04863828001V4

ASTL

Aspartate aminotransferase with or without pyridoxal phosphate activation

Estuche adecuado para el analizador cobas c respectivo
sistemas cobas c
cobas c 111

Informacin de pedido
Aspartate aminotransferase
4 100 tests

Ref. 04657543 190

ASTL: ACN 687

ASTPL: ACN 686

Fosfato de piridoxal
4 200 tests
Calibrator f.a.s. (12 3 mL)
Calibrator f.a.s. (12 3 mL, para los EE.UU.)
Precinorm U plus (10 3 mL)
Precinorm U plus (10 3 mL, para los EE.UU.)
Precipath U plus (10 3 mL)
Precipath U plus (10 3 mL, para los EE.UU.)
Precinorm U (20 5 mL)
Precipath U (20 5 mL)

Ref. 04774221 190

Ref. 10759350 190
Ref. 10759350 360
Ref. 12149435 122
Ref. 12149435 160
Ref. 12149443 122
Ref. 12149443 160
Ref. 10171743 122
Ref. 10171778 122

Cdigo 953
Cdigo 401
Cdigo 401
Cdigo 300
Cdigo 300
Cdigo 301
Cdigo 301
Cdigo 300
Cdigo 301

Espaol
Informacin del sistema
ASTL: ACN 687
ASTPL: ACN 686
Uso previsto
Test in vitro para la determinacin cuantitativa de la aspartato-aminotransferasa
(AST), sin o con activacin por fosfato de piridoxal en suero y plasma
humanos con los sistemas cobas c 111.
Generalidades1,2
La enzima aspartato-aminotransferasa (AST) se encuentra ampliamente
distribuida en los tejidos del organismo, principalmente en el tejido heptico,
cardaco, muscular y renal. Los niveles sricos de la enzima aumentan en
caso de enfermedades que afectan estos tejidos. Asimismo las afecciones
hepatobiliares tales como la cirrosis, el carcinoma metastsico y la hepatitis
viral producen niveles sricos elevados de AST. Como consecuencia
de un infarto de miocardio, la AST srica se encuentra aumentada y
alcanza su valor mximo dos das despus de ocurrido.
Los valores sricos de AST pueden estar disminuidos en pacientes en
dilisis renal o con una deficiencia de vitamina B6. La reduccin aparente
de la AST puede estar relacionada con la disminucin del nivel de fosfato
de piridoxal, el grupo prosttico de AST, que trae como consecuencia un
incremento en la relacin entre la apoenzima y la holoenzima.
Se han aislado dos isoenzimas de la AST, la citoplasmtica y la mitocondrial.
En el suero normal slo se halla la isoenzima citoplasmtica, mientras que
en el suero de pacientes con enfermedades coronarias y hepatobiliares,
pueden detectarse tanto la citoplasmtica como la mitocondrial.
La adicin de fosfato de piridoxal al ensayo provoca un incremento
en la actividad de la aminotransferasa. La activacin de AST supera
la de ALT. La activacin por fosfato de piridoxal previene la obtencin
de concentraciones falsamente bajas de la aminotransferasa en
las muestras de pacientes con insuficiente contenido endgeno de
fosfato de piridoxal (deficiencia de vitamina B6).
Principio de test
El presente test cumple con las recomendaciones de la IFCC, si bien
su estabilidad y funcionamiento han sido mejorados.3,4
La AST de la muestra cataliza la transferencia de un grupo amino entre
L-aspartato y 2-oxoglutarato para obtener oxaloacetato y L-glutamato.
A continuacin y en presencia de la malato deshidrogenasa (MDH), el
oxaloacetato reacciona con NADH para formar NAD+.
El fosfato de piridoxal sirve como coenzima en la transaminacin,
garantizando la activacin enzimtica completa.
L-Aspartato + 2-oxoglutarato
Oxaloacetato + NADH +H+

AST
MDH

oxaloacetato + L-glutamato

Reactivos - Soluciones de trabajo

R1
Tampn TRIS: 264 mmol/L, pH 7,8 (37 C); L-aspartato: 792 mmol/L;
MDH (corazn porcino): 24 kat/L; LDH (microorganismos):
48 kat/L; albmina (bovina): 0,25 %; conservante
PYP Fosfato de piridoxal (DL): 730 mol/L; conservante
SR
NADH (levadura): 1,7 mmol/L; 2-oxoglutarato: 94 mmol/L;
conservante; aditivos
Medidas de precaucin y advertencias
Para el uso diagnstico in vitro.
Observar las medidas de precaucin usuales para la manipulacin de reactivos.
Eliminar los residuos segn las normas locales vigentes.
Ficha de datos de seguridad a la disposicin del usuario
profesional que la solicite.
Preparacin de los reactivos
El contenido est listo para el uso.
Conservacin y estabilidad
ASTL
Sin abrir, a 2-8 C:
En uso y refrigerado en el analizador:
PYP
Sin abrir, a 2-8 C:
En uso y refrigerado en el analizador:

Ver la fecha de
caducidad del reactivo
4 semanas
Ver la fecha de
caducidad del reactivo
4 semanas

Obtencin y preparacin de las muestras

Para la obtencin y preparacin de las muestras emplear exclusivamente
tubos o recipientes de recogida apropiados.
Slo se han analizado y encontrado aptas las muestras aqu mencionadas.
Suero (sin hemlisis).
Plasma (sin hemlisis): tratado con heparina de litio, EDTA tripotsico.
Los diferentes tipos de muestra fueron analizados en tubos de recogida
de muestras seleccionados, comercialmente disponibles en aquel
momento, lo cual significa que no fueron analizados todos los tubos de
todos los fabricantes. Los sistemas de recogida de muestras de diversos
fabricantes pueden contener diferentes materiales que en ciertos casos
pueden llegar a afectar los resultados de los anlisis. Si las muestras
se procesan en tubos primarios (sistemas de recogida de muestras),
seguir las instrucciones del fabricante de los tubos.
Centrifugar las muestras que contienen precipitado antes de realizar el ensayo.
Estabilidad: 24 horas a 15-25 C5
7 das a 15-25 C (con activacin por PYP)5
7 das a 2-8 C6

L-malato + NAD+

La velocidad de oxidacin de NADH es directamente proporcional a la actividad

cataltica de la AST. Se determina midiendo la reduccin de la absorbancia.
2011-07, V 4 Espaol

1/5

sistemas cobas c

ASTL

Aspartate aminotransferase with or without pyridoxal phosphate activation

Material suministrado
Consultar la seccin "Reactivos Soluciones de trabajo" en
cuanto a los reactivos suministrados.
Material requerido (no suministrado)
Consultar la seccin Informacin de pedido.
Equipo usual de laboratorio
Ejecucin del test
Para un funcionamiento ptimo del test, observar las instrucciones de la
presente metdica referentes al analizador empleado. Consultar el manual del
operador del analizador en cuanto a las instrucciones especficas de ensayo.
Roche no se responsabiliza del funcionamiento de las aplicaciones no
validadas por la empresa. En su caso, el usuario se hace cargo de su definicin.
Aplicacin para suero y plasma
Sin activacin por PYP:
Definicin del test en el analizador cobas c 111
Absorbancia
Medicin
Clc. de la absorbancia
Cintica
Direccin de reaccin
Disminucin
Longitud de onda A/B
340/378 nm
Clc. primero/ltimo
19/34
Unidad
U/L
Modo de reaccin
R1-S-SR
Parmetros de pipeteo
R1
Muestra
SR
Volumen total

40
11
17
132

L
L
L
L

Diluyente (H2O)
29 L
26 L
9 L

Con activacin por PYP:

Definicin del test en el analizador cobas c 111
Absorbancia
Medicin
Clc. de la absorbancia
Cintica
Direccin de reaccin
Disminucin
Longitud de onda A/B
340/378 nm
Clc. primero/ltimo
31/40
Unidad
U/L
Modo de reaccin
R1-DL-S-SR
Parmetros de pipeteo
R1
Muestra
Diluyente (DL)
SR
Volumen total

40
11
18
17
132

L
L
L
L
L

Diluyente (H2O)
29 L
8 L
9 L

Calibracin
Calibradores

Modo de calibracin
Intervalo de calibracin

Calibrator f.a.s.
El instrumento emplea automticamente
agua desionizada como calibrador cero.
Regresin lineal
Con cada lote y si fuera necesario segn
los procedimientos de control de calidad.

Trazabilidad: El presente mtodo ha sido estandarizado frente a la formulacin

original de la IFCC empleando pipetas junto con un fotmetro manual
obteniendo valores absolutos y la absortividad especfica de sustratos.3,5
Control de calidad
Para el control de calidad, emplear los controles indicados en
la seccin "Informacin de pedido". Asimismo puede emplearse
otro material de control apropiado.
sistemas cobas c

Los intervalos y lmites del control deben adaptarse a los requerimientos

particulares de cada laboratorio. Los valores deben situarse
dentro de los lmites establecidos.
Cada laboratorio debera establecer medidas correctivas a seguir en
caso de que los valores se siten fuera de los lmites.
Srvase cumplir con las regulaciones gubernamentales y las normas
locales de control de calidad pertinentes.
Clculo
El analizador cobas c 111 calcula automticamente la actividad
de analito de cada muestra.
Factor de conversin:

U/L 0,0167 = kat/L

Limitaciones del anlisis - interferencias

Sin activacin por PYP:
Criterio: Recuperacin dentro de 10 % del valor inicial con una
actividad de la AST de 30 U/L (0,501 kat/L).
Ictericia:7 Sin interferencias significativas hasta un ndice I de 60 (concentracin
de la bilirrubina conjugada y no conjugada: aprox. 1026 mol/L 60 mg/dL).
Hemlisis:7 Sin interferencias significativas hasta un ndice H de 25
(concentracin de hemoglobina: aprox. 16 mol/L 25 mg/dL).
La contaminacin con eritrocitos provoca resultados aumentados,
ya que el nivel de analito en los eritrocitos es mayor que en los
sueros normales. La magnitud de la interferencia vara segn el
contenido de analito en los eritrocitos lisados.
Lipemia (Intralipid):7 Sin interferencias significativas hasta un ndice L de 20.
Las muestras lipmicas interfieren en el test y pueden causar
el aviso High Abs.
Anticoagulantes: El citrato y el fluoruro inhiben la actividad enzimtica.
Frmacos: No se han registrado interferencias con paneles de frmacos
de uso comn en concentraciones teraputicas.8,9
Excepciones: El doxiciclina clorhidrato causa valores artificialmente
disminuidos de AST.
La isoniazida puede causar resultados artificialmente disminuidos de la AST.
La furosemida puede causar resultados artificialmente elevados de la AST.
El Cyanokit (hidroxocobalamina) puede causar valores falsamente bajos.
En casos muy raros pueden obtenerse resultados falsos debidos
a la gammapata, particularmente del tipo IgM (macroglobulinemia
de Waldenstroem).
Con activacin por PYP:
Vase arriba
Criterio: Recuperacin dentro de 10 % del valor inicial con una
actividad de la AST de 35 U/L (0,585 kat/L).
Frmacos: No se han registrado interferencias con paneles de frmacos
de uso comn en concentraciones teraputicas.8,9
Excepciones: El dobesilato de calcio y el doxiciclina clorhidrato
provocan valores de AST artificialmente bajos.
La isoniazida puede causar resultados artificialmente disminuidos de la AST.
La furosemida puede causar resultados artificialmente elevados de la AST.
El Cyanokit (hidroxocobalamina) puede causar valores falsamente bajos.
Con fines diagnsticos, los resultados obtenidos con el test siempre
deben evaluarse junto al historial del paciente, los exmenes
clnicos y los resultados de otros anlisis.
Requerimientos para el lavado especial
Ningn ensayo presenta interferencias conocidas que hagan
necesarios pasos de lavado adicionales.
Lmites e intervalos
Sin activacin por PYP:
Intervalo de medicin
2-700 U/L (0,03-11,7 kat/L)
Determinar las muestras con actividades superiores por la
funcin de repeticin del ciclo.
La dilucin de las muestras por la funcin de repeticin del ciclo es de 1:10.
Los resultados de las muestras diluidas por la funcin de repeticin del
ciclo se multiplican automticamente por el factor 10.
2/5

2011-07, V 4 Espaol

04863828001V4

ASTL

Aspartate aminotransferase with or without pyridoxal phosphate activation

El lmite de deteccin equivale a la menor concentracin medible

de analito que puede distinguirse de cero. Se calcula como el valor
situado a tres desviaciones estndar por encima del estndar ms
bajo (estndar 1 + 3 DE, repetibilidad, n = 21).
Con activacin por PYP:
Intervalo de medicin
3-700 U/L (0,05-11,7 kat/L)
Determinar las muestras con actividades superiores por la
funcin de repeticin del ciclo.
La dilucin de las muestras por la funcin de repeticin del ciclo es de 1:10.
Los resultados de las muestras diluidas por la funcin de repeticin del
ciclo se multiplican automticamente por el factor 10.
Lmites inferiores de medicin
Lmite inferior de deteccin del test:
3 U/L (0,05 kat/L)
El lmite de deteccin equivale a la menor concentracin medible
de analito que puede distinguirse de cero. Se calcula como el valor
situado a tres desviaciones estndar por encima del estndar ms
bajo (estndar 1 + 3 DE, repetibilidad, n = 21).
Valores tericos
Sin activacin por PYP:
De acuerdo al mtodo estndar optimizado (comparable con el mtodo
IFCC sin activacin por fosfato de piridoxal10):
Hombres11
Mujeres

hasta 40 U/L (hasta 0,67 kat/L)

hasta 32 U/L (hasta 0,53 kat/L)

Valores calculados: Se ha empleado el factor 2,13 para la

conversin de 25 C a 37 C.12
Con activacin por PYP:
Segn el mtodo estndar 94/IFCC con activacin por fosfato de piridoxal:13
37 C Hombres 10-50 U/L
Mujeres 10-35 U/L

(0,17-0,85 kat/L)
(0,17-0,60 kat/L)

Valores consensuales con activacin del fosfato de piridoxal:14

37 C Hombres hasta 50 U/L (hasta 0,85 kat/L)
Mujeres hasta 35 U/L (hasta 0,60 kat/L)
Cada laboratorio debera comprobar si los intervalos de referencia
pueden aplicarse a su grupo de pacientes y, en caso necesario,
establecer sus propios valores.
Datos especficos de funcionamiento del test
A continuacin, se indican los datos representativos de funcionamiento
obtenidos en los analizadores. Los resultados de cada laboratorio
en particular pueden diferir de estos valores.
Precisin
La precisin se determin empleando muestras humanas y controles segn
un protocolo interno con repetibilidad* (n = 21) y precisin intermedia**
(3 alcuotas por serie, 1 serie por da, 10 das).
Se han obtenido los siguientes resultados:
Sin activacin por PYP:
Repetibilidad
Precinorm U
Precipath U
Suero humano 1
Suero humano 2
2011-07, V 4 Espaol

VM
U/L (kat/L)
39,7 (0,663)
123 (2,05)
26,2 (0,438)
221 (3,69)

VM
U/L (kat/L)
38,6 (0,645)
126 (2,10)
19,5 (0,326)
306 (5,12)

DE
U/L (kat/L)
0,9 (0,015)
1 (0,02)
0,6 (0,010)
3 (0,05)

CV
%
2,4
0,9
3,3
1,0

Con activacin por PYP:

Repetibilidad
VM
U/L (kat/L)
Precinorm U
48,3 (0,806)
Precipath U
139 (2,32)
18,3 (0,305)
Suero humano 1
313 (5,23)
Suero humano 2

DE
U/L (kat/L)
0,7 (0,012)
1 (0,02)
0,7 (0,012)
1 (0,02)

CV
%
1,3
0,7
4,1
0,4

VM
U/L (kat/L)
47,7 (0,796)
142 (2,38)
24,3 (0,406)
561 (9,36)

DE
U/L (kat/L)
1,4 (0,023)
2 (0,03)
0,7 (0,012)
5 (0,08)

CV
%
2,9
1,2
2,7
0,9

Precisin intermedia

Lmites inferiores de medicin

Lmite inferior de deteccin del test:
2 U/L (0,03 kat/L)

DE
U/L (kat/L)
0,4 (0,007)
0 (0,00)
0,4 (0,007)
1 (0,02)

CV
%
1,1
0,4
1,4
0,5

Precinorm U
Precipath U
Suero humano 3
Suero humano 4

Precisin intermedia
Precinorm U
Precipath U
Suero humano 3
Suero humano 4

* repetibilidad = precisin intraserie

** precisin intermedia = precisin total / precisin interserie / precisin da a da

Comparacin de mtodos
Sin activacin por PYP:
Se han comparado los valores de la AST en muestras de suero y plasma
humanos obtenidos en un analizador Roche/Hitachi cobas c 111 (y) con los
obtenidos con el mismo reactivo en un analizador COBAS INTEGRA 400 (x).
Cant. de muestras (n) = 82
Regresin lineal
Passing/Bablok15
y = 0,989x + 1,87 U/L
y = 0,990x + 1,61 U/L
= 0,981
r = 1,000
Las actividades de las muestras se encontraron entre 3,66 y 617 U/L
(0,061-10,3 kat/L).
Con activacin por PYP:
Se han comparado los valores de la AST en muestras de suero y plasma
humanos obtenidos en un analizador Roche/Hitachi cobas c 111 (y) con los
obtenidos con el mismo reactivo en un analizador COBAS INTEGRA 400 (x).
Cant. de muestras (n) = 78
Regresin lineal
Passing/Bablok15
y = 1,007x - 0,070 U/L
y = 0,974x + 2,73 U/L
= 0,988
r = 0,999
Las actividades de las muestras se encontraron entre 12,4 y 696 U/L
(0,207-11,6 kat/L).
Referencias bibliogrficas
1. Nagy B. Muscle disease. En: Kaplan LA, Pesce AJ, eds. Clinical
Chemistry, theory, analysis, and correlation. St. Louis: Mosby 1984:514.
2. Moss DW, Henderson AR, Kachmar JF. Enzymes. In: Tietz NW,
ed. Fundamentals of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia:
WB Saunders 1987:346-421.
3. Bergmeyer HU, Hrder M, Rej R. Approved recommendation (1985)
on IFCC methods for the measurement of catalytic concentration
of enzymes. Part 2. IFCC method for aspartate aminotransferase.
J Clin Chem Clin Biochem 1986;24:497-510.
4. ECCLS. Determination of the catalytic activity concentration
in serum of L-alanine aminotransferase (EC 2.6.1.1, ASAT).
Klin Chem Mitt 1989;20:198-204.
5. Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests. 3rd ed.
Philadelphia, PA: WB Saunders 1995:76-77.
6. Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations.
WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev.2.
7. Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences
in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32:470-475.
8. Breuer J. Report on the Symposium Drug Effects in Clinical Chemistry
Methods. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34:385-386.
3/5

sistemas cobas c

ASTL

Aspartate aminotransferase with or without pyridoxal phosphate activation

9. Sonntag O, Scholer A. Drug interferences in clinical chemistry:
recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug
interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-385.
10. Klein G, Lehmann P, Michel E, et al. Vergleich der IFCC-Methoden fr
ALAT, ASAT und GGT bei 37 C mit den eingefhrten Standardmethoden
bei 25 C und 37 C. Lab Med 1994;18:403-404.
11. Thefeld W, Hoffmeister H, Busch EW, et al. Referenzwerte fr
die Bestimmungen der Transaminasen GOT und GPT sowie der
alkalischen Phosphatase im Serum mit optimierten Standardmethoden.
Dtsch Med Wschr 1974;99:343-351.
12. Zawta B, Klein G, Bablok W. Temperaturumrechnung in der
klinischen Enzymologie? Klin Lab 1994;40:23-32.
13. Klauke R, Schmidt E, Lorentz K. Recommendations for carrying
out standard ECCLS procedures (1988) for the catalytic
concentrations of creatine kinase, aspartate aminotransferase,
alanine aminotransferase and -glutamyltransferase at 37 C.
Eur J Clin Chem Clin Biochem 1993; 31:901-909.
14. Thomas L et al. Consensus of DGKL and VDGH for interim reference
intervals on enzymes in serum. J Lab Med 2005; 29(5):301-308.
15. Passing H, Bablok W, et al. A General Regression Procedure for Method
Transformation. J Clin Chem Clin Biochem 1988;26:783-790.

sistemas cobas c

4/5

2011-07, V 4 Espaol

04863828001V4

ASTL

Aspartate aminotransferase with or without pyridoxal phosphate activation

La barra del margen indica cambios o suplementos significativos.
2011, Roche Diagnostics

Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim

www.roche.com

2011-07, V 4 Espaol

5/5

sistemas cobas c