Figura 3.

12 Imgenes de Paramecium al mismo aumento

(1000x), pero con distintos microscopios. (a) La microscopa de
campo claro permite observar la forma y las estructuras internas
de mayor tamao, como el ncleo. (b) La imagen de contraste
de fases muestra mayor detalle interno, y el caracterstico halo.
(c) La microscopa de campo oscuro revela la presencia de cilios.
(d) La imagen de Nomarsky es casi tridimensional.

Algunos microorganismos son fluorescentes de forma natural,

pero la mayora requieren ser teidos con compuestos
fluorescentes. Cuando se aade un fluorocromo a estas clulas
apareadas deParamecum tetrautelia, se observan con
fluorescencia naranja.

Figura 3.11Tinciones especficas. (a) La tincin de Wirtz-Conklin se utiliza para

observar endosporas. Bacilius cereus es una bacteria esporulada. Las endosporas

mantienen la tincin primaria verde, mientras que las otras clulas se observan
teidas con la coloracin de contraste rosa. (b) La tincin de Leifson revela que
este microorganismo posee flagelos, lo cual contribuye a su identificacin
comoSpirillum volutans..(c) La tincin negativa con tinta china permite observar
que esta bacteria posee cpsula, lo que facilita su identiticacin como Klebsiella
pneumoniae, agente causal de la neumona.
Esta tincin permite determinar el nmero y la disposicin de los flagelos de las
bacterias, lo que constituye una informacin esencial para la identificacin de
muchas especies (Figura 3.11b). La tincin de flagelos es un arte que se adquiere
slo con la prctica.

Figura 3.15 Criofractura y criograbado. La microscopia

electrnica de transmisin requiere una preparacin especial de
las muestras, debido a que los electrones tienen poco poder de
penetracin. Se pueden hacer secciones finas de las clulas o se
puede seguir las tcnicas de criofractura y criograhado. (a) En la
criofractura, las clulas se congelan en un bloque de hielo que a
continuacin se rompe con una cuchilla. (b) Para ms detalles se
puede seguir la tcnica de criograbado: las clulas se someten a
vaco y se elimina el agua por sublimacin. Esto hace que las
estructuras sobresalgan en la superficie. (c) Microfotografa de

una levadura tratarla mediante estas tcnicas la levadura est

gemando.

Figura 3.16 Sombreado metlico. La principal ventaja de la

microscopa electrnica de transmisin es su poder de aumento,
que permite ver virus y la ultraestructura (estructura interna) de
las clulas. Si el espcimen se prepara por sombreado metlico,
la MET tambin puede utilizarse para observar estructuras
externas. (a) Se recubre la muestra con una capa de metal
pesado, que le da aspecto tridimensional. (b) Microfotografa de
transmisin del virus de la polio preparado mediante sombreado

metlico; se observan las tres dimensiones: longitud, anchura y

espesor.

Imagen de SEM (Microscopia Electrnica de Barrido) mostrando clulas individuales de

Polaribacter sp. MED152 (Foto: I. Lekunberri y J.M. Fortuo)
El Polaribacter sp. MED152 es un microorganismo perteneciente a los Bacteroidetes marinos, que
representan el tercer grupo ms abundantedo del bacterioplancton marino, despus de las
cianobacterias y las proteobacterias

Confocal