PROPAGACION CLONAL In vitro DE PLANTULAS DE CAMU CAMU (Myrciaria dubia H.B.K Mc Vaugh)' Gutiérrez-Rosati, Antonietta Ornella '; Inguil Rojas, Erich Hazel * - Profesora Principal, Departamento de Biologia. Universidad Nacional Agraria La Molina. P.O. Box 456 La Molina, Lima 12, Perd. e-mail: antonietta@lamolina.edu.pe Bidlogo, egresado de la UNALM. RESUMEN 1 el presente trabajo de investigacién FE ace noni eficiente de propagacién clonal in vitro de Camu-camu. Para ello se utiizaron nudos y épices de plantulas provenientes de semillas germinadas in vitro, utlizandose el medio basal de Murashige y Skoog (1962) suplementado con reguladores de crecimiento (AG, 1,5mg/l; ANA, 10mgll), carbén activado (3g!) y 4cido ascérbico (50mgf), pH5.6. INTRODUCCION Entre los muchos frutales de la Amazonia Peruana, el "Camu camu" es indudablemente uno de los de mayor importancia actual por su elevado contenido de acido ascérbico y su buen sabor. Calzada (4). Elalto contenido de acido ascérbico presente en el ‘Camu camu (2780 mg/100g de pulpa) ha ocasionado el incremento de la demanda de este fruto, demanda que no podra ser cubierta por las plantaciones naturales, hecho que pone produccién nativa, poniéndose llegar ‘@ una sobreexplotacién si no se tiene un manejo adecuadode dicha especie. Ascufia etal. (2) EI Camu camu crece de manera natural @ orillas de los rios, cochas y cursos menores de agua en la Amazonia, El centro de origen de esta especie vegetal parece ser la cuenca Occidental del ‘Amazonas, de la cual forman parte la Amazonia del Peri, Colombia, Brasil y Venezuela, sin embargo la mayor concentracién de poblaciones y de diversidad se encuentra en la Amazonia peruana, a lo largo de los rios Ucayali y Amazonas y sus afluentes, en el sector ubicado entre las localidades de Pucallpa (sobre el io Ucayali) y Pebas (sobre el rio Amazonas). Villachica (30)Es necesario contar con una metodologia de preservacién de este recurso natural tan importante en vista del alto potencial agroindustrial que presenta, El desarrollo de técnicas de cultivo de tejidos para la propagacién clonal y conservacién in vitro se convierte en una alternativa factible para solucionar este y otros problemas. El presente articulo describe una metodologia eficiente de propagacién clonal in vitro de Camu-camu, mediante la cual se logré ingresar a condiciones in vitro representantes de diferentes poblaciones naturales. MATERIALES Y METODOS Material vegetal Los frutos maduros de Myrciaria dubia H.B.K. Me Vaugh, cosechados en las. del rio Ucayali, localidad de Jenaro Herrera y del rio Putumayo, localidad El Estrecho; ambos lugares pertenecientes al departamento de Loreto- Pert, Se extrajeron las semillas de los frutos, las cuales fueron esterilizadas previamente a ser éstas sembradas bajo condiciones de esteriidad Medios de cultivo. Se elaboraron medios de cultivo (diferentes modificaciones del medio basal M-s 1962, mediante la adicién de reguladores de crecimiento (ANA, AIA, IBA y AG, en diferentes concentraciones, carbén activado (3g) y Acido ascérbico (50mg/l), a fin de determinar la composicién mas adecuada para la germinacién de semillas, la micropropagacion y enraizamiento de las pléntulas. EI pH del medio fue ajustado a 5.6 + 0.5 con K(OH) O.1N y HCl 0.1N, antes de la esterilizacion (121°C y 1.06 Kg cm * ‘bras de presién durante 20 minutos). Desinfeccion de las semillas. Para el proceso de esterilizacién superficial de semillas se probaron concentraciones de hipoclorito de sodio asi como diferentes tiempos de exposicién a este agente desinfectante. Igualmente se procedié a evaluar el efecto que tiene el procedimiento de desinfeccién cuando la semilla se encuentrasintestaMicropropagacién. Después de transcurridos dos meses de sembradas las semillas y las pléntulas se encontraban con el tamafio y ntimero de nudos adecuados para su multiplicacién. Se procedié a seccionar los apices y nudos. Se determiné la combinacién hormonal que expresara una respuesta positiva a la micropropagacién. Se utilizaron diferentes repeticiones por tratamiento, Las pruebas estadisticas y de significacion se realizaron alos 30 y 45 dias. Para el procesamiento de datos se utilizo el programa estadistico SAS. En todos los calculos el nivel de significacién 0,05 fue considerado satisfactorio. Las variables evaluadas fueron: Porcentaje de explantes sobrevivientes. (%), Altura de la planta. (cm), Numero de nudos , Porcentaje de formacién de call. (%), Formacién de raices. Una vez obtenida la mejor respuesta en los ensayos de multiplicacién, se realizaron diferentes ensayos para estimular el enraizamiento, utlizando diferentes concentraciones de IBA, ANAy AIA En todos los experimentos los explantes fueron colocados en un cuarto de cultivo con las siguientes condiciones ambientales: Temperatura 2442°C ¢ Humedad 60-70% = Fotoperiodo oHrs luz/ 8Hrs oscuridad ‘© Intensidadluminosa 46.93 Lm RESULTADOS Y DISCUSION Desinfeccién de las semillas. ‘Se observ una mejor respuesta en el tratamiento de esinfeccién: 2.5% de hipoclorito de sodio durante 25 ‘minutos, con semillas previamente escarificadas. Germinacién de las semillas bajo condiciones in vitro, Se observo que incorporar carbon activado al medio de cultivo protegia a la semilla de los efectos ‘oxidativos de los fenoles que impedian una buena ‘germinacién, La germinacidn de la semilla es de tipo hipogea, se inicia a os. 12 dias luego de haber realizado la siembra, El porcentaje de germinacién in vitro, para las. semillas trabajadas fue del 76.74%, contrastando con el porcentaje de sgerminacién observado en forma natural del 98%, ‘Al cabo de dos meses de siembra, las plintulas se encuentran en estado fisiolégico optimo para ser micropropagadas, Micropropagacién. Los pices terminales responden negativamente al tratamiento hormonal. Observaciones similares se dan en otras especies de la familia Myrtaceae como Syzigium alternifolia, en donde los explantes nodales con dos ‘meristemas axilares dan mejor respuesta que el épice con un solo meristema apical. (Sha Valli Khan, et al., 25); al igual que en Syzigium cuminii, en donde los explantes nodales fueron los que mostraron mejor respuesta que ls ipiees, esto cs debido a diferencias en el estado fisioligico de los dos tipos de explantes. (Yadav, V. etal, 36), Los mayores promedios en altura y numero de rnudos se dan @ los 45 dias de evaluacién y por mas que las pruebas estadisticas no muestren significancia estadistica,en el tratamiento (1,5mg/l de AG/IOmgl de ANA) se ‘encuentran los explantes con mayores promedios para ambas Variables (Ver fotografia N° 1), los mayores porcentajes de explantes sobrevivientes a los 45 dias se encuentran en cl tratamiento (1,Smg/l de AG, con ‘Smg/l de ANA). "Trabajo de investigacién realizado cen el Centro de investigaciones en recursos Genéticos y Biotecnologia Vegetal (CIRGEBY) - Universidad Nacional Agraria La Molina y financiado por el Fondo de las Américas.