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OBJETIVOS O PROPOSITOS
INTRODUCCIN
FUNDAMENTO TEORICO
En la naturaleza los microorganismos viven casi siempre en mezclas. No obstante para poder
determinar las caractersticas de microorganismos en particular, este debe ser aislado de un
cultivo puro. El procedimiento general consiste en usar un medio de cultivo y condiciones de
incubacin que estimulen el crecimiento que se desea y reduzca el crecimiento de los dems
componentes de la microbiota. Una vez que el organismo deseado ha aumentado en
cantidad, con respecto a otros, se purifica de modo que el cultivo contenga solo
microorganismos del tipo deseado, es decir cultivo axnico o puro.
El aislamiento se puede dar por las siguientes tcnicas:
MATERIALES Y REACTIVOS
MATERIALES Y EQUIPOS
CANTIDAD
SUSTANCIAS Y
REACTIVOS
CANTIDAD
2
2
3
3
Agar PDA
Agar Nutriente
Agar King B
Peptona universal
Para 250 ml
Para 250 ml
Para 250 ml
0,5 gr
Glicerina
De
acuerdo
al
requerimiento para
el agar King B
Pipetas
Pasteur
plsticas,
estriles
Pipetas de vidrio de 1ml
Asas redondas
Aguja de diseccin recta
Gradillas
Pipeteadores
Perlas de vidrio
Balanza
1
1
1
1
1
1
1 por el
curso
Nota: Es necesario contar con las cajas usadas en la prctica No 2. (Hongos y bacterias
crecidas.
Los estudiantes deben llevar una muestra de suelo frtil o compost con el fin de obtener
Pseudomonas fluorescens.
METODOLOGIA
Aislamiento de microorganismos por agotamiento y puncin
1. Desinfecte la superficie con papel absorbente y alcohol. Use guantes.
2. Encienda el mechero y disponga el material requerido.
3. Marque la colonia seleccionada para el aislamiento. Describa la colonia
macroscpicamente.
4. Marque la caja petri con agar nutriente y PDA teniendo en cuenta, nombre del medio,
fecha, cdigo de los estudiantes.
5. Siembre el Agar nutriente por medio por la tcnica de estriado agotamiento de la
muestra de la caja de Agar nutriente obtenida en la prctica anterior.
6. Lleve la caja sembrada a incubar de 24 a 48 horas a temperatura ambiente.
Preguntas de complementacion
Se tiene un cultivo mixto con bacilos Gram positivos endoesporulados y
bacilos Gram positivos no formadores de endosporas. Como podra aislar
el bacilo formador de endosporas? Consulte una metodologa para este
tipo de microorganismos.
Qu tipo de mciroorganismos es posible aislar en el medio King B.
Por qu se observan pigmentos de fluorescencia en el King B y que
microorganismos lo producen.
BIBLIOGRAFIA
Madigan, M., Martinko, J., Parker, J. 1997 Brock Biologia de los microorganismos.
Decima edicin. Prentice Hall, New Jersey.
Carrascal, A., Pez, A., Burbano, M.2003. Manual de laboratorio: Microbiologa de
alimentos. Ceja.
Manual de medios de cultivo Merck. Editorial Merck Alemana. 1994.