CLASIFICACIN DE LOS MTODOS

CROMATOGRFICOS
La cromatografa puede ser definida como cualquier mtodo de separacin que
depende de una absorcin continua, particin o proceso de intercambio inico;
agrupa un conjunto importante y diverso de mtodos, que permite separar
componentes estrechamente relacionados en mezclas complejas, lo que en
muchas ocasiones resulta imposible por otros medios.

Mtodos cromatogrficos

Los mtodos cromatogrficos son hoy en da tan diversos que pocos de ellos muestran alguna
similaridad con la tcnica original. Las tcnicas cromatogrficas pueden clasificarse de
acuerdo a la disposicin de la fase estacionaria como sigue:
- Cromatografa Plana: La fase estacionaria se sita sobre una placa plana o sobre un papel.
Las principales tcnicas son: Cromatografa en papel y Cromatografa en capa fina
- Cromatografa en Columna: La fase estacionaria se sita dentro de una columna. Segn el
tipo de fluido empleado como fase mvil se distinguen: Cromatografa de lquidos
(LC), Cromatografa de Gases (GC) y Cromatografa de fluidos supercrticos (SFF)
Las tcnicas cromatogrficas son muy variadas, sin embargo, una caracterstica que todas
ellas tienen en comn es su dependencia de la distribucin de solutos entre dos fases, una de
las cuales se encuentra en movimiento, por lo que se le conoce como fase mvil y que
consiste en un fluido (gas, lquido o fluido supercrtico), cuya funcin es arrastrar a la muestra
a travs de una fase fija, conocida como fase estacionaria, constituida por un slido o un
lquido fijado en un slido y que es inmiscible con la fase mvil.
InTechMex (ITM) es una empresa creada para fomentar y estimular la innovacin tecnolgica
de los laboratorios de investigacin, clnicos, educativos y de gobierno a travs de sus
productos y servicios.

Clasificacin segn el procedimiento de separacin

La separacin de las sustancias que componen una mezcla se fundamenta en una serie
de sucesivos equilibrios entre la fase estacionaria y la fase mvil. El equilibrio depender
de la particin o diferente adsorcin que tengan la fase estacionaria y los componentes de
la mezcla. El mayor o menor avance en el sistema cromatogrfico depender de la
afinidad del componente y la fase estacionaria. El componente con menor afinidad por la
fase estacionaria en presencia de una fase mvil llamada eluyente ser eluido en primer
lugar, y por tanto se desplazar con mayor velocidad por el sistema cromatogrfico.

Clasificacin segn el proceso de desarrollo

Segn el procedimiento en que se desarrolla se utiliza la siguiente clasificacin,
que fue la usada por Tiselius en 1940:

Desarrollo por elucin.

Desarrollo por desplazamiento.

Anlisis frontal.

Desarrollo por elucin

Representa el concepto bsico de la separacin cromatogrfica y es la tcnica
ms usada en los distintos mtodos cromatogrficos (gaseosa, lquido-gas,
lquido-lquido, slido-lquido). Para describir esta tcnica considrese una mezcla
de slo dos componentes. Dicha mezcla se introduce en el extremo superior de
una columna adsorbente y sus componentes se separan en zonas, al pasar uno o
ms eluyentes a travs de la columna, debido a las distintas afinidades entre los
componentes y ambas fases.
La fase mvil es adsorbida dbilmente por la fase slida estacionaria. Este ideal
terico de desarrollo por elucin no siempre se consigue en la prctica. Es un
mtodo analtico esencial.

Desarrollo por desplazamiento

Consiste en desarrollar con un disolvente que sea adsorbido por la fase
estacionaria con mayor fuerza con que adsorbe a los componentes de la mezcla,

al contrario que el desarrollo por elucin. A medida que el disolvente pasa a lo

largo de la columna, desplaza a la mezcla, que al mismo tiempo se separa
parcialmente.
Parte del material menos fuertemente adsorbido se recupera de forma pura,
seguido por una mezcla (interfase) y seguido posteriormente del otro componente
en forma pura. Es un mtodo preparativo til.

Anlisis frontal
Consiste en la aplicacin continua de una mezcla en el origen. En principio el
componente menos fuertemente adsorbido fluye a lo largo de la columna, mientras
que el ms fuertemente adsorbido se acumula cerca del origen. Sin embargo
existe un lmite en la capacidad del adsorbente y, cuando este lmite se alcanza,
tambin el componente ms fuertemente adsorbido empieza a desplazarse a lo
largo de la columna. Por esto, las primeras fracciones contendrn el material
menos fuertemente adsorbido; ms tarde aparecer una mezcla de ambos
componentes. Es una tcnica preparativa ms que analtica.

Cromatografa de gases
En este caso la fase mvil es un gas inerte (helio o nitrgeno) y la fase
estacionaria es un slido (cromatografa gas-slido) o un lquido sostenido por un
slido inerte (cromatografa gas-lquido). Este tipo de cromatografa siempre es en
columna, ya que es la nica manera de que la fase mvil gaseosa se mantenga
fluyendo, confinada dentro del sistema. La columna puede estar rellena con la fase
estacionaria, en forma semejante a la cromatografa lquida, o bien la fase
estacionaria puede depositarse sobre las paredes de un tubo muy delgado
(0.25mm de dimetro) y largo (hasta 100m). Este tipo de columnas se conocen
como columnas capilares y proporcionan la mayor capacidad de separacin. De
acuerdo con el mecanismo de retencin, la cromatografa se puede clasificar en
los siguientes tipos:

Adsorcin (normal, de fase reversa)

Particin lquido-lquido
Intercambio inico
Premiacin sobre gel de afinidad

Las reas de aplicacin son muy diversas y abarcan prcticamente todas las
actividades en las que interviene la qumica, por ejemplo se emplea en:
El anlisis de drogas y frmacos en fluidos biolgicos como la saliva, la sangre, la
orina; Seguir la transformacin de las sustancias responsables de la transmisin
neurolgica; Determinar la presencia de contaminantes en el medio ambiente;
Descifrar la composicin de los combustibles fsiles; Realizar el control de calidad
de los productos qumicos y farmacuticos manufacturados; en fin, la lista de
ejemplos es interminable.