Microbiologa bsica

Practica de laboratorio

Catedrtico: Uri Marcial Ojeda

In. Luis ngel lvarez Ojeda.

Ing. Mara Fernanda reyes Guzmn
Ing. Loyda Eunice Snchez Chabl
Ing. Eduardo Daniel castillo Martnez

OBSERVACIN DE CLULAS AL MICROSCOPIO

Nombre de los integrantes de equipo

UNIVERSIDAD POPULAR DE LA CHONTALPA. Departamento de Microbiologa

RESUMEN:
Unidad fundamental de vida. Es un cuerpo con volumen que transforma energa y es capaz de transferir informacin. Este
concepto surge en este siglo XIX, pero se revoluciona con el descubrimiento del microscopio electrnico, que tiene una gran
resolucin. La rama que se ocupa de la clula es la Citologa, muy nueva y avanzada.
Palabras clave: Clula, Microscopa, Citologa, Procariota, Eucariota

INTRODUCCIN
Una clula (del latn cellula, diminutivo
de cella, hueco) es la unidad morfolgica y
funcional de todo ser vivo (menos los virus). De
hecho, la clula es el elemento de menor
tamao que puede considerarse vivo. De este
modo, puede clasificarse a los organismos vivos
segn el nmero de clulas que posean:
unicelulares (de una clula) y pluricelulares
(ms de una). Pueden poseer un tamao de
10 m y una masa de 1 ng, si bien existen
clulas mucho mayores. Y de acuerdo a su
organizacin pueden ser procariotas (de ncleo
no definido) y eucariotas (de ncleo verdadero).
De hecho, la clula es el elemento de
menor tamao que puede considerarse vivo.
Como tal posee una membrana de fosfolpidos
con permeabilidad selectiva que mantiene un
medio interno altamente ordenado y
diferenciado del medio externo en cuanto a su
composicin, sujeta a control homeosttico, la
cual consiste en biomolculas y algunos metales
y electrolitos. La estructura se automantiene
activamente
mediante
el
metabolismo,
asegurndose la coordinacin de todos los
elementos celulares y su perpetuacin por
replicacin a travs de un genoma codificado
por cidos nucleicos. La parte de la biologa
que se ocupa de ella es la citologa.
El tamao y la forma depende de sus
elementos ms perifricos (por ejemplo, la
pared, si la hubiere) y el citoesqueleto.
En cuanto al tamao, la mayora son
microscpicas. A pesar de ser muy pequeas (1
mm3 de sangre puede contener 5x106 clulas), el
tamao de las clulas es extremadamente
variable. La clula ms pequea observada, en
condiciones
normales,
corresponde
a
Mycoplasma
genitalium,
de
0.2
m,
encontrndose cerca del lmite terico de 0.17
m. Existen bacterias con 1 y 2 m de longitud.

Las clulas humanas son muy variables:

hemates de 7 micras, hepatocitos con 20
micras, espermatozoides de 53 m, vulos de
150 m e, incluso, algunas neuronas de en
torno a 1 m. En las clulas vegetales los granos
de polen pueden llegar a medir de 200 a 300 m
y algunos huevos de aves pueden alcanzar entre
1 (codorniz) y 7 cm (avestruz) de dimetro.
Los
bilogos
utilizan
diversos
instrumentos para lograr el conocimiento de las
clulas. Obtienen informacin de sus formas,
tamaos y componentes, que les sirve para
comprender adems las funciones que en ellas
se realizan. Desde las primeras observaciones
de clulas, los aparatos se han ido
perfeccionando,
originndose
as
la
Microscopa. Dado el pequeo tamao de la
gran mayora de las clulas, el uso del
microscopio es de enorme valor en la
investigacin biolgica. En la actualidad, los
bilogos utilizan dos tipos bsicos de
microscopio: los pticos y los electrnicos.
As, bajo lo anteriormente expuesto, los
objetivos de la presente investigacin han sido
los siguientes: realizar observaciones de
distintos tipos celulares mediante microscopa
ptica y registrar las observaciones mediante
esquemas y comparacin con microfotografas
y otras fuentes bibliogrficas.
MATERIALES Y MTODOS
Para
prctica se
observacin
siguiente:

la consecucin de la siguiente
revisaron websites bsicas sobre
de clulas, de donde destaca la

http://www.google.com.mx/url?sa=t&rct=
j&q=&esrc=s&source=web&cd=2&ved=0CDQQFjAB&url
=http%3A%2F%2Fwww.porquebiotecnologia.com.ar%2Fa
dc%2Fuploads%2Fpdf%2F23Observacion_celulas.pdf&ei=
9HqMUqeDN5HIkAe3xYDQDg&usg=AFQjCNFUwwRi
pi6TKBxs6VJEWfdn3R7RSw&sig2=GGha0X_9Scf2b9LO
Pcnimg&bvm=bv.56643336,d.eW0

De acuerdo con esto se obtienen las

siguientes metodologas.
Preparacin y observacin al microscopio de
una muestra de clulas humanas
Materiales: Microscopio, portaobjetos y
cubreobjetos, colorante azul de metileno.
Mtodo: 1). Limpiar con alcohol el
portaobjetos y raspar suavemente el interior de
la mejilla en la boca la boca con un hisopo o
una cuchara limpia. 2). Extender el material
recogido sobre el portaobjetos. 3). Colocar una
gota de agua y una de azul de metileno. 4).
Aplicar el cubreobjetos. 5). Observar al
microscopio y dibujar las estructuras que
observa.
Observar
los
preparados
incrementando progresivamente el aumento.
Por razones de seguridad es importante no
compartir material y poner a lavar o desechar el
material empleado para extraer la muestra.
Observacin de clulas sanguneas
Materiales:
Microscopio,lancetas,
Portaobjetos, Etanol, Azul de metileno.
Mtodo: 1). Se hace una extensin con el
cristal superior desplazndolo rpidamente por
el inferior de manera que quede una extensin
unicelular sobre el portaobjetos que se va a
utilizar en la experiencia. 2). Se fija a la flama,
o se deja secar al aire libre. 3). Se depositan
varias gotas de etanol sobre el porta. y se deja
que se evapore al aire (10-15 min). 4). Se aade
Azul de Metileno, dejando reposar durante 15
minutos. 5). Se lava con agua destilada
abundantemente, se coloca un cubre y se
observa al microscopio.
Observacin microscpica de tejido
epidrmico de cebolla
Materiales: Microscopio, portaobjetos,
cubreobjetos, agujas, pinzas, escalpelo, azul de
metileno, gotero, cebolla.
Mtodo: 1). Separar una de las hojas
interna de la cebolla y desprender la membrana
fina que est adherida por su cara inferior. 2).
Depositar el fragmento de membrana en un
portaobjetos con unas gotas de agua, y
colocarlo sobre la cubeta de tincin.3). Escurrir
el agua, aadir unas gotas de azul metileno)
sobre la membrana y dejar actuar durante cinco
minutos. No debe secarse la epidermis por falta
de colorante o por evaporacin del mismo. 5).

Con el gotero baar la epidermis con agua

abundante hasta que no suelte colorante. 6).
Colocar sobre la preparacin un cubreobjetos
evitando que se formen burbujas y llevarla al
microscopio. 7). Observar la preparacin e
identificar las distintas clulas del tejido
epidrmico y las de las hojas del bulbo de
cebolla.
Observacin microscpica de hongos
Materiales: Microscopio, Mohos, lupa,
aguja de diseccin, portaobjetos y cubreobjetos,
azul de metileno, cinta adhesiva transparente.
Mtodo: Preparacin en fresco. 1). Con la
ayuda de la lupa tomar, con una aguja de
diseccin, una porcin muy pequea de
muestra. 2). Extender el material recogido en el
portaobjetos. 3). Colocar una gota de agua y
una de azul de metileno. 4). Aplicar el
cubreobjetos. 5). Observar al microscopio el
hongo y sus esporas, y dibujarlas.
Preparacin en cinta adhesiva. 1). Colocar
sobre un portaobjetos una gota de solucin de
azul de metileno. 2). Cortar un trozo de cinta
adhesiva transparente de unos 2 cm. 3). Tocar
con el lado adhesivo de la cinta la superficie
enmohecida. 4). Pegar la cinta adhesiva sobre la
gota del portaobjetos. 5). Eliminar el colorante
sobrante. 6). Observar el microscopio y dibujar
las estructuras.
Tincin de Gram (Bacterias)
Materiales: Microscopio, 2 mecheros de
bunsen, portaobjetos, asa de inoculacin, agua
destilada, goteros, cristal violeta, etanol,
acetona, lugol, safranina, aceite de inmersin.
Mtodo: 1). Recoger muestras, 2). Hacer
el extendido en espiral. 3). Dejar secar a
temperatura ambiente. 4). Fijar la muestra con
etanol durante 1 min o al calor (flameado 3
veces). 5). Agregar cristal violeta y esperar 1
min. 6). Enjuagar con agua.7). Agregar lugol y
esperar entre 30 segundos y 3 minutos. 8). Se
decolora con etanol al 75 %, etanol al 95 %,
acetona o alcohol-acetona, hasta que ya no
escurra ms lquido azul. 9). Enjuagar con
agua. 10). Agregar safranina y esperar 1-2 min.
11). Enjuagar con agua. 12). Observar al
microscopio y dibujar o fotografiar.
Observacin de Algas verdes y Protozoarios
Materiales: Microscopio estereoscpico,
muestra de agua con protistas, cajas Petri.

Mtodo: 1). Tomar una alcuota del

frasco de agua de muestra y colocarlo en la base
de una caja Petri. 2). Observar al microscopio.
RESULTADOS Y DISCUSIN
Clula de cebolla
En cada uno de los resultados obtenidos
anotar las siguientes caractersticas: 1). Reino.
Vegetal. 2. Dominio. Eucarionte 3). Nmero.
Pluricelulares 4). Presencia o ausencia de pared
celular. S 5). Composicin de la pared celular.
(Celulosa) 6). Clasificacin por tincin. 7).
Presencia o ausencia de membrana celular. Si.
8). Composicin de la membrana. Fosfolpidos
9). Presencia o ausencia de pigmentos
fotosintticos. Si (clorofila) 10). Presencia o
ausencia de rganos de locomocin. Sin
roganos de locomocin 11). Capacidad para
formar tejidos o no. S forma tejidos 12). Tipo de
respiracin Anaerobia (CO2).
Clula de Maguey, Organo
1). Reino. Vegetal. 2. Dominio.
Eucarionte 3). Nmero. Pluricelulares 4).
Presencia o ausencia de pared celular. S 5).
Composicin de la pared celular. (Celulosa) 6).
Clasificacin por tincin. 7). Presencia o
ausencia de membrana celular. Si. 8).
Composicin de la membrana. Fosfolpidos 9).
Presencia
o
ausencia
de
pigmentos
fotosintticos. Si (clorofila) 10). Presencia o
ausencia de rganos de locomocin. Sin
roganos de locomocin 11). Capacidad para
formar tejidos o no. S forma tejidos 12). Tipo de
respiracin Anaerobia (CO2).

Clula de Organo
1). Reino. Vegetal. 2. Dominio.
Eucarionte 3). Nmero. Pluricelulares 4).
Presencia o ausencia de pared celular. S 5).
Composicin de la pared celular. (Celulosa) 6).
Clasificacin por tincin. 7). Presencia o
ausencia de membrana celular. Si. 8).
Composicin de la membrana. Fosfolpidos 9).
Presencia
o
ausencia
de
pigmentos
fotosintticos. Si (clorofila) 10). Presencia o
ausencia de rganos de locomocin. Sin
roganos de locomocin 11). Capacidad para
formar tejidos o no. S forma tejidos 12). Tipo de
respiracin Anaerobia (CO2).

Clula de Maguey
1). Reino. Vegetal. 2. Dominio.
Eucarionte 3). Nmero. Pluricelulares 4).
Presencia o ausencia de pared celular. S 5).

Composicin de la pared celular. (Celulosa) 6).

Clasificacin por tincin. 7). Presencia o
ausencia de membrana celular. Si. 8).
Composicin de la membrana. Fosfolpidos 9).
Presencia
o
ausencia
de
pigmentos
fotosintticos. Si (clorofila) 10). Presencia o
ausencia de rganos de locomocin. Sin
roganos de locomocin 11). Capacidad para
formar tejidos o no. S forma tejidos 12). Tipo de
respiracin Anaerobia (CO2).
Clula de Hongos
En cada uno de los resultados obtenidos
anotar las siguientes caractersticas: 1). Reino.
Fungi. 2. Dominio. Eucarionte 3). Nmero.
Unicelular y Pluricelulares 4). Presencia o
ausencia de pared celular. S 5). Composicin
de la pared celular. (Quitina) 6). Clasificacin
por tincin. 7). Presencia o ausencia de
membrana celular. Si. 8). Composicin de la
membrana. Fosfolpidos 9). Presencia o ausencia
de pigmentos fotosintticos. No 10). Presencia
o ausencia de rganos de locomocin. Sin
roganos de locomocin 11). Capacidad para
formar tejidos o no. S forma tejidos (mohos) 12).
Tipo de respiracin aerobia (O2).

Clula de algas y protozoarios

1). Reino.protistas 2. Dominio. procariota
3). Nmero. Unicelular 4). Presencia o ausencia
de pared celular. S 5). Composicin de la
pared celular. glicopptidos 6). Clasificacin por
tincin. 7). Presencia o ausencia de membrana
celular. Si. 8). Composicin de la membrana.
Fosfolpidos 9). Presencia o ausencia de
pigmentos fotosintticos. si 10). Presencia o
ausencia de rganos de locomocin. con
roganos de locomocin 11). Capacidad para
formar tejidos o no. no 12). Tipo de respiracin
aerobia (O2).
CONCLUSION
Se observ durante la prctica distintos
mtodos de realizacin para observar
microorganismos que estn presentes en
distintos medios de igual manera, estos medios
estudiados son desde las clulas bucales,
sanguneas, hasta los presentes en las tortillas
despus de un proceso de fermentacin, as
como los que se encuentran en aguas
estancadas y por supuesto las clulas de
materiales naturales como el maguey, sbila y
organo.
Cada uno de estos medios tiene procesos tanto
similares como iguales los cuales sirven para la

preparacin de la muestra y que todo lo que se

requiere estudiar sea arrojado en las muestras
para obtener los resultados deseados que en
este caso fue de la observacin de clulas.
A partir de esta prctica ya estamos en
condiciones
tanto
tericas
como
experimentales para poder distinguir y
determinar a una clula ya sea vegetal o
animal.

Introduccin
El tercer reino de los protistas incluye a
aquellos organismos que se separan de los
animales y los vegetales por una
diferenciacin morfolgica muy escasa, la
mayora son unicelulares. En base a su
estructura celular pueden dividirse los
protistas en dos grupos perfectamente
delimitados: los protistas superiores se parecen
en cuanto a la constitucin de sus clulas a los
animales y a las plantas; son eucariotas. A
ellos pertenecen las algas, los hongos y los
protozoos. Entre los protistas inferiores se
cuentan las bacterias y las cianobacterias
(algas verde-azules); son procariotas, y se
diferencian por su constitucin celular de
todos
los
dems
organismos.
La
denominacin
microorganismo
hace
referencia a las reducidas dimensiones de los
organismos citados, y por su significado
corresponde a la denominacin de protistas.
Un anlisis detallado de la estructura celular
interna permite diferenciar dos tipos de
clulas, la procariota y la eucariota.
Las clulas eucariotas son por lo general ms
grande y estructuralmente ms complejas que
las eucariotas y una caracterstica diferencial
de las clulas eucariotas, ausente en las
procariotas, es la presencia de orgnulos.
Los orgnulos comprenden el ncleo, las
mitocondrias y los cloroplastos.
Los organismos eucariotas son las algas, los
hongos y los protistas.
Todos los metazoos (animales y plantas) estn
formados por clulas eucariotas (Madigan,
2003).
Los protistas, constan de no ms de una
clula, y las algas y los hongos que presentan
tanto especies pluricelulares como especies
unicelulares, pero que son muy sencillas
porque todas sus clulas son prcticamente
iguales entre s.
Los protistas y las algas no pueden vivir fuera
del agua o de lugares donde siempre hay agua,
pero los hongos si pueden hacerlo gracias a
que sus clulas presentan una sustancia
impermeable denominada quitina.
Otro motivo por el cual vale la pena estudiar
este tipo de organismos, es que algunas
especies de protistas y de hongos son los
responsables de muchas enfermedades de
plantas y animales incluidos los humanos, por
ejemplo; el protista Plasmodium que es
transmitido por el mosquito, provoca la
malaria o paludismo es la principal causa de
mortalidad de los humanos y contra la cual
an no existe alguna vacuna (aula en lnea,
2005).

ANEXOS
(En una columna y en una hoja aparte)

Figura 1.6 Clula de agua verde

Figura 1.1.Observacin de clulas en
microscopio.

Figura 1.2 Clulas de organo

Figura 2.1. Muestras de sangre y mucosa bucal

en portaobjetos

Figura 3. Materiales
Figura 1.3 Clulas de maguey

Figura 1.4 Clulas de agua verde

CLULA DE LA MUCOSA BUCAL:

Se procedi a raspar el interior de la boca de un
voluntario a la altura de la mejilla con un palillo
de madera (batelenguas), ubicamos la mucosa
blanca obtenida en el porta objetos luego de
haber
sido
esterilizado
posteriormente
realizamos un frotis colocando la muestra en el
portaobejos, agregamos una gota de azul de
metileno, esperamos dos minutos para eliminar
el exceso de colorante usando una gota de agua,
despus de realizado esto se le coloco la cubierta
al portaobjetos y se llev al microscopio para
observacin de la muestra, en donde pudimos
notar la presencia de puntos los cuales son
indicadores del ncleo formado por los
microorganismos existentes en la muestra.
Estas tenan forma ameboidea y en su interior se
observaban unos puntos oscuros que eran el
ncleo; alrededor de ellos veamos el citoplasma
y se alcanzaba a diferenciar un poco la
membrana clula. En 40x podamos observar su
ncleo y en 100x su tamao se incrementaba. El
azul de metileno hacia ms fcil la observacin
de las clulas en el microscopio.
Discusin de resultados
El empleo de colorantes en la observacin de
clulas representa una gran ventaja ya que
permite identificar con mayor facilidad las
estructuras bsicas de la misma, siempre y
cuando se empleen concentraciones bajas, de lo
contrario se convierte en problema porque si el
colorante es muy concentrado no deja diferenciar
nada en la clula. De acuerdo con las
observaciones realizadas a la clula vegetal de la
epidermis de la cebolla, solo se pudo observar la
pared celular delimitando al citoplasma que a su
vez rodea al ncleo No se observ aparato de
golgi, retculo endoplasma tico, vacuolas,
ribosomas ni mitocondrias entre otros.
En la muestra con clulas del epitelio bucal
observbamos en cada clula unos puntos
oscuros de color violeta debido al lugol, los
cuales corresponden al ncleo rodeando este y
delimitado por la membrana celular.

Conclusiones
1-Para poder distinguir las muestras hay que
utilizar el azul de metileno.
2-Hemos visto que las clulas de la mucosa bucal
son muy sencillas.

3-Se poda ver el ncleo de la clula.

4-El pequeo tamao de las clulas y la
cantidad de ellas que podemos tener en un
poquito de saliva.
5-Nos tenemos que ayudarnos de distintos
instrumentos para obtener un mejor resultado.
6-El cubreobjetos es un instrumento esencial para
que la clula no se "estropee".
7-Con el microscopio se pueden ver cosas que a
simple vista no se pueden ver.

Observacin al microscopio de clulas sanguneas

Los glbulos rojos sin teir tienen color
anaranjado y no se mueven. Se ven amontonados
en forma de pilas de moneda.
No se observan glbulos blancos y las plaquetas
son diminutas y tampoco se mueven.
Los eritrocitos se ven ms claros en el centro, por
la zona bicncava y se observan algunos de ellos
con formas diferentes, debido a su rotura al
preparar la muestra.

Esta es la muestra observada con nuestro

microscopio:

- Basfilos: con granulaciones violetas

que eclipsan al ncleo bilobulado.

A pocos aumentos explorar la preparacin para

localizar la zona en la que el frotis es ms
perfecto. Consideramos como ms apta, aquella
en la que los glbulos estn en una sola capa,
bien teidos y no se han producido precipitados
de colorantes. Si los glbulos presentan formas
irregulares, bordes dentados, aspecto erizado,
etc., ser indicio de que el secado del frotis fresco
no fue todo lo rpido que se requiere. Localizada
la zona adecuada se cambia a mayor aumento.

B) Agranulocitos: sin granulaciones en el

ciptoplasma. Se dividen en:

En la extensin predominan los glbulos rojos,

hemates o eritrocitos, teidos de color rojo. Son
ms delgados por el centro que por los bordes. Los
de mamferos no pposeen ncleo pero los del resto
de los animales si lo tienen.
Los glbulos blancos o leucocitos se
identifican fcilmente por la presencia del ncleo.
Hay dos clases de leucocitos.
A) Granulocitos o Polimorfonucleares:
con ncleo fragmentado o arrosariado y
granulaciones en el citoplasma. Se dividen en:
- Neutrfilos : con granulaciones de
color salmn. Con ncleo multilobulado.
- Eosinfilos : con granulaciones
abundantes teidas en rojo. Con ncleo bilobulado.

- Linfocitos : con un solo ncleo que

ocupa casi toda la clula de manera que solo se
observa un pequeo anillo de citoplasma.
- Monocitos : son los de mayor
tamao y poco frecuentes, ncleo bilobulado y
excntrico, son los ms mviles y su funcin
principal es la fagocitosis.
Las plaquetas son fragmentos de clulas
que participan en la coagulacin.
Todo este conjunto de clulas constituye
el tejido sanguneo.

BIBLIOGRAFA
Fuente de la introduccin:
http://es.wikipedia.org/wiki/Celula
Plattner Heintschel, biologa celular,
2005.
Amada Aleida Angulo Rodrguez,
Biologia Celular, 2009.
Observacin
de
clulas
al
microscopio.
(www.porquebiotecnologia.com.ar/adc/.../pdf/2
3 Observacion_celulas.pdf.). Fecha de consulta:
mircoles 20 de noviembre 2013.