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Lotte & Thomas Orchids

Cultivo in vitro da gema da orqudea


Preparando as gemas
A vantagem desta tcnica que a planta nova ser clone da planta me. Isto : idntica.
Usamos esta tcnica para propagar Phalenopsis, Doritis pulcherrima, Phaius tankervillae
e Chiloschista lunifera.
Para que as gemas sejam adequadas, corta-se a haste floral 1cm acima e abaixo da gema
. muito importante usar uma faca bem afiada para no provocar lesonos tecidos.

Phalaenopsis flower stalk with bract


Em seguida remova a bractea que cobre a gema cuidadosamente.

Haste floral de Phalaenopsis sem a bractea


Que meio deve ser usado?
Para iniciar o crescimento da gema adormecida devemos utilizar meios que incluam
citocinas (fito hormnios). Ns usamos o meio da Sigma numero de catlogo P6793
(Phytotechlab P793)
Preparando a area de trabalho:
Voc pode usar o mesmo equipamento descrito para Seed sowing.
Colocando nos frascos
Mergulhe a gema j limpa por alguns segundos em soluo de etanol a 70%. Em
seguida deixe mergulhada por 30 minutos em solu~o a 0,5% de perxido de
hidrognio (H2O2). Em seguida deixe por 15 min em uma soluo a 3% de H2O2.
Aps este perodo coloque a gema esterelizada em um tubo esterilizado. Ento pegue
um farsco e abra ( tudo dentro da capela de fluxo laminar) A tampa do frasco pode ser
colocada sobre papel embebido em lcool. Pegue a sua pina, passe-a na chama para
esteriliz-la. Pegue o pedao da haste floral que contm a gema que esta imersa na
soluo de H2O2 e finque-o no meio de cultura que j est preparado no frasco. Em
seguida coloque a pina em gua fervendo para remover todo o resto de meio que ficou
aderido e coloque a pina no frasco com etanol a 70%. Feche o frasco identifique e
proceda com o prximo frasco da mesma maneira.
Dicas: Para tornar a sua soluo esterilizante mais eficiente, adicione algumas gotas de
detergente a solu~so de H2O3.
Cuidados Posteriores:

O Local onde voc colocar os frascos de cultivo deve ser bem iluminado e com
temperature em torno de 20C. Evite sol direto pois pode superaquecer o interior da
garrafa..

Cultivando broto deChiloschista lunifera


Devido ao tamanho e estrutura das gemas o ndice de contaminao alto do que se
usarmos germinao assimbitica de sementes. Por isso muito importante checar a
cultura diariamente nas primeiras semanas para ver se esto contaminadas. Se voc
encontrar algum fungo ou bactria voc pode tentar esteriliza-lo outra vez. Muitas
gemas exsudam compostos fenlicos no meio o que o tornar escurecido. Isto matar a
sua planta se voc no a a replantar em uma garrafa com meio novo. Alguns deles
param de exsudar esses compostos por olta do quarto replante.

phenolic exudations
To logo a planta tenha 2 ou 3 folhinhas, voc pode replanta-la em meio sem hormnio
(Ex. Sigma P6668) para que se inicie o crescimento das razes.
O que voc deve fazer se quer mais do que uma planta?

Voc pode corta 1/3 da gema. Isto far com que a gema produza dezenas de plntulas ao
invs de apenas uma (porque no falou antes??????)

Cultivo dePhaius tankervilleae

Planta jovem de
obtida de uma gema

Phalaenopsis

equestris

Cultivo no solo
Preparando as gemas
Ns tentamos a seguinte tcnica com Phaius tankervilleae e funcionou muito bem.
Corte a haste floral 3cm abaixo e acima da gema. Use uma faca amolada. Remova a
brctea cuidadosamente.
Coloque-os no solo horizontalmente. As gemas devem ficar para cima.

Umedea e cobra a caixa com um filme plstico como mostra a figura.

Cuidados posteriores:
Coloque a caixa com as hastes em lugar claro e com temperature em torno de 20C e
evite sol direto> Observe a cada 3 ou 4 dias par aver se a umidade est adequada.

Haste floral fresca