Dbca 2016

FASCCULO
MINISTRO DE ESTADO DA CINCIA, TECNOLOGIA E INOVAO

CELSO PANSERA
SECRETRIA-EXECUTIVA DO MINISTRIO DA CINCIA, TECNOLOGIA E INOVAO
EMLIA MARIA SILVA RIBEIRO CURI
CONSELHO NACIONAL DE CONTROLE DE

EXPERIMENTAO ANIMAL
PRESIDENTE
CELSO PANSERA
COORDENADORA
MONICA L. ANDERSEN
CONSELHEIROS:
I Representantes do Ministrio da Cincia, Tecnologia e Inovao:

Monica L. Andersen Titular
Renata Mazaro e Costa Suplente
II Representantes do Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico:
Ktia de Angelis Titular
Luisa Maria Gomes de Macedo Braga Suplente
III Representantes do Ministrio da Educao:
Roberto Lopes de Souza Titular
Antonio Sebben Suplente
IV Representantes do Ministrio do Meio Ambiente:
Mnica Mafra Valena Montenegro Titular
Lus Fbio Silveira Suplente
V Representantes do Ministrio da Sade:
Srgio de Andrade Nishioka Titular
Maria Augusta Carvalho Rodrigues Suplente
VI Representantes do Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento:
Rui Machado Titular
Marco Aurlio Delmondes Bonfim Suplente
VII Representantes do Conselho de Reitores das Universidades do Brasil:
Jos Paes de Almeida Nogueira Pinto Titular
Vicente Ribeiro Rocha Jnior Suplente
CONSELHO NACIONAL DE CONTROLE DE EXPERIMENTAO ANIMAL
VIII Representantes da Academia Brasileira de Cincias:

Paulo Hilrio Nascimento Saldiva Titular
Lcio Augusto Velloso Suplente
IX Representantes da Sociedade Brasileira para o Progresso da Cincia:
Lucile Maria Floeter Winter Titular
Carlos Rogrio Tonussi Suplente
X Representantes da Federao das Sociedades de Biologia Experimental:
Francisco Tadeu Rantin Titular
Rovilson Gilioli Suplente
XI Representantes da Sociedade Brasileira de Cincia em Animais de Laboratrio:
Vera Maria Peters Titular
Andr Silva Carssimi Suplente
XII Representantes da Federao Brasileira da Indstria Farmacutica:
Marco Antonio Stephano Titular
Eduardo Pagani Suplente
XIII Representantes das sociedades protetoras de animais legalmente estabelecidas no Pas:
Stlio Pacca Loureiro Luna Titular
Ceres Berger Faraco Suplente
Rita de Cssia Maria Garcia Titular
XIV Coordenadores-gerais do Guia:
Marcel Frajblat novembro de 2012 a junho de 2014
Norma Labarthe julho de 2014 a 27 de novembro de 2015
Marco Antonio Stephano a partir de 28 de novembro de 2015
CONCEA
COMPOSIO DA SECRETARIA-EXECUTIVA DO CONCEA

Gabinete da Secretaria-Executiva do Concea
Sharon Lisauskas Ferraz de Campos Secretria-Executiva

Ana Cludia Moura Torres Secretria-Executiva Substituta
Secretariado
Silmara Silva Cavalcanti
Leonice Santos Sousa
a) Tcnicos
Antnio Amrico Barbosa Viana Tecnologista em Cincia e Tecnologia
Marcelo Kenji Nishida Tecnologista em Cincia e Tecnologia
b) Assistentes
Rafael Augusto de Souza Viana Assistente em Cincia e Tecnologia
Zlia Rodrigues Sardinha Assistente em Cincia e Tecnologia
c) Apoio Administrativo
Paulo Roberto Costa
d) Auxiliar Administrativo
Edijane Mota de Seixas
e) Estagirio
Igor Vincius de Castro dos Santos
Ficha catalogrfica elaborada pela

Biblioteca de Poltica em C&T do Ministrio da Cincia, Tecnologia e Inovao
B823e
Brasil. Ministrio da Cincia, Tecnologia e Inovao. Gabinete do Ministro. Conselho Nacional

de Controle de Experimentao Animal.
Guia brasileiro de produo, manuteno ou utilizao de animais em atividades de
ensino ou pesquisa cientfica: fascculo 6: anfbios e serpentes mantidos em instalaes de
instituies de ensino ou pesquisa cientfica [recurso eletrnico]/coordenadora: Vania Gomes
de Moura Mattaraia; Carlos Alberto Gonalves Silva Jared ... [et al.]. Braslia: Ministrio da
Cincia, Tecnologia e Inovao, 2015.
83 p. il.
Contedo: Introduo geral / Adriano da Silva Campos, Bruno Loureno Diaz, Ekaterina
Akimovana Botovchenco Rivera, Jos Mauro Granjeiro, Luisa Maria Gomes de Macedo Braga,
Marcel Frajblat, Marco Antonio Stephano Anfbios e serpentes mantidos em instalaes de
instituies de ensino e pesquisa cientfica / Carlos Alberto Gonalves Silva Jared, Kathleen
Fernandes Grego, Marta Maria Antoniazzi, Svio Stefanini SantAnna, Selma Maria Almeida
Santos, Vania Gomes de Moura Mattaraia.
ISBN: 9788588063280
1. Anfbios. 2. Pesquisa cientfica. 3. Projeto de Pesquisa. I. Ttulo.
CDU 636.028
CONCEA
CONSELHO NACIONAL DE CONTROLE DE EXPERIMENTAO ANIMAL
fascculos
GUIA BRASILEIRO DE PRODUO, MANUTENO OU UTILIZAO DE
ANIMAIS EM ATIVIDADES DE ENSINO OU PESQUISA CIENTFICA
Sumrio dos Fascculos
1.
Introduo Geral
2.
Roedores e Lagomorfos mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica
3.
Caninos e felinos domsticos mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica
4.
Primatas no humanos mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica
5A. Peixes mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica I

5B. Peixes mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica II
6. Anfbios e serpentes mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa

cientfica
7A. Pequenos Ruminantes mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica
7B. Grandes Ruminantes mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica
8.
Equdeos mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica
9.
Sunos mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica
10. Aves mantidas em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica

11. Estudos conduzidos com animais silvestres mantidos fora de instalaes de instituies de ensino ou
pesquisa cientfica
12. Estudos conduzidos com animais domsticos mantidos fora de instalaes de instituies de ensino ou
pesquisa cientfica
13. Reptis (exceto serpentes) mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica
14. Animais Silvestres de vida livre
Sumrio
FASCCULO 6
INTRODUO GERAL
1 Bem-estar animal
2 Mtodos alternativos ao uso de animais
12
3 Planejamento de novos projetos
14
4 Obteno de aprovao para novos protocolos de pesquisa
35
5 Referncias bibliogrficas
38
ANFBIOS E SERPENTES MANTIDOS EM INSTALAES DE 40

INSTITUIES DE ENSINO OU PESQUISA CIENTFICA
ANFBIOS

1 Introduo
41

2 Captura no campo
41
3 Instalaes animais
43
4 Eutansia
50
5 Doenas mais comuns observadas no cativeiro
50
52
SERPENTES

1 Introduo
53

2 Instalaes Animais
53
3 Procedimentos de manejo
60
4 Procedimentos
65
5 Cuidados veterinrios
68
6 tica e bem-estar animal no uso de serpentes em laboratrio
73
74
ANEXO I
77
REQUISITOS MNIMOS PARA PRODUO, MANUTENO OU UTILIZAO

DE SERPENTES PARA ATIVIDADES DE ENSINO OU PESQUISA CIENTFICA
77
ANEXO II
78
Referncias bibliogrficas
REQUISITOS MNIMOS PARA PRODUO, MANUTENO OU UTILIZAO
DE ANFBIOS PARA ATIVIDADES DE ENSINO OU PESQUISA CIENTFICA
81
83
Introduo
GERAL
Guia Brasileiro de Produo, Manuteno ou Utilizao de Animais em Atividades de Ensino ou Pesquisa Cientfica
introduo geral
Guia brasileiro de produo, manuteno ou utilizao de animais

em atividades de ensino ou pesquisa cientfica
INTRODUO GERAL
Coordenador:
Bruno Loureno Diaz Universidade Federal do Rio de Janeiro
Autores:

Adriano da Silva Campos Fundao Oswaldo Cruz

Bruno Loureno Diaz Universidade Federal do Rio de Janeiro
Ekaterina Akimovna Botovchenco Rivera Universidade Federal de Gois
Jos Mauro Granjeiro Instituto Nacional de Metrologia, Qualidade e Tecnologia
Luisa Maria Gomes de Macedo Braga Pontifcia Universidade Catlica do Rio Grande do Sul
Marcel Frajblat Universidade Federal do Rio de Janeiro
Marco Antonio Stephano Universidade de So Paulo
INTRODUO GERAL
O Guia Brasileiro de Produo, Manuteno ou Utilizao de Animais em Atividades de Ensino ou Pesquisa
Cientfica (Guia) contempla uma das competncias do Conselho Nacional de Controle de Experimentao
Animal (Concea).
A Lei Federal 11.794, que em seu captulo II, artigo 4, criou o Concea, representa uma mudana de paradigma
no que tange ao uso de animais vertebrados para ensino e pesquisa no Brasil. Como Lei Federal, gerou condies
para que se estabelecesse uma poltica nacional para o uso de animais no ensino e na pesquisa. Nesse sentido,
a pertinncia, bem como a anlise crtica da real necessidade do uso de animais em situaes experimentais,
constituem bases imprescindveis para que a sociedade como um todo compreenda e aceite como justificvel
a participao de animais em procedimentos didticos e cientficos. Tarefa difcil que no se consolida sem a
introduo de normas, diretrizes e guias que visem orientar a todos que utilizam animais nessas reas.
A construo deste GUIA resulta de um trabalho do Concea em conjunto com especialistas, constituindo-se em
um documento que tem por finalidade nortear pesquisadores quanto ao uso de animais para ensino e pesquisa.
Deve-se ressaltar que este Guia se aplica aos animais do filo Chordata, subfilo Vertebrata, utilizados em atividades
de ensino e pesquisa, conforme prev a Lei 11.794/08.
Este documento, alm de considerar as particularidades e necessidades de nossas instituies de ensino,
laboratrios e instalaes animais, usou, a ttulo de orientao, Guidelines internacionais com o objetivo de
ofertar elementos para que os usurios possam priorizar o bem-estar animal e minimizar a dor e as consequncias
negativas da manipulao dos animais.
Sero apresentadas formas de como identificar e reconhecer evidncias de dor e distresse e a potencial relao
destes com a manipulao animal. Dar aos usurios indicaes de como desenvolver estratgias para minimizar
situaes consideradas distressantes e de como manter e incrementar o bem-estar animal, alm de oportunizar
uma reflexo sobre a necessidade do uso de animais para atingir os objetivos de seus projetos de pesquisa.
Adicionalmente, identifica as estruturas mnimas necessrias s edificaes em que os animais so criados,
mantidos ou submetidos aos experimentos, bem como os equipamentos necessrios para mant-los com
qualidade sanitria e bem-estar.
1a Edio | Braslia, 31 de maro de 2016
introduo geral
O Guia traz orientaes aos usurios para o estabelecimento de uma reflexo crtica ao uso dos animais, de
uma percepo da relao custo/benefcio e do valor intrnseco aos resultados pretendidos em seus projetos de
pesquisa e atividades didticas. Preenchidas essas condies imperativo que os usurios recebam previamente,
ao incio de suas atividades com animais, a aprovao da Comisso de tica no Uso de Animais, por meio do
envio de formulrios de proposta de uso animal (Formulrio unificado para solicitao de autorizao para uso
de animais em ensino e/ou pesquisa; em site Concea MCTI).
A percepo de que os animais de experimentao so seres sencientes e que seu uso pode contribuir para
a gerao de conhecimento deve ser acompanhada da insero dos pesquisadores aos conceitos dos 3Rs
(reduction, refinement, replacement), que no Brasil so traduzidos como Reduo, Refinamento e Substituio.
Vale enfatizar que o no cumprimento das orientaes estabelecidas neste Guia para produo, manuteno
ou utilizao de animais em atividades de ensino ou pesquisa poder incorrer em sanes administrativas, bem
como, posteriormente, em sanes penais, caso sejam configurados maus tratos.
1 BEM-ESTAR ANIMAL
O cuidado com animais em atividades de ensino ou pesquisa era limitado a prover manejo e alojamento
adequados aos animais, com pessoas capacitadas, objetivando assim, um mnimo de variveis em resultados de
pesquisas. Atualmente persistem as mesmas exigncias, todavia com especial ateno ao bem-estar dos animais.
Nesse sentido, o status atual da Cincia considera a somatria da excelncia de slidas bases cientficas com o
bem-estar animal.
A lei 11.794/08, que regulamenta a utilizao animal em nosso pas, transformou o bem-estar dos animais no s
em uma questo tica e humanitria, mas tambm em uma questo legal.
Existem vrias definies de bem-estar animal e quase todas o caracterizam como um estado onde h equilbrio
fsico e mental do animal com o seu ambiente. Porm, mais do que buscar definies, o objetivo de cada um
deve ser o de prover condies aos animais para que suas necessidades possam ser satisfeitas e danos possam
ser evitados. importante saber reconhecer se o animal est em bem-estar ou no, para que se possa tomar
providncias quando necessrio. Com essa premissa em mente alguns pontos devero ser levados em considerao
pelo pesquisador ou pelo tcnico ao pensar no bem-estar dos animais que sero utilizados.
importante salientar que uma proposta de utilizao de animais deve avaliar, sempre, a relao custo (sofrimento dos
animais) versus benefcio (resultados advindos da pesquisa ou atividade didtica). No se pode deixar de citar que o custo
para o bem-estar de animais produzidos, mantidos ou usados para procedimentos cientficos possui dois componentes
distintos: o primeiro o custo inerente que compreende os aspectos negativos da produo e cuidados e o segundo o
custo direto (danos) resultante dos procedimentos experimentais aplicados (RUSSELL & BURCH, 1959).
Outro aspecto a ser considerado o de lembrar que a utilizao de animais na pesquisa ou ensino sempre
impactar negativamente no seu bem-estar; seja porque os animais sero expostos a manipulaes diversas;
a alteraes genticas ou somente por mant-los em ambientes padronizados, que podem no preencher
totalmente suas necessidades e adaptaes.
introduo geral
A elaborao do projeto de pesquisa ou atividade didtica deve levar em considerao os seguintes aspectos:
estar ciente de que a dor e o sofrimento dos animais devem ser minimizados ou evitados. Este item to
importante quanto alcanar os objetivos cientficos ou didticos;
seguir os princpios ticos da utilizao de animais em atividades de ensino ou pesquisa cientfica e os
conceitos dos 3Rs;
conhecer a biologia e a etologia da espcie que ser utilizada. Lembrar as diferenas entre espcies e que o
bem-estar possui dois componentes: o fsico e o comportamental;
documentao da atividade didtica por meio de filmagens, gravaes ou fotografias de forma a permitir
sua reproduo para ilustrar prticas futuras, evitando-se a repetio desnecessria de procedimentos
didticos com animais;
prover alojamento, ambiente, alimentao e controle ambiental adequados para a espcie;
realizar manejo adequado para a espcie e prever que ele seja executado por pessoas treinadas para esse
fim, pois a intensidade de sofrimento causado pelo mau manejo e mau alojamento muitas vezes supera o
sofrimento causado pelos procedimentos experimentais;
possuir equipe tcnica devidamente treinada e capacitada;
ter mdico veterinrio responsvel pela sade e bem-estar dos animais;
apresentar seu projeto Comisso de tica no Uso de Animais pertinente antes de iniciar sua execuo.
1.1 Definies: dor, distresse e sofrimento

Dor, distresse e sofrimento so termos que descrevem basicamente estados humanos de percepo e experincia.
Portanto, difcil transferir essas definies para animais utilizados em atividades de ensino e pesquisa. De
maneira geral, as seguintes definies podem ser atribudas:
a dor pode ser definida como uma experincia sensorial e emocional desagradvel associada a uma leso real
ou potencial;
o distresse a incapacidade de superar uma experincia estressante levando a uma ruptura do bem-estar
individual;
o sofrimento qualquer experincia cuja emoo ligada a ele negativa. Geralmente est associada dor e
ao comprometimento do bem-estar.
O pessoal envolvido na utilizao animal deve conhecer os conceitos de dor, distresse e sofrimento e saber
como reconhecer, avaliar, controlar e, preferencialmente, prevenir essa experincia em seus animais. No h
um consenso sobre a definio desses termos, mas, para o propsito deste Guia, sero usadas as definies da
Diretriz Brasileira para o Cuidado e a Utilizao de Animais para fins Cientficos e Didticos DBCA.
10
introduo geral
1.2 Efeitos do bem-estar de um animal em resultados cientficos

A elaborao de um bom desenho experimental essencial para o sucesso de um estudo, alm de tambm ser
um desafio quando sistemas biolgicos complexos, como os animais so utilizados. O ideal us-los em um
estado fisiolgico estvel e definido, de forma que a resposta varivel pesquisada no seja perturbada por
fatores indesejados. Em estudos com animais, a ausncia do controle desses fatores pode levar interpretao
incorreta dos dados devido a possveis interferncias nos efeitos de um tratamento. Especial ateno deve ser
dada dor e ao distresse, devido complexidade e amplitude das respostas fisiolgicas e comportamentais
associadas presena desses fatores durante a coleta e interpretao de dados. A dor e o distresse devem ser
sempre minimizados de acordo com o objetivo do estudo, para que sejam evitadas alteraes fisiolgicas e
comportamentais associadas a esses fatores.
Alm dos efeitos dos procedimentos da pesquisa no seu bem-estar, os animais podem tambm ser expostos a
uma srie de fatores ambientais que causam stress. Entretanto, quando esses efeitos so incidentais e no fazem
parte do protocolo, os fatores que causam tais alteraes devem ser eliminados ou controlados, de forma a no
interferirem na coleta de dados e interpretao de resultados.
Claramente, no desenho e execuo de protocolos, evitar efeitos indesejados ao bem-estar de animais envolve
muito mais que a seleo de agentes anestsicos ou analgsicos adequados ou o fornecimento apropriado de
gua, comida, temperatura, umidade ou luz. A boa prtica cientfica tem total interesse na preservao do bemestar dos animais utilizados e na identificao, controle e, sempre que possvel, na eliminao dos fatores que
possam causar respostas fisiolgicas ou comportamentais associadas com estresse ou dor. Quando o estresse (ou
os fatores estressantes) ou a dor fazem parte de um procedimento de pesquisa, estratgias para minimizar ou
controlar esses efeitos so componentes essenciais do desenho experimental.
Se o bem-estar de um animal for comprometido, as consequncias podem incluir:
aumento da variabilidade nos dados;
necessidade de um maior nmero de animais;
dificuldade na reprodutibilidade dos resultados;
ausncia de dados;
credibilidade reduzida dos resultados;
resultados que no podem ser aplicados a outras situaes;
resultados impublicveis;
comprometimento na universalidade experimental;
uso desnecessrio de vidas.
Qualquer resposta a um fator estressor que resulte em alteraes nas medidas fisiolgicas e comportamentais,
por mais breve que seja, pode influenciar a confiabilidade, reprodutibilidade e interpretao dos dados.
11
introduo geral
2 MTODOS ALTERNATIVOS AO USO DE ANIMAIS

O uso de animais nas Cincias da Vida remonta Grcia antiga e aos primeiros experimentos mdicos. Durante
sculos, mdicos e pesquisadores utilizaram animais para melhorar seus conhecimentos sobre a forma como os
vrios rgos e sistemas do corpo humano funcionavam, bem como para aprimorar suas habilidades cirrgicas.
A ascenso da cincia biomdica moderna no sculo XIX causou um aumento no nmero de animais
utilizados em experincias, bem como na resistncia vivisseco. A publicao do livro Principles of Human
Experimental Technique pelos pesquisadores William Russel e Rex Burch em 1959 iniciou o movimento
de proteo aos animais usados em pesquisa e representou um marco na discusso sobre a utilizao de
animais para a avaliao de toxicidade. A partir desse movimento, o princpio dos 3Rs (Reduction, Refinement
e Replacement) para o uso de animais foi estabelecido: a reduo reflete a obteno de nvel equiparvel
de informao com o uso de menos animais; o refinamento promove o alvio ou a minimizao da dor,
sofrimento ou estresse do animal; a substituio estabelece que um determinado objetivo seja alcanado
sem o uso de animais vertebrados vivos. De fato, mtodos alternativos podem ser definidos como qualquer
mtodo que possa ser usado para substituir, reduzir ou refinar o uso de animais na pesquisa biomdica,
ensaios ou ensino.
Em 1969, a criao, no Reino Unido, do Fund for the Replacement of Animals in Medical Experiments (FRAME),
rgo para promover junto na comunidade cientfica o conceito e o desenvolvimento de mtodos alternativos,
foi a primeira ao em favor do princpio dos 3Rs.
Nos anos posteriores, o avano da cincia evidenciou as diferenas metablicas e de respostas que controlam a
homeostasia tecidual entre animais no humanos e humanos. A necessidade de modelos in vitro mais apropriados
tornou-se ainda mais evidente, iniciando-se, ento, uma nova fase de abordagem toxicolgica. Nas dcadas
seguintes os pesquisadores e defensores do bem-estar animal se uniram em torno de um objetivo comum:
encontrar alternativas cientificamente validadas para os testes feitos em animais.
A poltica declarada das instituies europeias, desde a implantao do Animal welfare guideline em 1986 por
meio da Diretiva 86/609/EC, de estimular e desenvolver o uso de mtodos alternativos ao uso de animais. Nela
fica estabelecido que uma experincia no poder ser executada em animal se outro mtodo cientificamente
satisfatrio, que no implique na utilizao de um animal, seja razovel e praticamente possvel. Vrios esforos
foram e tm sido efetuados para a busca de alternativas, com a criao de centros dedicados ao desenvolvimento
e validao de mtodos alternativos.
Em 1989 foi criado, na Alemanha, o Zentrealstelle zur ErfassungBewertung von Ersatz und Erganzungsmethoden
zum Tierversuch National Centre for Documentation and Evaluation of Alternative Methodos to Animal
Experiments (ZEBET). Em 1991 foi criado o European Centre for the Validation of Alternative Methods (ECVAM)
a partir da Diretiva 86/609/EC com objetivo de desenvolver e coordenar a validao de mtodos alternativos ao
uso de animais na Comunidade Europeia.
Em 1997 as agncias governamentais dos Estados Unidos formaram o Interagency Coordinating Center for the
Validation of Alternative Methods (ICCVAM). O ICCVAM composto por 15 agncias regulatrias e de pesquisa,
entre as quais se incluem a Environmental Protection Agency (EPA), a Food and Drug Administration (FDA) e a
Agency for Toxic Substances and Disease Registry (ATSDR), sendo que estas fornecem ou utilizam informaes
12
introduo geral
dos testes toxicolgicos para o processo de avaliao do risco. O Comit coordena, por meio das agncias, a
discusso relativa ao desenvolvimento, validao, aceitao e harmonizao nacional e internacional dos ensaios
toxicolgicos, por intermdio do governo federal dos Estados Unidos.
Da mesma forma, outros pases estabeleceram centros de validao: em 2005, o governo japons criou o Japanese
Centre for the Validation of Alternative Methods (JaCVAM) e em 2012 foi estabelecido o Centro Brasileiro de
Validao de Mtodos Alternativos (BraCVAM), fruto da cooperao entre o Instituto Nacional de Controle de
Qualidade em Sade (INCQS) da Fundao Oswaldo Cruz (Fiocruz) e a Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
(Anvisa) (DOU, Seo 3, n. 13, p. 122, 18/01/212).
Em 2003 a stima emenda (2003/15/EC) da Diretriz de cosmticos (76/768/EEC) proibiu, nos pases-membros
da Unio Europeia, o teste de ingredientes de cosmticos, do produto final acabado em animais (testing ban) e
proibiu a comercializao de produtos cosmticos acabados (ou seus ingredientes) que tenham sido testados em
animais (market ban). O testing ban e o market ban esto em vigor desde 2009 e 2013, respectivamente.
De forma similar, a regulamentao de qumicos (Reach) da Comisso Europeia, em vigor desde 2007, evita
os testes em animais e prefere os testes alternativos in vitro. O propsito do Reach registro, avaliao e
autorizao de qumicos para sistematicamente avaliar os riscos para a sade humana e ambiental de mais de
30.000 substncias qumicas que so produzidas ou importadas para a Comunidade Europeia em um volume
de mais de uma tonelada por ano. No sentido de minimizar e racionalizar o uso de animais para estudos de
toxicologia, o planejamento deve incluir a busca de informaes relacionadas molcula (pKa, pH, estrutura
qumica, caracterizao, etc.) que poder determinar a indicao de vias de administrao ou de exposio
por meio de clculos, eliminando a possibilidade de procedimentos desnecessrios. Importante e relevante
destaque vem sendo dado s anlises in silico para identificao preliminar de molculas no interessantes e
evitar testes in vivo desnecessrios.
Diante desse panorama regulatrio, a Unio Europeia, com o intuito de aumentar o desenvolvimento de mtodos
alternativos, adotou a Diretiva 2010/63/EU que estabelece o ECVAM como laboratrio de referncia no mbito da
Unio, sendo este agora denominado European Union Reference Laboratory ECVAM (UERL ECVAM), responsvel
por coordenar e promover o desenvolvimento de mtodos alternativos. A partir tambm dessa Diretiva de
2010, os estados-membros foram convocados a contribuir para essa atividade crucial identificando e indicando
laboratrios nacionais qualificados, garantindo a promoo de mtodos alternativos no nvel nacional.
A Organizao para a Cooperao e Desenvolvimento Econmico (OCDE) organizao intergovernamental
constituda de 34 pases da Amrica do Norte, Europa e Pacfico com objetivo de coordenar e harmonizar
suas polticas, debater assuntos de interesses econmicos, sociais e ambientais, e colaborar para fazer frente
aos problemas internacionais desempenha um papel fundamental na harmonizao dos mtodos para
classificao de substncias qumicas. As diretrizes de ensaios da OCDE so uma coleo de mtodos de
ensaio, internacionalmente aceitos, que so utilizados por laboratrios independentes, governos e indstrias
para determinar a segurana dos produtos qumicos e preparaes qumicas, incluindo agrotxicos e produtos
qumicos industriais. Eles cobrem os testes para as propriedades fsico-qumicas de produtos qumicos (seo 1),
os efeitos ambientais (seo 2), degradao e acmulo no meio ambiente (seo 3), efeitos na sade humana
(seo 4) e outras reas (seo 5). De especial interesse, na seo 4 que os mtodos alternativos ao uso de
animais so publicados (http://www.oecd.org/env/ehs/testing/oecdguidelinesforthetestingofchemicals.htm).
13
introduo geral
No Brasil, a responsabilidade de monitorar e avaliar a introduo de tcnicas alternativas que substituam

a utilizao de animais em atividades de ensino ou pesquisa do Concea. Essa entidade responsvel por
credenciar as instituies que utilizem animais em seus trabalhos, alm de criar as normas brasileiras de produo
e uso de animais. Em 2014 a Resoluo Normativa n 17 do Concea estabeleceu o processo de reconhecimento
de mtodos alternativos no Brasil e determinou o prazo para a substituio do uso de animais por mtodos
alternativos reconhecidos.
De forma complementar s leis nacionais, o Ministrio da Cincia, Tecnologia e Inovao (MCTI) estabeleceu,
por meio da Portaria n 491 de 03 de julho de 2012, a Rede Nacional de Mtodos Alternativos (Renama, http://
renama.org.br/), que tem por objetivo:
estimular a implantao de ensaios alternativos ao uso de animais por meio do auxlio e do treinamento
tcnico nas metodologias necessrias;
monitorar periodicamente o desempenho dos laboratrios associados por meio de comparaes interlaboratoriais;
promover a qualidade dos ensaios mediante o desenvolvimento de materiais de referncia, qumicos e
biolgicos certificados, quando aplicvel;
incentivar a implementao do sistema de qualidade laboratorial e dos princpios das boas prticas de
laboratrio (BPL);
contribuir para o desenvolvimento, a validao e a certificao de novos mtodos alternativos ao uso de
animais.
A Renama disponibilizar, por meio de uma rede de laboratrios associados, os mtodos alternativos ao uso
de animais validados e disponveis na OCDE, observando os princpios de boas prticas de laboratrio. Dessa
forma, a Renama contribuir para a garantia da qualidade dos servios ofertados ao setor produtivo e para o
aumento, natural, da sua competitividade internacional, uma vez que os mtodos alternativos ao uso de animais
representam muitas vezes barreiras tcnicas exportao (legislaes europeias anteriormente comentadas).
H um amplo escopo para a aplicao dos 3Rs (Substituio, Reduo e Refinamento) no uso de animais em
estudos toxicolgicos. Cada vez mais, alternativas validadas utilizao de animais sencientes so utilizadas
em testes de toxicidade e, nesse sentido, a validao de um mtodo definida como um processo pelo qual a
confiabilidade e relevncia de um procedimento so estabelecidas para um fim especfico. Todavia, nas situaes
em que a finalidade regulatria, devero ser usados os delineamentos propostos nos guias internacionalmente
aceitos para esse fim, uma vez que s esto disponibilizados aqueles que se consideram validados.
3 PLANEJAMENTO DE NOVOS PROJETOS

Esta seo fornece informaes para auxiliar pesquisadores e docentes a decidirem se experimentos com animais
so necessrios para atingir os objetivos propostos. Quando o uso dos animais justificado, existem informaes
para todas as etapas da conduo da pesquisa ou atividade didtica que os envolva. Entre elas destacam-se: a
14
introduo geral
escolha correta do animal, sua origem, a forma de seu transporte e o tipo de abrigo, alimentao e ambiente;
o planejamento do experimento ou atividade didtica; a previso e minimizao da dor e das repercusses
negativas para a sade do animal; o treinamento de pessoal e a publicao dos dados.
Pesquisadores e docentes so responsveis tica e legalmente por garantir que os princpios dos 3Rs sejam
utilizados em seus projetos de pesquisa ou atividades didticas. Antes de desenvolver um projeto de pesquisa
que empregue animais, o pesquisador dever considerar:
se o uso de animais proposto justificado;
o estado da arte (avaliar se projetos similares j foram realizados);
se os objetivos do projeto podem ser alcanados por meio de mtodos alternativos, tais como cultura de
tecidos, modelos matemticos, mtodos in silico, etc.
Os pesquisadores e os docentes devem avaliar se os benefcios potenciais do conhecimento cientfico
gerado se sobrepem s consequncias negativas decorrentes da manipulao do animal. As informaes
contidas nesta seo devem ser consideradas pelos pesquisadores e pelos docentes antes de submeterem
uma proposta de uso de animais Comisso de tica no Uso de Animais (Ceua) pertinente. Os projetos
devem considerar o menor nmero possvel de animais (ou quantidade de tecido animal) que conduza ao
mximo de informaes cientificamente vlidas e os mtodos utilizados na manipulao devem minimizar o
impacto negativo sobre os animais.
A colaborao entre pesquisadores (intra e interinstitucional) concorre para reduzir o nmero de animais ou
para a quantidade de tecido animal necessria para conduzir um estudo ou responder a uma questo especfica
do projeto de pesquisa. Os pesquisadores podem tambm colaborar para o refinamento de metodologias,
confeccionando, por exemplo, procedimentos operacionais padro que visem ao incremento do bem-estar
animal e manuteno dos padres ticos em pesquisa.
Para projetos a serem conduzidos em mais de uma instituio, a Ceua de cada uma desta dever analisar, aprovar
e monitorar o componente do projeto a ser realizado em instalaes sob sua responsabilidade.
Atividades cientficas envolvendo animais devem resultar de um esforo colaborativo entre pesquisadores,
especialistas em cuidado animal, equipe tcnica, professores e alunos. Para esse fim, todos os que trabalham
com animais em atividades de ensino ou pesquisa devem ter treinamento e suporte adequados e, dessa forma,
cuidar e utilizar animais em obedincia ao Concea.
Isso garantir que:
a dor e o desconforto nos animais sero mnimos;
todo o pessoal envolvido possua o conhecimento e as habilidades necessrias ao uso de animais;
a segurana pessoal daqueles que realizaro o estudo ser mantida durante o manuseio do animal;
os melhores resultados cientficos sero atingidos.
15
introduo geral
O fornecimento de treinamento apropriado (especfico de um determinado procedimento e espcie especfica)

antes do incio de um projeto responsabilidade da instituio. O treinamento dever ser fornecido conforme a
necessidade e deve incluir aspectos tcnicos e ticos em relao ao monitoramento dos animais. Alm disso, as
instituies de pesquisa devero garantir que haja pessoas suficientes e com as habilidades apropriadas para os
cuidados dos animais.
3.1 Modelos Animais

Os seres vivos compartilham propriedades e caractersticas. A ideia de estudar caractersticas comuns entre as
espcies a fim de compreender a funo das espcies advm, no mnimo, da poca da obra Historia Animalium,
de Aristteles, e sustenta o valor da medicina comparativa.
Descobertas fundamentais acerca da fisiologia e da fisiopatologia advieram de estudos comparativos utilizando
animais. Nesse contexto, esses organismos constituem-se em modelos ou substitutos para estudos sobre os
humanos ou outros animais.
Modelos animais podem ser utilizados para investigar a fisiologia celular, tecidual de estruturas e rgos e
permitem avaliar a integrao de rgos e sistemas com o organismo ou em uma estrutura similar. Ofertam a
possibilidade de compreender mecanismos subjacentes a doenas.
Na medida em que o conceito de modelo animal se aplica a toda utilizao de animais para fins cientficos,
ento, de forma geral, os mesmos critrios devem ser aplicados para a seleo e validao de um modelo animal
especfico. Inicialmente, os pesquisadores devem definir os objetivos do projeto e determinar qual o nvel do
sistema biolgico que relevante para a sua conduo. Por exemplo, seus estudos envolvero um tipo especfico
de clula, tecido, rgo ou a interao de rgos? Tendo a percepo de qual o sistema biolgico envolvido, o
pesquisador poder, ento, decidir a melhor espcie ou linhagem animal que representa mais adequadamente o
sistema biolgico a ser investigado. A opo por um determinado modelo animal deve ter consistncia cientfica
e no ser influenciada por convenincia ou oramento.
3.1.1 Escolhendo o animal adequado
A correta escolha do modelo animal fundamental para o sucesso de um projeto de pesquisa. Alm disso,
h de se considerar a variabilidade biolgica que pode interferir na qualidade dos resultados ou no rigor do
procedimento experimental em detectar efeitos de tratamentos. Com isso, a gerao de dados cientificamente
no vlidos pode acarretar no aumento do nmero de animais necessrios para manter um nvel adequado de
preciso. Por outro lado, a prpria variabilidade biolgica pode ser relevante para a pesquisa. Por causa disso, as
razes para a escolha de uma determinada espcie devem estar claramente justificadas na proposta (ver Seo
4.4.1 da DBCA para informaes sobre a seleo de animais apropriados).
Questes que devem ser consideradas na deciso do animal adequado:
Espcie: garantir que a espcie seja a mais apropriada para o protocolo de pesquisa proposto.
Raa, linhagem e variabilidade gentica: existe variao biolgica entre as raas das espcies animais. A
variabilidade pode ser reduzida escolhendo apropriadamente o modelo animal.
16
introduo geral
A variabilidade gentica pode reduzir a preciso dos resultados e dessa forma levar ao aumento no
nmero de animais necessrios. Outros aspectos importantes so a definio gentica de espcies
hbridas que de difcil controle e a dificuldade na determinao da equivalncia de colnias
distintas de animais.
Linhagens isognicas possuem um fentipo mais uniforme do que heterognicas, permitindo a

melhor deteco de respostas ao tratamento, reduzindo o nmero de animais necessrios.
Estado sanitrio: ter controle e conhecimento sobre o estado de sade dos animais permite melhor
compreenso dos efeitos e consequncias especficas da manipulao. O fornecedor deve dar atestados
sanitrios que esclaream ao pesquisador quanto ao estado sanitrio dos animais com os quais ele ir
trabalhar.
Comportamento: garantir que o animal escolhido tenha comportamento adequado ao ambiente onde o
estudo ser desenvolvido. Os pesquisadores devem, sempre que possvel, selecionar espcies domesticadas
e animais habituados ou acostumados a humanos e ambientes antropizados.
3.1.2 Origem dos animais
A maior parte dos animais utilizados em atividades de ensino ou pesquisa produzida especificamente para esse
fim, principalmente os roedores. Por essa razo os animais de cativeiro, ao contrrio de animais capturados em
estado selvagem, devem ser prioritariamente utilizados. A aquisio de animais para utilizao nos projetos de
pesquisa ou procedimentos de ensino, quando houver no Brasil a produo da espcie/linhagem de escolha,
s pode ser feita de instituies credenciadas no Concea. Nos casos da aquisio por meio de fornecedores
eventuais, garantir que os animais a serem utilizados tenham qualidade condizente com os objetivos do estudo
responsabilidade do pesquisador principal e da Ceua de sua instituio.
imprescindvel que os pesquisadores definam a origem dos animais a serem utilizados nos projetos encaminhados
s Ceuas.
3.1.3 Transporte dos animais
O transporte de animais crtico devido aos vrios riscos a que esto sujeitos. Problemas diferentes podem surgir,
seja no transporte externo (de um estabelecimento para outro), seja no transporte interno (dentro das unidades,
entre barreiras, diferentes salas). Os pesquisadores e docentes devem estar cientes das regulamentaes
especficas para o transporte de animais. A troca de informaes claras entre a pessoa que despacha os animais
e a que os recebe vital para minimizar o tempo de permanncia dos animais em trnsito. Ateno especial deve
ser dada ao transporte de animais geneticamente modificados, que deve atender s exigncias da Comisso
Interna de Biossegurana e, quando necessrio, da Comisso Tcnica Nacional de Biossegurana.
Alguns fatores que podem causar estresse aos animais so: o barulho excessivo, movimento das gaiolas de
transporte e ambiente e pessoal estranhos. A extenso do estresse em um animal depende de sua espcie,
sexo, idade, sade, estgio de prenhez, nmero de animais viajando juntos e relaes sociais. O desconforto
dos animais afetado pela durao e condio do ambiente durante o transporte e pela qualidade do cuidado
dispensado ao longo da viagem.
17
introduo geral
As condies e agendamento de transporte devem ser planejados para levar em considerao extremos climticos,
necessidades especficas da espcie e contingncias.
Para minimizar o desconforto durante o transporte, os pesquisadores e docentes devem:
utilizar contineres seguros, confortveis e prova de fuga;
fornecer alimento e gua adequados sempre que possvel;
garantir que todo o pessoal responsvel pelo manuseio e transporte tenha capacitao para reconhecer sinais
de desconforto e dor e que seja capaz de atuar para mitigar;
assegurar que o tempo de transporte seja o mnimo possvel.
3.1.4 Aclimatao e quarentena
Animais so extremamente sensveis ao novo, seja o ambiente ou alteraes deste, outros animais ou
pessoas e esses fatores devem ser sempre considerados. Introduzir animais em um novo local, com as
respectivas mudanas em sua condio de vida e de grupos sociais, produz uma resposta estressante que,
embora possa ser temporria, pode levar ao distresse. Portanto, necessrio que os animais passem
por um perodo de aclimatao antes que sejam utilizados em atividades de ensino ou pesquisa. Quanto
extenso desse perodo, depende da espcie animal e, portanto, devem ser observadas todas as suas
exigncias.
Durante o perodo de aclimatao, os animais devem ser habituados ao manuseio e presena das pessoas que
trabalharo com eles. No caso de pesquisadores, esse perodo importante para que se familiarizem com o
comportamento normal dos animais. Indivduos que no se aclimatarem no devero ser utilizados na pesquisa.
As reas designadas para quarentena devem ser observadas com mais frequncia, e todas as observaes devem
ser registradas para que problemas possam ser identificados e medidas possam ser tomadas para san-los. O
tempo de durao da quarentena dever ser apropriado para que seja assegurada a sade dos animais que ali
esto e os seus congneres j alojados na instalao.
3.1.5 Alojamento e manejo
As condies ambientais afetam a biologia e a qualidade de vida dos animais. Para reduzir a variao nas respostas
decorrentes do ambiente, os animais devem ser mantidos em local seguro, apropriado e controlado.
Os alojamentos dos animais devem ser projetados, mantidos e manejados para atender s exigncias da espcie.
Necessidades comportamentais de cada espcie, incluindo a disponibilidade de espao para permitir a livre
movimentao e atividade, sono, privacidade, contato com outros da mesma espcie, enriquecimento ambiental,
entre outras, devem ser levadas em considerao. Os pesquisadores devem tomar precaues para prevenir o
acesso de pessoas no autorizadas, bem como ter planos de contingenciamento no caso de emergncias, como
falhas na ventilao, iluminao, aquecimento, refrigerao ou escape de indivduos.
18
introduo geral
Se um animal apresentar um estado sanitrio ou gentico diferente de outros da mesma instalao, pode ser
necessria a indicao de um local especfico para ele. Exigncias podem tambm ser direcionadas pelo estado
reprodutivo do animal, necessidades da pesquisa ou experincia anterior.
Necessidades ambientais especficas para uma espcie, tais como iluminao, temperatura, qualidade do ar,
ciclos apropriados de luz e proteo contra rudos excessivos e vibraes, devero ser atendidas. O acesso rpido
ao alimento e gua e o fornecimento regular de acomodaes limpas e livres de parasitas e patgenos tambm
precisam ser considerados.
Animais possuem necessidades especficas de nutrientes nos diferentes estgios de suas vidas. Ao fornecerem
dietas balanceadas e reconhecidas internacionalmente aos animais, os pesquisadores reduzem a variao dentro
e entre estudos e assim evitam a necessidade de duplicao de experimentos, reduzem o nmero de animais
necessrios e melhoram a qualidade de sua pesquisa.
A qualidade da dieta tambm pode ser afetada pelas condies de armazenamento dos alimentos e pela
frequncia de fornecimento.
3.2 Biossegurana
A biossegurana deve ser entendida como elemento de grande importncia e deve integrar-se rotineiramente
em qualquer atividade de ensino ou pesquisa envolvendo animais, principalmente naqueles laboratrios onde
os perigos (sejam qumicos, fsicos ou biolgicos) sejam maiores. A biossegurana o conjunto de aes voltadas
para a preveno, minimizao ou eliminao de riscos inerentes s atividades de pesquisa, produo, ensino,
desenvolvimento tecnolgico e prestao de servios, visando sade do homem, dos animais, do meio ambiente
e qualidade dos resultados. Biossegurana como condio de segurana deve ser alcanada por meio de um
conjunto de aes destinadas a prevenir, controlar, reduzir ou eliminar riscos inerentes s atividades realizadas
(DIRETRIZES GERAIS PARA O TRABALHO EM CONTENO COM AGENTES BIOLGICOS, 2010).
Os manuais de biossegurana tradicionalmente enfatizam o uso de boas prticas de laboratrio (BPL), no sentido
de prticas laboratoriais seguras (no confundir com a BPL relacionada gesto da qualidade no laboratrio), a
utilizao apropriada dos equipamentos de proteo, instalaes bem planejadas e construdas e procedimentos
que visam minimizar riscos de infeco ou acidentes involuntrios para trabalhadores do laboratrio, alm de
impedir a contaminao do ambiente externo.
No Brasil, a legislao vigente trata exclusivamente da biossegurana com organismo geneticamente modificado (OGM),
entretanto, existem regras de atuao profissional para organismos comuns ou no geneticamente modificados.
Deve-se obedecer s condies estabelecidas pela Comisso Tcnica Nacional de Biossegurana (CTNBio), que
atualmente define organismo como: toda entidade biolgica capaz de reproduzir ou transferir material gentico,
inclusive vrus e outras classes que venham a ser conhecidas (Resoluo Normativa N 2, de 27 de novembro de 2006).
Por outro lado, os setores que manipulam OGMs ficam, tambm, obrigados por lei a requisitarem o Certificado de
Qualidade em Biossegurana (CQB) CTNBio, conforme a Lei n 11.105, de 24 de maro de 2005, alm de atenderem
rigorosamente s RN emanadas da CTNBio na sua rea de atuao, sem o qu estaro trabalhando margem da
Lei. De grande relevncia a conscientizao de que a espinha dorsal da prtica da biossegurana so a avaliao de
risco e as autoinspees peridicas de biossegurana. Apesar das ferramentas disponveis para ajudar nessa avaliao,
o componente mais importante o julgamento profissional. Portanto, tais avaliaes devem ser executadas pelos
indivduos com experincia e conhecimento das caractersticas especficas dos organismos que so considerados para
19
introduo geral
uso. O domnio dos equipamentos laboratoriais, dos modelos animais e dos equipamentos de conteno que podem
ser utilizados, bem como das instalaes disponveis, fundamental.
3.2.1 Biossegurana em instalaes animais
A biossegurana em instalaes animais assume dimenso diferenciada de outras atividades uma vez que a presena dos
animais agrava o risco biolgico. A flora microbiana e parasitria, a produo de alrgenos e a agresso animal so capazes de
causar danos sade ou vida dos profissionais envolvidos nessa atividade. A produo constante de protenas eliminadas
pela urina, secrees e descamao da pele que so encontradas em suspenso no ar ou depositadas nos materiais e
equipamentos tornam as instalaes animais ambientes propcios para o desenvolvimento de reaes alrgicas nos
expostos. Fora isso, agresses animais podem causar ferimentos e determinar infeces. As instalaes animais onde se
realizam infeces experimentais assumem papel de maior importncia tendo em vista os riscos potenciais e efetivos das
atividades com agentes patognicos de diferentes classes de risco. Os riscos especficos ficam, portanto, na dependncia
das espcies animais envolvidas e da natureza da atividade de ensino ou pesquisa realizada.
Quanto s medidas especficas de segurana com agentes perigosos, deve ser dada especial ateno aos procedimentos
sobre cuidados e alojamento dos animais; armazenamento de agentes de risco e preveno contra perigos causados
por esses agentes; dosagem e administrao de medicamentos; manuseio de tecidos e fluidos corporais; eliminao de
excretas, cadveres ou carcaas; e proteo pessoal. Exige-se o emprego de equipamento de segurana especfico, bem
como um manejo adequado, alm de prticas laboratoriais seguras. Em suma, para uma segurana eficaz, necessrio
pessoal treinado e que siga rigorosamente as normas de proteo contra riscos. Claro que os indivduos que lidam
com animais em atividades de ensino ou pesquisa, em locais onde agentes infecciosos so utilizados, so expostos a
riscos maiores de exposio devido possibilidade de transmisso por mordidas, arranhes ou aerossis. Todos os
presentes nessas instalaes devem utilizar (tcnicos envolvidos diretamente no trabalho ou qualquer um presente
nas instalaes) equipamentos de proteo individual EPI. Todas as instalaes devem ser adequadas e credenciadas
pelo rgo competente, quando for o caso. Logo, um programa eficiente de sade, biossegurana e ambiente deve
concentrar seus esforos para que os riscos inerentes ao uso de animais sejam reduzidos a nveis aceitveis. Portanto,
cada instalao animal dever desenvolver ou adotar um manual de biossegurana ou de operaes que identifique os
riscos e que especifique as prticas e procedimentos para minimizar ou eliminar as exposies aos perigos.
3.3 Desenho da pesquisa cientfica

A pesquisa cientfica deve ser bem planejada e contar com um planejamento adequado (desenho da pesquisa).
O desenho deve estar associado a uma anlise estatstica de tal forma que se aproxime do menor nmero de
animais necessrios obteno de resultados vlidos, evitando, por conseguinte, o uso em excesso ou insuficiente
de modelos. Desenhos mal elaborados produzem resultados inconclusivos, conduzem repetio do estudo e ao
aumento no nmero de animais.
Os pesquisadores e as Ceuas devem garantir que os objetivos e as hipteses estejam plenamente considerados e
completos antes do incio de qualquer atividade envolvendo animais.
3.3.1 Anlise estatstica1
1
O Centro Nacional para a Substituio, Refinamento e Reduo de Animais para Pesquisa (NC3Rs) uma organizao do Reino Unido
que lidera a descoberta e a aplicao de novas tecnologias e estratgias para substituir, reduzir ou refinar o uso de animais para fins cientficos
(3Rs). Entre suas atividades, o NC3Rs desenvolveu um roteiro para auxiliar o delineamento experimental e anlise estatstica. A verso original
e em ingls desse roteiro pode ser encontrada no seguinte endereo eletrnico: http://www.nc3rs.org.uk/.
20
introduo geral
Como ressaltado anteriormente, desenhos envolvendo animais devem garantir que resultados sejam
estatisticamente vlidos e obtidos com o menor nmero possvel de indivduos. Os pesquisadores devem, sempre
que possvel, buscar orientao do bioestatstico de sua instituio para a elaborao do projeto a fim de que
saibam, antecipadamente, como os dados sero analisados.
Outro ponto que deve ser considerado ao desenhar uma pesquisa o tamanho da amostra. Uma amostragem
muito pequena no permitir que o efeito estudado seja detectado com algum grau de confiabilidade. Entretanto,
uma amostragem muito grande leva a um uso desnecessrio de animais.
Pesquisas bem concebidas e analisadas corretamente podem levar a uma reduo no uso de animais e aumentar
a validade cientfica dos resultados. Uma pesquisa bem concebida deve ser:
IMPARCIAL
Quando dois ou mais grupos so comparados, os animais nos grupos devem estar em ambientes idnticos e
serem semelhantes em todos os sentidos exceto pelos tratamentos aplicados. O vis pode ser minimizado por:
alocao aleatria dos animais aos diferentes grupos (um processo fsico necessrio, por exemplo, jogar
uma moeda, a escolha de um nmero);
assegurar que todos os procedimentos subsequentes (incluindo alojamento) sejam aplicados em uma ordem
aleatria;
garantir que os investigadores que analisam os resultados no tenham conhecimento do tratamento recebido
(duplo-cego) at a anlise estatstica final.
PODER DE ANLISE ADEQUADO (ou seja, uso de animais suficientes)
Pesquisas robustas so aquelas que tm a oportunidade mxima de detectar um efeito verdadeiro do que se
estuda. O poder de anlise (robustez) obtido por:
Uso de um nmero adequado de animais (tamanho da amostra);
Controle da variao intersujeito (por exemplo, usando a randomizao).
O tamanho da amostra deve ser determinado utilizando um mtodo formal, tal como poder de anlise ou usando
o mtodo da equao de recursos (ver abaixo). Embora o poder de anlise seja ampliado pelo aumento do
tamanho da amostra, uma pesquisa desnecessariamente grande envolver animais em excesso e desperdiar
recursos cientficos.
Variao controlada por meio da atribuio aleatria de animais de gentipos similares, de peso e idade
similares, que tiveram um ambiente semelhante ao longo de suas vidas. Variao devido a ritmos circadianos
ou flutuaes no ambiente muitas vezes podem ser reduzidos em delineamento adequado, por meio de uso de
bloco randomizado ou estudos do tipo quadrados latinos (Latin Squares).
O erro de medio deve ser minimizado por tcnica cuidadosa e boa instrumentao, mantendo o pesquisador
s cegas quanto alocao de tratamento.
21
introduo geral
Anlise do Poder: um mtodo de anlise do poder para comparar dois grupos, por exemplo, requer as seguintes
informaes:
tipo de teste estatstico a ser utilizado (por exemplo, um teste t ou o teste do qui-quadrado para comparar
duas propores);
nvel de significncia para ser utilizado (com frequncia um nvel de 5%);
poder estatstico exigido (geralmente 80%-90%);
lateralidade do teste (um teste de 2 lados usual);
tamanho do efeito de interesse biolgico (ou seja, quanto de uma diferena no efeito biolgico ou clnico
necessrio detectar);
estimativa do desvio padro (quando se comparam as mdias, deve vir de um estudo anterior).
O site StatPages.org oferece clculos on-line de tamanho da amostra combinando os fatores acima.
A equao de recursos: E = N (nmero de animais por tratamento x nmero de tratamentos) - T (nmero de
tratamentos), onde N = o nmero total de sujeitos (por exemplo, animais individuais ou grupos / gaiolas de
animais) e T = nmero de combinaes de tratamento, E (o tamanho da amostra) deve ser de aproximadamente
entre 10 e 20.
Por exemplo, uma pesquisa comparando quatro tratamentos, utilizando seis indivduos por tratamento,
ter N = 24 (6 x 4) e T = 4, ento E = 24 - 4 = 20. Isso est dentro da faixa aceitvel. No entanto, pode
haver boas razes para ir acima desse limite superior. Se E for 30 ou 40, a pesquisa pode ser muito grande,
possivelmente desperdiando recursos. Essa equao mais adequada para pequenas, no rotineiras e
mais complexas experincias usando animais que provavelmente sero analisadas pelo mtodo estatstico
de varincia (ANOVA).
TENHA UMA AMPLA FAIXA DE APLICABILIDADE
Muitas vezes til saber se resultados semelhantes so obtidos em machos e fmeas, em diferentes linhagens, ou
como resultado de dietas ou ambientes diferentes. Do mesmo modo, a resposta a um frmaco pode depender de
um tratamento prvio, do efeito de outras drogas, ou da via de administrao. Esses efeitos podem ser estudados
de forma eficiente utilizando desenhos fatoriais.
Desenhos fatoriais: podem ser usados para investigar o efeito de uma droga tanto em machos quanto em fmeas
sem fazer duas experincias separadas ou utilizando o dobro de animais. Simplesmente, em cada um dos dois
grupos a metade dos sujeitos so fmeas e a outra metade machos. Um estudo fatorial com poder adequado
mostrar se os dois sexos responderam da mesma forma, o que no possvel se os dois sexos forem usados em
pesquisas diferentes.
SEJA SIMPLES E EFICIENTE
Pesquisas no devem ser complicadas a ponto de erros serem cometidos em sua execuo, ou a anlise estatstica
tornar-se excessivamente complicada. Estudos-piloto pequenos devem ser utilizados antes de iniciar um grande estudo
22
introduo geral
para assegurar que ele logisticamente eficiente e para dar alguma indicao preliminar de resultados provveis.
Todas as pesquisas devem ser pr-planejadas e no podem ser alteradas enquanto estiverem em andamento.
INDIQUE A FAIXA DE CERTEZA
Cada pesquisa deve ser analisada estatisticamente de modo que os resultados possam ser utilizados para o
planeamento futuro. Uma anlise estatstica adequada deve indicar a faixa de incerteza nos resultados, ou a
medida de variao, normalmente indicada por nveis de significncia ou intervalos de confiana.
3.3.2 Mtodos utilizados
Antes de iniciar uma pesquisa, tambm importante certificar-se de que os mtodos utilizados foram planejados
para garantir o bem-estar dos animais, e que as variveis no controladas, o modelo escolhido e as condies
de alojamento foram levados em considerao. Fatores estressantes no ligados ao estudo podem causar uma
grande variao e afetar a preciso dos resultados. Outras variveis, tais como ritmos circadianos, erros de coleta
dos dados e a qualidade e validade dos reagentes, precisam ser ponderadas.
3.3.3 Aps a coleta de dados
As etapas finais do estudo (publicao dos resultados) tambm devem ser consideradas no planejamento do projeto.
A metodologia, os dados e suas anlises devem ser acessveis a outros pesquisadores e dessa forma podem contribuir
para a reduo e refinamento do uso de animais por outros grupos de pesquisa. Essa informao deve ser apresentada
de forma clara, precisa e com detalhes suficientes para permitir que ela seja entendida e replicada, incluindo:
os objetivos e hipteses da pesquisa;
os animais utilizados (ex.: espcies, linhagens, fontes, tipos, estado sanitrio);
condies de transporte e a durao do perodo de aclimatao antes do incio;
condies do alojamento do animal, da alimentao e da gua;
os mtodos estatsticos utilizados para analisar os dados obtidos.
3.4 Preveno da dor e do distresse potencial

Todo protocolo de pesquisa deve descrever claramente os pontos finais humanitrios (endpoints) que sero
utilizados. Esses pontos finais devem ser adequados para a espcie utilizada no estudo e o monitoramento das
condies deve ser feito para cada animal envolvido. Idealmente os objetivos cientficos do projeto de pesquisa
devem ser atingidos sem afetar negativamente o bem-estar animal. Entretanto, muitas vezes no possvel atingir
os objetivos nessa condio, assim deve se considerar: os requisitos cientficos do projeto; efeitos negativos
previstos e/ou esperados sobre o bem-estar dos animais; cintica provvel e progresso dos efeitos adversos;
indicadores preditivos precoces de efeitos adversos atuais ou iminentes.
As fases de um projeto que podem ter impacto negativo sobre a qualidade de vida dos animais no so limitadas
aos protocolos da pesquisa. Outras fontes potenciais de dor, estresse e distresse podem ser consideradas, tais
23
introduo geral
como captura, transporte, manuseio, conteno, alojamento, ambiente social e fsico e manipulao gentica. A
preveno de dor e distresse requer conhecimento do comportamento normal da espcie em questo e do que
pode ser esperado se o protocolo utilizado causar efeitos adversos.
3.4.1 Estudos-piloto (CN3Rs - http://www.nc3rs.org.uk/conducting-pilot-study)
Estudos-piloto podem ser utilizados para determinar os efeitos do protocolo de pesquisa no bem-estar dos
animais. Eles so valiosos no planejamento e gerenciamento do projeto de pesquisa, pois ajudam a refinar e
a reduzir o impacto adverso nos indivduos, antes que pesquisas empregando um grande nmero de animais
sejam realizadas.
Os estudos-piloto devem ser considerados como integrantes de um projeto ou protocolo como um todo,
especialmente para permitir a avaliao da viabilidade do projeto ou protocolo e a potencial insero ao
princpio dos 3Rs. Os estudos-piloto devem ser avaliados pela Ceua de acordo com os critrios normais
aplicados aprovao de estudos plenos. Os resultados do estudo-piloto devem ser considerados quando da
anlise pela Ceua do projeto pleno.
Estudo-piloto, ou de viabilidade, um pequeno estudo destinado a testar a logstica e reunir informaes antes
de um estudo mais amplo, a fim de melhorar a qualidade e eficincia deste ltimo. Ele pode revelar deficincias
na concepo de um projeto de pesquisa ou protocolo, que podero ser resolvidas antes que animais, tempo
e recursos sejam utilizados em vo. Uma boa estratgia de pesquisa requer um planejamento cuidadoso e o
estudo-piloto, muitas vezes, uma parte dessa estratgia.
Um estudo-piloto normalmente pequeno em comparao com a pesquisa principal e, portanto, pode fornecer
apenas informaes limitadas sobre as fontes e magnitude da variao das medidas. improvvel, por exemplo,
que um estudo-piloto isoladamente possa fornecer os dados adequados sobre a variabilidade e o poder da
anlise que determina o nmero de animais a serem includos em um estudo bem desenhado. Uma reviso
sistemtica da literatura, ou mesmo uma nica publicao, pode ser uma fonte mais adequada de informaes
sobre a variabilidade.
Questes logsticas que podem ser reveladas por um estudo-piloto
Um estudo-piloto pode identificar problemas logsticos. Como parte da estratgia de pesquisa os seguintes
fatores podem ser resolvidos antes da pesquisa principal:
verifique se as instrues dadas aos pesquisadores (por exemplo, procedimentos de randomizao) so
compreensveis;
verifique se os pesquisadores e tcnicos esto suficientemente qualificados para a execuo dos procedimentos;
verifique o funcionamento dos equipamentos;
verifique se o animal a ser includo pode executar uma tarefa (fsica ou cognitiva);
verifique a confiabilidade e validade dos resultados;
detecte se alguma tarefa muito difcil ou muito fcil, pois isso poder enviesar ou distorcer resultados;
24
introduo geral
avalie se o nvel de interveno apropriado (por exemplo, a dose de uma droga);

identifique os efeitos adversos (dor, sofrimento, angstia ou dano duradouro) causados pelo procedimento,
bem como a eficcia das aes para mitig-los (por exemplo, taxa de dose de analgesia e cronograma);
defina antes os pontos finais humanitrios.
O que fazer com os dados / informaes
As informaes obtidas sobre as questes logsticas devem ser incorporadas ao desenho da pesquisa principal.
Como o objetivo de um estudo-piloto avaliar a viabilidade de um estudo, muito raro apresentar mais que
um resumo dos dados estatsticos. Na verdade, os dados podem ser irrelevantes se problemas com os mtodos
forem descobertos.
Se um estudo-piloto no leva a modificaes de mtodos ou procedimentos, os resultados dele podem
ser incorporados na pesquisa principal. A estratgia de amostragem utilizada para selecionar os animais e a
possibilidade de mudanas ao longo do tempo devem ser cuidadosamente consideradas antes de incorporar
dados do estudo-piloto. Mesmo que os dados do estudo-piloto no sejam utilizados desse modo e, mesmo
que o desenho final seja muito diferente do piloto, til incluir informao sobre o estudo-piloto em quaisquer
publicaes ou relatrios provenientes da pesquisa principal, uma vez que pode contribuir para o desenho em
estudos futuros.
Pode ser necessrio levar a cabo um segundo estudo-piloto para avaliar a pesquisa principal ou, em alguns casos,
o estudo principal pode ter que ser abandonado.
3.4.2 Testes toxicolgicos
A toxicologia, segundo consenso entre as sociedades mundiais, o estudo dos efeitos adversos de agentes
qumicos, fsicos ou biolgicos sobre organismos vivos e sobre o ecossistema, incluindo a preveno e ou
minimizao desses efeitos.
Testes toxicolgicos podem identificar potenciais efeitos adversos sade ou demonstrar a segurana de novas
substncias qumicas e novos produtos, fornecendo assim a base para a salvaguarda da sade de animais no
humanos, humanos e do ambiente; esses testes so importantes para a anlise de risco. Testes ecotoxicolgicos
podem ser exigidos pela legislao para caracterizar perigos e para avaliao de risco ambiental tanto pela Agncia
Nacional de Vigilncia Sanitria (Anvisa) quanto pelos ministrios responsveis pelo registro de novas molculas
para variados fins.
Autoridades reguladoras nacionais e internacionais necessitam equilibrar as preocupaes entre o bem-estar
animal e a necessidade de obter informaes toxicolgicas. A toxicologia um campo cada vez mais harmonizado
internacionalmente e considera uma vasta gama de organizaes preocupadas com o desenvolvimento e validao
de testes alternativos.
Para que os estudos de segurana e risco de novos produtos para o meio ambiente, animais no humanos e para os
humanos sejam considerados por agncias regulatrias, necessrio que guias nacionais e os internacionalmente
aceitos sejam seguidos, bem como suas recomendaes. Com relao s atividades de ensino ou de pesquisa,
25
introduo geral
recomenda-se que esses mesmos guias sejam seguidos sempre que possvel, pois consideram os aspectos ticos,
a reduo do nmero de animais e o refinamento das tcnicas.
METODOLOGIAS ADOTADAS PARA AVALIAO DO RISCO TOXICOLGICO
Vrios protocolos internacionalmente aceitos esto disponveis para uso em estudos toxicolgicos baseados no
conceito dos mtodos alternativos (http://ihcp.jrc.ec.europa.eu/our_labs/eurl-ecvam - acessado em 14/08/2014)
e alguns exemplos esto listados a seguir:
toxicidade aguda Estudo da toxicidade produzida por uma substncia teste quando administrada uma ou
mais vezes em um perodo que no exceda 24 horas;
toxicidade subaguda Estudo da toxicidade produzida por uma substncia teste quando administrada
diariamente durante perodo no superior a um ms; os protocolos internacionais usualmente abrangem
perodo que pode variar entre 14 ou 28 dias;
toxicidade subcrnica Estudo da toxicidade em que a substncia teste administrada diariamente por, pelo
menos, 90 dias;
toxicidade crnica Estudo da toxicidade em que a substncia teste administrada diariamente por pelo
menos seis meses, com exigncias variveis para diferentes espcies e para as diferentes necessidades
investigativas;
irritao Avaliao de risco irritativo induzido por substncias, nos olhos, pele e mucosas;
carcinogenicidade Avaliao do potencial de uma substncia para causar o aparecimento de neoplasias
malgnas. Esses estudos so de longa durao, prolongando-se por quase toda a vida do animal (roedores) e,
diante dessa situao, recomenda-se que sejam desenvolvidos somente em instalaes animais com condies
sanitrias e estruturais capazes de manter a vida desses animais por longos perodos, sem interferncias, a
no ser aquelas previstas no protocolo aprovado pela Ceua da instituio. Existem substncias carcinognicas
genotxicas e outras no genotxicas;
genotoxicidade Estudos que avaliam a habilidade de uma substncia para induzir alteraes no material
gentico (DNA, RNA, nucleotdeos, cromossomas). De acordo com o tipo de dano causado ao material
gentico, as substncias so classificadas como: mutagnicas, clastognicas ou aneugnicas;
reproduo Estudos que visam a determinao do potencial de uma substncia para causar desenvolvimento
anormal no perodo pr-natal, incluindo-se os estudos de uma ou duas geraes sequenciais. Sempre que
possvel deve-se optar pelos protocolos de uma gerao com extenso de observaes, no intuito de diminuir
o nmero de animais includos nos estudos. A teratologia uma das partes dos estudos da reproduo,
que visa a determinao do potencial de uma substncia para causar desenvolvimento pr-natal anormal,
produzindo anomalias congnitas;
estudos ecotoxicolgicos Avaliam o risco e a segurana de substncias para o ecossistema.
26
introduo geral
PLANEJAMENTO DE PROTOCOLOS COM TESTES TOXICOLGICOS

Durante o planejamento de protocolos com testes toxicolgicos essencial observar as exigncias regulatrias
especificadas pelas autoridades nacionais e pelas internacionais e que esto descritas nos documentos regulatrios.
Estas incluem os tipos de teste, espcies-alvo, via de administrao e parmetros estatsticos de forma a se obter
o mximo de informaes com o mnimo de envolvimento animal e resultados aplicveis e seguros.
O racional para estudos que visam a determinao do risco e da segurana de novas molculas inclui o seguinte:
estudos de genotoxicidade, estudo da toxicidade aguda (em substituio ao clculo da DL50, banido pela
Organizao para a Cooperao e Desenvolvimento Econmico em 2001), estudos de toxicidade em doses
repetidas (duas espcies, uma roedora e uma no roedora), estudos de toxicidade para a reproduo e para novos
frmacos, adicionalmente, estudos de segurana farmacolgica especficos. Os protocolos para conhecimento
do potencial irritativo ou corrosivo para olhos, pele e mucosas devem ter sua aplicabilidade avaliada caso a
caso, uma vez que se o dano presumido, tornam-se desnecessrios para substncias ou formulaes nas quais
propriedades qumicas ou fsicas sugerem que essa forma de toxicidade provvel, por exemplo, pH acima de
11,5 ou abaixo de 2.
Ainda no sentido de minimizar e racionalizar o uso de animais para estudos de toxicologia, o planejamento deve
incluir a busca de informaes relacionadas molcula (pKa, pH, estrutura qumica, caracterizao, etc.) que
poder determinar por meio de clculos, por exemplo, a indicao de vias de administrao ou de exposio,
eliminando a possibilidade de procedimentos desnecessrios.
3.4.3 Graus de invasividade
A finalidade dos graus de invasividade alertar os pesquisadores, as Ceuas e a todos os envolvidos com os
cuidados dos animais sobre o risco de dor ou distresse a que os animais sero submetidos durante a execuo
dos protocolos.
Os graus de invasividade orientam os pesquisadores, mdicos veterinrios, tcnicos e membros das Ceuas a
darem ateno especial aos protocolos que podero causar dor ou distresse aos animais.
Essa classificao contida na DBCA (RN n 12 do Concea) e se baseia em uma aproximao preventiva segundo
o nvel potencial de dor e distresse que os animais possam sentir.
Graus de Invasividade:
G1 = Experimentos que causam pouco ou nenhum desconforto ou estresse (ex.: observao e exame fsico;
administrao oral, intravenosa, intraperitoneal, subcutnea, ou intramuscular de substncias que no causem
reaes adversas perceptveis; coleta de sangue; eutansia por mtodos aprovados aps anestesia ou sedao;
deprivao alimentar ou hdrica por perodos equivalentes deprivao na natureza).
G2 = Experimentos que causam estresse, desconforto ou dor, de leve intensidade (ex.: procedimentos cirrgicos
menores, como bipsias, sob anestesia; perodos breves de conteno e imobilidade em animais conscientes;
deprivao alimentar ou hdrica breve, em perodos maiores do que a abstinncia na natureza; exposio a nveis
no letais de compostos qumicos que no causem reaes adversas graves).
27
introduo geral
G3 = Experimentos que causam estresse, desconforto ou dor de intensidade intermediria (ex.: procedimentos
cirrgicos invasivos conduzidos em animais anestesiados; imobilidade fsica por vrias horas; induo de estresse
por separao materna ou exposio a agressor; exposio a estmulos aversivos inescapveis; exposio a choques
localizados de intensidade leve; exposio a nveis de radiao e compostos qumicos que provoquem prejuzo
duradouro da funo sensorial e motora; administrao de agentes qumicos por vias como a intracardaca e
intracerebral).
G4 = Experimentos que causam dor de alta intensidade (ex.: mtodos no aprovados de eutansia que provoquem
dor; Induo de trauma ou queimaduras a animais no sedados; administrao de agentes qumicos paralisantes
em animais no sedados, protocolos onde a morte o ponto-final, quando os animais sofrerem dor ou distresse
que no podem ser aliviados).
Ateno especial dever ser dada criao de animais geneticamente modificados que sofrem dor ou distresse
como consequncia da alterao gentica. Devemos, nesse caso, classificar corretamente o grau de invasividade
para poder atender s necessidades de cuidados especiais desses animais.
3.5 Desenvolvimento de estratgias para avaliar, minimizar e monitorar dor ou

distresse
Para cada projeto de pesquisa, o desenvolvimento de uma estratgia para avaliar, minimizar e monitorar a dor e
o distresse requer decises a respeito de:
sinais clnicos ou observaes a serem utilizadas para avaliar o bem-estar de um animal ou sua condio
clnica durante o curso do projeto;
sinais clnicos ou a combinao de sinais clnicos que indicaro que uma interveno (incluindo eutansia)
necessria;
aes a serem tomadas se um problema for detectado;
frequncia de monitoramento;
pessoal que conduzir o monitoramento e seu treinamento;
sistema para registro das observaes.
Todos os aspectos de uso e manejo dos animais, incluindo a manipulao e alojamento, que possam impactar
negativamente na qualidade de vida dos animais, bem como a estratgia para que esse impacto seja minimizado,
devem estar descritos na proposta enviada Ceua, que dever avali-los cuidadosamente.
A complexidade da resposta de um animal a estressores torna difcil guiar-se por apenas uma simples medida
como indicador de dor ou distresse. Alm disso, devido ao fato de os animais no poderem comunicar suas
experincias diretamente aos humanos, sua dor e distresse somente podem ser avaliados por observao de
seu comportamento e fisiologia. O desafio medir ou avaliar esses sinais e determinar quando uma resposta
ao estresse se desenvolve a ponto de resultar em um efeito nocivo sobre o seu bem-estar e lev-lo ao distresse.
28
introduo geral
Para minimizar a dor e distresse, estratgias prticas devero ser desenvolvidas possibilitando prever, monitorar
e avaliar esses estados.
Elementos importantes de tais estratgias incluem:
relevncia de critrios para cada espcie de animal utilizada em um projeto de pesquisa;
relevncia de critrios para os tipos especficos de projetos de pesquisa realizados;
documentao dos critrios a serem utilizados para o monitoramento do bem-estar dos animais;
documentao dos critrios que indicam quando uma interveno (incluindo eutansia) ocorrer;
uma abordagem flexvel capaz de lidar com as mudanas inevitveis e eventos inesperados durante o curso
de um projeto;
boa comunicao, cooperao e respeito entre todas as partes, para garantir que os problemas sejam
detectados e gerenciados rpida e efetivamente;
uma vez identificadas todas as fontes potenciais de dor e distresse associadas a um projeto especfico,
os responsveis pelo projeto devem determinar os sinais que indicaro se o bem-estar de um animal foi
comprometido; os preditores mais significativos de uma piora na condio do animal; e o momento provvel
do incio das alteraes previstas.
Baseado nessas avaliaes, uma estratgia de monitoramento deve ser desenvolvida para o estudo, incluindo
descrio sobre os sinais relevantes, frequncia de monitoramento, momento de interveno e pontos-finais
humanitrios.
3.5.1 Avaliao do impacto de efeitos adversos sobre o bem-estar
Para que os efeitos adversos sobre o animal possam ser previstos e avaliados, imprescindvel que o observador
esteja familiarizado com as caractersticas normais e anormais de cada uma das espcies utilizadas em seu estudo
bem como seu comportamento.
A definio de normal para uma espcie animal pode variar de acordo com o alojamento ou condies do
ambiente, a presena ou ausncia de humanos e outros estmulos. Tal definio tambm pode variar entre
linhagens ou raas dentro da mesma espcie, e mesmo entre indivduos dentro de uma linhagem ou raa.
Durante o perodo de aclimatao, os pesquisadores e tratadores de animais devem se familiarizar com a
variao normal de comportamento de um animal especfico ou grupo de animais. Avaliaes por meio de
marcadores fisiolgicos, bioqumicos e neuroendocrinolgicos tambm podem ser feitos durante esse perodo
para estabelecer valores de referncia.
3.5.2 Definio de sinais apropriados ou critrios de monitoramento
Os sinais ou observaes clnicas a serem utilizados para avaliar a condio de um animal devem ser
definidos. Eles geralmente incluem sinais de doena ou anormalidade e sinais especficos associados ao
procedimento realizado.
29
introduo geral
Para que sinais clnicos apropriados possam ser selecionados, imprescindvel que os pesquisadores conheam as
caractersticas normais da espcie e linhagem que utilizar. Durante o perodo de aclimatao, os pesquisadores
devem se familiarizar com o comportamento normal de um animal especfico ou grupo de animais na situao da
pesquisa. Nveis normais de padres fisiolgicos como frequncia respiratria, frequncia cardaca, temperatura
do corpo e marcadores bioqumicos ou hormonais podem tambm ser estabelecidos durante esse perodo.
A frequncia de observaes deve ser tal que reas de preocupao e problemas potenciais possam ser detectados
em um estgio inicial e, portanto, a dor e perturbao do animal possam ser aliviadas o mais precocemente
possvel, antes que se tornem severas demais. Se um animal estiver em um perodo potencialmente crtico, a
frequncia de observao deve aumentar. Por exemplo, em algumas infeces experimentais, observaes de
hora em hora podem ser necessrias para identificar o ponto no qual um desfecho selecionado foi atingido e a
dor ou perturbao do animal deve ser interrompida.
3.5.3 Sinais gerais de alterao do comportamento normal
Os sinais de alterao no comportamento normal do animal devem ser identificados. Conforme destacado acima,
indcios de dor e distresse variam no somente com a espcie, mas tambm entre linhagens ou raas dentro da
mesma espcie, ou at entre indivduos dentro de uma mesma linhagem ou raa. Sinais mais comuns para uma
boa triagem podem ser:
mudanas na aparncia fsica (ex.: ferimentos, postura, textura do pelo, pelo sujo de urina ou fezes);
mudanas no peso corporal e outras relacionadas ao consumo de alimento e gua;
mudanas de padres fisiolgicos (ex.: frequncia de respirao, frequncia cardaca, temperatura corporal);
mudanas no comportamento normal (ex.: inatividade, automutilao, comportamento compulsivo,
movimentos repetitivos ou esteriotipados);
mudanas nas respostas a estmulos (ex.: agressividade, excitabilidade).
Indicadores comportamentais de dor aguda podem incluir vocalizao, aparncia anormal, alterao na postura
e no modo de andar e tambm isolamento.
importante saber que, devido a muitos animais no exibirem imediatamente sinais de dor ou distresse, diversos
critrios utilizados para seu monitoramento so indicadores de efeitos adversos mais significativos, e no apenas
dor ou distresse suaves ou moderados. Alm disso, em muitas espcies-presa como o rato ou camundongo, sinais
de dor ou distresse podem ser temporrios e intercalados com comportamento normal.
3.5.4 Sinais especficos de alterao do comportamento normal
Sinais de alterao no comportamento normal relativos a um procedimento especfico necessitam ser
identificados em cada caso. Tanto as consequncias desejadas de um determinado protocolo quanto quaisquer
complicaes potenciais indesejadas necessitam ser consideradas e identificadas. Em ambas as situaes, sinais
especficos que sugiram o incio e progresso desses efeitos adversos devem ser identificados. Por exemplo: em
um modelo animal de falncia renal crnica, marcadores bioqumicos de funo renal seriam utilizados para
reconhecer o incio e avano da doena, com marcadores clnicos de polidipsia, poliria e perda de peso. Aps
30
introduo geral
cirurgia abdominal, peritonite uma complicao possvel, cujos sinais incluem febre ou vocalizao como reao
palpao abdominal.
Quando os riscos de complicaes de um procedimento no so conhecidos ou os sinais e durao dos efeitos em
uma determinada espcie no so bem definidos, um estudo-piloto deve ser conduzido. Os dados identificaro
os sinais dos efeitos pretendidos e o risco de complicaes, alm de ajudar no desenvolvimento de estratgias
de refinamento do procedimento. Outras fontes de informao nessas situaes so resultados j publicados
com protocolos semelhantes, e a experincia de outros pesquisadores, veterinrios e tcnicos. Nesses casos, o
uso do conhecimento e da experincia humana para dor e desconforto tambm pode ser til na avaliao desses
elementos nos animais. Em outras palavras, deve-se perguntar o que o homem sentiria se fosse submetido ao
mesmo procedimento (ou quando ele vivencia uma condio clnica igual). Essa estratgia auxilia na compreenso
da importncia de critrios de monitoramento.
3.5.5 Pontos-finais humanitrios (endpoints)
Protocolos de pesquisa com pontos-finais cientificamente justificveis podem levar a alteraes significativas no
bem-estar animal apesar da adoo de prticas de preveno de dor e distresse e estratgias de monitoramento
adequadas. Portanto, todo protocolo de pesquisa deve considerar a possibilidade de adoo de pontos-finais
humanitrios. O encerramento de um estudo ocorre quando os objetivos cientficos foram alcanados. J o
ponto-final humanitrio o momento no qual o encerramento antecipado para que a dor, desconforto ou o
distresse do animal sejam evitados, aliviados ou finalizados.
Ponto-final humanitrio o momento no qual a dor, desconforto ou distresse de um animal utilizado em atividade
de ensino ou pesquisa evitado, terminado, minimizado ou reduzido por aes como: i) adoo de tratamento
para aliviar a dor, o desconforto ou o distresse; ii) interrupo de um procedimento doloroso; iii) excluso do
animal do estudo; ou iv) morte humanitria do animal.
Um ponto-final humanitrio deve permitir o alcance dos objetivos cientficos do protocolo de pesquisa e ao
mesmo tempo minimizar o sofrimento animal. Todo projeto de pesquisa deve conter as descries de pontosfinais apropriados para a espcie animal e procedimentos em uso.
Em protocolos que envolvem morte como desfecho provvel, a escolha de um ponto-final humanitrio adequado
ainda mais importante para abreviar o sofrimento de animais que progrediro inexoravelmente para a morte.
O uso de pontos-finais humanitrios contribui para o refinamento provendo uma alternativa aos pontos-finais no
caso de dor ou distresse grave nos animais.
O pesquisador que tem conhecimento preciso, tanto dos objetivos do estudo como do modelo proposto, deve
identificar, explicar e incluir no protocolo de estudo um ponto-final que seja consistente tanto do ponto de vista
cientfico quanto humanitrio. Quando estudos novos forem propostos interessante a realizao de estudopiloto para avaliar a dor e o distresse que podem ocorrer durante o estudo.
Os pontos-finais devem ser objetivos e baseados em evidncias a fim de:
limitar sofrimentos que no tenham sido previstos;
evitar a antecipao da morte desnecessria de animais cujo bem-estar est menos comprometido do que se
cr ou antes que o objetivo cientfico tenha se completado;
31
introduo geral
informar sobre o ndice de severidade do procedimento;

avaliar melhoramentos potenciais.
Ao reconhecer o ponto-final humanitrio, as seguintes aes devem ser tomadas:
o animal deixa de ser um sujeito experimental;
ajustar o protocolo para reduzir ou remover a causa do efeito adverso e com isso permitir que o animal se
recupere;
administrar tratamentos sintomticos ou de suporte;
morte humanitria do animal.
Deve-se destacar que no pode haver demora entre reconhecer e agir; o bem-estar animal no protegido por
sistemas nos quais as decises e as aes exijam longos comunicados ou burocracia demorada.
3.5.6 Procedimentos em casos de presena de sinais de comprometimento do bem-estar
Em quaisquer circunstncias onde a experincia de dor ou desconforto for eticamente justificada como parte do
estudo, sendo esses elementos reais ou potenciais, eles devero ser minimizados ou aliviados.
A interveno ser necessria para aliviar e monitorar complicaes, sejam elas previstas ou no. Quando
previstas, um plano para lidar eficazmente com tal evento deve ser desenvolvido antes do incio do estudo. Ao
longo do curso do estudo, a frequncia e tipo de complicaes devem ser monitorados e estar sujeitos a uma
reviso contnua e a uma investigao detalhada, visando minimizar complicaes indesejadas.
Em muitos casos, pode ser possvel aliviar a dor ou desconforto sem comprometer os resultados cientficos.
Estratgias especficas devero ser adotadas em cada projeto, e podem incluir um aumento na frequncia de
monitoramento relacionado ao incio ou alterao de sintomas, proviso de terapia de apoio como fluidos, uso
estratgico de analgsicos ou condies de alojamento especficas.
Aes a serem tomadas quando um sinal especfico ou combinao de sinais observado em um animal devem
ser definidas. A depender da gravidade do sinal, tais aes ou intervenes podero incluir:
promover o conforto do animal fornecendo tratamentos de apoio (ex.: calor, higiene, fluidos, nutrio e
necessidades sociais);
aumentar a frequncia de acompanhamento/observao;
consultar um mdico veterinrio com experincia apropriada;
administrar um tratamento especfico (ex.: um agente analgsico);
submeter o animal morte humanitria.
32
introduo geral
Os pesquisadores precisam agir prontamente para aliviar a dor ou sofrimento, o que pode determinar a
continuao ou interrupo do projeto.
3.5.7 Treinamento
Todas as pessoas responsveis por fazer as observaes dos animais devem ser competentes na avaliao da
fisiologia, do comportamento e da condio geral, utilizando como referncia o padro normal dessas variveis,
bem como conhecer as alteraes especficas esperadas. A instituio, o grupo de pesquisa e a Ceua institucional,
que autorizou o estudo, so responsveis por garantir que o pessoal envolvido com o monitoramento dos animais
seja capacitado. O treinamento deve ser fornecido conforme necessrio e deve englobar no apenas tcnicas,
mas tambm as responsabilidades dos pesquisadores em monitorar os animais. A preparao das equipes deve
incorporar a avaliao do local de trabalho com treinamento extra e continuado, conforme necessrio.
3.5.8 Abordagem em equipe
Estratgias de monitoramento devem ser realizadas com a colaborao de todos os envolvidos na superviso
dos animais utilizados no projeto de pesquisa e de todas as pessoas com experincia relevante com a espcie a
ser utilizada e os procedimentos que sero realizados. Essa abordagem em equipe deve, quando possvel, incluir
os pesquisadores, estudantes, veterinrios e tcnicos. A experincia de participar da criao de estratgias de
monitoramento pode ser muito til no treinamento e formao dos alunos.
3.5.9 Documentao da Estratgia de monitoramento
A documentao precisa da estratgia de monitoramento garante que todas as pessoas envolvidas com o cuidado
dos animais estejam cientes dos fundamentos que determinam a presena e severidade da dor e da perturbao.
Isso facilita:
a avaliao de um animal medida que sua condio clnica muda;
a determinao se o momento de interveno foi observado;
a reviso da eficcia da estratgia de monitoramento enquanto o projeto prossegue.
3.5.10 Checklist de monitoramento
Um checklist de monitoramento deve incluir os seguintes elementos:
sinais gerais de anormalidade para a espcie, linhagem ou indivduo;
sinais especficos de problemas que podem surgir do procedimento realizado;
documentao de pontos nos quais algum tipo de interveno necessria;
documentao de desfechos nos quais a morte humanitria necessria;
fornecimento de detalhes de qualquer tratamento dado, para que sua eficcia seja avaliada.
33
introduo geral
Outros fatores que podem ser includos so detalhes de qualquer necessidade de cuidados especiais e identificao
de qualquer amostra a ser colhida de um animal caso a morte se faa necessria quando os responsveis pela
coleta no esto presentes.
As descries dos critrios de monitoramento devem ser formuladas de forma que um sinal negativo seja utilizado
para indicar sem problemas e um sinal positivo seja utilizado para indicar que pode haver um problema real
ou potencial segundo observado pelo comportamento ou com a clnica. Por exemplo, o termo isolamento deve
ser empregado no lugar de interao social, e respirao difcil no lugar de padro respiratrio.
A incluso de um campo nenhuma anormalidade detectada (NAD) no checklist deve ser considerada. Esse campo
poderia ser utilizado por uma pessoa experiente com pouca dificuldade de avaliar se um animal ou grupo de
animais no esto bem. Se um animal no estiver bem, o checklist detalhado deve ento ser utilizado para fazer
um julgamento sobre as aes a serem tomadas. O pesquisador principal do projeto deve garantir que no haja
uso indevido do campo NAD por pessoas inexperientes.
3.5.11 Especificidade de um checklist de monitoramento
Idealmente, um checklist de monitoramento deve ser elaborado especificamente para cada espcie e para
cada procedimento. Critrios de monitoramento diferiro de acordo com o tipo de protocolo de pesquisa, bem
como entre espcies e indivduos. Para alguns projetos, vrios checklists de monitoramento diferentes podem
ser necessrios para cobrir diferentes fases do trabalho. Um checklist de monitoramento deve ser relevante ao
procedimento. Por exemplo, um checklist genrico para camundongos pode ser utilizado como ponto inicial, mas
no deve ser necessariamente usado para todos os projetos que utilizam camundongos.
Checklists simples podem ser desenvolvidos para uso durante perodos do projeto em que o bem-estar dos
animais seja uma preocupao menor. Por exemplo, durante o perodo de aclimatao ou quando um animal
j est recuperado de um determinado procedimento. Um checklist simples pode incorporar um campo NAD,
enquanto o checklist de monitoramento mais detalhado seria utilizado se alguma anormalidade fosse detectada.
3.5.12 Envolvendo a Comisso de tica no Uso de Animais (Ceua)
A estratgia de monitoramento deve fazer parte da proposta enviada Ceua. A Ceua pode interferir na reviso
dos critrios de monitoramento e pontos de interveno mediante consulta ao proponente. Dessa forma, todos
os critrios para monitoramento e aes subsequentes so acordados e documentados antes do incio do projeto.
A Ceua deve tambm envidar esforos para que todos os pesquisadores possuam a experincia ou treinamento
apropriados para implementar a estratgia de monitoramento de forma efetiva.
3.6 Treinamento de pessoal

Um importante fator de contribuio para obteno de bons resultados no cuidado e utilizao de animais
a qualidade da capacitao e o comprometimento dos membros da equipe com o trabalho desenvolvido. As
pessoas devem ser capacitadas para oferecer cuidado minucioso na manuteno de animais. Devem estar cientes
de que a qualidade de suas aes interfere no bem-estar dos animais ou nos resultados de atividades de ensino
ou pesquisa.
34
introduo geral
Pesquisadores, professores ou usurios de animais devem ter treinamento e experincia nos procedimentos
que realizam. O conhecimento dos preceitos ticos da utilizao de animais tambm deve ser cobrado de todos
os membros da equipe. O treinamento, programas educacionais, capacitao tcnica e seminrios para todo o
pessoal envolvido no uso de animais em atividades de ensino ou pesquisa so de responsabilidade da instituio.
4 OBTENO DE APROVAO PARA NOVOS

PROTOCOLOS DE PESQUISA
Este captulo define o propsito e as responsabilidades das Comisses de tica para uso de animais (Ceuas), e o
que deve ser considerado ao submeter um protocolo de pesquisa a uma Ceua.
4.1 Comisses de tica no uso de animais

responsabilidade da Ceua, no mbito de suas atribuies, cumprir e fazer cumprir o disposto na Lei 11.794/08
e nas demais normas aplicveis utilizao de animais;
Todos os estudos que utilizam animais vertebrados no humanos devem ser aprovados e monitorados pela
Ceua da instituio que manter os animais durante a conduo do projeto de pesquisa ou procedimento
de ensino, sendo esta credenciada no Concea. A Ceua da instituio deve garantir que o uso de animais
esteja em conformidade com a Lei 11.794/08 e os seus dispositivos infralegais e sempre que se fizer
necessrio justificar a aplicao dos conceitos 3Rs (Reduction, Refinement and Replacement) reduo,
refinamento e substituio. Quando uma atividade for conduzida a campo, ou seja, fora das instalaes
institucionais, a responsabilidade de aprovar e acompanhar o projeto ser da Ceua da instituio a qual o
pesquisador principal pertence, sendo que esta instituio dever estar credenciada no Concea. Quando
aplicvel, a Ceua responsvel pela aprovao e acompanhamento do projeto ser a do patrocinador do
estudo que tambm dever estar credenciado no Concea.
4.2 Submetendo uma proposta Ceua

Antes de submeter uma proposta Ceua, os pesquisadores devem considerar as questes a seguir:
4.2.1 Antes de escrever seu projeto o pesquisador deve perguntar-se:
O uso de animais necessrio?
Existem alternativas ao uso dos animais? Se existem, citar quais e por que no vai empreg-las.
O estudo foi planejado para produzir resultados vlidos?
necessrio um estudo-piloto?
As espcies ou animais foram selecionados de forma apropriada?
35
introduo geral
H instalaes, equipamentos e condies do ambiente adequadas e disponveis?

Todo o pessoal envolvido est adequadamente treinado? Tem algum conhecimento sobre a biologia e o
comportamento da espcie que vai usar?
Procurou utilizar o menor nmero possvel de animais?
H estratgias para minimizar e monitorar a dor e o distresse?
4.2.2 Se for usar animais, os seguintes dados devero constar na proposta de estudo:
Espcie e linhagem dos animais/inbred ou outbred/idade ou peso/sexo;
Fonte de obteno dos mesmos;
Perodo de adaptao;
Alojamento durante a execuo da pesquisa: tipo de gaiola, tipo de cama, nmero de animais por gaiola,
ambiente (temperatura, umidade, etc.);
Se tomar providncias para melhorar o ambiente dos animais, especificar quais;
Alimentao: tipo e composio, esquema de alimentao e de gua.
4.2.3 Quando do procedimento: mtodo
A descrio dos procedimentos depender do propsito da pesquisa. Contudo, algumas informaes sero
sempre necessrias:
nmero de animais, espcie, sexo e idade;
provenincia dos animais e qualquer tratamento prvio;
esquema dos procedimentos, tais como hora em que sero realizados, intervalos de tomada de amostras e
descrio genrica dos equipamentos utilizados. Em procedimentos dolorosos, indicar quais medidas sero
adotadas para evitar ou reduzir a dor ou o sofrimento;
grau de severidade;
no caso de morte humanitria o mtodo que ser utilizado dever estar descrito claramente, independente
dele ser aplicado durante ou ao final do estudo. Tambm dever ser indicado como sero descartadas as
carcaas ou cadveres.
Estudos adicionais ou alteraes na proposta; eventos adversos ou imprevistos e a suspenso da pesquisa devero
ser informados Ceua para anlise e deciso conforme a legislao vigente.
A solicitao Ceua dever conter informaes suficientes para que a Comisso possa avaliar a proposta com
segurana.
36
introduo geral
Em resumo, o projeto deve incluir, no mnimo:

o ttulo do projeto;
justificativa do projeto e para o uso de animais no projeto;
objetivos;
plano de trabalho e cronograma estimado;
os nomes, funes e capacitao de todo o pessoal;
a provenincia dos animais e as licenas exigidas, uma vez que a autorizao da Ceua no exclui a necessidade de
outras autorizaes legais cabveis de instituies como Instituto Brasileiro de Meio Ambiente Ibama, Fundao
Nacional do ndio Funai, Comisso Nacional de Energia Nuclear Cnen, Conselho de Gesto do Patrimnio
Gentico Cgen, Coordenao-Geral da Comisso Tcnica Nacional de Biossegurana CTNBio, Instituto Chico
Mendes de Conservao da Biodiversidade ICMBio e outras, no caso em que a natureza do projeto as exigir;
detalhes de alojamento;
detalhes do protocolo que ser desenvolvido;
os benefcios potenciais do projeto;
uma viso geral do projeto;
como os princpios de Reduo, Substituio e Refinamento sero aplicados;
como os animais sero monitorados;
consideraes como riscos potenciais a outros animais no humanos ou humanos;
declarao de que o projeto segue a legislao e princpios ticos.
O Quadro 1 pode ser utilizado para orientar os pesquisadores sobre questes que devero ser consideradas ao
planejar e conduzir protocolos de pesquisa. O Quadro objetiva manter o bem-estar e reduzir ao mnimo a dor ou
distresse dos animais durante o desenvolvimento dos projetos de pesquisa.
QUADRO 1 ORIENTAO PARA ADESO AOS PRINCPIOS TICOS NO USO DE ANIMAIS E CUIDADOS COM O
BEM-ESTAR ANIMAL EM PROTOCOLOS DE PESQUISA
PLANEJAMENTO DO ESTUDO
Avalie se h alternativas ao uso de animais
Preveja a extenso da dor e do distresse e encontre formas de evit-los ou de minimiz-los
Avalie a dor e o distresse antecipados individualmente versus causar menos dor em um nmero maior de animais
Planeje o protocolo de pesquisa para durar o menor tempo possvel
37
introduo geral
PLANEJAMENTO DO ESTUDO
Conhea a espcie a ser utilizada, o comportamento normal dela e seus sinais de dor ou distresse
Considere se as tcnicas propostas so as melhores possveis
CONDUO DO ESTUDO
Monitore os animais para verificar alteraes no comportamento e sinais de dor e de distresse durante toda a
realizao do estudo
Fornea tratamento paliativo para a dor dos animais, ex. cuidados pr e ps-operatrios, leitos confortveis,
temperatura e umidade ambientes nas faixas de conforto para a espcie, barulho mnimo, etc., incluindo anestesia ou
analgesia
Submeta morte humanitria, sem demora, qualquer animal que parea estar sofrendo dor ou distresse imprevistos
e que no possam ser prontamente aliviados
Avalie complicaes imprevistas e determine se os critrios para interveno e ponto-final humanitrio so
adequados
TCNICAS DE REVISO E ESTRATGIA DE PROMOO
Continue a revisar as tcnicas, procedimentos e mtodos para refin-los sempre que possvel
Revise os Procedimentos Operacionais Padro (POP) periodicamente
Continue a revisar procedimentos voltados ao cuidado e administrao em instalaes que contenham animais
confinados
Continue a revisar os procedimentos voltados para as boas prticas
RELATANDO CEUA
Faa relatrios Ceua conforme necessrio
5 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
ALTMAN, D. G. (1991). Practical Statistics for Medical Research. Chapman & Hall.
BRASIL. Ministrio da Cincia, Tecnologia e Inovao, Conselho Nacional de Controle de Experimentao Animal
Concea. Diretriz Brasileira para o Cuidado e a Utilizao de Animais para Fins Cientficos e Didticos (DBCA),
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39
ANFBIOS E SERPENTES
MANTIDOS EM INSTALAES
DE INSTITUIES DE ENSINO
OU PESQUISA CIENTFICA
40
Anfbios e serpentes mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica
FASCCULO 6
Guia brasileiro de produo, manuteno ou utilizao

de animais em atividades de ensino ou pesquisa cientfica

Coordenadora:
Vnia Gomes de Moura Mattaraia Instituto Butantan
Autores:

Carlos Alberto Gonalves Silva Jared Instituto Butantan

Kathleen Fernandes Grego Instituto Butantan
Marta Maria Antoniazzi Instituto Butantan
Svio Stefanini SantAnna Instituto Butantan
Selma Maria Almeida Santos Instituto Butantan
Vnia Gomes de Moura Mattaraia Instituto Butantan
ANFBIOS
1 INTRODUO
O manejo de animais silvestres em cativeiro geralmente realizado visando realizao de trabalhos cientficos,
exposio pblica dos animais em museus ou parques zoolgicos para fins de conservao, ou extrao de
matria-prima utilizada na pesquisa, ou para fins de produo.
O objeto deste captulo tratar dos anfbios em cativeiro para uso em atividades de produo, manuteno ou
utilizao para fins de pesquisa ou ensino. Em relao manuteno em cativeiro, existe uma vasta literatura
detalhando tcnicas de manejo em peixes, aves e mamferos. As serpentes e anfbios, no entanto, so bastante
desconhecidos nesse aspecto, existindo pouca informao sobre a sua manuteno e o seu comportamento em
cativeiro. Indubitavelmente, os anfbios compem o grupo de vertebrados menos conhecido por esse ponto de
vista, j que so animais em geral de pequeno porte e de hbitos secretivos. Alm do mais, diferentemente das
serpentes, no representam (ou representam muito pouco) problema para a sade humana ou veterinria.
Dos dados disponveis na literatura, a maioria se refere a animais do Hemisfrio Norte, especialmente ao grupo
Caudata, representado pelas salamandras e trites que, das 600 espcies existentes na atualidade, apenas 5
encontram-se no Brasil. De uma maneira geral, muito pouco se conhece sobre os Anura (sapos, rs e pererecas)
e os Gymnophiona (ceclias ou cobras-cegas), em especial, os da vastssima anfibiofauna brasileira. A escassez da
literatura sobre o tema talvez decorrente da dificuldade em se manter esses animais em cativeiro, dado o delicado
equilbrio em que vivem na natureza, sendo muito sensveis a variaes ambientais e apresentando uma pele muito
desprotegida e frgil (DUELMANN e TRUEB, 1989; POUGH et al., 1993, JARED e ANTONIAZZI, 2009). Porm, o atual
status de ameaa da classe como um todo, estabelecido pela International Union for Conservation of Nature (IUCN),
vem sendo considerado uma motivao maior para estudos que visem conservao desses animais.
2 CAPTURA NO CAMPO
A captura, manuteno ou utilizao de animais silvestres para fins de pesquisa, ensino ou produo depende
da aprovao dos rgos responsveis (Ibama, Instituto Chico Mendes de Conservao da Biodiversidade
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FASCCULO 6
ICMBio, por meio do Sistema de Autorizao e Informao em Biodiversidade Sisbio, e/ou Secretaria Estadual
do Meio Ambiente), alm do Comit de tica local. A Instruo Normativa do ICMBio n 03, de 02 de setembro
de 2014 (ICMBio, 2014), regulamenta atividades cientfica ou didticas que envolvam captura dos animais
silvestres na natureza, transporte, manuteno destes em cativeiro por perodo inferior a 24 meses e a coleta
de material biolgico de animais silvestres mantidos em cativeiro. J a Instruo Normativa do Ibama n
169/2008, de 20 de fevereiro de 2008 (IBAMA, 2008), regulamenta os procedimentos para autorizao de
diferentes categorias de empreendimentos que se utilizem da fauna silvestre.
O bem-estar dos animais no cativeiro, para uso em atividades de produo, manuteno ou utilizao para
fins de pesquisa ou ensino, depende em grande parte da observao de seu modo de vida e de seu habitat na
natureza. Esses dados so muito importantes para gerir o modo como essas espcies so mantidas. So eles
que nos fornecem os subsdios para a tentativa de reproduzir o seu ambiente natural. Nessa tentativa d-se
nfase, principalmente, rea dos terrrios, tipo de substrato, alimento, e condies de umidade, iluminao
e temperatura.
A captura de anfbios na natureza geralmente realizada por colocao de armadilhas de interceptao e queda
(pitfall), ou por procura ativa. As armadilhas pitfall so teis, principalmente quando a busca por anfbios
est inserida em expedies mais amplas, que visem captura de outros grupos de animais, aproveitando-se,
assim, o esforo envolvido na instalao da infraestrutura para esse tipo de armadilha. Podem ser teis para a
captura de todos os taxa, com exceo das pererecas que, por serem trepadoras, tm facilidade para escapar
do interior dos baldes.
Uma vez que a maioria dos anfbios noturna, a busca ativa realizada preferencialmente noite, com o
auxlio de lanternas. J as ceclias, por serem fossrias, so procuradas durante o perodo diurno, por meio de
escavao no muito profunda do solo (cerca de 15 cm), de preferncia em locais ricos em matria orgnica,
revirando-se tocos, galhos e troncos em decomposio, utilizando-se uma enxada larga. Para a procura de
anuros de cho de floresta, a enxada tambm til para a retirada superficial do folhio, com movimentos
certeiros ainda que delicados. Os animais, quando avistados, devem ser agarrados rapidamente com as mos,
segurando-os firme, porm sem apert-los. A seguir, devem ser colocados no interior de sacos plsticos fechados
com bolha de ar no interior ou em sacos de pano. Em todos os casos, coloca-se um pouco de substrato (terra
ou folhio midos) para servir de abrigo, e diminuir o nvel de estresse dos animais. No caso dos pipdeos,
anfbios exclusivamente aquticos, pode-se utilizar tarrafas de pesca, ou ainda, no caso das pipas amaznicas,
a procura ativa em barcos com o motor desligado, j que esses animais podem passar uma boa parte do
tempo boiando na superfcie dos rios sem correnteza. A captura de ceclias aquticas, da mesma forma que os
pipdeos, pode ser realizada por meio de tarrafas utilizadas para peixes.
importante ressaltar a necessidade de se acondicionar os anfbios separados por espcie, de modo que suas
toxinas cutneas no possam provocar danos para as demais espcies capturadas.
Caso a expedio para capturas se estenda por vrios dias, necessrio providenciar alimento vivo baseado
em grilos, baratas, cupim sem ferro (de preferncia na forma larval), moscas, mosquitos e outros pequenos
artrpodes. No caso de animais fossrios, pode-se utilizar minhocas como alimento. Deve-se, ainda, verificar
diariamente as condies de umidade das caixas. Caso algum animal venha a bito, este deve ser imediatamente
fixado para trabalhos posteriores e/ou depsito em coleo zoolgica. No final dos trabalhos de campo, caso os
animais tenham que ser mantidos vivos e trazidos ao laboratrio, devem ser acondicionados em local arejado
e sombreado, em caixas plsticas com tampa telada ou furada, com bom nvel de umidade e abrigos como
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FASCCULO 6
folhio, galhos e fragmentos de casca de rvore. Quando os animais so fossrios, usa-se terra como principal
substrato, alm de folhio mido na superfcie.
O transporte dos animais vivos, assim como a captura, deve ser autorizado pelos rgos competentes. Trata-se
de uma etapa crtica nas expedies cientficas e devem ser tomados todos os cuidados para que seja gerado o
menor nvel de stress possvel nos animais. Mesmo em viagens curtas o espao a ser destinado para os animais
deve considerar cuidados principalmente em relao manuteno da umidade e ao controle da temperatura,
que deve ser mantida amena.
No caso de anuros, animais saltadores, recomendvel acomod-los em caixas pequenas com furos na tampa
e lacradas com fita adesiva ou clips de presso, ou em sacos de pano umedecido, contendo folhio mido
ou uma bola de algodo bem umedecida. O ambiente protegido e com pouco espao impossibilita que os
animais saltem, gerando muito menos stress e menor possibilidade de se ferirem durante o transporte. Os
animais aquticos, quando em transporte de curta durao, podem ser mantidos fora da gua, desde que
sejam acondicionados em ambiente bem mido em meio a folhio, em caixas ou sacos de pano. Outro mtodo
bastante utilizado para transporte, principalmente em viagens mais longas, o acondicionamento dos animais
em sacos plsticos inflados com ar e bem amarrados, contendo uma bola de algodo bem umedecida no seu
interior. Nesse caso adequado que se renove, pelo menos diariamente, o ar dos sacos de acondicionamento.
Tambm adequado que os sacos e caixas contendo os animais sejam acomodados em uma caixa maior,
de plstico ou isopor. Caso necessrio, dependendo das condies climticas, essa caixa poder conter gelo
embalado e protegido por panos ou papel, em quantidade suficiente para amenizar a temperatura no interior
da caixa mas sem entrar em contato direto com os animais.
Deve-se, sempre, agrupar os indivduos por espcie e, preferencialmente, por tamanho, caso sejam muito
diferentes entre si, evitando-se um nmero excessivo de animais em cada embalagem.
Ao chegarem instalao animal, os animais devem passar por um perodo de quarentena e, apenas
posteriormente, podero ser misturados a outros indivduos que possam j existir no local, de preferncia
separados por local de procedncia.
3 INSTALAES ANIMAIS
3.1 Caixas e tanques de conteno
A instalao animal deve ser provida de caixas plsticas retangulares de vrios tamanhos e alturas, com tampa
telada, preferencialmente dotada de grampos de segurana, com um bom encaixe no corpo da caixa. As caixas
devem ser adequadas aos hbitos de vida de cada animal. Assim, pererecas, animais arborcolas e trepadores,
devem ser colocadas em caixas altas, enquanto espcies de cho, tais como: pequenas rs e sapos e espcies
semifossrias, tais como: os micro-hildeos, podem ser acondicionados em caixas mais baixas. Terrrios de
vidro podem ser utilizados em alguns casos, desde que bem vedados e com tampa telada, sendo ideais para a
manuteno de dendrobatdeos.
A tarefa de escolha de tamanho dos recintos muito delicada, j que as espcies so muito variadas, tanto em
tamanho, como em relao aos seus hbitos e necessidades. Assim, importante que o responsvel tcnico
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FASCCULO 6
utilize informao sobre cada espcie e seja um atento observador dos animais, assim como os cuidadores. S
dessa forma ser possvel a utilizao do bom senso na escolha dos terrrios.
Para os sapos e rs de grande porte, o ideal a utilizao de tanques de alvenaria azulejados, com cerca de 60 cm
(largura, altura e profundidade), fechados com tampas teladas montadas com dobradias, e providos de torneira
com bico de rosca a uma altura de cerca de 30 cm e ralo (bem vedado) no cho. Potes de cermica, porcelana
ou plsticos de vrios tamanhos e profundidades so necessrios para a colocao de gua em cada ambiente,
dependendo do tamanho e hbito dos animais. Devem ter boca larga e ser bem estveis, j que os anfbios
costumam mergulhar na gua desses recipientes para se hidratarem.
Para os animais aquticos, utilizam-se grandes aqurios ou tanques com tampa, providos de uma longa coluna
de gua (com cerca de 50 cm) e de sistema de filtragem constante. Idealmente, no caso do uso de gua tratada,
esta deve ser previamente descansada, para a evaporao do cloro, embora esse procedimento no parea ser
crtico. No caso de pipas, deve-se utilizar tanques cilndricos de paredes bem lisas e sem transparncia, que
no ofeream possibilidade de os animais escalarem por cantos. Caso sejam utilizados terrrios de vidro ou
caixas plsticas retangulares, deve-se promover uma boa vedao da tampa, j que esses animais escapam com
muita facilidade mesmo por pequenas frestas. No caso das pipas, no necessrio aerao, pois a gua deve ser
trocada aps a alimentao devido sujeira remanescente da mesma. Para as ceclias aquticas, o ambiente ideal
o mesmo utilizado para peixes, com sistema de filtragem externo, cascalho no fundo e aerao, tomando-se
apenas o cuidado de se manter uma longa coluna de gua e uma boa vedao na tampa. Ceclias de correnteza
como as do gnero Typhlonectes, apreciam a corrente de gua que se estabelece atravs da filtragem e aerao.
3.2 Enriquecimento dos recintos

A proposio de itens de enriquecimento espcie-especficos, adequados s necessidades de cada uma das espcies
e dos indivduos, deve se apoiar na observao do comportamento dos animais em cativeiro, comparando-o com
dados obtidos in situ.
Substrato de terra utilizado somente para anfbios fossrios ou com hbitos de cho de floresta. Para os animais
fossrios, a fim de se estabelecer a altura da coluna de terra a ser utilizada, deve-se respeitar o tamanho de
cada espcie e, na medida do possvel, o hbito de vida dos animais, que podem colonizar diferentes nveis de
profundidade do solo.
Por exemplo, anuros micro-hildeos, que se enterram superficialmente, so mantidos em caixa com uma coluna
de 3-4 cm, enquanto que ceclias de grande porte, como Siphonops annulatus, requerem uma coluna de terra de
pelo menos 20 cm.
Como enriquecimento para os ambientes, utiliza-se materiais inertes, tais como canos de PVC, telhas e tijolos
furados de cermica, e folhas ornamentais artificiais, bem como materiais orgnicos, tais como cascas de
rvore, folhio, cascas de coco seco cortadas ao meio, frutos vazios de sapucaia, galhos de vrios tamanhos e,
eventualmente, folhas naturais. No caso das ceclias aquticas, tocas construdas com a sobreposio de pedras
so bem-vindas.
Os dendrobatdeos necessitam de ambiente mais enriquecido do que os outros anuros. O terrrio deve conter
substrato de terra e folhio em desnvel, formando um pequeno lago em um dos cantos, que pode ser mantido
com uma corrente fechada de gua de forma a se obter uma pequena queda-dgua, atravs do uso de uma
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FASCCULO 6
bomba de aqurio. necessria tambm a utilizao de vegetao natural e galhos, formando diferentes nveis
de substrato a serem explorados pelos animais.
3.3 Manuteno da temperatura, da luminosidade e da umidade

Idealmente, para os anuros e ceclias, o ambiente poderia ser mantido em temperatura constante de
aproximadamente 25oC, utilizando-se ar-condicionado. No entanto, alm da dispendiosa manuteno, o arcondicionado priva os animais do contato com a variao natural da temperatura, o que pode causar confuso
no seu ciclo de vida. Dessa forma, o controle da temperatura ambiente pode ser realizado com a utilizao
de ventiladores ou aquecedores, de acordo com a necessidade. A existncia de gradientes de temperatura e
umidade no interior dos terrrios pode ser benfica aos animais, propiciando-lhes a oportunidade de compensar
as variaes ambientais atravs do metabolismo e do comportamento, da mesma maneira que ocorre no
ambiente natural.
Para a iluminao, o biotrio deve ser preferencialmente dotado de janelas teladas, sendo que a iluminao
diurna pode ser reforada por meio de luminrias no ambiente geral, acesas manualmente todos os dias, ou
ligadas a um temporizador.
A umidade deve ser mantida sempre alta, entre 50% e 70%, devendo ser observada e controlada diariamente,
tanto no ambiente geral, como individualmente nos terrrios. Umidificadores ambientais so bem-vindos,
principalmente nas estaes mais secas do ano. Nos terrrios, deve-se verificar o nvel de gua dos recipientes
e umidificar todo o ambiente com o auxlio de borrifadores. Quando houver como substrato, deve-se verificar a
umidade por meio de contato com a palma ou dorso da mo, despejando um pouco de gua, se necessrio, com
o auxlio de um regador de plantas, porm sem encharc-la. O nvel de umidade ideal depende dos hbitos de
cada espcie, mas em se tratando de anfbios, sempre de mdio para alto.
3.4 Alimentao
A alimentao diversificada um importante pr-requisito para o sucesso da manuteno. Durante a alimentao,
importante estimular as atividades normais do animal, deixando que ele capture o seu prprio alimento.
Os anfbios so todos carnvoros, na acepo mais ampla do termo, ou seja, alimentam-se de outros animais,
principalmente insetos. Podem tambm se alimentar de minhocas, outros anfbios, rpteis e at pequenos
mamferos. Todos os espcimes que servem de alimento devem estar vivos, j que a maioria dos anfbios depende
do movimento para encontrar o seu alimento. No cativeiro, a alimentao de anfbios depende, na sua maior
parte, de criaes-suporte de insetos, principalmente baratas (Pycnoscelus surinamensis), grilos (Gryllus gryllus)
e tenbrios (Tenebrio molitor e Zophobas morio), que devem estar disponveis em todos os tamanhos, suprindo
as necessidades de cada espcie. Dessa forma, a instalao animal deve ser planejada para contemplar uma rea
especial dedicada produo e manuteno desses animais.
A frequncia da alimentao geralmente uma vez por semana. A alimentao com insetos, que serve a maioria
dos animais, como sapos e rs de pequeno porte, pererecas e micro-hildeos, deve ser farta, mas no excessiva
e deve ser ajustada para cada espcie em funo do tamanho e nmero dos indivduos. O ideal que haja uma
pequena sobra, o que aumenta a chance de que todos os indivduos tenham a possibilidade de se alimentar. Essa
sobra deve ser mantida apenas por umas poucas horas no interior do terrrio, sendo recolhida sempre no mesmo
dia da alimentao. A familiaridade com cada indivduo indica a eventual necessidade de separ-los na hora da
45
FASCCULO 6
alimentao, a fim de dar-lhes chance de agarrar o alimento, quando se percebe grande competio no grupo de
um mesmo terrrio. Esse fator tambm decisivo para indicar quantos animais cada recinto idealmente comporta.
Antes da colocao do alimento, dependendo do comportamento de cada espcie ou mesmo de cada indivduo,
pode ser necessria a retirada parcial ou at mesmo total do enriquecimento dos terrrios (com exceo dos
recipientes de gua e dos galhos, no caso das pererecas), a fim de evitar que os insetos se escondam. No caso
dos animais semifossrios como os micro-hildeos, o controle da alimentao um pouco mais complicado, j
que esses animais no aceitam ficar expostos. Assim, para eles necessrio que seja feita uma subtrao entre o
alimento disponibilizado e o alimento que sobrou.
No caso de animais maiores, como sapos e grandes rs, a base da alimentao realizada com camundongos
recm-nascidos ou at mesmo adultos, como no caso de leptodactildeos e ceratofrdeos de grande porte. Esses
camundongos, no caso das grandes instituies de pesquisa, podem ser obtidos por meio das instalaes de
produo de mamferos para utilizao em pesquisa ou ensino. Nesse caso, o alimento colocado no cho dos
tanques (ou terrrios), de preferncia na frente dos anfbios, para facilitar a sua visualizao. Os insetos tambm
devem ser utilizados como suplementao alimentar.
Para as ceclias, animais cegos para imagem, mas com excelente olfato, a percepo do alimento se d atravs de
quimiorrecepo. So muito carnvoras e aconselhvel manter-se uma variao entre o uso de carne bovina ou
de frango moda, corao de boi ou fil de peixe cortado em pequenos pedaos, e minhocas. Os insetos podem
tambm servir como suplemento alimentar. As carnes devem ser colocadas na forma de pequenas bolas sobre a
superfcie do substrato. Dessa forma, alm de sujar menos a terra, fica mais fcil o controle da alimentao.
Geralmente, deixa-se o alimento disposio dos animais por 24 horas. Ao fim desse perodo, as sobras devem
ser retiradas, procedendo-se a limpeza dos terrrios.
Os pipdeos, todos aquticos e com baixa viso, tambm so orientados atravs de quimiorrecepo pelas narinas
e pelas pontas dos dedos das patas dianteiras. Alimentam-se bem com a mesma variao de carnes oferecida s
ceclias. Pequenos peixes vivos tambm so bem aceitos. Vez ou outra, muito espaadamente, pode-se fazer uma
suplementao com os pequenos crustceos comercializados genericamente como Artmia.
Deve-se ter em conta que a quantidade de alimento varia ao longo do ano, havendo uma significativa diminuio
do apetite dos animais em funo das temperaturas baixas do inverno, o que tende a regularizar com a chegada
dos meses quentes.
3.5 Higienizao dos recintos

Nos terrrios e caixas sem substrato, deve-se remover os animais para outra caixa e proceder a lavagem com
detergente neutro, seguida de um enxgue abundante. Caso a caixa no apresente detritos ou fezes, pode-se
espaar a lavagem em perodos de tempo mais longos. A lavagem deve ser realizada semanalmente, ou com uma
frequncia ainda maior, caso as caixas apresentem detritos ou fezes.
No caso dos tanques, utilizados para sapos e rs de grande porte, que quase sempre defecam em grande
quantidade (fezes envolvidas por uma cpsula membranosa), deve-se promover uma lavagem abundante diria,
utilizando-se uma mangueira rosqueada torneira no interior do tanque, com ou sem detergente (no caso do uso
de detergente, naturalmente, faz-se necessria a remoo dos animais).
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FASCCULO 6
Aps a limpeza dos recintos, coloca-se novamente os enriquecimentos de cada terrrio, removidos no momento
da alimentao, normalmente realizada no dia anterior.
No caso de terrrios com substrato de terra, a limpeza realizada semanalmente, aps a alimentao. A cada dois
meses, deve-se remover os animais subterrneos e revolver a terra para promover a sua oxigenao. A terra deve
ser inteiramente trocada a cada quatro meses. A terra utilizada deve ser fofa e rica em matria orgnica e pode
ser procedente do cho de mata (se possvel), ou at mesmo comprada em lojas especializadas para artigos de
jardinagem onde geralmente conhecida pelo nome de adubo orgnico (terra preta). Deve-se certificar de que
no contm adubos qumicos. Pode ser enriquecida com a mistura de p de coco ou troncos e galhos apodrecidos
e desfeitos.
Nos tanques das pipas, aps a alimentao, deve-se trocar toda a coluna de gua em funo do espalhamento do
alimento, o que provoca podrido e mau cheiro.
3.6 Exigncias no cativeiro por grupo

As instalaes em geral abrigam animais de laboratrio, principalmente mamferos. Essas instalaes seguem
normas especficas, j muito bem padronizadas. A seguir, apresentaremos grupos de animais, formados a partir
de semelhanas nas suas necessidades no cativeiro, em uma tentativa de sistematizar minimamente os principais
requisitos para o seu bem-estar:
3.6.1 Pererecas
As pererecas, animais pertencentes extensa famlia Hylidae, so trepadores e escaladores, possuindo discos
adesivos na ponta de cada dedo que servem justamente para a locomoo e sustentao do corpo em planos
verticais. Em cativeiro, permanecem boa parte do tempo aderidos nas paredes do terrrio. necessrio, assim,
que se d prioridade ao volume em detrimento da rea. Deve-se, portanto, utilizar caixas altas com tampas bem
vedadas e teladas. No necessrio o uso de substrato. No necessrio individualizar os animais, desde que
respeitado um nmero mximo confortvel de animais (geralmente de 3 a 5) por caixa. Esse nmero deve ser
determinado pelo tamanho dos animais e pelos hbitos de cada espcie (se mais agitada ou mais tranquila). A
gua deve ser colocada em um pote com boa estabilidade e volume, possibilitando a imerso total do animal.
O enriquecimento do ambiente deve ser realizado com galhos e folhas naturais ou artificiais e pedaos de cano
de PVC com dimetro que possibilite a entrada dos animais no seu interior. A alimentao semanal deve variar
entre baratas, grilos e tenbrios. A limpeza deve ser realizada um a dois dias aps a alimentao, com lavagem
completa das caixas, que devem ser borrifadas com gua diariamente.
As pererecas do gnero Phyllomedusa, diferentemente da maioria das outras pererecas, devem ser mantidas
separadamente, e requerem folhas bem verdes para manterem a sua cor.
3.6.2 Sapos e rs de grande porte
Os sapos incluem todas as espcies que pertencem famlia Bufonidae, em especial do gnero Rhinella. As
espcies de grande porte so conhecidas popularmente como sapos-cururus. Esses animais devem ser mantidos
em tanques de alvenaria providos de torneira e ralo, o que facilita enormemente a limpeza, que deve ser diria,
com auxlio de mangueira. A gua deve ser provida em recipientes grandes, estveis e no muito fundos (como por
exemplo, gaiolas pequenas de camundongos), de forma que os animais possam se banhar. aconselhvel que o
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FASCCULO 6
uso de substratos como terra ou folhio seja dispensado, j que dificulta enormemente a limpeza dos tanques. O
enriquecimento deve ser realizado com telhas de barro superpostas, de maneira a criar abrigos e formar rampas
para acesso gua, alm de servir como um substrato diferenciado. So animais gregrios, e frequentemente
so vistos amontoados dentro dos abrigos. A alimentao semanal composta basicamente por camundongos
neonatos, complementados por insetos oferecidos de forma alternada (baratas, grilos ou tenbrios).
As rs de grande porte compreendem espcies do gnero Leptodactylus (famlia Leptodactylidae). Essas espcies
so mantidas em ambiente semelhante aos dos sapos, mas diferentemente daqueles, so animais territoriais,
devendo ser mantidos separadamente. Passam boa parte do tempo totalmente imersos no recipiente de gua
(que, portanto, deve ter bom tamanho e profundidade), mas tambm procuram com frequncia os abrigos de
telha. A alimentao semanal composta basicamente de camundongos ou ratos neonatos, ou at mesmo
camundongos com cerca de 20 g, dependendo do tamanho das rs.
Na falta de tanques de alvenaria, sapos e rs de grande porte podem ser mantidos em caixas plsticas grandes e
fundas, com tampa de tela.
3.6.3 Sapos e rs de pequeno porte
Os sapos de pequeno porte tambm pertencem, na sua maioria ao gnero Rhinella (famlia Bufonidae). J as
pequenas rs, na maioria pertencem famlia Leptodactylidae. Esses animais so mantidos em caixas menores,
mais baixas do que as das pererecas, com um fino substrato de terra e/ou folhio. No necessrio em geral
individualizar os animais. A gua oferecida em recipientes baixos o suficiente para permitir que os animais
se banhem sem correr o risco de afogamento. O alimento composto de insetos (grilos, baratas e tenbrios)
oferecido semanalmente. A limpeza deve ser realizada semanalmente, trocando-se a terra e/ou folhio. As caixas
devem ser borrifadas diariamente.
3.6.4 Anuros semifossrios
Esse grupo de animais compreende desde espcies grandes de rs, como as do gnero Ceratophrys, at espcies
menores, como as que compem a famlia Microhylidae. O tamanho das caixas deve, assim, ser adequado ao
tamanho de cada espcie.
As espcies do gnero Ceratophrys so mantidas solitrias em caixas com substrato de terra em uma coluna
suficiente que permita ao animal se enterrar por inteiro. A terra deve ser mantida sempre mida, porm, no
encharcada. Um recipiente baixo e estvel com gua deve ser colocado disposio na superfcie. Esses animais
so muito vorazes e com bocas muito grandes em relao ao tamanho corporal. Sua alimentao preferida so os
camundongos, oferecidos semanalmente, que podem variar desde adultos (para as espcies de maior porte), at
recm-nascidos (para as espcies de menor porte ou indivduos jovens). A terra deve ser revolvida pelo menos a
cada 15 dias e trocada a cada 2-3 meses.
Em relao s espcies de Microhylidae, geralmente de porte menor, valem regras semelhantes s das espcies
do gnero Ceratophrys. Podem, porm, compartilhar uma mesma caixa em pequeno nmero e, ao contrrio
daqueles, possuem olhos e bocas pequenos, o que torna a sua alimentao mais difcil em cativeiro. Normalmente
os itens mais bem aceitos, oferecidos semanalmente, so os tenbrios, cupins sem ferro e, por vezes, minhocas
pequenas. Valem os mesmos cuidados com o substrato e a umidade relatados para os Ceratophrys.
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FASCCULO 6
3.6.5 Dendrobatdeos
Os dendrobatdeos pertencem famlia Dendrobatidae e compreendem, na sua maioria, espcies amaznicas
que em geral possuem coloridos muito vistosos. So espcies pequenas e quase sempre arborcolas ou semiarborcolas e normalmente de hbitos diurnos. Geralmente, so mantidas em terrrios de vidros que possibilitem
a sua visualizao constante para um melhor controle. Devem ser mantidos com substrato de terra em elevao,
propiciando a formao de um lago de um dos lados do terrrio, galhos e vegetao formando vrias alturas de
substrato e proporcionando diferentes possibilidades de abrigo. A gua pode ser mantida em corrente fechada,
por meio do uso de uma bomba de aqurio. Para esses animais adequado o uso de iluminao especificamente
sobre o terrrio (lmpada comum ou luz do dia de baixa radiao) provida de timer, acompanhando o ritmo
regular de claro/escuro do ambiente externo. A alimentao realizada com grilos e baratas jovens, formigas e
cupins sem ferro e moscas de frutas. O terrrio deve ser borrifado diariamente.
3.6.6 Pipdeos
Esses animais constituem os nicos anuros exclusivamente aquticos e pertencem ao gnero Pipa (famlia
Pipidae). O ambiente ideal para eles so tanques cilndricos com colunas de gua de pelo menos 50 cm de altura,
de preferncia construdos em material opaco, que evite a passagem da luz. Podem ser mantidos em grupos
de vrios indivduos. A gua deve ser permanentemente filtrada com fibra sinttica para a retirada de resduos
mais grosseiros. No necessrio nenhum tipo de enriquecimento, uma vez que esses animais apreciam ficar
parados no fundo do tanque ou, por vezes, boiando na superfcie. A altura da coluna de gua importante j que
esses animais desenvolvem com muita frequncia as danas nupciais. A alimentao deve ser realizada em dias
alternados com carne bovina ou de frango moda, ou lascas de peixe. Pode-se, ainda, oferecer pequenos peixes
vivos e minhocas picadas. A gua deve ser totalmente trocada aps a alimentao, utilizando-se um sistema
de sifo ou de torneiras instaladas no tanque especificamente para essa finalidade, especialmente quando so
oferecidas as carnes modas. Caso sejam observados resduos aderidos ao tanque, se necessrio, suas paredes
devem ser limpas com esponja ou at mesmo lavadas. Se for necessria a lavagem com detergente para a remoo
de gordura, os animais devem ser retirados com o auxlio de rede para peixes e posteriormente reintroduzidos
na gua limpa.
3.6.7 Ceclias fossrias
As ceclias so tambm popularmente conhecidas como cobras-cegas. Pertencem ao grupo dos Gymnophiona e
compreendem vrias famlias e gneros. So animais essencialmente fossrios e devem ser mantidos em caixas
plsticas contendo substrato de terra, formando colunas de pelo menos 20 cm de altura, bem tampadas com
tela, sem deixar frestas. A superfcie do substrato deve ser enriquecida com elementos que forneam abrigo, tais
como: cascas secas de coco ou frutos de sapucaia com a boca voltada para baixo. No substrato, constroem suas
galerias, mas apreciam tambm utilizar esses abrigos onde podem ser encontrados agregados. A terra deve ser
mantida sempre mida, mas no encharcada. No deve ser revolvida para que as galerias sejam mantidas intactas.
Porm, a cada quatro meses deve ser trocada. A alimentao semanal composta de carne bovina ou de frango
moda, oferecida na forma de pequenas bolas. Deve-se, ainda, alternar essa alimentao com camundongos
neonatos e, vez ou outra, carne de peixe ou corao de boi. A introduo de minhocas na terra benfica, uma
vez que podem servir de alimento e, ao mesmo tempo, contribuir para o equilbrio do substrato por meio da
decomposio de fezes das ceclias e de eventuais contaminaes por sobras de alimento.
49
FASCCULO 6
3.6.8 Ceclias aquticas

As ceclias aquticas pertencem famlia Typhlonectidae. O ambiente ideal desses animais semelhante aos
aqurios convencionais para peixes, com sistema de filtragem externo, cascalho no fundo e aerao, tomando-se
apenas o cuidado de se manter uma longa coluna de gua e uma boa vedao na tampa. Ceclias de correnteza,
como as do gnero Typhlonectes, apreciam a corrente de gua que se estabelece atravs da filtragem e aerao. A
alimentao semanal realizada com minhocas e carne de boi ou frango moda. A filtragem da gua, se eficiente,
dispensa a limpeza do ambiente.
4 EUTANSIA
A eutansia deve ser realizada pela aplicao intraperitonial de uma dose excessiva de tiopental (ou tiopentato
de sdio) a 50 mg/kg. Pode-se, ainda, utilizar lidocana ou benzocana em pomada ou gel por pincelamento no
interior da boca ou na barriga e regio inguinal. Outra opo a administrao intrapleuroperitoneal de volumes
de 0,05 a 2 ml (em funo do tamanho do exemplar) de soluo de cloridrato de lidocana a 2% ou de cloridrato de
bupivacana 0,5%, aguardando um perodo de cinco minutos at que no haja reflexos. Pode-se ainda assegurar a
morte com uma injeo intracraniana via foramen magnum de lidocana ou bupivacana (ver SEBBEN, 2007).
Os animais que venham a bito, seja por morte natural, por doena, ou pelo procedimento de pesquisa cientfica,
devem ser fixados em formalina (formaldedo a 10%) e tombados em colees zoolgicas, sempre que possvel
e quando houver interesse das mesmas. As colees da regio onde ocorre a pesquisa devero ser consultadas
previamente quanto ao interesse em receber esses animais para tombamento.
5 DOENAS MAIS COMUNS OBSERVADAS NO

CATIVEIRO
A rotina de manejo e manuteno de um biotrio de animais silvestres deve contar com uma equipe multidisciplinar
composta, principalmente, por bilogos e veterinrios, de modo a contemplar tanto os aspectos biolgicos
quanto os clnicos referentes ao manejo.
Quaisquer anormalidades devem ser analisadas pelos membros da equipe, os quais devem permanecer sempre
atentos a comportamentos que fogem rotina, sinais de doena ou ferimentos que venham a surgir nos animais.
Essa anlise visa fornecer subsdios para a indicao de possveis tratamentos clnicos pelos veterinrios.
Entretanto, em relao a anfbios, a literatura que versa sobre aspectos clnicos e doenas ainda muito escassa.
Apresentamos, a seguir, algumas das doenas mais comuns que acometem esses animais no cativeiro.
5.1 Micose
Causa: diversos fungos
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FASCCULO 6
Sintomas: mudana na aparncia normal do tegumento, ferida circular que com o tempo sofre aumento
no dimetro e na profundidade.
Tratamento: uso de antimictico.
5.2 Doena da perna vermelha (red leg disease)

Causa: infeco por bactrias como as do gnero Pseudomonas
Sintomas: ruborizao da pele e hematomas ao longo da regio abdominal e pernas.
Tratamento: uso de antibitico.
5.3 Amebase
Causa: Entamoeba especializada em anfbios (Entamoeba ranarum).
Sintomas: diarreia sanguinolenta, constipao, postura anormal devido destruio dos tecidos internos.
Tratamento: uso do medicamento base de Metronidazol
5.4 Miase
Causa: proliferao de larvas de moscas (diversas espcies).
Sintomas: dano tissular, especialmente na regio dos olhos, narinas e cloaca.
Tratamento: remoo mecnica e subsequente untamento com leo e utilizao de anti-inflamatrio e
antibitico de uso tpico.
5.5 Verminose
Causa: vrias espcies de vermes
Sintomas: muito variveis conforme a espcie de parasita
Tratamento: especfico para cada espcie.
5.6 Protruso intestinal

Causa: presumivelmente por infestao de nematdeos.
Tratamento: manipulao do intestino empurrando-o delicadamente em direo ao interior da cloaca
com um jato de gua. Algumas vezes necessria a remoo cirrgica.
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FASCCULO 6
5.7 Dificuldade na troca de pele

Causa: desidratao.
Tratamento: banhos forados prolongados em gua. A partir disso, faz-se remoo da pele, podendo ser
auxiliado com pina.
5.8 Fraturas sseas

Causa: acidentes causados pelos prprios animais.
Sintomas: membros quebrados
Tratamento: normalmente, ocorre regenerao espontnea, porm, importante prevenir infeco,
utilizando pomada antibitica ou antibitico injetvel.
DAVIES, R.; e DAVIES, V. (1997) The Reptile and Amphibian Problem Solver. Tetra Press.
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52
FASCCULO 6
SERPENTES
1 INTRODUO
As serpentes so animais vertebrados ectotrmicos que fazem parte do grupo dos rpteis. Possuem o corpo
alongado sem patas e coberto por escamas, a cintura escapular est ausente quando a cintura plvica est
presente, ela rudimentar e notam-se pequenos espores em vez de membros plvicos (VITT e Caldwell, 2009).
No possuem plpebras, mas o globo ocular est protegido por uma escama crnea transparente. O ouvido
externo est ausente e o mdio adaptado para sentir vibraes do solo. So animais carnvoros que ingerem
suas presas inteiras, possuindo diferentes tticas para subjugar suas presas. Enquanto algumas serpentes
simplesmente abocanham e engolem suas presas, outras realizam comportamentos como a constrio e ainda
h as que produzem substncias txicas que so injetadas em suas presas paralisando e matando-as. Apesar
do formato externo muito semelhante entre as espcies, o tamanho destas pode variar de alguns centmetros
a vrios metros. Uma caracterstica muito interessante das serpentes o fato de alguns grupos produzirem
substncias txicas que quando inoculadas matam suas presas ou causam acidentes nos seres humanos.
Para produo, manuteno ou utilizao para fins de pesquisa ou ensino, envolvendo serpentes ou qualquer
outro animal silvestre, necessria a aprovao do Comit de tica local e aprovao dos rgos responsveis
(Ibama, Instituto Chico Mendes de Conservao da Biodiversidade ICMBio, por meio do Sistema de Autorizao
e Informao em Biodiversidade Sisbio, e/ou Secretaria Estadual do Meio Ambiente). A Instruo Normativa
do Ibama N. 169/2008, de 20 de fevereiro de 2008 regulamenta procedimentos de autorizao de diferentes
categorias de empreendimentos utilizadores de fauna silvestre. A Instruo Normativa do ICMBio N 03, de
02 de setembro de 2014, regulamenta atividades cientfica ou didticas que envolvam coleta ou captura dos
animais silvestres na natureza, manuteno destes em cativeiro por perodo inferior a 24 meses e coleta de
material biolgico de animais silvestres mantidos em cativeiro.
2 INSTALAES ANIMAIS
2.1 Estrutura fsica dos recintos (macro e microambientes)
As serpentes podem ser mantidas de duas maneiras distintas, serpentrio fechado (criao intensiva) e
serpentrio aberto (semiextensiva) (LELOUP, 1984).
No serpentrio fechado, as serpentes devem ser mantidas em caixas dentro de salas, enquanto que, no
serpentrio aberto, as serpentes devem ser mantidas em recintos delimitados em reas externas. A rotina de
manejo e manuteno em qualquer um dos serpentrios deve contar com uma equipe de bilogos e, ao menos,
um veterinrio responsvel. Requisitos mnimos para produo, manuteno ou utilizao de serpentes para
atividades de ensino ou pesquisa cientfica so apresentados no Anexo II.
2.1.1 rea de recinto e condies ambientais
2.1.1.1 Serpentrio fechado
53
FASCCULO 6
um tipo de instalao til para casos de manuteno de serpentes que no so adaptadas s condies
climticas da regio, j que possvel controlar fatores como temperatura, umidade e iluminao.
Por exemplo, quando se mantm serpentes de reas equatoriais em local com clima subtropical. No
serpentrio fechado a reproduo pode ser controlada e as serpentes podem ser melhor acompanhadas
individualmente quanto sua alimentao, condies de sade, etc. (LELOUP, 1984).
Dimenses
As serpentes so mantidas em gaiolas, caixas ou terrrios. Estes podem estar dispostos em prateleiras, a fim
de otimizar o espao da sala e devem ser de material liso e de fcil higienizao. Deve-se evitar um nmero
superior a dois animais por gaiola, sendo um animal o ideal. As dimenses das gaiolas devem ser compatveis
ao tamanho da serpente e ela enrolada no pode ocupar mais de 1/3 da rea da gaiola. Para as serpentes
arborcolas, a altura disponvel tambm um fator a ser considerado e, nesse caso, a altura deve corresponder
no mnimo metade do comprimento da serpente. Serpentes semiaquticas ou aquticas devem ter um local
que possam nadar ou banhar-se, mas tambm a opo de um local que possam permanecer sem estar em
contato com a gua, mantendo todo seu corpo em ambiente seco.
Substrato
O substrato pode variar conforme a espcie ou at mesmo o experimento que ser realizado. No caso de
estudos relativos histria natural e comportamento dos animais, substratos naturais podem ser usados,
simulando o habitat em que as serpentes vivem. Terra, cascalho, pedras, areia e troncos podem ser utilizados,
contanto que tenham passado por um processo de desinfeco previamente (ver item Higienizao abaixo).
Outros tipos de substratos so o papel-jornal e o papelo corrugado. No caso do papel-jornal, deve-se forrar
a gaiola com uma camada formada por vrias folhas de jornal, j que, em caso da serpente virar o bebedouro
de gua, o jornal possa absorver a gua, evitando que o ambiente fique alagado. Pelo fato de o jornal ser uma
superfcie lisa, deve ser inserido um objeto como um pedao de rocha ou telha ou qualquer outro objeto rugoso
para que a serpente deslize seu corpo contra o objeto e consiga realizar a ecdise. Serpentes arborcolas devem
ter condies de ocupar a gaiola tridimensionalmente. Para tal, devem existir suportes em diferentes alturas
para que a serpente possa escalar e se manter enrodilhada acima do nvel do piso da gaiola. As diferenas da
habilidade em escalar, assim como tamanho dos animais, devem ser levadas em considerao com relao ao
tamanho dos suportes e a quantidade dos mesmos. Por exemplo, a cobra-papagaio (Corallus caninus) consegue
se equilibrar em um nico galho, enquanto outras necessitam de reas de forquilha para se manter acima da
superfcie. Algumas serpentes so fossoriais. Nesse caso, necessrio que o substrato permita que as mesmas
se enterrem. Pode-se, ento, utilizar vermiculita, sabugo de milho triturado, areia, etc. Para serpentes que
vivem sob o folhio ou troncos de rvores, uma opo o uso de cascas de rvores (barks).
Serpentes muito pesadas podem vir a ter problemas nas escamas ventrais caso o substrato no seja macio o
suficiente, nesse caso a maravalha uma boa opo. Entretanto, cuidados devem ser tomados no momento
da alimentao quando o substrato formado por pequenas partculas, como a serragem, j que, durante a
ingesto da presa, pode haver ingesto do material particulado, causando srios problemas na boca ou no trato
digestrio (CARE, 1980-1984). A origem do material utilizado deve ser verificada evitando assim problemas
como contaminao e leses das serpentes.
Fonte de gua e umidade
Apesar de algumas serpentes serem encontradas em ambientes xricos, imprescindvel a presena de uma
54
FASCCULO 6
fonte de gua para que a serpente possa ingerir gua e para manter a umidade no interior da gaiola. Essa
gua deve ser tratada e trocada a cada trs dias, evitando o desenvolvimento de bactrias. O bebedouro
deve ser liso para melhor higienizao, lavado com detergente comum e ser bem enxaguado, a cada troca
de gua. Serpentes podem tambm ingerir gua que acumula sobre seu corpo (ANDRADE e ABE, 2000). Este
um comportamento muito importante no caso das serpentes arborcolas que em condies naturais no
descem ao solo para beber gua. Elas ingerem a gua das chuvas que ficam nas folhas e galhos, ou ento
as gotculas nas suas escamas. Assim, para serpentes arborcolas deve-se borrifar gua na gaiola e sobre a
serpente frequentemente (a cada dois ou trs dias), fornecendo gua para ingesto.
A umidade ideal depende da espcie que se est mantendo em cativeiro. Espcies provenientes de matas
fechadas possuem uma maior necessidade de umidade do que aquelas que habitam locais rochosos e secos.
Deve haver um higrmetro na sala para controle; a observao dos animais e das suas condies do bons
indcios se a umidade do local adequada. Dificuldades para realizar a ecdise e/ou acmulo de disecdises so
indcios de uma baixa umidade no local que pode ser compensada com borrifos de gua na gaiola. A existncia
de fungos na gaiola ou mesmo micoses nas escamas das serpentes, por outro lado, demonstra que a umidade
(pelo menos no interior da gaiola) est elevada. Aumento de pontos de ventilao nas gaiolas, aumentando o
fluxo de ar pode ser a soluo. Caso o problema no seja solucionado e se estenda a muitas gaiolas e animais,
deve-se aumentar a ventilao da sala.
Temperatura
As serpentes como animais ectotrmicos necessitam de fonte de calor externo para manuteno da sua
temperatura. Portanto, necessrio dar serpente condies para que a mesma consiga manter o intervalo
de temperatura do seu corpo dentro dos nveis aceitveis para realizao das suas atividades fisiolgicas e
comportamentais. Devido existncia de grande diversidade de serpentes com seus diferentes hbitos e
temperaturas, no possvel estabelecer uma temperatura exata ou mesmo um intervalo ideal que sirva
indistintamente para todas as espcies de serpentes.
recomendado proporcionar gradientes de temperatura no interior dos terrrios, visando o bem-estar dos
animais. Caso sejam mantidas na sala serpentes com preferncias trmicas diferentes, fontes de calor devem
ser providenciadas. Existem produtos como pedras aquecidas prprias para aquecimento de terrrios que
podem ser usadas, porm, deve-se tomar cuidado para que a serpente no consiga entrar em contato direto
com a fonte de calor caso esta seja uma lmpada de bulbo ou resistncia, a fim de evitar queimaduras na pele.
Iluminao
Diferentemente de outros rpteis como lagartos e tartarugas, que necessitam de radiao solar para sntese
de vitamina D, as serpentes obtm essa vitamina por meio da alimentao. Esse fato possibilita a manuteno
de serpentes sem a necessidade de iluminao especial com UVB (comprimento de onda de 290-320 nm).
Entretanto, assim como para os outros animais, fundamental um ciclo de claro e escuro. A iluminao natural
(atravs de janelas ou claraboias) j suficiente para a manuteno do ciclo. Caso a sala no possua iluminao
natural, deve ser fornecido um ciclo de 12/12 horas, ou ento similar ao ciclo na regio onde se encontra o
serpentrio. Se houver sistema de ventilao na sala (uso de insuflao e exausto de ar) as janelas podem
ser seladas. Do contrrio, melhor que as janelas possam ser abertas e teladas por fora, para evitar fugas e
entrada de insetos.
55
FASCCULO 6
2.1.1.2 Serpentrio aberto

Neste caso, as serpentes so alojadas em reas externas delimitadas. Nesse tipo de serpentrio, as
serpentes esto em condies mais prximas s condies naturais, tendo contato com chuva, radiao
solar, vento, rochas, etc. (LELOUP, 1984). Quando comparado ao serpentrio fechado, uma srie de
fatores naturalmente resolvida como, por exemplo, a iluminao. No entanto, deve-se ter em mente
que nesse tipo de serpentrio as espcies a serem mantidas devem ser tpicas da regio de instalao do
serpentrio ou ento de locais com caractersticas climticas semelhantes.
No cativeiro semiextensivo, se as instalaes atenderem a todos os requisitos estruturais e de segurana,
o manejo dos animais facilitado, necessitando apenas de adequaes nos aquecedores quando a
temperatura cai. O tempo de quarentena de 45-60 dias considerado adequado, embora muitas vezes
exames clnicos sejam necessrios para evitar a introduo de doenas nos recintos. O manejo alimentar
individualizado e os tcnicos devem monitorar, a distncia, se a serpente se alimenta ou no. A
marcao para identificao das serpentes pode ser feita por meio de marcas naturais, tinta nas escamas
ou microchip subcutneo.
O trabalho do tcnico do serpentrio envolve familiaridade, com a manuteno e manejo de serpentes,
principalmente no recinto das peonhentas.
No Brasil, as serpentes usualmente mantidas em cativeiro semiextensivo pertencem famlia Viperidae
(gneros Bothrops e Crotalus) e representantes da famlia Boidae (gneros Boa e Epicrates). Representantes
de outras famlias podem ser utilizados, porm, a taxa de mortalidade desses animais costuma ser mais
elevada.
Dimenses
No caso do serpentrio aberto, as dimenses dependem mais das condies de implantao e do nmero de
animais a serem mantidos. Deve-se utilizar a regra de uma serpente mdia (cerca de 1 m) por m2, com 150
cm de altura mnima das laterais e 3 a 4 m2 para serpentes maiores de 2 m. Em casos de serpentrios acima
de 50 m2, sugere-se a diviso em unidades menores (baias ou parques) a fim facilitar o manejo profiltico.
fundamental que exista rea sombreada para as serpentes, assim como abrigos, para que elas no se sintam
desprotegidas e merc de predadores como guias, gavies e gambs. importante conhecer muito bem
o comportamento e as capacidades das espcies a serem mantidas em cativeiro para determinar a altura do
muro que ir delimitar o recinto, evitando a sada ou entrada de outros animais. A cobertura com tela pode
ser uma opo. A cenografia do recinto deve assemelhar-se ao habitat natural da serpente (e.g. ambiente de
Cerrado para cascavis e ambiente de Mata Atlntica para jararacas e jiboias). O sistema de circulao de gua
pode incluir um riacho em toda a extenso do serpentrio, com um sistema de escoamento da gua no cho
ou mesmo uma cachoeira entre as pedras (MELGAREJO-GIMENEZ, 2006).
Substrato
Normalmente, os serpentrios abertos possuem substrato natural formado por terra, vegetao, folhio, areia,
pedaos de rochas, galhos, etc. Pode haver uma parte do serpentrio com substrato artificial (grama artificial,
concreto, etc.) para facilitar a higienizao do local.
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FASCCULO 6
Fonte de gua e umidade

Devido presena da luz solar, a fonte de gua para os animais deve ser de gua corrente ou ento ser
trocada todos os dias para evitar o acmulo de algas e bactrias. E, assim como no serpentrio fechado, a gua
disponvel deve ser tratada. De maneira geral, a umidade natural j suficiente, mas, dependendo do local e
devido a picos de perodo seco, pode-se aumentar a umidade, molhando atravs de uma mangueira o recinto
de uma a duas vezes por dia. Dificilmente ocorrem casos de umidade excessiva graas ventilao natural. E
assim como no serpentrio fechado, a presena de micoses nas escamas ou disecdises tambm so indicativos
de possveis desequilbrios na umidade local. Importante lembrar que o recinto deve ter escoamento de gua
protegido por tela para que a gua da chuva no se acumule, alagando o serpentrio e para que as serpentes
no escapem.
Temperatura
O serpentrio aberto possui uma grande vantagem que permitir a termorregulao natural pelas serpentes.
No entanto, necessrio que se d opes de diferentes temperaturas para que as serpentes possam elevar
ou abaixar a sua temperatura corprea. reas com insolao e com diferentes graus de sombreamento
ocorrendo ao mesmo tempo so fundamentais para que as serpentes escolham o que melhor lhes convm
naquele momento. Durante o inverno, caso as espcies de serpentes no estejam acostumadas a quedas de
temperatura da regio, necessrio o uso de aquecedores ou, ento, o deslocamento das serpentes para
serpentrios fechados.
Iluminao
A iluminao natural possui vantagens em relao luz artificial. O ciclo de claro e escuro naturalmente
controlado, a luz solar um agente bactericida (DANIEL et al., 2001) e a radiao uma fonte de calor para a
termorregulao das serpentes. Devem-se tomar cuidados com a insolao nas serpentes, portanto, ambientes
abrigados da luz solar devem estar disponveis a todos os indivduos.
Higienizao
A higienizao do recinto deve ser realizada a cada 15 dias com a lavagem dos bebedouros, paredes internas
e externas, com gua e sabo, enquanto os espelhos dgua com lavadora de alta presso. Uma interveno
sanitria no serpentrio (higienizao completa das paredes e piso com hipoclorito de sdio) realizada uma
vez por ano em cada recinto ou a cada troca do plantel.
Alimentao
Viperdeos e bodeos so alimentados mensalmente com camundongos (Mus musculus) ou ratos (Rattus
norvegicus) de acordo com o tamanho da serpente. Durante a alimentao dos animais, as serpentes so
separadas em diferentes pontos do recinto para que ocorra melhor distribuio do alimento e para evitar a
disputa das serpentes pela mesma presa (roedor). Nas primeiras duas semanas, o manejo e a circulao de
pessoas aps a alimentao das serpentes devem ser evitados. Outras presas (e.g. anfbios e lagartos) devem
ser utilizadas no caso de colubrdeos ou dipsaddeos.
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FASCCULO 6
Parmetros fisiolgicos e Reproduo

A temperatura corprea de machos e fmeas ao longo das estaes do ano pode ser monitorada nos diferentes
microhabitats do cativeiro semiextensivo. A mensurao pode ser feita com o termmetro infravermelho que
elimina a necessidade de contato com o animal.
O cativeiro semiextensivo permite acompanhar e observar vrias interaes entre machos e fmeas na poca
do acasalamento. Em cascavis e jararacas, por exemplo, durante os meses de abril a junho (outono), so
observados vrios comportamentos reprodutivos, tais como luta entre machos (rituais de combate), corte,
perseguio e acasalamento. No final da primavera observam-se vrias fmeas termorregulando, o que pode
ser muito importante para otimizar o metabolismo da me e dos embries durante a gestao. Fmeas prenhes
podem ser acompanhadas e identificadas por marcao individual. Desse modo, no final do vero poderemos
registrar o nascimento de filhotes e identificar as mes. Observaes de processos reprodutivos podem ser
obtidas tambm em outras espcies de serpentes em cativeiro semiextensivo. Tais registros constituem
informaes preciosas sobre a biologia reprodutiva desses animais, que, por sua vez, podem contribuir para o
melhor manejo dos mesmos.
2.1.1.3 Quarentena e identificao
A quarentena dos animais recm-chegados fundamental para evitar a propagao de doenas
infectocontagiosas no plantel. A quarentena deve estar prxima ao biotrio, mas separada por barreiras
fsicas, como portas. Caso no haja funcionrios exclusivos para atuar nas salas de quarentena, o
fluxograma da instalao animal deve ser feito de modo que as salas da criao sejam atendidas em
primeiro lugar. A vestimenta do funcionrio deve ser trocada ao entrar na quarentena e, em nenhuma
hiptese, o funcionrio poder voltar criao principal. No havendo espao fsico para a separao em
salas diferentes, pode-se utilizar prateleiras separadas para o isolamento dos animais recm-chegados,
nesse caso o material de cada prateleira deve ser individualizado.
Serpentes coletadas na natureza ou trazidas de algum outro local devero receber ficha de identificao
individualizada, na qual sero armazenados dados sobre a procedncia do animal, data e local de coleta
e o nmero de registro da serpente. Na quarentena, as serpentes so mantidas em caixas individuais.
As caixas so forradas com papelo e gua ad libitum. A inspeo deve ser realizada diariamente, sendo
as caixas trocadas quando necessrio. Aps o processo de registro, as serpentes devem permanecer por
perodo de 45 - 60 dias em quarentena. A ficha deve conter ainda registros das serpentes, tais como:
comprimento rostro-cloacal (CRC) e comprimento da cauda (CC), massa e sexo do animal. Ao tratador,
indicado o uso de equipamentos de proteo individual, como: luvas de borracha ou cirrgicas e mscaras,
uma vez que diversos agentes infecciosos podem ser transmitidos das serpentes para o homem.
O controle de endo e ectoparasitas deve seguir um programa estabelecido pelo responsvel tcnico
da instalao. Durante o perodo de permanncia na quarentena, as serpentes devem ser observadas
quanto frequncia alimentar, regurgito, defecao e ecdise.
Na quarentena, recomendado que os ganchos e tubos sejam desinfetados aps o manejo de cada
serpente, para evitar contaminaes entre os animais. Essa desinfeco pode ser realizada imergindo os
insumos em um recipiente com soluo de hipoclorito de sdio a 0,5% ou soluo de amnio quaternrio
inodoro.
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FASCCULO 6
Antes de serem liberados para o plantel, exames coproparasitolgicos devem ser realizados nas serpentes
da quarentena. Os animais s devero ser encaminhados ao biotrio de criao quando os resultados de
todos forem negativos.
Todos os animais devem ser identificados. O uso do microchip muito recomendado. Os animais devem
ser microchipados aps 45 a 60 dias de quarentena (JACOBSON et al. 1992). O microchip (transponder)
implantado por via subcutnea com auxlio de um aplicador, no lado esquerdo do ltimo tero do
corpo da serpente. Um leitor especial permite identificar, a cerca de 30 cm, o cdigo do transponder,
que, aplicado corretamente, bem tolerado e no produz inflamao nem sofre migraes dentro do
corpo do animal. Esse procedimento est de acordo com a Instruo Normativa do Ibama (02/2001) a
qual estabeleceu a obrigatoriedade de se identificar os animais em criadouros por sistema eletrnico
de microchip. Alm disso, pode ser feita uma marcao externa com esmalte na base da cauda para
identificao visual.
2.1.2 rea de utilizao
Pesquisas relacionadas ao comportamento ou fisiologia podem ocorrer dentro da prpria gaiola, terrrio ou
recinto onde o animal mantido. A sala deve ter caractersticas semelhantes s salas para outros animais de
laboratrio. Paredes e tetos devem ser lisos e lavveis, sem rachaduras que possam acumular microrganismos. O
cho e as bancadas ou prateleiras devem ser resistentes a produtos qumicos para higienizao e impermeveis.
A sala deve ser iluminada com luz artificial ou natural, nesse caso as janelas devem possuir tela para evitar a
entrada de insetos. No se aconselha a existncia de escada na sada da sala, optando-se, quando possvel,
pela utilizao de rampas.
2.2 Apoio tcnico

Composto por uma rea de higienizao, sala de procedimentos (ambulatrio e centro cirrgico), depsito,
rea de triagem, rea de quarentena e sala de necropsia. Todas as atividades realizadas nas diferentes reas da
criao e experimentao animal devem ter uma descrio detalhada das operaes, para que os procedimentos
sejam sempre uniformizados e padronizados (Procedimento Operacional Padro POP).
2.2.1 rea de higienizao
Esta rea deve ser adequada lavagem e desinfeco das gaiolas e materiais utilizados na criao das serpentes.
Muitas vezes, a rea de higienizao se encontra no interior da sala de manuteno e se restringe a uma pia ou
torneira instalada em um dos cantos. A higienizao das gaiolas ou terrrios deve ser feita em outro ambiente, j
que necessrio o uso de substncias qumicas, como: hipoclorito de sdio, quarternrio de amnio, clorexidine ou
lcool etlico para a desinfeco e higienizao, alm da gua e sabo. O resduo originado neste local, como fezes
e substratos, deve ser descartado em saco de lixo branco para material infectante e posteriormente ser incinerado.
2.2.2 Ambulatrio e centro cirrgico
Quando a pesquisa/ensino necessitar de exames mais especficos ou cirurgias, deve haver um ambulatrio
e/ou centro cirrgico, ou ento convnios com locais que estejam adequados para tais procedimentos. O
ambulatrio e/ou centro cirrgico so espaos contguos, sendo que no ambulatrio so realizados exames
clnicos gerais, retirada de secrees, bipsias, curativos e preparao do paciente para a interveno cirrgica.
59
FASCCULO 6
No ambulatrio, devemos ter uma pia, uma estufa para esterilizao de material, uma mesa de fcil desinfeco
(ao inoxidvel, por exemplo) e todo o material e medicamento necessrios para os procedimentos a serem
realizados. O centro cirrgico dever ter uma mesa em material de fcil desinfeco e uma boa iluminao, que
pode ser conseguida atravs de um foco cirrgico fixo ou porttil. Muitas vezes, por falta de espao, no h
condies de ter um ambulatrio e um centro cirrgico na criao/experimentao de serpentes. Desse modo,
o ambulatrio e o centro cirrgico podem ser em uma nica sala, desde que o ambiente seja devidamente
limpo e desinfetado antes de realizar uma cirurgia.
As paredes e o cho devem ser de material no poroso, de fcil limpeza, com cantos arredondados e a porta
deve ter visor. Se nas salas houver janelas, estas devem permanecer fechadas durante os procedimentos para
evitar a entrada de poeira e insetos.
2.2.3 Depsito
importante que na criao haja um espao reservado para os materiais de reposio utilizados na criao,
como gaiolas e bebedouros lavados e desinfetados, substratos limpos, sacos de lixo e luvas de procedimento.
2.2.4 Triagem
Antes de entrarem na quarentena, as serpentes recm-chegadas ao plantel devem passar pela triagem, uma
sala prxima quarentena onde os primeiros tratamentos profilticos so administrados. Essa sala deve ter
uma porta com visor, uma pia, uma mesa de fcil limpeza para a realizao do exame clnico geral, determinao
do sexo, medida dos dados biomtricos (como comprimento rostro-cloacal e rostro-total) e uma balana para
pesagem dos animais.
2.2.5 Sala de necropsia
A sala de necropsia deve ter uma pia, uma mesa de ao inoxidvel, uma geladeira e um freezer. As paredes e
piso devem ser de material impermevel e de fcil limpeza. A necropsia deve ser realizada com equipamentos
de proteo individual como luvas, mscara e culos de proteo. O avental utilizado na necropsia no poder
ser utilizado em nenhum outro local da criao. Sugere-se o uso de prop na sala de necropsia. Animais que
vm a bito devero ser levados, em sacos plsticos adequados, sala de necropsia, onde so colocados na
geladeira. Aps a necropsia e coleta de material para exame histopatolgico, os animais so adequadamente
embalados em sacos plsticos e colocados no freezer at o descarte apropriado. Sempre que possvel, as
serpentes devem ser fixadas em formalina (fomaldedo a 10%) e tombadas em colees zoolgicas (mais
informaes no item 5.7).
3 PROCEDIMENTOS DE MANEJO
3.1 Alimentao
As serpentes so animais carnvoros que sempre se alimentam da presa inteira. Existe uma vasta diversidade de
itens alimentares que so predados pelas diversas espcies e algumas delas possuem modificao ontogentica
na dieta. O primeiro passo conhecer a dieta alimentar da espcie em vida livre e adaptar s condies
60
FASCCULO 6
de cativeiro. importante que a presa a ser fornecida como alimentao seja procedente de locais prprios
de criao (biotrios de camundongos e ratos, ranrios, etc.) e que tenham um controle das suas condies
sanitrias. No entanto, h casos em que faz parte da experimentao oferecer animais coletados na natureza
(por exemplo em casos de estudos do comportamento alimentar), ou que no exista criao do alimento, mas
corre-se o risco de introduzir patgenos no plantel. Nem sempre possvel oferecer a mesma dieta da natureza
no cativeiro por dificuldade em se conseguir a presa. Nesse caso deve-se fazer uma adaptao da serpente
ao alimento. Por exemplo, filhotes de Bothrops jararaca se alimentam de presas ectotrmicas na natureza
quando jovens. No entanto, com insistncia, eles acabam aceitando filhotes de camundongos na alimentao.
Serpentes costumam matar suas presas antes de ingeri-las, mas deve-se tentar oferecer a presa submetida
eutansia. Caso a serpente no aceite a presa morta, deve-se insistir movimentando-a perto da serpente. Se
mesmo assim ela recusar, a presa deve ser oferecida viva. Se for oferecido alimento vivo e que possa levar perigo
para a serpente (por exemplo, um roedor), deve-se colocar na gaiola alimento para a presa. Caso a serpente
no prede o roedor, este ter alimento e no atacar a serpente. As presas vivas no devem permanecer na
sala de manuteno das serpentes quando no estiverem sendo oferecidos para alimentao. Estudos indicam
que mesmo camundongos de laboratrio reconhecem o odor das serpentes como ameaa e apresentam
comportamentos estereotipados de medo (WELDON et al., 1987). Da mesma maneira, aconselhvel que
toda sala de manuteno seja alimentada no mesmo dia, evitando que serpentes sintam o odor da presa, mas
no sejam alimentadas.
A frequncia da alimentao tambm variada, dependendo da espcie. Serpentes que se alimentam de
grandes volumes relativos de uma s vez podem ser alimentadas mensalmente (por exemplo bodeos e
viperdeos) com cerca de 10% a 20% do seu peso em alimento (que pode ser fracionado em duas ou trs
presas). J outras serpentes que se alimentam mais frequentemente, mas de presas menores, podem ser
alimentadas quinzenalmente ou mesmo semanalmente (por exemplo Micrurus). importante oferecer uma
presa compatvel com a capacidade de ingesto da serpente para que a mesma no sofra tentando ingerir
um alimento muito grande (SAZIMA e MARTINS, 1990). Em todos os casos, o controle do ganho do peso e do
crescimento fundamental para evitar sobrepeso dos animais.
3.2 Higienizao
Diariamente, os resduos de excrees e ecdises devem ser removidos das gaiolas das serpentes ou, quando
necessrio, a gaiola deve ser trocada. A cada trs dias, ou antes se necessrio, o bebedouro deve ser trocado.
Tanto as gaiolas como os bebedouros devem ser lavados com sabo neutro e desinfetados com uma soluo de
hipoclorito de sdio a 0,4% ou com uma soluo de amnio quaternrio inodoro. As gaiolas devem secar fora
da sala de manuteno para que o odor dessas substncias qumicas no influencie as serpentes. O substrato
arbreo utilizado para as serpentes de hbito arborcola precisa ser regularmente lavado e desinfetado. O
recipiente com gua, utilizado para as serpentes de hbito semiaqutico, deve ser lavado a cada trs dias.
Embora a terra no seja um bom substrato para manter as serpentes de criao ou experimentao, por
dificultar a retirada dos resduos, se o seu uso for necessrio, esta deve ser trocada mensalmente.
Deve-se tomar muito cuidado com a procedncia dos substratos utilizados nas gaiolas, pois podem estar
infectados com caros, carrapatos ou microrganismos prejudiciais s serpentes. Galhos, folhas, cascalhos e
terra devem ser autoclavados previamente. Outra opo de desinfeco, com exceo da terra, imergir os
substratos por um perodo de 2 horas em uma soluo de hipoclorito de sdio a 0,4% e postos para secar.
61
FASCCULO 6
Nenhum material de uma sala pode ser utilizado em outra, para evitar contaminaes. Regularmente, o
material de conteno de cada sala, ganchos e tubos de conteno devem ser desinfetados com uma soluo
de hipoclorito de sdio a 0,5% ou com uma soluo base de amnio quaternrio inodoro. Semanalmente, o
piso das salas deve ser limpo com detergente neutro e gua.
3.3 Conteno
Existem equipamentos prprios para a conteno de serpentes: gancho, lao de Lutz, pino e tubo de
conteno. Para cada situao e espcie a ser contida pode-se usar um ou mais equipamentos. O gancho
o equipamento mais verstil, j que com ele podemos erguer uma serpente e transport-la de um lado para
outro. formado de um cabo que possui a ponta curvada em forma de L ou C. Com o gancho, tambm
podemos pressionar a cabea da serpente de modo a imobiliz-la antes de cont-la com as mos.
O lao de Lutz composto por um cabo e na sua ponta uma tira de couro (de 2 a 3 cm de largura) que corre
por uma guia diminuindo ou aumentando o tamanho do lao. Deve ser usado para conteno passando o lao
pela cabea da serpente e apertando a regio do pescoo. Sua utilizao deve ser realizada para contenes de
curtos perodos. A fora de presso do lao no pescoo deve ser suficiente para imobilizar a cabea da serpente
sem, no entanto, machuc-la. Deve-se ter mais cuidado com espcies que no tenham traqueia pulmonar (por
exemplo, Lachesis e Micrurus), evitando o sufocamento das serpentes. Esta uma boa opo para contenes
rpidas de serpentes peonhentas e que necessitem observar ou manusear partes do corpo inclusive a cabea.
O pino pode ser utilizado para conteno e deslocamento de serpentes, principalmente para aquelas que so
mais geis e que no se mantm no gancho.
O tubo de conteno deve ser longo e transparente. A serpente induzida a entrar no tubo e aps adentrar ao
menos um tero de seu corpo no tubo, o mesmo deve ser pressionado levemente no substrato, a fim de impedir
o movimento do animal. Com auxlio das mos, o animal fica retido no interior do tubo conferindo segurana
total ao tratador. O dimetro do tubo deve ser tal que no permita que a serpente consiga virar a sua cabea e
retornar. Caso sejam mantidas serpentes de diferentes tamanhos, deve-se ter tubos de diferentes dimetros. A
borda de entrada do tubo deve ser lisa de modo a no ferir a serpente quando da sua entrada. O tubo mantm a
poro posterior da serpente livre para os procedimentos necessrios (ver LOCK, 2008), observando a ventilao
do tubo para que no sufoque a serpente.
3.4 Enriquecimento ambiental

Embora sejam animais com metabolismo baixo, quando comparados aos mamferos e aves, e, assim, apresentem
pouca atividade no seu recinto, o oferecimento de itens de enriquecimento ambiental importante para
promover melhor grau de bem-estar s serpentes. Serpentes arborcolas devem ter condies de se manter
acima do substrato atravs de galhos ou canos. Para serpentes aquticas, a possibilidade de corpos dgua
grandes o suficiente para nadar, tambm um item de enriquecimento ambiental. Serpentes mantidas em
ambientes com muita presena humana, devem ter locais de abrigo onde elas se sintam protegidas.
Os recintos podem ser constitudos de rvores, plantas e arbustos originrios de cada rea nativa do habitat da
serpente. Alm disso, devero ter elementos naturais, rvores, touceiras e gramados. Esses materiais podem
ser dispostos para abrigar os animais (e.g. buracos no solo, tocas, iglus, sombras debaixo de folhas de bananeira,
troncos, pedras, arbustos ou rvores). Todos esses elementos podem vir a constituir um microhabitat para
diversas espcies de serpentes e permitem a seleo de habitat mais adequado para seu metabolismo e
sobrevivncia (GOMES & ALMEIDA-SANTOS, 2012).
62
FASCCULO 6
3.5 Medicina preventiva

A medicina preventiva dedica-se a prevenir as doenas em vez de trat-las. Nesse contexto, o distresse
(estresse crnico) um dos fatores mais importantes em serpentes e com o qual temos que ter maior cuidado,
pois os animais submetidos ao distresse tm uma queda na resistncia imunolgica, predispondo-os a vrias
doenas. Para minimizar o estresse crnico, devemos nos preocupar com o bem-estar dos animais e mantlos em condies ambientais favorveis (temperatura, umidade, luminosidade e substrato apropriados),
em ambientes tranquilos e com uma alimentao adequada para cada espcie. Tratamentos profilticos e
exames laboratoriais so importantes para manter a higidez dos animais e diagnosticar precocemente algumas
doenas, respectivamente. A seguir alguns itens importantes na preveno de doenas em serpentes, inclusive
antropozoonoses (doenas transmitidas ao homem por um reservatrio animal).
3.5.1 Inspeo diria
Diariamente, as serpentes devem ser vistoriadas por profissionais devidamente treinados. O mdico veterinrio
responsvel deve ser avisado de qualquer mudana de comportamento, presena de feridas, ectoparasitos ou
qualquer anormalidade clnica, para que medidas adequadas sejam tomadas. Como, na maioria das vezes, as
serpentes no demonstram sintomas clnicos, importante que dados de peso, frequncia de alimentao e
de ecdise sejam anotados na ficha individual dos animais para auxiliar no diagnstico. Existe uma diversidade
de doenas que acometem as serpentes em cativeiro e que esto descritas em literatura (MADER, 2006;
JACOBSON, 2007; GREGO, RAMEH-DE-ALBUQUERQUE, KOLESNIKOVAS, 2014).
3.5.2. Biossegurana
Toda a equipe tcnica envolvida no manejo das serpentes peonhentas de importncia em sade (famlia
Viperidae e Elapidae), serpentes peonhentas sem importncia em sade (famlia Colubridae e Dipsadidae) ou
serpentes no peonhentas (Colubridae, Dipsadidae, Boidae, Pythonidae) deve ser treinada por profissionais
com experincia na rea. Equipamentos de proteo individual (EPIs), como: aventais, botas, luvas de
procedimento, props e culos de segurana devem estar disposio da equipe e serem utilizados, conforme
o trabalho desenvolvido em cada criao. A equipe tambm dever ser treinada para utilizar apropriadamente
e com segurana os equipamentos para o manejo das serpentes, como ganchos, laos de Lutz, tubos de
conteno e pino, que devem estar sempre em boas condies de uso e limpos.
No indicado que um tcnico trabalhe sozinho em um biotrio de serpentes peonhentas de importncia em
sade. Dever haver um telefone no biotrio e um nmero de emergncia para o qual o tcnico dever ligar
em casos de acidente. Cartazes com informaes do que fazer em casos de acidentes ofdicos devem estar
visveis no biotrio.
Em relao s zoonoses, a Salmonella sp uma bactria presente na microbiota intestinal da maioria das
serpentes, com potencial zoontico. Os principais sintomas em humanos so diarreia, vmito e cefaleia. Existem
outras bactrias (Quadro 1) tambm presentes na microbiota intestinal ou na microbiota da cavidade oral das
serpentes e que tambm podem causar enfermidades em humanos, principalmente nos imunossuprimidos
(S & SOLARI, 2001; JHO et al., 2011). A microbiota fngica de serpentes inclui Geotrichum sp (PAR et
al., 2007), Aspergillus sp (AUSTWICK & KEYMER, 1981), Mucor sp (NORBERG et al., 2011), Trichophyton sp
(PAR et al., 2007) e Trichosporon sp (CAMPAGNER, 2011), mas as pessoas mais susceptveis so tambm as
imunossuprimidas. A utilizao de luvas de procedimento durante a troca das gaiolas evita a contaminao
bacteriana e fngica. Zoonoses causadas por parasitos de serpentes so mais comuns nos pases asiticos,
atravs da ingesto de serpentes cruas ou mal preparadas.
63
FASCCULO 6
Quadro 1. Principais agentes zoonticos bacterianos envolvidos em biotrios de criao e

experimentao de serpentes.
AGENTE
NB*
VIA DE TRANSMISSO
PROFILAXIA
orofecal
Uso de EPIs
Ingesto ou contato direto com fluidos e

exsudatos corporais.
Uso de EPIs
Salmonella
Aeromonas hydrophila
Citrobacter freundii
Corynebacterium sp
Enterobacter sp
Enterococcus sp
Klebsiella pneumonia
Morganella morganii
Proteus mirabilis
Proteus vulgaris
Providencia sp
Pseudomonas sp
Staphilococcus sp
Mycobacterium
* NB: nvel de biossegurana.
3.5.3 Barreiras sanitrias

Existem vrias barreiras sanitrias importantes na criao de serpentes:
1) utilizao de vestimenta adequada no biotrio como jaleco e botas/props;
2) uso estratgico de pedilvio com soluo desinfetante;
3) elaborao de um fluxograma eficiente, cobrindo primeiro as reas limpas e, posteriormente, as reas sujas;
4) troca da vestimenta nas diferentes reas do biotrio;
5) utilizao de luvas de procedimento na troca de gaiolas e manejo das serpentes;
6) lavagem e desinfeco criteriosa dos insumos utilizados na criao;
7) tratamento profiltico das serpentes recm-chegadas;
8) quarentena dos animais recm-chegados de, no mnimo, 60 dias.
64
FASCCULO 6
3.5.4 Controle de doenas, diagnstico e tratamento

Para o bom desempenho das pesquisas cientficas, recomendvel que as serpentes fiquem em adaptao
por um perodo mnimo de 15 dias antes do incio de sua utilizao. Se o estudo no for a respeito dos
endoparasitos, recomendamos a vermifugao dos espcimes, pois endoparasitos podem causar estresse
crnico nos animais, com consequente imunossupresso, favorecendo que pequenas leses causadas pelos
parasitos nas mucosas sirvam de porta de entrada para bactrias oportunistas. O veterinrio responsvel deve
ser informado imediatamente de qualquer alterao de comportamento, presena de feridas, disecdise ou
fraturas, a fim de realizar exames laboratoriais e preconizar o tratamento mais adequado. O animal doente
deve ser isolado e, dependendo do estudo, excludo. Na literatura, h uma extensa lista das enfermidades mais
comuns, seu diagnstico e tratamento (FRYE et al., 1996; MADER, 2006; GREGO, RAMEH-DE-ALBUQUERQUE
& KOLESNIKOVAS, 2014).
3.5.5 Triagem
Ao chegarem instalao, as serpentes devem passar por um exame clnico para verificao das suas condies
gerais, presena de feridas, fraturas, ectoparasitos, inspeo da cavidade oral, da cloaca, determinao do
sexo e medio dos dados biomtricos. Nesse momento, os animais recebem uma identificao e uma ficha
individual que lhes acompanham por todo o perodo que estiverem no biotrio. aconselhvel que todas as
serpentes recm-chegadas passem por um tratamento ectoparasiticida e endoparasiticida antes de serem
encaminhadas para a quarentena, pois comum chegarem da natureza ou de outros criadouros infestadas
com caros, carrapatos e endoparasitos.
3.5.6 Separao por espcies
O ideal que se faa a separao das serpentes por famlias, em salas ou baias diferentes. Caso no seja
possvel, imprescindvel a separao em diferentes prateleiras com equipamentos separados para cada
grupo. comum que serpentes de famlias diferentes tenham respostas imunolgicas diferenciadas diante de
um mesmo antgeno. Por exemplo, os viperdeos (Crotalus, Bothrops) so muito susceptveis ao paramixovrus,
j os bodeos (Boa, Epichrates) so resistentes a esse vrus, podendo ser portadores assintomticos.
4 PROCEDIMENTOS
4.1 Principais vias de administrao de substncias
A espcie da serpente em tratamento ir determinar a via de administrao de substncias. A via de
administrao para serpentes peonhentas de importncia em sade , geralmente, a injetvel por ser mais
segura para o tcnico.
Via oral:
Para administrar substncias via oral, as serpentes precisam ser contidas manualmente ou sedadas em
recipiente saturado de dixido de carbono.
65
FASCCULO 6
Substncias em suspenso so administradas s serpentes atravs de sondas (o nmero da sonda

depende do tamanho da serpente). A sonda deve ser umedecida em gua para facilitar a passagem pelo
esfago e ser inserida suavemente. O volume a ser administrado no deve passar dos 10% do peso do
animal. Ex.: se uma serpente pesa 100 g, o volume a ser administrado no deve passar dos 10 ml.
Substncias em cpsulas ou comprimidos so inseridos no esfago dos ofdios com o auxlio de uma
pina.
Via subcutnea:
A injeo subcutnea aplicada entre as escamas, na regio lateral do tero cranial da serpente, aps
desinfeco do local com lcool iodado a 0,2%. A conteno pode ser manual, com lao de Lutz ou tubo
de conteno.
Via intracelomtica:
A injeo intracelomtica deve ser feita na regio ventral, cinco dedos acima da cloaca, entre as escamas,
em uma angulao baixa (< 45o). uma tima via para administrar uma grande quantidade de lquido
parenteral. A conteno pode ser manual, com lao de Lutz ou tubo de conteno.
Via intravenosa:
So poucos os stios para administrao venosa de medicamentos em serpentes. A veia caudal de difcil
acesso em pequenas serpentes ou naquelas em que a cauda muito curta, mas um timo stio em
animais de porte mdio a grande, como os viperdeos. Como a veia caudal fica localizada ventralmente s
vrtebras coccigeanas, indicado que se posicione a serpente deixando o seu ventre exposto. A agulha
deve ser escolhida de acordo com o tamanho do animal, sendo inserida na linha mdia da cauda, entre as
escamas, em um ngulo de 45o. Cuidados devem ser tomados para no atingir o hemipnis dos machos.
As injees cardacas s devem ser utilizadas para a administrao de medicamentos de emergncia, pois
h um pequeno risco de hemorragia associada a esse stio (TAMBOURGI et al., 2010).
Via intramuscular:
A injeo intramuscular deve ser realizada nos msculos paravertebrais, inserindo a agulha entre as
escamas e apenas pequenos volumes relativos devem ser administrados por essa via. de fcil acesso
em bodeos, por serem serpentes mais musculosas, mas de difcil acesso em viperdeos que possuem,
geralmente, pouca musculatura paravertebral.
4.2 Colheita de tecidos, fluidos, secrees e excrees

4.2.1 Colheita de tecidos
A bipsia de tecido cutneo e de fragmentos de rgos deve seguir as mesmas recomendaes descritas no
item 5.4 (Cirurgia), por se tratar de um procedimento invasivo.
66
FASCCULO 6
4.2.2 Colheita de amostras sanguneas

So poucos os stios para a venopuno em serpentes. A colheita de sangue pela veia caudal um timo stio
em animais de porte mdio a grande, mas deve-se tomar cuidado para no contaminar a amostra com linfa.
O procedimento para a colheita de sangue pela via caudal segue o mesmo descrito no item 4.1 (Principais vias
de administrao de substncias via intravenosa).
A colheita de sangue atravs da puno cardaca possvel, mas a sedao ou anestesia so necessrias. O
corao pode ser facilmente localizado com o auxlio de um doppler vascular ou por meio da visualizao dos
batimentos cardacos nas escamas ventrais. O corao deve ser estabilizado entre os dedos e a agulha deve
ter calibre adequado para o tamanho da serpente (20 x 0,55 para animais de pequeno porte; 25 x 0,70 para
animais de mdio porte e 30 x 1,0 para serpentes de grande porte). A agulha inserida entre as escamas, uma
ou duas escamas abaixo de onde o corao localizado. Deixe a seringa encher sozinha, para evitar excesso de
presso negativa e o colabamento do ventrculo cardaco (DYER e CERVASIO, 2008).
O plexo venoso vertebral, com auxlio de um scalp 22, tambm pode ser utilizado para colheita de amostras
sanguneas, principalmente em serpentes de grande porte, como os bodeos. Para acessar esse vaso, a
serpente deve ser contida na borda de uma mesa, dobrando-a em um ngulo de aproximadamente 90o, para
facilitar a insero da agulha entre as vrtebras.
4.2.3 Extrao de peonha
A extrao de peonha das serpentes opistglifas (principalmente das famlias Colubridae e Dipsadidae),
ofdios peonhentos sem importncia em sade, pode ser realizada contendo-se manualmente o animal
pela cabea e fazendo-se uma leve massagem caudo-cranial, com os dedos indicador e polegar, em cima
da glndula Duvernoy. Em cada presa (dentio inoculadora), encaixa-se um tubo capilar sem heparina ou
microtubos. Imediatamente aps a colheita, o veneno dever ser refrigerado ou congelado, de acordo com
a necessidade de cada experimento.
A extrao de peonha das serpentes proterglifas (famlia Elapidae) e solenglifas (famlia Viperidae), ofdios
peonhentos de importncia em sade, dever ser realizada com o auxlio do dixido de carbono como medida
de preveno de acidentes. Segundo Wang et al. (1993), o pH do sangue das serpentes que passam pelo dixido
de carbono para a realizao da extrao de veneno, volta rapidamente para os nveis normais. A serpente dever
ser colocada em um recipiente saturado de dixido de carbono at adormecer, aproximadamente 5 minutos.
Esse tempo pode variar de indivduo para indivduo. Aps a sedao a serpente contida manualmente,
fazendo-se uma massagem caudo-cranial em cima da glndula de veneno. No caso dos viperdeos, a extrao
de veneno pode ser feita com microtubos ou tubos encaixados nas presas ou, ento, em um Becker de vidro
imerso em um banho de gelo. No caso dos elapdeos, a extrao dever ser feita com tubos capilares sem
heparina, encaixados nas presas inoculadoras.
Em qualquer um dos casos mencionados acima, aps a extrao, deve-se passar um antissptico nas bainhas
das presas e nas presas para evitar estomatite. Podem ser utilizadas solues de iodopovidone 10% ou de
clorexidine 0,12%.
67
FASCCULO 6
4.3 Modificao de ingesto de alimento

Caso a serpente no se alimente naturalmente, pode-se optar pela alimentao forada. Nesse caso, a presa
deve ter um tamanho inferior capacidade mxima de ingesto da serpente e deve estar morta. Caso ela possua
estruturas que possam lesionar o trato digestrio da serpente, estas devem ser extradas (por exemplo: dentes
incisivos de roedores). Para facilitar o procedimento, a presa deve ser untada com substncia lubrificante que
facilite o transporte pelo trato digestrio (por exemplo: clara de ovo, vitamina).
5 CUIDADOS VETERINRIOS
5.1 Cuidados pr e ps-operatrios
Deve-se fazer uma avaliao pr-operatria na serpente que inclui um exame clnico geral, frequncia cardaca,
frequncia respiratria e avaliao hdrica. Se possvel, exames hematolgicos e bioqumicos tambm auxiliam
na verificao do estado geral do animal. Um jejum de sete dias antes da cirurgia recomendado para as
serpentes, sem restrio hdrica.
Os pr-anestsicos so utilizados para sedar o animal e facilitar a entubao endotraqueal para anestesia
inalatria, assim como diminuir a quantidade de anestesia injetvel utilizada. Como droga pr-anestsica,
atualmente o propofol est sendo bastante utilizado, pois permite uma rpida induo e recuperao
quando comparado a outros agentes. Diferentes combinaes com cetamina tambm so utilizadas como
pr-anestsicos: cetamina + midazolam; cetamina + medetomidina. Diferentemente dos mamferos, no
necessrio administrar atropina como droga pr-anestsica em serpentes para evitar a sialorreia, pois as
mesmas no produzem saliva em excesso.
Aps a cirurgia, devemos manter a serpente em local tranquilo com temperatura em torno de 25oC a 27oC at
a sua recuperao. A ferida cirrgica deve ser tratada a cada 48h e, dependendo do protocolo de ensino ou
pesquisa, antibitico e analgsico devem ser prescritos para evitar infeces e garantir o bem-estar do animal.
Na Tabela 1 as doses das principais drogas pr-operatrias esto apresentadas.
Os antibiticos devem ser escolhidos de acordo com cada situao. Na literatura existem vrios trabalhos que
auxiliam na escolha adequada desses medicamentos (JACOBSON, 1996; STEIN, 1997; KOLESNIKOVAS et al.,
2007; FUNK & DIETHELM, 2007).
68
FASCCULO 6
Tabela 1. Principais drogas pr-operatrias utilizadas em serpentes

Princpio ativo
Dosagem
Observaes
Fonte
Acetilpromazina
0,1 0,5 mg/

kg IM
Sedativo, adm. 1 hora antes da

anestesia geral
Bennett, 1991
Diazepam
0,22 0,62 mg/

kg IM
Sedativo
Bennett, 1991
Midazolam
2,0 mg/kg IM
Pr-anestsico
Bennett, 1991
Propofol
5-10 mg/kg IV
Anestsico de curta durao
Tambourgi, et
al., 2010
Cetamina/midazolam
40 mg/kg de
cetamina + 2 mg/
kg de midazolam
IM
Anestsico geral
Bouts &
Gasthuys,
2002
Tiletamina/zolazepam
2-5 mg/kg IM
Anestsico geral, para pequenos

procedimentos
Schumacker e
Yelen, 2006
Vias de administrao: IM intramuscular; IV intravenosa
5.2 Analgesia
Apesar de dificilmente manifestarem dor, alguns sinais, como: postura alterada, tremores, aumento da
frequncia respiratria ou cardaca, podem ser indicativos de dor e desconforto nesses animais. Algumas
vezes, o no reconhecimento da dor e a falta de conhecimento das doses apropriadas de analgsicos para
esses animais resultam no tratamento inadequado da dor. Os analgsicos devem ser administrados a todas as
serpentes submetidas a procedimentos dolorosos: aps cirurgias; feridas ou queimaduras extensas, etc. Na
Tabela 2, so apresentadas doses de agentes analgsicos utilizados em serpentes.
Tabela 2. Drogas analgsicas utilizadas em serpentes
Princpio ativo
Dosagem
Observaes
Fonte
Buprenorfina
0,02 mg/kg IM
Leva horas para fazer efeito
Tambourgi, et
al., 2010
Butorfanol
0.4-2.0 mg/kg
SC, IM, IV
Administrar a cada 12 - 24h
Schumacker &
Yelen, 2006
Meperidina
20 mg/kg IM
Administrar a cada 24h
Heard, 1993
Meloxicam
0.1 - 0.2 mg/kg

IM, IV, VO
Analgsico e anti-inflamatrio,
Adm. a cada 24h.
Schumacker &
Yelen, 2006
Cetoprofeno
2 mg/kg SC, IM
Administrar a cada 24h
Schumacker &
Yelen, 2006
Vias de administrao: IM - intramuscular; IV intravenosa; SC subcutnea; VO via oral
5.3 Anestesia
Em ofdios, a glote facilmente visualizada e est localizada imediatamente acima da bainha da lngua, a
traqueia formada por anis incompletos e finaliza no pulmo ou no saco areo. Algumas serpentes das
famlias Viperidae (cascavis, jararacas), Colubridae e Dipsadidae, possuem o que chamamos de traqueia-
69
FASCCULO 6
pulmonar, ou seja, ao longo de quase toda a traqueia observamos parnquima pulmonar. No viperdeo Lachesis
sp, nas famlias Boidae e Pythonidae e em algumas serpentes das famlias Colubridae e Dipsadidae, a traqueia
finaliza no(s) pulmo(es). A maioria das serpentes possui apenas o pulmo direito desenvolvido, mas, outras,
apesar de possuir o direito mais desenvolvido, possuem um pulmo esquerdo menor do que o direito (em at
40%) ou at mesmo vestigial. O pulmo termina no saco areo, parte avascular do pulmo que no realiza
trocas gasosas. Cuidado deve ser tomado ao prover ventilao assistida s serpentes, pois tanto os pulmes
como os sacos areos so delicados e facilmente danificados com a hiperinsuflao (JACOBSON, 1993).
Tanto os anestsicos inalatrios como os injetveis podem ser utilizados, embora os inalatrios possuam uma
induo e um tempo de recuperao mais rpidos.
Tubos de conteno, de tamanho adequado para a serpente manejada, podem ser utilizados para a induo da
serpente, acoplando a mangueira do aparelho anestsico inalatrio na ponta onde est a cabea do animal. Na
parte posterior do tubo, veda-se o espao entre o tubo e a serpente com papel-toalha. Assim que a serpente
entrar em plano de induo, retir-la cuidadosamente do tubo e inserir um tubo endotraqueal ou sonda uretral,
de tamanho adequado, na sua glote.
Em se tratando de serpentes peonhentas de importncia em sade, um mnimo de duas pessoas adequadamente
treinadas devem estar presentes durante o manejo. Lembrando que todo procedimento de anestesia deve ser
acompanhado por um mdico veterinrio. Procedimentos operacionais padres sobre socorro de acidentados
ofdicos devem estar visveis, inclusive com o nmero do posto de sade ou do hospital para onde a pessoa
acidentada deve ser encaminhada.
Alguns procedimentos menos invasivos podem ser realizados com anestesia local, como bipsia de pele,
reduo de prolapso de clon, sutura de feridas e curativo de feridas extensas. O agente mais utilizado a
lidocana, infiltrada localmente a 2 - 5 mg/kg. Devido aos efeitos colaterais de toxicidade, a dose no deve
exceder os 10 mg/kg (SCHUMACHER & YELEN, 2006).
O agente anestsico inalatrio de eleio o isoflurano. A induo feita com 4% - 5% e a manuteno com
1% - 3%. A vantagem do isoflurano o de proporcionar uma induo e recuperao rpidas, com mnima
depresso cardiovascular (SCHUMACHER & YELEN, 2006).
Em relao aos agentes anestsicos injetveis, vrias combinaes podem ser usadas, sendo que as associaes
com a cetamina so as mais utilizadas. O uso de propofol em injees intravenosas de 5 - 10 mg/kg tambm pode
ser utilizado, mas com cuidado, pois pode causar depresso cardiorespiratria. Na Tabela 3 so apresentados
os agentes anestsicos inalatrios e injetveis mais utilizados.
70
FASCCULO 6
Tabela 3. Drogas anestsicas utilizadas em serpentes.

Princpio ativo
Dosagem
Observaes
Fonte
Isoflurano
3-5% induo,
2-4%
manuteno
Anestesia inalatria
Tambourgi, et
al., 2010
Propofol
5-10 mg/kg IV
Anestsico de curta durao
Tambourgi, et
al., 2010
Cetamina/acepromazina
(10:1 em volume)
40-60 mg/kg de
cetamina
Anestsico geral
Tambourgi, et
al., 2010
Cetamina/midazolam
40 mg/Kg de
cetamina + 2 mg/
kg de midazolam
IM
Anestsico geral
Bouts e
Gasthuys,
2002
Cetamina/xilazina
40 mg/Kg de
cetamina + 1 mg/
kg de xilazina IM
Anestsico geral
Bouts e
Gasthuys,
2002
Tiletamina/zolazepam
2-5 mg/kg IM
Anestsico geral, para pequenos

procedimentos
Schumacker &
Yelen, 2006
Lidocana
2-5 mg/kg
Anestsico local
Schumacker &
Yelen, 2006
5.4 Cirurgia
As cirurgias somente devero ser feitas em ambientes limpos, desinfetados, bem iluminados e com todo o
equipamento e instrumental apropriados. Dever ser realizada por um mdico veterinrio ou com a superviso
deste (Lei 5.517 de 1968 do CFMV), aps cuidadoso estudo da anatomia do animal e o melhor protocolo
anestsico para a situao. Durante a cirurgia, indicado que a serpente fique em uma manta eltrica com
temperatura em torno dos 25+1oC. Aps a cirurgia, a serpente deve ser mantida a 28+1oC at sua total
recuperao, ou seja, dardejar de lngua e propriocepo adequada (quando colocada em decbito dorsal a
serpente retorna ao decbito ventral).
Aps a cirurgia, cuidados ps-operatrios devem ser adotados, como oferecer temperatura adequada para
a recuperao da serpente (em torno dos 25oC - 27oC), prescrio de analgsico, antibitico e curativos com
periodicidade regular, para o bem-estar do animal. A manuteno da serpente em temperaturas subtimas,
aps a cirurgia, predispe o animal supresso imunolgica e subsequente infeco.
5.5 Eutansia
Segundo a Resoluo n 1000, de 11 de maio de 2012, do Conselho Federal de Medicina Veterinria, eutansia
a induo da cessao da vida animal, por meio de mtodo tecnicamente aceitvel e cientificamente
comprovado, sendo um meio de eliminar a dor ou o sofrimento dos animais. Segundo o art. 10 desta mesma
Resoluo, a escolha do mtodo depender da espcie animal envolvida, da idade e do estado fisiolgico dos
animais, bem como dos meios disponveis para conteno dos mesmos, da capacidade tcnica do executor, do
nmero de animais e, no caso de experimentao ou ensino, do protocolo de estudo.
De acordo com Resoluo Normativa que trata das diretrizes da prtica de eutansia do Concea, procedimentos
de eutansia devem ser supervisionados, mesmo que no de forma presencial, pelo Responsvel Tcnico pelo
71
FASCCULO 6
Biotrio, que deve ter o ttulo de Mdico Veterinrio com registro ativo no Conselho Regional de Medicina
Veterinria da Unidade Federativa em que o estabelecimento esteja localizado.
Em serpentes, o mtodo mais adequado a utilizao de barbitricos (30 - 100 mg/kg, intravenoso ou
intracelomtico), pois uma droga de efeito rpido e de baixo custo. Como h a necessidade de realizar a
conteno fsica para a aplicao do agente, tcnicos experientes so imprescindveis, principalmente quando
se trata da conteno de serpentes peonhentas de importncia em sade.
Em serpentes submetidas eutansia para servirem de alimento a serpentes ofifagas (serpentes que se
alimentam de outras serpentes), os barbitricos ou outros agentes injetveis no devem ser utilizados, pois
podem causar sedao nos animais que consomem a carcaa. Nesses casos, o mais indicado o uso de
anestsicos inalatrios (para espcies que no fazem apneia, seguido de outro mtodo de eutansia), aps a
devida aprovao pelas Ceuas das Instituies de Ensino e Pesquisa. Atualmente, existe uma grande tendncia
em oferecer ratos e camundongos pr-abatidos s serpentes. A eutansia, nesses casos, pode ser feita pelo
deslocamento cervical, contanto que seja feito por um executor bem qualificado e para roedores com peso
menor que 150 g.
5.6 Necropsia
Para compreender a histria natural de uma doena, risco de surgimento, morbidade das afeces e as causas de
mortalidade, devemos proceder realizao de necropsia e posterior coleta de material biolgico para determinao
do agente etiolgico envolvido (MATUSHIMA, 2007). Para realizar a necropsia, a conservao do cadver deve ser
feita em refrigerador (4oC a 10oC) por um perodo mximo de 24 horas. O resfriamento no impede a autlise e a
putrefao, mas retarda esses processos. Nunca devemos congelar carcaas que sero submetidas necropsia,
pois o congelamento pode romper as membranas celulares, impedindo o diagnstico histopatolgico. O mdico
veterinrio responsvel pela necropsia dever ser bem familiarizado com a anatomia da espcie em questo, bem
como com suas particularidades. Na literatura, existem alguns trabalhos sobre a anatomia das principais espcies
de serpentes utilizadas em pesquisa ou ensino no Brasil, que so ferramentas de grande auxlio nessa atividade
(KOLESNIKOVAS et al., 2007; FUNK, 2005; GOMES & PUORTO, 1993; GOMES et al., 1989). Equipamentos de proteo
individual, como avental, luvas e mscaras devem sempre ser utilizados durante a necropsia.
Antes da necropsia propriamente dita, deve-se pesar, medir e examinar externamente a serpente: condies
gerais, orifcios naturais, presena de ectoparasitos, feridas e fraturas. Feito isso, coloca-se a serpente em
decbito dorsal e faz-se uma pequena inciso nas escamas ventrais, no meio do corpo, cortando, em seguida,
na direo cranial e depois na direo caudal. Aps aberta, a pele da serpente pode ser rebatida e presa em
uma tbua de necropsia com alfinetes. Todos os rgos internos devem ser cuidadosamente verificados em
relao anatomia topogrfica, aspecto, presena de parasitos, secrees, etc. As amostras de tecido podem
ser coletadas nos mais diferentes tipos de solues e reagentes, dependendo da finalidade do estudo, em
frascos apropriados e identificados. Na maioria das vezes, utiliza-se formol 10%. Aps a necropsia, uma ficha
deve ser preenchida com todas as informaes a respeito da serpente e uma detalhada descrio necroscpica.
5.7 Destino das carcaas

As serpentes que vierem ao bito natural ou que forem submetidas eutansia e que puderem ser aproveitadas
em atividades de ensino ou pesquisa, em universidades ou colees, devem ser armazenadas em freezer at
72
FASCCULO 6
o seu uso ou fixadas (FRANCO et al., 2002). Serpentes que vierem a bito e que forem descartadas devem ser
acondicionadas em saco branco leitoso apropriado para resduos biolgicos (grupo A)(no caso das serpentes
peonhentas de importncia em sade, deve-se tomar a precauo de terem a boca fechada com fita crepe, pois
as presas ainda podem ter resduos de veneno com atividade lesiva, tanto para a pessoa que est efetuando o
acondicionamento da carcaa, como para os funcionrios responsveis pelo transporte do lixo). Se o saco com a
carcaa no for imediatamente encaminhado para a coleta apropriada do lixo, o mesmo deve ser congelado at
o momento da coleta. As carcaas devem ser tratadas pelo mtodo de incinerao (TAMBOURGI et al., 2010).
6 TICA E BEM-ESTAR ANIMAL NO USO DE

SERPENTES EM LABORATRIO
Assim como para outros animais, devemos nos preocupar com o bem-estar das serpentes que esto sendo
utilizadas na produo, manuteno ou utilizao em atividades de ensino ou pesquisa cientfica. Pessoal
treinado e capacitado para o manejo das serpentes condio imprescindvel, principalmente quando se trata
de serpentes de importncia em sade. Muitas pessoas, por medo dos animais, acabam no tendo os devidos
cuidados na manipulao, podendo causar srias leses nas serpentes. A sala de manuteno das serpentes
no pode ser utilizada para outros fins, como laboratrio ou escritrio, e o tempo de permanncia na sala
deve-se restringir ao mnimo necessrio. Algumas serpentes demonstram claramente, por meio da vibrao
da cauda ou de posturas defensivas, o quanto a presena humana incmoda e estressante. Locais com muito
barulho ou vibrao, ao lado de marcenarias ou serralherias, por exemplo, tambm so desconfortveis para
as serpentes.
Quando machos forem colocados juntos para realizao da disputa antes do acasalamento, necessrio que
seja em um espao amplo que permita ao perdedor se refugiar, caso contrrio, a disputa pode no se encerrar,
levando um ou os dois indivduos estafa e at a morte. Deve-se tomar cuidados especiais no manejo de fmeas
prenhes. Devido mudana do estado fisiolgico, elas se mostram mais agressivas e, devido aos filhotes ou
ovos, possuem seu centro de gravidade deslocado. Quando da manipulao com gancho, lao de Lutz e outros
para evitar o soerguimento da serpente por um nico ponto.
A investigao e o registro de questes de bem-estar animal so de responsabilidade de cada indivduo
envolvido. Cada instituio deve desenvolver mtodos de relato e investigao de indicadores de bem-estar
animal, e todos os funcionrios devem estar cientes da importncia e dos mecanismos para o registro e os
relatos de questes de bem-estar animal. A responsabilidade pela reviso de tais relatrios do responsvel
tcnico e das Comisses de tica no Uso de Animais. A resposta a tais relatrios incluem a comunicao dos
achados aos funcionrios envolvidos, as medidas corretivas se cabveis. Todos os relatrios e aes corretivas
devem ser registrados de forma permanente (NATIONAL RESEARCH COUNCIL, 2011).
73
FASCCULO 6
7 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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Processes, v. 14, n. 2, p. 137-146, 1987.
76
ANEXO I Anfbios e serpentes mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica
FASCCULO 6
ANEXO I
REQUISITOS MNIMOS PARA PRODUO, MANUTENO OU UTILIZAO DE SERPENTES PARA ATIVIDADES
DE ENSINO OU PESQUISA CIENTFICA
NECESSIDADES ESSENCIAIS EM CATIVEIRO
TEMPERATURA
Manter temperaturas ambientais adequadas espcie mantida em cativeiro para que a mesma
possa realizar as suas atividades fisiolgicas e comportamentais.
UMIDADE
Oferecer umidade adequada espcie mantida em cativeiro.
ILUMINAO
Oferecer um ciclo de luz semelhante ao ambiente natural da serpente ou, pelo menos, um ciclo de
12 h claro/12 h escuro.
ALIMENTAO
Pesquisas que mantiverem as serpentes por mais de 30 dias, devem aliment-las com presas
especficas da sua dieta, mensalmente, ou a cada 15 dias.
GAIOLA
As gaiolas de plstico so as mais indicadas por serem leves, fceis de serem lavadas e difceis de
serem quebradas. Deve ser compatvel com o tamanho da serpente. A serpente enrolada no pode
ocupar mais do que 1/3 da rea da gaiola. Para as serpentes arborcolas, a altura deve compreender
no mnimo a metade do comprimento da serpente. Serpentes semiaquticas devem ter um local
que possam nadar ou banhar-se, mas ter a opo de um local que possam manter todo o seu corpo
em ambiente seco.
SUBSTRATO
Deve ser trocado sempre que estiver sujo ou com excesso de umidade. Evitar substratos pequenos
que possam grudar na presa e serem ingeridos pelas serpentes, causando estomatite ou mesmo
obstruo do trato gastrointestinal.
ABRIGO
Oferecer abrigos para as serpentes que so mantidas em serpentrios abertos (criao semiintensiva)
GUA
A gua oferecida deve ser tratada, estar sempre disposio do animal e ser trocada a cada 3 dias
no mnimo.
SALA DE EXPERIMENTAO
A sala de experimentao no deve ser a mesma da manuteno.
CONTENO FSICA
A escolha do material de conteno deve ser feita de acordo com a espcie e finalidade. O tubo
plstico deve ser utilizado quando se pretende realizar algum procedimento no 1/3 posterior da
serpente; o lao deve ser confeccionado com espuma e tira de couro para no causar leses nas
serpentes e ser utilizado tanto para realizar procedimentos no 1/3 anterior como posterior do
corpo.
BIOSSEGURANA
Todas as pessoas que trabalham com serpentes devem passar por treinamento adequado e utilizar
os equipamentos de proteo individual.
77
ANEXO II Anfbios e serpentes mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica
FASCCULO 6
ANEXO II
A) Caractersticas gerais das Serpentes
Anatomia
As serpentes possuem todo o corpo coberto por escamas, sendo que diferentes grupos apresentam diferentes
tipos de escamas. Seu nmero, formato e disposio so utilizados como caractere taxonmico para diferenciao
entre as espcies. Periodicamente, as serpentes realizam a ecdise ou muda, que a troca da camada mais
superficial da pele. Essa troca se inicia pelos lbios e se desprende do corpo numa pea nica. Alguns dias
antes da realizao da ecdise, a serpente produz um lquido lubrificante entre a velha e a nova pele, deixando
a colorao da serpente com aspecto opaco e leitoso. Os olhos das serpentes nessa fase tornam-se azulados e
opacos tambm. Aps a muda, as serpentes voltam a ter uma pele com aspecto brilhoso novamente.
O esqueleto das serpentes formado basicamente por crnio, vrtebras e costelas, sendo que apenas alguns
grupos ainda possuem vestgios de cintura plvica e membros posteriores reduzidos a um esporo (por exemplo,
Aniliidae, Boidae, Pythonidae, Tropidophiidae e Typhlopidae) (BAUCHOT, 2006). As vrtebras no possuem
grande mobilidade entre si, tendo movimentao dorso-ventral e lateral restritas. No entanto, o grande nmero
de vrtebras (algumas espcies com mais de 400) permite uma grande flexibilidade do corpo (SHINE, 1995).
Muitas serpentes possuem adaptaes cranianas para ingerir grandes presas: caixa craniana resistente, maxilas
suspensas com grande mobilidade, ausncia de snfise mandibular e grande mobilidade do quadrado entre outras
adaptaes. Quatro tipos bsicos de denties so encontrados nas serpentes (HARTLINE, 1971). Dentio glifa
no existe diferenciao entre os dentes para inoculao de peonha (e.g., Scolecophidae, Boidae, Pythonidae,
Colubridae). Essas serpentes no tm glndulas de veneno, mas algumas possuem saliva txica para suas presas.
Dentio opistglifa existem dentes modificados na poro posterior da boca adaptados inoculao da
peonha produzida por glndulas de Duvernoy (e.g. alguns Dipsadidae). As serpentes brasileiras que possuem
esses tipos de denties na maioria das vezes no so capazes de produzir um envenenamento grave nos seres
humanos e so consideradas como serpentes sem importncia em sade (por exemplo Oxyrhopus, Philodryas,
Thamnodynastes). Dentio proterglifa possuem dentes especializados para inoculao de peonha na regio
anterior da boca (e.g. corais-verdadeiras, najas e mambas). Dentio solenglifa possuem um sistema de
inoculao de peonha altamente especializado. Alm de ter grandes presas, a articulao do maxilar possibilita
que durante o bote as presas sejam projetadas para frente (e.g. cascavis e jararacas). Estes dois ltimos tipos
de dentio pertencem s serpentes causadoras de acidentes em seres humanos e so chamadas de serpentes
peonhentas de importncia em sade e, em caso de acidente, deve-se tomar soro antiofdico especfico para
combater a peonha.
Os rgos internos tambm possuem adaptaes para se alojar no corpo cilndrico das serpentes. Eles so
alongados e, quando so pares, se apresentam deslocados em relao ao seu par (o direito mais cranial) ou
ento ausentes, como o caso do pulmo esquerdo ausente ou reduzido em algumas serpentes (BAUCHOT,
2006). Algumas espcies possuem traqueia-pulmonar, ou seja, ao longo de quase toda a sua extenso, existe
parnquima pulmonar (ver item 5.3 Anestesia). As serpentes no possuem diafragma, sendo que a respirao
ocorre por movimentao da musculatura intercostal.
78
FASCCULO 6
rgos dos sentidos

As serpentes no possuem ouvido externo e o ouvido mdio modificado. A columela tem o formato alongado
e articulada com o osso quadrado, dando-lhes a capacidade de amplificar as vibraes emitidas pelo substrato
em contato com a cabea (BAUCHOT, 2006). Embora a literatura indique que as serpentes so incapazes de
perceber ondas sonoras areas, estudos recentes tm demonstrado que as serpentes respondem a sons areos
(YOUNG e AGUIAR, 2002).
Algumas famlias tm os olhos atrofiados (e.g. Typhlopidae, Leptotyphlopidae), sendo conhecidas como cobrascegas, enquanto outras possuem viso desenvolvida e enxergam em trs dimenses (por exemplo a serpente
arborcola Aethula que tem 45o de viso binocular). A viso junto com outros rgos dos sentidos desempenha
importante papel no comportamento predatrio.
Todas as serpentes possuem o sistema vomeronasal bem desenvolvido. A abertura do rgo vmero nasal ou
rgo de Jacobson se d no palato das serpentes. As partculas qumicas do ambiente so captadas pela lngua
bfida ao dardejar e, quando entra na boca, encosta na abertura deste rgo, desencadeando o estmulo nervoso.
O sentido vmero nasal de fundamental importncia para as serpentes, elicitando comportamentos predatrios,
defensivos, reprodutivos, etc.
Alguns grupos de serpentes possuem rgos termossensoriais, que podem ser em nmero par (um em cada lado
da face), denominado fosseta loreal ou em maior nmero localizados nas escamas labiais (fossetas labiais). O
primeiro tipo encontrado nas serpentes crotalneas (cascavel, jararaca, surucucu) e, o segundo, em serpentes da
famlia dos bodeos (cobra-de-veado e cobra-papagaio) e pitondeos (ptons). um rgo extremamente sensvel,
diferenciando variaes de at 0,05oC, sendo muito utilizado na captura de presas endotrmicas pelas serpentes
que os possui (VITT e CALDWELL, 2009).
Fisiologia
Serpentes so animais ectotrmicos, sendo dependentes de fontes externas de calor para manuteno da sua
temperatura corprea dentro do intervalo trmico ideal. A temperatura corprea nem sempre constante.
Dependendo da atividade da serpente, ela tende a procurar diferentes temperaturas (AVERY, 1982). Fmeas
vivparas gestantes so exemplos de situaes em que a serpente tem temperaturas preferenciais maiores
(MING-CHUNG e HUTCHISON, 1994).
Alimentao
Todas as serpentes so carnvoras, sendo que a dieta varivel entre as espcies. Algumas espcies se alimentam
de diversos itens, anfbios, insetos, roedores; enquanto outras so especialistas se alimentando ou tendo
preferncia por um tipo de item (SANTANNA e ABE, 2007). Algumas serpentes, por outro lado, possuem variao
ontogentica na dieta. Quando jovens se alimentam de presas ectotrmicas e, quando adultas, predam animais
endotrmicos (MARTINS et al., 2002). As serpentes no tm condies de partir seu alimento, portanto elas
sempre ingerem suas presas inteiras e normalmente iniciam pela cabea. So animais oportunistas, no sentido
de poderem ingerir presas que foram encontradas mortas (necrofagia) (SAZIMA e STRUSSMAN, 1990).
79
FASCCULO 6
Reproduo
A reproduo das serpentes pode ser basicamente dividida em dois tipos: as que botam ovos, denominadas
ovparas; e aquelas que parem os filhotes j completamente formados, as vivparas. Nos dois casos, as fmeas,
antes do perodo reprodutivo, armazenam gordura e, quando entram no perodo de reproduo, transformam
a gordura em vitelo que ser depositado nos folculos ovarianos. Aps a cpula, as serpentes fmeas tm a
capacidade de armazenar os espermatozoides, controlando o momento da fecundao (HALPERT et al., 1982).
Portanto, apesar de termos certeza do momento da cpula, no conseguimos definir o momento da fecundao.
Aps o nascimento (vivparas ou ovparas), os filhotes possuem em seu interior reservas de vitelo que podem
durar alguns dias ou semanas.
No perodo reprodutivo, machos de algumas espcies realizam uma disputa pela fmea (ALMEIDA-SANTOS e
SALOMO, 2002). Esses combates tendem a ser ritualizados, normalmente no causam ferimentos nos oponentes,
mas, em alguns casos, podem ocorrer mordidas ou picadas (ver item 6 tica e Bem-Estar).
B)
Classificao
De acordo com o Reptile Database (UETZ, 2014), existem 27 diferentes famlias, com cerca de 3.500 espcies de
serpentes no mundo. No Brasil encontramos 10 famlias (BRNILS e COSTA, 2012): Anomalepididae (7 espcies),
Typhlopidae (6), Leptotyphlopidae (16), Tropidophiidae (1), Aniliidae (1), Boidae (12), Colubridae (34), Dipsadidae
(244), Viperidae (30) e Elapidae (30), sendo que as duas ltimas famlias correspondem s serpentes peonhentas
de importncia em sade.
C)
Modelos de serpentes frequentemente utilizadas em pesquisa
No Brasil, existem cerca de 380 serpentes que podem ser mantidas em cativeiro para estudos relativos a
comportamento, fisiologia, reproduo, patologia entre outros tpicos, mas tambm muitas serpentes podem
ser mantidas em cativeiro para estudo dos venenos e sua utilizao na produo de imunobiolgicos. Os grupos
mais comumente mantidos por perodos mais longos para pesquisa e ensino so as jararacas (Bothrops) e as
cascavis (Crotalus) entre as peonhentas e as jiboias (Boa) entre as no peonhentas (Tabela 1). Outras espcies
so utilizadas na pesquisa e ensino, mas, normalmente, em menor nmero ou a manuteno, ocorre por tempo
reduzido (at dois anos). Entretanto, as bases de manejo das serpentes em cativeiro aqui descritas servem como
parmetros para o grupo como um todo.
80
FASCCULO 6
Tabela 1. Principais famlias e gneros brasileiros de serpentes mantidas em cativeiro para pesquisa,
produo e ensino.
Famlia
Caractersticas
Gnero
Nome popular
Boa
jiboia
Boidae
Vivparas, matam por

constrio, dentio
glifa
Epicrates
salamanta
Eunectes
sucuri
Colubridae
Dentio glifa
ou opistglifa,
arborcolas ou
terrcolas, geralmente
ovparas.
Spilotes
caninana
Oxyrhopus
falsa-coral
Philodryas
cobra-verde, parelheira, cobra-cip
Dipsadidae
Dentio glifa
ou opistglifa,
arborcolas ou
terrcolas, geralmente
ovparas. Grande
variedade de formas,
cores e habitats no
Brasil
Viperidae
Elapidae
Sibynomorphus
dormideira
Thamnodynastes
corre-campo
Tomodon
cobra-espada
Dentio solenglifa,
presena de fosseta
loreal
Bothrops
jararaca, jararacussu, urutu, caiaca
Crotalus
cascavel
Lachesis
surucucu-pico-de-jaca
Dentio proterglifa
Micrurus
coral-verdadeira
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
ALMEIDA-SANTOS; SELMA, M.; SALOMO, M. G. Reproduction in neotropical pitvipers, with emphasis on species
of the genus Bothrops. In: SCHUETT, G. W.; HGGREN, M.; DOUGLAS, M. E.; GREENE, H. W. Biology of the Vipers,
Eagle Mountain Publishing. p. 445-462, 2002.
AVERY, R. Field studies of body temperatures and thermoregulation. Biology of the Reptilia, v. 12, n. 4, p. 93-166,
1982.
BAUCHOT, R. Snakes: A Natural History. Sterling Publishing Company, Inc., 2006.
BRNILS, R. S.; COSTA, H. C. Rpteis brasileiros: Lista de espcies. Verso 2012.1., Sociedade Brasileira de
Herpetologia, 2012. Disponvel em: <http://www.sbherpetologia.org.br/>. Acesso em: 20 out. 2014.
HALPERT, A. P.; GARSTKA, W. R.; CREWS, D. Sperm transport and storage and its relation to the annual sexual
cycle of the female red-sided garter snake, Thamnophis sirtalis parietalis. Journal of Morphology, v. 174, n. 2, p.
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HARTLINE, P. H. Physiological basis for detection of sound and vibration in snakes. Journal of Experimental
Biology, v. 54, n. 2, p. 349-371, 1971.
81
FASCCULO 6
MARTINS, M.; MARQUES, O. A.; SAZIMA, I. Ecological and phylogenetic correlates of feeding habits in Neotropical
pitvipers of the genus Bothrops. In: SCHUETT, G. W.; HGGREN, M.; DOUGLAS, M. E.; GREENE, H. W. Biology of
the Vipers, Eagle Mountain Publishing, p. 307-328, 2002.
MING-CHUNG, T.; HUTCHISON, V. H. Influence of pregnancy on thermoregulation of water snakes (Nerodia
rhombifera). Journal of Thermal Biology, v. 19, n. 4, p. 255-259, 1994.
SANTANNA, S. S.; ABE, A. S. Diet of the rattlesnake Crotalus durissus in southeastern Brazil (Serpentes, Viperidae).
Studies on Neotropical Fauna and Environment, v. 42, n. 3, p. 169-174, 2007.
SAZIMA, I.; STRUSSMAN, C. Necrofagia em serpentes brasileiras: exemplos e previses. Revista Brasileira de
Biologia, v. 50, p. 463-468, 1990.
SHINE, R. Australian snakes: a natural history. Cornell University Press, 1995. 229p.
UETZ, P. The Reptile Database. 2014. Disponvel em: < http://www.reptile-database.org >. Acesso em: 20 out. 2014.
VITT, L. J.; CALDWELL, J. P. Herpetology: an Introductory Biology of Amphibians and Reptiles. Academic Press,
2009. 697p.
WANG, T.; FERNANDES, W.; ABE, A. S. Blood homeostasis upon CO2 anesthesia in the rattlesnake (Crotalus
durissus). The Snake, v. 25, p. 21-26, 1993.
YOUNG, B. A.; AGUIAR, A. Response of western diamondback rattlesnakes Crotalus atrox to airborne sounds.
Journal of Experimental Biology, v. 205, n. 19, p. 3087-3092, 2002.
82
FASCCULO 6
REQUISITOS MNIMOS PARA PRODUO, MANUTENO OU UTILIZAO DE ANFBIOS PARA ATIVIDADES DE

ENSINO OU PESQUISA CIENTFICA
Necessidades
Anfbios
essenciais em arborcolas
cativeiro
(pererecas)
Anfbios
terrestres
Anfbios semifossrios
e fossrios
Anfbios
aquticos
Dendrobatdeos
Terrrios
Caixas plsticas
altas com
tampa telada e
bem vedada.
Caixas plsticas
ou tanques
azulejados com
tampa telada e
bem vedada.
Caixas plsticas com tampa

telada e bem vedada, com
substrato de terra em
profundidade compatvel
com as dimenses da
espcie.
Aqurios ou
tanques dotados
de filtro para
gua e com
tampa bem
vedada.
Terrrios de vidro com

substrato de terra.
Exigncias de
gua/umidade
gua em
recipientes que
possibilitem o
mergulho total
do corpo.
gua em
recipientes que
possibilitem o
mergulho total
do corpo.
Coluna de
Substrato sempre umedecido,
gua com
porm no encharcado.
profundidade
Recipientes rasos com gua
adequada para a
da superfcie.
natao.
Bandeja com
profundidade (pequeno
lago) contendo gua
corrente em circulao
fechada.
Temperatura mdia de 25oC
Macroambiente
Alimentao
Grilos, baratas
e tenbrios
(vivos).
Eventualmente
camundongos
neonatos
(vivos) para
espcies de
grande porte.
Enriquecimento
ambiental
Galhos, folhas
artificiais
ou naturais,
pedaos de
cano de PVC
Insetos vivos
(grilos, baratas
e tenbrios) e
camundongos
neonatos vivos
(para sapos e
grandes rs)
Temperatura
mdia de 25oC
Temperatura mdia de
25oC
Carne bovina
e/ou de frango
moda, lascas de Moscas de frutas, cupins
Anuros: insetos vivos (grilos, peixe, minhocas
e formigas sem ferro,
baratas, tenbrios e cupins (para os pipdeos grilos, baratas e tenbrios
sem ferro) e minhocas vivas.
e ceclias).
recm-nascidos (todos
Peixes vivos
vivos).
(somente para
os pipdeos).
Ceclias: cascalho
Canos de PVC,
Folhio, canos de PVC, cascas
e tocas de pedra,
telhas e tijolos
de coco seco cortadas ao
furados de barro.
vegetao
meio, frutos de sapucaia.
Folhio.
aqutica.
Conteno
qumica
Banho em MS222 (tricana metano sulfonato), a 0,1% - 0,2%
Eutansia
Dose intraperitonial de tiopental (tiopentato de sdio) a 50 mg/kg.
Galhos e vegetao
natural.
83
ISBN: 978-85-88063-28-0

Dbca 2016

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FASCCULO

MINISTRO DE ESTADO DA CINCIA, TECNOLOGIA E INOVAO

CONSELHO NACIONAL DE CONTROLE DE

I Representantes do Ministrio da Cincia, Tecnologia e Inovao:

CONSELHO NACIONAL DE CONTROLE DE EXPERIMENTAO ANIMAL

VIII Representantes da Academia Brasileira de Cincias:

COMPOSIO DA SECRETARIA-EXECUTIVA DO CONCEA

Sharon Lisauskas Ferraz de Campos Secretria-Executiva

Ficha catalogrfica elaborada pela

Brasil. Ministrio da Cincia, Tecnologia e Inovao. Gabinete do Ministro. Conselho Nacional

CONSELHO NACIONAL DE CONTROLE DE EXPERIMENTAO ANIMAL

Roedores e Lagomorfos mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica

Caninos e felinos domsticos mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica

Primatas no humanos mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica

5A. Peixes mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica I

6. Anfbios e serpentes mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa

Equdeos mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica

Sunos mantidos em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica

10. Aves mantidas em instalaes de instituies de ensino ou pesquisa cientfica

2 Mtodos alternativos ao uso de animais

3 Planejamento de novos projetos

4 Obteno de aprovao para novos protocolos de pesquisa

ANFBIOS E SERPENTES MANTIDOS EM INSTALAES DE 40

5 Doenas mais comuns observadas no cativeiro

6 tica e bem-estar animal no uso de serpentes em laboratrio

REQUISITOS MNIMOS PARA PRODUO, MANUTENO OU UTILIZAO

Guia brasileiro de produo, manuteno ou utilizao de animais

Bruno Loureno Diaz Universidade Federal do Rio de Janeiro

Adriano da Silva Campos Fundao Oswaldo Cruz

1a Edio | Braslia, 31 de maro de 2016

1.1 Definies: dor, distresse e sofrimento

1a Edio | Braslia, 31 de maro de 2016

1.2 Efeitos do bem-estar de um animal em resultados cientficos

2 MTODOS ALTERNATIVOS AO USO DE ANIMAIS

1a Edio | Braslia, 31 de maro de 2016

No Brasil, a responsabilidade de monitorar e avaliar a introduo de tcnicas alternativas que substituam

3 PLANEJAMENTO DE NOVOS PROJETOS

1a Edio | Braslia, 31 de maro de 2016

O fornecimento de treinamento apropriado (especfico de um determinado procedimento e espcie especfica)

3.1 Modelos Animais

1a Edio | Braslia, 31 de maro de 2016

Linhagens isognicas possuem um fentipo mais uniforme do que heterognicas, permitindo a

1a Edio | Braslia, 31 de maro de 2016

1a Edio | Braslia, 31 de maro de 2016

3.3 Desenho da pesquisa cientfica

3.4 Preveno da dor e do distresse potencial

avalie se o nvel de interveno apropriado (por exemplo, a dose de uma droga);

1a Edio | Braslia, 31 de maro de 2016

PLANEJAMENTO DE PROTOCOLOS COM TESTES TOXICOLGICOS

1a Edio | Braslia, 31 de maro de 2016

3.5 Desenvolvimento de estratgias para avaliar, minimizar e monitorar dor ou

1a Edio | Braslia, 31 de maro de 2016

informar sobre o ndice de severidade do procedimento;

1a Edio | Braslia, 31 de maro de 2016

1a Edio | Braslia, 31 de maro de 2016

3.6 Treinamento de pessoal

1a Edio | Braslia, 31 de maro de 2016

4 OBTENO DE APROVAO PARA NOVOS

4.1 Comisses de tica no uso de animais

4.2 Submetendo uma proposta Ceua

1a Edio | Braslia, 31 de maro de 2016

H instalaes, equipamentos e condies do ambiente adequadas e disponveis?

Em resumo, o projeto deve incluir, no mnimo: