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Objetivos
Evaluar y caracterizar la viabilidad y el enraizamiento de estacas de hoja de Passiflora
mollisima var. tripartita.
Evaluar y caracterizar la viabilidad y el enraizamiento de estacas leosas de Feijoa
(Acca sellowiana).
Evaluar y caracterizar la viabilidad y el enraizamiento de estacas herbceas de romero
(Rosmarinus officinalis) y mejorana (Origanum mejorana)
Evaluar y caracterizar la viabilidad y el enraizamiento de acodos areos en Acca
sellowiana
Evaluar y caracterizar la viabilidad de injertos por yema en T y por parche en Rosa
Introduccin
La propagacin asexual es un mtodo de propagacin vegetal que implica la divisin celular
autntica con el fin de generar dos clulas hijas genticamente idnticas (Caso, 1192). En
este proceso hay una duplicacin del sistema cromosmico y del citoplasma de la clula
madre y por sta razn, las plantas propagadas vegetativamente tienen las mismas
caractersticas especficas de su planta madre. En muchas especies, la reproduccin
vegetativa tiene la ventaja de ser ms fcil, rpida y econmica que la reproduccin sexual
debido a que muchas especies presentan condiciones complejas de latencia que no
permiten que la semilla se desarrolle fcilmente. Los cultivares de frutales y plantas
ornamentales que provienen de mutaciones de yemas o partes somticas de una planta
que han sido producto del mejoramiento se denominan clones. El clon es un material
genticamente uniforme que proviene de un solo individuo y su propagacin solo se puede
realizar por medios vegetativos como estacas, acodos o injertos.
Sin embargo, en la naturaleza existen muchas especies de plantas que se propagan por va
asexual sin la intervencin del hombre, por sta razn se dice que la propagacin via
asexual en las plantas existe de dos formas: la propagacin asexual natural y la
propagacin asexual artificial. Los mtodos de propagacin asexual artificial ms conocidos
son: el acodado, la tcnica de propagacin por estacas, la injertacin y la microinjertacin
(Rojas et al., 2004). El acodado es un mtodo de propagacin en el cual se provoca la
formacin de races adventicias a un tallo que todava se encuentra unido a la planta madre,
posterior a sta formacin inducida de races, el tallo se separa y se convierte en una planta
madre (Villalobos y Fernndez, 2004). La razn por la que este mtodo es tan exitoso
consiste en que la rama acodada sigue unida al tallo y por ende, la planta madre sigue
proporcionando agua y nutrientes a la rama, de sta manera las probabilidades de fracaso
disminuyen.
Otra tcnica de propagacin muy conocida es la propagacin por estacas, en sta, una
parte del tallo, de la raz o de la hoja se separa completamente de la planta madre y se
pone a crecer bajo condiciones ambientales favorables con el objetivo de que la planta
produzca races adventicias y tallos y as de sta manera se produzca una nueva planta
independiente que tenga caractersticas morfolgicas, fisiolgicas y productivas similares a
las de la planta madre (Arce-Portuguez, 2004). Sin embargo, la probabilidad de xito de
sta tcnica es mucho menor en comparacin con el acodado. Otra tcnica muy til en la
agricultura es la injertacin; el injerto consiste en unir dos plantas por el sistema vascular
para que estas en conjunto formen una sola planta nueva y tiene como ventaja que
disminuye la juvenilidad de las plantas y permite que la planta resultante presenta tanto las
caractersticas favorables del portainjerto como de la variedad injertada (Hartmann, 1985).
Finalmente, la tcnica ms reciente de propagacin asexual es la tcnica de
microinjertacin in vitro. sta tcnica es ampliamente utilizada en trabajos de revigorizacin
de materiales envejecidos y tiene como objetivo producir material libre de virus y
enfermedades (Bagot, 2005).
El objetivo de este informe es evaluar y analizar los resultados de diferentes ensayos de las
tres tcnicas de propagacin asexual (Estacas, Acodos, Injertos) ms conocidas y utilizadas
en la produccin agrcola.
Materiales y mtodos
Propagacin por esquejes y estacas herbceas
Este ensayo de propagacin se realiz con plantas de romero (Rosmarinus officinalis) y
mejorana (Origanum mejorana), Para este experimento se utilizaron 20 esquejes por cada
especie y estas se dividieron en cuatro tratamientos diferentes de un diseo factorial 2X2 (si
se tiene en cuenta la especie como un factor, sera un diseo factorial anidado en dos
etapas) : (T1: Esqueje apical sin auxinas, T2: Esqueje apical+ ANA 0.4%, T3: Esqueje basal
sin auxinas, T4: Esqueje basal + ANA 0.4%), los esquejes se cortaron para que todos
tuvieran 7 cms de longitud y posterior a esto se trasplantaron a 2 cm de profundidad en
bandejas de propagacin que tenan como sustrato fibra de coco. y se dispusieron en el
invernadero de propagacin (nave 2 de los invernaderos de la facultad de ciencias agrarias)
durante 8 semanas tratando de mantener alta humedad en los esquejes para evitar la
desecacin. Finalmente, se evalu el nmero de estacas muertas y vivas, el nmero de
races formadas, la longitud de las races formadas, el peso fresco del callo, el peso fresco
de las races, el nmero de brotes formados y el peso fresco y la longitud de brotes
formados y con estas variables se realiz el respectivo anlisis estaistico.
Propagacin por estacas leosas
Se tomaron 8 estacas leosas de un rbol de feijoa (Acca sellowiana berg.) proveniente del
huerto agroecolgico que se encuentra a la entrada de los invernaderos de la Facultad de
Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional. Se tomaron 4 estacas basales y 4 estacas
apicales de feijoa, se les aplic ANA al 0.4% en la parte basal del corte y las estacas se
sembraron a 3 cm de profundidad en bolsas plsticas con una mezcla de sustrato de fibra
de coco y turba Klassmann, posteriormente se dispusieron en el invernadero de
propagacin de la facultad de Ciencias Agrarias. Antes de la aplicacin de los tratamientos
Figura 2. Efecto del tipo de yema y la presencia o ausencia de reguladores de crecimiento en el peso de
la raz de estacas de Mejorana
Figura 5. Efecto del tipo de yema y la presencia o ausencia de reguladores de crecimiento en la longitud
de la raz de esquejes de Mejorana
Figura 7. Efecto del tipo de yema y la presencia o ausencia de reguladores de crecimiento en el nmero
de races adventicias de esquejes de Mejorana
Figura 9. Efecto del tipo de yema y la presencia o ausencia de reguladores de crecimiento en el peso de
la raz de esquejes de Mejorana
Figura 10. Estacas de plantas de Romero (Rosmarinus officinalis) tratadas con auxinas.
Figura 11. Estacas basales de plantas de Romero (Rosmarinus officinalis) sin tratamiento
con auxinas.
Los factores evaluados no mostraron un efecto significativo en longitud de la raz de las
plantas de romero (Fig 12). En este caso, ni la topfisis ni el tratamiento con reguladores de
crecimiento afect la longitud de las races. Esto pudo haber sucedido debido a que las
plntulas de romero a las que no se les realiz la aplicacin provocaron un mayor fenmeno
de elongacin en las clulas de la raz y por ende, el peso no se vio afectada por la longitud
de las races.
Figura 12. Efecto del tipo de yema y la presencia o ausencia de reguladores de crecimiento en la longitud
de la raz de esquejes de Romero.
Figura 13. Esquejes de plantas de Romero (Rosmarinus officinalis) tratados con auxinas.
Figura 14. Efecto del tipo de yema y la presencia o ausencia de reguladores de crecimiento en el nmero
de races adventicias de esquejes de Romero.
Figura 15. Esquejes de romero (Rosmarinus officinalis) sin tratamiento con auxinas.
Propagacin por estacas leosas
Tabla 1. Viabilidad y enraizamiento de estacas leosas de Acca sellowiana berg.
Estacas Leosas basales
1
0.91
0.69
0.13
0.15
Nmero de
races
Longitud
races (cm)
0.73
cm
0.14
Peso races 0
(gr)
0.08
0.13
nmero de
brotes
12
0.11
0.32
Longitud
brotes (cm)
0.03
0.03
1.53
Observaci
n
no
hubo
enraiz
amien
to
no
races
se sec
y se
perdi
viva
hojas
defoliadas muert
a
5
primordi
os
radicale
s
muert
a
En general, la viabilidad y el enraizamiento de las estacas de feijoa fue bastante pobre tanto
en yemas apicales de feijoa como en yemas basales y las variables evaluadas no
permitieron encontrar diferencias significativas entre los dos tratamientos al evaluarse un
MANOVA al 0.05%. Es posible evidenciar esto debido a que solo una yema de cada
tratamiento present enraizamiento. A pesar de esto, se podra decir que hubo diferencias
en el nmero de brotes de las yemas dado que el 75% de las yemas basales present
brotes (figura 16A) mientras que ninguna yema apical gnero brotes (Figura 16B). Debido a
que no se encontraron races en el 75% de las estacas basales, es posible asegurar que los
brotes se generaron por las reservas de energa del tallo y no por la toma de nutrientes de
las estacas por medio de las races (Tabla 1).
La baja viabilidad de las estacas apicales se pudo haber debido a muchas variables, debido
a que incluso con la aplicacin de auxinas exgenas a baja concentracin, las estacas
pudieron haber tenido problemas de deshidratacin pre y post siembra, ya que puede ser
que al momento de la siembra se dejaron muchas hojas y esto tuvo un efecto negativo en el
estado hdrico de la estaca, causando de igual manera que los fotoasimilados y las auxinas
endgenas no se translocaron a la base de los esquejes para producir races adventicias,
sino se quedaran en las hojas para evadir el estrs causado por las condiciones
ambientales. Segn Ramos (2008), es necesario realizar una inmersin de la estaca en
agua por 24 horas y aplicar un sellante para evitar la deshidratacin y aumentar la
probabilidad de enraizamiento. En la multiplicacin por estacas solo ser necesario que un
nuevo sistema de races adventicias se desarrolle, para que las yemas tengan el potencial
de desarrollar nuevos brotes (Hartmann et al., 2002).
Estacas de tallo y hojas
La propagacin asexual por medio de esquejes es muy utilizada en un gran nmero de
cultivos, debido a que es ms fcil y econmico que otros mtodos de propagacin asexual.
Sin embargo, en la mayora de las especies en la que se usa est poco estudiada. En
general se sabe que involucra una compleja asociacin de factores ambientales y
fisiolgicos tales como: nutricin, relacin carbono- nitrgeno y cambios anatmicos del
tallo (Asada y Shibata, 2000). Para este tipo de propagacin es necesario tener en cuenta
un balance hormonal ptimo, principalmente en el uso exgeno de auxinas como
promotores para la formacin de races laterales (Opik y Rolfe, 2005), debido a que la
concentracin y forma de aplicacin de sta hormona depende la viabilidad, la capacidad de
formacin de races, la calidad del sistema radicular formado y el posterior desarrollo de la
planta en el rea de produccin (Fachinello et al, 1994).
Estacas Tallo
con auxinas
10.2
11.7
10
12.4
# de races
Longitud de races
10.3
9.8
11.4
11.9
# de races
21
Peso de races
0.294
0.477
0.858
Longitud de races
2.6
5.2
4.02
Como se puede ver en la Tabla 2. las estacas de tallo con auxinas, fueron las nicas que
promovieron el crecimiento de races adventicias, en cambio, las estacas de tallo a las que
no se les realiz la aplicacin del regulador de crecimiento no presentaron diferenciacin del
callo, en general, se puede observar que las estacas de tallo a las que se les aplic auxinas
tienen una longitud similar a la que tenan las estacas sin aplicacin de auxinas (10.85 y
11.075 respectivamente), por ende no es posible asegurar que las diferencias en el
enraizamiento se debe a un mayor contenido de reservas en las estacas a las que se les
realiz la aplicacin de auxinas. En este caso, no se hizo la defoliacin de las estacas de
tallo en ninguno de los dos tratamientos, debido a que Santelices (2007) encontraron al
evaluar estacas de Nothofagus glauca que la presencia de hojas fue fundamental para
asegurar la supervivencia y el proceso de generacin de races. En Nothofagus glauca,
tambin se encontr que las estacas a las que se les realiz la aplicacin de IBA
presentaban mejor enraizamiento en comparacin con estacas sin IBA (Santelices y
Cabello, 2006)
Figura 17. Estacas obtenidas a partir de tallos de curuba (Passiflora tripartita) con aplicacin
de auxinas.
Figura 18. Estacas obtenidas a partir de tallos de curuba (Passiflora tripartita) sin aplicacin
de auxinas.
Tabla 3. Viabilidad y enraizamiento de hojas de Curuba
Con auxinas
Sin auxinas
133.92
121
168.84
162.15
# de races
Peso de races
0.291
Longitud de races
0.7
descompuesta
descompuesta
117.12
125.46
# de races
Peso de races
Longitud de races
Las estacas de hoja de curuba en los dos tratamientos evaluados (con auxinas, sin
auxinas) presentaron baja o nula capacidad de enraizamiento como se puede ver en la tabla
3. Sin embargo, es posible sugerir que la aplicacin de auxinas en estacas de hoja caus
efectos ms positivos debido a que este tratamiento gener el enraizamiento de una de las
estacas de hoja y disminuy el marchitamiento de las hojas de la estaca, ya que como se
puede observar en la figura 19 y 20 las estacas de hoja a las que se les realiz la aplicacin
de auxinas permanecieron verdes y turgentes, mientras que las estacas de hoja sin
aplicacin de auxinas presentaron clorosis, disminucin de la turgencia y necrosis. Las
hojas no suelen ser el sitio menos utilizado para realizar la propagacin de la planta por
medio de estacas debido a que son rganos que pueden deshidratarse fcilmente debido a
que exponen un rea superficial de transpiracin relativamente alto y por ende, los
carbohidratos de reserva se mantienen en las hojas como mecanismo fisiolgico para evadir
el estrs.
Figura 19. Esquejes obtenidos a partir de hoja de curuba (Passiflora tripartita) sin aplicacin
de auxinas.
Figura 20. Esquejes obtenidos a partir de hoja de curuba (Passiflora tripartita) con aplicacin
de auxinas.
Tcnica de Acodamiento
No se observ el crecimiento radicular en los acodos obtenidos a partir de plantas de feijoa,
tanto en el caso de tratamiento con auxinas, como en el control sin presencia de auxinas.
Sin embargo, s se observ la formacin de callo en ambos casos, siendo superior el peso
total del callo en el acodo sin auxinas (Fig. 21), el cual correspondi a 0,628 g, mientras que
en acodo con aplicacin de auxinas (Fig. 22), el peso total del callo fue menor (0,586 g).
Figura 21. Acodos realizado a partir del tallo de plantas de feijoa (Acca sellowiana) sin aplicacin de
auxinas.
Figura 22. Acodos realizado a partir del tallo de plantas de feijoa (Acca sellowiana) con aplicacin de
auxinas.
Vilchez et al., (2011) encontraron que sin aplicacin de auxinas se logr la mejor respuesta
en los acodos de guayaba de diferentes variedades, lo cual se debido posiblemente a que
la cantidad de auxinas endgenas en las plantas fue suficiente para promover el
enraizamiento. Sin embargo, Albany et al. (2004), concluyeron que la mejor respuesta se
obtuvo al aplicar ANA 5000 mg.L-1 en acodos areos de guayabo. Contrariamente a lo
planteado por Albany et al., (2004), no se obtuvo un buen enraizamiento de los acodos
areos con la aplicacin de auxinas, posiblemente debido a un periodo de evaluacin de
corta duracin que no permiti el enraizamiento, debido a que existen especies en las
cuales los perodos de formacin de races mediante mtodos de propagacin asexual son
extensos, como es el caso de la feijoa.
Injertacin en Rosa sp.
En uno de los dos injertos realizados se encontr que la yema presentaba coloracin verde,
mientras que la zona circundante evidenciaba un color negro posiblemente asociado a
necrosis del tejido (Fig. 23). No obstante, la apariencia turgente de la yema, que no revela
signos de desecacin o marchitamiento, sugiere que se establece una conexin vascular
exitosa entre el patrn y la yema. Sin embargo, en los das posteriores de observacin, no
se encontr crecimiento vegetativo a partir de la yema, lo que podra deberse a un corto
periodo de realizacin de la prctica que no permiti observar resultados concretos.
Conclusiones
Los resultados de nuestro trabajo, muestran que para especies como mejorana y romero,
no hubo efectos significativos de la interaccin del tipo de yema (apical o basal), y la
presencia o ausencia del regulador de crecimiento en el nmero de races formadas,
aunque el nmero de races de las plantas con auxinas tuvo diferencias significativas en
comparacin con las plantas a las que no se les aplico auxinas.
El bajo nivel de enraizamiento de las estacas apicales y basales de feijoa en presencia y
ausencia de ANA, posiblemente fue causado por un importante grado de deshidratacin, lo
que gener, que las estacas concentraran todos sus esfuerzos en contrarrestar el estrs
hdrico con las reservas de energa presentes en los tallos.
Aunque hubo diferencias significativas en la generacin de races adventicias, de las
estacas de curuba, con y sin aplicacin de auxinas, no se logr determinar si esto es debido
a la presencia de auxinas, ya que la longitud para los dos tratamientos no present
diferencias concluyentes.
Los acodos no presentaron enraizamiento, esto es causado posiblemente, a que el periodo
de evaluacin fue de corta duracin, ya que la literatura reporta que los mtodos de
propagacin asexual son extensos, como es el caso de la feijoa.
Aunque uno de los injertos en rosa presentaba, apariencia turgente y signos de efectividad
en el injerto, al momento de la evaluacin no se pudo llegar a determinar si este injerto
haba sido exitoso, ya que probablemente el tiempo de evaluacin fue muy cort.
Se evidencia la importancia en el conocimiento de la propagacin asexual, ya que la
informacin bibliogrfica es limitada para muchas
especies vegetales de inters
agronmico.
Bibliografa
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