Bioqumica. Practica No. 6.

2012

EXTRACCION Y CUANTIFICACION DE GLUCOGENO EN ORGANISMOS MARINOS O

HIGADO.

Calixto Heredia Lidda Mariam

Instituto Tecnolgico de La Paz
Laboratorio de Bioqumica
2 de mayo de 2012
Resumen:
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El glucgeno es una forma que tiene el cuerpo de acumular energa. Es un polmero de la
glucosa. Se puede decir que es la gasolina de nuestro organismo. Nuestra fuente de
obtencin de glucgeno fue de almeja, se extrajo y cuantifico el glucgeno que se
encontraba en esta muestra, arrojando los resultados de positivo con la prueba de lugol, con
un 33% de glucgeno. Este tipo de metodologa se recomienda hacerla con un animal que ha
sido sacrificado en menos de 24 horas, para que nos de un buen rendimiento.
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Introduccin:
El glucgeno es una forma que tiene el
cuerpo de acumular energa. Es un
polmero de la glucosa. Se puede decir que
es la gasolina de nuestro organismo.Parte
de la energa que absorbemos de la comida
(hidratos de carbono) se convierte en
glicgeno que se acumula en el hgado

(glucgeno-heptico) y en los msculos

(glucgeno-muscular). El glucgeno
heptico nos interesa menos en el deporte,
su funcin es mantener estable la glucosa
en la sangre. [1]

Es el polisacrido que se almacena en el

El

tratamiento

posterior

con

cido

organismo animal. A menudo se le designa

tricloroactico (TCA) hace que precipiten las

como almidn animal. Es una estructura

protenas y cidos nucleicos de la mezcla.

mucho ms ramificada que la amilopectina

El glucgeno aislado se vuelve a precipitar

con cadenas de 12 a 14 residuos de alfa-D-

con etanol, obtenindose una preparacin

glucopiranosa (con enlaces glucosidicos

con un alto grado de pureza.

alfa-D-[14]) y ramificaciones unidas por

El tratamiento con antrona (que contiene

medio de enlaces glucosidicos (16). [2]

(H2SO4) es un mtodo rpido para la

Se encuentra principalmente en el hgado y

en el musculo representando hasta un 10%
y un 1-2% de su peso hmedo,

determinacin de hexosas y alopentosas

constituyentes de un polisacrido. Mediante
este mtodo, el glucgeno es hidrolizado
por un cido (H2SO4) hasta sus unidades

respectivamente.

elementales (monosacridos), que pueden

ser luego deshidratadas dando furfural, y
ste ltimo, reacciona con la antrona y se
forma un producto coloreado (azul-verdoso)
con un mximo de absorbencia a 620 nm.
El valor resultante se compara con los
obtenidos al preparar una recta estndar

Estructura del glucgeno [3]

El glucgeno se libera de los tejidos que lo

contienen por calentamiento con una base

con glucosa pura, usando el mismo

mtodo.[4]

fuerte (KOH) hasta la destruccin total del

El objetivo de esta prctica es el de obtener

tejido. La separacin del glucgeno del

glucgeno y la estimacin en porcentaje de

tejido se consigue mediante la adicin de

glucgeno.

etanol (precipita polisacridos y elimina los

monosacridos solubles) y sulfato de sodio
(coprecipitante).

As,

se

produce

un

precipitado que contiene una mezcla de

glucgeno, protenas y cidos nucleicos,
que han resistido el calentamiento anterior.

Metodologa:

Digestin

Se pic lo ms pequeo posible la muestra

con la que se trabaj, lo colocamos en un
matraz erlenmeyer de 250 ml y se aadi50

ml de KOH 3.0 N, al terminar se calent en

bao mara a 80C durante 30 minutos.
Despus de transcurrido ese tiempo se
enfri y acidulo con H2SO4.

Precipitacin

Se pas la solucin a un vaso de

precipitado de 500 ml y se agreg 150 ml
de alcohol de 96 . Agitamos con mucho
cuidado y se dejo reposar durante 10
minutos. Al terminar se separ el
sobrecalentado por decantacin o filtracin
y se pas el precipitado a un vidrio de reloj
que fue previamente pesado. Al terminar se
coloc en un desecador (modelo G01350A1, marca Thermo) y posteriormente se
pes.

Identificacin

Resultados:
La muestra con la que se trabaj peso
20.04 g, al terminar la prctica se volvi a
pesar y se obtuvo 8.5 gramos, con un 33%
de glucgeno. La prueba de lugol a la
muestra extrada dio negativo, para la
prueba con el glucgeno al 1% nos dio
positiva. A continuacin se muestra un
cuadro con los resultados de todos los
equipos.
Grafica 1
Equip Muestr

Glucge

Glucgenoextr

no al 1%

ado

Camar

Positivo

Negativo

n
2

Almeja

Positivo

Negativo

Hgado

Positivo

Negativo

Negativo

de

Se disolvi una pequea porcin del

precipitado en un poco de agua destilada y

pollo
4

Callo

Positivo

Almeja

Negativo Negativo

Almeja

Negativo Negativo

Despus se aadi 5 gotas de solucin de

Pulpo

positivo

yodo a cada tubo, se procedi a comparar

Tabla de resultados de todos los equipos.

se coloc 2 mL de esta en un tubo de

ensayo, en otro tubo de ensayo se coloc 2
mL de solucin de glucgeno al 1%.

los resultados de los dos tubos y se anot

las observaciones.

Negativo

Discusin:
Las reservas de glucgeno son limitadas y
pueden llagar a agotarse, la velocidad con
que sucede este agotamiento de las
reservas depende de la intensidad que

tenga el ejercicio realizado y de la cantidad

de glucgeno que se ha almacenado antes
de emprender el entrenamiento.
Es por eso que al terminar la prctica, nos
dimos cuenta de que algunos resultados
dieron negativo. Esto puede deberse a que
la fuente de donde se obtuvo el glucgeno
ya estaban previamente muertas, y
conservadas, es por eso que lo ms
eficiente y recomendable es que se
sacrifique un animal y al instante extraer el
glucgeno. Ya que esta reserva de
glucgeno que tiene el organismo es muy
limitada, y el cerebro tanto como el musculo
necesitan del glucgeno para que el
organismo funcione.
Conclusin:
El glucgeno es una forma que tiene
nuestro cuerpo para acumular energa.
Estas reservas son limitadas y se llegan a
agotar. Es por eso que al extraer y
cuantificar glucgeno de algn animal
marino o de hgado se necesitan menos de
veinticuatro horas para poder extraer
aunque sea solo un poco de este
polisacrido.[4]

Bibliografa:
1. http://www.todonatacion.com/ciencia
s-del-deporte/glucogeno.php (30 de
abril de 2012)
2. Bioqumica de Harper, David W.
Martin Jr., 14 edicin, pg. 171-172
3. http://es.wikipedia.org/wiki/Gluc%C3
%B3geno (30 de abril de 2012)
4. http://www.uco.es/organiza/departam
entos/bioquimica-biolmol/pdfs/22%20AISLAMIENTO%20G
LUC%C3%93GENO.pdf (30 de abril
de 2012)