M.R.S.

Agar
DM613. Para el aislamiento, cultivo y enumeracin de
Lactobacilos y otras bacterias cido lcticas de
alimentos y otros materiales.

Contenido: Ver etiqueta del envase.

Composicin*
Mezcla de peptona
Extracto de levadura
Glucosa
Tween 80
Fosfato dipotasio de hidrgeno
Citrato triamonio
Acetato de sodio anhidro
Sulfato de magnesio 7H2O
Sulfato de magnesio anhidro
Agar
pH final: 6.2 0.2

Concentracin
del medio:
18.0g/litro
4.0g/litro
20.0g/litro
1.0ml/litro
2.0g/litro
2.0g/litro
3.0g/litro
0.2g/litro
0.034g/litro
12.0g/litro

Conservacin y caducidad

Todos los contenedores deben ser mantenidos cerrados

hermticamente y almacenados en un lugar seco a 25C
o menos hasta la fecha de caducidad mostrada en la
etiqueta del envase. Algunos medios requieren
almacenamiento a 2-8C, referirse a la etiqueta del
envase.

Precauciones

Exclusivamente para uso diagnstico in vitro. Respetar

las precauciones de seguridad y utilizar tcnicas
aspticas. Debe ser utilizado solo por personal de
laboratorio cualificado y con experiencia. Antes del
desecho, esterilizar todo el material biolgico. Consultar
la fecha de seguridad del producto (disponible si se
requiere o a travs de la pagina en Internet de MAST).

Materiales requeridos pero no proporcionados

Accesorios y productos para anlisis microbiolgico de

base, por ejemplo: anillos para anlisis, suplementos
selectivos MAST, esponjas, hisopos, incineradores y
termostatos, etc... Otros, como reactivos bioqumicos y
serolgicos, y aditivos como sangre.

Procedimiento

1. Referirse a la etiqueta del envase para cantidades y

volmenes requeridos. Preparar MAST M.R.S. Agar
(DM613) suspendiendo los polvos en agua destilada
o desionizada. Para los envases de sobre, disolver el
contenido entero del sobre en el volumen mostrado
en la etiqueta.
2. Autoclave a 121C (15 p.s.i.) durante 15 minutos.
3. Enfriar a 50-55C y mantener a esta temperatura.
Ajustar el pH si se requiere medio acidificado.
-1
4. Preparar un homogenato 10 usando un stomacher o
un mezclador y diluciones seriales posteriores de la
muestra alimenticia.
-1
5. Colocar 1ml de un homogenato a 10 y cada dilucin
en placas petri separadas. Aadir 15ml de M.R.S.

agar fundido y enfriado a 45C a cada placa. Mezclar

uniformemente y dejar solidificar.
6. Incubar bajo condiciones anaerobias o
microaerbicas 5% de dixido de carbn, 5-10% de
oxgeno) durante 2-5 das a 30C. Una temperatura
mas baja de 22-25C puede ser usada para
recuentos de psicotrofos o 42C para termfilos. Si
las instalaciones son solamente para cultivo aerbico,
aadir una capa de aproximadamente 5ml de M.R.S.
agar a cada placa despus de que haya solidificado
para producir una placa con capas.
7. No dejar que la superficie de las placas se seque ya
que esto inhibir los lactobacilos debido a un
incremento en la concentracin de acetato de la
superficie del agar.

Interpretacin de resultados

Despus de la incubacin, contar el nmero de colonias

de cada tipo de colonia en las placas que contengan
entre 15 y 150 colonias, y computar el numero de
lactobacilos / bacterias cido lcticas por gramo de
comida.

Control de calidad

Comprobar si hay signos de deterioro. El control de

calidad debe ser llevado a acabo con al menos un
organismo que demuestre la actuacin esperada. No
usar si el resultado del control del microorganismo es
incorrecto. La lista de abajo ilustra una variedad de
actuaciones de las cepas de control de uso rutinario, que
el usuario final puede obtener facilmente.
Microorganismos
Lactobacillus acidophilus
ATCC 314
Staphylococcus aureus
ATCC 25923

Resultado
Crecimiento
Ningn
crecimiento

Limitaciones de uso

Nota: - MAST M.R.S. Agar recuperar las bacterias

cido lcticas y permitir el crecimiento de levaduras. La
diferenciacin entre bacterias cido lcticas y
lactobacilos puede ser conseguida mediante el examen
de pelculas de diferentes formas de colonias usando el
microscopio ptico.

Referencias

Bibliografa disponible si se requiere.

IFU402 MM 09/08 V2
MAST es una marca registrada
ATCC es una marca registrada de la American
Type Culture Collection, Manassas, Virginia, USA
*La composicin puede variar para seguir los criterios de actuacin