PRINCIPALES TCNICAS RPIDAS

DE LABORATORIO EN LA CLNICA
VETERINARIA

MVZ. EPCV. Mario Erasmo Zamora

Martnez

PRINCIPALES TCNICAS RPIDAS DE LABORATORIO EN LA CLNICA VETERINARIA

La realizacin de las tcnicas de laboratorio dentro de la clnica veterinaria es una prctica
utilizada por los mdicos clnicos por ser mtodos muy simples y que requieren material sencillo o
no muy costoso. El resultado de las pruebas bien realizadas ofrece al clnico un abordaje casi de
inmediato a la posible causa de la enfermedad que cursa el paciente.
La realizacin de la tcnica de laboratorio pese a ser un mtodo simple no siempre resulta
fcil la tcnica de observacin al microscopio, pues se requiere de preparacin bsica en el uso del
mismo y sobretodo paciencia, tiempo suficiente para observar la totalidad de la muestra y atlas de
imgenes como referencia para identificar mejor los hallazgos.
As que debemos de preguntarnos antes de instaurar stas tcnicas en nuestra clnica
veterinaria lo siguiente.
1.
2.
3.
4.
5.
6.

S usar el microscopio?
Tendr la paciencia para invertir algunos minutos a cada muestra?
Mis observaciones son fieles a lo que observo?
Cualquier personal de la clnica puede hacer el estudio o dependen de m?
Capacitar a las personas en las tcnicas bsicas?
Tendr calidad y control de los materiales conforme los uso y dar mantenimiento al
microscopio siempre que sea necesario?

Si est dispuesto (a) a llevar a cabo lo anterior, usted es un candidato (a) para emitir
resultados en la clnica rpida y con ello una responsabilidad por cada hallazgo que usted observe.
Siempre es aconsejable emitir un resultado impreso de lo observado, pues se cobra el estudio a
realizar. Hoy en da el mdico veterinario tiene la obligacin de respaldar cada resultado por
escrito a los propietarios para que todo sea hecho con responsabilidad y dejar antecedente en el
expediente de la prueba que se realiz. Una ltima frase casi obligada para quien hace ste tipo de
tcnicas rpidas es NO INVENTAR HALLAZGOS QUE NO OBSERVO CON CLARIDAD. Se puede
sospechar pero no confirmar. Este ltimo concepto resulta de gran relevancia puesto que sin ello
de nada sirven las tcnicas rpidas de laboratorio.
LAS PRUEBAS DE DIAGNSTICO RPIDO SIEMPRE ME LLEVAN AL DIAGNSTICO FINAL?
La respuesta es, no siempre. Como se ver ms adelante hay pruebas con alta sensibilidad
y especificidad. Un ejemplo es cuando se sospecha de demodicosis. Si el resultado es negativo
excluye la enfermedad a excepcin del caso del Shar pei. Esta prueba es buena por ser excluyente
en su totalidad. Sin embargo, se debe tomar en cuenta que algunas de las tcnicas son pruebas
primarias donde la especificidad es baja y por lo tanto se requerirn de pruebas secundarias. Por
ejemplo si la semiologa de un paciente sugiere dermatofitosis y las cuatro pruebas primarias son
negativas (lmpara de Wood, raspado cutneo, cinta adhesiva, tricografa y evaluacin de pelo con
KOH). Yo excluyo demodicosis y debo saber que la lmpara de Wood y prueba de KOH son poco
sensibles para hallar los agentes micticos. Entonces debo hacer un cultivo micolgico para
2

confirmar mi diagnstico diferencial en base a las lesiones antes investigadas. En este caso, el
cultivo micolgico es una pruebas confirmatoria y ms especfica para el diagnstico final. Otro
ejemplo para clarificar el punto es el uso de la cinta adhesiva o de acetato. En un perro con
lesiones se encuentran neutrfilos lo que significa que existe inflamacin de tejido epitelial, pero
no es un diagnstico definitivo pues debemos conocer la causa que provoc el desorden pudiendo
ser un hipotiroidismo o incluso demodicosis. En este caso slo se hall el problema secundario a la
inflamacin de la piel. Aclarando que tambin existe el pioderma primario. En el caso de los
estudios coprolgicos suelen ser sencillos y tiles cuando se observan trofozoitos de Giardia
duodenalis u ooquistes de Cystoisospora e incluso fragmentos de parsitos (proglotidos de
Dipylidium caninum). En el caso de realizar raspados en pacientes no convencionales como
conejos con lesiones en odos o erizos con alteraciones en el pelaje y sospechoso de ectoparsitos
suele ser ideal realizar raspados, pues el diagnstico es inmediato en caso de ser positivos a la
presencia de los agentes causales.
A continuacin se describen algunas de la tcnicas que se aprendern en este curso, entre
ellos: coprologa directa y por tcnica de Flotacin, raspados cutneos, cinta de acetato, prueba
con lmpara de Wood, prueba con hidrxido de potasio y citologa (hisopados, improntas y
aspirados).

TCNICAS PARASITOLGICAS
La parasitologa, as como la ciencia sigue avanzando junto con las tcnicas de diagnstico
clnico e investigacin. Hoy en da se utilizan tcnicas avanzadas como biologa molecular para el
diagnstico de parsitos. Sin embargo, los estudios coprolgicos que permiten la deteccin y la
identificacin de huevos, ooquistes y quistes de los diferentes parsitos, stos siguen siendo una
herramienta utilizada en la clnica diaria y en los laboratorios clnicos veterinarios.
Las tcnicas coproparasitoscpicas son econmicas, sencillas, fcil de realizar y que toman
poco tiempo. Casi cualquier estudiante es capaz de realizarlo siempre y cuando sea ordenado y
metdico para observar la preparacin.
El mdico veterinario en la clnica tiene la facultad de realizar estas tcnicas bsicas que
son tiles para el abordaje de un evento clnico. Esto se logra gracias a que un gran nmero de
parsitos eliminan quistes, ooquistes, huevos, larvas o fragmentos de stos en las heces. En otras
ocasiones puede hallarse el mismo protozoario en la fase de trofozoto.

ABORDAJE PARA LA DETECCIN DE ENDOPARSITOS

Examen coprolgico macroscpico: Esta consiste en analizar la muestra obtenida, ya sea
recolectada con un asa coprolgica o recoleccin del suelo. La funcin primordial es buscar
parsitos adultos (nematodos) o fragmentos de stos (proglotidos) entre lo ms comn. Tambin
se debe aprovechar esto ltimo para observar la consistencia, color, presencia de sangre y moco.
Lo anterior orienta a cierto tipo de parasitosis. Por ejemplo: diarrea con moco y sangre se
sospecha de giardiosis o diarrea con sangre en coccidias.
NOTA: En caso de encontrar parsitos adultos, se pueden depositar en formol al 10% para
su conservacin y su posterior identificacin. En caso de encontrar fragmentos de parsitos
cestodos (proglotidos) es necesario colocarlos en un portaobjetos y realizar una compresin con
un palillo de madera para poder liberar las cpsulas ovgeras, despus se observa al microscopio y
as identificar con precisin al parsito.
Un punto importante es revisar la TOTALIDAD DE LA LAMINILLA puesto que puede
suceder que hasta el final de la preparacin se halle un huevo de Toxocara canis o un ooquiste de
Cystoisospora y con ello cambia el diagnstico por completo.
A continuacin se muestra como se debe visualizar la laminilla de la preparacin:

Frotis directo: El frotis directo es sencillo de realizar (ver procedimiento). Se recomienda realizar
en muestras fecales de perros, gatos, aves, pequeos mamferos y reptiles. Se utiliza para detectar
trofozotos, quiste y ooquistes de protozoarios y huevos de helmintos. La desventaja es la pequea
cantidad de heces que se utiliza, no es muestra representativa, por lo que puede ser impreciso y
poco confiable el resultado de la tcnica.
Pese a lo anterior no debe ser una tcnica despreciada y la consideraramos una prueba
primaria para el descarte de parasitosis. Si en el rea del laboratorio de la clnica u hospital llega
una muestra abundante en bolsa o en un frasco, no dude en realizar un coprolgico directo junto
con la tcnica de flotacin. Un ejemplo claro de lo anterior es cuando una muestra de una
serpiente pitn lleg al hospital. Se pidi tcnica de flotacin y adems como protocolo utilizamos
el frotis directo. En el coprolgico directo se hall la presencia de trofozotos de Giardia spp.,
mientras que en la flotacin result negativo. Aqu se pone de manifiesto la importancia de
realizar ambas tcnicas y un correcto diagnstico al paciente.
PROCEDIMIENTO DEL FROTIS DIRECTO
1. Se recolecta la muestra directa del recto del animal con ayuda de un lubricante y asa
coprolgica.
2. Se toma un pequea cantidad de heces (ordinariamente es suficiente con la que se
adhiere al termmetro). Esto puede ser con ayuda con un palillo de madera.
3. Se coloca una gota de solucin salina fisiolgica sobre un portaobjetos.
4. Se emulsifica la muestra. Hay que cerciorarse que la capa sea lo bastante delgada para
poder ser observada al microscopio.
5. Se coloca un cubreobjetos y se examina totalmente el frotis.
6. Se utiliza el objetivo de 100 aumentos (10x) y para cerciorarse se utiliza el objetivo de
400 aumentos (40x).
Tcnica de flotacin: En esta tcnica se dispersa una suspensin de material fecal en una solucin
de mayor densidad que los huevos, ooquistes, quistes de los parsitos. La diferencia en la
gravedad especfica de soluciones hace que se elevan las estructuras parasitarias. La mayor parte
de las partculas fecales caen hacia el fondo ya que la densidad es mayor que la de la solucin.
Cualquier solucin lo suficientemente densa como para hacer flotar a los huevos como el sulfato
zinc, soluciones sobresaturadas de cloruro de sodio son muy utilizadas.
PROCEDIMIENTO PARA LA TCNICA DE FLOTACIN
1. Colocar en un vaso una cantidad de heces del tamao de una avellana (2 gramos).
2. Agregar solucin sobresaturada y homogenizar perfectamente las heces.
3. Verter el contenido en otro recipiente con la ayuda de un colador con el fin de quitar
partculas grandes.
4. Verter la sustancia colada en un tubo serolgico
5. Centrifugar a 1500 rpm por 5 minutos.
6. Quitar la capa superficial del lquido del tubo mediante un asa de aluminio.
5

7.

8.
9.
10.

a. Otra opcin es aadir ms solucin saturada hasta el borde y colocar un

cubreobjetos sin derramar solucin.
Depositar varias gotas al centro de un portaobjetos.
a. Como opcin recomiendo el uso de lugol de parasitologa para ser ms evidente
los quistes de Giardia que por su tamao es difcil de observar.
Colocar el cubreobjetos
Observar al microscopio con objetivo de 100 aumentos (10x) y 400 aumentos (40x) con el
diafragma ligeramente cerrado para observar mejor las estructuras.
Revisar la totalidad de la preparacin.

Tcnica de flotacin con Fecalyzer: Existen kits comerciales que se utilizan con el mismo principio
como tcnica estndar de flotacin. Estos kits contienen un vial con un filtro.
PROCEDIMIENTO CON EL FECALYZER
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Sacar la rosca y aadir sulfato de zinc hasta la mitad.

Tomar con la rosca del fecalyzer una porcin de muestra fecal.
Introducir las heces y girar varias veces para disolver la materia fecal.
Aadir ms sulfato de zinc hasta el borde sin que se derrame.
Colocar un cubreobjetos sobre el fecalyzer comprobando que el lquido alcance el borde.
Esperar de 10 minutos y despus colocar el cubreobjetos con ayuda de unas pinzas
pequeas sobre un portaobjetos.
7. Observar al microscopio con objetivo de 100 aumentos (10x) y 400 aumentos (40x) con el
diafragma ligeramente cerrado para observar mejor las estructuras parasitarias.
8. Revisar la totalidad de la preparacin.
Bibliografa
1. Coffin DL. Laboratorio clnico en Medicina Veterinaria. Tercera edicin.1959
2. Hendrix C.M. Laboratory Procedures for Veterinary Technicians- Fourth edition.
Mosby.2002.
3. Ibarra FV, Figueroa JC, Quintero MTM. Parasitologa Veterinaria Vol. III Artrpodos 1era
edicin.2012.
4. Ibarra FV, Vera YM, Alcal YC. Parasitologa Veterinaria Vol 1. Protozoarios 1era
edicin.2009

PRUEBAS DIAGNSTICAS PARA PIEL

Actualmente varios mdicos veterinarios se han subespecializado en la dermatologa y con
ello aportado varias tcnicas bsicas de diagnstico necesarias cuando se nos presentan pacientes
con problemas de piel. De hecho refieren que los pacientes que mayormente llegan a la consulta
diaria son los que padecen trastornos cutneos.1
NOTA: El siguiente escrito es somero y orientativo. Para mayor referencia es preferible dirigirse a textos
especializados en dermatologa.

Tambin refieren que debido a que la mayora de los problemas dermatolgicos presentan
los mismos signos clnicos, resulta por lo tanto un reto en el diagnstico. 1
El abordaje diagnstico consiste en realizar las tcnicas bsicas en la primera consulta con
el fin de reducir la lista de diagnsticos diferenciales. Como se mencion ms adelante, se puede
tener pronto el resultado y la terapia o seleccionar pruebas adicionales como cultivo micolgico,
bioqumica sangunea, hemograma, urianlisis.1
Sin embargo siempre hay que tener en cuenta que las tcnicas siempre son
complementarias, tal como lo dice el siguiente enunciado:
En la dermatologa, como tambin ocurre en la mayora de las reas de la medicina de
pequeos animales, los mtodos complementarios de diagnstico solo complementan los hallazgos
clnicos. La utilizacin no racional y azarosa de cualquier mtodo complementario redundar en
informacin confusa o fcil de malinterpretar.2
Se consideran cinco pasos importantes para el diagnstico.
1. Realizar resea y una buena anamnesis
2. Identificar lesiones primarias, secundarias y mixtas.
3. Determinar un patrn de distribucin.
4. Hacer una lista de diagnsticos diferenciales.
5. Utilizar con criterio los mtodos complementarios de diagnstico.
Raspado cutneo: El objetivo es diagnosticar enfermedades provocadas por ectoparsitos
como Cheyletiella, Demodex, Notoedrex y Sarcoptes. Los materiales necesarios para hacer un
raspado son una hoja de bistur, un portaobjetos, glicerina y un cubreobjetos. Se aplica una
pequea gota sobre la hoja de bistur. Es necesario generar un pliegue cutneo para exprimir los
folculos pilosos (pellizcar) y as favorecer la salida de ectoparsitos como Demodex. Despus se
toma entre los dedos ndice y pulgar de la mano y se procese a raspar suave y firmemente una y
otra vez en la direccin del pelo. El material va quedando adherido a la hoja de afeitar. Despus de
raspar varias veces, la piel debe volverse rosa cuando los capilares se vuelvan visible y exudan
sangre. Esto asegura que se recoge material de una parte lo suficientemente profunda de la piel
7

como para recoger caros Demodex. (As se evita falsos negativos). Despus se deposita en el
portaobjetos extendindola y se aplica un cubreobjetos. Se observa a microscopio de 100
aumentos (10x) y 400 aumentos (40x).
Es una tcnica altamente especfica (es decir, la observacin de raspados positivos, casi siempre es
diagnstico de la enfermedad). Aunque su sensibilidad es baja (la observacin de raspados
negativos no excluye la enfermedad.2
ESPECIFICACIONES POR AGENTE ETIOLGICO
Sarna sarcptica: Los lugares de eleccin son los bordes de los pabellones auriculares,
codos y tarsos y que presenten ppulas de ser posible. Es necesario realizar entre 5 y 6 raspados
para elevar la sensibilidad de la prueba. Esta sarna es altamente contagiosa entre los perros y se
transmite al ser humano. Las heces, detritus y huevos y la accin irritativa dentro de las galeras
ocasionan prurito intenso. Los caros prefieren los sitios de epidermis delgada. Las lesiones inician
como ppulas eritematosas.

Dibujo 1. Principal localizacin del caro Sarcoptes scabiei.

AUTOR
Dermatologa canina para la prctica clnica
diaria. Fernando Fogel y Pablo Manzuc.
Dermatologa de pequeos animales. Atlas en
color y gua teraputica.
Soluciones Saunders en la prctica veterinaria.
Dermatologa de pequeos animales.
Clnica de pequeos animales 3era edicin.
Morgan R.V.

COMENTARIO
Los raspados cutneos no excluyen la
enfermedad y se observan en cerca de 50%
(baja sensibilidad).
Baja. Slo el 20%)
Los caros Sarcoptes slo se encuentran en los
exmenes de raspados cutneos alrededor del
50%.
Los raspados son hasta un 50% a 75% son
negativos.

Sarna demodsica: Los lugares de eleccin para realizar raspados son ventral al cuello, la
cara y en miembros anteriores y posteriores. Es suficiente raspar de 2 a 3 veces a cada paciente. Es
recomendable que el rea muestreada presente comedones. La prueba es altamente sensible (un
raspado negativo excluye la enfermedad). En la infestacin temprana se observa una prdida
ligera de pelo en la cara y extremidades anteriores, seguida de engrosamiento de la piel.

Dibujo 2. Principal localizacin del caro Demodex canis.

AUTOR
Dermatologa canina para la prctica clnica
diaria. Fernando Fogel y Pablo Manzuc.
Dermatologa canina para la prctica clnica
diaria. Fernando Fogel y Pablo Manzuc.

COMENTARIO
*Es una prueba sensible, pero en Shar-pei, en
los que los raspados pueden ser negativos aun
en animales demodcticos.
*Es muy poco probable observar Demodex en
paciente no demodcticos. Los raspados que
contienen pocos caros deben ser juzgados
junto a la signologa clnica.

Sarna notodrica: Es una enfermedad parasitaria causada de los gatos y caracteriza por
presentar prurito. Se realiza un raspado superficial. Es recomendable para Notoedres cati raspar
reas de la cabeza, cara y orejas que presenten costras y escamas.
Cheiletielosis: Se pueden hacer raspados convencionales o improntas con cinta de
acetato. Los raspados convencionales se realizan sobre el lomo y dorsal del cuello. Es un acaro
grande. La sensibilidad es del 90% y la especificidad del 100%. Las cintas de acetato se observan
directamente al microscopio sin teir.
caro Otodectes y Psoroptes: Es comn observarlos con el otoscopio en el perro y el
conejo respectivamente. Para su recolecta es suficiente con raspado superficial e incluso el uso de
un hisopo. Se coloca el material en un portaobjetos con glicerina y se coloca un cubreobjetos.

PROCEDIMIENTO PARA EL RASPADO CUTNEO

1. Se recomienda quitar el filo a la navaja de bistur con su propio empaque para evitar
lesionar al paciente.
2. Se aplica una pequea gota de glicerina sobre el bistur.
3. Se genera un pliegue cutneo para exprimir los folculos pilosos y favorecer la salida de
caros (Demodex).
4. Se toma entre los dedos ndice y pulgar y se procede a raspar una y otra vez hasta lograr
un poco de sangrado. (SIEMPRE REALIZAR VARIOS RASPADOS DE DIFERENTES SITIOS Y
COLOCARLOS EN EL MISMO PORTAOBJETOS).
5. Se deposita el material sobre un portaobjetos con o sin una gota de glicerina y se aplica un
cubreobjetos.
6. Se observa en el microscopio en objetivos de 100 aumentos (10x) y 400 aumentos (40x)
toda la laminilla. Es recomendable usarlo con el diafragma ligeramente cerrado para
mejorar la visualizacin.

CITOLOGA DRMICA
CINTA ADHESIVA: Es una de las tcnicas que se utiliza con ms frecuencia. Es til para determinar
las caractersticas superficiales de la epidermis. La cinta adhesiva tiene la facilidad de poder llegar
a sitios de difcil acceso como el espacio interdigital. Se toma una cinta de acetato (cinta adhesiva
transparente) y se aplica sobre la superficie a muestrear. El material quedar adherido a la
superficie gomosa. Luego se colocar sobre un portaobjetos con el material hacia arriba y se fija
por los extremos. El portaobjetos as preparado se sumerge en los colorantes y luego se observa al
microscopio ptico. Existe otra variante donde se desprende la cinta y se tie para despus
colocarlo en el portaobjetos con el material haca abajo, este ltimo es de mi preferencia debido a
que acta como cubreobjetos y se puede aadir aceite de inmersin y preservar la preparacin.
Despus se observa para visualizar clulas, bacterias, levaduras, ectoparsitos, detritus celulares y
agentes contaminantes.
QU SE PUEDE OBSERVAR?
Bacterias: Existe microbiota bacteriana, sin embargo su nmero es escaso. En exceso se interpreta
como una infeccin de tejido epitelial (dermatitis bacteriana).
Levaduras: Es un habitante normal. El nmero oscila a una levadura por campo. A 1000 aumentos.
Ms de 5 levaduras por campo es un sobrecrecimiento. Y entre 1 a 5 levaduras deben juzgarse
junto con la semiologa clnica. Aunque no son tan fiables y cuantitativos como un cultivo.
Ectoparsitos: Se llegan a observar Demodex y huevos, Sarcoptes, piojos y Cheyletiella.
Clulas inflamatorias: Se hallan neutrfilos normales o degenerados, macrfagos, incluso
fagocitando bacterias.
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Macroconidios de hongos ambientales: Es usual ver estas estructuras, principalmente del gnero
Alternaria. En ningn caso, la presencia de macroconidios es indicativa de micosis superficial.
Queratinocitos: Son clulas aplanadas y anucleadas.
Partculas de polvo: Se observan como pequeas estructuras de color refringente. Y su presencia
en exceso informa acerca del estado de limpieza del manto.
Restos de queratina: Se observan como espculas basfilas fuertes.
Esporas ambientales: Se observan de color verde.
FROTIS POR IMPRESIN DIRECTA: Se recoge exudado hmedo de las pstulas, las erosiones, las
lceras o el drenaje de las lesiones. El portaobjetos se presiona contra la lesin cutnea y despus
se procede a la tincin con hemocolorante rpido. Los posibles hallazgos son las mismas que para
una citologa de cinta adhesiva.

PROCEDIMIENTO PARA LA CINTA DE ACETATO

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8.
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Se toma una o varias cintas adhesiva no mayor al tamao del portaobjetos.

Se aplica sobre la superficie a muestrear presionando con fuerza.
Se coloca por un extremo del portaobjetos.
Se identifica la zona en donde se hizo la impresin.
Se tie con hemocolorante rpido durante un minuto en cada solucin.
a. Nota: Algunos recomiendan evitar introducirla en el alcohol fijador y solo teir con
la solucin eosinoflica y basoflica.
Entre el paso del alcohol y la solucin eosinoflica (rojo) se debe quitar el exceso en una
toallita y despus pasar al siguiente colorante.
Al final se enjuaga con solucin destilada o directa al chorro y se procede a quitar el
exceso con una toallita.
Se coloca el acetato sobre un portaobjetos.
Se observa con microscopio con el objetivo de 100 aumentos (10x), 400 aumentos (40x) y
1000 aumentos (100x). ste ltimo objetivo es necesario para identificar levaduras y
bacterias.
CITOLOGA TICA

Es una tcnica til para hallar bacterias, levaduras, ectoparsitos. Cuando se sospecha de
caros se usa aceite mineral para disolver el material recogido por la escobilla tica. Para la
identificacin de bacterias y levaduras y se hace rodar el hisopo sobre un portaobjetos. Realizar
tres improntas e identificar el odo muestreado. Si el material es muy ceroso, el extremo final del
portaobjetos debe calentarse para ayudar que se derrita la cera y que el colorante pueda penetrar

11

en la muestra. Para la identificacin de microorganismos es necesario utilizar el objetivo de 1000

aumentos. (100 x).
CUADRO 1. INTERPRETACIN
Orejas sanas: Promedio menor o igual a 2 levaduras
Orejas sospechosas: Promedio de 2 y 8 levaduras
Orejas con infeccin: Mayor o igual a 8 levaduras
Con objetivo de 1000 aumentos
Tesis: Determinacin de la presencia y nmero De Malassezia pachydermatis en el canal auditivo externo de perros clnicamente sanos
de la ciudad de Mxico. Nadia Josefina Pereira Lozada. FMVZ-UNAM Mxico .D.F. 2003.

PROCEDIMIENTO PARA LA CITOLOGA TICA

1. Se introduce el hisopo seco en el conducto auditivo. (recordar que el conducto auditivo es
en forma de L) por lo que se introduce haca a un lado y luego se dirige hacia abajo.
2. Es recomendable frotar las paredes para obtener material representativo.
3. Despus se coloca el material sobre un portaobjetos (rotando el hisopo sobre el
portaobjetos) De preferencia hacer tres lneas.
4. *En el laboratorio en muestras con mucho sebo es recomendable con un encendedor
aplicar un poco de calor para disminuir la grasa en la laminilla.
5. Teir la muestra con hemocolorante rpido.
CITOLOGA DE ASPIRADOS
La citologa es una tcnica fcil, econmica y mnimamente invasiva que evala muestras
recolectadas por diferentes tcnicas para observar clulas, microorganismos y elementos
caractersticos de una lesin especfica. Las principales indicaciones para utilizar la citologa clnica
son en efusiones, sedimento urinario, prstata con aspirados o lavados, linfadenopatas,
examinacin de enfermedades metastsicas, organomegalia difusa, masas subcutneas, cutneas
y lesiones ulcerativas, citologa conjuntival, vaginal, lavados traqueobronquiales, masas en
abdomen no identificadas entre otras muchas ms. De manera general la citologa clasifica las
lesiones para asistir con el diagnstico, pronstico y manejo del evento clnico. Se clasifica
generalmente en seis grupos, a saber; tejido normal o hiperplsico, masa qustica, infiltrado
celular o inflamacin, respuesta por dao tisular, neoplasia y muestra no diagnstica (ver cuadro
1). Y las anteriores pueden estar presentndose al mismo tiempo o estar coasociadas. La citologa
clnica casi siempre la realiza un patlogo clnico o anatomopatlogo ya que laminilla requiere de
un tiempo determinado para hacer la lectura por ms sencilla que parezca el caso. Adems de la
responsabilidad en la emisin de resultados. Como parte del curso se incluy ste tema
enfatizando lo inflamatorio y no inflamatorio y enviando siempre una o varias laminillas a un
laboratorio de referencia mientras se gana experiencia en la citologa clnica. Un punto a favor
para los que se quieren dedicar a la citologa clnica es la facilidad de diagnstico de ciertos
procesos como abscesos, algunos tipos de neoplasias como el tumor venreo transmisible. En

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estos casos junto con la respuesta esperada en el tratamiento es factible realizar ste tipo de
tcnica en la clnica.

CUADRO 2. CATEGORAS GENERALES DE LA INTERPRETACIN DE CITOLOGA

Tejido normal o hiperplsico
Masa qustica
Infiltrado celular o inflamacin
Respuesta al tejido lesionado
Neoplasia
Muestra no diagnstica
Raskin, R.E, Meyer,Meyer.D.J. Canine and feline citology. A color atlas and interpretation guide.Saunders 2010.

PROCEDIMIENTO DE CITOLOGA DE ASPIRADOS

1. Se realiza rasurado o antisepsia del lugar a puncionar.
2. Se sujeta y se delimita la zona a puncionar.
3. Se introduce la jeringa de 5 o 10 mL y se aspira en el centro de la masa, jalando el embolo
varias veces (pasando aproximadamente a travs de dos tercios del dimetro de la masa.
La aguja puede ser redirigida haca varias reas diferentes en su interior (abanico) para
obtener material suficiente. Es recomendable realizar muestras de varias zonas de la masa
mediante distintos intentos de recogida por separado.
a. El abanico se realiza sacando la aguja lo ms posible y reintroducindola, no a la
mitad del aspirado porque se provocara lesin.
b. Si existe sangrado, suspender el aspirado.
c. Si existe sangrado, repetir en otra zona (por ejemplo en los bordes laterales)
d. Si persiste el sangrado, intentar el aspirado solo con la aguja y si persiste, realizar
varias veces en abanico y depositar la muestra en el portaobjetos. (Realizar varias
preparaciones). Algunas neoplasias estn muy vascularizadas.
e. En caso de obtener lquido, se extrae y se deposita en un tubo con EDTA y se
realizan laminillas con un frotis terminal. Se intenta de nuevo el aspirado si es que
la masa persiste.

4. La jeringa acoplada se retira de la lesin pero cuando se interrumpe la presin negativa.

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5. La jeringa se separa de la aguja y el mbolo se retira hasta el final del cilindro.

6. Despus la aguja se conecta de nuevo y su contenido se expulsa a un portaobjetos

empujando rpidamente el mbolo hasta el final del cilindro.

7. Identificar cada laminilla. Es comn el error de ir acumulndolas y luego se pierde la

secuencia para la identificacin.
8. Es necesario revisar una o dos laminillas para observar material (celularidad) para evitar
dar muestras con material insuficiente y aprovechar que el paciente se encuentra todava
en la clnica. Eso se evita muchas molestias para el paciente y el propietario.

CITOLOGA VAGINAL
El estudio de la citologa vaginal es muy utilizada por mdicos dedicados a la reproduccin
para conocer el estado hormonal de los pacientes. La citologa vaginal, generalmente en
combinacin con anlisis hormonales, pueden proporcionar informacin valiosa acerca del estado
del ciclo ovrico. Tambin es til para abordar problemas inflamatorios, observacin de
microorganismos bacterianos, parasitarios y levaduriformes.

14

Eritrocitos
Proestro
Estro
Diestro
Anestro

+++
----

Neutrfilos
Escasos
Escasos
Moderados
Escasos

Cuadro 3
Basales
Escasas
+
++
++

Intermedias
--+++
++

Escamosas
con ncleo
Escasas
++
Escasas
--

Escamosas
sin ncleo
+
+++
---

Diplomado de citologa del departamento de Patologa. Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Facultad de Medicina Veterinaria y
Zootecnia.

Etapa
Proestro
(9 das)
(Rango
de 3-17
das)

Clulas
epiteliales
Temprano
Parabasales,
intermedias y
pocas
superficiales
Tardo
Superficiales
(>80%) y
clulas
intermedias.

Estro (9
das)
(rango de
3-21
das)

>80%
superficiales y
escamosas
anucleadas.
<5% de
parabasales o
intermedias.
Diestro
Abrupto
(2 meses) disminucin de
superficiales e
incremento de
15 al 20% de
intermedias.

Anestro
(4.5
meses)

Neutrfilos

Presentes

Eritrocitos

Bacterias

Abundantes
o ausentes. Presentes
Usualmente
presentes

Fondo

Granular
o sucio

Limpio
Poco o
ausentes

Estatus
hormonal

Eleva el
estradiol y baja
progesterona

Pueden ser
abundantes Presentes
o ausentes.
Usualmente
presentes

Ausente

Presente o
ausente

Presente

Limpio

Presente
con
frecuencia
(pocos o
muchos)

Puede estar
presente
pero
usualmente
ninguno

Presente.
Ingiriendo
bacteria
dentro de
los
neutrfilos
puede ser
vistos
Ausente o
en bajo
nmero

Puede
haber
gran
cantidad
de
detritus.

Disminuye el
estradiol y se
eleva la
progesterona.

Alta o baja
concentracin
de
progesterona.

Predominan las Ausentes o

Ausente
Limpio o Baja
parabasales e
en bajo
granular concentracin
intermedias.
nmero.
de
Superficiales
progesterona.
ausentes.
No es posible distinguir entre proestro tardo de estro en citologa vaginal.

Tabla del libro : Raskin,RE. Meyer DJ. Canine and Feline Cytology. A color atlas and interpretation guide. Saunders 2001.

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PROCEDIMIENTO DE LA CITOLOGA VAGINAL

1. Se introduce el hisopo seco (algunos recomiendan aplicacin de solucin salina fisiolgica)
en la vagina en direccin caudal. A veces es necesario introducir hacia arriba de la vagina
y luego redirigir hacia caudal.
2. Una vez que se encuentra craneal al orificio uretral, se raspa suavemente la pared vaginal.
Esto para obtener material representativo.
3. A continuacin se transfiere las clulas a una laminilla, haciendo rodar suavemente el
bastoncillo y ejerciendo una presin mnima, para evitar la rotura de clulas. De
preferencia hacer tres lneas.
4. Teir la muestra con hemocolorante rpido.

MICOLOGA
Lampara de Wood: Una lmpara de Wood es una fuente especial de luz ultravioleta (UV)
con una longitud de onda de 340 a 450 mm. Es una prueba primaria utilizada en la clnica para
observar ciertos dermatofitos, principalmente Microsporum canis. Consiste en exponer a una luz
UV las reas afectadas para poner en evidencia la fluorescencia amarillento/verdosa emitida por el
hongo. Esta combinacin nica hace que los metabolitos del triptfano que producen algunas
cepas de M. canis produzcan este color caracterstico. La lmpara debe ser encendida 10-15
minutos antes de ser utilizada para que alcance la longitud adecuada. El examen debe realizarse
en una habitacin oscura. Se expone durante 10 a 15 minutos. El resultado tambin puede ser
falso positivo en los casos en lo que hubo aplicacin de soluciones tpicas y debido a la
fluorescencia de las escamas. Los pelos positivos son los que se envan para cultivo micolgico. Las
infecciones raras por M. audounii, M. distortum y Trichophyton schoenlenii tambin pueden emitir
fluorescencia.
Desgraciadamente, no todas las cepas de Microsporum elaboran este producto celular, por lo que
la lmpara de Wood slo es til en aproximadamente el 50% de los casos de infeccin por M. canis.
Esta tcnica no puede aplicarse para identificar las especies de Trichophyton ni M. gypseum.2
Observacin directa de agentes micticos. Prueba de Hidrxido de potasio (KOH): Es una
tcnica primaria y previa al cultivo. La tcnica consiste en observar las artrosporas o artroconidias
de los dermatofitos que se hallan rodeando las vainas de los pelos infectados (pelos esporados).
De la zona a muestrear se limpia con alcohol el pelo y la piel. Se recogen pelo de la periferia de la
lesin con ayuda de pinzas. La tcnica de hidrxido de potasio al 10 o 20% consiste en depositar
dos gotas de KOH y luego calentarla (con una lmpara cercana) y esperar veinte minutos para que
acte el aclarador del pelo. Las artrosporas se hallan casi siempre rodeando al pelo deformado y si
se mueve el micromtrico, se ven refringentes. Aunque es una prueba muy especfica si se realiza
correctamente, no es una tcnica sensible para el diagnstico de dermatofitos si la realiza un
clnico inexperto. Todas las infecciones por dermatofitos deben confirmarse mediante cultivos de
hongos.
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Si hay ectotrix la corteza del pelo aparece hinchada y daada y, si se rompe, el extremo se ver
deshilachado.3
PROCEDIMIENTO
1. Con la ayuda de pinzas, se obtiene pelo de la periferia de las lesiones nuevas.
2. Se coloca el hidrxido de potasio al 10 o 20% en un portaobjetos y se deja reposar de
20 a 30 minutos. (el calor es opcional).
3. El pelo se ve hinchado e irregular.
4. Se observa con microscopio de 100 aumentos (10x) y 400 aumentos (40x). Es
necesario visualizar siempre estos estudios para evitar confusiones con estructuras
propias del pelo.

Cultivo micolgico en medio de prueba para dermatofitos (DTM): Es una tcnica muy
sensible y especificas. Los cultivos confirman las micosis superficiales y los negativos lo descartan.
La muestra debe ser tomada de los lmites de una lesin sospechosa, y debe contener pelos y
escamas. El DTM tiene un indicador de rojo de fenol (lo cual indica consumo inicial de protenas,
caracterstica propia de los dermatofitos). Es necesario revisar el cultivo cada 2 a 3 das durante 14
das como mnimo.
Se suele observar el desarrollo de mltiples hongos ambientales (Alternaria sp, Aspergillus,
Penicillium sp) que pueden virar el color del DTM, aunque de forma diferida (consumo tardo de
protenas.2

TRICOGRAMA (EVALA LA PUNTA, LA RAZ Y EL EJE DEL PELO)

Es una tcnica til para la evaluacin de las fases de crecimiento del pelo, buscar
infecciones de pelo por agentes micticos (artroconidias), agentes parasitarios (caros), defecto de
la pigmentacin entre otros ms.3
Se toma una pequea muestra de pelo para examinarla. Se utiliza aceite mineral para fijar
y se examina en objetivo de 10 aumentos (10X) y 40 aumentos (40X). 3
Se recomienda que una vez tomado el pelo, mantenerlo en la posicin adecuada para que
todos los folculos este del mismo lado y sea fcil su observacin.3
La punta del pelo: Se examina para conocer si el paciente tiene prurito o si la causa de la cada del
pelo no es traumtica (p.ej. enfermedad endocrina). 3
Raz del pelo: til para determinar la fase del pelo. Anagen, telogen o catagen en un intento de
determinar si los folculos presentan un ciclo normal. En la mayora de las razas la mayor parte del
pelo est en una fase telgena, pero deberan identificarse algunos pelos angenos. En las razas
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con perodos de crecimiento largos (caniches), casi la totalidad del pelo puede estar en una fase
angena, con relativamente poco pelo en fase telgena.3
Eje del pelo: En los pacientes con dermatofitosis a veces pueden observarse dermatofitos en
ectotrix. A veces se utiliza el KOH para disolver el exceso de queratina. En la pediculosis y
cheiletielosis pueden apreciarse los huevos del ectoparsito adheridos al eje del pelo.3
Si hay ectotrix la corteza del pelo aparece hinchada y daada y, si se rompe, el extremo se ver
deshilachado (como una escoba).3

Bibliografa
1. Diplomado a distancia en Medicina, Ciruga y Zootecnia en perros y gatos. Mdulo de
dermatologa. Luis Ramn Nolasco Espinosa. Universidad Nacional de Mxico. Facultad de
Medicina Veterinaria y Zootecnia.2011
2. Fogel F, Manzuc P. Dermatologa canina para la prctica clnica diaria. 1era edicin.
Buenos Aires: Inter-Mdica 2009.
3. Medleau F,Hnilica KA. Dermatologa de pequeos animales. Atlas en color y gua
teraputica. Segunda edicin. Elsevier Saunders. 2007.
4. Patel A, Forsythe P. Soluciones Saunders en la prctica veterinaria. Dermatologa en
pequeos animales.
5. Cowell RL, Tyler RD,Meinkoth JH, Denicola DB. Diagnostic Cytology and Hematology of the
Dog and Cat 3era ed. Mosby.2008
6. Raskin RE, Meyer DJ. Atlas of canine and Feline Cytology. Saunders.2001

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