PRUEBA DE LA CATALASA

La prueba de la catalasa es una prueba usada para determinar la presencia de catalasa en

microrganismos,

que

usualmente

se

usa para diferenciar

los

estafilococos

(catalasa positivo) de los estreptococos (catalasa negativa).

PEROXIDO DE HIDROGENO
El perxido de hidrgeno es uno de los productos del metabolismo celular en diversos
organismos, pero dada su potencial toxicidad, es transformado enseguida por la enzima
catalasa. En la industria, se tambin se utiliza la enzima catalasa, para diferentes fines.
Por ejemplo, se usa en la industria textil, para eliminar residuos de perxido de
hidrgeno. Adems, la catalasa cumple una funcin protectora contra determinados
microorganismos patgenos, sobre todo anaerobios. Las bacterias anaerobias, mueren al
estar en contacto con oxgeno, es por esta razn que el oxgeno producido por esta
enzima tiene efecto bactericida sobre estos microorganismos. (MacFaddin, J. 2003)
CATALASA
En una enzima tpica de las bacterias aerobias que tienen un metabolismo oxidativo,
capaz de descomponer el agua oxigenada (perxido de hidrogeno) en agua y oxgeno.
Desde el punto de vista prctico, se toma la colonia de los microorganismos que hay que
investigar y se mezcla con una gota de agua oxigenada .Si la bacteria posee catalasa,
esta escindir dicho compuesto formando una serie de burbujas visibles, dividas al
oxigeno liberado. (Pomarola, A. y colaboradores 1987)
FUNCION
Las especies de oxgeno reactivas como el radical superxido, el radical hidroxilo y el
perxido de hidrgeno (H2O2) se forman durante la reduccin del dioxgeno en agua.
Estas especies pueden daar las protenas, los lpidos y los cidos nucleicos, por lo que
se requieren sistemas antioxidantes eficientes, entre los que se incluyen ciertas enzimas.
El perxido de hidrgeno se forma por la dismutacin del radical superxido y tambin
en la reaccin de algunas oxidasas. Hay varias enzimas capaces de degradar el perxido
de hidrgeno: las catalasas, las peroxidasas y las peroxirredoxinas (1, 2). Las
peroxidasas eliminan el H2O2 usndolo para oxidar otros sustratos. A diferencia de las

otras enzimas, que requieren de un sustrato reducido, las catalasas dismutan el perxido
de hidrgeno. Daz, A. (2002).
Se han identificado tres grupos de catalasas:
a) LAS CATALASAS MONOFUNCIONALES, que contienen hemo y estn
presentes tanto en los organismos procariotos como en los eucariotos,
b) LAS MN-CATALASAS, que son enzimas hexamricas que no tienen hemo,
tienen Mn en el sitio activo y slo estn presentes en algunos organismos
procariotes anaerobios.
c) LAS CATALASAS-PEROXIDASAS, que tienen actividad de catalasa y de
peroxidasa, contienen hemo y slo estn presentes en las bacterias y los hongos
La mayora de los organismos aerobios tienen catalasas monofuncionales.
La enzima catalasa descompone el perxido de hidrgeno (H2O2) en agua y oxgeno.
De esta manera las bacterias se protegen del efecto txico del H2O2, que es un producto
final del metabolismo aerobio de los azcares.
2 H 2 O2 2 H 2 O+O 2
CATALASA

Catalasa positivo: se produce la aparicin de burbujas que corresponde a la liberacin

de oxgeno, lo que indica que la bacteria tiene el enzima catalasa.
-

Micrococcus
Stomatococcus

Staphilococcus

Catalasa negativo: no se producen burbujas por tanto la bacteria no posee dicho enzima
-

Aerococcus
Enterococcus
Streptococcus
Pediococcus
CATALASA POSITIVA

CATALASA NEGATIVA

PRUEBA EN PORTAOBJETOS (recomendada)

Con el asa de siembra recoger el centro de una colonia pura de 18-24 horas y

colocar sobre un portaobjetos limpio de vidrio.

Agregar con gotero o pipeta una gota de

microorganismo sin mezclarlo con el cultivo.

Observar la formacin inmediata de burbujas (resultado positivo).
Descartar el portaobjeto en un desinfectante.

H 2 O2 al 30% sobre el

Si se invierte el orden del mtodo (extender la colonia sobre el agua oxigenada)

pueden producirse falsos positivos. MacFaddin, J. (2003)

PRUEBA EN TUBOS
H 2 O2 al 3% directamente sobre un cultivo denso de 18 a 24

Agregar 1 ml de

horas en agar en pico de flauta puro.

No usar como medio de cultivo agar con sangre.
Observar el burbujeo inmediato

BIBLIOGRAFIA

1. Pomarola,

A.

colaboradores

(1987):

MICROBIOLOGIA

PARASITOLOGIA GENERAL, Segunda edicin, Editorial Masson S.A, Pg.,

75, Barcelona-Espaa.
2. Prueba a de la catalasa, revisado el 15/07/16 a las 10.44 a.m .Disponible en:
http://learn.chm.msu.edu/vibl/content/catalase/Catalase_Test/catalase.html
3. MacFaddin,
J.
(2003):PRUEBAS
BIOQUIMICAS
PARA

LA

IDENTIFICACION DE BACTERIAS DE IMPORTANCIAS QUIMICAS,

Captulo VI. Prueba de catalasa y oxidasa, Pg. 75-80, Tercera edicin,
Editorial Medica Panamericana S.A. ,Argentina.
4. Daz, A. (2002). ESTRUCTURA DE LAS CATALASAS Departamento de
Bioqumica, Instituto de Fisiologa Celular, UNAM. Mxico. Disponible en :
http://www.uacj.mx/ICB/redcib/Documents/REB_DOC/2003/06/2003-2_LA
%20ESTRUC_.pdf