CATECOLAMINAS EN

ORINAS
Lic. T. M. Carlos N. Ortega Tumay
H.N.E.R.M.-ESSALUD

FEOCROMOCITOMA
Es una neoplasia
neuroendocrina de las
clulas cromafines que
biosintetizan, almacenan,
metabolizan y secretan
concentraciones
elevadas de
catecolaminas.

PREVALENCIA
La incidencia es de 2 a 8
casos por milln de
habitantes.
Es mas frecuente entre la
cuarta y quinta dcada
de la vida.
La prevalencia en la
poblacin hipertensa es
de 0.2 0.4 %.

ETIOLOGA

La frecuencia del
feocromocitoma es de 75%
intradrenal y el 9.0-23%
desarrolla en tejido
extrarrenal y se denomina
paraganglioma.

Manifestaciones clnicas
La hipertensin arterial elevada sostenida es el sntoma mas comn .

Presenta la triada sintomtica cefalea, diaforesis y palpitaciones

Nerviosismo y ansiedad.
Rubor y tremor.

Dolor toraccico.
Nauseas y vomitos

Polidipsia y vertigos.

METODOS PARA DOSAJE DE

METANEFRINAS

Cromatografa de intercambio inico

 Determinacin de Metanefrinas urinarias

Fundamento: Las metanefrinas contenidas en la muestra
son retenidas por una resina de intercambio catinico. Una
vez eliminada las interferencias por lavado, se eluyen las
metanefrinas y se cuantifican espectrofotomtricamente
como vanillina despus de una oxidacin con periodato en
medio alcalino.

Reactivos:
1.-Buffer Bis-tris 0,4 mol/l
2.-Reactivo 2 Amoniaco 4 mol/L
3.-Microcolumnas de 2x20 de intercambio catinico
equilibradas
4.-Reactivo B, periodato de sodio 0,12 mol/l
5.-Reactivo C, metabisulfito de sodio 0,67 mol/l
6.-Patron de Normetanefrina 100 mg/L.

Equipos y materiales necesarios:

Bao de Mara de agua hirviente
Espectrofotmetro para lectura a 360 nm.
Pipetas automticas 50, 100 y 200 ul
Tubos de Vidrio Prex de 15 x 150
Tubos de Vidrio de 13 x 100
Tubos de vidrio 12 x 75
Punteras celestes y amarillas
Agua destilada

Requisitos de la Muestra:
Orina de 24 horas
Previa dieta : 3 das antes no ingerir carotenos,
chocolates, caf ni te no tomar aldomet.
Conservar la orina acidificada a pH < 3,0.

Estable a 4 por 15 das y a -20 por 30 das.

Centrifugar o filtrar antes de la determinacin.

Procedimiento
1.-Pipetear en un tubo de ensayo pyrex de 15 x 150, 5 ml del espcimen.
2.-Ajustar el pH del espcimen entre 0,7 y 0,9 con acido clorhdrico
concentrado.
3.-Incubar en un bao de agua hirviente por 20 minutos.
4.-Enfriar con agua corriente.

5.-Aadir 5 ml de Buffer tris 0,4 mol/L.

Corrida de la cromatografa
6.-Destapar la micro columna, romper la lengeta inferior y bajar el filtro
hasta el nivel de la resinar evitando comprimirla. Dejando pasar todo el
sobrenadante. Desechar el eluido. (Nota 1).
7.-Verter el contenido de la muestra tratada y desechar el eluido.
8.-Lavar el tubo con 3 ml de agua destilada y verterlo en la micro columna y
desechar el eluido.
9.-Aadir a la columna agua destilada 10 ml y desechar el eluido.
10.-Aadir a la columna el reactivo 2 Amoniaco y recoger el eluido.

 10.-Agitar bien el eluido.

Colorimetra: Pipetear en tubos de ensayo
B. RVO.

B. PATRON PATRON

B. MX.

MX.

Eluido

2 ml

2 ml

Patron

0,1 ml

0,1 ml

Rvo. 2

2 ml

1,9 ml

1,9 ml

Rvo. C

0,05 ml

0,05 ml

0,05 ml

0,05 ml

0,05 ml

0,05 ml

Agitar bien y aadir

Rvo. B

0,05 ml

Agitar bien y dejar reaccionar durante 2 minutos a temperatura

ambiente 20 a 30

Rvo. C

0,05 ml

0,05 ml

0,05 ml

0,05 ml

0,05 ml

Agitar bien y leer la absorbancia a 360 nm la rxn esteble por 60 min

 Clculos:
Luego de simplificar la concentracin de volmenes usados en la formula
al final obtenemos:
Ao Muestra - Ao Bco. Muestra x 7,65 = mg/L
Ao Patrn - Ao Bco. Patrn
Finalmente la Cantidad de Metanefrinas en la orina de 24 horas se calcula
de la siguiente formula:
Metanefrina en mg/l x Vol. De orina 24 hrs. en Litros= mg. Metan./24 Hrs
Valores de Referencia:
Hasta 1 mg de metenefrina / 24 horas

Anlisis del Mtodo

Soporte : columna de plstico de 20 cm
Fase estacionaria: partculas resina ionizadas.

Fase Mvil: El Buffer tris, agua y amoniaco.

Revelador: Por espectrometra. Se forma vanillina
en el eluido como producto de la oxidacin de las
metanefrinas con el periodato en medio alcalino y
se mide a 360

CORTISOL LIBRE URINARIO

Lic. T. M. Carlos N. Ortega Tumay
H.N.E.R.M.-ESSALUD

GENERALIDADES
El cortisol se secreta por la corteza adrenal, junto con la aldosterona y las
hormonas sexuales.
Sigue un ritmo circadiano determinado por la ACTH hipofisaria, que a su
vez regula la secrecin de glucocorticoides.

Los ms altos se presentan aproximadamente de 6 a 8 a.m y los ms bajos

alrededor de la media noche.
La secrecin cuantitativa de glucocorticoides puede evaluarse mediante
el cortisol libre urinario cuando existe una sospecha de
hipercortisolismo. Evala la fraccin activa no unida a protenas.

La alteracin del ritmo circadiano del cortisol plasmtico y el aumento de

la eliminacin de cortisol son marcadores de enfermedad del eje hipothipfiso-adrenal.
Para descartar hipercortisolismo es necesario realizar tres determinaciones.
Entre un 8-15 % de pacientes con Sndrome de Cushing sus valores son
normales

METODOS PARA DOSAJE DE CLU

Cortisol Urinario
Electroquimioluminiscencia.
Mx. Orina de 24 Horas.
Valores Referenciales: 12-103 ug/24 Horas
Pacientes con Valores de 120-300 debe hacerse diagnostico diferencial
con pseudo-Cushing.

>300 diagnostico de sindrome de Cushing.

Nota: interferencias proteinas >10 g/dl.

 Cortisol libre urinario

RIA
Mx orina de 24 horas
Valores referenciales de 10-90 ug/ 24 hrs
El CLU no varia con la edad, es independiente del peso
El 1% de cortisol es secretado por la orina