ELECTROFORESIS

La electroforesis es un mtodo de laboratorio en el que se utiliza una

corriente elctrica controlada con la finalidad de separar biomoleculas segn
su tamao y carga elctrica a travs de una matriz gelatinosa.
Fue empleado por primera vez por en el ao 1937, pero su importancia vino a
incrementarse cuando en los aos cincuenta E. L.Durrum y Arne W.K. Tiselius ,
impulsaron la electroforesis de zona, nombre que se asign a la separacin de
materiales en un campo elctrico en presencia de algn tipo de soporte;
aunque este trmino se limit originalmente al anlisis de coloides y partculas
submicroscpicas , se ha convertido en estos ltimos aos en una metodologa
aplicada a sustancias de bajo peso molecular.

1. Fundamento.
Cuando una mezcla de molculas ionizadas y con carga neta son
colocadas en un campo elctrico, estas experimentan una fuerza de atraccin
hacia el polo que posee carga opuesta, dejando transcurrir cierto tiempo las
molculas cargadas positivamente se desplazaran hacia el ctodo (el polo
negativo) y aquellas cargadas positivamente se desplazaran hacia el nodo (el
polo positivo).
El movimiento de las molculas est gobernado tambin por dos fuerzas
adicionales; inicialmente la friccin con el solvente dificultar este movimiento
originando una fuerza que se opone , por otro lado las molculas tienen que
moverse en forma aleatoria o movimiento browniano debido a que poseen
energa cintica propia denominado difusin. La energa cintica de las
molculas aumenta con la temperatura, por ello a mayor temperatura mayor
difusin.
La suma de todas estas fuerzas provoca que las molculas no migren de
una manera homognea, de tal manera que, si las molculas son colocadas en
un cierto lugar de solucin, los iones comenzaran a moverse formando un
frente cuya anchura aumentara con el tiempo.
Para reducir la anchura de este frente podemos reducir el movimiento de
las molculas empleando un medio que oponga ms resistencia a dicho
movimiento. Una forma comn de hacer esto es formar un gel. El gel consiste
de un polmero soluble de muy alto peso molecular que atrapa molculas de
agua y forma un tamiz que dificulta el movimiento de los solutos,
consecuentemente, la migracin electrofortica de las molculas ser ms
lenta, pero el ensanchamiento del frente se ver reducido tambin.

OBJETIVOS:
*Realizar la practica con materias de fcil acceso
MATERIALES:
2 platos hondos (de esos de comer la sopa)
1 cucharilla
sal de mesa (NaCl)
Bicarbonato sdico (NaHCO3),
Papel de filtro
2 Portaobjetos
Cableado elctrico
5 Pilas de Petaca (de las de 9V)
1 Lpiz.

PROCEDIMIENTO:

Procedimiento:
Primero llenamos cada plato con 300mL de agua aproximadamente. Le aadimos una
cucharilla de NaCl , y una cucharilla de NaHCO 3. Colocamos los platos en paralelo como
podemos ver en el dibujo. Entre los platos situamos un portaobjeto que nos har de apoyo. Por
otra parte recortamos una tira de papel de filtro (vale el del caf), y lo empapamos del medio
electrofortico. Situamos esta tira encima del portaobjetos y dejamos que cada extremo de la
tira est en contacto con el electrolito de cada plato. Posteriormente dibujamos una lnea
transversal a lpiz en la tira. Por otra parte realizamos el circuito elctrico, colocamos las 5
pilas en serie, y de cada polo de las pilas de los extremos sacamos un cable que sumergiremos
en cada plato.

Ahora probamos si el montaje funciona, (figura siguiente), para ello nos sacamos una gotilla de
sangre y la posamos sobre la lnea dibujada en la tira de papel, colocamos un portaobjetos
encima del papel y conectamos el circuito elctrico. Con el paso del tiempo, si el montaje
funciona, se deberan observar 5 manchas a lo largo de la tira en direccin al polo negativo. En
todo caso, tened la precaucin de no suministrarle ms voltaje al montaje, de no tocar ni el
electrolito ni la tira, y de desconectar el circuito cuando termine la migracin, adems de cargar
la tira con el circuito.

PREGUNTAS SOBRE LA PRCTICA:

1. Explicar la migracin de acuerdo con la carga

2.El ADN hacia qu electrodo migrar?

Tomado de :
http://biovigo.blogspot.com.co/2008/11/electroforesis-casera.html
http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/libros/celular/
electroforesis.html