Extraccin ADN Vegetal

Materiales
Vegetal fresco.
Tubos de ensayo.
Mortero y pistilo
Microcentrfuga
Pipetas.
10 ml de Alcohol etlico al 70% (fro).
10 ml de solucin tampn al 10%.
1 ml de jugo enzimtico.
5 ml de solucin salina al 4%.
2 gotas de azul de Metileno.

Procedimiento
1. Coloque un trozo pequeo, de aproximadamente una (1) pulgada de vegetal, agregando
10 ml de solucin tampn al 10% (necesaria para romper la pared y membranas celulares),
en un mortero y macerar.
2. Decantar aproximadamente 10 ml del lquido del mortero dentro de un tubo para
centrifugar.
3. Centrifugar por 7 minutos a 2,500 RPM, para lograr la separacin en dos (2) componentes
de la mezcla.
4. Decantar el sobrenadante del tubo en un tubo de ensayo limpio. Agregar 1 ml de jugo
enzimtico, necesario para desnaturalizar protenas.
5. Mezclar por inmersin diez (10) veces.
6. Cuidadosamente (dejando resbalar por las paredes del tubo de ensayo) agregar 10 ml de
etanol al 70% fro, luego dejar reposar por 5 minutos, para lograr precipitar el ADN en la
interfase.
7. Extraer de la interfase y trasladar las fibras de cromatina a 5ml de la solucin salina al 4%
previamente colocada en un tubo de ensayo limpio, contribuyendo a la preservacin del
ADN.

8. Teir las fibras de cromatina con una (1) gota de azul de Metileno, lo cual permitir una
mejor visualisacin.

Extraccin ADN Animal

Materiales
Trozo de hgado de pollo.
Mortero.
Microcentrfuga.
Tubos de ensayo.
Pipetas.
1 cucharada de arena lavada.
20 ml de agua destilada.
10 ml de Alcohol etlico al 70% (fro).
10 ml de Cloruro Sdico al 2M.
5 ml de solucin salina al 4%.
2 gotas de azul de Metileno.

Procedimiento
1. Coloque un trozo pequeo de hgado de pollo de una (1) pulgada, agregar una cucharada
de arena y agregar 20 ml de agua destilada en un mortero y macerar, para romper
membrana celular.
2. Agregar a la mezcla del mortero 10 ml de NaCl al 2M. Depositar 10 ml de la mezcla en un
tubo de ensayo para centrifuga, logrando la ruptura de los ncleos de la clula.
3. Centrifugar por 7 minutos a 2,500 RPM, para lograr la separacin en dos (2) componentes
de la mezcla.
4. Decantar el sobrenadante del tubo en un tubo de ensayo limpio. Agregar 1 ml de
detergente, necesario para desnaturalizar las protenas.
5. Mezclar por inmersin diez (10) veces.

6.

Cuidadosamente (dejando resbalar por las paredes del tubo de ensayo) agregar 10 ml de
etanol al 70% fro, luego dejar reposar por 5 minutos, para lograr precipitar el ADN en la
interfase.

7.

Extraer de la fase que presenta mayor condensacin y trasladar las fibras de cromatina a
5ml de la solucin salina al 4% previamente colocada en un tubo de ensayo limpio,
contribuyendo a la preservacin del ADN (misma funcin que ADN vegetal).

8. Teir las fibras de cromatina con una (1) gota de azul de Metileno, lo cual permitir una
mejor visualizacin.