TRANSDUCCIN DE SEALES:

TIROSINA QUINASAS

Dra Claudia Tomes

SEALES RECIBIDAS POR RECEPTORES EN LA CARA EXTERNA

DE LA SUPERFICIE CELULAR SON TRANSMITIDAS AL INTERIOR

POR MEDIO DE COMBINACIONES DE PEQUEAS Y GRANDES

MOLCULAS SEALIZADORAS INTRACELULARES

LA TRANSDUCCIN DE SEALES COMPRENDE

CASCADAS DE INTERACCIONES MOLECULARES

La transduccin de seales usualmente involucra mltiples pasos

Mltiples pasos tienen dos ventajas muy importantes:

1) Amplificar la seal (unas pocas molculas producen una gran
respuesta celular)
2) Proveer ms oportunidades para controlar la especificidad,
coordinacin y regulacin.

MOLCULAS PEQUEAS E IONES COMO SEGUNDOS

MENSAJEROS
El ligando que se une al receptor en la membrana es el primer
mensajero
Varios segundos mensajeros son pequeas molculas no
proteicas o iones solubles en agua que se distribuyen rpidamente
dentro de la clula por difusin
Los segundos mensajeros participan en vas de transduccin
iniciadas por receptores asociados a protenas G y a receptores
tirosina quinasas

LAS TRES ETAPAS DE LA TRANSDUCCIN DE SEALES

1) RECEPCIN

2) TRANSDUCCIN

EXTRACELLULAR
FLUID

3) RESPUESTA
CYTOPLASM

Plasma membrane
Reception

Transduction

Response

Receptor
Activation
of cellular
response
Relay molecules in a signal transduction
pathway
Signal
molecule

Concepto 1: RECEPCIN

UNA MOLCULA SEAL SE UNE AL RECEPTOR PROTEICO,

CAUSNDOLE UN CAMBIO CONFORMACIONAL

La unin de una molcula seal a su receptor es altamente

especfica

Un cambio conformacional en el receptor es frecuentemente

la primera tranduccin de la seal

Concepto 1: RECEPCIN

LOS RECEPTORES CON ACTIVIDAD TIROSINA QUINASA (RTK)

SON PROTENAS TRANSMEMBRANA QUE
UNEN FOSFATOS A TIROSINAS

SUSTRATO-Y-OH + APPP (ATP) SUSTRATO-Y-OP + APP (ADP)

Concepto 1: RECEPCIN

FUNCIONES:

-AYUDAR A LA CLULA A DECIDIR SI TIENE QUE CRECER O NO

-REGULAR LA PROLIFERACIN Y DIFERENCIACIN CELULARES

-PROMOVER LA SUPERVIVENCIA

- MODULAR EL METABOLISMO

Concepto 1: RECEPCIN

LIGANDOS PTK:
PROTENAS O PPTIDOS, SOLUBLES O UNIDOS A MEMBRANAS

INTERACTAN CON SUS RECEPTORES POR MEDIO DE UNIONES

NO COVALENTES (ELETROSTTICAS, PUENTES DE HIDRGENO,
van der WAALS, etc)

Concepto 1: RECEPCIN

LIGANDOS de RTK (ejemplos):

Insulina
Factor de crecimiento epidrmico (EGF)
Factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF)
Neurotrofinas, incluyendo el factor de crecimiento nervioso (NGF)
Factor de crecimiento de fibroblastos (FGF)
Factor de crecimiento de hepatocitos (HGF)
Factor de crecimiento endotelial (VEGF)
Insulin-like growth factor-1 (IGF-1)
Factor estimulador de la formacin de colonias de macr. (M-CSF)
Ephrins

Concepto 1: RECEPCIN

NO-RECEPTORES (Abl,Src,Lck,Yes, Fgr, Fyn,

Lyn, Hck y Blk).
INTRACELULARES. SE UNEN A UN RECEPTOR Y SE

PTK PUEDEN SER

ACTIVAN CUANDO DICHO RECEPTOR UNE SU

LIGANDO.

RECEPTORES (PDGF-R, EGF-R, Ins-R, etc).

PROTENAS TRANSMEMBRANA QUE UNEN
HORMONAS Y FACTORES DE CRECIMIENTO

REPRESENTACIN ESQUEMTICA DE TIROSINAS

QUINASAS TIPO RECEPTOR: VARIACIONES

PROTOTIPO:
TK Y R EN EL
MISMO
POLIPPTIDO

TK Y R EN DISTINTOS
POLIPPTIDOS;
UNIONES
COVALENTES

TK Y R EN DISTINTOS
POLIPPTIDOS;
UNIONES
NO COVALENTES
Cooper; De Groot et al, Endocrine Reviews 27: 545-560 (2006)

MECANISMO DE ACTIVACIN
Signal
molecule

(Concepto 1: RECEPCIN)

Signal-binding site

Helix in the
membrane

Signal
molecule

Tyrosines

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Receptor tyrosine
kinase proteins
(inactive monomers)

CYTOPLASM

Dimer

Activated relay
proteins

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

ATP

Activated tyrosinekinase regions

(unphosphorylated
dimer)

6 ADP

P Tyr
P Tyr
P Tyr

Tyr
Tyr
Tyr

P
P
P

P Tyr
P Tyr
P Tyr

Fully activated receptor

tyrosine-kinase
(phosphorylated
dimer)

Tyr
Tyr
Tyr

Cellular
response 1

P
P
P

Cellular
response 2

Inactive
relay proteins

UN MISMO RECEPTOR PUEDE DISPARAR MLTIPLES VAS DE TRANSDUCCIN A LA VEZ

Concepto 2: TRANSDUCCIN

SE RECLUTA UNA PROTENA

ADAPTADORA (ej Grb)

QU PASA
SE ACTIVA EL TARGET POR

DESPUS DE LA

ASOCIACIN AL RECEPTOR

AUTOFOSFORILACIN?

(ej PLC)

SE FOSFORILA EL TARGET
(ej IRS)

ESPECIFICIDAD:
CADA FOSFOTIROSINA EN LA COLA CITOPLASMTICA DEL
RECEPTOR RECLUTA UNA PROTENA CITOSLICA DIFERENTE

Activated relay
proteins

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

Tyr

ATP

Activated tyrosinekinase regions

(unphosphorylated
dimer)

6 ADP

P Tyr
P Tyr
P Tyr

Tyr
Tyr
Tyr

P
P
P

Fully activated receptor

tyrosine-kinase
(phosphorylated
dimer)

P Tyr
P Tyr
P Tyr

Tyr
Tyr
Tyr

P
P
P

Inactive
relay proteins

Cellular
response 1
Cellular
response 2

EJEMPLO: RECEPTOR DEL PDGF

enzimas
Molecular Biology of
the Cell. 4th Ed, 2002

Concepto 2: TRANSDUCCIN

VA DE LA FOSFOLIPASA C (PLC) GENERA

DOS SEGUNDOS MENSAJEROS

1) DAG (DIACILGLICEROL), MENSAJERO QUE PERMANECE ANCLADO

A LA MEMBRANA PLASMTICA. ALL ACTIVA UNA Serina/Treonina QUINASA
(PKC) DEPENDIENTE DE CALCIO Y FOSFOLPIDOS

2) IP3 (INOSITOL1,4,5 tri-FOSFATO, MENSAJERO SOLUBLE QUE SE UNE A

RECEPTORES ESPECFICOS EN LA MEMBRANA DEL RETCULO ENDOPLSMICO.
ESTA UNIN PROVOCA LA SALIDA DE CALCIO DE ESTA ORGANELA

Concepto 2: TRANSDUCCIN
EXTRACELLULAR
FLUID

Signal molecule
(first messenger)

(second

DAG messenger)
GTP

Phospholipase C

PIP2
IP3 (second
messenger)

IP3-gated
calcium channel

Endoplasmic
reticulum (ER)

CYTOSOL

Ca2+
Ca2+
(second
messenger)

Various
proteins
activated

Cellular
responses

Concepto 2: TRANSDUCCIN

ALGUNAS VAS DE TRANSDUCCIN REGULAN LA SNTESIS

DE ENZIMAS U OTRAS PROTENAS, USUALMENTE
AL ENCENDER O APAGAR GENES EN EL NCLEO
(RESPUESTAS LENTAS)

LA LTIMA MOLCULA ACTIVADA PUEDE FUNCIONAR

COMO UN FACTOR DE TRANSCRIPCIN
(ejemplo: va de la Ras)

LE 11-14

Concepto 2: TRANSDUCCIN
Growth factor

Reception

Receptor

Phosphorylation
cascade
Transduction

CYTOPLASM

Inactive
transcription
factor

Active
transcription
factor

Response

DNA
Gene
NUCLEUS

mRNA

Concepto 2: TRANSDUCCIN (va de la Ras)

Las molculas que transmiten la seal desde el receptor hasta la respuesta son
mayormente protenas

En la cascada el receptor activa una protena, quien a su vez activa otra y as

sucesivamente, hasta llegar a la que produce la respuesta celular

En muchas vas, la seal se transmite por una cascada de

fosforilaciones en protenas

Estos sistemas de fosforilaciones y defosforilaciones actan como

interruptores moleculares, encendiendo y apagando actividades

A DIFERENCIA DE LOS RECEPTORES CON SIETE DOMINIOS

TRANSMEMBRANA, RTK NO INTERACTAN DIRECTAMENTE CON
SU PROTENA G (Ras)

Concepto 2: TRANSDUCCIN (va de la Ras)

Molecular Biology of
the Cell. 4th Ed, 2002

CICLO DE ACTIVACIN/DESACTIVACIN
DE PROTENAS G MONOMRICAS

Molecular Biology of
the Cell. 4th Ed, 2002

GEF (SOS)= guanine nucleotide

exchange factor

GAP = GTPase activating factor

CONEXIN ENTRE PTK Y Ras

Grb2 = protena adaptadora

Sos = GEF para ras

Ras-GDP = inactiva

Movies en http://faculty.plattsburgh.edu/donald.slish/tyrosinekinase
Cortesa del Dr Donald Slish

TANTO LA FOSFORILACIN EN TIROSINA COMO LA ACTIVACIN

DE Ras SON FENMENOS TRANSIENTES, FINALIZADOS POR
FOSFATASAS Y GAPs. Ras CONVIERTE ESTAS SEALES EN
OTRAS MAS PERDURABLES A TRAVS DE UNA CASCADA DE
FOSFORILACIONES EN SERINA Y TREONINA.

Molecular Biology of
the Cell. 4th Ed, 2002

LE 11-14

Concepto 2: TRANSDUCCIN
Growth factor

Reception

Receptor

Phosphorylation
cascade
Transduction

CYTOPLASM

Inactive
transcription
factor

Active
transcription
factor

Response

DNA
Gene
NUCLEUS

mRNA

LE 11-8

Concepto 2: TRANSDUCCIN
(cascada de fosforilaciones)

Signal molecule

Receptor
Activated relay
molecule
Inactive
protein kinase
1

Ras

Active
protein
kinase
1

Ph
o
ph
os

Inactive
protein kinase
2

Raf

ATP
P

Active
protein
kinase
2

MEK

e
ad
sc
ca

Inactive
protein kinase
3

ATP
ADP

Pi

Active
protein
kinase
3

PP

Inactive
protein

MAPK

ATP

ADP

Pi

Growth factor

n
io
lat
ry

ADP
PP

Pi

PP

Reception

Active
protein

Cellular
response

Concepto 2: TRANSDUCCIN
Concepto 3: RESPUESTA

Receptor

Phosphorylation
cascade
Transduction

CYTOPLASM

La MAPK activa transloca

al ncleo,

Inactive
transcription
factor

Active
transcription
factor

Response
P

donde

DNA

activa la transcripcin
Gene
NUCLEUS

mRNA

de genes

Concepto 3: RESPUESTA

MAPK KINASA
Y CICLO CELULAR

Molecular Biology of
the Cell. 4th Ed, 2002

HEMOS VISTO DOS VAS:

PLC
MAPK
AHORA VAMOS A VER LA VA DE LA
PI3K

CONTROL INICO DE LA SECRECIN DE INSULINA

http://www.medbio.info/horn/time%203-4/secretion_of_insulin_and_glucagon.htm

a
lin
na
re
ad

SEAL

a
lin
su
in

Ins R

sa
co
glu

cAMP

GLUT4
o
en
og
uc
gl

is
lis

uc
gl

is
lis

glucogenogenesis

MSCULO

INSULINA: RESPUESTA TEMPRANA

msculo, tejido adiposo, hgado

INSULINA: RESPUESTAS TEMPRANAS

RESPUESTAS LENTAS

RESPUESTAS RPIDAS

PARALELISMO
ENTRE LAS VAS
QUE
ANALIZAMOS

AL PIZARRN

Concepto 3: RESPUESTA

SE ACTIVAN GENES PARA LA DIVISIN CELULAR.

EN OTRAS PALABRAS, LA ESTIMULACIN DE PTK
CONDUCE A LA PROLIFERACIN

A DIFERENCIA DE LAS CLULAS NORMALES QUE NO SE DIVIDEN A

MENOS QUE SEAN ESTIMULADAS POR FACTORES DE CRECIMIENTO, LAS
CANCEROSAS SE EMBARCAN EN MITOSIS DESCONTROLADA. LA MUTACIN
PUEDE OCURRIR EN CUALQUIER PUNTO DE LA CASCADA

Concepto 3: RESPUESTA

EJEMPLO DE MUTACIN EN EL RTK (ej RET EN MEN2A)

CNCER

SITUACIN NORMAL

OTRO EJEMPLO
TRANSLOCACIN
Transferencia de una porcin de un cromosoma a otro cromosoma
no homlogo. En las translocaciones recprocas dos cromosomas
intercambian material
CAUSAN ALTERACIONES FENOTPICAS POR
INSERCIN DENTRO DE UN GEN, DESTRUYENDO LA FUNCIN DEL MISMO
INSERCIN BAJO PROMOTORES O ENHANCERS QUE ALTEREN LA EXPRESIN
INSERCIN DENTRO DE UN GEN, CRENDOSE UN GEN HBRIDO, QUE AL
SER TRANSCRIPTO Y TRADUCIDO, DA ORIGEN A UNA PROTENA QUIMRICA

TRANSLOCACIN CROMOSMICA (ejemplo de gen hbrido)

Sitio cataltico tirosina kinasa (activable)

Protena normal

NH2

COOH

25 aa

Sitio cataltico tirosina kinasa (constitutivamente activo)

NH2

COOH

INHIBIDORES DISEADOS CONTRA TARGETS ESPECFICOS

ACTUALMENTE EN DESARROLLO (Fase I, II y III y aprobados)

a = Inhibidores de GFR:
Ab monoclonales;
pequeos inhibidores de PTK
b = antagonistas de Ras:
oligonucletido antisense;
inhibidores de farnesil transf
c = antagonistas de Raf:
oligonucletido antisense;
pequeos inhibidores

d = antagonistas de MEK:
pequeos inhibidores

BIBLIOGRAFA
ANIMACIONES FANTSTICAS, VANLAS!!!!!! En Science Signaling, The Signal Transduction
Knowledge Environment. http://stke.sciencemag.org/cgi/content/abstract/sigtrans;3/119/tr2,

Movies en You Tube (muchos, por ejemplo Kahn Academy)

MOLECULAR CELL BIOLOGY, Lodish, Berk, Zipursky, Matsudaira, Baltimore, Darnell.

4th Edition. W.H. Freeman and Company, 2000.

THE WORLD OF THE CELL, Becker, Kleinsmith, Hardin. 4th Edition. Benjamin/Cummings, 2000

MOLECULAR BIOLOGY OF THE CELL. Alberts, Bray, Lewis, Raff, Robrts, Watson. 4 Edicion, 2002
Garland Publishing. Gratis en http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/bv.fcgi?rid=mboc4.section.2840