AO DE LA INVERSIN PARA EL DESARROLLO RURAL

Y LA SEGURIDAD ALIMENTARIA

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

INGENIERIA INDUSTRIAL
ESCUELA PROFESIONAL INGENIERIA
AGROINDUSTRIAL

PRACTICA N1
TEMA:

RECONOCIMIENTO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO

NOMBRE:
GRUPO:
Profesor:

ARRIETA DELGADO YORKA YAJAIRA

2
JUAN MARTINES MENDOZA

PIURA 25
DE SEPTIEMBRE DEL 2013

MICROSCOPIO: RECONOCIMIENTOY MANEJO

DEL MICROSCOPIO; PREPARADOS Y
COLORACIONES.
1.Introduccin
Etimolgicamente la palabra microscopio deriva de dos voces
griegas Mikros = pequeo y Scopium = ver u observar. Se define
pues como un instrumento de ptica, que se utiliza para la
observacin de cuerpos pequeos que a simple vista no se
alcanzan a distinguir.
(DETLEV GANTEN-THOMAS DEICHMANN-THILO SPAHL,
2003)
La aplicacin del microscopio al estudio de los seres vivos supuso
un paso de gigante en el conocimiento de los organismos. A
partir del holands Leeuwenhoek, en el siglo XVII, empieza a
saberse de las pequeas estructuras vivientes, conocimientos
que el microscopio compuesto perfecciona despus y, con la
aplicacin del microscopio electrnico de nuestros das, se hace
posible la observacin de estructuras finsimas, al conseguir
aumentar 100.000 veces las partculas protoplasmticas.
(ATLAS TEMTICO-Biologa, 2004)
El descubrimiento del microscopio electrnico y de las tcnicas
de preparacin de los tejidos para el examen correspondiente
han revelado un orden de complejidad totalmente nuevo en la
materia viva. El advenimiento ms reciente del microscopio
electrnico explorador ha permitido obtener mayores
conocimientos de la estructura fina de clulas vegetales y
animales. En los ltimos aos se han ideado muchos mtodos
fsicos y qumicos nuevos aplicados a problemas de la biologa,
as se han descubierto en la funcin de los seres vivos grados de
complejidad comparables a los adelantos estructurales que
debemos al microscopio electrnico.
(CLAUDE A. VILLE, 1993 - Sptima Edicin)
El microscopio electrnico ha revelado notable complejidad
estructural donde el microscopio de luz solo permita apreciar
una matriz ms o menos homognea.
(CLAUDE A. VILLE, 1993 - Sptima Edicin)
En las investigaciones citolgicas, el microscopio electrnico
representa un prodigioso auxiliar exploratorio, aunque se sigue
empleando el microscopio ptico que es todava de gran utilidad.
(LAROUSSE - Biblioteca Practica1992)
Los microscopios pticos usan lentes, casi siempre de vidrio,
para enfocar y amplificar los rayos de luz que pasan a travs de
un espcimen no bien rebotan en el.

2.Objetivos

Manejar correctamente el microscopio y reconocer sus

partes as como observar preparados en fresco y en
seco.
Obtener correctamente un preparado en fresco y en
seco y usar adecuadamente los colorantes cidos
bsicos y neutros en las preparaciones microscpicas.

3.Materiales de laboratorio

Microscopio compuesto
Mechero de alcohol
Azul de metileno
Gradillas
Asa de koll
Wright
Pipetas
Eosina
Leishman

Materiales que debe traer el alumno

Agua destilada
Laminas y laminillas
Alcohol
Lanceta
Gotero
Fsforos
Bolsa plstica
Enchufe

4.Procedimiento y resultado
A. Microscopio:

B. Coloraciones
Es un proceso mediante el cual, un cuerpo toma color bajo la
accin de otro cuerpo o sustancia llamada colorante y que no
se decolora con lavados de agua o cualquier otra sustancia
empleada como disolvente.
a. Preparado en fresco
Limpiar bien una lmina portaobjetos con un
pedazo de lino o con papel para lentes.
Con un gotero, colocar una gota de agua
estancada en el centro de lmina portaobjetos
y sobre la muestra el cubreobjetos.
Efectuar la iluminacin del microscopio.
Colocar el portaobjetos en la platina de
microscopio, fijarla con las pinza. La parte que
contiene el cubreobjetos y la preparacin,
deber estar sobre el orificio de la platina.
Enfocar, mientras observa por el ocular, eleve
ligeramente el tubo con el tornillo macro
mtrico hasta que se visualice el preparado,
haga la imagen ms ntida con el tornillo
micromtrico.
El ajuste de la intensidad de la luz se har con
el diafragma.
Se enfoca girando el tornillo micromtrico,
lentamente, hacia atrs o hacia adelante para
obtener detalles en varios niveles.
Las observaciones se inician con el objeto de
pequeo aumento, procurando enfocarlo bien.
En el experimento realizado con agua retenida hemos
observado, Agentes patgenos: bacterias, virus,

protozoarios, rotferos y parsitos que entran al agua

proveniente de desechos orgnicos.

b. Preparado en seco
Extensin o frotis: sustancia examen, mucosa
labial.
Fijacin: al alcohol, calor, etc.
Colorear de 1 a 5: con un colorante acido o
bsico.
Lavar: en agua corriente hasta que salga
incolora.
Secar: al medio ambiente o a calor moderado.
Observar: a objetivo de menor y mayor
aumento.
Observar a inmersin; colocar una gota de
aceite de cedro.
Esquematizar lo observado.
En el experimento realizado hemos observado clulas
epiteliales a nivel de la boca.

leosina

c. Coloracin neutra
Obtencin de muestra: con una lanceta estril
realizar una puncin en el dedo medio.
Frotis: sustancia examen, sangre.
Colorear de 3 a 5: colorante leishman.
Lavar: con agua destilada.
Secar: al medio ambiente o calor moderado.
Observar: objetivos de pequeo, mediano y gran
aumento.
Observar a inmersin: colocar una gota de aceite de
cedro.
Esquematizar lo observado.
En el experimento realizado hemos observado glbulos
rojos en gran cantidad y un glbulo blanco en el cual
se poda observar su ncleo.

5.Discusin
la historia del microscopio ...
Las excavaciones arqueolgicas han entregado numerosos
descubrimientos de lentes planos, convexos y biconvexos con
antigedades que nos remontan a los 2000 a 3000 aos antes de C. Es
as que Beck las halla en la Antigua Mesopotamia en 1928. El arquelogo
ingls Austin Henry Layard (imagen inferior), en 1847, halla lentes plano
convexo de cristal de roca burdamente tallado en Ninive. Otros hallazgos
se ubican en Creta, Grecia, China, etc.

La evolucin del microscopio se podra reconstruir del siguiente

modo:
1590: En Midelburg
(Holanda), Juan y Zacharias
Janssen (imagen izquierda)
construyen el que sera el
primer microscopio
compuesto de la historia
(imagen derecha). De una
simplicidad absoluta el
mismo consista en dos
lentes soportados en sendos
tubos de latn de unos 25 cm
de largo que se deslizaban
(facilitando el enfoque)
dentro de otro.
1612: Galileo Galilei incursiona en el trabajo con lentes. Ya lo haba
hecho con los telescopios y los microscopios no quedaron al margen de
su creatividad. Es as que fabrica uno de pequeo tamao (unos 12 cm)
instalando dos lentes en sendos tubos de madera que se deslizaban
dentro de uno exterior de cartn al que se le practicaron terminaciones
en cuero al estilo de la poca.
1632: En Layden (Holanda), Antoni van Leeuwenhoek (imagen inferior),
fabrica un microscopio simple de unos 10 cm con el que logr convertirse
en el descubridor de los eritrocitos.

1665: Giuseppe Campana genera un salto cualitativo, ya que construye

un microscopio de 9 cm donde el avance sustancial lo aporta un
mecanismo de tornillo que facilita el desplazamiento mejorando
notablemente la calidad del enfoque y una base circular de madera con
un orificio central que permita observar por transparencia.

1668: Eustacchio Divini (imagen derecha), en

Bologna (Italia), desarrolla un microscopio
compuesto de mayor porte. El sistema estaba

1670: Christopher Cock y Robert Hooke (imagen inferior

centro), uno aportando la construccin y el otro el
diseo, son los responsables de la creacin de un
microscopio compuesto de 50 cm (imagen izquierda) con
el que Hooke logr observar celdillas de corcho (imagen
inferior derecha) a las que denomin "clula",
instaurando por primera vez el uso de esta palabra.

1680: La estructura microscpica del tejido seo es observada a

travs de un microscopio simple (imagen derecha) por Juan
Crisstomo Martinez (imagen inferior).

1700: En Inglaterra, John Marshall, no solo mejora la tecnologa de la

platina permitiendo su desplazamiento y mejor calidad de observacin
por transparencia sino que tambin optimiza el tornillo paralelo a la barra
convirtindolo en micromtrico aumentando, as, la agudeza del enfoque
fino. Fabrica con fines comerciales un modelo de gran tamao
(aproximadamente 50 cm).
1715: Nace el modelo "Lieberkhn", el que contaba con una pieza
cncava plateada (lieberkhn) que cumpla funciones de espejo
condensador de la luz. La muestra es fijada mediante una pinza.
1720: Es Edmund
Culpeper quien, en
Inglaterra, desarrolla
un microscopio de 40
cm (imagen derecha)
con el aporte de un
espejo colocado bajo la

1750: Obra del alemn Nuremberg, este microscopio de 40 cm se

diferencia en el hecho que la muestra era colocada en un sistema
cilndrico. Para la misma poca, John Cuff mejora la estructura diseada
por Culpeper, utilizando dos barras metlicas, una fija y la otra mvil. Un
tornillo sujeto a ambas barras permita el enfoque fino (imagen inferior).

1770: Benjamn Martin (imagen

centro) construye un modelo de 20
cm muy popular en las zonas
germnicas de Europa (imagen
derecha).
1835: Pequeo microscopio de 15 cm, modelo Oberhauser.
1850: Microscopio invertido modelo Lawrence Smith.
1860: Microscopio compuesto Dollond (imagen inferior) de 32 cm con
espejo orientable y tornillo de tipo micromtrico con cremallera.

1880: Nachet fabrica un microscopio monocular de 28 cm y aporta la

adaptacin de los binoculares graduables a un microscopio. Tambin para
la poca aparece el sistema revolver para el cambio de objetivos.

1900: Microscopios de diseccin de Carl Zeiss.

Siglo XX: El microscopio va a conservar sus caractersticas generales.

Pequeas modificaciones solo mejoran algunas prestaciones sin apartarse
de la esencia alcanzada. Alguna de stas, fueron la incorporacin de un
carro para desplazar la muestra sobre la platina, el sistema elctrico de
iluminacin incorporado, etc. En la actualidad, la utilizacin de
Microscopios Electrnicos de Transmisin y los de Barrido han permitido
obtener imgenes de gran resolucin en materiales ptreos, metlicos y
orgnicos.

Descripcin del microscopio compuesto

El microscopio tiene dos partes, una ptica y otra mecnica, las cuales
sern reconocidas en el desarrollo de la prctica.

Parte ptica
1. Ocular: Denominado as por que va cerca del ojo del observador,
consta de un sistema de dos lentes planos convexos, dispuestos en un

tubo, cilndrico de metal, con diafragma intermedio; ambas lentes

presentan las caras planas hacia el ojo del observador y las caras
convexas hacia el objeto.
El lente que va cerca del ojo del observador se denomina ocular
propiamente dicho y el lente inferior se le conoce con el nombre de
lente de campo.
En la parte lateral o superior del tubo cilndrico lleva una numeracin
5x, 10x, 15x, que indica el nmero de aumentos propios del ocular. El
ocular da la imagen virtual y derecha y se forma a la altura del
diafragma.
2. Objetivos: Denominados as porque que van cerca del objeto por
observar. Un objetivo est constituido por un tubo metlico cilndricocnico, lleva en su interior un sistema de lentes destinados a dar la
imagen real e invertida del objeto.
El lente de la parte inferior se denomina lente frontal. En la parte
lateral del tubo metlico, lleva inscritos una numeracin 4x, 10x, 20x,
40x, 60x, 100x, etc., que indica el nmero de aumentos propios del
objetivo.

Clases de objetivos
a. Objetivos a seco
Son aquellos que se emplean generalmente para observar
preparados en fresco, aunque tambin pueden utilizarse par
observar preparados en seco, no se utiliza ningn tipo de sustancia
refractante para realizar la observacin.
Por el nmero de aumentos son de tres clases:

De pequeo aumento = mayor de ox y menor de 10x

De mediano aumento = mayor de 10x y menor de 30x
De gran aumento = mayor de 30x y menor de 90x

b. Objetivo de inmersin
Son aquellos que entre el lente frontal y el preparado a observar, se
interpone una sustancia liquida, comnmente el aceite de cedro,
cuyo ndice de refraccin es de 1,5. Se utiliza solo para
observaciones de preparados en seco.
Caractersticas
1. Es el de mayor aumento (100x, 150x)
2. El lente frontal es ms pequea.
3. Lleva inscrita una fraccin:1/12;o un decimal:1,20, 1,30 o la
palabra ol inmersin.
4. De acuerdo a la procedencia lleva una franja o una raya negra
para facilitar su identificacin.

Distancia focal
Es la distancia que media entre la parte inferior del lente frontal y el
objeto a observar, cuando se tiene un enfoque perfecto.

Estas distancias focales para los diferentes objetivos son:

Pequeo aumento = entre 0.5 y 3 cm
Mediano aumento = entre 3 mm y 5mm
Gran aumento = entre 1 mm y 3mm
Inmersin = entre 0.8 mm y 1.20 mm
3. Sistema de iluminacin
Se encuentra ubicado en la parte inferior de la platina y comprende:
a.
b.
c.
d.

Espejo o lmpara de iluminacin

Diafragma
Condensador
Porta filtro
a. El espejo: Es de forma circular, presenta dos caras una plana y otra
cncava, sujeto por medio de un eje giratorio. Se utiliza para enviar
loa rayos de luz hacia el preparado.
b. El diafragma: Es un dispositivo constituido por laminillas metlicas
dispuestas concntricamente de tal forma que permite cerrar y
abrir, regulando de esta manera la entrada de luz emitida por el
espejo.
c. El condensador: Est constituido por un sistema de dos o ms
lentes (ABBE) ,montados de un cilindro cnico truncado de metal.
Est situado por debajo de la platina. Sirve para concentrar o
condensar los rayos luminosos emitidos por el espejo y funciona
accionado por un tornillo.
d. El porta filtro: Es un dispositivo que permite colocar de diferentes
colores, con la finalidad de facilitar la observacin.

Parte mecnica
1. El pie: Sostiene el microscopio asegurado una perfecta estabilidad
del aparato en posicin vertical, inclinado u horizontal. Presenta
diferentes formas, siendo la ms comn de herradura.
2. La columna o brazo: Es la parte articulada al pie por medio de
una bisagra llamada charnela, sostiene a la platina, a la subplatina,
al tubo ptico, lleva los tornillos macro mtrico y micromtrico.
Generalmente tiene la forma de un arco, que es por donde se toma
para su traslado y manejo.
3. Platina: Es una plancha metlica colocada en posicin horizontal,
presenta un orificio en la parte central que permite el paso de la luz
proveniente del sistema de iluminacin. En los modelos
perfeccionados, esta platina puede desplazarse por los tornillos
macro y micromtrico, hacia arriba y hacia abajo. Adems lleva
adherida un par de pinzas que sirven para sujetar a la lmina portaobjeto, o un carro mvil (charriot) para el desplazamiento del
preparado durante la observacin.

4. El tubo ptico: Es metlico y de forma cilndrica, ennegrecido

interiormente para evitar la reflexin de la luz. En el extremo

superior del tubo se inserta y en el extremo inferior el objetivo,

directamente o por intermedio de un dispositivo llamado revolver.
5. El revolver: Es un dispositivo metlico de forma circular,
entornillado en la parte inferior del tubo ptico, gira sobre su eje
central. Presenta varis orificios en los que van atornillados los
objetivos. Este dispositivo permite realizar el cambio de objetivos
durante la observacin.
6. El tornillo macro mtrico: Se encuentra ubicado en la parte
superior o inferior de la columna, permite grandes desplazamientos
del tubo ptico.
7. Tornillo micromtrico: Se encuentra ubicado en la parte superior
o inferior de la columna, por debajo del macro mtrico o
superpuestos l. Accionados por un solo tornillo. Permite el
desplazamiento en trminos de micras.

6. Conclusiones
Las coloraciones sirven para resaltar estructuras en tejidos
biolgicos que van a ser observados con la ayuda de diferentes
tipos de microscopios.
Bacterias: son microorganismos unicelulares que presentan un
tamao de unos pocos micrmetros (entre 0,5 y 5 um, por lo
general) y diversas formas incluyendo esferas (cocos), barras
(bacilos) y hlices (espirilos). Las bacterias son procariotas y, por
lo tanto, a diferencia de las
clulas eucariotas (de animales, plantas, hongos, etc.), no tienen
el ncleo definido ni presentan, en
general, orgnulos membranosos internos.
Algas: se les llama algas a todos los protistas fottrofos1 2 .
Tambin llamadas plantas inferiores (en contraposicin a las
plantas superiores o plantas), su definicin significa que son
eucariotas no plantas terrestres (ni animales ni hongos), con
capacidad de realizar fotosntesis y obtener el carbono orgnico
con la energa de la luz del Sol. Pueden ser unicelulares o
multicelulares, y casi siempre viven en un medio acutico
(alguna excepcin coloniz la superficie terrestre, pero no de la
forma espectacular en que lo hicieron las embriofitas o plantas
terrestres o plantas superiores).
Partes del microscopio:
Ocular
El espejo
Diafragma
El condensador
El porta filtro
El pie
El brazo

Tubo ptico
El revolver
Tornillo macro mtrico y micromtrico

7. cuestionario
a. cul es la diferencia entre un microscopio ptico y un
microscopio electrnico?
Microscopio ptico
Un microscopio ptico es un microscopio basado en lentes pticas. El
desarrollo de este aparato suele asociarse con los trabajos de Anton
van Leeuwenhoek. Los microscopios de Leeuwenhoek constaban de
una nica lente pequea y convexa montada sobre una plancha con
un mecanismo para sujetar el material que se se iba a examinar (la
muestra o espcimen). Este uso de una nica lente convexa se conoce
como microscopio simple, en el que se incluye la lupa, entre otros
aparatos pticos
Microscopio electrnico
Un microscopio electrnico es un microscopio que utiliza electrones en
vez de fotones o luz visible para formar imgenes de objetos
diminutos. Los microscopios electrnicos permiten alcanzar una
capacidad de aumento muy superior a los microscopios
convencionales (hasta 500.000 aumentos comparados con los 1000
aumentos de los mejores microscopios pticos) debido a que la
longitud de onda de los electrones es mucho menor que la de los
fotones.
b. cul es la diferencia entre un microscopio ptico simple
del m. compuesto?
Un microscopio simple es aquel que solo utiliza un lente de aumento; el
ejemplo ms clsico es la lupa.
Un microscopio compuesto es un microscopio que tiene ms de un
lente. Los microscopios compuestos se utilizan especialmente para
examinar objetos transparentes, o cortados en lminas tan finas que se
transparentan.
c. porque se utiliza el aceite de cedro en la observacin con
los objetivos de inmersin?
El aceite de cedro se utiliza para el objetivo de 100X. No puedes usar
el objetivo de 100X en seco, a diferencia del de 40X, 10X y menores.
d. Qu tipo de imagen da el ocular y el objetivo?
El objetivo est compuesto de varias lentes que crean una imagen real
aumentada del objeto examinado. Las lentes de los microscopios estn
dispuestas de forma que el objetivo se encuentre en el punto focal del
ocular. Cuando se mira a travs del ocular se ve una imagen virtual

aumentada de la imagen real. El aumento total del microscopio

depende de las longitudes focales de los dos sistemas de lentes.

e. Cmo se calcula el nmero de aumentos de una muestra?

Encuentra el aumento o el nmero impreso en el lente ocular del
microscopio compuesto. El lente ocular es la pieza por dnde
miras. Normalmente, el lente tiene una magnificacin de 10x.
El aumento impreso en el lente objetivo del microscopio que
usas. El lente del objetivo est justo por encima de la diapositiva
o de la muestra que observas con el microscopio. Muchos
microscopios tienen mltiples lentes objetivos que giran,
proporcionando diferentes aumentos. Los aumentos objetivos
ms comunes son lentes de 4x, 10x, 40x y 100x.
Multiplica el aumento del lente ocular por el aumento del lente
objetivo para determinar el aumento total. Si el lente ocular es
de 10x y el lente del objetivo es 10x, por ejemplo, entonces el
aumento total es de 100x. La ecuacin es: magnificacin ocular x
aumento del objetivo = aumento total.
f. Qu pasos se siguen para realizar una coloracin de Gram?
1 Fijamos la muestra mediante calor.
2 Violeta cristal (Tie todas las bateras, Gram + y -) 1.
3 Fijamos con Lugol, 1.
4 Decoloremos con una mezcla alcohol-cetona (los Gram - se
decoloren).
5 Safranina (colorante de contraste, tie a los Gram -), 1.
g. Cul es la diferencia entre coloracin Gram positiva y
coloracin Gram negativa?

La diferencia entre la coloracin de la Gram positivo es que al

aplicar cada colorante es orientativo. En la tincin se observarn de
color azul-violeta las Gram + y de color rosa las Gram -.

h. Qu significa um u nm?
Um: Se trata de micrmetros o micras (abreviatura: m). Un
micrmetro es igual a una millonsima de metro.
Nm: El nanmetro es la unidad de longitud que equivale a una
milmillonsima parte de un metro.

i. Para observar plasmodium falciparum que tipo de preparado

empleara
El tipo de preparado que empleara para observar plasmodium es
( preparado fresco )

j. Esquema comparativo de la formacin de imagen del

microscopio ptico con el m. elctrico

8.Anexos

9.Referencias bibliograficas

http://micropartes.blogspot.com/

http://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio_compuesto

http://www.libroos.es/libros-de-ciencia/biologia/67977-villee-claudebiologia-4ta-edicion-pdf.html

http://es.extpdf.com/biologia-de-claude-a-villee-8-edicion-pdf.html