INSTITUTO TECNOLOGICO SUPERIOR DE

MISANTLA
MATERIA: MICROBIOLOGIA
CARRERA: ING. BIOQUIMICA
DOCENTE: DR.GUSTAVO HERNANDEZ
CASTELLANOS
SEMESTRE: SEXTO
PRESENTA:
JOSE LUIS ROMERO MARTINEZ
MINERVA ARROYO PORTILLA
NIDIA GISELL SANCHEZ HERNANDEZ
WENDOLYN COBOS MORA
ISRAEL BENJAMIN OCAA ARROYO

INSTITUTO TECNOLOGICO
SUPERIOR DE MISANTLA

Nombre de la asignatura:
MICROBIOLOGIA
Nombre de la Practica: VERTIDO Y EXTENSIN EN
PLACA

Num.de
practica
12
Carrera: Ingeniera Bioqumica

OBJETIVO
En esta prctica el alumno llevara a cabo la elaboracin de vertido y extensin en
placa en el cual aplicara los conocimientos adquiridos en prcticas anteriores
INTRODUCCION:

Aislamiento
Para aislar clulas individuales, los microorganismos han de ser diluidos, debido al
gran numero en que normalmente estn presentes. La dilucin se realiza,
normalmente, por uno de los siguientes sistemas: siembra por estra en placa,
vertido en placa y extensin en placa.

Tcnicas de siembra

Mtodo de siembra por estra en placa

Es el mtodo ms fcil y el ms usado para obtener cultivos axnicos. Para ello,
con un asa de siembra se toma una muestra de la poblacin mixta y a
continuacin se hacen estras sobre la superficie de un medio slido preparado en
una placa Petri (a las placas Petri tambin se les denomina simplemente placas).
Conforme se van haciendo estras en zigzag con el asa, cada vez se van
depositando en la superficie del medio menos microorganismos. A continuacin,

se flamea el asa, se toca en la regin donde se han realizado las ltimas estras y
se contina la siembra con la misma tcnica, en la superficie de medio sin sembrar
an. Repitiendo este proceso varias veces se logra separar clulas individuales. A
continuacin, las placas se incuban en un lugar adecuado, permitiendo que las
clulas aisladas experimenten un nmero suficiente de divisiones para formar
colonias visibles. Aunque cada colonia posiblemente representa un clon derivado
de una sola clula, no podemos asegurarlo. Quizs, dos clulas quedaron
depositadas tan juntas que han originado una nica colonia mixta. Por tanto, para
asegurarnos de que hemos obtenido un cultivo axnico, conviene repetir el
procedimiento a partir de una colonia bien aislada en la primera placa. Las
colonias que se desarrollen la segunda vez, sern, casi con toda seguridad,
cultivos axnicos.

Mtodos de vertido en placa y extensin en placa

En estos mtodos, las suspensiones de clulas microbianas se diluyen antes de

su siembra en placa. Se siguen estas tcnicas cuando la muestra contiene tantos
microorganismos, que la dilucin no se puede realizar en una sola etapa. Por
ejemplo, una suspensin con mil millones de clulas por mililitro debe ser diluida
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Veces para obtener una suspensin con un centenar de clulas por mililitro, Por
tanto, se realizan diluciones seriadas (en varias etapas), normalmente de diez en
diez, pero a veces de cien en cien.
Para realizar diluciones de diez en diez, se aade 1 ml de la suspensin
bacteriana a 9 ml (de medio estril o solucin salina, igualmente estril. Se agita
vigorosamente para diluir las clulas y el proceso se repite cuantas veces sea
necesario. A continuacin, se puede proceder de dos maneras diferentes.
En el mtodo de vertido en placa, las muestras diluidas se mezclan con agar
fundido y se vierten en placa. Algunas colonias quedarn embebidas en el agar y
otras crecern en la superficie. Las colonias superficiales se extendern y sern
ms grandes.
En el segundo mtodo (extensin en placa), las muestras diluidas se siembran
directamente en la superficie de la placa de agar, extendindolas con avuda de un
asa de Diralsky de cristal estril. La suspensin se absorbe en el agar, dejando las

clulas microbianas sobre la superficie. En ambas tcnicas las placas se incuban

hasta la aparicin de las colonias. Como en el mtodo de siembra por estra, no
existe la seguridad de que las colonias que aparecen en las placas sembradas por
extensin o en el agar solidificado sembrado por el mtodo del vertido en placas
sean cultivos axnicos hasta que se repita el proceso. Las dos tcnicas de
siembra por dilucin presentan la ventaja de que permiten obtener un mayor
nmero de colonias aisladas que el mtodo de siembra por estra, por tanto se
eligen cuando se ha de seleccionar una cepa a partir de una mezcla con varios
tipos de microorganismos.

MATERIAL

16 cajas de Petri con agar

8 pipetas de 1 ml
8 tubos estril con 9 ml de agua
2 matraces Erlenmeyer de 250 ml.
1 probeta de 10ml.
Asa de siembra
1 mechero Fisher
1 asa de siembra

PROCEDIMIENTO
a) se prepar agar nutritivo. Posteriormente se esterilizo todo el material
b) se realizaron las diluciones para posteriormente realizar las tcnicas de cultivo
ya antes mencionadas.
c) posteriormente hacer los clculos para sacar obtener las UFC

RESULTADOS

Aqu se puede observar un

acaro en la muestra .

En esta imagen se puede

apreciar que la compaera esta
colocando la muestra en la caja
Petri.

Aqu se est inoculando

DISCUSIN:
Durante esta prctica se elaboraron varias tcnicas de siembre entre las cuales
estn el vertido en placa y extensin en placa, se elaborara primeramente los
medios de cultivo con agar papa dextrosa en la cual se inocularon
microorganismos por medio de un piquete con la una varilla esterilizada
previamente cuidando de tocar exactamente en medio de la caja Petri en otra caja
Petri que tena ms medio de cultivo se llev a cabo la extensin en placa,
posteriormente se cort un cuadro alrededor donde se haba inoculado y fue
trasladado a otro con un cubreobjetos y posteriormente a su almacenamiento. Al
cabo de algunos das en la incubadora se sac y se observ a travs de un
microscopio y fue posible la visibilidad de caros.

CONCLUSION: se pudieron observar los microorganismos con xito sin ningn

inconveniente.

Bibliogrfica

http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/microbiologia/unidades/documen/uni
_02/56/cap309.htm

https://conalepfelixtovar.wordpress.com/2012/09/26/tecnicas-y-metodos-deaislamiento-y-seleccion-de-microorganismos/