Enzimas microbianas

enzimas microbianas comerciales estn reemplazando cada vez catalizadores qumicos convencionales en muchos
industrial procesos. Las enzimas tienen varias ventajas sobre las catalizadores qumicos, incluyendo la capacidad de
funcionar bajo condiciones relativamente suaves de temperatura, pH y presin. Esto resulta en el consumo de menos
energa y por lo general hay ningn requisito para la corrosin caros equipos resistentes. Las enzimas son especficas,
a menudo estereoselectivas, catalizadores, que no producen no deseado subproductos. En consecuencia, hay menos
necesidad de extensa refinacin y purificacin del producto objetivo. Adems, en comparacin con los procesos
qumicos, enzimas basado procesos son "medio ambiente" como enzimas son eliminacin de residuos biodegradables
y hay menos asociados problemas. Ciertas enzimas no se limitan a ambientes acuosos y pueden operar en dos fases
sistemas de disolventes y en no acuoso-orgnica orgnica del agua medios de comunicacin, en particular los
disolventes hidrfobos. Operacin en tales condiciones a menudo pueden mejorar enzima el rendimiento,
especialmente en sustratos han limitado Solubilidad del agua. clasificacin de enzimas se basa en un sistema
originalmente establecido por la Comisin de Enzimas de la Internacional Unin de Bioqumica (1979). Hay seis clases
principales, agrupados de acuerdo con el tipo de reaccin catalizado: 1 oxidorreductasas (clase 1) catalizar la oxidacin
/ reduccin reacciones, la transferencia de tomos de hidrgeno, tomos de O o electrones; 2 transferasas (clase 2)
catalizan la transferencia de un grupo de una molcula a otra; 3 hidrolasas (clase 3) catalizan la hidrlisis, la escisin
de bonos mediante la adicin de una molcula de agua; 4 liasas (clase 4) catalizan bonos de divisin, que no sea a
travs de hidrlisis o la oxidacin; 5 isomerasas (clase 5) catalizan reordenamientos estructurales de las molculas; y
6 ligasas o sintetasas (clase 6) catalizan la formacin de nuevos bonos, por ejemplo, C-N, C-O, C-C y C-S, con
degradacin del ATP.
Cada enzima tiene un cdigo de cuatro cifras para la clase, subclase, etc. Por ejemplo, invertasa, una hidrolasa, se
clasifica como EC 3.2.1.26. clulas y esporas microbianas en suspensin o inmovilizados pueden emplearse como
biocatalizadores en algunos bioconversiones industriales, particularmente cuando coenzimas son necesarios. Sin
embargo, en muchos casos, esto tiene limitaciones porque: 1 las clulas de energa y recursos en el crecimiento de los
residuos " y / o actividades de mantenimiento; 2 reacciones secundarias pueden conducir a una reduccin en el
potencial rendimiento del producto objetivo; 3 condiciones para el crecimiento microbiano, cuando sea necesario,
pueden ser diferentes de las necesarias para una ptima la formacin de producto; y 4 pueden surgir dificultades en
el aislamiento y la purificacin del producto de las clulas o de fermentacin agotada medio. Para superar tales
problemas, el uso de parcialmente purificado 'mayor' preparaciones de enzimas microbianas es a menudo
recomendado numerosos y variados procesos industriales. En algunos casos, toda la fermentacin microbiana
convencional procesos pueden eventualmente ser sustituidos por multienzimtico sistemas que podran proporcionar
ms eficiente la utilizacin de sustratos, mayores rendimientos y mayor de productos uniformidad. Varios miles de
toneladas de enzimas comerciales son Actualmente se producen cada ao, los cuales tienen un valor en exceso de
1500 US $ millones. Unas enzimas animales y vegetales son utilizados, pero la mayora de las enzimas comerciales son
ahora obtenido a partir de fuentes microbianas. Muchos de estos son extracelular enzimas, y la mayora se derivan de
varias especies de Bacillus. Sus proteasas y amilasas son los ms ampliamente utilizados, y hay un particular, demanda
de las enzimas termoestables que son disponible de varios miembros de este gnero. La mayor proporcin de todas
las enzimas comerciales, algunos 34%, se utilizan como enzimas detergentes, 14% para los productos lcteos
relacionados utiliza, con el 12% para el procesamiento de almidn y 11% para aplicaciones textiles. El 29% restante se
divide entre una amplia gama de aplicaciones (Fig. 9.1 y en la tabla 9.1). Adems de su papel como auxiliares en los
procesos tradicionales, enzimas 'a granel' estn en el centro de muchos procesos novedosos y la innovacin
biotecnolgica contina su expansin la gama de aplicaciones. enzimas son normalmente a granel preparaciones
bastante crudo que se purifican solamente suficientemente para cumplir con los requisitos del cliente para la actividad
y estabilidad. A menudo contienen muchas otras enzimas,que en algunos casos son beneficiosos para la aplicacin
general actuacin.

Tabla 9.1 Aplicaciones de una gama de enzimas microbianas a granel

Las proteasas, en su mayora proteasas neutras o metaloproteasa de zinc a partir de especies de Aspergillus y Bacillus,
junto con algunas alcalina serina proteasas

(A) detergentes biolgicos, por ejemplo, la proteasa alcalina subtilisina EC 3.4.4.16 de Bacillus licheniformis y B. subtilis
(B) la modificacin de hornear-masa / el debilitamiento del gluten y el sabor mejora
(C) fabricacin de la cerveza, por ejemplo, 'Chillproofing' de cerveza para eliminar la neblina de protenas
(D) cebo de cuero y licitacin
(E) el queso fabricacin-coagulacin de la protena de la leche y la promocin de la maduracin, por ejemplo, una
proteasa asprtica (CE 3.4.23.6) a partir de especies de Rhizomucor y especies de Kluyveromyces recombinantes que
produce la quimosina de ternero. Aminopeptidasa de Lactococcus lactis se utilizan tambin para mejorar el desarrollo
del sabor
(F) enternecimiento de la carne y la retirada de carne de los huesos
(G) el control de sabor y produccin en productos alimenticios
(H) el tratamiento de residuos, por ejemplo, la recuperacin de la plata de las pelculas fotogrficas pasado
Las lipasas EC 3.1.1.3, principalmente de especies de Bacillus, Aspergillus, Rhizopus y Rhodotorula
(A) detergentes biolgicos, tambin disponible de Aspergillus oryzae recombinante que produce lipasa de Humicola
(B) la eliminacin de cuero procesado en grasa
(C) la produccin de compuestos de sabor y la aceleracin de la maduracin de los productos lcteos y crnicos
carbohidrasas
a-amilasa EC 3.2.1.1, en su mayora procede de especies de Aspergillus y Bacillus
(A) almidn de procesamiento en la licuefaccin de almidn en la produccin de jarabes de azcar
(B) de coccin parcial-degradacin del almidn en la modificacin de la harina y la generacin de azcares
fermentables, y para mejorar la corteza color
(C) hidrlisis de preparacin de almidn durante la preparacin del mosto
(D) detergentes biolgicos-almidn de eliminacin de manchas de comida
(e) los productos textiles de fabricacin-desencolado
b-amilasa EC 3.2.1.2 a partir de especies de Bacillus tales como B. polymyxa, y especies de Streptomyces y Rhizopus
(A) la produccin de jarabe de maltosa
(B) fermentacin del mosto cervecero-aumentando
Amiloglucosidasa (glucoamilasa) EC 3.2.1.3 a partir de Aspergillus niger y Rhizopus niveus
(A) la produccin de glucosa-completa sacarificacin del almidn de jarabe
(B) el color de la corteza del pan horneado-mejorado
(C) sacarificacin elaboracin de la cerveza-dextrina en la produccin de cerveza baja en carbohidratos
(D) vino y frutas jugo de extraccin de almidn
b-galactosidasa (lactasa) EC 3.2.1.23 de especies de Bacillus, Kluyveromyces y Candida
(A) jarabe de suero de leche de produccin-hidrlisis de la lactosa en glucosa y galactosa para dar mayor dulzura
(B) la leche y los productos lcteos sin lactosa procesamiento de reduccin / eliminacin para aquellos que son
intolerantes a la lactosa
(C) la fabricacin de helados, la prevencin de la textura 'arena' causada por cristales de lactosa

La glucosa isomerasa EC 5.3.1.5 a partir de especies de Actinoplanes, Arthrobacter y Streptomyces

(A) fabricacin de jarabes de alta fructosa como "conversin alta sweeteners'-glucosa en fructosa
Glucosa oxidasa EC 1.1.3.4 a partir de Aspergillus niger y Penicillium notatum
(A) antioxidante, que se utiliza a menudo junto con catalasa para eliminar el oxgeno de productos alimenticios
Inulinasa EC 3.2.1.7 de Aspergillus niger, especies de Candida y especies de Kluyveromyces
(A) el tratamiento de los tubrculos de pataca-hidrlisis de polifructanos y levanos
Invertasa EC 3.2.1.26 de especies de Saccharomyces y Kluyveromyces
(A) la produccin de dulces y confitera-licuefaccin de sacarosa, por ejemplo, chocolates suaves centrada
(B) azcar invertido conversin de la produccin-sacarosa en glucosa y fructosa
Pululanasa EC 3.2.1.41 de Klebsiella pneumoniae y Bacillus acidopullulyticus
(A) almidn de procesamiento utilizado para la desramificacin de almidn en la fabricacin de jarabe de azcar y
elaboracin de la cerveza
Las pectinasas (una mezcla de enzimas como la CE 3.2.1.15 poligalacturonasa, producidas por Aspergillus niger y
especies de Penicillium, a menudo por fermentacin-sustrato slido)
(A) la extraccin del zumo y aceite vegetal
(B) el zumo de fruta y vino aclaracin
(C) la fermentacin del grano de caf
Hemicelulasas y b-glucanasas / celulasas
b-glucanasas, por ejemplo, celulasas EC 3.2.1.4 a partir de Trichoderma reesei, Penicillium funiculosum,
Aureobasidium pullulans y Bacillus especies, y b-glucanasas especficas de Penicillium emersonii
(A) el zumo de fruta y la produccin y transformacin de las aceitunas
(B) la produccin de vino y la cerveza y el procesamiento de la hidrlisis de las encas b-glucano para mejorar las tasas
de filtracin
(C) de malteado velocidades modificacin de granos
(D) Produccin de tejidos-biopulido de fibras de celulosa
(E) el tratamiento de pulpa de madera
Hemicelulasas de las levaduras Cryptococcus y Trichosporon, por ejemplo, xilanasa EC 3.2.1.32
(A) de bicarbonato de pentosanasas se utilizan para alterar la consistencia de masa
(B) elaboracin de la cerveza
(c) los alimentos para animales
(d) nutracuticos
(E) el tratamiento de pulpa de madera
Varios enzimas y sus usos
Catalasa EC 1.11.1.6 de Aspergillus niger, Corynebacterium glutamicum y lysodeikticus Micrococcus
(a) blanqueo de tejidos
(B) la fabricacin del queso

Fitasa EC 3.1.3.8
(A) Adems de piensos para animales monogstricos, a fin de liberar fosfato del cido ftico, por ejemplo, de Pichia
recombinante angusta
La ureasa EC 3.5.1.5 Lactobacillus fermentum de
(A) la produccin de vino
(B) la fabricacin cermica, para mejorar la fabricacin y la calidad de la cermica moderna que son de importancia
para el equipo y las industrias aeronutica o para la ortopedia
Las enzimas en procesos de biotransformacin diverso
(A) La penicilina y cefalosporina acilasas (amilasas) EC 3.5.2.6, por ejemplo, Bacillus megaterium y Escherichia coli
penicilina productos acilasa de Pseudomonas y especies producen acilasa cefalosporina. Se utiliza para la conversin
de antibiticos para eliminar los grupos secundarios de penicilinas o cefalosporinas para formar cido 6aminopenicilnico o cido 7-aminocefalospornico, respectivamente, las molculas de base para la sntesis de
penicilinas semisintticas y cefalosporinas
(B) cido L-amino-acilasas EC 3.5.1.14 a partir de especies de Aspergillus, que se utiliza para la resolucin de los Laminocidos de la mezcla racmica acilada mezclas de D, mezclas de cido L-amino, por ejemplo, vase el captulo 10,
la produccin de L-lisina
(C) biotransformaciones de esteroides, por ejemplo, 11-b-hidroxilasa (monooxigenasa) EC 1.14.15.4 de Curvularia
lunata para la produccin de prednisolona a partir de 11 deoxycortisone (vase el Captulo 11)
Pequeas cantidades de preparados enzimticos 'bien' de alta pureza Tambin son necesarios para numerosas
aplicaciones. Estos incluyen papeles como agentes teraputicos, muchas de las los cuales son ahora productos
recombinantes (vase el Captulo 11), componentes de los alimentos y kits de pruebas de diagnstico mdico,
biosensores, como herramientas de investigacin y muchos otros propsitos (Tabla 9.2). Hay una demanda creciente
de enzimas finas utilizado en biologa molecular, en particular restriccin endonucleasas y polimerasas de ADN, por
ejemplo ADN polimerasa de Thermus aquaticus (Taq polimerasa de ADN) o Pyrococcus furiosus (Pfu ADN polimerasa).
Estas enzimas se utilizan en la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) para la amplificacin de fragmentos de ADN.
La purificacin de Taq nativa y recombinante de ADN polimerasa es se indica en la figura. 9,2, como un ejemplo de los
protocolos necesaria para suministrar una enzima altamente purificada. Mayora de los dems enzimas finos tambin
son intracelulares y se someten a altos niveles de purificacin, en particular los de clnica utilizar. Las enzimas que son
ms caros de producir, incluyendo muchas enzimas intracelulares microbianos, y los empleados en biosensores y
sistemas de pruebas analticas, son a menudo se usa en una forma inmovilizada. en la industria procesos (Tabla 9.3),
la inmovilizacin facilita el confinamiento y la recuperacin, y estas preparaciones de enzimas tener varias otras
caractersticas beneficiosas, incluyendo: 1 reutilizacin; 2 idoneidad para su aplicacin en continuo operaciones; 3 su
producto es la enzima libre, por lo tanto, ms procesamiento para eliminar o inactivar la enzima es no requerido; 4
estabilidad de la enzima mejorada; y 5 reduccin de los problemas de eliminacin de efluentes. Las enzimas pueden
inmovilizarse por unin a travs adsorcin fsica, enlace inico o enlace covalente, para inertizar los materiales de
soporte slidos inorgnicos u orgnicos, tal como nailon, bentonita, celulosa y dextrano. Alternativamente, pueden
ser microencapsuladas dentro de membranas semipermeables, atrapadas dentro de geles o fibras, y enzimas
intracelulares pueden inmovilizarse dentro de sus clulas productoras.
La produccin de enzimas microbianas comercial
Enzimas microbianas se producen predominantemente por sumergida fermentaciones, aunque algunos-sustrato
slido se utilizan las fermentaciones, en particular para la produccin de enzimas extracelulares fngicas (vase el
captulo 6, Solid substrate fermentaciones). De hecho, la primera comercial preparacin de enzima microbiana fue
producido a travs de solidsubstrate fermentacin. Esta enzima, 'Takadiastase', una amilasa fngica, fue producido
mediante el cultivo de Aspergillus oryzae en el arroz hmedo o salvado de trigo. El proceso fue inicialmente
desarrollado por el Dr. Jokichi Takamine y patentado en los EE.UU. en 1884. Sin embargo, la produccin a gran escala
de enzimas microbianas en general no fue posible hasta despus de la mitad del siglo 20a. Se hizo posible slo despus
de que las vastas mejoras en fermentacin sumergida tecnologa que sigui el desarrollo de la penicilina

fermentaciones en la dcada de 1940. La mayora de las enzimas industriales son productos de procesos por lotes y
unos pocos se producen actualmente a travs de la fermentacin continua. Los fermentadores para mayor produccin
de enzimas son de hasta 100m3 de capacidad, pero enzimas finas pueden ser producidos en escalas ms pequeas de
unos pocos cien litros o menos. La mayora de los fermentadores se agitan tanque reactores que son operados en
condiciones aspticas y utilizar bajo costo medios complejos indefinido. Al igual que en el desarrollo de cualquier
proceso de fermentacin, los procesos de produccin de la enzima tradicionalmente comienzan con la bsqueda de
un organismo productor adecuado. Uso de GRAS cotizada (generalmente considerado como seguro) organismos
(Tabla 4.2) es una consideracin importante para las enzimas que se van a utilizar en los alimentos o aplicaciones
mdicas. UN programa de la deteccin de microorganismos y la seleccin es necesarios, para determinar propiedades
de las enzimas, tales como la ptima pH y resistencia al calor, y el examen de la capacidad de secretar la enzima diana.
Las enzimas de termfilos generalmente proporcionan varias ventajas. Ellos son termoestables, capaces de operar a
temperaturas ms altas que las enzimas de mesfilos, aumentando as la difusin tasas y solubilidad, y la disminucin
tanto de la viscosidad y el riesgo de contaminacin microbiana. La fermentacin sistema y condiciones para la
produccin mxima de la enzima por unidad de biomasa, usando carbn barato y materiales de alimentacin de
nitrgeno, a continuacin, deben ser determinados. Aparte de la productividad de la enzima, una consideracin
adicional es la estabilidad de la enzima, que puede influir en el tiempo, y las operaciones utilizadas en, el
procesamiento aguas abajo.
Los nivel de purificacin aplicado vara considerablemente dependiendo de si la enzima es intracelular o extracelular,
y de su uso final. procesamiento aguas abajo implica separacin, purificacin, estabilizacin y conservacin (figura
9.3;. Vase tambin el Captulo 7 para mtodos especficos de la purificacin de protenas). mejora de las cepas se
puede intentar para promover mejorar la productividad de la enzima. En el pasado, esto tiene a menudo ciclos
involucrados de mutagnesis y seleccin al azar. Sin embargo, otras estrategias estn ahora disponibles tanto para el
organismo y la ingeniera de protenas. Objetivos de mejora a menudo incluyen el aumento de la eficacia de secrecin
para enzimas extracelulares y superacin del organismo de propios mecanismos de regulacin. Este ltimo puede
implicar intentos para aliviar la represin catablica, un regulador comn mecanismo para muchas enzimas
hidrolticas. Otro mejoras pueden lograrse mediante el aumento de Mrna vida media y el aumento de la dosis de genes
a travs de cromosmica amplificacin o por amplificacin del plsmido, si la enzima es el plsmido codificado. Los
objetivos para la enzima (protena) la ingeniera son la mejora de la actividad enzimtica, la mejora estabilidad, pH
ptimo alterado o tolerancia a la temperatura, especificidad modificada y mejoras generales a su rendimiento
industrial. Sin embargo, tales cambios implicar la manipulacin de los componentes de aminocidos especficos y
dependen de un conocimiento previo de la secuencia de aminocidos de la protena. Hoy en da, si una enzima til se
identifica en un microorganismo, vegetal o animal, que en s misma es difcil de cultivar, o si se sabe poco de su
fisiologa y la bioqumica, otras estrategias para la produccin comercial puede ser adoptado. En lugar de proceder
con amplia programas de investigacin y desarrollo para facilitar la produccin de la enzima por el productor natural
de organismo, el gen estructural para la enzima puede ser se transfiri a un seleccionado, fcilmente cultivada,
"anfitrin" microorganismo, junto con mecanismos adecuados para el control. La ingeniera gentica ahora hace
posible la la expresin del gen que codifica para casi cualquier enzima, sin sea cual sea su origen. Esto permite a los
fabricantes de enzimas para desarrollar rpidamente un proceso para la produccin de grandes cantidades de la
enzima.
La expresin en los organismos enumerados-GRAS ofrece ventajas obvias. Los principales candidatos para este rol son
especies dentro de tres gneros de microorganismos, a saber, Bacillus, Aspergillus y Saccharomyces. Su la biologa se
conoce bien y que han demostrado ser seguro de manejar, rpido para crecer y puede producir altos rendimientos de
enzimas, muchas de las cuales pueden ser excretados en la medio de fermentacin. Una ventaja adicional es que el
medio y las condiciones en las que crecen y llevar a cabo bien son ya conocidos, reduciendo as al mnimo ms
experimentacin costosa para optimizar la fermentacin condiciones
Enzimas detergentes
La incorporacin de enzimas en detergentes ofrece varios beneficios. El ahorro de energa se hacen como una menor
temperatura de lavado se puede utilizar y los niveles de menos deseable productos qumicos de detergentes pueden
ser reducidos. A diferencia de otros detergentes componentes, las enzimas no tienen un impacto negativo en los
procesos de tratamiento de aguas residuales. Son totalmentey rpidamente se biodegrada para no dejar residuos

nocivos. En consecuencia, son ambientalmente seguros y no son una riesgo para la vida acutica. El primer uso
comercial de las enzimas microbianas en los detergentes Fue en 1959. Un qumico Jaag suizo, que trabajaba para la
empresa Gebrder detergente Schnyder, desarrollado un nuevo producto que contiene una proteasa bacteriana, que
sustituy a la tripsina animal que previamente haba han incorporado en estos productos detergentes. De este punto
se hizo un uso cada vez mayor de microbiana enzimas en detergentes. En la dcada de 1960, hubo ms mejoras a
travs de la introduccin de las proteasas activa a pH alcalino. Eran relativamente poco afectada por otros
componentes del detergente en polvo y funcionado en las temperaturas de lavado deseados. Un ejemplo bien
conocido es la subtilisina, una proteasa de serina bacteriana alcalina de Bacillus licheniformis y B. subtilis, que se utiliza
ampliamente en detergentes para ropa en los niveles de 0.015- 0,025% (w / w). Esta enzima ha sido diseado para
mejorar las caractersticas de pH y temperatura, y reducir sensibilidad al perxido. Las proteasas no son las nicas
enzimas utilizadas en los detergentes; Desde finales de 1980, amilasas y lipasas han sido disponible para su
incorporacin, por ejemplo, Lipolase de Novo Nordisk. Lipolase fue la primera enzima detergente para ser producido
a travs de tecnologa de ADN recombinante. El gen de la lipasa se aisl de una cepa del filamentoso hongo Humicola
y despus se transfirieron a Aspergillus oryzae, que se cultiva ms fcilmente en fermentaciones sumergidas. grasos
superiores digestin cida enzimas ahora se han descubierto, tal como una cutinasa de Fusarium solani, lo que
naturalmente se degrada la mezcla de cidos grasos que forman cutcula. El gen para esta enzima ha sido transferida
a Saccharomyces cerevisiae y la produccin comercial est siendo examinado. enzimas de procesamiento de almidn
y relacionados carbohidrasas enzimas microbianas han demostrado ser de gran valor en el procesamiento de almidn,
un polisacrido compuesto de amilosa (lineal a-1,4-ligado unidades de glucosa) y amilopectina (Polmero ramificado
tanto con un 1,4 y un 1,6 vnculos). a-amilasa (glucanohidrolasa 1,4-a-D-glucano) es uno de los ms importantes de
stos industrial enzimas. Este endo-enzima acta al azar en un-1,4vnculos, y en ltima instancia genera glucosa,
maltosa y maltotriosa unidades. Tambin puede catalizar la escisin de interior a-1,4 vnculos en glucgeno y
oligosacridos. Desde la dcada de 1950, amilasas fngicas se han utilizado para la fabricacin de jarabes de azcar
que contienen mezclas especficas de los azcares que no podan ser producidos por convencional hidrlisis cida del
almidn. Adems, a-amilasas son empleado en varias industrias, en particular elaboracin de la cerveza y hornear,
donde la licuefaccin de almidn y dextrina hidrlisis son requeridos (Tabla 9.1). Tambin son secretadas por muchos
otros microorganismos, incluyendo bacterias y algunas levaduras. Los a-amilasas termoestables a partir de Bacillus
especies, por ejemplo, B. licheniformis, han demostrado ser especialmente til. Otro xito ha sido amiloglucosidasa
(glucoamilasa) de Aspergillus niger y Rhizopus especies, que aparecieron por primera vez a principios de 1960. Esta
enzima puede romper por completo el almidn y dextrinas en glucosa. Dentro de unos pocos aos de su introduccin,
casi toda la produccin de glucosa convencional a travs hidrlisis cida fue reemplazado por procesos basados en
enzimas, debido a la mayor rendimiento, mayor grado de pureza y ms fcil cristalizacin del producto. El proceso fue
ms mejorado mediante el uso bacteriana altamente termoestable amilasa en almidn de pretratamiento
(licuefaccin). isomerasa de glucosa tambin ha sido un xito notable en la industria del procesamiento del almidn.
Esta enzima se puede obtener de muchas bacterias, incluyendo especies de Bacillus y Streptomyces, y por lo general
se inmoviliza para su uso en la conversin de glucosa a fructosa. El producto, donde se completa la conversin a la
fructosa, tiene el mismo valor calorfico como la glucosa, pero su efecto edulcorante es de aproximadamente dos veces
ms alta. glucosa sustrato es normalmente derivados de almidn de maz hidrolizado (vase ms arriba), y a
continuacin, se convierte en una mezcla de glucosa y fructosa por glucosa isomerasa. rendimientos de conversin
son prcticos en el gama de 40 a 50% y los productos se denomina Jarabe de maz de alta fructosa '(JMAF) o' isosyrup
'. Fructosa la concentracin se puede aumentar a 55% en cromatogrfico enriquecimiento. Alternativamente, la
fructosa puede ahora ser separado de la mezcla de glucosa-fructosa y la fraccin de glucosa restante se isomeriza para
producir un producto final combinada que contiene hasta 80% fructosa. Estos jarabes, derivados de almidn, son algo
ms barato que la sacarosa de la caa o de remolacha fuentes, pero tienen el mismo poder edulcorante. Por
consiguiente, se han convertido en los principales ingredientes alimentarios, en particular en Amrica del Norte, y la
produccin anual de HFCSs es ahora de ms de 8 109 kg. Invertasa (b-fructofuranosidasa) fue la primera enzima a
ser inmovilizado para su uso a escala industrial. Era desarrollado en el Reino Unido por la Tate y Lyle durante la primera
1940 para la produccin de jarabe. La conversin de sacarosa a la glucosa y la fructosa usando este invertasa
inmovilizada reemplazar a los mtodos de hidrlisis de cido convencionales. Esta enzima se prepar originalmente
de autolisado de S. cerevisiae preparativos, que se ajustaron a pH 4,7, clarificado por filtracin a travs de sulfato de
calcio y luego adsorbido sobre carbn animal. ahora tambin se obtiene invertasa de otras levaduras u hongos
filamentosos, por ejemplo, A. niger y A. oryzae. Aparte de la produccin de jarabe, se emplea en la produccin de
confitera. Por ejemplo, softcentred bombones se preparan mediante la adopcin de un slido sucrosa relleno a base,

que contiene algo de la invertasa, y recubrimiento con chocolate. Dentro de 2 semanas se convierte en el centro
convertido en un jarabe de fructosa / glucosa. La lactasa (b-galactosidasa) se emplea en varios industriales procesos
que requieren la hidrlisis de la lactosa de la leche, en el que el disacrido est presente a una concentracin de 4,7%
(w / v). La hidrlisis de la lactosa en glucosa y galactosa se realiza en la leche y la leche productos para bebs que son
intolerantes a la lactosa, y en las regiones del mundo donde una gran proporcin de la poblacin adulta exhibicin
intolerancia a la lactosa, por ejemplo, regiones de frica y Asia Sudoriental. hidrlisis de la lactosa Tambin es til en
la fabricacin de productos tales como helado, como la baja solubilidad de este disacrido conduce a la formacin de
cristales que pueden dar una desagradable textura arenosa. Adems, su conversin en glucosa y galactosa aumenta
el dulzor relativo en alrededor cudruple. lactasa comercial se obtiene a partir de Kluyveromyces marxianus
(anteriormente K. fragilis), A. niger o A. oryzae. Las enzimas de la levadura tienen pH ptimos de 6,0 a 7,0, mientras
las enzimas de Aspergillus tienen ptimos tan bajo como pH 3.0-4.0. Estas enzimas se pueden utilizar libre o
inmovilizada, siendo esta ltima particularmente til para suero tratamiento. enzimas de la levadura se han
inmovilizado por incorporacin en fibras de acetato de celulosa y el Aspergillus enzimas se han inmovilizado en 0,5
mm dimetro de slice porosa para su uso en reactores de lecho fijo. Las enzimas en la produccin de queso
preparaciones de cuajo de los estmagos de terneros, corderos y los nios se han utilizado en la produccin de queso
durante miles de aos. Estos cuajos contienen la enzima renina (Quimosina, una proteasa asprtico), que realiza
limitado proteolisis de protenas de la leche (casena) para formar cuajada en el inicio de la produccin de queso (vase
el Captulo 12, fermentaciones lcteos). savia de la figura, que contiene la enzima proteoltica ficina, a veces se ha
utilizado para el mismo propsito, pero muchas otras proteasas llevar a cabo demasiado protelisis.
Cuajos de origen animal, sobre todo a partir de terneros, predominaron en la fabricacin de queso, hasta la dcada de
1960 cuando un aumento en la produccin de queso coincidi con una escasez de disponible cuajo animal. proteasas
fngicas especficas, que tienen propiedades muy similares a la pantorrilla quimosina, a continuacin, sirven para
hacer cuajos microbianos, tales como proteasas de Rhizomucor miehei y R. pusillus. Esta super el dficit y ha facilitado
la produccin de los llamados quesos "vegetariano". Algunos enzima microbiana preparaciones tambin son ms
sensibles a la temperatura (Termolbiles) de cuajo de ternera, que es til en ciertas quesera procesos. Ms
recientemente, el gen de la quimosina de ternera se ha introducido en varios microorganismos, incluyendo E. coli, K.
lactis, Aspergillus nidulans y A. niger var. awamori. Estos microorganismos genticamente modificados son capaces de
expresar y secretar la enzima. Recombinante preparaciones de quimosina ahora tienen la aprobacin para su uso
como aditivos alimentarios en ms de 20 pases. Animal y microbiana quimosinas (que constituye aproximadamente
un tercio de la mercado) se han combinado las ventas mundiales un valor de ms de $ 75 millones. lipasas microbianas
tambin se utilizan en los productos lcteos productos, especialmente quesos, para la hidrlisis de grasas steres de
cido para acelerar el desarrollo del sabor. Las enzimas en la produccin de jugo de la planta Varias enzimas
microbianas se emplean en jugo de fruta procesamiento, pero probablemente el ms importante son pectinasas. Estos
adyuvantes de procesamiento se producen a menudo por -Sustrato slido fermentacin de A. niger o Penicillium
especies. Las frutas y bayas contienen cantidades variables de pectina, que acta como una capa de unin entre las
clulas de plantas para mantener las paredes celulares adyacentes. La pectina es un heteropolmero de cido
galacturnico, steres metlicos de galacturnico cido y otros residuos de azcar. En el jugo de la planta produccin,
parte de esta pectina se extrae durante prensado. Se produce un aumento de la viscosidad zumo, lo que lleva a
dificultades en la obtencin de rendimientos de zumo ptimas, y en la clarificacin del jugo y la filtracin. Estos
problemas pueden ser superar mediante la adicin de preparaciones de pectinasa a la fruta la pulpa antes de pulsar.
se utiliza tratamiento con enzimas similares para aumentar el rendimiento de aceites de pulpa de la aceituna, fruto de
la palma y la carne de coco. El 'pectinasa' comercial no es una enzima, pero es por lo general un complejo cctel de
enzimas (esterasas de pectina de metilo, poligalacturonasas y pectina liasas) capaces de atacar a una variedad de
bonos en correspondientemente diversa molculas de pectina. Las composiciones de comercial preparaciones de
pectinasa varan considerablemente en las proporciones de estos diferentes enzimas. pectinasas son hongos Tambin
disponibles que permanecen activos en los jugos muy cidos de frutos ctricos, en el que el pH puede ser tan bajo
como 2,2-2,8. Se pueden usar en la descamacin enzimtica de ctricos fruta para la industria conservera. El araban
polisacrido, un polmero de la pentosa arabinosa, es tambin un componente importante de la clula de la fruta
paredes. Al igual que la pectina, a menudo se extrae durante el prensado de algunas frutas, especialmente peras. Esto
puede conducir a la formacin de turbidez, pero ahora se puede eliminar mediante el uso comercial arabanases.
Adems, algunos extractos, tales como jugo de manzana, contener almidn, que debe ser degradado para producir
clara zumos y concentrados. Esto se logra mediante la adicin de amilasas, junto con la pectinasa, durante

despectinizacin del jugo. En la elaboracin del vino, enzimas comerciales se utilizan para varios propsitos, as como
para la extraccin de jugo. para el rojo vinos, la extraccin del color de las pieles de la uva durante prensado puede
promoverse mediante la adicin de comercial celulasas, por ejemplo, a partir del hongo Trichoderma reesei. En
Adems, las glucosidasas pueden emplearse para hidrolizar terpenilo glucsidos, la liberacin de los terpenos que son
importantes constituyentes del ramo vino. vinos preparados a partir de uvas autorizados a someterse a ataque por el
hongo Botrytis cinerea antes de la cosecha ( "podredumbre noble") son a menudo difcil de aclarar y filtro, debido a la
presencia de hongos b-glucanos. Estos polmeros pueden ser degradados por la adicin de una microbiana especfica
b-glucanasa al vino (vase tambin Captulo 12, la elaboracin de cerveza). Las frutas ctricas, como el pomelo y las
naranjas, las amargas contienen los flavonoides de frutas de sabor amargo llamada naringina. La amargura de los
productos derivados de estos frutos se puede ajustar usando naringinasa (a-ramnosidasa + b-glucosidasa) de A. niger.
Se convierte primero a naringina prunina el compuesto menos amargo, luego a no amargo naringenina. El nivel de
hidrlisis se puede controlar naringina mediante la regulacin de la velocidad de flujo de zumo de fruta a travs de
una columna de naringinasa inmovilizado. La glucosa oxidasa de A. niger o especies de Penicillium, a menudo junto
con la catalasa, se pueden emplear para eliminar oxgeno molecular a partir de vino, cerveza, zumos de fruta y
suavebebidas. Esto evita la oxidacin potencialmente perjudicial que de otra manera afecta a la calidad del producto.

Las enzimas en la fabricacin de textiles

Las enzimas se utilizan cada vez ms en el tratamiento de los textiles para el acabado de telas y prendas de vestir,
especialmente para el desencolado, biopulido y lavado de mezclilla. Antes de tejer telas de algodn o mezclas de
algodn y fibras sintticas, los hilos se refuerzan con un adhesivo (denominado "tamao") para evitar la rotura de hilos
de la urdimbre. El tamao puede estar compuesto de almidn, derivados de almidn, goma vegetal y celulosa soluble
en agua derivados, tales como metil- y carboximetilcelulosa. Antes de la tincin, blanqueo y de impresin, el tamao
debe ser retirado de la tela. Esto tiene previamente ha logrado mediante tratamiento con cidos, lcalis y Los agentes
oxidantes que pueden daar las fibras. Por consiguiente, desencolado enzimtico con amilasas o celulasas es ahora
ampliamente utilizado, ya que no son corrosivos y producen no hay residuos de efluentes nocivos. Las celulasas
tambin se emplean en algodn bio-pulido y de otras fibras de celulosa para producir telas con una ms suave y ms
brillante apariencia. procesos similares el uso de proteasas microbianas se han desarrollado para el tratamiento de
fibras de lana, que se componen de queratina. El tratamiento de prendas de denim para darle un aspecto desgastado
antes la venta se denomina "lavado a la piedra '. Tradicionalmente, esto se ha logrado por lavado de las prendas de
vestir en un movimiento de rotacin lavadora con piedras pmez. Celulasas ahora se utilizan para acelerar la abrasin
y ayudar al aflojamiento del colorante ndigo. Este 'bio-lavado a la piedra' es menor daar a las prendas, reduce el
desgaste de las mquinas y genera menos polvo de piedra pmez. Las enzimas en la fabricacin de cuero Las proteasas
y lipasas ahora se utilizan ampliamente en la procesamiento de cueros y pieles. Estas enzimas son ms fciles de usar,
ms agradable para manejar y ms seguro que la dura productos qumicos que se emplearon previamente. su ms
aplicaciones importantes estn en remojo, pelambre, desengrasado y cebo. El remojo es la primera operacin
importante de tratamiento del cuero. Aparte de la limpieza cueros y pieles mediante la eliminacin de los desechos
derivados de la sangre, carne, la grasa y el estircol, que les rehidrata. Las proteasas mejoran absorcin de agua
mediante la disolucin de protenas intrafibrilar que el cemento de las fibras entre s y evitar que el agua penetracin.
Las lipasas tambin se utilizan para dispersar las grasas como una alternativa a desengrasado con disolventes. estas
enzimas grasas superficiales hidrolizan y aquellos dentro de la estructura de los cueros y pieles, pero sin causar ningn
fsica daar. El depilado de cueros y pieles ha empleado tradicionalmente productos qumicos tales como cal apagada
y el sulfuro de sodio, lo que en el pasado han hecho un efluente de curtiembre problema de contaminacin grave.
dehairing enzima asistida implica proteasas, a menudo la proteasa alcalina de Aspergillus flavus. Su utilizacin reduce
o totalmente sustituye a la los requisitos para el procesamiento qumico y proporciona una reduccin de costes
importante en el tratamiento de efluentes. cebo de cuero prepara la piel para el bronceado. Ello implica la eliminacin
de cualquier protena no deseada restante hacer que la superficie del grano del cuero acabado limpio, lisa y fina. Los
mtodos tradicionales canina que se apliquen, paloma o pollo abonos. stas eran muy desagradable de usar, poco
fiable y lento, y han sido sustituidos por proteasas microbianas. Las enzimas usadas en el tratamiento de pastas de
madera fabricacin de papel es una importante industria mundial. En los EE.UU por s solo ms de 70 millones de
toneladas de papel y cartn se fabrican cada ao, los cuales tienen un valor en exceso de US $ 50 mil millones.

fabricacin de papel implica la procesamiento de fibras vrgenes en su mayora, pero hay un creciente la utilizacin de
algunos materiales reciclados o secundaria fibras. El reciclaje ahorra ambos rboles y energa, disminuye efluentes
residuales y reduce las cargas de relleno sanitario. Tradicionalmente, el procesamiento de pulpa de madera ha
supuesto la un amplio uso de los productos qumicos, lo que puede conducir a problemas con tratamiento de efluentes
y la contaminacin ambiental. Por lo tanto, el desarrollo de la tecnologa a base de enzimas paraprocesamiento de
pulpa y fabricacin de papel tiene importantes ventajas. enzimas microbianas se pueden utilizar en varios etapas de
la pulpa y el procesamiento de papel a: 1 mejorar la digestin de celulosa; 2 mejorar las tasas de drenaje en la
eliminacin de agua durante formacin del papel; 3 aumentar la flexibilidad de la fibra; 4 xilano eliminar
selectivamente sin afectar a otra componentes; 5 remover resinas; 6 mejorar el blanqueo; 7 eliminar los
contaminantes, tales como en el destintado de de alta calidad de papel de desecho; y 8 fibrilar o aumentar interfibras
unin en la industria qumica pulpas y fibras herbceas. Esas enzimas microbianas utilizadas en estos procesos incluyen
una amplia gama de celulasas, hemicelulasas, pectinasas y lipasas. Sin embargo, an no pueden reemplazar la totalidad
tratamientos mecnicos y qumicos. Enzimas como catalizadores en sntesis orgnica Hay un mercado de rpido
crecimiento para las enzimas microbianas utilizado en la sntesis de compuestos orgnicos de alto valor para las
industrias qumicas, farmacuticas y alimentarias. Un rea de gran valor comercial implica la aplicacin de
glicosiltransferasas de ciclodextrina, a menudo obtenida de termfilos extremos, para crear ciclodextrinas de
molculas de almidn simples. Estas ciclodextrinas son vehculos tiles de compuestos frgiles como las vitaminas y
sabores. No existe ningn medio qumico para la creacin de esta clase de sustancias, por lo que el enzimtica ruta es
nica. Un campo cada vez ms importante es la sntesis de quiral compuestos. Existen compuestos quirales en dos
formas llamados enantimeros, que son especulares no superponibles imgenes de uno al otro y son por lo tanto
asimtrica. En casi todos los aspectos, los dos enantimeros son fsicamente y qumicamente idnticos. Sin embargo,
las soluciones de un enantimero gira el plano de luz polarizada en una direccin hacia la derecha (+), mientras que
las soluciones de la otra enantimero gire en sentido antihorario (-), pero por exactamente la misma cantidad. Este
fenmeno se conoce como ptico actividad y los enantimeros se denominan a veces ismeros pticos. La quiralidad
es de vital importancia en la biologa ya que la mayora compuestos orgnicos naturales son quirales. Por ejemplo, la
mayora de los aminocidos son enantimeros, con un solo enantimero por lo general se encuentra en la naturaleza.
Sin embargo, cuando los compuestos se sintetizan qumicamente un casi 50: se hace 50 mezcla de enantimeros, que
se llama una mezcla racmica. Por lo general, para la mayora de las molculas biolgicas, En cuanto a los aminocidos,
slo una de sus variantes o enantimeros es biolgicamente eficaz como un sustrato enzimtico, frmaco, nutriente,
etc. Su otra enantimero puede ser intil / intil o incluso perjudicial para salud. La razn de que las molculas
idnticas de frente quiralidad puede tener tal comportamiento biolgico diferente es que las protenas, especialmente
las enzimas y los cidos nucleicos son ellos mismos molculas quirales. En consecuencia, cualquier droga o nutriente
debe tener la quiralidad correcta si se trata de interactuar con una protena de la quiralidad especfico. En la sntesis
industrial de tales compuestos, tiene que haber controles a garantizar la produccin de slo el enantimero deseado,
a menudo en una pureza superior al 99%. No slo es econmicamente desventajoso para hacer una gran cantidad de
productos qumicos cuando slo la mitad (un enantimero) es biolgicamente funcional, pero para algunos frmacos
otro enantimero pueden ser txicos. Ciertos sntesis quirales pueden ser llevaron a cabo qumicamente, pero las
rutas enzimticas son por lo general privilegiado. procesos a base de enzimas se pueden utilizar para preparar
especfica enantimeros y enantimeros de resolver racmica mezclas. Estos procesos utilizan race masas, que son
una familia de enzimas que aceptan cualquier enantimero, aunque ellos mismos son quirales como todas las otras
protenas. Su funcin biolgica es convertir un sustrato de una quiralidad en su forma opuesta. Ellos se pueden utilizar
parasintetizar aminas quirales, alcoholes y otros muchos compuestos.
Combustibles y productos qumicos industriales
Dentro de los prximos 50-100 aos algunos suministros de combustibles fsiles, en particular el petrleo, es probable
que llegar a reducirse. Por consiguiente, hay una necesidad urgente de desarrollar alternativo fuentes de energia. La
mayora de los requisitos se cumplirn a partir geotrmica, nuclear, solar, agua y viento fuentes. Sin embargo, la
generacin de combustible biolgico es probable que se convierta cada vez ms importante, especialmente en lo que
puede proporcionar tanto lquidos y gaseosos. Es importante destacar que estos combustibles son producido a partir
de recursos renovables, principalmente la planta la biomasa, en forma de cultivos energticos cultivadas, natural
vegetacin, y agrcola, domstico e industrial desechos. Los dos principales productos de combustible microbiana
momento, derivados de estos recursos son el metano y etanol, pero estos no son los nicos combustibles que se
pueden formar. Otro ejemplos lquidos y gaseosos incluyen hidrgeno, propano, metanol y butanol; electricidad

tambin se puede generar por los sistemas microbiolgicos. Numerosos otros compuestos qumicos son importantes
ahora se produce ms econmicamente por fermentacin microbiana y los procesos de biotransformacin. La mayora
son metabolitos primarios que incluyen cidos orgnicos, aminocidos, disolventes industriales y una amplia gama de
biopolmeros. Muchos de estos productos microbianos son utilizado como materias primas qumicas y los ingredientes
funcionales en una amplia gama de productos industriales y de alimentacin.
Alcanos
El metano se utiliza tanto para combustible domstico e industrial. En la actualidad, los suministros en su mayora
provienen de yacimientos de gas y petrleo o la gasificacin de carbn. En consecuencia, la produccin de metano a
travs de la fermentacin es atractiva slo en limitadas situaciones locales a pequea escala. Sin embargo, este modo
de produccin puede llegar a ser cada vez ms importante ms adelante en el siglo 21, cuando los suministros de la
no renovable fuentes comienzan a disminuir. La produccin de metano por microorganismos es un muy proceso
complejo, que implica una mezcla de anaerbico microorganismos que se encuentran de forma natural en los
pantanos, orgnicos sedimentos y en los estmagos (rumen) de rumiantes animales. produccin microbiana actual de
metano para de combustin puede ser a travs de la digestin anaerobia de la agricultura, residuos industriales y
urbanos (vase el Captulo 15). Estos residuos son predominantemente biomasa vegetal (lignocelulsica materiales)
que tienen altos costos de recoleccin. UN potencialmente atractivo, pero costoso, de modo a gran escala la
produccin se realiza mediante el depsito en vertederos (vase el Captulo 15), siempre que la produccin de gas
estable a largo plazo puede ser desarrollado. Por el contrario, los fermentadores de biogs utilizan baja tecnologa en
el la produccin local a pequea escala de metano. A menudo utilizan excrementos de animales y son particularmente
valiosos en lugares donde otros combustibles no estn disponibles. El biogs generado est compuesto principalmente
de 50 a 80% de metano y 15-45% de CO2, junto con algunos gases traza. poblaciones microbianas mixtas asociadas
con generacin de metano son muy verstiles con respecto a la gama de sustratos que pueden utilizar. La produccin
de metano a partir de materiales orgnicos implica tres especfica fases. En primer lugar, un grupo de microorganismos
hidrolizan polmeros orgnicos, incluyendo grasas, protenas y polisacridos, a sus monmeros solubles respectivos.
Estos compuestos son entonces metabolizados a cidos orgnicos por organismos acidognicas anaerbicas. En la fase
final, los cidos orgnicos se convierten en alcanos y de carbono dixido (Fig. 10.1). bacterias metanognicas producen
metano a partir de acetato, que es el producto principal. Sin embargo, el metano tiene un rendimiento energtico ms
bajo que el alcanos de cadena ms larga, etano y propano (Tabla 10.1), que se derivan de propionato y butirato,
respectivamente (Fig. 10.1). Normalmente, slo pequeas cantidades de estos dos cidos orgnicos se producen
durante acidognesis, pero las cantidades generadas dependen de la especfica condiciones. Por lo tanto, existe la
posibilidad de la futuro manipulacin de tales fermentaciones para producir una mayor proporcin de los
combustibles ms atractivo etano y el propano.
Butanol
La acetona, butanol, cido butrico y el isopropanol, junto con otros cidos orgnicos y alcoholes, se puede obtener
por fermentacin clostridial de una gama de materias primas, incluyendo almidn, melaza y celulosa hidrolizada
materiales. La cantidad relativa de cada fermentacin producto depende de las especies bacterianas y la condiciones
especficas utilizadas cepa, y el medio ambiente de la fermentacin. Hay tres fermentacin principal tipos: 1 de
acetona-butanol (Clostridium acetobutylicum), adicional productos: cido butrico, cido actico, acetona, etanol,
CO2 y H2; 2 butanol-isopropanol (Clostridium butylicum), productos adicionales: cido butrico, cido actico, CO2 y
H2; y cido lctico-cido actico al 3 butrico (Clostridium butyricum), productos adicionales: CO2 y H2. Los miembros
del gnero Clostridium son Gram-positivo varillas con flagelos peritricoso y son por lo tanto muy mviles. Se
caracterizan por su capacidad para formar esporas resistentes al calor, un metabolismo fermentativo altamente y su
respuesta al oxgeno. Todos son anaerobia, pero intervalo de anaerobios obligados a aerotolerant especies.
Normalmente, no contienen derivados de hemo, tales como citocromos y catalasa. Sin embargo, algunas especies
pueden citocromos producir si se suministra con precursores adecuados. La mayora son mesfilos, aunque varios
termfilo Se conocen las especies, por ejemplo, C. thermoaceticum. Crecen bien a pH neutro y alcalino, pero se inhiben
en condiciones cidas y variar ampliamente en el gama de sustratos que pueden utilizar. La fermentacin acetonabutanol tiene una larga historia como un exitoso proceso de fermentacin industrial. Era Weizmann en el Reino Unido,
a principios del siglo 20, que llevado a cabo gran parte de la investigacin bsica en la produccin de acetona, butanol
y etanol por C. acetobutylicum. Esto fue muy valiosa durante la Primera Guerra Mundial, en particular para la

produccin de acetona, que era necesaria en la fabricacin de explosivos. La acetona se usado especficamente como
un agente de gelatinizacin de nitrocelulosa en la produccin de plvora. El proceso de Weizmann tambin riboflavina
producida (vitamina B2) como subproducto. Despus de la Primera Guerra Mundial, se convirti en el principal butanol
producto de inters. Se utiliza ampliamente como materia prima qumico en la produccin de lacas, rayn,
plastificantes, recubrimientos, detergentes, lquidos para frenos y butadieno para la fabricacin de caucho sinttico.
butanol se tambin se utiliza como disolvente de grasas, ceras, resinas, goma laca y barnices, y como agente de
extraccin valioso y disolvente en la industria de alimentos. La produccin anual de fermentationderived butanol era
de ms de 20 000 toneladas en 1945, pero en el mundo occidental el proceso comenz a declinar por el 1940 finales.
Esto era debido a cambios en el suministro de la fermentacin materias primas (melaza, caa de azcar, etc.) y el
aumento de la disponibilidad de petroqumica barato materias primas para su sntesis qumica. Butanol est ahora
predominantemente fabrica a partir de a base de petrleo materias primas. En los EE.UU., por ejemplo, la produccin
actual de sintetizado qumicamente butanol es ms de 500 000 toneladas / ao, con anual crecimiento de 3-4%. Sin
embargo, las fermentaciones butanol Todava son operados en ciertos pases. En la antigua estados de la Unin
Sovitica algunos procesos se basaron en melaza de remolacha, mientras que las fermentaciones utilizando la caa de
azcar melaza continuaron hasta hace relativamente poco tiempo en el sur frica y China an mantiene cierta
fermentationbased plantas de fabricacin. El futuro para fermentation- de produccin basado ve muy brillante, sobre
todo ya que el consumo mundial de butanol se ha disparado por encima los ultimos aos. Esto proporciona una
oportunidad para el introduccin de nuevos y ms eficientes de fermentacin tecnologa de proceso, sobre todo
porque el suministro de productos petroqumicos mengua. Adems de la funcin existente como disolvente y
producto qumico materia prima, butanol tiene varias propiedades que son favorable para el uso de combustibles de
motor, ya sea solo o cuando mezclado con gasolina (Tabla 10.2). Butanol tiene buena propiedades de octano de
mejora, una proporcin relativamente alta de calor de combustin y una presin de vapor mucho ms baja que tanto
el metanol y el etanol. Estas caractersticas hacen que el butanol un extensor de combustible lquido an mejor que el
etanol, que se utiliza actualmente en la formulacin de gasohol. Por otra parte, el butanol tiene una baja miscibilidad
con el agua, pero de alta miscibilidad con diesel y gasolina. Debido a su elevado calor de combustin, soluciones
butanol que contiene tanto como 20% (v / v) de agua tienen el mismo valor de combustin como etanol anhidro. Esto
puede indirecta reducir el xido de nitrgeno (NOx) mediante la reduccin de las emisiones la temperatura de
funcionamiento de combustin interna motores. Como aditivos de combustible, alcoholes tales como butanol tambin
tienen el potencial para reducir el monxido de carbono las emisiones.
Proceso de produccin Butanol
En el pasado, la produccin econmicamente viable de butanol normalmente ha requerido un volumen de al
fermentador menos 1000m3. Los fermentadores no se agitaron, como el desprendimiento de gases proporciona una
mezcla suficiente. Estas fermentaciones se hicieron funcionar como procesos por lotes, a menudo usando 5-7% de
almidn o melaza como el carbono (w / v) sustrato. Ms recientemente, con el aumento de la demanda de butanol,
procesos avanzados a base de maz, maz subproductos de procesamiento y otros residuos celulsicos tienen ha
propuesto, en particular en los EE.UU. (ver abajo). En el proceso convencional, antes de la fermentacin, el medio y
se esterilizan fermentador y se purg con CO2. El fermentador fue inoculado con una relativamente bajo nivel de
inculo, 0,03% (v / v) C. acetobutylicum. En el primero 18-24 h el pH cae de una nivel inicial de 5,8 a 6,0 a pH 5,2,
debido a la produccin de cido butrico y cido actico durante este rpido crecimiento fase. Durante los siguientes
20-24 horas el pH se eleva de nuevo a pH5.8-6.0, ya que estos cidos son metabolizados para formar los disolventes
neutros acetona, butanol y etanol. Su concentracin total alcanza alrededor de 2% (v / v) en una relacin de 6: 3: 1
para la acetona, butanol y etanol, respectivamente. Los rendimientos globales de hasta 37% (w / w), basado en el
inicial hidratos de carbono, que puede lograrse. la recuperacin del producto tiene tradicionalmente involucrados
destilacin fraccionada. Los gases generados durante la fermentacin, en particular el CO2, puede ser recuperados
para su venta como subproductos y la destilacin residuos pueden ser vendidos como alimento para animales. Una
proporcin de la produccin de butanol en China y una algunos otros pases todava pueden ser a travs de
fermentacin similar procesos, pero la ltima acetona-industrial con butanol la fermentacin del etanol operado en
el mundo occidental cerrado a principios de 1990. Esto se llev a cabo por Productos Qumicos Nacionales en
Germiston, Sur Africa, utilizando C. acetobutylicum P262. Implicaba fermentaciones discontinuas con melaza como
sustrato, que se desarroll durante 40-60 horas y se genera el producto promedio concentraciones de 15 a 18 g / L.
Sin embargo, la viabilidad econmica de estas fermentaciones ahora exige un disolvente rendimiento de 22-28 g / L
dentro de este tiempo, de lo contrario no puede competir con procesos qumicos. La exacta econmicamente

competitivo concentracin depende el precio vigente del petrleo. Los mtodos por lotes tradicionales han sufrido de
varios problemas, incluyendo la contaminacin por los lactobacilos, ataque bacterifago, la inhibicin del producto,
de alta los costos de energa para la destilacin y el hecho de que una mezcla de productos de fermentacin se obtiene.
Ms eficiente procesos se estn desarrollando con la mejora de cepas que producen predominantemente una
fermentacin producto y el uso de sustratos ms baratos, incluyendo domstica y desechos agrcolas. En ellos pueden
participar temperatureprogrammed, , cultivos en suspensin de varias etapas continuas o clulas inmovilizadas
incorporados en fluidizedbed reactores. Tales procesos de fermentacin son probablemente contar con sistemas de
recuperacin de productos integrados, tales como pervaporacin.
Este mtodo en particular implica
selectivaseparacin de membrana de componentes disolventes en una cmara de baja presin (por ejemplo, usando
dimetilsilano poli membranas), seguido de la condensacin del producto. Estas mejora de los procedimientos tienen
el potencial para producir una concentracin de disolvente total superior a 30 g / L y permitir la recuperacin
simultnea de disolventes de la caldo durante la fermentacin. Esto elimina la inhibicin del producto y permite la
utilizacin completa del carbono sustrato a una tasa relativamente alta durante continua fermentacin.
Etanol Industrial
La mayora de las regiones del mundo se han producido tradicionalmente bebidas alcohlicas a partir de sustratos
disponibles a nivel local (Vase el Captulo 12). fermentaciones alcohlicas son similares ahora se utiliza en algunos
pases para producir el tipo de combustible o etanol como materia prima qumica. La produccin mundial anual de
etanol es ms de 30 mil millones de litros, aproximadamente 70% de la que se produce por la fermentacin, el resto
se fabrican sobre todo mediante la hidratacin cataltica de etileno. Casi el 12% de la fermentacin el etanol es el
alcohol de bebidas, el 20% es para el vario industrial usa y el 68% restante es el etanol combustible. El etanol es un
combustible atractivo porque puede ser utilizado solo o mezclado con otros combustibles lquidos, por ejemplo,
'Gasohol', una mezcla de 10 a 22% (v / v) de etanol con la gasolina (vase Tabla 10.2). En la dcada de 1970, Brasil y
algunos otros pases emprendi la produccin a gran escala de etanol a partir de recursos renovables de biomasa
indgenas para compensar los crecientes costos de las importaciones de petrleo. El etanol se produce por
fermentacin de sacarosa, derivados de azcar bastn, usando Saccharomyces cerevisiae. Brasil es ahora responsable
de ms del 46% de la produccin mundial anual, cerca de 14,5 mil millones de litros de etanol. Sin embargo, esto es
no es suficiente para mantenerse al da con la creciente demanda de combustible. Incapacidad para desarrollar sus
procesos de produccin tiene traducido en la necesidad de importar etanol de los EE.UU. y otros pases productores.
Adems de la sacarosa, otra fermentacin convencional sustratos para fermentaciones de etanol incluyen azcares
simples derivados de plantas y residuos lcteos. estos requieren relativamente poco procesamiento (figuras 10.2 y
10.3). Sin embargo, uso de races y tubrculos de almidn (yuca, patata, etc.) o almidn de grano (maz, trigo, arroz,
etc.) exige energa el consumo de las operaciones de tratamiento para lograr la hidrlisis. Incluso un mayor
procesamiento es necesaria antes de la utilizacin de materiales lignocelulsicos de plantas (vase p. 149).
Bioconversin de almidn de maz
En Amrica del Norte, los procesos de molienda hmeda o seca tienen sido desarrollado para el procesamiento de
maz aceite de maz por separado a partir del almidn. Esto tambin genera subproductos que puede ser utilizado para
la alimentacin animal. almidn extrado se somete a la gelatinizacin y la sacarificacin, y el resultante azcares
pueden someterse a fermentacin alcohlica. Los La tecnologa utilizada inicialmente se bas en gran medida de que
anteriormente desarrollado para la produccin de bebidas alcohlicas, pero ahora los procesos son mucho ms
eficientes. Enzimtica sacarificacin se utiliza para la conversin de almidn en azcares fermentables que emplean
diversos termoestable amilasas, incluyendo glucoamilasas. La fermentacin de los azcares resultantes, todo glucosa,
se lleva a cabo por cepas seleccionadas de S. cerevisiae en 32-38 C y pH 4,5-5,0. Las fermentaciones pueden ser por
lotes o continuo procesos, a menudo con alguna forma de reciclaje celular, quereduce tanto el tiempo de fermentacin
y la cantidad de sustrato "desperdiciado" en conversin de biomasa no deseado. El funcionamiento en vaco, lo que
facilita la eliminacin continua de etanol para reducir la inhibicin de etanol, e incluso inmovilizacin de clulas se han
probado (Tabla 10.3). Estas fermentaciones alcohlicas generan una cerveza, que contiene (V / v) aproximadamente
10% de etanol a partir del cual la levadura se separa generalmente antes de la destilacin. Recuperado el etanol puede
entonces estar deshidratado (vase el captulo 7 de destilacin). El costo de esta recuperacin de etanol es a menudo
hasta el 50% del gasto total del proceso. Proceso subproductos incluyen metanol, glicerol y ms alto alcoholes, tales
como alcoholes de amilo, butilo y propilo. Posible alternativa se acerca a la recuperacin de etanol incluir el uso de

fermentacin extractiva continuo procedimientos que utilizan disolventes no voltiles, no txicos, tales como el
alcohol oleico, que tienen una alta afinidad por el etanol. Este stategy es til en la superacin de la inhibicin del
producto final. Los disolventes empleados se introducen continuamente en el fermentador y la subida a travs del
medio para formar una capa que se retira continuamente. Paso a travs de una centrfuga de los resultados en la
separacin de ethanolladen disolvente de medios de comunicacin y las clulas, que se devuelven al fermentador. El
etanol puede ser recuperado por vaporizacin instantnea y el disolvente no voltil es reutilizada.
Aunque S. cerevisiae est todava ampliamente utilizados para la fermentacin alcohlica de sustratos de azcar
simples, hay son otros organismos con potencial comercial (Tabla 10.4). Estos incluyen especies del gnero bacteriano
Zymomonas, como Z. mobilis, que son gramnegativas sino anaerobios facultativos que normalmente fermentan
solamente glucosa, fructosa o sacarosa. Ofrecen una mayor los rendimientos de etanol que hace S. cerevisiae, pero
no son tan etanol tolerante. En el futuro, es probable rutas alternas involucrar a los organismos genticamente
modificados que tienen la capacidad de utilizar una amplia gama de fuentes de carbono y tienen mejores propiedades
de fermentacin. Por ejemplo, Escherichia coli, que normalmente slo produce relativamente pequeas cantidades
de etanol, se ha transformado con un plsmido que codifica la alcohol deshidrogenasa y piruvato descarboxilasa de Z.
mobilis. Tal transformantes producen etanol en tanto aerbico como condiciones anaerbicas.
La bioconversin de materiales lignocelulsicos
A diferencia de los cultivos energticos (cereales, caa de azcar y la remolacha, etc.), residuos vegetales
lignocelulsica (serrn, virutas de madera, paja, bagazo, residuos de papel, etc.) no tienen directa de alimentos utilizar.
Son recursos renovables an no se ha explotado plenamente. Miles de millones de toneladas de estos materiales
celulsicos Actualmente ir a perder cada ao, que podra ser convertido en energa qumica u otra de fermentacin
til productos. Lignocelulosa se compone de la siguiente polmeros.
1 La lignina (10 a 35%, w / w), un polmero de tres fenlico alcoholes (p-coumaril, alcoholes y sinaplico coniferlico)
que incrusta la celulosa. Este material no puede ser degradado por microorganismos en condiciones anaerobias, pero
se pueden utilizar como fuentes de vainillina, catecol, sulfuro de dimetilo (DMS) y dimetilsulfxido (DMSO) a travs de
procesos qumicos.
2 de celulosa (15 a 55%, w / w), un homopolmero lineal de unidades de glucosa b-1,4-enlazada. Una vez hidrolizado,
la resultante la glucosa es fermentada fcilmente por muchos microorganismos, pero pocos pueden utilizar
directamente el polmero nativa. 3 La hemicelulosa (25 a 85%, w / w), una clase de heteropolmeros que contiene
diversas hexosas (d-glucosa, dgalactose y d-manosa) y pentosas (l-arabinosa y d-xilosa). La xilosa es el segundo ms
abundante azcar en la naturaleza despus de d-glucosa y puede constituir hasta a 25% del peso seco de algunos
rboles leosas, pero slo unos pocos microorganismos fermentan las pentosas a etanol.
Es importante destacar que la produccin de etanol a partir de lignocelulosa es econmicamente viable slo si ambos
pentosas y hexosas son fermentados. Pocos microorganismos pueden utilizar directamente lignocelulosa y los que lo
hacen, como algunas especies de Clostridium, producen poca o ninguna etanol. Por lo tanto, directa la fermentacin
microbiana de materiales celulsicos para el etanol es un oportunidad distante. Un enfoque ms propensos a
demostrar xito en el corto plazo implica varios pasos. En primer lugar, el tratamiento previo del material
lignocelulsico es necesario antes de la sacarificacin de la hemicelulosa y componentes de celulosa. Los azcares
resultantes de qumica y / o enzimtica de hidrlisis puede entonces ser fermentada a producir etanol, que se puede
separar de la fase acuosa fase por destilacin. El pretratamiento y sacarificacin deben llevarse a cabo de una manera
que maximiza la bioconversin subsiguiente los rendimientos y minimiza la formacin de potencialmente inhibidora
compuestos, especialmente furfurales y soluble compuestos fenlicos. La mayora de los materiales lignocelulsicos
requieren una pretratamiento para render la celulosa y la hemicelulosa ms susceptibles a la hidrlisis cida o
enzimtica. El pretratamiento requisitos varan con la materia prima y son a menudo sustancialmente menor para los
materiales procesados, tales como papel y la tarjeta. Los mtodos empleados incluyen el tamao mecnico reduccin
por molienda, la fabricacin de pasta qumica, hidrlisis cida, tratamiento, autohidrlisis, extraccin con disolvente
alcalino, humeante y explosin de vapor (descompresin explosiva despus del tratamiento de vapor de alta presin
a 4000kPa durante 5-10 min). Varias combinaciones de los procesos de tratamiento previo puede ser usado
dependiendo de la fuente de lignocelulsica materiales (Fig. 10.3). Algunos alcanzan la sacarificacin parcial, pero el
tratamiento adicional con cido o enzimas es por lo general necesario. La hidrlisis cida se lleva a cabo generalmente

con cido diluido (por ejemplo, 0,5 a 5% (v v) / cido sulfrico) bajo presin para lograr temperaturas elevadas de 100240 C. Este tratamiento es relativamente barato, pero tambin genera grandes cantidades de subproductos de
degradacin y los compuestos inhibidores indeseables. cido fuerte hidrlisis a menudo utiliza cido clorhdrico
concentrado a temperatura ambiente, lo que da la ms alta de azcar rendimiento de cualquier proceso de hidrlisis
cida. Sin embargo, tales operaciones son cido altamente corrosivo y casi completa la recuperacin es esencial para
que el proceso econmicamente viable. La hidrlisis cida de las mezclas de celulosa y hemicelulosa es difcil de
controlar. La hemicelulosa es ms fcilmente hidrolizada que la celulosa y genera azcares al principio del proceso.
Estos azcares pueden someterse la interrupcin adicional de compuestos inhibidores, por ejemplo, furfuroles. Por
consiguiente, el acondicionamiento de los hidrolizados puede ser necesario con el fin de eliminar estos compuestos,
antes de la fermentacin. Los azcares generados por hidrlisis son principalmente glucosa, celobiosa (un disacrido
compuesto por b-1,4- unidades de glucosa unidas) y xilosa. La fermentacin de xilosa es problemtico. S. cerevisiae,
que es actualmente responsable para el 95% de todo el etanol producido por fermentacin, no fermenta este
monosacrido. esos organismos que lo hacen (vase la Tabla 10.4), no son tolerantes a etanol y dar a los rendimientos
de etanol pobres. Hay una serie de posibles formas en que se podra emplear S. cerevisiae en la fermentacin
alcohlica de xilosa (Fig. 10.4).
1 Isomerizacin de la aldo-azcar, D-xilosa, a la formacin de cetonas d-xilulosa, que S. cerevisiae puede fermentar.
Esta se puede lograr llevando a cabo la fermentacin de la levadura en presencia de una xilosa isomerasa bacteriana.
2 La ingeniera gentica de S. cerevisiae, para expresar genes ya sea para:
(A) una xilosa isomerasa bacteriana, por ejemplo, a partir de especies de Actinoplanes, Bacillus, etc .; o (B) la
xilosa reductasa y xilitol deshidrogenasa de una levadura de fermentacin de pentosa, por ejemplo especies
de Candida,Pichia, etc. Sin embargo, no es probable que los problemas con desequilibrios cofactor con esta
opcin.
Z. Mobilis tambin ha sido manipulada genticamente para fermentarxilosa y puede desempear un papel en el futuro
en la produccin de etanol a partir de biomasa vegetal, al igual que el genticamente Engineered E. coli se mencion
anteriormente, y cierta termfila microorganismos.
Hidrgeno
El hidrgeno es un combustible muy atractiva debido a su alto contenido de energa (118,7 kJ / g), que es
aproximadamente cuatro veces mayor que el etanol y ms de dos veces mayor que metano. La tecnologa para su uso
ya ha sido desarrollado y el producto de su combustin es agua. Una amplia gama de microorganismos producir
hidrgeno como una parte de los mecanismos para la eliminacin de electrones que son generada durante las
reacciones metablicas:

La generacin de hidrgeno a partir de microorganismos, o sistemas libres de clulas en base a componentes

microbianos, es todava mucho en su infancia. Sin embargo, hay tres posibles rutas de produccin.
1 Biophotolysis de agua implica dividir el agua usando energa de la luz y no requiere de un sustrato exgeno. Esto se
puede realizar utilizando sistemas fotosintticos, tales como cloroplastos de algas, que pueden considerarse como
clulas solares. In vivo, la energa generada es normalmente utilizado para formar nicotinamida adenina dinucletido
reducida fosfato (NADPH). Sin embargo, en presencia de una hidrogenasa bacteriana y un electrn apropiado
portador, el hidrgeno molecular puede ser generada (Fig. 10.5).
2 fotorreduccin, la descomposicin dependiente de la luz de compuestos orgnicos, se realiza por fotosinttica
bacterias. Este es un proceso anaerbico que requiere luz y un sustrato orgnico exgeno, que es inhibida por oxgeno,
dinitrgeno y amonio iones. Formacin de de hidrgeno se atribuye a una nitrogenasa que puede reducir protones,
as como de dinitrgeno. Los miembros de la Chlorobiaceae, Chromatiaceae y Rhodospirillaceae llevar a cabo
fotorreduccin. Esas bacterias con mayor potencial son probablemente las bacterias prpuras no del azufre, tales
como especies Rhodospirillium, que photometabolize cidos orgnicos.

3 Fermentacin de compuestos orgnicos por muchas bacterias genera una pequea cantidad de hidrgeno. Por
ejemplo,algunas enterobacterias producen hidrgeno y CO2 escindir formiato, y en clostridios se produce a partir
ferredoxina reducida. Tericamente, 4 mol de hidrgeno podra ser generado a partir de cada mol de glucosa, que
slo representa un rendimiento energtico del 33%. Sin embargo, la mayora de los organismos producir mucho
menos. En consecuencia, hay poca posibilidad para la produccin comercial de hidrgeno a travs de esta ruta en un
futuro prximo.

Electricidad
El papel de los microorganismos en la generacin de electricidad puede implicar producido por microbios gaseosa y
lquida combustibles, tales como etanol o metano, que se utilizan para conducir generadores mecnicos
convencionales. Alternativamente, directa generacin puede ser utilizado, pero esto es todava en las primeras etapas
de desarrollo. Las posibles rutas son a travs intacta microorganismos o enzimas microbianas incorporado dentro de
las clulas de combustible (Fig. 10.6). sistemas basados en enzimas son preferido, como la transferencia de electrones
entre las clulas enteras y electrodos es en general menos eficiente. En algunos casos, inmovilizado enzimas pueden
ser utilizados. Los posibles candidatos son deshidrogenasas microbianas acoplados a sistemas de electrodos y catalizar
la interconversin de hidrgeno y electricidad. Adems, hay la posibilidad de que fototrficas microorganismos, o sus
sistemas fotoactivos, podra convertir directamente la luz solar en electricidad. Por ejemplo, usando membranas
artificiales que incorporan sistemas basados en bacteriorrodopsina de archaea, por ejemplo

halobium halobacterium. Tales sistemas facilitan la translocacin dependiente de la luz de protones y la consiguiente
gradiente electroqumico transmembrana creado podra ser utilizado para generar electricidad.
Aminocidos
Varios aminocidos se producen en cantidades comerciales a travs de procesos de fermentacin directa utilizando
superproductora cepas microbianas, o por biotransformacin microbiana. Se emplean sobre todo como alimento o
animal suplementos alimenticios y compuestos de sabor. Sin embargo, varios aminocidos tambin tienen usos en
productos farmacuticos y cosmticos, y en la industria qumica para la fabricacin de polmeros.
cido L-glutmico
De todos los procesos de produccin de aminocidos, la de lglutamic cido es probablemente la ms importante en
trminos de la cantidad. Su uso principal es como el potenciador del sabor, L-glutamato monosdico (MSG), que puede
aumentar e intensificar el sabor de los alimentos sin aadir significativa sabor propio. MSG est naturalmente presente
en ciertos alimentos y se descubri que era la "activa" componente de un alga marina tradicional sabor de mejora
rodante utilizado en los alimentos del Lejano Oriente. Este compuesto fue aislado por primera vez de las algas,

Laminaria japonica, en 1908. La produccin comercial en Japn sigui casi inmediatamente, utilizando extractos de
protena de soja y gluten de trigo. En 1959, la Food and Drug Administration de EE.UU. (FDA) clasifica MSG como
"generalmente considerado como seguros "(GRAS) debido a su historial de uso seguro, y el Organizacin para la
Agricultura y la articulacin Alimentacin (FAO) / Mundial Organizacin de la Salud (OMS) Comit de Expertos en
Aditivos Alimentarios (1970) dieron la ingesta diaria admisible como 0-120 mg / kg de peso corporal. Desde principios
de la dcada de 1960, la produccin clsica mtodos que utilizan fuentes de la planta han sido sustituidos mediante
procesos de fermentacin, que ahora son responsables para una produccin anual de ms de 400 000 toneladas. El
precio de MSG en el comercio internacional es un promedio de US $ 1.20 / kg y, aparte de un amplio uso en oriental
alimentos, que se aade a una amplia gama de productos alimenticios, especialmente sopas, salsas, salsas y productos
de aperitivo. microorganismos productores de cido glutmico incluyen especies de Arthrobacter gneros
estrechamente relacionados, Brevibacterium, Corynebacterium, Microbacterium y Micrococcus. Estos son Grampositivas, biotinrequiring, bacterias no mviles que tienen intensa glutamato actividad deshidrogenasa.