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Cmo contribuir con la reduccin en

la incidencia de Tricomoniasis en
Venezuela?

Valero G, Adriana N
C.I. 24.139.367

UNIVERSIDAD DEL ZULIA


FACULTAD EXPERIMENTAL DE CIENCIAS

DIVISIN DE ESTUDIOS BSICOS SECTORIALES


LICENCIATURA EN BIOLOGA
ASIGNATURA: BIOLOGA CELULAR

Portafolio
Cmo contribuir con la reduccin en la incidencia de
Tricomoniasis en Venezuela?

BACHILLER:
Valero G, Adriana N
C.I. 24.139.367

Maracaibo, 27 de julio del 2015

Cmo
contribuir con
la reduccin en
la incidencia de
Tricomoniasis
en Venezuela?

Biologa de Trichomonas vaginalis

Trafico intracelular de Protenas. Ciclo de Divisin Celular


Estructura y Divisin del Complejo de Golgi en Trichomonas vaginalis y
Tritrichomonas feto

El complejo de Golgi est formado por las cisternas y los filamentos parabasales 1.
Este est situado dorsalmente a la derecha del ncleo, consiste en cisternas alargadas
con bordes dilatados. Los filamento parabasales forman una hebra microfibrilar vinculados
a los cuerpos basales. Algunos autores afirman que los dos filamentos parabasales dan
apoyo a las cisternas de Golgi y que T. vaginalis presenta dos complejos de Golgi (fig3)1.
Por microscopa electrnica, el aparato de Golgi es visto como una estructura
prominente, alcanzando 6 m de longitud, la anchura de 1 m, y la presentacin de 8 12
cisternas (Fig1), excepto cuando la clula est en divisin. El espacio luminal de los
sculos es estrecho y en el orden de 30 35 nm. La distancia que separa los sculos se
encuentra en el mismo orden de magnitud y, como consecuencia, el aparato de Golgi
presenta una apariencia compacta (Fig1).
Las cisternas presentan membranas fenestradas y poseen vesculas de varios
tipos a los bordes de todos los sculos. Sin embargo, los microtbulos se conectan a
Golgi y a la membrana plasmtica (Fig2), producto de reaccin indicativa de la presencia
de cido fosfatasa y en los lisosomas, que fueron vistos principalmente en la regin
posterior de las clulas.

Fig1. Muestra una vista de cerca de las laminillas de Golgi, y la Fig 2. Seccin delgada de
una preparacin de rutina que muestra un haz de microtbulos que interacta con el
aparato de Golgi (G) y la corteza celular. N, ncleo.
Todos estos acontecimientos implican la sntesis de protenas, y, en consecuencia
la va secretora de la clula. En este estudio han sido capaces de encontrar un etiquetado
de adhesinas de Golgi, en vesculas y la superficie celular, utilizando la tcnica
inmunoelectrnica3.

Por otra parte, en T. vaginalis, mantiene la estructura de Golgi durante la mitosis, y


las adhesinas se encuentran en la va secretora, parece que la secrecin y la exocitosis
son continuas durante el ciclo celular.
Igualmente el complejo de Golgi esta asociados con otras estructuras de la clula
como los filamentos parabasales, en estudios previos han propuesto que existen dos
filamentos parabasales (PF) en trichomonas, y cada uno se conoce para apoyar cada
dictyosome del aparato de Golgi, el conjunto forma el llamado aparato de parabasales (fig
3)1,3.
En el presente estudio nos han demostrado, por primera vez, una conexin
estructural entre la primera cisterna de Golgi y esta estructura peridica. Encontramos que
la mayor parte de la regin cis del complejo de Golgi es siempre asociado con los
filamentos parabasales y es tambin en estrecha proximidad con el retculo endoplsmico.
Sin embargo, este fsico de conexin es importante, ya que proporciona un medio por el
cual el orgnulo permanece interconectado a los cuerpos basales. Teniendo en cuenta
esta conexin, ayuda a entender por qu la migracin de Golgi sigue la migracin de los
cuerpos basales y flagelos durante la mitosis4,5.

Fig3. Muestra dos complejos de Golgi pequeos (G) pero la clula se encuentran todava
en una fase premitotica. N, ncleo.

Referencia Bibliografa
1.
Honigberg, M. B., Brugerolle,G. (1990): Structure. In: B. M. Honigberg (ed.):
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5.
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the Trichomonas vaginalis cell cycle. J. Parasitol. 85, 203 207.

Ciclo de Divisin Celular

Durante la fase de sntesis del ciclo celular, la clula duplica todos los
componentes esquelticos y orgnulos, incluyendo los centros de organizacin de los
microtbulos, que estn situados por debajo de los cuerpos basales. En el inicio de la
mitosis (Fig1), cada citoplasto duplicado, que se encuentra al lado del otro, sufre una
progresiva migracin durante el curso del huso mittico formacin/alargamiento hasta la
telofase. Sin embargo, se conserva la envoltura nuclear, realizndose una mitosis
extranuclear cerrada denominada criptopleuromitosis1, la cual se efecta en 45 min2.
Durante la interfase, slo hay una cinta de Golgi en T. vaginalis, mientras que en el
inicio de la mitosis se encuentran dos cintas de Golgi, siempre cerca del ncleo y
siguiendo durante todas las fases del proceso de divisin. Algunos autores3 creen que T.
vaginalis presenta dos complejos de Golgi. En nuestra opinin, los anlisis realizados por
estos autores se realizaron con clulas en el proceso de divisin o en clulas interfsicos
G2/S.

Fig. 1. Vista general de una seccin delgada rutina longitudinal. Esta clula est en el inicio de la
mitosis: dos axostilos (A), dos flagelos recurrente (RF), dos costa (C) y dos puntas axostilo (puntas
de flecha en regin posterior). Obsrvese la presencia de dos pequeos Golgi (G) en la regin
anterior de la clula. Los flagelos anteriores (F), varios hidrogenosomas (H), los lisosomas (L) y el
ncleo (N) son tambin visto. Bar: 1 mm.

El aparato de Golgi no se fragmenta durante la mitosis, sino ms bien parece


alargarse; y una vez que tiene al menos un tamao duplicado, se separa en dos, en un
proceso nombrado Golgikinesis.
Por otra parte, se ha observado que durante el curso del ciclo celular el aparato de
Golgi aparece alargado (Fig2), mientras se mantiene el usual nmero de cisternas.
Despus de la elongacin de Golgi, alcanza 4,7 6,0 mm, la pila se someti a la fisin
medial progresiva de cada cisternas comenzando con la adyacente a la clula superficie,
terminando con el cis de cisternas, cerca del retculo endoplsmico.
Durante el proceso mittico cada cinta de Golgi migra junto con la porcin anterior
de cada axostilo, situado entre los cuerpos basales y la envoltura nuclear. Durante el
curso de la mitosis, cada cinta se alarga gradualmente, llegando a 3,6 mm en la telofase,
cuando cada clula hija presenta una sola cinta de Golgi.

De acuerdo con un informe reciente4, trichomonas vaginalis despus del ciclo de


divisin celular, una clula hija retiene el aparato de Golgi y la otra tiene que sintetizar un
nuevo orgnulo como se produce con el axostilo.

Fig. 2. Tamao de Golgi durante las fases del ciclo celular. Cien clulas fueron tomadas de
diferentes fases en la mitosis y la interfase. El tamao de la cinta de Golgi se midi y la fase se
estableci de acuerdo con los parmetros previamente publicados 5. Tenga en cuenta que el
aparato de Golgi crece gradualmente durante el curso del ciclo celular.

En este sentido, orgnulos esqueleticos asociado, tal como el aparato de Golgi,


sigue la divisin del citoesqueleto durante la fase de sntesis y durante la migracin, la
elongacin y la separacin de la hija las clulas durante la mitosis, manteniendo as un
nuevo punto de vista sobre el comportamiento de estas estructuras celulares durante la
divisin celular (fig3).

Fig. 3. Modelo informtico SYNU 3D que muestra una vista superior de un polo durante
prometafase en la mitosis. El aparato de Golgi (rosa) es situado entre el compartimento
nuclear (amarillo) y los cuerpos basales/flagelo recurrente (verde). poliribosomas
dispersos (partculas circulares blancos), una porcin de la membrana celular (gris), parte
de los filamentos sigmoidales (azul), y tambin algunos de los microtbulos se muestran
centros organizadores (naranja).

Referencia Bibliogrfica
1

Gonzlez Lzaro M. (2001). El ncleo de clulas HeLa: Posible fuente de nucletidos


para Trichomonas vaginalis. Tesis de Licenciatura, Departamento de Biologa. Facultad
de Ciencias. Universidad Nacional Autnoma de Mxico. (UNAM). Mxico D.F., Mxico.

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Honigberg, M. B., Brugerolle,G. (1990): Structure. In: B. M. Honigberg (ed.): Trichomonads


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flagella in the division process of Tritrichomonas foetus and Trichomonas vaginalis. J.
Euk. Microbiol. 47, 481 492.

Mitocondria: Hidrogenosoma
Energa del Metabolismo, Protozoos sin Mitocondrias

El hidrogenosoma constituye un compartimiento separado del metabolismo


energtico en trichomonas vaginalis, como las mitocondrias pueden realizar en la mayora
de otros eucariotas. Albergan una secuencia metablica clave, la produccin de ATP a
partir de piruvato a acetato ligado a la produccin de H 2.1,2 (Figura1). Las funciones
hydrogenosomal confieren una ventaja energtica para la clula3. Sin embargo, en
trichomonas vaginalis, el metabolismo es hydrogenosomal no es absolutamente
indispensable.

Figura 1: Mapa del metabolismo hydrogenosomal en T. vaginalis. 1. El piruvato: ferredoxina


oxidorreductasa, 2. malato deshidrogenasa (descarboxilacin, NAD), 3. NAD: ferredoxina
oxidorreductasa, 4. H2: oxidorreductasa ferredoxina, 5. etilo: succinato CoA-transferasa, 6.
tiocinasa succinato. Fd: ferredoxina. Las flechas indican las direcciones fisiolgicas asumidas en
vivo. Discontinuas flechas indican una transferencia de nucletidos ciclasa postulado. 4

El hidrogenosoma es una estructura esfricas, aprox. de 0.5-1 m de dimetro, en


condiciones de estrs puede llegar a 2 m de dimetro, y est rodeado por una envoltura,
contiene una matriz granular y, a menudo un ncleo denso en electrones.
En flagelados como T. vaginalis la envoltura se compone de dos membranas
estrechamente superpuestas5, pero la membrana interior no forma crestas.
El principal papel de estos orgnulos se encuentra en la conversin de piruvato en
acetato. Esta conversin se acompaa de fosforilacin a nivel de sustrato y la
transferencia de electrones, ya sea a los protones de 02.6
El hidrogenosoma difiere de la mitocondria en propiedades fundamentales, sin
embargo, ambos orgnulos utilizan piruvato como un importante sustrato y forma acetilCoA. Los mecanismos implicados y el destino de los electrones generados son diferentes.
Protozoos anaerbicos como T. vaginalis, en sus hidrogenosomas, carecen de un nmero
de los principales componentes y funciones mitocondriales, incluyendo el ciclo del cido
tricarboxlico, citocromos, citocromo oxidasa, y transporte ligado a la fosforilacin. La
ausencia de algunos de estos componentes se confirm en hidrogenosomas aislados6.
Las actividades enzimticas que representan los procesos metablicos se han
detectado en la vagina; en T. vaginalis se evidencia sn-glicerol, 3-fosfato deshidrogenasa,
la superxido dismutasa y la Ciclasa quinasa7.

Los datos sobre la respiracin indican la presencia de una actividad NADH


oxidasa8 y posiblemente una oxidasa terminal de la naturaleza desconocida6.
El metabolismo de hidrogenosomas aislados se ha estudiado poco. Ellos utilizan
piruvato con la generacin de H2 (T. vaginalis)4, para convertir el piruvato
cuantitativamente a acetato, malato, Co2, y H24 (Figura 1), el acetato como producto
principal. En trichomonas vaginalis este proceso est acompaado por la fosforilacin de
ADP + Pi a partir de ATP.5 El acetato, como producto principal de hidrogenosomas, es un
producto final de las clulas vivas en condiciones anaerbicas y aerbicas.8

Hidrogenosoma

Referencia Bibliogrfica

1. Lindmark, D. G., Miiller, M. 1973. Hydrogenosome, a cytoplasmic organelle of the


anaerobic flagellate, Tritrichomonasfoetus, and its role in pyruvate metabolism. J. Bioi.
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hydrogmosome of Tritrichomonas foetus. J. Protozool. 30:422-25
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properties of Trichomonas vaginalis resistant to metronidazole under anaerobic conditions.
Acta Univ. Carol. Bioi. In press

Ncleo

Secuencia del Genoma de la Transmisin Sexual del Patgeno Trichomonas


vaginalis

El ncleo de T. vaginalis se encuentra en su porcin anterior, como en otros


eucariotas, est rodeado por una envoltura nuclear porosa y por una estructura en forma
de barra, llamada axostilo.1 El DNA del parsito tiene un peso molecular mayor de 23.5 kb
y est organizado en 6 pares de cromosomas. 2 El genoma de T. vaginalis es una
secuencia repetitiva de genes.
El conjunto bsico de ~60.000 genes codificadores de protenas, dotan a T.
vaginalis con una de las capacidades de codificacin ms altos entre los eucariotas. Los
intrones se identificaron en 65 genes3. El ARN de transferencia (ARNt) para todos los 20
aminocidos que se encontraron, y ~250 unidades DNA ribosomal (rDNA) fueron
localizados en uno de los seis cromosomas (Fig. 1).
Curiosamente, la maquinaria de transcripcin eucaritica de T. vaginalis parece
ms metazoos que protista. La presencia de un Dicer como gen, dos genes Argonaute y
41 genes DEADDEAH transcripcionalmente activo sugiere la existencia de un ARN de
interferencia (RNAi) (fig. S1). La identificacin de estos componentes plantea la
posibilidad de utilizar la tecnologa de ARNi para manipular la expresin gnica T.
vaginalis.

Fig. 1. Cariotipo y fluorescentes hibridacin in situ (FISH) anlisis de T. vaginalis cromosomas. (A)
Metafase cromosoma calabazas de T. vaginalis revelan seis cromosomas (I a VI). (B) el anlisis
FISH utilizando un 18S sonda rDNA muestra que todo ~250 unidades de ADNr localizar a un solo
cromosoma. (C) En contraste, el Tvmar1 elemento de transposicin se dispersa en todo el
genoma.

Las funciones de estos genes son diversas, afecta a varias vas metablicas e
influyen en la evolucin de este parasito. La mayora (65%) de los 152 LGT genes que
codifican enzimas metablicas estn involucrados en el metabolismo de los carbohidratos
o aminocidos.
El gran tamao del genoma, de alta repeticin de copias, bajo polimorfismo de
repeticin, y la evidencia de expansin de la repeticin sugieren que T. vaginalis ha
sufrido un aumento muy reciente y sustancial en el genoma tamao.
En el metabolismo se identifico una va de biosntesis novo de cistena a travs de
cistena sintasa, un candidato LGT 4, y genes que codifican enzimas implicadas en el
metabolismo de la metionina, incluyendo su posible regeneracin. En T. vaginalis existen

genes que codifican una amplia gama de molculas de defensa, tales como las
superxido dismutasas, reductasas de tiorredoxina y peroxirredoxinas, tambin demuestra
una amplia gama de capacidades de transporte, facilitado por la expansin de las familias
transportadoras, tales como los de azcar y aminocidos.
Familias de genes amplificados masivo tambin se producen en kinome del
parsito, que comprende ~880 genes que codifican quinasas distintas protenas (ePKs) y
~40 protenas quinasas atpicos, lo que es uno de los mayores kinomes eucariotas
conocidos. El parsito tiene heterotrimeric protenas y componentes de la va activada por
mitgenos protena quinasa (MAPK), lo que sugiere mecanismos de transduccin de
seales semejantes a las levaduras de unin a nucletidos de guanina. Inusualmente, el
kinome contiene 124 genes de citoslica tirosina quinasa (TKL), pero carece por completo
del receptor serina/treonina ePKs de la familia TKL5.
Se identificaron homlogos de las protenas implicadas en la respuesta daan el
ADN y la reparacin, la reestructuracin de la cromatina, y la meiosis, el ltimo proceso no
se cree que se produce en el parsito. De los 29 genes meiticas bsicos encontrados,
varios son protenas de reparacin generales necesarios para la progresin meitica en
otros organismos6, y ocho son protenas meiosis especificas. Por lo tanto, T. vaginalis
contiene cualquiera de las reliquias evolutivos recientes de mquinas o de genes
funcionales en la recombinacin meitica en un ciclo sexual an no descrita.

Referencia bibliogrfica

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