BIOTECNOLOGIA

As enzimas, importantes componentes do metabolismo

de todos os seres vivos, tm a capacidade de promover
e acelerar reaes qumicas. Microrganismos
ou substncias com essa propriedade j eram usados
por populaes humanas muito antigas para modificar
alimentos fermentar uvas e fabricar o vinho,
ou alterar o leite e produzir queijo, por exemplo.
Depois que os cientistas desvendaram a atuao
das enzimas, estas passaram a ser cada vez mais
empregadas, com variadas finalidades.
Hoje, essas protenas especiais so teis inclusive
na indstria, no apenas na rea de alimentos,
mas em muitos outros setores.

EN
PODEROSA

Solange Ins Mussatto,

Marcela Fernandes
e Adriane Maria Ferreira Milagres
Departamento de Biotecnologia,
Escola de Engenharia de Lorena,
Universidade de So Paulo

e na natureza, as enzimas so protenas capazes de

promover e acelerar reaes qumicas, que regulam
grande nmero de processos biolgicos. Presentes
em microrganismos, animais e vegetais, elas so
usadas direta ou indiretamente pela humanidade h
milhares de anos, mas sua importncia s foi reconhecida em meados do sculo 19, quando cientistas
descobriram como atuam. A partir de ento, e sobretudo no sculo 20, aumentou rapidamente o conhecimento sobre tais substncias, e foram determinados os mecanismos de ao e as estruturas de
milhares delas.
Essa maior compreenso possibilitou o emprego
dessas protenas especiais em processos industriais
de diferentes reas: mdica, alimentcia, txtil, qumica, de papel e celulose e muitas outras. vantajoso usar enzimas na indstria, porque elas so naturais, no txicas e especficas para determinadas
aes. Alm disso, so capazes de alterar as caractersticas de variados tipos de resduos, contribuindo
para reduzir a poluio ambiental. O mercado brasileiro de enzimas, embora pequeno diante do mundial, apresenta grande potencial, em funo da
enorme disponibilidade de resduos agroindustriais
2 8 CINCIA HOJE vol . 41 n 2 42

e do dinamismo dos setores industriais citados

acima.
Nas clulas, as enzimas esto envolvidas em
todos os processos bioqumicos. Para atuar corretamente, porm, precisam de condies especficas,
pois so ativas apenas em uma faixa estreita de
acidez-alcalinidade (pH) e so sensveis a mudanas
nesse fator e na temperatura do meio.
Os microrganismos so a principal fonte de enzimas de aplicao industrial, mas diversas podem
ser obtidas de animais (pancreatina, tripsina, quimotripsina, pepsina, renina e outras) ou vegetais
(papana, bromelina, ficina e outras). Hoje, porm,
como possvel modificar geneticamente os microrganismos para que forneam qualquer enzima, a
tendncia substituir as produzidas por vegetais e
animais pelas de origem microbiana.
O uso de enzimas em processos industriais de
grande interesse, em especial devido facilidade de
obteno (por biotecnologia) e s vantagens em relao aos catalisadores (aceleradores de reaes) qumicos, como maior especificidade, menor consumo
energtico e maior velocidade de reao. Alm disso,
a catlise enzimtica tem outros benefcios, como o
aumento da qualidade dos produtos, em relao

PHILIP GOULD/CORBIS/LATINSTOCK

Produtos naturais encontrados em abundncia no corpo humano

BIOTECNOLOGIA

NZIMAS
MORTON BEEBE/CORBIS/LATINSTOCK

FERRAMENTA NA INDSTRIA

catlise qumica; a reduo dos custos de laboratrio

e de maquinrio, graas melhoria do processo; ou
a fabricao controlada de pequenas quantidades.

Atuao na produo de alimentos As

enzimas tm destacado papel no setor alimentcio,
pois podem influir na composio, no processamento e na deteriorao dos alimentos. Elas s vezes so
indesejveis: provocam, por exemplo, o escurecimento de frutas e vegetais ( o caso das polifenoloxidases),
o rano de farinhas (lipases e lipoxigenases) e o amolecimento de tecidos vegetais (enzimas pcticas).
Em certas situaes, porm, a deteco da atividade prejudicial de uma enzima em um produto
pode servir como indicador da eficincia de uma
operao. No leite pasteurizado, por exemplo, a
constatao da atividade de fosfatase indica que o
processo trmico no foi bem executado. Da mesma
forma, se a peroxidase est ativa em vegetais que
passaram pelo mtodo de secagem conhecido como
branqueamento, o processo foi ineficaz. Por outro
lado, existem vrios exemplos do uso de enzimas
com o objetivo de modificar matrias-primas e/ou
obter produtos especficos (ver Aplicaes em variados processos).

Medicamentos e anlises clnicas Vrias enzimas tm propriedades que permitem seu

uso como medicamentos. So exemplos as que tm
ao antibitica ou antiinflamatria (lisozima, bromelina, hialuronidase e outras), as que auxiliam a
terapia da leucemia (L-asparaginase) ou facilitam a
digesto (papana, bromelina, tripsina e outras). Em
geral, enzimas utilizadas com essa finalidade devem
ter pureza e especificidade altas, antigenicidade
baixa (para evitar reaes imunolgicas) e estabilidade em condies fisiolgicas.
Alm das aplicaes teraputicas, diversas enzimas so empregadas na sntese de frmacos (penicilina, por exemplo). As lipases, que degradam
gorduras, so teis em reaes qumicas necessrias
produo de remdios.
Na rea mdica, aplicaes de grande interesse
so o diagnstico e prognstico de doenas e o
acompanhamento do tratamento, por meio da deteco de enzimas em anlises laboratoriais. Alguns
desses diagnsticos so feitos, por exemplo, com
dosagens de enzimas como amilase (pancreatite
aguda), aspartato-aminotransferase e transaminase
glutmico-oxalactica (infarto, doenas hepticas e
musculares), aldolase (doenas musculares), creati- 4

A fermentao
de malte
( esquerda)
e de uva,
para a fabricao
de bebidas,
realizada
por enzimas de
microrganismos

outubro de 20 07 CINCIA HOJE 29

BIOTECNOLOGIA

APLICAES EM VARIADOS PROCESSOS

Na panificao, a enzima alfa-amilase promove a decomposio do amido,
que leva produo de maltose, aumentando a maciez e a textura da massa
e do miolo e mantendo o po fresco por mais tempo. J a amilase maltognica e a xilanase do estabilidade massa, enquanto a protease altera a elasticidade e a textura do glten e melhora a cor e o sabor do po. No processamento de amidos, enzimas como glicose isomerase, alfa-amilase, beta-amilase, pululanase e isoamilase convertem o amido em dextrose ou xaropes
ricos em acares simples.

A quebra das
longas molculas
da celulose, um
dos componentes
da madeira,
em fragmentos
cada vez menores
pode ser feita
em etapas,
por meio
da utilizao
de diferentes
enzimas

Na indstria de laticnios,
a quimosina promove a coagulao do
leite (para a produo de queijos),
a lactase decompe a lactose
em acares mais simples,
a protease quebra protenas de soro.
Neste e em outros setores,
as lipases decompem gorduras.

nacinase e creatina-fosfotransferase (infarto e doenas musculares), fosfatase cida (cncer da prstata

e metstase) e fosfatase alcalina (doenas hepticas
e sseas), entre muitas outras. A anlise enzimtica
muito importante, em alguns casos, para o estabelecimento da causa, da localizao e da extenso
da leso, para o controle do tratamento e para a
constatao da cura.

enzimas mais complexo (as hemicelulases) para sua

degradao. Tais enzimas incluem xilanases, que
rompem ligaes entre molculas de xilose; mananases, que quebram ligaes entre molculas de
manose; glucuronidases, que rompem ligaes entre
cidos urnicos e molculas de acares (como
xilose e manose), e outras.

Enzimas, celulose e papel Muitas enzimas

Celulose

interessam indstria de papel e celulose. Para

produzir papel, composto basicamente de fibras de
celulose, preciso picar a madeira, transform-la
em polpa, por processos qumicos, e retirar dessa
polpa a hemicelulose, a lignina, certas resinas e
outros componentes. Enzimas capazes de realizar
algumas dessas tarefas permitem, nessa indstria,
substituir produtos qumicos responsveis por srios
problemas ambientais.
Fungos e outros organismos que obtm alimento
(glicose) da madeira degradam a celulose por meio
da ao conjunta de trs grupos de enzimas denominadas celulases: (1) as endo-1,4-beta-glucanases,
que quebram a longa molcula de celulose, ao acaso, em variados fragmentos; (2) as exo-1,4-beta-glucanases, que dividem os fragmentos em pedaos
ainda menores; e (3) as 1,4-beta-D-glucosidases, que
degradam tais pedaos, liberando molculas simples
de glicose (ver figura). J a hemicelulose, por ter
estrutura qumica diferente, requer um conjunto de

30 CINCIA HOJE vol . 41 n 2 42

Endo - 1,4 - - glucanases

Exo - 1,4 - - glucanases

1,4 - - D - glucosidases

) Molcula de glicose

BIOTECNOLOGIA

Enzimas como papana, bromelina e ficina ajudam a amaciar

carnes, e outras so empregadas nos processos de produo
de bebidas alcolicas. No caso das bebidas destiladas, a
alfa-amilase e a glicoamilase decompem o amido. No caso
dos vinhos, a pectinase facilita a prensagem, a filtrao e a
clarificao e reduz o tempo de processamento. Nos dois tipos
de bebidas, as proteases quebram protenas. As cervejarias
usam diferentes enzimas para
liquefazer e fermentar a matriaprima (alfa-amilase), aumentar
o teor de certos acares (glicoamilase), aumentar a velocidade de filtrao (glucanase), remover compostos
indesejveis (pentosanases) e evitar a turbidez do
produto final (papana, bromelina ou ficina).

Na rea de

sucos de frutas,

a pectinase
facilita a extrao,
clarificao e
filtrao do suco, a
celulase liquefaz o
tecido vegetal e
permite extrair
pigmentos do fruto
e a glicoamilase
decompe o amido,
evitando turvao e
gelatinizao
durante o
processamento.

FOTOS SXC.HU

A lignina, por sua vez, degradada por duas classes de enzimas: algumas que produzem perxido
de hidrognio e outras (as fenoloxidases, divididas
em peroxidases e lacases) que precisam dessa substncia para atuar. Essa degradao contribui para o
branqueamento da polpa de celulose (ver Operrios
microscpicos em ao). Diversas outras enzimas
tm aplicao na indstria de papel e celulose, em
especial as lipases, que ajudam a remover impurezas
(resinas e outras), aumentando a produtividade do
processo e elevando a qualidade do produto final.

Tecidos com maior requinte Na indstria

txtil, a presena das enzimas tem crescido nas
ltimas dcadas. Elas podem atuar nas fases de
fiao, tingimento e acabamento dos tecidos. Nesse
ltimo caso, ajudam a limpar a superfcie do material, a reduzir as pilosidades e a melhorar a aparncia,
o brilho, o caimento, a resistncia e a estabilidade.
Em outra aplicao relevante, certas enzimas (proteases) conferem resistncia ao encolhimento s fibras
da l. Em muitos processos txteis, substncias qumicas sintticas podem ser substitudas por enzimas, que tm ao mais especfica e geram benefcios ambientais, pois so biodegradveis e dependem
de menor consumo de energia.
A celulase, por exemplo, torna os tecidos mais
lisos e macios. Pode ainda produzir a aparncia lavada dos jeans, destruindo menos as fibras do que a
pedra-pomes, tambm empregada com esse fim. Lipases, proteases e nitrilases melhoram a capacidade

de absoro de tintas por fibras sintticas, e amilases

eliminam gomas usadas para aumentar a resistncia dos fios no processo de tear. Outras enzimas
(peroxidases e catalases) reduzem os resduos de
substncias usadas no alvejamento de tecidos.

Aumento do poder de limpeza cada

vez maior o nmero de produtos de limpeza que
contm enzimas, em especial amilases, proteases,
lipases e celulases. Cada uma delas ataca um tipo
de substncia, tornando-a solvel em gua e facilitando sua remoo: as amilases atuam sobre o
amido (presente em manchas de molhos, frutas,
chocolate e outras), as proteases quebram protenas,
as lipases degradam gorduras e as celulases ajudam
a remover fibrilas de celulose que aparecem com o
tempo nos tecidos (essa remoo melhora o brilho
e a maciez das roupas).
A atuao conjunta dessas enzimas amplia muito a ao dos detergentes. A combinao, por exemplo, de lipases com proteases e celulases facilita a
remoo de manchas como as de batom, frituras,
manteiga, azeite, molhos, e mesmo os difceis pontos encardidos de colarinhos e punhos. Quando
adicionadas a detergentes de uso hospitalar, domstico e industrial, tais enzimas agem digerindo e
dissolvendo resduos orgnicos (sangue, fezes, urina,
vmitos e outros), higienizando instrumentos cirrgicos e partes (tubos e outras) de aparelhos (endoscpios e outros), e removendo contaminantes das
roupas hospitalares. Esses resduos podem ser re- 4
outubro de 20 07 CINCIA HOJE 3 1

BIOTECNOLOGIA

movidos com lavagem a altas temperaturas, sem

enzimas, mas o emprego destas permite reduzir a
temperatura, o consumo de gua e a energia mecnica na limpeza e aumenta sua eficcia. Detergentes
com enzimas podem ainda substituir produtos
custicos, cidos e solventes txicos (que agridem
o ambiente e desgastam materiais e instrumentos).

Novos cosmticos no mercado

Outra
rea em que as enzimas vm ganhando espao a
de cosmticos. J h enzimas incorporadas formulao de vrios produtos presentes no mercado, como
tinturas, depilatrios, alisantes de cabelo, sais de
banho, dentifrcios, desodorantes, produtos anticaspa, curativos e outros, ou aplicadas em limpezas de
pele (descamao) e produtos aromticos. Enzimas

OPERRIOS MICROSCPICOS
EM AO
A busca por microrganismos que produzem enzimas capazes de
decompor a celulose (celulases), a hemicelulose (hemicelulases)
e a lignina (ligninases) e que, por ter caractersticas variadas, possam ser usadas em processos industriais, vem sendo feita pelo
grupo de pesquisas em microbiologia e bioqumica do Departamento de Biotecnologia da Escola de Engenharia de Lorena (EEL/
USP). Esses estudos visam determinar com preciso como as enzimas encontradas atuam sobre os materiais lignocelulsicos,
contribuindo para o desenvolvimento de tecnologias biolgicas
de polpao da madeira e branqueamento de polpas celulsicas
no Brasil.
Em 1998, um dos trabalhos revelou que a capacidade degradadora da cepa brasileira do fungo Thermoascus aurantiacus, isolada
de pilhas de cavacos de eucalipto em uma empresa de polpa e
papel, tem caractersticas diferentes das observadas na maioria
das cepas desse fungo conhecidas anteriormente. Em 1999, outros
trabalhos revelaram que essa cepa apresenta alta produo da
enzima xilanase (2.880 micromoles por minuto e por grama de
substrato) durante a fermentao em estado slido de bagao de
cana-de-acar. J no farelo de trigo, esse fungo produziu cerca de
2.700 micromoles/min da enzima por grama de substrato. Em 2004
foi demonstrado que a produo de xilanase por T. aurantiacus depende principalmente da natureza e concentrao do substrato.
No ano passado, estudo sobre a biodegradao de madeira de
eucalipto (Eucalyptus grandis) e pinho (Pinus taeda) pelo fungo
Ceriporiopsis subvermispora revelou nveis diferenciados (para
cada tipo de rvore) de secreo de hemicelulases e celulases.
Em sntese, alguns trabalhos desenvolvidos pelo grupo de pesquisa da EEL/USP indicaram que, quanto mais extensa a degradao da biomassa vegetal (ou seja, a infestao pelo fungo),
maior a taxa de produo das enzimas pelo fungo.

32 CINCIA HOJE vol . 41 n 2 42

que quebram protenas tm recebido ateno especial da cosmetologia, com destaque para a papana,
capaz de promover a penetrao de compostos na
pele e atuar como agente de raspagem e depilao
em produtos de uso local. importante, no desenvolvimento do cosmtico, conhecer as caractersticas da enzima usada, dos demais componentes da
frmula e do recipiente onde acondicionado,
alm das condies de armazenamento, para evitar
reaes entre essas substncias, que prejudicariam
a eficcia e a segurana do produto.

Uso no tratamento de efluentes O desenvolvimento das chamadas tecnologias limpas, ou

seja, que reduzem o impacto ambiental de uma
atividade industrial, tambm conta com a participao de enzimas. Um exemplo o uso na produo
de polpa de celulose e no branqueamento desta.
Combinadas com tcnicas de processamento, as
enzimas permitem reduzir ou at eliminar o uso de
cloro nessas atividades industriais, evitando a emisso de substncias organocloradas altamente txicas e mesmo cancergenas para o ambiente.
Enzimas so aplicadas ainda no tratamento de
efluentes e resduos industriais. As guas residuais
das indstrias alimentcias, por exemplo, contm
gorduras slidas ou lquidas (graxas e leos), que
causam srios problemas de poluio, ao formar
filmes na superfcie dos corpos receptores (impedindo o fluxo do oxignio necessrio vida aqutica) e ao causar entupimentos. A adio de lipases
a esses efluentes gera substncias mais simples,
facilmente degradadas, evitando tais problemas.
A indstria txtil uma das maiores geradoras
de efluentes lquidos, em geral txicos e contendo
corantes. Tais resduos so normalmente tratados
por processos fsico-qumicos que precipitam e/ou
coagulam parcialmente os resduos, seguidos de
tratamento biolgico com lodos ativados, que contm
bactrias capazes de degradar as substncias orgnicas ainda no removidas. Embora esse sistema
retire at cerca de 80% dos compostos poluentes, o
lodo acumulado, com elevada concentrao de corantes, no pode ser reaproveitado. Por isso, tm
sido estudados vrios microrganismos capazes de
degradar poluentes txteis com eficincia e baixo
custo. Entre eles esto Bacillus subtillis (que oxida
certos corantes), Phanerochaete chrysosporium,
Pleorotus ostreatus, Trametes (versicolor e hirsuta),
Coriolus versicolor, Pycnoporus (sanguineus e cinnabarinus), Phlebia tremellosa, Neurospora crassa
e Geotrichum candidum (todos degradam variados
corantes e mineralizam poluentes resistentes degradao), Agaricus bispora (produz a enzima tirosinase, que altera a estrutura dos corantes, levando
sua precipitao, o que facilita a remoo).

BIOTECNOLOGIA

NOVO NORDISK

As pesquisas
feitas em uma
grande empresa
produtora
de enzimas
industriais
utilizam
sofisticados
mtodos
computacionais

SUGESTES
PARA LEITURA

Essenciais nos biocombustveis

Os
exemplos mais comuns de biocombustveis, que
podem ser empregados nos motores de forma isolada ou misturados com combustveis convencionais, so o biodiesel, o bioetanol e o biogs. A utilizao dessas fontes de energia renovveis, biodegradveis e no txicas vem crescendo em todo o
mundo, o que aumenta a importncia do uso de
enzimas em sua produo.
O primeiro pode ser produzido a partir de variadas fontes, como leos vegetais crus e refinados,
resduos da extrao de leos vegetais, leos usados
em cozinha e gorduras animais, com o uso de enzimas do tipo lipases, com alto rendimento. No caso
do bioetanol, usado h dcadas no Brasil como
combustvel para automveis, a degradao enzimtica da biomassa vegetal (principalmente bagao e
palha de cana-de-acar) bastante estudada hoje.
Tal processo consiste no uso de celulases para quebrar as longas molculas de celulose, gerando molculas menores (acares) que em seguida so
fermentadas e transformadas em etanol. O bioetanol
considerado mais potente que o lcool comum e
at 20% menos poluente. No entanto, o custo das
enzimas empregadas no processo precisa ser reduzido para tornar a produo de bioetanol de celulose economicamente vivel.
O biogs uma mistura gasosa combustvel que
pode ser produzida a partir de diversos resduos
orgnicos (esterco de animais, lodo de esgoto, lixo
domstico, resduos agrcolas, efluentes industriais
e plantas aquticas) por digesto anaerbia, ou seja,
por degradao de matria orgnica pela ao de

bactrias na ausncia de oxignio. O biogs um

combustvel muito menos poluente que o carvo, a
gasolina e o diesel, pois sua combusto no libera
fuligem nem monxido de carbono.

O mercado de enzimas O mercado mundial

de enzimas industriais estimado hoje em US$ 2,3
bilhes anuais e tem trs segmentos: enzimas tcnicas (destinadas a indstrias de tecidos e de produtos de limpeza), enzimas para alimentos e bebidas e
enzimas para rao animal. As principais enzimas de
aplicao industrial so proteases, amilases, lipases,
celulases, xilanases e fitases, e as maiores empresas
produtoras so europias: Gist-Brocades (Holanda),
Genencor International (Finlndia) e Novo Nordisk
(Dinamarca). A ltima detm, sozinha, cerca de metade do mercado mundial de enzimas industriais.
No Brasil, em 2005, as importaes de enzimas chegaram a US$ 31 milhes e as exportaes a
US$ 3 milhes. As mais importadas foram amilases
(US$ 4 milhes), seguidas de proteases (US$ 2,5
milhes). O mercado brasileiro de enzimas, embora
ainda pouco representativo (cerca de 2% do total
mundial), revela grande potencial, devido enorme
gerao de resduos agroindustriais e ao dinamismo
das indstrias de alimentos, medicamentos, tecidos
e celulose/papel. A reduo do custo de produo
de enzimas favorecida, no pas, pela possibilidade
de bioconverso de subprodutos agrcolas como farelo de trigo, farelo de algodo, casca de soja e outros.
Acredita-se, por isso, em um aumento rpido do uso
de enzimas, de forma geral, e em particular em
processos industriais, no pas.

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outubro de 20 07 CINCIA HOJE 3 3