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ISSN: 1135-8122
somenta@gmail.com
Sociedad Mexicana de Nutricin y Tecnologa
de Alimentos
Mxico
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SOMENTA
CIENCIA Y
TECNOLOGA
ALIMENTARIA
Abstract
Lactic acid bacteria (LAB) had been employed in fermented sausages as protective cultures, reducing the population
of other non-desirable microorganisms. The isolation of LAB that can survive thermal treatment could be an alternative to
improve the shelf-life of cooked products. Eight strains of LAB isolated from commercial sausages were heated in water
baths at 50, 60 and 70 C during 30-60 min. four surviving strain were previously identified as L. alimentarius, L. lactis, L.
piscicola and Enterococcus sp. These strains were inoculated in a sausage to determine their effect in product acceptation
and enterobacteria population. L. alimentarius and L. lactis had higher acceptation scores close or higher than control.
LAB population increased with storage time; enterobacteria population increased but in less amount than LAB. L.
alimentarius y L. lactis presented a marked effect of enterobacteria during storage.
Resumen
Las bacterias cido lcticas (BAL) han sido utilizadas en embutidos fermentados como cultivos protectores inhibiendo
a otros microorganismos no deseables. El aislamiento de BAL que puedan sobrevivir al tratamiento trmico de productos
cocidos podra ser una alternativa para mejorar la vida de anaquel de estos productos. Ocho cepas aisladas de salchichas
comerciales fueron sometidas a pruebas de termoresistencia en baos de agua a 50, 60 y 70 C durante 30-60 min. Cuatro
cepas sobrevivieron a los tratamientos y fueron previamente identificadas como L. alimentarius, L. lactis, L. piscicola y
Enterococcus sp, las cuales fueron inoculadas en una salchicha para estudiar su efecto sobre la aceptacin y el conteo de
enterobacterias. L. alimentarius y L. lactis presentaron valores de aceptacin similares o mejores al control. La poblacin
de BAL se increment respecto al tiempo de almacenamiento, mientras que las enterobacterias tambin aumentaron pero
por abajo de BAL. L. alimentarius y L. lactis tuvieron un efecto ms marcado sobre la poblacin de enterobacterias durante
el periodo de almacenamiento.
Keywords: Lactic acid bacteria, thermoresistance, enterobacteria, shelf-life, sausages.
Palabras clave: Bacterias cido lcticas, termoresistencia, enterobacterias, vida de anaquel, salchichas.
INTRODUCCIN
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MATERIALES Y MTODOS
Seleccin de las cepas lcticas
Ocho cepas aisladas de productos crnicos fueron
seleccionadas en base a su capacidad de produccin de
cido lctico y bacteriocinas, inhibiendo microorganismos
de descomposicin o patgenos (Minor-Prez et al., 2002;
Signorini et al., 2003). Las cepas seleccionadas fueron
previamente identificadas como: Lactobacillus sake
(MXVK133), Enterococcuss sp. (MXVK29), Lactobacillus
piscicola (MXVK76) y Lactobacillus minor (QUB 119B),
proporcionadas por el Departamento de Microbiologa de
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Tabla 1. Temperatura y entalpa de desnaturalizacin para las suspensiones de las cepas de BAL que sobrevivieron
a los tratamientos trmicos en baos de agua.
Table 1. Temperature and denaturation enthalpy of the solutions of BAL strains that survive to the heat
treatments in water bath.
Cepa
L. lactis
L. piscicola
L. alimentarius
Enterococcus sp.
H d (J/s)
92,83
288,49
279,81
59,18
RESULTADOS Y DISCUSIN
Termoresistencia de las cepas seleccionadas
De las ocho cepas seleccionadas, solo cuatro de
ellas presentaron una superviviencia adecuada a los
tratamientos trmicos. L. alimentarius, L. lactis , L.
piscicola y Enterococcus sp tuvieron conteos mayores a
300 UFC despus de ser sometidas a 50, 60 y 70 C durante
30, 45 y 60 min. L. sake, L. minor, L. helveticus y L.
divergens no sobrevivieron al tratamiento trmico a 50 C
durante 30 min, ni a mayores temperaturas y/o tiempos. La
Tabla 1 muestra los resultados de la calorimetra diferencial
de barrido practicada a las cepas de BAL identificadas
como termoresistentes. En cuanto a las temperaturas de
desnaturalizacin, L. lactis y Enterococcus sp presentaron
los menores valores (65,60 y 68,75 C, respectivamente)
en comparacin con L. piscicola y L. alimentarius (70,00
y 80,60 C, respectivamente). Estas temperaturas
concuerdan con lo obtenido en los baos de agua, donde
a pesar de que el inicio de desnaturalizacin es menor a 70
C, la mxima temperatura de desnaturalizacin detectada
fue mayor a este valor en las cuatro cepas analizadas. La
temperatura final de los picos de transicin trmica tuvo
valores cercanos a los 100 C. El parmetro ms importante
en este tipo de anlisis es la energa o entalpa de transicin
trmica (Hd), donde, como puede observarse en la Figura
1 y Tabla 1, fue mayor para L. piscicola y L. alimentarius,
en comparacin con L. lactis y Enterococcus sp. Debido a
que tanto Hd es un estimado de la energa trmica
necesaria para desnaturalizar protenas o componentes
celulares y la temperatura mxima de desnaturalizacin es
la medida de la estabilidad trmica de estos componentes
(Boyer et al., 1997), los valores ms altos de Hd y Td
para las cepas de BAL denominadas como termoresistentes
puede explicar este comportamiento. Los picos observados
Prueba de aceptacin
Para determinar el efecto de la inoculacin de BAL
sobre las salchichas, se llev a cabo una prueba de
aceptacin con un panel no entrenado. La prueba de
aceptacin se llev a cabo a los 1 y 12 das de
almacenamiento. Un total de 25 jueces reclutados entre
personal acadmico y alumnos evaluaron cada una de las
salchichas elaboradas con las 4 cepas termorresistentes,
comparndolas contra un control sin inocular. En una
sesin previa, se definieron a los jueces los atributos a
evaluar: color, sabor, textura y aceptacin general. Cada
cepa fue evaluada en una sesin diferente. Cada muestra
y el control (2 g de cada una) se presentaron codificadas a
temperatura ambiente, evaluando los cuatro atributos en
la misma sesin, utilizando una escala no estructurada (10
cm de largo), con la calificacin ms baja del lado izquierdo
y la ms alta del lado derecho (Pedrero y Pangborn, 1989).
Se midi la distancia marcada como la calificacin
correspondiente para cada atributo.
Anlisis microbiolgicos
Se tomaron muestras a los 0, 3, 6, 9 y 12 das para
llevar a cabo recuentos de enterobacterias en agar de
eosina y azul de metileno (Murthy, 1984) y de bacterias
cido-lcticas en agar MRS (De Man et al., 1960). Se
report el promedio de 5 conteos como el logaritmo de
unidades formadoras de colonias (UFC) por gramo de
muestra.
Diseo experimental y anlisis estadstico
Se utiliz un diseo completamente al azar en la
distribucin de las muestras entre los diferentes
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Exo->
2.0
1.0
0.0
-1.0
L. piscicola
L. lactis
Enterococus sp.
L. alimentarius
50
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100
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Temperatura (C)
Prueba de Aceptacin
La Tabla 2 presenta los resultados de la prueba de
aceptacin llevada a cabo a las muestras inoculadas con
las cepas termoresistentes y el control sin inocular. Al
segundo da, los valores mas altos para sabor, suavidad y
apariencia general, comparados con la muestra control,
fueron atribuidos a las muestras inoculadas con L. lactis,
excepto para el color, donde las salchichas inoculadas con
L. piscicola tuvieron una calificacin significativamente
(P < 0.05) ms alta. Las salchichas mas desagradables
fueron las inoculadas con Enterococcus sp y L.
alimentarius.
A los 12 das de almacenamiento, los atributos
evaluados presentaron cierto detrimento en comparacin
con las notas evaluadas en el segundo da. El color y la
apariencia general fueron mejor aceptados por parte de los
catadores en la muestras control. El color disminuy en
aceptacin para las salchichas inoculadas con L. piscicola
y L. lactis. De manera interesante, el atributo de sabor tuvo
las mismas calificaciones al da 2 y al da 12, por lo que la
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Tabla 2. Prueba de aceptacin de las salchichas inoculadas con las BAL termoresistentes comparadas con un control sin inocular. Medias con
la misma letra en la misma fila no son significativamente diferentes (P < 0,05).
Table 2. Acceptance test of the sausage inoculated with thermoresistant BAL compared with the control (without inoculation). Letters
indicate that means with the same letter in the same row are not significantly differents (P < 0.05).
Control
L. lactis
L.piscicola
L.alimentarius
Enterococcussp
4,711,2c
3,081,2b
5,050,8d
4,510,7d
5,241,1b
4,460,5a
6,021,0a
5,280,6a
5,341,0a
2,981,0d
5,440,9b
4,621,1b
4,540,5d
2,900,7c
4,931,2c
4,521,1c
4,020,8e
2,701,0e
4,931,2e
4,250,5e
4,990,7a
4,740,8a
2,960,4b
2,090,8b
4,740,8a
4,500,9c
4,550,5b
3,420,5a
2,201,1c
4,550,5b
4,620,7b
4,060,9c
2,410,6d
5,140,6a
4,060,9c
4,061,0e
3,870,5e
3,180,7c
4,770,9d
3,870,5e
4,460,8d
3,930,7d
2,200,4e
4,050,8e
3,930,7d
Da 2
Color
Sabor
Suavidad
Apariencia general
Da 12
Color
Apariencia general
Sabor
Suavidad
Apariencia general
1.0E+07
1.0E+06
1.0E+05
1.0E+04
1.0E+03
1.0E+02
1.0E+01
1.0E+00
0
10
12
Tiempo (das)
Figura 2. Poblacin microbiolgica de las muestras inoculadas con
L. lactis para enterobacterias en las muestras control () e inoculadas
(p) y bacterias cido lcticas (BAL) en las muestras control () e
inoculadas (r).
Figure 2. Microbial population of the samples inoculated with L.
lactis for enterobacteria in the control samples () and inoculated
(p) and BAL in the control samples( ) and inoculated (r).
Anlisis microbiolgicos
La poblacin microbiolgica en las salchichas, tanto
para enterobacterias como para BAL, presentaron una
tendencia similar aun en las muestras inoculadas con las
BAL termoresistentes. La p o b l a c i n d e B A L s e
increment respecto al tiempo de almacenamiento,
mientras que los conteos de enterobacterias tambin
presentaron cierta tendencia a aumentar con respecto
al tiempo de almacenamiento, mantenindose por abajo
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1.0E+00
Tiempo (das)
10
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Tiempo (das)
Figura 5. Poblacin microbiolgica de las muestras inoculadas con
Enterococcus sp. para enterobacterias en las muestras control ( ) e
inoculadas (p) y bacterias cido lcticas (BAL) en las muestras
control () e inoculadas (r).
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1.0E+05
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1.0E+01
1.0E+00
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Tiempo (das)
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CONCLUSIONES
La termoresistencia de algunas cepas de bacterias
cido lcticas que les permite sobrevivir al tratamiento
trmico es importante ya que estas pueden ser utilizadas
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