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Espectrofotometra UV-Visible
Feria B.; Maldonado D.; Velez P.; Tacuri D.
Laboratorio de Anlisis Instrumental
Grupo 4
Escuela Politcnica Nacional, Facultad de Ingeniera Qumica y
Agroindustria
Quito, Ecuador
e-mail: bryan.feria@epn.edu.ec, daniel.maldonado@epn.edu.ec,
pablo.velez@epn.edu.ec, david.tacuri@epn.edu.ec

Resumen Con la ayuda de un espectrofotmetro y de una

solucin estndar de Anaranjado de metilo se midi la
absorbancia a distintas longitudes de onda para determinar
la mxima longitud de onda. Se trabaj en un rango de
absorbancia menor o igual a 2 (fuera de ese rango los
resultados pueden ser errneos). Una vez establecida la
longitud de onda mxima (425 nm) se tom soluciones
diluidas de concentraciones conocidas y se midi sus
absorbancias. Con los datos obtenidos se procedi a
elaborar la curva de calibracin y se determin el
coeficiente de absortividad.
Palabras clave: Espectrofotometra, Curva de Calibracin,
Absorbancia,
Longitud
de
Onda,
Espectro
electromagntico.
Abstract: With the aid of a spectrophotometer and a
standard solution of Methyl orange, the absorbance was
measured at different wavelengths to determine the maximum
length. We worked in a range of absorbance less or equal to
2 (outside this range the results may be wrong). Once
established the maximum wavelength (425 nm) we took
solutions of known concentrations and measured their
absorbance. With the data obtained we built the calibration
curve and calculated absorption coefficient.
Keywords:
Spectrophotometry,
Calibration
Absorbance, Wavelength, electromagnetic spectrum.

Curve,

1. MATERIALES Y METODOLOGA
En la celda del espectrofotmetro marca HACH (DR 2000)
se coloc agua como sustancia de referencia, posteriormente
se encero para reducir posibles interferencias que puedan ser
generadas por el medio acuoso de la solucin, una vez
encerado el sistema se coloc una muestra de colorante de
anaranjado de metilo de concentracin conocida. La solucin
al estar muy concentrada por los datos de absorbancia que se
obtenan se la diluyo ya que no deben ser mayores a 2. Con
esta muestra diluida se determin el espectro de absorcin de
la solucin preparada, mediante lecturas en la regin visible
entre 400 y 700 nm. Se realiz varias lecturas con diferentes
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longitudes de onda para determinar en qu longitud de onda

se da la absorbancia mxima, desde 400nm hasta 430nm en
intervalos de 10nm viendo en que longitud de onda se daba la
absorbancia mxima, una vez determinada la longitud de
onda mxima en el que se daba la mxima absorbancia se
realizaron las siguientes mediciones a esa longitud de onda
en particular, para esto se prepar diluciones a partir de la
solucin madre con concentraciones de 2ppm, 4ppm, 6ppm,
8ppm, 10ppm respectivamente y se realiz las mediciones de
absorbancia para cada disolucin con la longitud de onda
mxima obtenida previamente.

2. TABLAS DE
DATOS Y
DIAGRAMAS
A continuacin se
detallan los valores
experimentales
obtenidos en la
prctica.
Tabla1. Datos experimentales para determinar la mxima
absorbancia
Longitud de onda
(nm)
400
410
415
420
425
430

Absorbancia
1,068
1,147
1,194
1,203
1,209
1,197

Tabla 2. Datos experimentales para la construccin del a

curva de calibracin.
Concentracin (ppm)
2
4
6
8
10

Absorbancia
0,175
0,318
0,497
0,679
0,831

Absorbancia = 0.0834 * concentracin

1.209
0.0834
Concentracin=14.496 ppm
Concentracin=

f(x) = - 0x^2 + 0.2x - 41.76

R = 0.99

Calculo del coeficiente de absortividad.

A
Cd

1.209
14.496 ppm2.54 cm
1
1
=0.0328355 ppm cm
=

4. RESULTADOS Y DISCUSIN

Figura 1. Curva para determinar la mxima absorbancia del

anaranjado de metilo.

f(x) = 0.08x
R = 1

Los mtodos espectroscpicos se basan en la capacidad de las

sustancias de absorber o emitir radiacin electromagntica, y
tales mtodos se pueden emplear para determinar la
concentracin de un reactivo o producto durante una reaccin
(Archive, 2009), es as que en la espectrofotometra UV
Visible se aprovecha la absorcin en el rango visible del
espectro electromagntico, de este modo, para la muestra de
solucin de anaranjado de metilo se obtuvo una longitud de
onda que fue de 425 nm medida a la cual la absorbancia fue
de 1.209 segn la Tabla 1, esto indica que a esta longitud de
onda la absorbancia es mxima, el valor obtenido est dentro
del rango de color azul (440 -490) nm, lo cual nos indica que
el color que percibimos es el complementario a este, es decir
el anaranjado (Garca, 2013), por esta razn la longitud de
onda obtenida es coherente de acuerdo a los datos
bibligrafos.
La curva de calibracin realizada muestra un valor de r2 igual
a 0.9983, lo cual indica que los datos experimentales se
ajustan de manera correcta a la curva de concentracin vs
absorbancia, la cual en el intervalo de 2 a 10 ppm es una lnea
recta, es as que realizando los clculos pertinentes se obtuvo
una concentracin de la solucin inicial de 14.496 ppm y un
coeficiente de absortividad de 0.0328355 ppm ^ (1)*cm^ (-1).
5. CONCLUSIONES

Figura 2. Curva de calibracin para el anaranjado de metilo.

3. CLCULOS

1.La concentracin de solucin de naranja de metilo fue de

14.496 ppm.
2. La longitud de onda a la cual se obtuvo la mxima
absorbancia fue de 425 nm.
3. El coeficiente de absortividad fue de:
0.0328355 ppm^ (-1)*cm^ (-1)

Clculo de la ecuacin de la curva de calibracin

0.8310.175
=0.0834
102
y y 1=m( xx 1)
y0.318=0.0834( x4)
y=0.0834x

m=

Clculo de la concentracin de la muestra diluida

6. RECOMENDACIONES
1. Se recomienda para futuras mediciones usar una solucin
madre diluida lo suficiente para que los valores de
absorbancia no sean demasiado altos. (Skoog. 1994. p.950)
2. Se recomienda realizar anlisis de absorbancia con
diferentes muestras para comprar los niveles de absorbancia

que presentan estas y ver como varan en cada muestra.

(Getty. 1994. p132)

7. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
[1] Archive (2009). FUNDAMENTOS DE
ESPECTROFOTOMETRA. Recuperado de
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/cineticapr
actica6_19764.pdf
[2] Garca T. (2013). Aplicaciones y criterios de uso de la
espectroscopia de absorcin molecular:

Espectrofotometra UV-visible. Recuperado de

http://www.uhu.es/tamara.garcia/quimI/apuntes/TEM
A%203.pdf
[3] Getty. 1994. Conservacin de vidrieras histricas. Espaa,
Madrid. Editorial Santander
[4] Instituto Tecnolgico y de Estudios Superiores de
Monterrey. (2013). Practica 22. Espectrofotometra.
Recuperado de http://quimicaexperimental.blogspot.com/2013/05/practica-25espectrofotometria.html
[5] Skoog.1994. Anlisis instrumental. Espaa, Barcelona.
Mc Graw Hill/ interamericana de Espaa