DETERMINACIN DE HIDROCARBUROS

TOTALES EN AGUAS POR ESPECTROSCOPIA

INFRARROJA

I.-RESUMEN
Se evalu analticamente la metodologa para las determinaciones de hidrocarburos
totales en aguas por espectroscopia infrarroja. El objetivo fue confirmar la aplicacin
correcta del mtodo para el anlisis de aguas, pues constituye un factor clave para
la prestacin de servicios analticos. Se trabajaron diferentes tipos de muestras de
agua, se encontraron resultados satisfactorios en precisin y exactitud, siguindose
estrictamente los protocolos de verificacin.

II.- INTRODUCCION
La contaminacin del agua (ros, lagos y mares) es producida, principalmente, por el
vertimiento de aguas servidas, de basuras, de relaves mineros y de productos
qumicos, las aguas servidas, basuras y desmontes en las aguas, adems de
productos qumicos y desechos industriales. Las descargas municipales, industriales,
agrcolas y los vertimientos de residuos oleosos de la actividad martima y portuaria,
as como la actividad petrolera, son las principales fuentes de contaminacin y
deterioro de las aguas, ocasionando la presencia de txicos orgnicos, metales
pesados, slidos suspendidos, microorganismos patgenos y nutrientes a los
ambientes, los cuales afectan el bienestar de los ecosistemas y la calidad de vida de
los grupos humanos presentes en la regin .
La contaminacin de las aguas por hidrocarburos en los sistemas de
almacenamiento, en las fuentes de abastecimientos subterrneos y superficiales, as
como en otros cuerpos de agua es un hecho que ocurre con relativa frecuencia. Este
tipo de contaminacin produce un cambio en las caractersticas organolpticas del
agua que induce al rechazo de los consumidores, y su ingestin representa un
riesgo para la salud; asimismo, el ecosistema puede sufrir afectaciones debidas al
impacto negativo de estos contaminantes sobre sus diferentes componentes .
La determinacin de hidrocarburos en aguas es de gran importancia para las
entidades ambientales, debido a los deterioros que causan stos al ambiente. Entre
los mltiples factores que afectan el ambiente estn los derramamientos,
vertimientos de residuos industriales en ros, mares y otras fuentes . La presencia de
aceites y grasas en aguas residuales domsticas e industriales es de inters pblico
debido tanto a su efecto perjudicial en lo esttico, como al impacto negativo que
provoca en la vida acutica. Parmetros reglamentarios y normativos se han
establecido para su monitoreo en agua y en efluentes, los cuales requieren una
adecuada metodologa para el aseguramiento de la calidad analtica de los
resultados.
El mtodo espectroscpico infrarrojo escogido, se basa en la extraccin de los
compuestos orgnicos no polares (principalmente hidrocarburos de origen del
petrleo), por su afinidad al tetracloroetileno. Sin embargo, pueden ser extrados
otros compuestos como grasas y/o aceites animal o vegetal y de comportamiento
No polar como los pigmentos, dado que no existe un disolvente que sea selectivo.
Los hidrocarburos disueltos en el tetracloroetileno se determinan cuantitativamente
en una curva de calibracin, por comparacin de la absorbancia leda a un nmero
de onda de 2925 cm-1, situada en la regin media infrarroja del espectro
electromagntico y que corresponde a la vibracin de valencia CH .
Ningn solvente disolver de forma selectiva slo Hidrocarburos. En la eliminacin
del disolvente pueden ocurrir prdidas de los hidrocarburos de cadena corta e

hidrocarburos aromticos sencillos por volatilizacin. En este proceso pueden

perderse cantidades significativas de destilado del petrleo desde la gasolina hasta
el aceite combustible. Adems, los residuos ms pesados del petrleo pueden
contener una porcin significativa de los materiales que no son extrables con el
disolvente (coextraccin) aunque los hidrocarburos ms polares, tales como los
compuestos aromticos complejos y los derivados hidrocarbonados de cloro, azufre
y nitrgeno, pueden ser adsorbidos por el gel de slice .
En el presente trabajo se llev a cabo la evaluacin analtica de la precisin y
exactitud del mtodo espectroscpico en zona infrarroja, para la determinacin de
hidrocarburos totales en aguas.

III.- PARTE EXPERIMENTAL

3.1.-Materiales y mtodos
Los Hidrocarburos de Petrleo son una mezcla de productos qumicos compuestos
principalmente de hidrgeno y carbono, llamados hidrocarburos que suponen entre
el 50% y el 98% de la composicin, su origen es el petrleo crudo. Debido a que
hay muchos productos qumicos diferentes en el petrleo crudo y en otros
productos derivados del petrleo, no es prctico medir cada uno en forma
separada. Sin embargo, es til medir la cantidad total de hidrocarburos en un sitio,
es por ello la importancia del desarrollo de mtodos que permitan determinar estos
productos [8].
El mtodo original plantea lecturas en celdas de 1 cm para trabajar en un intervalo
de 4 a 40 mg aproximadamente. Utilizamos celdas de 4 cm lo que implica trabajar
en un rango ms bajo, si las muestras sobrepasan este rango, se realizan dos
diluciones. El empleo de celdas de paso ptico diferente, no implica cambios en las
condiciones de trabajo del espectrofotmetro ni tampoco representa cambios
significativos en el mtodo original.
3.2.-Equipos e Insumos
Botellas de boca ancha y de color mbar preferiblemente, con tapa recubierta
interiormente con tefln o papel aluminio, Embudos de separacin con llave de
tefln, Probetas graduadas, Embudos de vidrio, Lana de vidrio, Papel filtro 392,
Whatman 40 o equivalente, de 11 cm de dimetro, Matraces volumtricos, Agitador
magntico
con
barras
magnticas,
Erlenmeyer
con
tapa
esmerilada,
Espectrofotmetro Infrarrojo modelo FTIR 330 Thermo Nicolet, Celdas de cuarzo de
40 mm de paso ptico, Balanza analtica con precisin de 0.1 mg.
3.3.-Reactivos

Para la preparacin de reactivos, patrones y muestras, se emplear agua

desionizada. Todos los reactivos son de grado analtico, excepto se indique alguna
especificacin. Mezcla comercial certificada de Hidrocarburos Patrones (nHexadecano, Isoctano y Clorobenceno), n-Hexadecano, Isoctano, Clorobenceno,
Tetracloroetileno (Solvent IR), Acido clorhdrico (HCl) 1:1, Sulfato de sodio anhidro
(Na2SO4), Mezcla patrn de referencia: utilizar la mezcla de referencia comercial de
n-Hexadecano (37.5 % v/v), Isoctano (37.5 % v/v) y Clorobenceno (25.0 % v/v).
De forma alternativa prepararla a partir de los compuestos individuales.
Por ejemplo, para 40 mL, mezclar 15 mL de Hexadecano e Isoctano y 10 mL de
Clorobenceno. Guardar hermticamente en refrigeracin durante un ao como
mximo, Mezcla patrn de trabajo: pipetear 0.5 mL de la mezcla de referencia a un
volumtrico de 100 mL previamente tarado y pesar hasta la dcima de mg. Disolver
y enrasar con tetracloroetileno. Calcular la concentracin real en mg/L, Muestra
control: en un vial, pipetear 0.1 mL de la mezcla de referencia y pesar hasta la
dcima de mg. Disolverlo con Tetracloroetileno y trasvasarlo cuantitativamente al
embudo de separacin que contiene 500 mL de agua. Mezclar bien y analizar como
una muestra.
3.4.-Coleccin, preservacin y almacenaje de muestras
Slo deben recolectarse muestras puntuales. La muestra deber recogerse
directamente en la botella de boca ancha. El volumen a colectar depende del tipo de
agua y la concentracin de HCT presentes; ste vara desde 500 mL para aguas
residuales industriales y/o domsticas hasta 2 litros para aguas potables y/o
superficiales dulces o salinas. Las muestras deben preservarse a pH 2 por adicin
de 2 a 5 mL aproximadamente de HCl 1:1. Debe verificarse el pH de las muestras a
su arribo al laboratorio y corregirlo si es necesario con adicin de cido. Al recolectar
la muestra se debe tener en cuenta. No purgar las botellas de muestreo con la
muestra antes de la toma, ya que los Hidrocarburos como tambin otras grasas
presentes se adhieren a las paredes de las botellas generando resultados ms altos
de los esperados. Dejar un espacio prudente entre el lquido y la boca de la botella
para facilitar la agitacin y el manejo durante el anlisis y almacenamiento en
nevera. Analizar las muestras a la mayor brevedad posible. En caso de almacenaje,
preserve y refrigere las muestras a temperatura 6C por un perodo de tiempo no
mayor a 28 das.

Procedimiento
Las condiciones ambientales no son crticas para la realizacin de este ensayo. La
humedad es crtica para el funcionamiento del equipo IR por lo que este debe
permanecer en un local con climatizacin y deshumidificacin.
Extraccion con Solventes Orgnicos:
Mrquese el nivel de la muestra en la botella para determinar el volumen de
la misma. Si el volumen de muestra es mayor de 1.5 litros, extraiga
directamente en la botella; si no, la muestra es transferida a un embudo de
separacin lavando la botella con 15 mL de Tetracloroetileno para recuperar
cualquier prdida de hidrocarburos que pueda quedar en ella.

 Adicione el lavado al embudo de separacin y agite vigorosamente durante 2

minutos. Si se sospecha de la formacin de emulsiones estables, agtese con
suavidad de 5 a 10 minutos.
Deje separar las capas y drene la capa de disolvente a un erlenmeyer.
Realice dos extracciones ms, cada una con 15 mL de Tetracloroetileno, pero
adicionndolos primero a la botella de muestra antes de agregarlos al
embudo de separacin para recoger los hidrocarburos adheridos.
Combine todos los extractos en el erlenmeyer.
Aada 3 g de slica gel y sulfato de sodio anhidro, agregue un agitador
magntico, tape y agite 5 minutos.
Deje decantar.
El erlenmeyer debe permanecer tapado durante el proceso de extraccin. A travs
de un embudo con papel de filtro, trasvase el extracto lquido a un matraz
volumtrico de 50 mL y enrase con Tetracloroetileno.
Preparacin de la curva de calibracin:
A partir de la mezcla patrn de trabajo, prepare 5 6 patrones en el intervalo de 10
a 200 mg/L. En todo caso, considere la concentracin real de la mezcla patrn.
Prepare simultneamente al menos siete blancos. El tiempo de validez, siempre que
cumpla el criterio de verificacin, ser de un ao. Lea las absorbancias de los
patrones y las muestras en el intervalo de 3200 a 2700 cm -1 y al pico mximo de
2925 cm-1. Mientras est vigente la curva, conserve los patrones en viales con tapa
de tefln y protegidos de la luz.
Lectura de espectros:
Verificacin del equipo:
Cercirese que el equipo FT-IR est encendido.
Liberar las ventanas del espectrofotmetro quitndole los protectores de

ventanas de color rojo.

Abrir la vlvula del gas Nitrgeno (N2) a una presin constante entre 5 - 10

psi, tenga en cuenta que no es necesario pasar un flujo de N2 alto, ya que

esto llevara a prdidas o gastos excesivos y sin ninguna justificacin.
Abrir la aplicacin EZ-OMNIC.
Antes de iniciar cualquier operacin o anlisis, debe alinear el
espectrofotmetro FT-IR.
En el cuadro de dilogo que se despliega seleccionar el experimento
predeterminado (que para el caso sera Hidrocarburos Totales en agua x IR).
En la ventana del OMNIC, despliegue la opcin Recoger en la barra de men y
posteriormente la opcin Seleccionar Experimento"; se abrir un cuadro de
dilogo.
Escoger en el cuadro de dilogo la opcin Diagnstico y posteriormente
seleccione Alinear.
Esperar a que se cumplan los pasos necesarios para cumplir con la alineacin
del espectrofotmetro. Al final de este paso, la seal deber estar dentro del
intervalo esperado de -5.6 a 9.8 V en la bancada o Bench. Si es as, contine
con el procedimiento; en caso contrario, deber volver a alinear el FT-IR hasta

lograr alcanzar el valor aceptable. Registre el pantallazo de los resultados y

gurdelo en la hoja de Excel del da de trabajo.
Cerrar el EZ-OMNIC.
Abrir el Bench (Bancada) desde el acceso directo en el escritorio.
Seleccionar Performance Test (prueba de nivel de ruido) y siga las
instrucciones del cuadro de dilogo, guarde los datos de la forma indicada en
el numeral 9.
Regresar al cuadro de dilogo del Bench y seleccione Lser para registrar de
la forma descrita, las Ganancias X, Y y R y adems, Lser X, Y, y R, Mcoil X e
Y.
Si todos los valores son aceptables o satisfactorios, segn el historial del
equipo, cierre el Bench y contine con la validacin o Valpro.
Validacin del equipo:

Esta debe realizarse previo al anlisis de un lote de muestras. Los resultados se

guardan automticamente en el archivo del equipo:
Para iniciar el Valpro, abra nuevamente el EZ-OMNIC y cargue el experimento a

seguir.
Seleccionar en la barra de men la opcin Analyze, escoja Valpro (Validacin

del equipo) y siga las instrucciones del cuadro de dilogo o lea el manual de
Validacin o el tutorial.
Si el equipo pasa todas las pruebas de alineacin, chequeos y Valpro, realice
los anlisis de HCT.
Cerrar la vlvula del gas Nitrgeno.
En todo el procedimiento previamente descrito, el color verde que acompaa los
valores de aceptacin es indicativo de que estn dentro del intervalo esperado. Otro
color ser indicativo de que hay un problema y la aplicacin mostrar un mensaje
de error; si esto sucede, reprtelo.
Verificacin de la Curva de Calibracin:
Inicialmente, verifique la calidad del Tetracloroetileno mediante un fondo

obtenido de la extraccin de un blanco de agua desionizada que servir como

blanco de compensacin. Utilcelo para analizar patrones y muestras.
Verifique la validez de la curva existente mediante el anlisis de un patrn de
concentracin conocida, preferiblemente, cercano al punto medio de la curva.
Si el resultado es coincidente 10%, se considera que la curva es vlida y se
procede a preparar y leer las muestras. En caso negativo, repetir el patrn. Si
el problema persiste, construir una nueva curva de calibracin.

Determinacin de HCT en las muestras:

Trasfiera cuidadosamente el extracto obtenido a la celda de cuarzo

previamente limpia y seca, dejando un espacio libre de llenado para

evitar derrames, cubra la celda con la tapa de tefln.
Realice un Background o blanco del disolvente previo a las lecturas.
-1
Lea las muestras en el intervalo de trabajo de 3200 a 2700 cm ,
registrando la absorbancia a 2925 cm-1 que corresponde al mximo de la
banda (CH-) de hidrocarburos.
Si la concentracin de la muestra resulta > 200 mg/L, analizar dos
diluciones diferentes y aceptar los resultados si el coeficiente de variacin
es 10%.
Para muestras cuyo contenido se sospeche que sobrepasa el valor mximo de la
curva de calibracin, puede emplearse como alternativa, una curva de calibracin
que abarque un intervalo de concentraciones ms altas, a fin de evitar diluciones. La
construccin de dicha curva, se har como se indica en esta instruccin.
La ecuacin (1) es la formula general para calcular los Hidrocarburos Totales:
a x 0.05 x Fd
HCT = ---------------------V

(1)

Donde: HCT= mg/L de Hidrocarburos Totales en la muestra; a= lectura en mg/L de

HCT en el extracto determinado a partir de la curva de calibracin, V= volumen en L
de muestra extrada y Fd= factor de dilucin (en caso necesario). El resultado se
obtendr de la frmula general, despus de haber obtenido la lectura de la muestra
a partir de la curva de calibracin y se expresar con dos cifras decimales. Se deben
consultar los datos de la curva vigente para informar aquellos resultados que
resulten menores al lmite de deteccin. Con cada lote de muestras, analizar una
muestra control.
RESULTADOS Y DISCUSIN
De acuerdo con los protocolos de verificacin se evaluaron los siguientes
parmetros: lmite de deteccin, precisin y exactitud [10]; [11]. A continuacin se
exponen e interpretan los resultados obtenidos en los ensayos de verificacin del
mtodo, este fue acreditado en 2009 por el Instituto de Hidrologa, Meteorologa y
Estudios Ambientales IDEAM, con base a resultados experimentales, a continuacin
se exponen los resultados obtenidos en el perodo 2010-2012. Siguiendo el
procedimiento de anlisis referenciado y con el equipamiento disponible en el
laboratorio. Los resultados descritos se obtuvieron con muestras de aguas
residuales, as como muestras certificadas comerciales y las empleadas en las
pruebas de desempeo del IDEAM.

Otra variable obtenida y vlida para determinar la exactitud es la recuperacin de

del analito aadido con valores conocidos de concentracin [10]; [11], los resultados
obtenidos para tal fin y con la variable del diferente tipo de aceite o grasa utilizada,
para 35 ensayos con concentraciones aadidas entre 3.4 y 106 mg/L, la
recuperacin estuvo entre 85 y 113% con un valor promedio de 99%. Porcentajes de
recuperacin promedio fueron altos debido a la viscosidad de estos, lo cual permite
retener con ms facilidad mayor cantidad de grasas y aceites e hidrocarburos.
Exactitud
Pruebas de evaluacin de desempeo con resultados satisfactorios. En la Tabla 1 se hace e ilustra el anlisis de
muestras certificadas (QCI).
Tabla 1. Datos de exactitud

mg/L HCT

Zscore
promedio
(intervalo)
-0.11 (84
7
0.39/0.05)
0.33 (68
11
0.41/0.67)
0.28 (38
11
0.48/1.00)
Fuente: elaboracin propia

Precisin
En la Tabla 2, se muestra como fue evaluada la precisin en forma de reproducibilidad interna [12]; [13], con
muestras certificadas (IDEAM y QCI) analizadas, muestras certificadas analizadas por el mismo analista entre 7 y 11
veces, incluidas fechas diferentes.

Concentracin mnima a reportar

Dado que; la legislacin para agua potable no establece un lmite mximo permisible
para hidrocarburos totales y el lmite de deteccin con hexano limpio es de 1.1 y el
de cuantificacin de 3.4 mg/L, La concentracin mnima a reportar, se establece en
3.4 mg/L.

IV.-CONCLUSIONES
De forma detallada, las conclusiones que se extraen del presente estudio, se
pueden puntualizar de la siguiente manera. El mtodo estandarizado se
fundamenta en aprovechar las potencialidades de la espectroscopia infrarroja y
la extraccin liquido-liquido. Esta combinacin proporciona una tcnica fiable y
rpida.
El procedimiento propuesto presenta adecuadas caractersticas de desempeo,
por lo que puede definirse como un mtodo preciso (coeficientes de variacin
<10%), veraz (no presenta sesgo significativo), con un adecuado intervalo de
concentracin y un lmite de deteccin relativamente bajo (3.4 mg/L).
Estas caractersticas permiten que el mismo se ajuste al propsito para el cual
fue diseado, que consiste en la determinacin de hidrocarburos totales en
muestras de aguas de diferente procedencia. De acuerdo con los resultados
obtenidos el mtodo se ajusta al uso propuesto y es adecuado para ser aplicado
en las condiciones particulares del laboratorio de calidad de aguas, de la
empresa aguas de Cartagena SA ESP, adems se vuelve un mtodo de
referencia para otros laboratorios que deseen aplicarlo, ya que pueden reportar
resultados correctos y confiables, adems de ser una gua a nivel internacional.