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REPRODUCCIN EN ANIMALES DE
LABORATORIO
1 parte:
RATA - RATN
Los roedores de laboratorio pueden ser considerados animales en alta produccin, segn el
sistema de apareo que se utilice.
En produccin intensiva es habitual que la hembra se encuentre amamantando y gestando
al mismo tiempo por lo tanto en estas circunstancias las condiciones del medio ambiente, la
dieta, las caractersticas genticas y las condiciones sanitarias de estas especies determinan
el comportamiento en la reproduccin.
La respuesta biolgica esta absolutamente condicionada por el medio ambiente. Si este no es
estable la respuesta tampoco lo ser y habr mayor margen de error en los experimentos y
menor reproductividad.
Ciclo estral
El ciclo estral dura entre 4-5 das (siendo el de 4 das l mas frecuente). Los animales con
ciclos de 5 das presentan mayor ndice de pseudopreez y de preez posiblemente por tener
mayor periodo de receptividad.
El olor de la orina de los machos como de las hembras acorta el ciclo de 5 a 4 das en el 50 al
100 % de las hembras expuestas al mismo. ( la extirpacin del bulbo olfatorio suprime este
efecto)
Metaestro I: duracin aproximada 15 hs. Vulva inflamada. Vagina con cmulos caseosos.
Fluido vaginal caseoso y abundante con clulas pavimentosas.
La ovulacin mltiple y espontnea ocurre en esta fase temprana debido al aumento de LH.
Es pico de LH determina el final de la liberacin de estrgenos y el comienzo de secrecin de
progesterona que induce el comportamiento materno y la secrecin uterina
Metaestro II: Duracin aproximada 6 hs. Vulva normal. Vagina con paredes hmedas. Frotis
con clulas cornificadas y leucocitos.
Los vulos se hallan en el oviducto.
Diestro: Duracin aproximada 57 hs. Clulas epiteliales y leucocitos. El ph vaginal es de 6,1
y la luz uterina es de 2,5 mm.
Estro: Duracin aproximada 12 hs. Vulva inflamada. Vagina paredes de aspecto seco,
blanquecino y lustroso ph 4,2
Clulas: 75% nucleadas y 25 % cornificadas. Al final del estro aparecen clulas planas
nucleadas y el flujo se hace abundante y caseoso.
Ovario con folculos grandes y vulos casi maduros.
En este periodo los estrgenos son los responsables del comportamiento de la hembra. La
estimulacin digital de la regin plvica produce una lordosis refleja (test de Blandau o de
respuesta copulatoria).
Gestacin
La gestacin dura 22-23 das. La placenta es discoidea y hemocorial.
A partir del da 13 se observa el abultamiento del abdomen, dependiendo del numero de
cras.
Entre el da 2 y 16 de preez es factible el hallazgo de glbulos rojos en vagina. La duracin
del parto depende de la cantidad de cras, de la edad de la madre y de su condicin fsica.
Cpula y fertilizacin:
Normalmente el apareamiento se produce en el estro en el periodo de oscuridad cercano a la
ovulacin.
La cpula se puede demostrar por la presencia en la vagina del llamado tapn vaginal,
constituido por las secreciones de las glndulas accesorias del macho, principalmente las
glndulas coagulantes. Este tapn distiende la vagina pudindose asomar por la vulva hasta
24 hs despus de la copula.
Ciclo estral:
La duracin del ciclo varia de 4 a 6 das en animales mantenidos con 14 hs luz/ 10
oscuridad (aunque segn los autores tambin se puede ver influenciado por el medio
ambiente a travs del eje hipotlamo-hipfisis).
El ciclo se divide en proestro, estro, metaestro y diestro. El celo dura aproximadamente 12
hs.
El proestro y estro culminan en la ovulacin y constituyen la face de liberacin de
estrogenos, mientras que el metaestro y el diestro (o pseudopreez o preez) conforman la
face progestacional o luteal). (Ver Tabla 1)
En las hembras mantenidas con Ciclos luminicos 14/10 el pico ovulatorio de LH se produce
entre las 4 y las 5 de la tarde del da del proestro y la ovulacin 12 horas despus, entre la 1
y las 8 de la maana del da del estro, con marcada tendencia a localizarse en la mitad del
periodo de oscuridad.
Los vulos liberados en cada ciclo son transportados a la porcin proximal o ampolla del
oviducto donde tiene lugar la fecundacin.
Los mismos mantienen su fertilidad durante 10 a 15 hs
Por lo general los espermatozoides se hallan esperando a los vulos y son capaces de
fecundar durante aproximadamente 6 hs, aunque mediante una motilidad remanente
durante ms de 14 horas. Y son eliminados por fagositosis leucocitaria 24 horas despus de
la cpula
EFECTO LEE-BOOT: Las hembras aisladas presentan ciclos de 5 a 6 das de duracin, a veces
irregulares y con la aparicin de pseudogestacin espontneas.
Cuando se agrupan hembras sin la presencia de machos pueden presentar pseudopreez, ms
frecuentemente si son grupos pequeos, o anestro si se agrupan en mayor nmero.
En ambos casos hay una efectiva supresin del celo.
Gestacin
La duracin de la gestacin es de 19 a 20 das segn la cepa.
La duracin de la preez esta muy relacionada con el tamao de la masa fetal y no tanto con
la cantidad de cras implantadas.
La gestacin es ms corta cuando se trata de camada hbridas que cuando son cepas puras,
lo que probablemente esta en relacin con las diferencias antignicas entre la madre y los
fetos.
En sistemas de apareamiento monogmico permanente, es habitual que se aproveche el celo
posparto que aparece entre 16 y 24 horas despus del mismo. La fertilidad es menor en este
apareamiento que en otro correspondiente a un ciclo normal.
La placenta es discoidea y hemocorial.
Parto y Lactancia
La mayora de los nacimientos se producen en las horas de oscuridad segn algunos autores,
mientras que otros sealan que no hay relacin entre el inicio del parto y el ciclo lumnico.
El primer feto por lo general sale del cuerno derecho, y el resto es expulsado al azar.
La lactacin dura aproximadamente 21 das, pero puede prolongarse si se reemplaza la
camada por otra de animales ms jvenes que produzcan mayor succin.
Los mximos niveles de secrecin lctea se producen a los 12 o 13 das pos parto.
El reflejo de la expulsin de la leche, cuyo estimulo es la succin de los pezones por parte de
las cras, es necesario no solo para la liberacin de la oxitocina, sino tambin para la
secrecin de hormonas de la hipfisis anterior, responsables del mantenimiento de la
secrecin lctea.
EFECTO WHITTEN:
Si las hembras aisladas ( que presentan anestro) son luego llevadas a la presencia de machos
normales, comienzan a presentar ciclos con normalidad.
Este efecto del macho sobre los ciclos es inducido por una feromona andrgeno-dependiente
que se agrega a la orina dentro de la vejiga y tambin durante la salida al exterior, en este
caso por la secrecin de las glndulas prepuciales.
que es
TABLA 1
Proestro
Estro
Metaestro
Diestro
Frotis vaginal
Clulas epiteliales nucleadas, leucocitos
ocasionales, clulas epiteliales
cornificadas.
Abundantes clulas cornificadas,
escasas clulas epiteliales nucleadas.
Clulas cornificadas, numerosos
leucocitos, escasas clulas epiteliales
nucleadas.
Moco, menos clulas que en otros
estadios, predominantemente leucocitos
con clulas epiteliales nucleadas
ocasionales.
Orificio Vaginal
SISTEMAS DE APAREO
Son independientes de los sistemas de cra
El criterio para elegir los mismos va a depender del comportamiento de los animales y de la
capacidad reproductiva de la especie.
Los sistemas de Apareo se clasifican de dos maneras diferentes:
A) Segn el numero de animales utilizados (Son Monogmicos o Poligmicos )
B) Segn el tiempo de permanencia (Son Permanente o Temporales )
APAREO MONOGMICO
Es cuando mantenemos un macho apareado con una hembra en forma permanente.
Este tipo de apareo tiene la ventaja de aprovechar el celo posparto de las hembras, se llevan
registros detallados y precisos en forma sencilla.
Posee la desventaja de ser mas caros, por la cantidad de materiales que se utilizan (Jaulas,
mamaderas, etc.) y ms trabajosos. Producen a su vez un mayor desgaste de las hembras
(las mismas se retiran de produccin luego 7 partos consecutivos)
APAREO POLIGMICO
Es cuando apareamos un macho con dos o ms hembras.
A su vez estos grupos de apareo pueden mantenerse fijos durante toda la vida reproductiva o
pueden deshacerse y rearmarse.
Desventajas: Si son fijos no puede individualizarse las cras de cada hembra y se dificultan
los registros y no son detallados. Si no son fijos (o sea que se retiran los machos o las
hembras) son costosos y requieren mucho trabajo y dedicacin del personal.
Ventajas: Si son fijos se ahorra mucho en materiales y si no son fijos hay un gran
aprovechamiento de los machos y altas produccin de animales.
APAREO PERMANENTE
Es el sistema de apareo en el cual los animales permanecen juntos durante toda su vida
reproductiva
SELECCIN DE REPRODUCTORES
La seleccin de reproductores debe basarse en el estudio de las caractersticas reproductivas
y productivas de animales cuya produccin ya se encuentra establecida.
1. CARACTERISTICAS REPRODUCTIVAS: ( los valores son generales y varia en funcin
de la cepa , colonia y/o caractersticas del ambiente en el que se encuentran los
animales en estudio)
A) ndice de primera cra: Indica la edad que la hembra es apta para l apareo.
Ratn: 50 a 60 das de edad
Rata: 50 a 60 das de edad
Hmster: 50 a 70 das de edad (Syrian, Chinese y Djungarian)
Cobaya: 90 a 100 das de edad
Conejo: 150 a 180 das de edad
F) ndice de ultima cra: Indica la edad de la hembra que comienza a presentar baja
capacidad reproductiva.
Ratn: 7 partos o 240 das de edad
Rata: 8 partos o 300 das de edad
Hmster: 5 partos o 1 ao de edad
Cobaya: 8 partos o 2 aos de edad
Conejo: 8 partos o 3 aos de edad
1
0
2. CARACTERISTICAS PRODUCTIVAS:
A) Peso medio de la camada al nacimiento (media de la camada)
Ratn:1 1.5 grs
Rata: 4 6 grs
Hamster: 1.5 a 2.5 grs
Cobayo: 50 a 80 grs
Conejo:50 a 100 grs
Todos estos datos sirven para seleccionar los reproductores donde las madres que no
respondan a la media de la colonia sern descartadas, este descarte no debe ser realizado
antes de la tercera camada ,que es donde se puede en forma certera evaluar la capacidad
reproductiva de las hembras.
Las mismas deben ser comparadas con la cepa patrn.
La metodologa de descarte de reproductores debe ser realizada en el siguiente orden:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Tamao de la camada
Mortalidad de los lactantes
Intervalo entre partos
Edad de los reproductores
Peso medio de la camada
Productividad
Estado de Salud
Fertilidad
11
Una cepa es endocriada cuando se aparearon animales mas emparentados que la media de
la poblacin a la que pertenecen (padre x hijo - hermano x hermana) por mas de 21
generaciones consecutivas y que a su vez dichos antecesores puedan ser rastreados hasta un
apareo ancestral nico.
A partir de la generacin 21 se considera un grado de consanguinidad del 98,6%
CARACTERISTICAS
G1
Pareja elegida
G2
G3
G4
G = Generacin
G0
1
2
G0
G1
G2
G3
G2
1
3
Los animales del ncleo verde se aparean independientemente del grado de parentesco que
los una. Los hijos de estos apareos formaran el nuevo ncleo del sistema (amarillo o de
expansin) y puede ser utilizado para venta y para formar el ncleo de stock o ncleo rojo
cuyos animales solo pueden ser utilizados para venta y no pueden ser apareados ya que sino
perderan el 98,6% de consanguinidad.
N. Isogenico
Ncleo Expansin
1
4
Exocra:
Se produce cuando los individuos apareados estn menos emparentados que la media de la
poblacin. Lo que se busca es producir animales heterocigotas.
Por lo cual la poblacin tiene una homocigosis menor al 1%.
Para mantener estas colonias con sus caractersticas estables por muchas generaciones.
Para elegir el sistema de cruzamiento a utilizar en una colonia se tiene en cuenta el numero
de machos reproductores que la colonia utiliza histricamente.
N de reproductores
Sistema Utilizado
Nueva Jaula
Reproductora
1
2
3
4
5
6
7
8
Go
2
4
6
8
1
3
5
7
1
5
Este sistema tan estricto solo se utiliza en ratas y ratones y no es aconsejado para colonias
con menos de 10 y 20 ( siempre teniendo en cuenta la posible aparicion de casos de
muerte y/o infertilidad)
Los Sistemas Rotacionales (Poiley Falconer) tienen como principal objetivo el de evitar el
apareamiento de animales emparentados.
Para ello Samuel M. Poiley (1960) describi un sistema donde las poblaciones cerradas son
sistemticamente controladas de forma tal que todos los animales contribuyan igualmente al
mantenimiento del pool gentico a lo largo del tiempo.
Para seguir con el sistema se debe dividir a los animales en grupos uniformes y seguir con el
esquema descrito.
En este mtodo se describieron esquemas para colonias divididas en 3 (tres) y hasta 12 (doce)
grupos. Cuanto mayor sea el nmero de machos que forman la colonia menor ser el nmero
de grupos a formar.
Los grupos estn formados por un nmero determinado de jaulas (Ej.: Grupo 1 formado por
jaulas que van de la 1 a la 333, grupo 2 va de la jaula 334 a la 666 y el grupo 3 va de la jaula
667 a la jaula 1000).
N de grupo de
procedencia de
Los machos
1
2
3
2
3
N de grupo de
procedencia de las
hembras
3
1
Esquema de 4 grupos
N de grupo de
procedencia de los
machos
1
2
3
4
N de grupo de
procedencia de las
hembras
2
3
4
1
Esquema de 3 grupos
1
6
Esquema de 5 grupos
N de grupo de
procedencia de los
machos
1
2
3
4
5
2
3
4
5
N de grupo de
procedencia de las
hembras
5
1
2
3
N de grupo de
procedencia de los
machos
1
2
3
4
4
5
1
6
N de grupo de
procedencia de las
hembras
3
4
6
5
Esquema de 7 grupos
N de grupo de
procedencia de los
machos
1
2
7
1
N de grupo de
procedencia de las
hembras
5
6
6
7
3
4
1
2
Esquema de 6 grupos
1
7
Esquema de 8 grupos
N de grupo de
procedencia de los
machos
1
2
2
5
N de grupo de
procedencia de las
hembras
8
3
6
7
1
3
7
1
N de grupo de
procedencia de los
machos
1
2
2
5
N de grupo de
procedencia de las
hembras
9
3
6
7
9
1
7
8
Esquema de 9 grupos
1
8
Esquema de 10 grupos
N de grupo de
procedencia de los
machos
1
2
2
5
N de grupo de
procedencia de las
hembras
10
3
6
7
9
10
7
8
10
N de grupo de
procedencia de los
machos
1
2
2
5
N de grupo de
procedencia de las
hembras
11
3
6
7
9
10
7
8
11
10
10
11
Esquema de 11 grupos
1
9
N de grupo de
procedencia de los
machos
1
2
4
5
N de grupo de
procedencia de las
hembras
3
4
6
7
9
10
8
9
11
10
12
11
10
12
11
12
Siguiendo los lineamientos generales del sistema Poiley posteriormente (1967) se describi
el Sistema Falconer.
Bajo este sistema las colonias son divididas en grupos que son cruzados usando el
siguiente cuadro:
N de grupo de
procedencia de los
machos
1
2
1
2
N de grupo de
procedencia de las
hembras
2
3
6
7
6
7
7
8
Esquema de 12 grupos
2
0
Como se puede extraer del cuadro anterior solo se rotan las hembras para la formacin de
los nuevos grupos
Hay que tener en cuenta que a medida que se rotan las hembras generacin tras generacin,
se llegar a un punto donde la h del grupo 1 deber ser apareada con el macho del grupo 1
(cosa que seria imposible ya que pertenecen al mismo grupo) entonces este esquema se
saltea y se pasa al esquema siguiente; de esta forma se consigue mantener uniforme el ndice
de consanguinidad existente en la colonia a lo largo del tiempo.
En ambos sistemas es recomendado rotar en los esquemas la columna de machos por la de
hembra en cada ciclo de rotacin y cruzamiento.
2
1
BIBLIOGRAFIA
Jesus ZUIGA
PRINCIPIOS DE LA CIENCIA DE ANIMALES DE LABORATORIO
Ed. L.F.M. VAN ZUTPHEN, V. BAUMANS, A.C.BAYNEN 1 Ed. 1999 (ELSEVIER)
Institute of Laboratory Animal Resources, National Research Council
GUIDE FOR THE CARE AND USE OF LABORATORY ANIMALS
National Academy Press, Washington, 1996.
Poole T.B. (Ed.)
THE UFAW HANDBOOK ON THE CARE AND MANAGEMENT OF LABORATORY ANIMALS, 6th Ed.
Longman Scientific and Technical, London, 1989.
Castillo Menendez R.
ANIMALES DE LABORATORIO EN LAS INVESTIGACIONES BIOMDICAS
Editorial Ciencias Mdicas, La Habana, 1985.
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