TEMA VII

PARED CELULAR

Es muy importante en bacterias porque es la mejor diana teraputica. Es la capa que

rodea externamente a la membrana plasmtica. En bacterias, tiene dos funciones principales:
- Proporcionar la forma celular (espiral, cocoide...)
- Proteger frente a la lisis osmtica.
Existen dos tipos de pared celular en bacterias, que se diferencian en la tincin de gram:
- Gram +: Monoestratificada y gruesa (monocapa)
- Gram -: Pluriestratificada y delgada (multicapa)
PEPTIDOGLICANO O CAPA DE MURENA
El peptidoglicano es el constituyente bsico de la pared celular en bacterias. Es el
responsable de la rigidez de la pared, y proporciona resistencia frente a la lisis osmtica.
Es un polmero de azcares y amnocidos. Su estructura es:
N-acetil glucosamina 14 N-acetil murmico Tetrapptido
En E.coli, que es la bacteria modelo de las gram , el tetrapptido est formado por: L
alanina, D glutmico, mesodiamino pimlico y D alanina. En Staphylococcus aureus, bacteria
modelo de las gram +, est formado por: L alanina, D glutamina, L lisina y D alanina.
Son aminocidos poco frecuentes (forma D, mesodiamino pimlico). Esta estructura
bsica se repite para formar una estructura tridimensional o de malla.
La asociacin de las unidades de peptidoglicano conlleva la formacin de nuevos
enlaces entre las cadenas de tetrapptidos: En E. coli el tetrapptido se une con un enlace
peptdico entre el mDAP y la D Ala. En Staphylococcus aureus el puente cruzado est
formado por 5 molculas de glicina:
NAG-NAM

NAG-NAM

L Ala

Enlace interpeptdico

L Ala

D Glu

o puente cruzado

D Gln

M DAP ----- CO NH D ala

L Lis ------[gli]5 D Ala

D Ala

D Ala

E. coli

Staphylococcus aureus

L lis
D Gln

Estructura tridimensional:
M

G
M
G

El nmero de puentes cruzados difiere

en el tipo de bacteria. En Gram no se forman

todos los puentes cruzados posibles. En gram

+ se forman prcticamente todos los posibles.

Esto implica que su pared sea ms resistente.

G
M

El peptidoglicano representa, en gram

+, del 40 al 90% de la pared celular. En gram
- constituye entre el 5 y el 20% de la pared.

ESTRUCTURA DE LA PARED CELULAR EN GRAM +

Est formada por una gruesa capa de proteoglicanos y cidos teicoicos. Los cidos
teicoicos estn asociados covalentemente. Son polialcoholes formados por unidades de
glicerol o ribitol unidas entre s mediante enlaces fosfodiester. En funcin de sus
componentes, los dividimos en 2 grupos:
- Glicerol teicoicos: Formados por varias molculas (ms de 10) de glicerol, unidas
mediante enlaces fosfodiester. P O CH2 CH CH2 O P
O
R
- Ribitol teicoicos: P O CH2 CH CH CH CH2 O P
O

Los residuos R estn sustituidos por D Ala, glucosa o N-acetil glucosamina.

En funcin de su localizacin, los cidos teicoicos se clasifican en:
- cidos lipoteicoicos: Conectan la membrana plasmtica con el exterior de la pared.
- cidos teicoicos: Slo aparecen en la cara ms externa de la pared celuar.
Los cidos teicoicos tienen las siguientes funciones:
- Proporcionar cargas negativas a la pared, y por tanto, favorecer el transporte de iones a
su travs.
- Actuar como canales inicos, gracias a sus cargas negativas.
- Son los principales antgenos de superficie de las gram +.
ESTRUCTURA DE LA PARED CELULAR EN GRAM

En contacto con la membrana hay una delgada capa de proteoglicanos, conectada con la
siguiente capa de pared por una lipoprotena pequea (7000 d). La siguiente capa es la
membrana externa, muy semejante a la membrana plasmtica. Es una bicapa lipdica, pero con
ciertas diferencias:
En su parte ms externa tiene lipopolisacridos, tambin llamado ARO, formado por 3
partes:

El ARO se ha estudiado en profundidad en Salmonella.

A Est formado por dos molculas de glucosamina unidas entre s y de las que cuelgan
cidos grasos como el mirstico, lurico, palmtico, esterico, caproico...

El ncleo R est formado por diferentes azcares unidos por enlaces fosfodister. Entre
estos azcares destacan 2 poco frecuentes:
KDO: 2-ceto-3-desoxioctnico
Heptulosa
La cadena lateral est formada por un polmero de estos cuatro azcares: Galactosa,
ramnosa, abecuosa? y manosa.
Man Abe
Ram
Gal
Glu NAG
Gal
Glu Gal
Heptulosa
Heptulosa P P Etanolamina
KDO
KDO KDO P Etanolamina
P - Glucosamina Glucosamina P
El lipopolisacrido es muy txico, y por eso se le denomina endotoxina.
A diferencia de la membrana plasmtica, la membrana externa es una estructura
permeable. Permite el paso de molculas inferiores a 5000 d. En este transporte interviene una
protena transmembrana llamada porina.
Una de las funciones de la membrana externa es la retencin de enzimas hidrolticas
como nucleasas, proteasas, glucosidasas, etc. Estas enzimas se localizan en el espacio
periplsmico y son enzimas digestivas; hidrolizan polmeros como polisacridos, protenas,
cidos nucleicos, que penetran a travs de la porina y se degradan en monmeros. stos,
penetran al interior de la clula a travs de sistemas de transporte como el transporte activo o
la translocacin de grupo.

LISIS DE LA PARED CELULAR: FORMACIN DE PROTOPLASTOS

Existen enzimas capaces de hidrolizar el peptidoglicano:
La lisozima est presente en lgrimas y saliva de mamferos. Hidroliza el enlace
glucosdico (14) que une NAG y NAM del peptidoglicano. El peptidoglicano resultante es
frgil, por lo que la bacteria lisa (explota).

El peptidoglicano dbil se separa de la clula y queda una clula que carece de

peptidoglicano,

esfrica,

llamada

protoplasto,

que

debe

mantenerse

estabilizado

osmticamente (0.6 M aproximadamente).

Si tratamos una gram con lisozima, nos queda una estructura llamada esferoplasto,
que tambin debe ser estabilizado osmticamente.

Protoplasto y esferoplasto tienen importancia en manipulacin gentica de bacterias y

otros organismos con pared celular.
La lisozima es producida por clulas animales. Las bacterias producen distintas enzimas
capaces de degradar su propio peptidoglicano; se llaman autolisinas:
- Glucosidasas: Rompen el enlace glucosdico (14)
- Amidasas: Rompen el enlace peptdico NAM aminocido
- Endopeptidasas: Hidrolizan el puente cruzado del peptidoglicano.
Participan en la etapa final de crecimiento bacteriano, que implica la lisis de la bacteria.
Tambin son morfogenticas: intervienen en la morfognesis; participan en el crecimiento
vegetativo de las bacterias; hidrolizan ciertos enlaces en el peptidoglicano donde se incluyen
nuevas molculas que intervienen en la elongacin del peptidoglicano

BIOSNTESIS DEL PEPTIDOGLICANO

Las autolisinas hidrolizan enlaces puntuales. En los huecos que quedan se incluyen
peptidoglicanos que elongan la pared. En la biosntesis del peptidoglicano intervienen dos
molculas: UDP y bacterioprenol que es un alcohol isoprenoide de 55 carbonos.
Etapas en la biosntesis en gram (es similar en gram +):
Citoplasma:
- Formacin de UDP y unin de NAM UDP-NAM
- Unin de aminocidos: L-Ala D-Glu
UDP-NAM
mDAP D-Ala D-Ala

UDP-NAM
L-Ala
D-Glu
mDAP
D-Ala
D-Ala

Membrana plasmtica:
En la cara interna hay bacoprenol fosfato, que es un transportador.
NAM P P Bactoprenol
NAG NAM P P Bactoprenol
L-Ala
L-Ala
D-Glu
UDP-NAG
D-Glu
M DAP
+ UMP
m DAP
+ UDP
D-Ala
UDP
D-Ala
D-Ala
D-Ala
El bactoprenol va a transportar la molcula desde la cara interna de la membrana hasta
el punto de crecimiento del peptidoglicano, en la pared celular. Su funcin es hacer
hidrofbica esta molcula, para que atraviese la membrana. Cuando es transportada, la
molcula libera el bactoprenol, generndose bactoprenol pirofosfato, que regresa a la cara
interna. Gracias a la energa obtenida en la hidrlisis de un fosfato, adquiere su configuracin
normal dentro de la membrana plasmtica.
NAG NAM
L-Ala
D-Glu
mDAP
D-Ala
D-Ala

Bactoprenol P P Bactoprenol P + Pi

Se forma un puente cruzado entre D-Ala y mDAP. La formacin del puente requiere
energa, y en el exterior celular no hay ATP. La clula emplea una enzima llamada
transpeptidasa especfica que hidroliza el enlace de la ltima D-Ala, y la energa liberada la
acopla en la formacin del puente cruzado; es una reaccin de transpeptidacin.
NAG NAM
L-Ala
D-Glu
mDAP
D-Ala
D-Ala ----- mDAP
D-Ala
D-Glu
L-Ala
NAM NAG
D-Ala carboxipeptidasa hidroliza el enlace D-Ala D-Ala en las molculas que no
forman puente cruzado. Existen antibiticos que acta a nivel de biosntesis de pared:
- Penicilinas y cefalosporinas inhiben la transpeptidacin.
- La cicloserina es un anlogo de la D-Ala e inhibe las reacciones donde acta la D-Ala.
- Vancomicina inhibe el transporte de la molcula mediado por bactoprenol a este nivel:
Bactoprenol P P

Bactoprenol P + Pi

- Bacitracina inhibe el transporte mediado por bactoprenol, pero a distinto nivel.

FIMBRIAS Y PILI (PELOS)

Son apndices que presentan distintas bacterias y que no participan en el movimiento.

Las fimbrias son muy numerosas y cortas, mientras que los pili son ms largos y poco
abundantes. Su presencia est determinada genticamente. Su funcin es actuar como factor
de adherencia (participa en la adherencia de bacterias a sustratos inertes) y en la formacin de
pelculas sobre el agua.
Los pili aparecen en bacterias que llevan a cabo la conjugacin. Adems, actan como
factor de adherencia a distintos tejidos y sirven como receptores de determinados fagos.

Ambos se originan en la membrana plasmtica y atraviesan la pared celular.

Estructuralmente estn formados por la asociacin de la misma protena, la pilina, de 17000 d.
En E.coli. La pilina est enrollada helicoidalmente. Esta estructura est determinada
genticamente.
FLAGELO BACTERIANO
Muchas bacterias son mviles gracias a una estructura denominada flagelo. Hay una
excepcin; las bacterias deslizantes se mueven por un movimiento de flexin, aunque tambin
utilizan flagelo.
Ventaja: La presencia del flagelo permite a la bacteria cambiar de hbitat y colonizar
nuevas reas con ms nutrientes.
Inconveniente: El movimiento requiere energa.
El flagelo bacteriano es un apndice largo, delgado y helicoidal (no es recto). Su
dimetro es de 14-20 nm. Es observable a microscopio electrnico, aunque a ptico podemos
verlos utilizando una tincin especfica; fuschina + cido tnico. Estructuralmente no tiene
nada que ver con el de los eucariotas (9+2).
DISPOSICIN FLAGELAR
Polar: Uno o varios flagelos aparecen en uno o dos polos de la bacteria. Distinguimos dos
tipos:
- Monotrica:
- Lofotrica:
Peritrica: Se distribuyen alrededor de la superficie celular.
ESTRUCTURA
GRAM Est formado por 3 partes:
- Cuerpo basal: Regin que ancla al flagelo en la superficie celular. Es distinto en gram +
y gram -. En gram est formado por un eje central y un sistema de 4 anillos: S, M, P y
L.

Los anillos S y M estn a nivel de la membrana plasmtica de la clula. El anillo

P se localiza a nivel de la capa de peptidoglicano, y el L a nivel de la membrana
externa. A ambos lados de los anillos S y M aparecen dos protenas de transmembrana
llamadas protenas mot, responsables de la movilidad del flagelo, que es por rotacin.
Proporcionan la rotacin al flagelo.
Bajo lo anillo S y M hay otra protena llamada protena fli, cuya funcin es
cambiar el sentido de la rotacin.
- Gancho: Es una estructura ancha y ligeramente curvada que conecta el cuerpo basal con
el filamento del flagelo.
- Filamento: Es muy largo, y est formado por la asociacin de una protena llamada
flagelina, que se asocia helicoidalmente. Su estructura es muy similar en todas las
bacterias (40.000 d. en E. Coli)
GRAM +

Aparecen las 3 partes diferenciadas. El cuerpo basal es ms simple. Est formado por 2
anillos, el S y el M, a nivel de la membrana plasmtica. A continuacin est el gancho y el
filamento, igual que en gram -.

CRECIMIENTO Y MOVIMIENTO DEL FLAGELO

La flagelina se sintetiza en el citoplasma. Penetra a travs del eje central del flagelo y se
deposita en el extremo ms distal del filamento.
La energa para el movimiento flagelar la obtiene del gradiente de H + que hay en la
membrana plasmtica, que son translocados al interior celular por las protenas mot.
Se ha calculado que cada rotacin flagelar implica el gasto de 1000 H +. El movimiento
del flagelo proporciona velocidades de 0.00017 km/h. Esta velocidad es la ms elevada de
todos los seres vivos, ya que supone 60 longitudes celulares por segundo. El guepardo se
mueve a 110 km/h; 25 longitudes/segundo.
TAXIAS O TACTISMOS
Las bacterias que poseen flagelos son capaces de moverse y responder a distintos
gradientes o estmulos. Estos movimientos de respuesta a estmulos se llaman taxias o
tactismos. Hay 2 tipos:
- Quimiotactismos: Son movimientos del flagelo en respuesta a estmulos qumicos. Hay
compuestos atrayentes para bacterias (glucosa, galactosa...nutrientes) y repelentes
(antibiticos).
- Fototactismos: Requieren la intervencin de otras protenas y receptores de la clula.
Son movimientos de respuesta a estmulos luminosos. Se dan en bacterias fotosintticas
mviles. Se ponen de manifiesto en el siguiente experimento: En un porta se ponen
estas bacterias y se incide con un rayo de luz. Las bacterias se mueven hasta que
encuentran el rayo, y all se detienen. Si descomponemos la luz, se disponen al nivel
donde tienen un nivel mximo de absorcin.