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ciclo celular y Duplicacin del ADN

Las clulas de los distintos organismos pasan durante su vida por


distintos perodos, cada uno de ellos caracterstico y claramente
diferenciado.
Cada tipo celular cumple con sus funciones especficas durante la
mayor parte de su vida, creciendo gracias a la asimilacin de
materiales provenientes de su ambiente y con ellos sintetiza nuevas
molculas por medio de complejos procesos regulados por su material
gentico.
Cuando una clula aumenta hasta llegar a un determinado tamao, su
eficiencia metablica se torna crtica, entonces se divide. En los
organismos pluricelulares, se produce un crecimiento a partir de una
clula (huevo o cigoto) como as tambin se aumenta la masa tisular y
se reparan los tejidos lesionados o desgastados, por aumento del
nmero de clulas.
Las nuevas clulas originadas en esta divisin poseen una estructura y
funcin similares a las clulas progenitoras, o bien derivadas de ellas.

Fig. 12.1 - Ciclo de Divisin Celular


En parte son similares porque cada clula nueva, recibe
aproximadamente la mitad de organoides y citoplasma de la clula
madre, pero en trminos de capacidades estructurales y funcionales lo
importante es que cada clula hija, reciba una rplica exacta del
material gentico de la clula madre.
Durante la vida celular, las clulas pasan por un ciclo regular de
crecimiento y divisin. A esta secuencia de fases se la denomina ciclo
celular y en general consta de un perodo donde ocurre un importante

crecimiento y aumento de la cantidad de organoides (interfase) y un


perodo de divisin celular (mitosis o meiosis).
La interfase involucra perodos donde la clula realiza los procesos
vitales propios de su funcin. Durante ella, se producen tambin
fenmenos a nivel nuclear imprescindibles para la divisin posterior.
Cronolgicamente podemos dividir la interfase en tres etapas G 1, S y
G2.
Haciendo un esquema del ciclo celular, el tiempo en que transcurre
cada una de las etapas se representa en la Fig. 12.2.
Es necesario sealar que existen excepciones a este ciclo, ya que no en
todas las clulas los perodos tienen la misma duracin. Incluso si
consideramos una poblacin celular homognea (clulas del mismo tipo),
existen variaciones particulares. Siempre que se habla de tiempos
determinados, se hace considerando los promedios de cada tipo
celular.
Tambin existen clulas que dejan de dividirse por largos perodos o
bien permanentemente. Por ejemplo, las neuronas permanecen luego de
la maduracin del tejido nervioso en una etapa especial denominada G 0,
donde las clulas entraran como alternativa a G 1. En la actualidad es
frecuente referirse a este tipo de clulas como "no cclicas" o
detenidas en G1, ya que no es seguro que las clulas que no se dividen
pasen por un solo estado.

Fig. 12.2 - Fases del Ciclo Celular

ETAPAS Y CARACTERSTICAS
Como ya se mencion, una clula tipo pasa a lo largo de su vida por
etapas (G1, S y G2) antes de dividirse. Las caractersticas ms
relevantes de cada una de las mismas son:
Etapa G1: Esta etapa que sucede a la divisin celular es la ms variable
en duracin. Las clulas hijas recientemente originadas presentan una
gran actividad metablica producindose un aumento acelerado del
tamao celular. Los organoides de la clula precursora han sido
repartidos de manera ms o menos equitativa entre las clulas hijas,
deben entonces aumentar de tamao y tambin en nmero para
mantener las caractersticas de su tipo celular. Se sintetizan as
ribosomas y microtbulos a partir de las protenas y otras molculas
que la conforman. Los organoides del sistema de endomembranas,
aumentan considerablemente de tamao, ya que ambas clulas hijas
han recibido parte de estos organoides. Sin embargo, pueden ser
sintetizados de nuevo en caso de no existir precursores. Esto no
ocurre con mitocondrias y cloroplastos que se originan por divisin de
estas estructuras preexistentes. Como se recordar ambos organoides
contienen ADN y ribosomas que les permite dividirse de forma

relativamente independiente del ncleo celular.


Todos los procesos de sntesis de nuevos organoides o aumento de
tamao de los existentes, son regulados mediante activacin de
complejos enzimticos en un momento determinado.
En este perodo se observa, a su vez, una gran sntesis de ARNm como
as tambin ARNt y ARNr. Estos cidos sern utilizados para la
sntesis de protenas estructurales, para la construccin y o aumento
de los organoides, como as tambin la produccin de enzimas
necesarias para dicha sntesis. Cabe destacar que durante este
perodo tambin se sintetizan las enzimas que sern utilizadas en la
etapa siguiente, es decir en la duplicacin del ADN, como as tambin
molculas precursoras de los cidos nucleicos.
Cuando las clulas dejan de crecer (si se agotan los nutrientes o por
inhibicin por contacto) lo hacen en G1. Esto implica que tambin se
sintetizan las sustancias que estimulan o inhiben distintas fases del
ciclo celular.
Etapa S: el perodo S o de sntesis de ADN tiene como caracterstica
fundamental la sntesis de nuevo material gentico, para que las clulas
hijas tengan la misma dotacin. Sin embargo persisten los altos ndices
de sntesis de ARN para obtener enzimas requeridas en la sntesis de
histonas que formarn parte de la macroestructura del ADN y
tubulinas relacionadas con el proceso de divisin celular.
Etapa G2: En esta fase, ya con el ADN duplicado, la clula ensambla las
estructuras necesarias para la separacin de las clulas hijas durante
la divisin celular y la citocinesis (separacin del citoplasma).
Etapa M: Durante M, la envoltura nuclear se desintegra, la cromatina
se condensa en forma creciente hasta ser visible los cromosomas al
microscopio ptico. Estos cromosomas formados cada uno por dos
cromtidas (cromosomas duplicados) pasaran por cada una de las fases
de la divisin celular (mitosis o meiosis) para concluir con la formacin
de las clulas hijas, cada una con una nica copia de su ADN
(cromosomas sin replicar) , que marcan el inicio de un nuevo ciclo.
SISTEMA DE CONTROL DEL CICLO CELULAR
El sistema de control del ciclo celular es un dispositivo bioqumico
compuesto por un conjunto de protenas reguladoras interactivas:
las ciclinas y las quinasas dependientes de ciclinas que inducen y
coordinan los procesos bsicos del ciclo, como la duplicacin de ADN y

la divisin celular, a los que denominamos procesos subordinados.


Durante un ciclo tpico, el sistema de control est regulado
por factores de retraso que pueden frenar el ciclo en puntos
determinados denominados puntos de control. En estos puntos, las
seales de retroalimentacin que contienen informacin sobre los
procesos subordinados pueden detener momentneamente el avance
del ciclo, evitando el inicio del proceso siguiente antes que el
precedente haya terminado. Sobre dichos factores tambin actan
seales del entorno como puede ser una hormona o un factor de
crecimiento.
Una analoga que puede ayudarnos a comprender este mecanismo es
comparar al sistema de control del ciclo celular con el funcionamiento
de una lavadora automtica (1. Alberts y col -pg929-930), el programador
de la lavadora slo avanza a travs de los diferentes pasos del ciclo de
lavado (etapas del ciclo celular), si recibe determinadas seales.
Adentro de la lavadora hay sensores que miden el nivel de agua o jabn
que ingresan. Estos sensores envan seales que pueden provocar el
retraso o la interrupcin del ciclo de lavado. De igual manera en la
clula, las seales generadas en los procesos subordinados (por ej. la
sntesis de ADN) o por el entorno, detienen el ciclo.
A continuacin pasaremos a describir las protenas reguladoras, el
mecanismo de regulacin y los puntos de control del ciclo celular.
PROTENAS REGULADORAS DEL CICLO CELULAR
El pasaje de una clula a travs del ciclo es controlado por protenas
citoplasmticas. Los principales reguladores del ciclo en clulas
animales son:
1.
Las ciclinas, protenas que controlan la actividad de sus
proteinquinasas dependientes. La concentracin de ciclinas vara en
forma cclica, aumentando o disminuyendo durante el transcurso del
ciclo celular. Esto se debe a variaciones en la velocidad de degradacin
de la ciclina, dado que la velocidad de sntesis es casi constante
durante todo el ciclo. En los mamferos existen 6 ciclinas como mnimo,
denominadas A, B, C, D, E y F (Fig. 12.4b), pero nosotros las
clasificaremos como ciclinas de G1 y ciclinas mitticas. Las ciclinas G1
se unen a sus quinasas dependientes de ciclinas (Cdk2) durante G1
siendo necesarias para superar el punto de control G1 y pasar a la fase
S. Las ciclinas mitticas se fijan a la quinasa Cdk1 durante G2, siendo
necesaria su presencia para que el ciclo supere el punto de control G2

y se inicie la mitosis. (Fig. 12.3 )


2.
Las quinasas dependientes de ciclinas (CDK), enzimas que
mediante la fosforilacin de determinadas protenas desencadenan los
procesos subordinados del ciclo celular. En los mamferos se conocen 5
CDK las cuales forman tres grupos principales:

Fig. 12.3 - Complejo ciclina-quinasa dependiente de ciclina activo


(ciclina-CDK)

CDK de G1 (Cdk2)

CDK de fase S (Cdk2)

CDK de fase M (Cdk1)

A diferencia de la concentracin de ciclinas, la concentracin de CDK


se mantiene durante todo el ciclo celular, por permanecer constantes
tanto la velocidad de sntesis como la de degradacin (Fig. 12.4 y 12.5)
Las CDK se activan slo cuando se unen a las ciclinas para formar
complejos, por lo que requieren un nivel umbral para desencadenar la
transicin a la fase siguiente del ciclo celular.
3.
El Complejo Promotor de la Anafase (APC) y otras enzimas
proteolticas. El APC desencadena los eventos que conducen a la
destruccin de las cohesinas[1] permitiendo a las cromtidas hermanas
separarse e iniciando la degradacin de las ciclinas mitticas.

Fig. 12.4 -Generalizacin del sistema de control del ciclo celular en


eucariotas

Fig. 12. 5 - Ciclinas y CDK en un ciclo celular de vertebrados


MECANISMO DE REGULACIN DEL CICLO CELULAR
Al finalizar la mitosis aumenta la expresin de la ciclina G1 (E), esta
ciclina se unir a la su quinasa (Cdk2) formando un complejo activo
conocido como factor promotor de Fase S (FPS). Este FPS slo
puede actuar sobre cromosomas en estado Pre-Replicativo. As se
denominan por poseer sobre cada origen de replicacin un complejo
multiproteico llamado Pre-Replicativo.
Los orgenes de replicacin (ORI) se presentan en nmero de 20 a 80
sobre cada lazo de cromatina y se caracterizan por poseer una
secuencia
comn
denominadasecuencia
de
replicacin
autnoma (ARS) formada por dos secuencias "GAGGC" sobre las que se
halla unido a lo largo de todo el ciclo celular, el complejo de
reconocimiento del origen de replicacin (ORC), uno de los complejos
protecos que forma parte del complejo Pre-Replicativo (PreR). El
segundo componente del complejo PreR es la protena Cdc6p (cell
division cycle protein), que se sintetiza en G1 e inserta sobre los
orgenes de replicacin al ltimo componente, lasprotenas de
mantenimiento de los minimicrosomas (MCM). (Fig. 12.6)
El nivel creciente de FPS al inicio de la fase S induce la apertura de los
orgenes de replicacin, activando a las molculas responsables de la

sntesis de
componente
sntesis, y
componente

ADN e induciendo la separacin del complejo Pre-R del


Cdc6p y MCM. Separados estos componentes, se inicia la
por lo tanto el FPS no se requiere ms, siendo su
lbil, la ciclina de G1, degradada en los proteosomas.

Los cromosomas a partir de este momento se denominarn cromosomas


Post-Replicativos (slo presentan asociado a los orgenes de
replicacin el ORC). Los cromosomas se mantendrn en estado Post-R
hasta el inicio de la anafase.
Degradadas las ciclinas G1, el nivel de ciclinas mitticas aumenta.
Un nuevo participante entra al ciclo, el complejo promotor de la
mitosis, FPM, formado por las ciclinas mitticas ms las quinasas
dependientes de ciclinas de M (Cdk1). ste inicia el ensamblado del
huso mittico, la desintegracin de la envoltura nuclear y la
condensacin de los cromosomas, al inducir la fosforilacin de
diferentes sustratos como las lminas nucleares, conduciendo a la
clula a la metafase.
A esta altura del ciclo, el FPM activa el complejo promotor de
la Anafase, APC, que permite la separacin de las cromtides
hermanas y su migracin a los polos (anafase). As se completa la
mitosis, se destruyen las ciclinas de fase M y se activan las ciclinas de
G1 para el prximo ciclo celular.

Fig. 12.6 - Modelo simplificado propuesto para la replicacin de


cromosomas eucariotas

CONTROL DE CALIDAD DEL CICLO CELULAR (Fig. 12.7)


Durante el ciclo celular, la clula pasa al menos tres puntos de control
(checkpoints):

Punto de control G1, en este punto el sistema de control de


la clula pondr en marcha el proceso que inicia la fase S. El sistema
evaluar la integridad del ADN (que no este daado), la presencia de
nutrientes en el entorno y el tamao celular. Aqu es donde
generalmente actan las seales que detienen el ciclo (arresto
celular) .

Punto de control G2, en l se pone en marcha el proceso que

inicia la fase M. En este punto, el sistema de control verificar que la


duplicacin del ADN se halla completado (que no este daado), si es
favorable el entorno y si la clula es lo suficientemente grande para
dividirse.

Punto de control de la Metafase o del Huso, verifica si los


cromosomas estn alineados apropiadamente en el plano metafsico
antes de entrar en anafase. Este punto protege contra prdidas o
ganancias de cromosomas, siendo controlado por la activacin del APC.

Fig. 12.7 - Puntos de Control e Ingreso de la informacin Reguladora al


Sistema de Control del Ciclo Celular

Protena p53, el guardin del genoma


Como hemos mencionado en los prrafos precedentes, tanto en el
punto de control G1 como G2 se verifica la integridad del ADN. Ante la
presencia de ADN daadose genera una seal que retrasa la entrada
en fase M. El mecanismo depende de una protena llamada p53, que se
acumula en la clula en respuesta a las alteraciones de ADN,
deteniendo el sistema de control en G1 y por lo tanto impidiendo la
posterior entrada en mitosis. El gen p53 es uno de los genes
supresores de tumores ms conocidos, que no slo detiene el ciclo
(arresto celular), sino tambin participa en la apoptosis (muerte
celular programada) forzando a las clulas al suicidio cuando el dao en

el ADN es irreparable.
Las clulas que presentan los dos alelos del gen p53 mutados,
tendrn protena p53 no activa y por lo tanto continuarn
dividindose a pesar del dao en su genoma, por lo tanto
desarrollarn cncer. Las mutaciones del gen p53 presenta una alta
incidencia en la mayora de los cnceres humanos.

Cmo acta la p53?


Cuando el ADN presenta un dao "limitado", aumentan los niveles de
protena p53. Dicha protena activa la transcripcin del gen p21, que
codifica a la protena p21. Esta ltima protena ejerce su efecto
inhibidor unindose al complejo ciclina-Cdk2 y deteniendo el ciclo.
Cuando el ADN es reparado, la protena p53 se libera del promotor del
gen p21, provocando el descenso en los niveles de p21. Esto permite
restaurar la actividad del complejo ciclina-Cdk2.

Fig. 12.8 - Accin de la Protena p53 en el Control del Ciclo Celular

ONCOGENES Y CNCER
Los genes supresores de tumores, codifican para productos celulares

que inhiben la proliferacin celular. Para impedir el efecto protector


que ejercen sobre el genoma, se requiere la mutacin de sus dos alelos.
Los genes conocidos como protooncogenes codifican protenas que
estimulan la divisin celular, por ejemplo, factores del crecimiento o
receptores de factores del crecimiento.
La mutacin de uno de los dos alelos que codifican para un
protooncogen, lo transforma en un oncogen capaz de originar
productos celulares que estimulan la divisin celular de forma
incontrolada conduciendo al cncer, con alteracin de los mecanismos
de control del ciclo celular.
En la siguiente tabla se mencionan a titulo informativo los oncogenes y
genes supresores de tumores mejor conocidos por su expresin
durante el ciclo celular.

Tabla 12.1 - ALGUNOS GENES RELACIONADOS CON CNCERES EN


HUMANOS

Genes para factores de crecimiento o sus receptores

PDGF

Codifica el Factor de crecimiento derivado de


las plaquetas. Responsable de glioma (un cncer
del cerebro)

erb-B

Codifica al Factor de crecimiento epidrmico.


Relacionado con gliobastoma (cncer del cerebro) y
cncer de mama.

erb-B2

Codifica receptor de factor de crecimiento.


Relacionado con cncer de mama, glndulas salivales
y ovario.

RET

Codifica receptor de Factor del crecimiento.


Relacionado con cncer de tiroides.

ONCOGENES

Genes para transductores citoplasmticos en vas


estimuladoras

Ki-ras

Responsable de cncer de pulmn, ovario, colon y


pncreas.

N-ras

Relacionado con leucemias.

Genes para factores de transcripcin que activan genes


promotores del crecimiento

c-myc Relacionado con leucemias y cnceres de estmago,


pulmn y mamas

N-myc

Relacionado con neuroblastoma (cncer de clulas


nerviosas) y glioblastoma

L-myc

Relacionado con cncer de pulmn.

ONCOGENES

Genes para otros tipos de molculas

Bcl-2 Codifica para una protena que normalmente bloquea


la apoptosis. Relacionado con linfoma de clulas
foliculares B.

Bcl-1

Tambin llamado PRADI. Codifica la ciclina D1, un


ciclina reguladora del ciclo celular. Relacionada con
cncer de mama, cabeza y cuello.

MDM2 Codifica un antagonista de la protena p53. Participa


en sarcomas y otros cnceres.

GENES

Genes de protenas citoplasmticas

SUPRESORES
DE TUMORES
APC

Relacionada con cncer de coln y estmago.

DPC4

Codifica para una molcula transductora en una va


que inhibe la divisin celular. Relacionada con cncer
pancretico.

NF-1

Codifica para una protena que inhibe a la protena


Ras. Relacionada con neurofibroma y
feocromocitoma (cncer del sistema nervioso
perifrico) y leucemia mieloide.

NF-2

Relacionado con meningioma y ependinoma


(encfalo) y schwanoma (nervios perifricos)

Genes de protenas nucleares

MTS1

Codifica para la protena p16, uno de los frenos del


sistema de control del ciclo celular. Relacionada con
muchos cnceres.

RB

Codifica para la protena RB (retinoblastoma). Esta


protena es uno de los principales frenos en el ciclo
celular.

p53

Codifica para la protena p53, la cual detiene la


divisin celular e induce a las clulas anormales al
suicidio (apoptosis). Relacionado con la mayora de
los cnceres .

WT1

Relacionado con el Tumor de Wilms del rin.

Genes que codifican protenas de ubicacin an no

determinada

BRCA1

Relacionado en cnceres de mama y ovario.

BRCA2

Relacionado con cncer de mama.

VHL

Relacionado con cncer de clulas renales.

DUPLICACIN DEL ADN


CARACTERSTICAS DE LA DUPLICACIN DEL ADN
Aunque los principios generales de la duplicacin o replicacin del ADN
son sencillos y pueden considerarse como consecuencia directa de su
estructura, el proceso requiere una maquinaria compleja que contiene
una gran cantidad de enzimas y protenas que actan en conjunto.

Fig. 12.9 - La duplicacin del ADN se produce previo desenrollamiento


de las dos cadenas de la doble hlice, usando cada una como molde para
sintetizar las nuevas cadenas.

1.

MLTIPLES PUNTOS DE ORIGEN

Los cromosomas eucariontes tienen una gran cantidad de ADN, el cual


se halla contenido en dos molculas lineales, una para cada cromtide.
Si estas molculas se replicasen a partir de un sitio nico de origen, la
etapa S de la Interfase sera extremadamente larga. Las clulas
eucariontes resuelven este problema disponiendo de mltiples sitios de
origen de la replicacin en cada cromosoma. En ellos, el ADN presenta
secuencias especiales de nucletidos. Adems todos los orgenes
tienen en comn secuencias conservadas de aproximadamente doce
pares de nucletidos, llamados ARS (autonomus replication secuence).

Fig. 12.10 - La replicacin siempre comienza en los sitios de origen en


cada cromosoma. En ellos el ADN presenta secuencias especiales de
nucletidos
2.

DESENROLLAMIENTO DE LAS CADENAS DE ADN

En cada cromosoma, las dos cadenas del ADN se encuentran arrolladas


una a la otra como los hilos de una soga. Si tratamos de separarlas, la
soga debe apretarse ms en las vueltas restantes o girar. Algo similar
ocurre en el ADN, cuando las cadenas complementarias se separan
para iniciar la duplicacin. En ese momento aumenta la tensin torsional
en el sector no duplicado de la doble hlice.

Fig. 12. 11 - Separacin progresiva de las dos cadenas de ADN a nivel

de la horquilla de replicacin y su posible consecuencia biolgica.


El desenrollamiento es realizado por las enzimas ADN-helicasas, las
cuales recorren la hlice desenrollando las hebras del ADN a medida
que avanzan. Una vez separadas, las cadenas se combinan con
las protenas SSB, llamadas tambin protenas desestabilizadoras, que
evitan el autoapareamiento entre las bases complementarias
libremente expuestas.

Fig. 12.12 - Cadenas adelantada y retrasada del ADN durante la


replicacin. La helicasa separa a las dos cadenas del ADN y las
protenas SSB evitan autoapareamientos entre las bases
complementarias libremente expuestas en la cadena atrasada.
A medida que la enzima helicasa abre la doble hlice, dos enzimas
complementarias: la topoisomerasa I y la topoisomerasa
II o girasa, van disminuyendo la tensin torsional acumulada por el
superenrollamiento en el sector no replicado de la doble hlice.
La topoisomerasa I primero corta una de las cadenas del ADN, luego
la cadena cortada gira una vuelta en torno a su propio eje y finalmente
vuelve a unir los extremos cortados.
La topoisomerasa II corta las dos cadenas, las cuales luego de girar
una vuelta alrededor del eje de la doble hlice, restablecen sus
uniones.
Ambas enzimas utilizan energa del ATP y se comportan

como nucleasas (cortando las cadenas de ADN) y luego


como ligasas (restableciendo las uniones fosfodister).
Las topoisomerasas I y II se diferencian no slo porque la primera
corta una de las cadenas y la segunda corta las dos, sino tambin
porque la topoisomerasa I realiza desenrollamientos de corto alcance y
la girasa abarca una extensin de ADN bastante mayor.

Fig. 12.12 - Efecto hipottico de la topoisomerasa II para evitar el


superenrollamiento que se produce en el ADN como consecuencia de la
separacin progresiva de sus cadenas.

3.

LA DUPLICACIN DEL ADN ES BIDIRECCIONAL

Al abrirse la doble hlice se forma una burbuja de replicacin, cuyo


tamao aumenta a medida que avanza la separacin de las dos cadenas
del ADN, fenmeno que se produce en ambos extremos de la burbuja
en forma simultnea. Se establece de este modo, en cada uno de los
extremos, una estructura en forma de Y, a la que llamamos horquilla de
replicacin, cuyos brazos representan a las cadenas ya separadas de
ADN y el tronco la doble hlice en vas de separacin. As cada burbuja
tiene dos horquillas de replicacin que a partir de un punto de origen
comn avanzan en direcciones opuestas. Las horquillas desaparecen
cuando se van integrando a las burbujas contiguas. Las horquillas que
recorren los telmeros desaparecen cuando se separa el ltimo par de
nucletidos.
El segmento de ADN que se sintetiza a partir de un origen de
replicacin (con sus dos horquillas), lo llamamos replicn. De este modo

la replicacin del ADN termina cuando se ensamblan los sucesivos


replicones. Esto permite que el ADN se sintetice en un tiempo
bastante breve para el ciclo de vida de una clula.

Fig. 12. 14 - Esquema que muestra dos replicones contiguos y los puntos
donde se origina la replicacin (flechas). Puede observarse el carcter
bidireccional de la replicacin y los sectores donde el ADN se sintetiza
en forma continua y discontinua.
4.

LA SNTESIS DE ADN ES DISCONTINUA

Una de las caractersticas de las ADN-polimerasas es que slo pueden


actuar en direccin 5
3, por agregado de nucletidos en el
extremo 3 de las cadenas nuevas. Como vimos, a medida que se
separan las cadenas progenitoras en la horquilla de replicacin, una
presenta sus nucletidos en direccin 5
3 y la otra en direccin
3
5. De manera que la primera al ser copiada debera formar una
cadena hija en sentido 3
5, algo que las polimerasas no pueden
hacer.
Las clulas solucionan esta situacin utilizando estrategias distintas en
la construccin de cada una de las nuevas cadenas. La cadena hija que
se form en direccin 5'
3 se construye en forma continua
mediante el agregado de nucletidos en el extremo 3 a medida que
avanza la horquilla de replicacin. En cambio la otra cadena hija es
sintetizada de manera discontinua, en pequeos tramos, llamados
fragmentos de Okazaki, los cuales se unen entre s a medida que se
sintetizan, por accin de la enzima ADN-ligasa.
Por lo expuesto, podemos decir que la sntesis del ADN es un proceso
bidireccional, no slo porque se produce en dos direcciones
divergentes a partir de una misma burbuja de replicacin, sino tambin
porque las cadenas de la doble hlice son sintetizadas en direcciones

opuestas.

Fig. 12. 15 - Replicacin semiconservativa del ADN.

5.

MODELO SEMICONSERVATIVO

Como las nuevas hlices de ADN estn formadas por una cadena
original (preexistente) que sirvi de molde y una cadena nueva (recin
sintetizada) decimos que el mecanismo de replicacin es
semiconservativo.
INICIO DE LA SNTESIS DE ADN
Para iniciar la sntesis de las cadenas complementarias se requiere
adems del ADN molde un cebador o primer , que consiste en una
pequea cadena de ARN de unos diez nucletidos de largo. La sntesis
del cebador es catalizada por una enzima llamada ARN-primasa y. el
cebador queda unido al ADN temporariamente. Unavez sintetizado el
cebador la sntesis contina si la ADN-polimerasa tiene disponibles
suficientes desoxirribonucletidos trifosfatados (dATP, dGTP, dCCP y
dTTP). stos se agregan en la cadena nueva de acuerdo a la secuencia
de nucletidos de la cadena que sirve de molde.

Gran parte de la energa requerida durante la replicacin la aportan los


desoxirribonucletidos trifosfatados, que hidrolizan los ltimos dos
grupos fosfato (liberando energa) cuando se unen entre s.
Al iniciarse la sntesis continua del ADN, en cada origen se forman
dos cebadores orientados divergentemente uno en cada cadena de la
doble hlice y a continuacin la ADN-polimerasa cataliza la sntesis
de la cadena continua agregando nucletidos en el extremo 3 de la
hebra en formacin. Mientras tanto los cebadores son removidos por
una nucleasa reparadora y su lugar es reemplazado por un fragmento
de ADN equivalente sintetizado por la ADN-polimerasa .
Como vimos la cadena continua requiere un solo cebador que se forma a
comienzo de la replicacin, en cambio la cadena discontinua necesita
muchos cebadores, uno para cada fragmento de Okazaki. La enzima
responsable de la sntesis discontinua es la ADN-polimerasa . Cabe
sealar que las ADN-polimerasas son sostendas por un anillo proteico
llamado PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) mientras realiza el
deslizamiento por la cadena de ADN

Fig. 12.16 - Doble hlice de ADN desenrrollndose. Cada cadena


servir de molde para la sntesis de cadenas nuevas

Fig. 12.17 - La energa para el proceso de replicacin la proveen los

mismos desoxirribonucletidos trifosfatados, con la hidrlisis de los


ltimos dos grupos fosfato-

Fig. 12. 18 - Unin del aro de PCNA a la ADN polimerasa

Los fragmentos de Okazaki alcanzan una longitud de 200 nucletidos.


Una vez completa la sntesis de un fragmento ambas enzimas se liberan
y vuelven juntas hacia el ngulo de la horquilla de replicacin, dejando
atrs los 200 nucletidos del segmento que acaban de sintetizar y
otros tantos del ADN molde que se usar para copiar el prximo
fragmento de Okazaki.
Como ocurre con la polimerasa d en movimiento, la ADNpolimerasa a no se desprende del ADN debido a que se le asocia un aro
de PCNA. Luego el cebador es hidrolizado por una nucleasa, la que se
encarga tambin de reparar errores (segundo sistema de reparacin) y
los huecos son rellenados con desoxirribonucletidos por la ADNpolimerasa . Finalmente los fragmentos de Okazaki son unidos por la
ADN-ligasa.
La discontinuidad de la sntesis hace que la hebra mal orientada crezca
ms lentamente que la otra, que lo hace en forma continua, por esta
razn se les asign el nombre de cadena rezagada y cadena
adelantada respectivamente.
Replicacin de la heterocromatina
La heterocromatina por estar muy compactada se replica tardamente
durante la fase S del ciclo celular.
Sntesis de histonas
Hemos sealado que el ADN se replica en forma semiconservativa, es
decir que las cadenas de la doble hlice progenitora, al separarse para
su replicacin, se comparten por igual en ambos cromosomas hijos. En
cambio no se sabe como se segregan las histonas. Es posible que al
cabo de la replicacin sean heredadas totalmente por uno de los

cromosomas hijos, en este caso el otro cromosoma hijo debe


procurarse de la totalidad de histonas nuevas.
En su mayor parte las histonas se sintetizan durante la fase S de la
interfase y se incorporan al cromosoma apenas es duplicado el ADN
Replicacin en Procariontes
Muchas de las caractersticas esenciales de la duplicacin del ADN son
universales, aunque existen algunas diferencias entre procariontes y
eucariontes debido a que su material gentico est organizado de
manera distinta.
En las bacterias casi todo el ADN se encuentra formando una cadena
circular, en cambio en los eucariontes cada cromosoma no duplicado
contiene una cadena lineal asociada a una gran cantidad de protenas y
algo de ARN.
En procariontes al existir un nico punto de origen se forma slo un
ojal de replicacin. Aqu actan tres ADN-polimerasas:
ADN-polimerasa I, es la que elimina el cebador y reemplaza los
ribonucletidos de ste por desoxirribonucletidos, rellenando los
huecos dejados por la ADN-polimerasa II. Adiciona 10
nucletidos/seg.
ADN-polimerasa II, tiene actividad de nucleasa, es decir que retira
nucletidos de la cadena de ADN en los sitios donde se produjeron
errores o desemparejamientos.
ADN-polimerasa III, es la enzima responsable de alargar las cadenas
en el proceso de replicacin. Adiciona 500 nucletidos/seg.

Fig. 12.19 - Mecanismo de replicacin del ADN en clulas procariontes

Fig. 12.20 - Mecanismo de replicacin en procariotas

Cuadro 12.1 - MLTIPLES FUNCIONES DE LAS ADN-POLIMERASA EN E. COLI

Poli. I y Poli. III

Sntesis de ADN en sentido 5

Exonucleasa en sentido 3

Correccin de errores, removiendo


nucletidos en sentido 5
3

Poli. I

Exonucleasa en sentido 5

Cuadro 12.2 - PRINCIPALES ENZIMAS QUE ACTUAN EN LA REPLICACIN

Enzimas

Reacciones que catalizan

ADN-polimerasa I (procariontes)

Elimina el cebador, reemplazando los


ribonucletidos por desoxirribonucletidos.
Rellena los huecos del ADN.

ADN-polimerasa II (procariontes)

Nucleasa, corrige errores.

ADN-polimerasa III (procariontes)

Principal enzima de la replicacin. Sintetiza la


cadena nueva a partir del cebador. Realiza
correccin de pruebas.

ADN-polimerasa

(eucariontes

Sintetiza los fragmentos de ADN discontinuos


a partir del cebador.

ADN-polimerasa

(eucariontes)

Rellena los huecos dejados por el cebador y


repara errores como un segundo sistema de
reparacin.

ADN-polimerasa

(eucariontes)

Sintetiza la hebra continua a partir del


cebador y realiza lecturas de prueba.

Helicasas

Rompen los puentes de hidrgeno, separando


las cadenas del ADN.

Primasas

Sintetizan el primer o cebador.

Protenas SSB

Topoisomerasas I y II

Se extienden sobre las hebras del ADN


evitando autoapareamientos entre las bases
libremente expuestas

Corrigen el superenrollamiento

Cohesinas: protenas que mantienen unidas transitoriamente a las


cromtidas hermanas.