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FACULTAD DE BIOANALISIS
REGION XALAPA
PRACTICA 1
“DETERMINACIÓN DE AMILASA SERICA Y URINARIA”
FUNDAMENTO :
El almidón reacciona con el yodo y forma un compuesto de color azul que se
mide colorimetricamente. La digestión del almidón por la amilasa disminuye la
intensidad del color azul:
MATERIAL:
3 Tubos de ensaye de 13 x100
Foto colorímetro corning filtro verde
Material de vidriería y venopuncion.
REACTIVOS:
Solución Amortiguadora de almidón.
Solución de yodo 0.01 n
1 ml de suero.
ALGORITMO:
CALCULOS:
Absorbancia.
Tubo 1 .35
Tubo 2 .2
PRACTICA 2
“GLICEMIA”
GENERALIDADES:
MATERIAL:
MATERIAL DE VENOPNCION
SUERO 1 ML
CENTRÍFUGA
FOTOCOLORIMETRO FILTRO VERDE
3 TUBOS DE ENSAYE DE 13X100
ALGORITMO:
reactivo 20 ml 20 ml
ABSORBANCIA
BLANCO 0
ESTANDAR 0.09
CALCULOS
A-blanco-A-probema/A-blanco
Glucosa=.07/.09x100=77.7
PRACTICA 3
“DETERMINACIÓN DE FRUCTOSA EN ORINA”
GENERALIDADES:
La fructosa se convierte en hidroxi-metil-furfural, este compuesto se
condensa con el resorcinol de Selivanoff y da como resultado un precipitado
de color rojo ladrillo. El precipitado deberá formar una solución roja en
etanol.
La fructosa puede aparecer en la orina de la diabetes mellitus, la fructosina
encuentra en el hígado y forma la fructosa 1-fosfato, también se ha
demostrado su presencia en el riñón y en el intestino
La inhibición del metabolismo de la fructosa, se llama intolerancia, uno de esos
errores es la deficiencia de fructoquinasa que produce la fructosemia esencial,
este defecto es raro, pero es posible que sea mas frecuente debido que no
tiene consecuencias graves por lo que pasa inadvertido.
MATERIAL Y EQUIPO:
1 Gradilla metálica
3 Tubos de ensaye de 15x150
Pipetas graduadas
Cazo, Mechero, Tripie, Tela de asbesto
1 Vaso p.p de250 ml
Muestra de orina de 24 horas.
REACTIVOS:
Reactivo de Selivanoff
ALGORITMO:
Extraer 5 ml de Centrifugar 5 minutos
sangre a 2500 rpm.
UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE BIOANALISIS
REGION XALAPA
PRACTICA 4
“ DETERMINACIÓN DE BETA LIPOPROTEINAS”
REACTIVOS:
Solución de cloruro de calcio.
Solución de heparina al 1% en cloruro de cloro al 0.9%
METODO:
Algotritmo:
Tubo: 1 2 3
Sol. Cacl2 5 ml 5 ml 5 ml
RESULTADOS:
ABSORBANCIA
TUBO 1 0.02
TUBO2 0.18
E= 104(.18- 0.02 )
=104( 0.16 )
=16.64 UP/P
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FACULTAD DE BIOANALISIS
REGION XALAPA
PRACTICA 5
“TRIGLICÉRIDOS”
FUNDAMENTO:
Los triglicéridos presentes en la muestra originan, según las
reacciones acopladas al descrito a continuación.
Triglicéridos + H2O lipasa Glicerol +Ácidos grasos
MATERIAL:
Baño de agua 37°C
Espectrofotómetro.
Suero o plasma
Anticoagulantes con heparina, EDTA
ALGORITMO:
Absorbancia
Abs. mv 0.61
Abs. po 0.57
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FACULTAD DE BIOANALISIS
REGION XALAPA
PRACTICA 6
“ LÍPIDOS TOTALES”
FUNDAMENTO:
ALGORITMO:
Solución 1 - 0.05 ml -
Prueba - - 0.05 ml
PRACTICA 7
“CUERPOS CETONICOS”
FUNDAMENTO:
cetónico, que se produce en el metabolismo oxidativa, y que está presente en la orina normal del
Existen diversas situaciones en las que la acetona aparece en cantidades mayores en la orina,
cetoacidosis diabética, por indicar las más frecuentes. Todas estas situaciones tienen en común
inadecuada utilización de los hidratos de carbono. En vez de éstos, se comienzan a utilizar como
fuente metabólica los ácidos grasos, cuyos productos finales, las cetonas, se van acumulando y,
MATERIAL:
Placa excavada
Espátula
Orina
Reactivo rothera
Agitador
ALGORITMO:
PRACTICA 8
“COLESTEROL”
Colesterol, alcohol complejo que forma parte de todas las grasas y aceites animales.
suprarrenal.
entre 200 y 249 mg/dl; en las hipercolesterolemias moderadas se sitúan entre 250
los 299 mg/dl. Sin embargo, hay que considerar que, aunque el colesterol es el
MATERIAL:
Solución patrón 1 y 2
Agua destilada
Reactivo colesterol 1
Pipetas
Ácido sulfúrico
Vaso pp.
Baño maria
Foto colorímetro corning
ALGORITMO:
RESULTADOS:
COLESTEROL
Epr/Ep x 300= mg/100 ml 0.04/0.2x300=60 mg/100 ml
Absorbancia:
Parton: 0.2
Problema:0.04
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FACULTAD DE BIOANÁLISIS
REGION XALAPA
PRACTICA 9
“TGP”
FUNDAMENTO:
es una enzima casi exclusivamente hepática, mientras que la AST está presente en
cantidad de estas enzimas aumenta, en mayor o menor grado. Esto ocurre por
MATERIAL:
Sustrato TGP
BM a 37°C
Suero
Agua destilada
Reactivo 2,4 DNFH
Diluyente para enzimas
ALGORITMO:
1.- Extraer 5 ml sangre y centrifugar a 2500 r.p.m
250
RESULTADOS:
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PRACTICA 10
“TGO”
FUNDAMENTO:
es una enzima casi exclusivamente hepática, mientras que la AST está presente en
cantidad de estas enzimas aumenta, en mayor o menor grado. Esto ocurre por
ALGORITMO:
1.- Extraer 5 ml sangre y centrifugar a 2500 r.p.m
250
B D
Sustrato TGO 0.5 ml 0.5 ml
Colocar en baño maria a 37 °C y agregar
Suero 0.01 ml
Agua destilada 0.01 ml
Mezclar por agitación suavemente e incubar 30 minutos y agregar
Reactivo 2,4 DNFH
Mezclar e incubar 10 minutos A 37 °C Y agregar
Diluyente para enzimas 5 ml 5 ml
RESULTADOS:
PRACTICA 11
“UREA”
FUNDAMENTO:
la orina, procede de la descomposición de las células del cuerpo, pero, sobre todo, de
las proteínas de los alimentos. La urea está presente también en mohos de los
Friedrich Wöhler.
preparadas sintéticamente
Material:
Ureasa
Micropipeteas
Baño maria
Rreactivo 1 y 2
Solucion standard
ALGORITMO:
250
2.-Preparar una serie de tubos como sigue:
B S D
Standard - 20 -
Suero - - 20 ul
Ureasa 1 gota 1 gota 1 gota
Mezclar por agitación suave e incubar a 5 minutos a 37°C
Reactivo 1 1 ml 1 ml 1 ml
Reactivo 2 1 ml 1 ml 1 ml
Mezclar por agitación suave e incubar a 5 minutos a 37°C
AGUA 10 ml 10 ml 10 ml
DESTILADA
RESULTADOS:
Calculos:
Urea(g/l)=D x factor
Factor=0.60 g/l /s
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PRACTICA 12
“UREMIA”
FUNDAMENTO:
250
PRACTICA 13
“CREATININA”
FUNDAMENTO:
CREATININA
En los seres humanos la orina normal suele ser un líquido transparente o amarillento. Se
eliminan aproximadamente 1,4 litros de orina al día. La orina normal contiene un 96% de agua
y un 4% de sólidos en solución. Cerca de la mitad de los sólidos son urea, el principal producto
MATERIAL:
Standard
Orina
Agua
Reactivo 1 y 2
Suero
Fotocolorimetro
Centrífuga.
ALGORITMO:
1.- Extraer 5 ml sangre y centrifugar a 2500 r.p.m
250
B S D D
Desproteínizad - - 3 ml 3 ml
o
Standadrd. - 0.5 ml - - -
Orina - - - 0.5 ml
Agua 1 ml 0.5 ml - 0.5 ml
Reactivo 1 2 ml 2 ml 2ml 2 ml
Reactivo 2 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml
Mezclar por inversión y incubar 20 minutos y leer absorbancia
RESULTADOS:
CALCULOS:
Creatinina en suero mg/i=d xf
F=20 mg/L
F=20 mg/i/0.07=285x0.5=142ml/l
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FACULTAD DE BIOANÁLISIS
REGION XALAPA
PRACTICA 14
“BILIRRUBINA”
FUNDAMENTO:
La hemoglobina es una proteína contenida en los eritrocitos que constituye,
deben contenerla en cantidad suficiente y esto depende de los niveles de hierro que
MATERIAL:
Solucion fisiológica
Pipeta y reloj
Fotocolorimetro corning
Suero
Centrífuga.
Algoritmo:
250
BILIRRUBINA DIRECTA
TUBO P B
H2SO4 0.2 ml 0.2 ml
Nano2 I gota -
Solicion salina 2.0 ml 2.0 ml
Suero 0.2 ml 0.2 ml
Mezclar incubar 15 a 25 °c
Calculos:
Concentración de bilirrubina directa
=Ex13.7 mg/100 ml
=E x 235 mol/L
=0.14 mg/100 ml
Concentración de bilirrubina indirecta
=E x 14.0 mg/100 ml
=E x 240 mol/L
=0.14-0.157=0.017 mg/100 ml