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PREINFORME 4 DE LABORATORIO

PRESENTADO POR:
MARA JOS MNDEZ LVAREZ
JENNIFER TATIANA MAPPE ROJAS
LAURA GONZLEZ ROJAS

PRESENTADO A:
EDELBERTO SILVA GOMEZ

UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA


FACULTAD DE MEDICINA
DEPARTAMENTO DE NUTRICIN HUMANA
BOGOT D.C.

FACTORES FISICOQUMICOS Y CRECIMIENTO

OBJETIVO GENERAL:
Evaluar el efecto de los diferentes factores fsico qumicos medioambientales
sobre el crecimiento y comportamiento fisiolgico de los microorganismos.
OBJETIVOS PARTICULARES:
Evaluar el efecto de la Temperatura sobre el crecimiento de
microorganismos
Determinar el efecto del pH sobre el crecimiento de los microorganismos
Estudiar el efecto de la Fuerza Inica sobre el crecimiento de
microorganismos
Analizar el efecto de la fuerza Osmtica sobre el crecimiento de
microorganismos
Evaluar el efecto de la Tensin de Oxgeno sobre el crecimiento de
microorganismos

los

los
los
los

El crecimiento microbiano se refiere al nmero de clulas, los microorganismos al estar en


la etapa de crecimiento aumentan su cantidad y se agrupan en colonias de cientos de miles
suficientemente grandes para ser observadas a ojo desnudo(Tortora, 2007) ;este
crecimiento se representa grficamente como el log de un nmero de clulas en funcin del
tiempo, en este periodo de tiempo se distinguen 4 fases (UPNA,2009) :
- Fase lag: sntesis de enzimas para la produccin de protenas y RNA.
- Fase exponencial: divisin celular dependiendo de la especie con una
velocidad constante y mxima.
- Fase estacionaria: se agotan los nutrientes disminuyendo de tal manera la
velocidad que llega a detenerse.
- Fase de muerte: el nmero de clulas vivas disminuye, la velocidad de la
muerte y la duracin en esta fase depende de la especie microbiana.

Grfico
http://www.unavarra.es/genmic/microclinica/tema02.pdf

tomado

de

El crecimiento microbiano se ve afectado por mltiples factores fsico qumicos, entre ellos
la Temperatura, pH, presin osmtica y fuerza inica.
Temperatura : Cada microorganismo posee una temperatura ptima de crecimiento
relacionada normalmente con la temperatura de su hbitat junto a la actividad enzimtica; a
cada uno de los microorganismos se les ha determinado una temperatura mnima para
crecimiento pues su actividad enzimtica frena y el agua posiblemente solidificada no
permite que se lleven a cabo todas las reacciones metablicas (Rodrguez, 2005) y con el
cambio de estado de los lpidos de membrana celular pasan de fluidos a cristalinos
impidiendo el ingreso o desecho de nutrientes (UPNA, 2009) pero a su vez hay una

temperatura mxima de crecimiento posible, ms all de sta puede ocurrir una


desnaturalizacin de protenas generando muerte celular (Rodrguez, 2005).
Los microorganismos de acuerdo a su temperatura ptima se clasifican de la siguiente
manera
Tabla tomada de: http://www.unavarra.es/genmic/microclinica/tema02.pdf

Espectrofotmetro: Se usa para determinar la concentracin de una sustancia en


determinada solucin, se basa en el principio bsico de la luz en que es una forma de
energa electromagntica, que al interactuar con otras sustancias permitiendo comparar la
radiacin absorbida y transmitida por una solucin con una cantidad desconocida de
sustrato y otra con cantidad conocida. En el laboratorio, se utilizar para observar la
turbidez en el tubo de ensayo, referida a la cantidad de luz que pasa atravs del cultivo
bacteriano; a menor luz atravesando el cultivo, mayor nmero de microorganismos habr.
(annimo, s.f)
Agar YEG: Se usa para el conteo de microorganismos en muestras agua, el mtodo se
aplica para determinar la eficacia del tratamiento del agua potable o el agua en general. Es
un medio rico y nutritivo para los cultivos de bacterias, hongos y mohos, los nutrientes son
suministrados por triptona y vitaminas de extracto de levadura que favorecen el crecimiento
microbiano. Al combinar los ingredientes de los medios junto a una temperatura de
incubacin de 22 C y 36C se logra la deteccin de mltiples contaminantes microbianos (

pH: El pH se refiere a la acidez o alcalinidad de una solucin (Tortora, 2007)); el pH


intracelular es un poco mayor al medio que rodea pues en muchas ocasiones es necesario
la diferencia en las concentraciones de protones para la obtencin de energa (Annimo,
2009). La concentracin de hidrogeniones para un crecimiento ptimo se conoce como pH
ptimo la mayora crece ptimamente en un rango de 6,5 a 7,5 cercano a la neutralidad,
frecuentemente el microorganismo influencia el pH de su hbitat (Rodrguez, 2005) .
En condiciones de laboratorio los microorganismos producen cido el cual interfiere en su
crecimiento y por tal motivo se emplean sustancias qumicas que actan como buffers como
peptonas o aminocidos.
Presin osmtica: La mayora de los nutrientes se encuentran disueltos en agua por lo que
sta es necesaria para el crecimiento de los microorganismos. Cuando el microorganismo
se encuentra en una solucin con mayor concentracin de solutos que la de la clula, el
ambiente es hipertnico respecto a la clula, esto causa una plasmlisis donde el agua
celular se difunde hacia una zona de mayor concentracin de soluto disminuyendo el
citoplasma celular (Tortora, 2007); en caso contrario, en una solucin hipotnica donde la
concentracin de soluto es menor se absorbe agua del medio hinchando la clula hasta su
ruptura, fenmeno conocido como plasmptisis. Normalmente, un microorganismo crece en
un ambiente hipotnico al favorecer la entrada de agua a su interior y as mantiene la
difusin de nutrientes (Rodrguez, 2005).

Tomado de (Tortora, 2007).


Fuerza inica:
La fuerza inica mide la interaccin entre iones y entre los iones e ion-solvente, en una
solucin electroltica (UNAM, s.f) Se calcula con la siguiente frmula:
Donde z es la valencia del in y c es la concentracin molar de cada
in.
La fuerza inica es muy importante en los procesos biolgicos, ya que
las interacciones entre clulas se dan en el medio en el que se encuentren, por lo que la
difusin de sustancias se ver afectada por la composicin inica del medio. (Gennaro,
2003)
Aplicado al crecimiento de los microorganismos se observa desde el punto de disponibilidad
de agua para el crecimiento; esta disponibilidad se ve ligada a la osmolaridad y a la
concentracin del soluto.Cada compuesto tiene un diferente coeficiente de actividad de los
iones, aspecto que definir la disponibilidad; este coeficiente est determinado por la carga
y fuerza inica de toda la solucin, por ejemplo, la sal tiende a ionizarse ms en el agua, a
diferencia del azcar, por lo cual ser ms fcil para un organismo crecer en agua dulce que
en agua salada (Gennaro, 2003).
Efecto de la tensin de oxgeno
La tensin de oxgeno se refiere a la cantidad de oxgeno disponible en el ambiente para el
crecimiento; una alta tensin indica una alta cantidad de oxgeno en el medio.
El efecto de la tensin de oxgeno en los microorganismos depender de la naturaleza del
mismo (ver tabla); una alta tensin de oxgeno afecta principalmente el crecimiento de los
microorganismos anaerobios y aerobios estrictos (Rojas, 2006) por lo cual al bajar la
tensin, por medio de diversos mtodos, en el laboratorio congelando la muestra, se espera
observar una mayor proliferacin de los microorganismos que comparten estas
caractersticas de crecimiento anaerobio

Medio de cultivo agar de tioglicolato: Es un medio lquido utilizado para


microorganismos de crecimiento rpido,como las variedades anaerobias, aerobias y
aerofilos, ya que contiene un agente reductor que evita el efecto txico de los perxidos
para estos microorganismos, formados en el ambiente para contribuir al crecimiento de
estas cepas (Laboratorios Medibac, 2015). Tambin contiene sustancias necesarias para la
multiplicacin bacteriana como la dextrosa.
El comportamiento esperado en este agar es el que se ve en la tabla superior; los
microorganismos aerobios crecern en la superficie, donde la concentracin de oxgeno es
mayor, los microorganismos anaerobios tendern a crecer en el fondo del tubo y los
microorganismos que sean facultativos se espera que crezcan en la totalidad del tubo
(Laboratorios Medibac, 2015).
Medio de cultivo en caldo MRS: Se caracteriza por la presencia de sales en cantidades
importantes pero en especial posee sulfato de manganeso, este estimula el crecimiento de
estreptobacterias y de las betabacterias ( )
MICROORGANISMOS:
- Serratia marcescens: hace parte de la familia Enterobacteriaceae, se conoce
por su potencial de diseminacin, coloniza la piel y el tracto gastrointestinal de
adultos y neonatos.
- Escherichia coli: Es un organismo procariota, gram negativo. Se suelen
encontrar en el intestino de diversos seres vivos, y algunas cepas son causantes de
infecciones mortales. No forma esporas, es capaz de fermentar la glucosa y la
lactosa.
- Pseudomonas aeruginosa: Es una bacteria gram negativa, flagelada y que
est relacionada con alteraciones a la salud humana. La identificacin incluye,la
produccin de piocianina y fluorescena as como su habilidad de crecer a 42 C.

1 Imagen referenciada de Tortora, G. (2007). Introduccin a la microbiologa. Encontrada


en:https://books.google.com.co/books?
id=Nxb3iETuwpIC&pg=PA159&dq=crecimiento+microbiano&hl=es&sa=X&redir_esc=y#v=onepage&q=crecimient
o%20microbiano&f=false

- Bacillus subtilis: Es una bacteria Gram positiva formadora de espora y con


forma de varilla o bastn. Es importante en los procesos de descomposicin. tiene la
habilidad para formar una resistente endospora protectora.
- Staphylococcus aureus: Es un coco gram positivo de la familia
Micrococcaceae, relacionado con procesos de infeccin. Suelen agruparse como
racimos de uvas. Es anaerobia facultativa, productora de coagulasa, catalasa,
inmvil y no esporulada.
- Bacillus stearothermophilus: (Geobacillus) Bacteria Gram-positiva con forma
de bacilo, hallada en suelos, fuentes termales, sedimentos Ocenicos y es causa de
descomposicin de los productos alimenticios. Algunas cepas son capaces de oxidar
el monxido de carbono aerbicamente
- Saccharomyces cerevisiae: la especie cerevisiae constituye la levadura y el
microorganismo eucariote ms estudiado tambin conocido como la levadura de
panadera, el trmino levadura proviene del latn levare, que significa levantar

REFERENCIAS
Rodrguez E,Gamboa M, et al. (2005). Bacteriologa General: Principios Y Prcticas de
Laboratorio (1 ed., Vol., pp. 149-149). Editorial de la Universidad de Costa Rica. Encontrado
en https://books.google.com.co/books?
id=vwB0fgirgN0C&pg=PR7&dq=efecto+dela+temperatura+en+crecimiento+microbiano&hl=
es&sa=X&redir_esc=y#v=onepage&q=efecto%20dela%20temperatura%20en
%20crecimiento%20microbiano&f=false
Gennaro, A. (2003) Remington: Farmacia, Volumen.1. Encontrado en:
https://books.google.com.co/books?id=Av4IIsyHqcC&pg=PA268&dq=fuerza+ionica&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwjd1N7_p8DMAhVDbD4KH
YisALcQ6AEIGzAA#v=onepage&q=fuerza%20ionica&f=false
Rojas, O. (2006) Inmunologa (de memoria). Encontrado en:
https://books.google.com.co/books?id=CtWACreoBkC&pg=PA36&dq=tension+de+oxigeno+microorganismos&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwjm
6q6Ts8DMAhVGID4KHZgICrUQ6AEIIjAB#v=onepage&q=tension%20de%20oxigeno
%20microorganismos&f=false
Tortora, G. (2007). Introduccin a la microbiologa (9 ed., Vol. 1, pp. 160-163). Buenos Aires,
Editorial Mdica Panamericana. obtenido de https://books.google.com.co/books?
id=Nxb3iETuwpIC&pg=PA159&dq=crecimiento+microbiano&hl=es&sa=X&redir_esc=y#v=on
epage&q=crecimiento%20microbiano&f=false
Laboratorios Medibac (2015) Ficha tcnica. MEDIO DE TIOGLICOLATO USP Medio de
cultivo Caldo Tioglicolato USP. Encontrado en:
http://www.labmedibac.com/wp-content/uploads/2015/04/MEDIO-DE-TIOGLICOLATO-USPMEDIBAC-LAB.pdf

Annimo
(s.f)
Captulo
5
Caracterizacin
Microbiolgica.
Recuperado
http://sedici.unlp.edu.ar/bitstream/handle/10915/2685/5_-_Caracterizaci
%C3%B3n_microbiol%C3%B3gica.pdf?sequence=10

en:

UPNA (2009). MICROBIOLOGA CLNICA - Tema 2.- Crecimiento y muerte de


microorganismos.
unavarra.es/genmic/microclinica.
Obtenido
05,
2016,
de:
http://www.unavarra.es/genmic/microclinica/tema02.pdf
Neogen.
(2011).
Yeast
Extract
Agar,
ficha
http://www.neogen.com/Acumedia/pdf/ProdInfo/7707_PI.pdf

tcnica

Disponible

Annimo (s.f).Manual de mantenimiento para equipos de laboratorio, Espectrofotmetro.


Disponible en: http://www.bvsde.paho.org/bvsacd/cd29/laboratorio/cap11.pdf

en: