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Mdulo 1

Volume

Andrea Da Poian
Debora Foguel
Marlvia Dansa-Petretski
Olga Tavares Machado
Ana Paula Abreu-Fialho

Bioqumica I

5 edio

Bioqumica I
Volume 2 - Mdulo 1
5 edio revisada

Andrea Da Poian
Debora Foguel
Marlvia Dansa-Petretski
Olga Tavares Machado
Ana Paula Abreu-Fialho

Apoio:

Fundao Cecierj / Consrcio Cederj


Rua Visconde de Niteri, 1364 Mangueira Rio de Janeiro, RJ CEP 20943-001
Tel.: (21) 2334-1569 Fax: (21) 2568-0725
Presidente
Masako Oya Masuda
Vice-presidente
Mirian Crapez
Coordenao do Curso de Biologia
UENF - Milton Kanashiro
UFRJ - Ricardo Iglesias Rios
UERJ - Celly Saba

Material Didtico
ELABORAO DE CONTEDO

Departamento de Produo

Andrea Da Poian
Debora Foguel
Marlvia Dansa-Petretski
Olga Tavares Machado
Ana Paula Abreu-Fialho

Cristine Costa Barreto


DESENVOLVIMENTO INSTRUCIONAL
E REVISO

Alexandre d'Oliveira
Katy Araujo

Cristina Freixinho
Diana Castellani
Elaine Bayma
Patrcia Paula

ILUSTRAO

COORDENAO DE PRODUO

PRODUO GRFICA

Jorge Moura

Ana Paula Abreu-Fialho


Jose Meyohas

Dbora Barreiros

PROGRAMAO VISUAL

Tereza Queiroz
REVISO TIPOGRFICA

COORDENAO DE DESENVOLVIMENTO
INSTRUCIONAL

COORDENAO DE AVALIAO DO
MATERIAL DIDTICO

EDITORA

Jefferson Caador
CAPA

Jefferson Caador
Osias Ferraz
Patricia Seabra

Copyright 2005, Fundao Cecierj / Consrcio Cederj


Nenhuma parte deste material poder ser reproduzida, transmitida e gravada, por qualquer meio
eletrnico, mecnico, por fotocpia e outros, sem a prvia autorizao, por escrito, da Fundao.

D111b
Da Poian, Andrea.
Bioqumica I. v. 2 / Andrea Da Poian; Debora
Foguel; Marlvia Dansa-Petretski; Olga Tavares
Machado; Ana Paula Abreu-Fialho. 5.ed. rev. Rio
de Janeiro: Fundao CECIERJ, 2010.
252p.; 19 x 26,5 cm.
ISBN: 978-85-7648-667-1
1. Protenas. I. Foguel, Debora. II. Dansa-Petretski,
Marlvia. III. Machado, Olga Tavares. IV. AbreuFialho, Ana Paula. V. Ttulo.
CDD: 572
2010/1
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Governador
Srgio Cabral Filho

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NORTE FLUMINENSE DARCY RIBEIRO
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RIO DE JANEIRO
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Reitor: Roberto de Souza Salles

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DO RIO DE JANEIRO
Reitora: Malvina Tania Tuttman

Bioqumica I
SUMRIO

Volume 2 - Mdulo 1

Aula 11 Protenas 1 uma introduo ___________________________ 7


Aula 12 Protenas 2 Voc sabe o que estrutura secundria
de uma protena? ___________________________________

33

Aula 13 Protenas 3 Agora, sim: as protenas no espao! _________ 51


Aula 14 Protenas 4 Como as protenas adquirem as suas estruturas
tercirias (ou quaternrias)? ___________________________

69

Aula 15 Voc j ouviu falar em protenas fibrosas? _________________ 87


Aula 16 Protenas 6: protenas globulares a maioria delas _________ 103
Aula 17 Quando as protenas se tornam mais... parte I:
os agregados supramoleculares ________________________

129

Aula 18 Quando as protenas se tornam mais... parte II


os vrus __________________________________________

147

Aula 19 Sobre as famosas enzimas parte I: uma introduo ________ 167


Aula 20 Sobre as famosas enzimas parte II:
J ouviu falar em stio ativo? __________________________

183

Aula 21 Cintica enzimtica: partindo da prtica para a teoria _______ 207


Aula 22 Voc realmente sabe o que so vitaminas? _______________ 227
Referncias _____________________________________________ 247

AULA

Protenas 1 uma
introduo

11
Meta da aula

objetivos

Introduzir o conceito de nveis


organizacionais das protenas, apresentando
o que a estrutura primria desses
compostos e sua importncia.

Esperamos que, ao final desta aula, voc seja


capaz de:
1

identificar ligaes peptdicas;

descrever a formao de pontes dissulfeto;

identificar a importncia da seqncia primria


para a funo de uma protena.

Bioqumica I | Protenas 1 uma introduo

INTRODUO

As protenas so os principais constituintes celulares, com grande importncia


na manuteno da vida, por desempenharem diversas funes. Conhea
algumas:
A contrao dos nossos msculos, que proporciona nossos movimentos,
acontece pela atuao de algumas protenas, sendo as principais a actina
e a miosina.
O processo de transporte e utilizao de oxignio e gs carbnico realizado
pelo nosso organismo tem participao das protenas hemoglobina e
mioglobina (mais adiante, na Aula 16, teremos um captulo especial
dedicado a essas duas protenas, que so completamente adaptadas ao
transporte desses gases de uma maneira belssima!).
A defesa do nosso organismo contra invasores garantida pelos anticorpos,
que tambm so protenas.
A fotossntese, realizada pelos seres autotrficos, ocorre devido presena
de pigmentos que ficam ligados s protenas.
Penas, chifres, venenos de serpentes, cabelos, unhas e diversas estruturas
animais so compostos por protenas.
As enzimas, que esto envolvidas em quase todas as reaes metablicas
celulares, tambm so protenas. Elas participam de uma enormidade
de funes no nosso organismo; por exemplo, a quebra da glicose, a
utilizao de lipdios como fonte de energia, a formao de ATP, (nossa
moeda energtica), a sntese de colesterol, de lipdios, de glicognio e de
muitas outras molculas.
Na Aula 8, voc viu que essas molculas to fundamentais vida so formadas
pelos aminocidos. Agora voc vai dar um passo frente e aprender como
as protenas se organizam no espao. Vamos l?

Aprendendo mais sobre as protenas...


Voc sabia que o nome protena vem do grego proteios, que
quer dizer primeiro, mais importante? Sabia que 80% do peso
dos nossos msculos desidratados so atribudos s protenas?
Quer saber mais ainda sobre esses compostos? Visite http:
//www.qmc.ufsc.br/qmcweb/artigos/proteinas.html.

CEDERJ

MDULO 1
AULA

11

NVEIS ORGANIZACIONAIS DAS PROTENAS


As protenas podem ser descritas considerando diferentes nveis
de organizao. Elas possuem estruturas primria, secundria, terciria
e quaternria.
Resumidamente, dizemos que:
estrutura primria: a seqncia linear dos aminocidos da protena;
estrutura secundria: a maneira como esses aminocidos se organizam
no espao. Os elementos de estrutura secundria mais comuns so as
hlices (l-se alfa-hlices), as fitas (l-se fitas-beta) e as voltas.
estrutura terciria: a maneira como a protena se organiza no espao
tridimensional, isto , o movimento, a organizao das hlices, fitas
e voltas no espao tridimensional;
estrutura quaternria: quando a protena tem mais de uma SUBUNIDADE,
isto , forma dmeros (duas subunidades associadas); trmeros (trs

SUBUNIDADE

subunidades associadas); tetrmeros (quatro subunidades associadas)

Subunidade de uma
protena uma
cadeia (seqncia)
de aminocidos que
interage com outra(s)
cadeia(s) (seja(m)
ela(s) igual(is) ou
diferente(s)) para
formar a estrutura
da protena em nvel
quaternrio.

e oligmeros (mais de quatro subunidades associadas).


Voc vai aprender nesta disciplina sobre cada um desses nveis
de organizao. Na aula de hoje, vamos aprofundar os conhecimentos
sobre a estrutura primria.

1 nvel: estrutura primria


A estrutura primria de uma protena , simplesmente, sua
seqncia de aminocidos. Em outras palavras, a ordem na qual
aparecem os aminocidos em uma dada protena (difcil de imaginar?
Leia o boxe Formando protenas, logo adiante). Essa estrutura apresenta
apenas uma dimenso, j que ela s diz respeito ordem em que esto
dispostos os aminocidos.
A estrutura primria de uma protena pode tambm ser chamada
de seqncia primria. Para entender o que esta seqncia primria,
necessrio saber o que e como se forma uma ligao peptdica.

CEDERJ

Bioqumica I | Protenas 1 uma introduo

Formando protenas

Fonte: http://www. Fonte: http://www. Fonte: http://www. Fonte: http://www.


sxc.hu/photo/598140 sxc.hu/photo/516821 sxc.hu/photo/598119 sxc.hu/photo/598121

Formar uma protena pode ser analogicamente comparado a formar uma


palavra. Calma, calma, voc j vai entender!
Imagine que voc queira escrever a palavra AMOR. Voc precisa, para
isso, de quatro letras: A, M, O e R, dispostas nesta ordem. Se voc quiser
escrever ROMA, voc precisa das mesmas quatro letras, mas agora em
uma ordem diferente. Neste exemplo, cada letra a unidade formadora
de uma palavra e, dependendo da ordem em que forem dispostas, do
origem a uma palavra diferente.
Com os aminocidos e as protenas acontece algo semelhante: os
aminocidos (letras) so as unidades formadoras dessas macromolculas
(palavras). Assim, colocando um aminocido em seguida do outro (e
unindo-os por uma ligao qumica, que voc ver como se forma a
seguir), formamos uma protena, assim como colocando uma letra ao
lado da outra podemos formar palavras. A ordem em que os aminocidos
so ligados uns aos outros e quantos so utilizados para constituir uma
protena importante porque permite a enorme diversidade existente
dessas macromolculas. Assim como podemos formar um nmero
gigantesco de palavras com apenas 24 letras, podemos formar um nmero
tambm muito alto de protenas com apenas 20 aminocidos!

O QUE E COMO SE FORMA UMA LIGAO PEPTDICA?


Para que se forme uma seqncia linear de aminocidos (a
estrutura primria de uma protena), necessrio que um aminocido
se ligue quimicamente a outro. Quando esta reao (aminocido +
aminocido) acontece, dizemos que se formou uma ligao peptdica.
A ligao peptdica uma ligao covalente que se estabelece
entre a carboxila (COO) de um aminocido e o grupo amino (NH3+)
do aminocido adjacente. Quando esta ligao se forma, h perda de
uma molcula de gua. Veja:

10

CEDERJ

Aminocido 2

Forma-se uma molcula


de gua: 1 oxignio da
carboxila +
2 hidrognios do amino

Dipeptdeo
(unio de dois aminocidos)

Figura 11.1: A formao de uma ligao peptdica acontece pela sada de um oxignio da carboxila de um
aminocido e de dois hidrognios ao grupo amino de um segundo aminocido. Um dipeptdeo e uma molcula
de gua so os produtos desta reao.

Ento, quando acontece uma ligao peptdica entre dois


aminocidos, um dipeptdeo formado. interessante ressaltar que a
ligao peptdica forma um dipolo eltrico. Isto ocorre porque o oxignio
atrai a nuvem eletrnica e assume um carter parcialmente negativo;
conseqentemente, o nitrognio assume um carter parcialmente positivo
em um mecanismo parecido com aquele que voc viu para a formao
do dipolo eletrnico da molcula de gua (se tiver dvida, vale a pena
voltar Aula 3 e dar uma olhada na seo Como uma molcula de
gua?). Assim, um dipeptdeo apresenta um dipolo eltrico.
Outra caracterstica da ligao peptdica que sempre que acontece
este tipo de ligao, h sada de uma molcula de gua. Alm disso,
possvel formar uma protena com nmero variado de aminocidos. Ao
dipeptdeo que voc viu se formar na Figura 11.1, possvel adicionar
mais aminocidos, formando tripeptdeos, polipeptdeos e, finalmente, as
protenas, que podem ter um nmero variado de RESDUOS DE AMINOCIDOS.

RESDUOS DE
AMINOCIDOS

Chamamos resduos
de aminocidos os
aminocidos que
esto formando um
peptdeo ou uma
protena. Este termo,
resduos, indica
que, nas protenas,
os aminocidos
no se apresentam
exatamente como so
quando esto livres, j
que, conforme vimos,
h perda de uma
molcula de gua a
cada ligao peptdica
que se forma.

CEDERJ

11

11

MDULO 1

Aminocido 1

Forma-se a ligao
peptdica

AULA

So liberados dois
liberado um oxignio
hidrognios durante
durante a reao
a reao

Bioqumica I | Protenas 1 uma introduo

ATIVIDADE
1
1. Caracterizando ligaes peptdicas
Parte I: A seguir, voc v duas possveis reaes qumicas. Dentre elas,
identifique, circulando a letra correspondente, aquela(s) que no (so)
ligao(es) peptdica(s). Justifique sua resposta.

a.

________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________

b.

________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________

12

CEDERJ

MDULO 1

11
AULA

Parte II Responda: Quantas molculas de gua so perdidas na formao


de um pentapeptdeo?
________________________________________________________________
________________________________________________________________
RESPOSTA COMENTADA

Se voc marcou a opo b como aquela que representa uma ligao


peptdica, acertou! Nesta opo, h dois aminocidos que se ligam
pelo grupamento carboxila de um ao grupamento amino de outro,
com a perda de uma molcula de gua. Esta a definio de ligao
peptdica, inclusive!
Na letra a, repare na estrutura representada esquerda. No um
aminocido, pois no tem o grupamento amino na sua estrutura.
Portanto, no possvel que esteja acontecendo uma ligao
peptdica!
Na parte II, perguntamos quantas molculas de gua se perdem na
formao de um pentapeptdeo. Para calcular isso, voc poderia ter
tentado fazer um pentapeptdeo e contar o nmero de molculas de
H2O liberadas ou, simplesmente, pensar assim: na formao de um
dipeptdeo, acontece uma ligao peptdica e se forma uma molcula
de gua; de um tripeptdeo, duas ligaes e duas guas. O nmero de
molculas de gua sempre igual ao nmero de ligaes e o nmero
de ligaes sempre igual ao nmero de aminocidos menos 1! Logo,
para formar um pentepeptdeo, ocorrem quatro ligaes peptdicas.

A seqncia primria de uma protena, portanto, a unio de


vrios aminocidos por ligaes peptdicas. No entanto, estas no so os
nicos tipos de interao envolvidos na formao da estrutura primria
de uma protena...
CISTENA

AS PONTES DE ENXOFRE (OU PONTES DISSULFETO)

S para voc
relembrar a estrutura
da cistena:

Alm das ligaes peptdicas que formam a seqncia primria


(cadeia) de uma protena, outras interaes podem ocorrer tambm entre
os aminocidos dessa cadeia.
Conforme voc viu na Aula 8, a

CISTENA

um aminocido que

possui um tomo de enxofre na extremidade de seu grupamento R.


Cistena

CEDERJ

13

Bioqumica I | Protenas 1 uma introduo

A presena deste enxofre na cistena serve como uma espcie de tomada,


j que dois enxofres, quando se aproximam, podem formar uma ponte
de enxofre ou ponte dissulfeto. Duas cistenas unidas por uma ponte de
enxofre formam o que chamamos de cistina. Veja a Figura 11.4:

Cistena 1

Cistena 2

Ponte de enxofre ou
ponte dissulfeto

Ou simplesmente...
cistena SH + HS cistena cistena S S cistena
ponte de enxofre
cistina

Figura 11.2: A formao de uma ponte de enxofre se d pela interao entre os


enxofres de duas cistenas e a sada de dois tomos de hidrognio. O composto
formado (cistena + cistena) chamado cistina.

!
E a metionina?
A cistena e a metionina so os dois nicos aminocidos
que possuem enxofre em sua constituio. Na cistena,
este tomo est na extremidade do grupamento R,
disponvel para interagir com outros grupamentos
sulfeto (SH). Na metionina, embora haja enxofre, este
no ocupa a posio terminal do grupamento R, e
no pode, por causa disso, formar pontes de enxofre
com outra metionina ou cistena.
Metionina

14

CEDERJ

MDULO 1

11

Quer ver como estas pontes de enxofre acontecem em uma protena

AULA

de nosso organismo? Na Figura 11.3, voc v a seqncia primria da


insulina. A insulina um hormnio cuja principal funo participar na
regulao do nosso metabolismo energtico. Ela apresenta duas cadeias
peptdicas: a cadeia A e a cadeia B. A cadeia A apresenta 21 resduos
de aminocidos; a cadeia B apresenta 30 resduos. Estas duas cadeias se
conectam por meio de pontes dissulfeto.
Cadeia A
5

15

21

Gli He Val Glu Gln Cis Cis Ala Ser Val Cis Ser Leu Tir Gln Leu Gln Asn Tic Cis Asn

Cadeia B
5

10

15

20

Fen Val Asn Gln His Leu Cis Gli Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tir Leu Val Cis Gli Glu
Arg Gli Fen Tir Tre Pro Lis Ala
25

30

Figura 11.3: Estrutura primria da insulina, um hormnio peptdico envolvido na regulao do nosso metabolismo
energtico, especialmente no metabolismo de um acar, a glicose. A insulina um hormnio protico que possui
duas cadeias polipeptdicas A e B, que representam sua seqncia primria. Estas duas cadeias so ligadas por
pontes dissulfeto entre a cadeia A e B.

ATIVIDADE
2

2. Estabelecendo pontes dissulfeto


Est achando esquisito uma atividade no meio da seqncia do texto?
Sentiu falta das pontes dissulfeto ligando a cadeia A e B da insulina na
Figura 11.3? Estabelecer estas pontes exatamente a sua tarefa, dividida
em duas etapas:
a. identifique (circulando), na Figura 11.3, quais resduos de aminocido
da cadeia A e B poderiam formar pontes dissulfeto para unir estas duas
cadeias;
b. mostre como se forma uma ponte de enxofre entre dois resduos de
aminocidos.
________________________________________________________________
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________________________________________________________________

CEDERJ

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Bioqumica I | Protenas 1 uma introduo

RESPOSTA COMENTADA

Fazer uma atividade a melhor maneira de fixar um conceito. Voc


aprendeu nesta seo da aula que pontes dissulfeto se formam
apenas entre resduos de cistena. Sendo assim, possveis candidatos
so:
Cadeia A
S

15

21

Gli He Val Glu Gln Cis Cis Ala Ser Val Cis Ser Leu Tir Gln Leu Glu Asn Tir Cis Asn

Cadeia B
S

10

15

20

Fen Val Asn Gln His Leu Cis Gli Ser His Leu Val Gln Ala Leu Tir Leu Val Cis Gli Glu
Arg Gli Fen Fen Tir Tre Pro Lis Ala
25

30

De fato, a maior parte desses resduos participam da unio entre


as duas cadeias, como voc pode ver pelas linhas que os unem
(representando as pontes). Observe que h pontes de enxofre que
que unem as cadeias A e B as pontes intercadeias; alm dessas,
existem tambm pontes de enxofre intracadeia que, no caso da
insulina, acontecem dentro da cadeia A.
Estas pontes se formam entre os grupamentos SH de duas cistenas,
com a sada dos hidrognios, como voc viu na Figura 11.2, qual
voc pode retornar para tirar qualquer dvida. Tenha em mente
que, independente de acontecerem intra ou intercadeias, as pontes
dissulfeto so elementos de estrutura primria.

Nas Aulas 13 e 14, voc ver como as pontes dissulfeto so


importantes na manuteno da estrutura terciria das protenas.
Por enquanto, que tal saber um pouco mais sobre o que faz com
que tenhamos tantas protenas diferentes na natureza?

DIVERSIDADE DAS PROTENAS


As protenas possuem tamanhos variados. Existe uma protena
no melo que impede a quebra de outras protenas (o que feito por

16

CEDERJ

MDULO 1

11

enzimas chamadas proteinases). Este inibidor de proteinase III do

AULA

melo, por exemplo, possui apenas 30 aminocidos. O citocromo c


humano, que participa do processo de respirao celular (que voc
vai relembrar e aprender mais a respeito na disciplina Bioqumica II)
possui 104 aminocidos. J a RNA

de um vrus de bactria

RNA POLIMERASE

(bacterifago), chamado T7, possui 883 aminocidos. Est achando

Enzima que participa


da sntese do RNA
nos seres vivos.

POLIMERASE

muito? A titina humana, uma protena que ajuda a arranjar as fibras


musculares, contm 26.926 resduos de aminocidos, sendo, de fato,
uma protena gigante!

!
Obviamente, quanto maior uma protena, mais complicada a sua montagem
ou enovelamento, conforme veremos nas aulas seguintes.

Mas o tamanho no o nico fator que influencia a tamanha


diversidade de protenas que encontramos na natureza. A composio de
aminocidos destas protenas (para saber mais, veja o boxe Compondo
diferentes protenas), bem como a ordem em que eles se apresentam
ligados, tambm um determinante.

Compondo diferentes protenas


Embora existam 20 aminocidos diferentes constituindo protenas
(conforme voc aprendeu na Aula 8), os estudos tm mostrado que alguns
deles so mais abundantes nas diversas protenas, sendo os mais comuns
a leucina, a alanina, a glicina, a valina e o cido glutmico. Os mais raros,
por sua vez, so triptofano, cistena, metionina e histidina. Ser que voc
saberia dizer por que estes aminocidos so mais raros?
Voc viu, na Aula 8, que h uma classificao dos aminocidos que os
dividem em essenciais ou no essenciais dieta. Dizer que um aminocido
essencial significa que nossas clulas no sabem sintetizar estes
aminocidos (isto , no temos as enzimas necessrias para sua sntese)
e, por isso, precisamos encontr-los na nossa dieta. Este o caso do
triptofano, da histidina e da metionina, por exemplo. Se as protenas que
comemos tm baixo contedo destes aminocidos, j que no so muito
abundantes, precisamos tomar cuidado para que eles no nos faltem na
dieta para no causar um desequilbrio nutricional.

CEDERJ

17

Bioqumica I | Protenas 1 uma introduo

Este assunto to importante que merece uma seo s para


explic-lo. Veja a seguir!

VOC SABE O QUE DETERMINA A SEQNCIA DE UMA


PROTENA?
Falando agora sobre a ordem em que os aminocidos se unem para
formar uma protena, voc saberia explicar como ela determinada?
Uma protena o produto da traduo de uma informao contida
no nosso cdigo gentico. Este cdigo gentico est contido no DNA, uma
seqncia de nucleotdeos que est confinada no ncleo de nossas clulas.
A informao contida na seqncia de nucleotdeos da molcula de
DNA origina uma fita de RNA (RNA mensageiro RNAm) que carrega
a informao gentica para o citoplasma, onde ela pode ser traduzida
em protenas. Resumindo, temos que:
seqncia de DNA seqncia de RNA seqncia da protena.
A relao entre os nucleotdeos do DNA e os aminocidos
TRADUO
Leitura de um RNA
mensageiro por um
ribossoma para sntese
de uma protena.
Este processo
acontece no
citoplasma da clula
e o que d origem a
uma protena recmsintetizada.

Cdon de RNA

chamada cdigo gentico, que constitui a base da vida e da evoluo


das espcies em nosso planeta.
Em torno de 1960, estabeleceu-se que cada aminocido na
seqncia primria de uma protena era resultado da leitura de um
cdon do RNA. Um cdon de RNA um trio de nucleotdeos que,
durante o processo da

TRADUO,

decodificado em um aminocido.

Sendo assim, observe:


UUU

CUC

ACC

GCG

GUG

GAG

Seqncia da
PROTENA

Fenilalanina

Leucina

Treonina

Alanina

Valina

Ac. Glutmico

Cada trio de bases do RNAm representa um aminocido da


seqncia primria de uma protena. Assim, a seqncia de bases do
RNA (que vem da seqncia de bases do DNA o cdigo gentico)
responsvel pela seqncia de aminocidos de uma protena. Uma
protena produto da traduo de um gene. Em outras palavras, todo
pedao do DNA que capaz de, quando transcrito em um RNAm, ser
traduzido em uma protena, chamado gene.

18

CEDERJ

MDULO 1

11

O DNA um cido nuclico enorme, que contm muitos milhares de

AULA

genes; esse milhares de genes, por sua vez, do origem a milhares de protenas
e aqui est o motivo da enorme diversidade delas. Como se no bastasse,
ainda h possibilidade de acontecerem mudanas na seqncia do DNA,
que podem acarretar graves conseqncias para um organismo... Veja
mais sobre o assunto no boxe Mutao: o que e o que causa?.

Mutao: o que e o que causa?


Mutao qualquer alterao na
seqncia de bases do DNA, quer
seja por retirada de um nucleotdeo
ou substituio por outro diferente.
Uma mutao no DNA pode acarretar
em alteraes da seqncia primria
da protena e a conseqente perda
de funo desta.
Muitas vezes, ouvimos falar de
algumas substncias que so
mutagnicas e esto presentes no
nosso dia-a-dia. Esse o caso do
benzantraceno, que est presente
Fonte: http://www.sxc.hu/photo/369103
no cigarro.
A prpria radiao ultravioleta (UV)
um agente mutagnico; da, os mdicos recomendarem a exposio
ao sol em horrios nos quais esta radiao no to forte como, por
exemplo, no incio e no fim do dia.
A luz UV capaz de alterar as bases do nosso DNA, promovendo mudanas
irreversveis. Este DNA mudado dar origem ao RNA que carregar a
informao errada, resultando em uma protena alterada. Se essa protena
for responsvel por alguma reao envolvida no nosso ciclo celular, pode
acontecer de este ciclo ficar descontrolado e a clula comear a se dividir
sem controle, levando ao cncer.

SEQNCIA PRIMRIA E FUNO DA PROTENA


A funo de uma protena depende de sua seqncia primria.
Qualquer mudana desta seqncia gera uma protena diferente que
pode at perder sua funo biolgica.
Usando o exemplo da insulina (Figura 11.3 e Atividade 3), se
houvesse a substituio da cistena 7 da cadeia A por outro aminocido
qualquer, no se formaria aquela ponte intercadeia e, certamente, a
insulina resultante no seria a mesma.
Falando em insulina, voc sabia que este hormnio sintetizado
contendo 84 aminocidos e secretado na corrente sangnea com apenas

CEDERJ

19

Bioqumica I | Protenas 1 uma introduo

51? Entenda o porqu disso logo depois de fazer a atividade a seguir, que
fundamental para voc entender a relao entre seqncia primria e
funo de uma protena!

ATIVIDADE
3

3. Relacionando funo e seqncia primria de uma protena


O sistema olfativo um dos sensores que temos para perceber o meio
externo. O nosso sistema olfativo funciona da seguinte maneira: existem, ao
longo do epitlio da nossa cavidade nasal, clulas sensoriais que produzem
protenas capazes de interagir com molculas de cheiro presentes no ar.
Isso que faz com que a gente sinta o cheiro das coisas! Estas protenas so
chamadas de receptores de odor e as molculas de cheiro, odorantes.
Bulbo olfativo (parte
do crebro que percebe
o cheiro)

Clulas sensoriais

SEQNCIA DE
AMINOCIDOS
APRESENTADA

possvel representar
os aminocidos
por dois cdigos de
letras. Em um deles
so utilizadas trs
letras (exemplo:
ARG = arginina);
em outro utilizada
uma letra apenas
para representar
cada aminocido
(exemplo: M =
metonina). Este
ltimo cdigo est
expresso nesta
atividade.

20

CEDERJ

Perfil anatmico de um
ser humano, destacando
a parte sensvel a odores
da cavidade nasal

Epitlio da cavidade nasal,


onde esto as clulas
sensoriais que produzem
os receptores de odor

Odorantes (que
entram na cavidade nasal com
o ar)

A interao entre um odorante e um receptor de cheiro bastante


especfica, ou seja, cada receptor capaz de perceber com maior afinidade
um determinado odorante. Pequenas alteraes no receptor fazem com
que ele perca esta afinidade pelo odorante. Analise as informaes a
seguir, especialmente as SEQNCIAS DE AMINOCIDOS APRESENTADAS (cada
letra representa um aminocido diferente). Unindo as informaes da
sua anlise com o que voc acabou de ler no enunciado desta questo,
proponha uma hiptese para explicar a diferena do odorante reconhecido
pela protena receptora de cheiro apresentada no Quadro 1 e a apresentada
no Quadro 2.

MDULO 1

11
AULA

1
Animal: Camundongo
Molcula: Protena receptora de cheiro I7-I206
Pedao da seqncia de aminocidos constituintes de I7-I206:
(...) NLSCTDMSTA ELTDFILAIF ILLGPLSVTG (...)
Odorante reconhecido: octanal

2
Animal: Camundongo
Molcula: Protena receptora de cheiro I7-V206
Pedao da seqncia de aminocidos constituintes de I7-V206:
(...) NLSCTDMSTA ELTDFVLAIF ILLGPLSVTG (...)
Odorante reconhecido: heptanal

RESPOSTA COMENTADA

Como voc viu no enunciado da questo, a sensao de cheiro


percebida por ns pela interao que acontece entre molculas de
cheiro presentes no ar e protenas receptoras para esses odorantes,
presentes na cavidade nasal. Pequenas modificaes na protena
receptora de odor fazem com que esta protena possa ou no
detectar um determinado cheiro. Analisando a seqncia primria
dos receptores apresentados no Quadro 1 e no 2, voc deve ter
percebido que h um resduo de aminocido diferente entre eles:

1
Pedao da seqncia de aminocidos constituintes de I7-I206:
(...) NLSCTDMSTA ELTDFILAIF ILLGPLSVTG (...)
Odorante reconhecido: octanal

2
Pedao da seqncia de aminocidos constituintes de I7-V206:
(...) NLSCTDMSTA ELTDFVLAIF ILLGPLSVTG (...)
Odorante reconhecido: heptanal

CEDERJ

21

Bioqumica I | Protenas 1 uma introduo

Esta nica diferena na seqncia primria foi responsvel pela


mudana da capacidade do receptor reconhecer o odorante (no
Quadro 1, o receptor reconhece o octanal e, no 2, o heptanal). Em
qualquer dos casos, essa modificao de um aminocido no fez com
que esta protena passasse a exercer uma funo completamente
diferente ela continua sendo um receptor de cheiro. No entanto,
o cheiro que ela era capaz de reconhecer com uma isoleucina em
sua estrutura (I) mudou quando esse aminocido foi trocado por
uma valina (V).
A importncia da seqncia primria para a funo de uma protena
enorme, como voc pde verificar nesta atividade. Os dados
apresentados no so fictcios: eles foram publicados, em 1998,
em uma revista cientfica internacional de grande prestgio, como
parte de um esforo dos pesquisadores em elucidar o funcionamento
do nosso olfato!

MODIFICAES PS-TRADUCIONAIS
As mudanas que ocorrem nas protenas, dentro das clulas, aps sua
sntese so ditas mudanas ps-traducionais, pois traduo como se chama
o processo de sntese de uma protena a partir da seqncia do RNA.
Muitas protenas so modificadas aps sua sntese. Por exemplo,
alguns resduos podem ser removidos para produzir uma protena
madura, como o caso da insulina (Figura 11.4).
Esta protena sintetizada como um precursor com 110 resduos.
Existe um pedao da seqncia primria que chamado peptdeo-sinal,
responsvel por direcionar a insulina para as vesculas secretrias do
pncreas, de onde ela poder ser lanada na corrente sangnea e
participar da regulao do metabolismo de nosso organismo (voc vai
aprender isso em Bioqumica II). Depois de direcionar a insulina, esse
peptdeo-sinal (que possui 24 aminocidos) no tem mais funo, sendo
eliminado da seqncia. Formam-se, em seguida, as pontes dissulfeto
entre as cistenas da cadeia A e da cadeia B, como voc j viu nesta aula
na Figura 11.3. O peptdeo C (constitudo por 35 aminocidos), outro
pedao da cadeia que fica sem funo aps a ligao da cadeia A com
a B, tambm clivado (cortado); fica pronta a insulina madura, que

22

CEDERJ

MDULO 1

11

a que circula no nosso sangue aps uma refeio. Dos 110 resduos de

AULA

aminocidos do precursor (pr-pr-insulina), a forma madura da protena


conta com apenas 51 resduos.
Cadeia C

Cadeia C

S
Cadeia A

H2N

COOH

Cadeia A

H2N

Cadeia B

Peptdeo- Pr-pr-insulina
sinal

COOH

H2N

Cadeia A

Cadeia B
Pr-insulina

H2N

Cadeia B

COOH

COOH

Insulina

Figura 11.4: Modificaes ps-traducionais da insulina.

Alm deste tipo de modificao (remoo de pedaos da cadeia),


as protenas tambm podem receber adio de carboidratos, fosfatos,
dentre outros, em posies especficas, aps sua sntese. Estes grupos
muitas vezes so essenciais para o funcionamento da protena.
Resumindo, podemos dizer que h diversos mecanismos de gerar
diversidade de protenas. Mas... se uma protena funciona bem em um
organismo desempenhando um determinado papel, no interessante
que, evolutivamente, essa protena no sofra muitas modificaes? Esse
o nosso prximo assunto!

O QUE SO PROTENAS HOMLOGAS?


Dizemos que protenas homlogas so aquelas que se relacionam
evolutivamente. Em geral, realizam a mesma funo em espcies diferentes.
Um exemplo o citocromo c, uma protena que possui aproximadamente
100 aminocidos, contm ferro e participa da transferncia de eltrons na
membrana das mitocndrias das clulas eucariticas. Em Bioqumica II, voc
ver mais detalhes sobre a funo desta protena. No momento, podemos
adiantar que esta protena tem sido usada para se estabelecer relaes
filogenticas (relao de parentesco) entre os seres vivos. Como assim?
Se imaginarmos que protenas homlogas devem desempenhar
funes muito parecidas nas espcies em que elas se encontram, podemos
concluir que sua seqncia primria no pode variar muito. Ou, pelo

CEDERJ

23

Bioqumica I | Protenas 1 uma introduo

menos, no pode haver trocas dos aminocidos que estejam mais


estreitamente relacionados com a funo especfica da protena, pois tal
funo est intimamente ligada a sua seqncia de aminocidos.
No caso de citocromo c, os aminocidos diretamente relacionados
ao transporte de eltrons no podem jamais ser substitudos por outros;
caso contrrio, o transporte ficaria prejudicado e a protena perderia a
capacidade de atuar como transportadora. Por outro lado, existem regies
da protena que no esto diretamente ligadas ao transporte de eltrons
e que, se sofressem alteraes, no causariam perda de funo.
Desta forma, se ao longo do curso evolutivo esta protena
acumulou mutaes nas regies que permitam mudanas sem perda
ou comprometimento da funo (veja o boxe Um pouco mais sobre
protenas homlogas), poderamos esperar que duas espcies distantes
filogeneticamente apresentassem mais diferenas em suas seqncias
primrias do que espcies mais prximas evolutivamente. E foi exatamente
isso que os estudos revelaram! S para voc ter uma idia, existem 48
diferenas de seqncia primria entre o citocromo c de cavalo e o de
fungos, duas espcies que esto completamente separadas na rvore
evolutiva. Entretanto, apenas duas diferenas de seqncia primria
foram encontradas entre o citocromo c de pato e de galinha, o que
bvio, pois so espcies bem prximas filogeneticamente.
Assim, possvel construir-se uma rvore evolutiva, comparando
a seqncia primria de uma protena que est presente em todas as
espcies eucariticas, como o caso do citocromo c.

Um pouco mais sobre protenas homlogas

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/399249

24

CEDERJ

MDULO 1

11
AULA
Fonte: http://www.sxc.hu/photo/296835

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/652536

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/180838

CEDERJ

25

Bioqumica I | Protenas 1 uma introduo

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/573781

Para entender protenas homlogas, vamos ao seguinte exemplo: nas


fotos apresentadas, voc v um carro, uma bicicleta, um patinete, um
caminho. Precisamos comprovar que todos eles so meios de transporte.
Se escolhssemos como critrio o motor, certamente erraramos, pois
diramos que o patinete e a bicicleta, por no terem motor, no so meios
de transporte. Ento, para podermos classificar tais objetos nesta categoria,
precisamos escolher algo comum a todos, como, por exemplo, ter rodas.
assim que se faz para dizer se uma espcie mais prxima ou mais distante
da outra. Primeiro, precisamos escolher uma protena comum a todas elas
(normalmente uma enzima) e depois determinar a seqncia primria desta
para saber quem mais prxima evolutivamente de quem.
Homo Sapiens, Macaco
Chimpanz
4
Camundongo
2

Mamferos

Pssaros e rpteis

Avestruz
Canguru
9
1 1 Galinha
Coelho 3
Pombo
1Pingim
3
Tartaruga
2
Cavalo, porco, ovelha, vaca
1
Pato
6
2 1
1
Cavalo, foca, morcego
11
2
Hipoptamo 2
6
6
Peixes sseos Carpa
Atum
1
4
6
Anfbios
3
Sapo
2 2
7
Aneldeos
9
Minhoca

Peixe-cachorro

Peixes cartilaginosos
Lampria

Equinodermas
Peixe-estrela
Mariposa Abelha

23

Insetos

Mosca
16

8
16
Levedos
Fungo
Candida

15

Trigo

13
7
17

14

Neurospora

12

1
Humicola

12

Arroz

31

33

Girassol
Plantas

11

Espinafre

Figura 11.5: rvore evolutiva dos eucariontes construda em funo das


diferenas existentes entre os aminocidos do citocromo c nas diversas espcies.
Os nmeros representam os aminocidos diferentes em relao ao ancestral.

26

CEDERJ

MDULO 1

11
AULA

No caso das fotos apresentadas, poderamos dizer que, em funo do


nmero de rodas, o carro e o caminho constituiriam um grupo, ao passo
que a bicicleta e o patinete formariam outro grupo.

A escolha da protena para usar de referencial na construo


de uma rvore filogentica bastante importante. Existem protenas
bastante conservadas, que apresentam seqncia primria muito parecida
nas diversas espcies. o caso de uma protena chamada

H4.

HISTONA H4

A histona H4 da ervilha e da vaca apresentam diferenas em apenas duas

Protena que liga e


empacota DNA em
eucariotos.

HISTONA

posies de aminocidos dos seus 102 resduos. Tal fato surpreendente,


se levarmos em conta que estas espcies j divergiram h mais de 1,2
milho de anos!
Essa baixa taxa de variao entre organismos to divergentes
significa que o gene que codifica a histona H4 muito intolerante a
mutaes. Se estas ocorrem, geram histonas incapazes de se ligar ao
DNA e, portanto, sem funo.
A evoluo no aceita alterao no gene que codifica as histonas,
mas aceita melhor as mutaes no gene do citocromo c. Podemos concluir,
ento, que a taxa de mutao de uma determinada protena depende da
extenso em que a mudana afeta a sua funo. Afinal, como voc j
aprendeu, a seqncia primria est diretamente relacionada funo
de uma protena.

Genmica e Protemica: definies e aplicaes


No ano de 2001, foi divulgado pela televiso e pelos jornais, o trmino
do seqenciamento do genoma (seqncia de genes do DNA) humano.
Alm deste, que certamente foi o mais extenso e complicado genoma j
seqenciado, outros tambm o foram, tais como os genomas de bactrias
(Escherichia coli, Synechocystis sp., Haemophilus influenza), de leveduras
(Saccharomyces cerevisiae) e o de um pequeno verme (Caenorhabditis
elegans).
No Brasil, tambm tivemos nosso incio na era da genmica com uma
importante contribuio neste campo: o seqenciamento do genoma
da Xylela fastidiosa, um fitopatgeno responsvel pela doena do
amarelinho que destri grande parte das laranjas (veja o quadro a
seguir, com informaes sobre alguns organismos que tiveram seu
genoma seqenciado).

CEDERJ

27

Bioqumica I | Protenas 1 uma introduo

Organismo

Tamanho
do
Genoma
(milhes
de bases)

Interesse biolgico

Mycoplasma pneumoniae

0,8

Causa pneumonia

Treponema palidum

1,1

Causa sfilis

Borrelia burgdorferi

1,3

Causa doena de Lyme

Helicobacter pylori

1,7

Causa lcera gstrica

Haemophilus influenza

1,8

Causa meningite

Escherichia coli

4,6

Algumas linhagens podem


ser patognicas

Saccharomyces cerevisiae

12,1

Eucariota unicelular

Caenorhabditis elegans

97

Verme multicelular usado


em estudos de Biologia
celular

Xylela fastidiosa

2,7

Fitopatgeno. Ataca
plantaes de laranja

Homo sapiens sapiens

3 bilhes
de pares
de bases

Somos ns!

O conhecimento do genoma das espcies impe novos desafios aos


cientistas, como o de conhecer as protenas que so, de fato, expressas
pelos organismos. Os pesquisadores cunharam o termo proteoma, em
paralelo ao termo genoma, com o intuito de descrever o repertrio de
protenas que so, de fato, codificadas pelo DNA de um organismo. Para
se conhecer este repertrio, importante isolar essas protenas, conhecer
seu tamanho e, muitas vezes, determinar sua seqncia primria de
aminocidos. Desta forma, possvel saber, exatamente, de que protena
estamos tratando e investigar a participao dela em quadros de doena,
inflamao etc.
Quer saber mais sobre esse assunto que est to em voga no mundo da
pesquisa? Visite os sites:
http://biodados.icb.ufmg.br/sebio/proteomics_ciencia_hoje.pdf
http://educar.sc.usp.br/licenciatura/2001/genoma/Projetogenoma.html

ATIVIDADE FINAL
Relaes de parentesco?
Imagine que voc seja orientador de um estagirio que acabou de entrar no ensino
superior e no seu grupo de pesquisa. Esse estagirio foi conversar com voc sobre um
projeto que buscar estabelecer relaes filogenticas entre espcies, baseando-se
em seqncias primrias de protenas expressas por essas espcies.

28

CEDERJ

MDULO 1

11

Ele lhe mostrou os seguintes grupos de seqncias:

AULA

Grupo 1
Humano

nlhglfgrkp gqapgysyta

Pato

nlhglfgrkt gqaegfsytd

Grupo 2
Humano

sasfepapen kcekcgqcnt

Pato

sgtfgprpgn kvektaqcht

a. Analisando as seqncias dos dois grupos e levando em considerao que os


fragmentos representados expressam o grau de semelhana entre as seqncias
completas, qual voc recomendaria ao seu estagirio para usar na anlise
filogentica dos grupos?
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________

b. Imagine que seu estagirio, a partir da informao que voc deu (na letra a desta
atividade) para a escolha da protena para usar na pesquisa, tenha selecionado mais
cinco seqncias de organismos diversos para estabelecer relao evolutiva entre
as espcies. Que tipo de anlise ele deve fazer nessas seqncias para estabelecer
essas relaes? O que ele deve buscar nas seqncias, para saber qual organismo
evolutivamente mais prximo de um ou de outro?
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________

CEDERJ

29

Bioqumica I | Protenas 1 uma introduo

RESPOSTA COMENTADA

a. Como voc viu na aula, a variao da seqncia de uma protena


ao longo do tempo (e das espcies), permite estabelecer relao
entre organismos diferentes. Embora precise haver alguma variao,
a protena tem de existir e manter sua funo em todas as espcies
a serem relacionadas, o que implica em que a variao tambm no
seja muito grande. Nas seqncias apresentadas pelo estagirio, o
primeiro grupo mostra algumas modificaes quando comparamos
os dois organismos e o segundo grupo apresenta seqncias muito
diferentes. Diante dessas duas opes, o estagirio deve escolher as
seqncias do grupo 1, cujos fragmentos apresentados diferem em
apenas 2 aminocidos.
b. Para analisar as seqncias na busca de relaes evolutivas entre
as espcies, preciso tentar encontrar o grau de identidade entre elas.
Grau de identidade uma expresso bastante utilizada pelos cientistas
dessa rea, e se refere a quanto a seqncia de uma protena idntica
de outra. Quanto maior o grau de identidade, mais prximas as
espcies so evolutivamente!

RESUMO

As protenas apresentam quatro possveis nveis de organizao das suas estruturas:


o primrio (seqncia de aminocidos), o secundrio (formao de estruturas
organizadas espacialmente), o tercirio (estrutura tridimensional) e o quaternrio
(associao de subunidades de uma protena).
No nvel primrio, temos a seqncia de aminocidos, formada pela unio de
um aminocido a outro por uma ligao peptdica. Uma ligao peptdica a
ligao entre o grupamento amino de um aminocido ao grupamento carboxila
de outro, com a sada de uma molcula de gua. Alm da ligao peptdica que
forma a seqncia primria, pode haver pontes de enxofre na estrutura primria,
originadas pela ligao de dois resduos de cistena.
A enorme diversidade das protenas se deve s diferentes composies e tamanhos
que elas podem apresentar, bem como s modificaes ps-traducionais que elas
podem sofrer.

30

CEDERJ

MDULO 1

11
AULA

A seqncia primria de uma protena determinada pela seqncia de bases


do DNA, e responsvel pela funo da protena. Alteraes de determinados
aminocidos em uma protena (geradas por mutaes no DNA) podem acarretar
perda da funo desta, ao passo que alteraes em outros stios da protena
podem no ser nocivas; ao contrrio, so boas medidas para estabelecer relaes
filogenticas entre as espcies.

CEDERJ

31

AULA

Protenas 2 Voc sabe o


que estrutura secundria
de uma protena?

12
Meta da aula

objetivos

Apresentar o que a estrutura secundria


de uma protena e seus elementos
caractersticos.

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de


caracterizar os trs elementos que formam a
estrutura secundria de uma protena:
1

as -hlices;

as folhas ;

as voltas.

Pr-requisitos
Para fazer um bom aproveitamento desta aula, importante voc
relembrar o que so e como se formam as pontes de hidrognio, conceito
apresentado na Aula 3. Alm disso, seria interessante ter mo a Aula 8,
para que voc possa consultar as estruturas de alguns aminocidos.

Bioqumica I | Protenas 2 Voc sabe o que estrutura secundria de uma protena?

INTRODUO

Na aula passada, voc viu que as protenas tm quatro nveis organizacionais e


comeou estudando o primeiro nvel: a estrutura primria.
A estrutura primria de uma protena sua seqncia de aminocidos. Esta
seqncia primria pode ser comparada a um colar de contas esticado: cada
conta seria um aminocido e o colar, a protena.

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/314788

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/258629

Figura 12.1: A seqncia primria de uma protena pode ser analogicamente comparada a um
colar de contas, no qual cada conta representa um aminocido e o colar, a protena inteira.

Mantenha esta imagem do colar na cabea: para estic-lo, necessrio que


voc segure as duas extremidades e puxe-as de forma que o colar fique como
uma linha reta. Voc est gastando energia para isso. Essa conformao do colar
(esticado como uma linha) no , necessariamente, a que ele assumiria se voc
no o estivesse segurando. Se voc o lanar em cima de uma mesa, ver que ele,
provavelmente, assumir uma forma mais irregular. Isso acontece porque, em
cima da mesa, no h nada impondo energia para mant-lo esticado.
Na natureza, as molculas se comportam mais ou menos como o colar em cima
da mesa: elas tendem a assumir a conformao que requer menos energia para
ser sustentada. Assim como o colar no se mantm esticado em cima da mesa
naturalmente quando voc o lana sobre ela de qualquer maneira (porque
precisaria de energia para isso), as protenas tambm no se mantm esticadas
na natureza. Quando elas comeam a assumir formas no espao as quais
favorecem uma configurao que gasta menor energia para ser mantida , temos
a estrutura secundria dessas protenas. Esse o assunto da aula de hoje.

34

CEDERJ

MDULO 1
AULA

12

ESTRUTURA SECUNDRIA
A estrutura secundria de uma protena diz respeito ao arranjo
local dos aminocidos no espao, isto , a como uma determinada
seqncia se organiza no espao.
Os elementos mais importantes da estrutura secundria so: as hlices, as folhas e as dobras (ou voltas). As -hlices e folhas foram
previstas por LINUS PAULING e Robert Corey, em 1951.
Veja o que so esses elementos e por que somente essas poucas
maneiras de organizao esto presentes nas protenas.

LINUS PAULING (1901-1994)


Poucos estudantes de Qumica, atualmente, tm
idia da importncia de Linus Pauling. Ele comeou
a se interessar por Qumica com 15 anos, ainda no
Ensino Mdio, o qual nunca concluiu por causa da
disciplina Histria Americana. Na cincia, recebeu
diversos prmios, e foi intitulado membro mais jovem
da Academia Nacional de Cincias (dos EUA) com
apenas 32 anos.
As obras de Linus Pauling so consideradas as mais
citadas na literatura qumica. Este pesquisador
Fonte: Oregon State
ganhou, em 1955, o prmio Nobel de Qumica
University
por suas pesquisas sobre a natureza das ligaes
qumicas e sua aplicao na elucidao da estrutura
de substncias complexas, como as protenas.
Alm disso, Pauling era militante contra as guerras mundiais, os testes de bombas
atmicas e o desenvolvimento de armas nucleares. Ele ganhou o prmio Nobel da
Paz em 1962 por essas aes. H muito mais o que se dizer sobre Linus Pauling
e, por isso, recomendamos que voc visite o site do canal de cultura da qumica
da Universidade de So Paulo, no endereo http://lqes.iqm.unicamp.br/canal_
cientifico/lqes_cultural/lqes_cultural_cultura_quimica5-1.html. Voc no vai se
arrepender: a vida desse cientista realmente uma lio!

AS -HLICES
Certamente voc j viu uma espiral como, por exemplo, o fio do
telefone ou a espiral de um caderno. Uma estrutura semelhante a essa
pode acontecer em uma protena pelas interaes entre aminocidos, e
chamada de -hlice (Figura 12.2).

CEDERJ

35

Bioqumica I | Protenas 2 Voc sabe o que estrutura secundria de uma protena?

Detalhes das pontes


de H
(IIII)

Carbono
Hidrognio
Nitrognio
Oxignio
Grupo R

Carbono
Hidrognio
Nitrognio
Oxignio
Grupo R

(a)

(b)

(c)

Figura 12.2: Esquema das -hlices. Pense em um basto imaginrio como um eixo ao redor do qual voc enrolasse
um colar de contas. Dependendo da espessura do basto, para circund-lo seriam necessrias mais ou menos contas.
Podemos fazer uma analogia entre as -hlices e o colar: a seqncia primria da protena (colar de contas) se
enrola ao redor de um eixo imaginrio de tal forma que, para dar uma volta ao redor deste eixo, so necessrios
3,6 aminocidos (contas). Esta estrutura estabilizada por pontes de H (b) e interaes de Van der Waals. Em (c),
voc v a estrutura de uma protena do nosso plasma sangneo que possui apenas -hlices: como elementos da
estrutura secundria: a albumina.

36

CEDERJ

MDULO 1

aminocido), o que ocupa 5,4 . Isso significa que um aminocido (por


exemplo, na posio 1) em uma -hlice far pontes de H com outro
cerca de quatro posies sua frente (no exemplo, com o aminocido
na posio 5).
Na espiral, os grupamentos R dos aminocidos ficam voltados

ANGSTRM ()
Angstrm uma
unidade de medida
que equivale a 1010m.
Para voc dimensionar
melhor:
1mm = 10-3m
1m = 10-6m
1nm = 10-9m
1 = 10-10m

para o exterior, j que muitos deles so volumosos e, por esta razo,


dificilmente se ajustariam ao interior da hlice.
As -hlices so altamente estveis devido presena de um grande
nmero de pontes de hidrognio (representadas na Figura 12.2 e no quadro
a seguir por | | | |) que se formam entre o hidrognio do grupamento amino
de um resduo de aminocido e o oxignio do grupamento carboxila de
outro resduo, situado quatro posies frente:

Quadro 12.1: Estabilizao das -hlices por pontes de hidrognio formadas entre
o grupamento amino de um aminocido e o grupamento carboxila de outro quatro
posies frente.

NH | | | | O = C
Aminocido 1
Aminocido 5
(grupamento amino)
(grupamento carboxila)

Ponte de H

Ponte de H
Estrutura de uma -hlice, mostrando
as pontes de H que se formam entre
os resduos de aminocidos).

As pontes de H se formam naturalmente, pois h interao entre


as nuvens eletrnicas daqueles tomos de hidrognio e oxignio de que
falamos. Uma espcie de malha invisvel se forma ao redor da espiral,
fazendo com que a hlice mantenha esta conformao.

CEDERJ

37

12

resduos de aminocidos (isto , trs aminocidos e 60% de um quarto

AULA

Em uma -hlice, cada volta da espiral possui, em mdia, 3,6

Bioqumica I | Protenas 2 Voc sabe o que estrutura secundria de uma protena?

INTERAES (OU
CONTATOS) DE
VAN DER WALLS
So interaes fracas
que se estabelecem
entre dois tomos que
se aproximam muito
um do outro. Cada
tomo apresenta uma
nuvem de eltrons que
influencia o tomo
vizinho, atraindo-o ou
repelindo-o.

A manuteno da estrutura da hlice garantida, ainda, pelas


interaes de VAN DER WAALS que acontecem em seu interior, fazendo com
que esta regio seja bastante empacotada (veja o boxe a seguir).

O que significa empacotadas?


Para entender melhor este conceito de
como empacotar uma protena em uma
-hlice, imagine uma mola. Uma mola
uma espiral, e possui estrutura anloga da
hlice. Se tivssemos no interior dessa mola
foras capazes de fazer com que o dimetro
dela diminusse, o que voc veria seria um
fenmeno parecido com o que as foras de
van der walls proporcionam -hlice!
Fonte: http://www.sxc.hu/
photo/651534

Agora pense um pouco mais: voc j aprendeu que, na constituio


de protenas, pode haver vinte aminocidos diferentes. Essas diferenas
esto nas suas estruturas e se refletem nas propriedades qumicas que
apresentam (hidrofobicidade x afinidade pela gua, carter bsico x
carter cido etc). Ser que, em uma seqncia primria, todos os
aminocidos se comportam da mesma maneira, isto , ser que todos
eles formam -hlices, por exemplo?

A arrumao dos aminocidos nas hlices


A resposta para a pergunta anterior NO! Vamos entender o
porqu?
Se aminocidos com grupamentos R volumosos, como a asparagina,
serina e treonina aparecem lado a lado na seqncia primria de uma
determinada protena, dificultam a organizao em hlice. Por outro lado,
como vimos na Aula 8, que apresentou os aminocidos, existem alguns
que so carregados positiva ou negativamente em pH neutro (relembre
as caractersticas dos aminocidos no boxe a seguir). Ter isso em mente
importante para entender o que vem logo em seguida.

38

CEDERJ

MDULO 1

12
AULA

Relembrando caractersticas dos aminocidos


Os vinte aminocidos constituintes de protenas
Aminocidos
apolares

Aminocidos
aromticos

Aminocidos
polares sem carga

Aminocidos
polares carregados

Glicina
Alanina
Valina
Leucina
Isoleucina
ProlinaMetionina

Fenilalanina
Tirosina
Triptofano

Serina
Treonina
Cistena
Asparagina
Glutamina

Lisina (+)
Arginina (+)
Histidina (+)
Aspartato ()
Glutamato ()

Lembra-se de como se formam pontes de hidrognio nas -hlices?


Ento, agora, analise a seqncia de aminocidos a seguir. O que voc
acha que aconteceria com ela? Ser que ela seria uma boa formadora
de -hlice?
Posio
Resduo

serina aspartato leucina alanina valina glutamato treonina

A seqncia anterior uma boa formadora de hlice?


(

) Sim

) No

A resposta no.
A explicao para isto que a
serina (posio 1) tenderia a formar
uma ponte de hidrognio com a valina

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/264245

(posio 5), que o quarto aminocido


sua frente na seqncia primria. At a, tudo bem! Entretanto, o cido
asprtico (posio 2), que um resduo que em pH neutro se encontra
carregado negativamente, deveria formar uma ponte de hidrognio com
o cido glutmico (posio 6), quatro posies sua frente, tambm
carregado negativamente. Ser que este encontro seria favorecido?
Voc aprendeu que cargas de mesmo sinal tendem a se repelir.
Logo, o cido asprtico (negativo) no capaz de interagir com o cido
glutmico (tambm negativo), desestabilizando a hlice, fazendo com
que ela se desmonte.
E se pensarmos nesta mesma seqncia sendo que, no lugar de
termos um cido glutmico (posio 6), tivermos uma lisina ou arginina,

CEDERJ

39

Bioqumica I | Protenas 2 Voc sabe o que estrutura secundria de uma protena?

ambas aminocidos carregados positivamente em pH neutro? Ser que


esta seqncia formaria uma -hlice? A resposta sim!!!! O encontro do
cido asprtico (negativo) com um resduo de lisina (positivo) fortalece
a -hlice, j que forma um par inico.
O mesmo raciocnio pode ser empregado no que se refere aos
aminocidos aromticos e apolares, como o triptofano, a tirosina e
a fenilalanina. Se eles se encontram separados na seqncia por um
intervalo de trs aminocidos (ou seja, quatro posies frente), podem
formar contatos chamados de interao hidrofbica, j que vo tender
a ficarem juntos e longe da gua. A interao hidrofbica entre esses
aminocidos fortalece a -hlice. Veja o exemplo:
Posio
Resduo

...isoleucina serina alanina treonina leucina lisina

A isoleucina (posio 1), bastante apolar, faria interao


hidrofbica com a leucina, tambm apolar, que est quatro posies a
sua frente, fortalecendo a hlice.
Uma pergunta que voc pode estar se fazendo neste momento :
ser que existem aminocidos que no participam da formao de uma
-hlice?
Os resduos prolina e glicina so os piores formadores de -hlice.
RELEMBRE A
ESTRUTURA DA
PROLINA

Por qu? Por causa das suas estruturas.


A PROLINA m formadora de -hlice porque possui seu tomo de
nitrognio como parte de um anel, o que impossibilita que a ligao N-C
gire para formar uma espiral. Alm disso, por causa de caractersticas
qumicas da estrutura da prolina, o nitrognio da prolina envolvido neste
anel no dispe de hidrognios para formar as pontes de hidrognio
necessrias formao de uma hlice. Dessa forma, muito raro
encontrar prolinas no meio de uma -hlice.
Outro aminocido que tambm no funciona bem na formao de
-hlices a glicina. A glicina uma m formadora de -hlice devido
sua grande flexibilidade. Por ser um aminocido pequeno (o menor deles),
a glicina apresenta grande mobilidade no espao, o que desestabiliza
tanto -hlices quanto folhas- (que voc ver o que so em seguida).

40

CEDERJ

MDULO 1

12

Somente as estruturas conhecidas como voltas permitem que as glicinas

AULA

se movimentem mais livremente, e a que podemos encontrar uma


concentrao grande deste aminocido.
Resumindo, podemos dizer que so quatro os fatores que facilitam
ou dificultam a formao de uma -hlice:
1. a repulso ou a atrao eletrnica entre resduos carregados positiva
e/ou negativamente;
2. o tamanho das cadeias laterais de resduos vizinhos;
3. as interaes entre resduos hidrofbicos separados entre si trs ou
quatro aminocidos de distncia na seqncia primria (interaes
hidrofbicas);
4. a presena de prolinas e glicinas.
ATIVIDADE
1

1. Caracterizando -hlices
Considere os quatro tpicos que voc leu no pargrafo anterior sobre
fatores que facilitam ou dificultam a formao de -hlices. A partir deles,
analise a seqncia a seguir:
leucina-histidina-valina-fenilalanina-alanina
Agora, responda: esta seqncia pode formar uma -hlice? Por qu?
Justifique com base nos quatro itens discriminados no boxe de ateno
antes desta atividade e consulte o boxe Relembrando caractersticas dos
aminocidos.
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
RESPOSTA COMENTADA

Se voc concluiu que a seqncia apresentada uma boa formadora


de -hlice, acertou! Voc provavelmente deve ter justificado essa
resposta assim:
1. No h cargas de mesmo sinal se repelindo nesta seqncia.
2. No h dois aminocidos volumosos prximos para desestabilizar
a hlice.
3. Leucina e fenilalanina vo formar interao hidrofbica que
fortalece a hlice.
4. No h prolinas e glicinas na cadeia.

CEDERJ

41

Bioqumica I | Protenas 2 Voc sabe o que estrutura secundria de uma protena?

AS FITAS
As folhas so a segunda maneira de os aminocidos da seqncia
primria de uma protena se organizarem no espao. As folhas formam
estruturas semelhantes a um ziguezague, semelhantes s pregas de uma
saia de colegial ou a um leque. As fitas so como tiras que voc cortasse
do leque, perpendicularmente orientao de suas tiras. O conjunto
dos ziguezagues formado com dois ou mais cortes deste equivale a uma
folha .
E como se formam as fitas em uma protena para que, em
seguida, possamos ter uma folha ?
Os aminocidos de uma cadeia polipeptdica, como voc bem
sabe, tm caractersticas qumicas variadas. Estas caractersticas fazem
com que a seqncia primria da protena no seja linear no espao
(lembre do exemplo do colar de contas, que, quando solto em cima da
mesa, tende a assumir uma conformao no-linear). Em alguns casos,
as caractersticas dos aminocidos fazem com que eles se organizem na
forma de uma -hlice, como voc viu na seo anterior desta aula. Em
outros casos, eles podem promover uma dobra na cadeia polipeptdica,
colocando lado a lado e alinhados dois ou mais pedaos da protena.
Difcil de visualizar? Veja a Figura 12.3:

(a)

Folha

(b)

Fita
Fita

Figura 12.3: Semelhana entre as fitas e o ziguezague das dobras de um leque


ou das pregas de uma saia de colegial. Em (a) voc v a folha de cima. Repare
que duas partes da cadeia polipeptdica esto ligadas por pontes de H, e que os
grupamentos laterais (esferas com R) esto para cima ou para baixo do plano da
cadeia principal, onde se encontram os carbonos (esferas pretas). Em (b) voc
v as fitas lateralmente, e poder perceber com facilidade o ziguezague desta
estrutura, semelhante a um leque ou a uma saia de colegial.

42

CEDERJ

MDULO 1

12

As fitas , assim como a folha , so estabilizadas por pontes de H,

AULA

que proporcionam a esta estrutura bastante estabilidade e um certo grau


de rigidez. O padro de formao de pontes de hidrognio das folhas
completamente diferente do padro observado nas -hlices.
Para que se forme uma folha , necessrio que se estabeleam
contatos entre as fitas , ou seja, as pontes de hidrognio fazem com que
duas fitas formem uma folha . Como ficam os grupamentos R dos
aminocidos nas folhas ? Eles ficam voltados para cima ou para baixo
do plano em que corre a folha , conforme voc pode ver na Figura 12.3.
Esta maneira de se posicionar permite que grupamentos volumosos no
interfiram com a organizao das folhas .
Existem dois tipos de fitas : as paralelas e as antiparalelas (Figura
12.4). Toda vez que uma protena se dobrar de forma que a extremidade
carboxila esteja orientada no mesmo sentido da extremidade amino,
teremos uma fita paralela; quando amino-terminal e carboxi-terminal
estiverem em sentidos opostos (seguindo-se o fio da protena),
estaremos diante de uma fita antiparalela.

(a)

(b)

(c)

N
C

Fita paralela

Fita paralela

Figura 12.4: Esquema de formao das fitas paralelas e antiparalelas. Imagine a


seqncia primria de uma protena (representada em a) sofrendo dobras por causa
das propriedades qumicas dos seus aminocidos. Se duas partes da seqncia se
alinharem, possvel que se forme uma fita (setas em b e c). Se a fita se formar
entre um pedao da protena e outro que est no mesmo sentido da extremidade
amino da protena (N), teremos uma fita paralela; caso se forme entre dois pedaos
em orientaes de sentido opostas, a fita ser chamada de antiparalela.

CEDERJ

43

Bioqumica I | Protenas 2 Voc sabe o que estrutura secundria de uma protena?

Um ponto importantssimo no que diz respeito s folhas que


elas podem ser formadas por fitas que esto muito distantes na seqncia
primria da protena, separadas por hlices ou voltas (Figura 12.5). No
se preocupe, pois sobre estas ltimas voc aprender ainda nesta aula,
mais adiante.

Fita

Fita

Fita

Fita

Hlice
Volta
(a)

(b)

Figura 12.5: Estruturas como as fitas/folhas podem


aproximar regies distantes de uma protena, como os
aminocidos de uma extremidade (amino - N-terminal)
e de outra (carboxila C-terminal).

Assim como nos perguntamos para as -hlices: ser que qualquer


aminocido fica bem acomodado numa folha ? Obviamente, quando
as fitas que formam uma folha esto muito prximas, a presena de
grupamentos R muito volumosos dificulta essa aproximao.
Peter Chou e Gerald Fasman, analisando a composio secundria
de diversas protenas, elaboraram, em 1978, uma tabela com a propenso
de cada resduo para formar uma -hlice ou folha (veja o Quadro 12.2).
Quanto maior o valor de P (probabilidade), maior a propenso daquele
resduo para formar uma dada estrutura secundria. Esta tabela pde
auxiliar os pesquisadores na previso da estrutura secundria de uma
determinada seqncia desconhecida.

44

CEDERJ

MDULO 1

-Hlice

AULA

12

Quadro 12.2: Probabilidade de um dado aminocido ser encontrado nos dois


principais tipos de estrutura secundria. Quanto maior a barra cinza, maior a
probabilidade de acharmos o resduo formando as estruturas

Fita

Glu
Met
Ala
Leu
Lis
Fen
Gln
Trp
Ile
Val
Asp
His
Arg
Tre
Ser
Cis
Asn
Tir
Pro
Gli
P

Caso em que as folhas fazem diferena no


mundo visvel!
A fibrona da seda uma protena produzida
por insetos e aracndeos e que est presente
na formao dos casulos, teias, ninhos etc.
A fibrona da seda da mariposa Bombyx
mori, por exemplo, constituda de folhas
antiparalelas possuindo uma repetio de seis
aminocidos ao longo de sua estrutura primria.
So eles: Gli-Ser-Gli-Ala-Gli-Ala.
Nas folhas da fibrona, as fitas se empilham
de modo que os grupamentos R dos resduos de
glicina de uma fita se encaixam perfeitamente
na fita adjacente. Do mesmo modo, os
grupos R das serinas ou alaninas se encaixam
na fita adjacente formando uma estrutura
bem empilhada e empacotada. A resistncia
das teias e sedas se deve a esta organizao
das folhas , conforme voc vai ver com mais
detalhes na Aula 15.

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/700563

CEDERJ

45

Bioqumica I | Protenas 2 Voc sabe o que estrutura secundria de uma protena?

As folhas , portanto, podem acontecer entre diversos resduos de


aminocidos de uma seqncia primria. Sua ocorrncia importante
por proporcionar protena uma estrutura mais resistente; dependendo
da funo desta protena, isso pode ser fundamental.

ATIVIDADE
2

2. Caracterizando folhas
Voc aprendeu que as fitas so formadas pela ligao entre dois trechos
distantes da seqncia da protena.
A seguir, voc ver dois pequenos trechos de uma protena que, aps
esta comear a assumir uma conformao tridimensional, ficaram lado
a lado.
Trecho 1
N-terminal

TRIPTOFANO TREONINA FENILALANINA VALINA

C-terminal

VALINA TREONINA TIROSINA ARGININA

Trecho 2
N-terminal

PROLINA
GLUTMICO

ISOLEUCINA SERINA

LISINA

LISINA

C-terminal

Perguntas:
a. Qual desses dois trechos no forma uma fita ? Justifique sua resposta.
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
b. Que tipo de ligao necessrio que acontea para que se forme uma
fita (ou folha) ?
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
c. No trecho que forma fita , quais so as orientaes destas fitas (paralelas
ou antiparalelas)?
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

46

CEDERJ

MDULO 1

12
AULA

RESPOSTA COMENTADA

Se voc consultou o Quadro 12.1, viu que somente o trecho 1


que pode constituir uma fita . Isso porque, nele, esto presentes
aminocidos com alta probabilidade de participar deste tipo de
estrutura. O trecho 2 constitudo por aminocidos que tm baixa
propenso para assumir conformao de fita . Os aminocidos
do trecho 1, pareados como mostrado no enunciado da questo,
formaro uma fita pelo estabelecimento de pontes de H, que deve
ter sido sua resposta para a letra b. S para complementar, essas
pontes so formadas entre o oxignio do grupamento carboxila de
um aminocido com o hidrognio do grupamento amino de outro
aminocido, localizado paralelamente ao primeiro.
Quanto orientao das fitas (letra c), devemos levar em conta as
posies do C-terminal e do N-terminal da protena em questo.
Como N-terminal e C-terminal do trecho 1 esto em sentidos opostos
(se seguirmos o fio seqncia primria da protena), esta fita
antiparalela.

AS VOLTAS
As voltas conectam diferentes segmentos das protenas, podendo
mudar a direo da cadeia. Podem estar presentes (1) entre duas -hlices,
(2) conectando uma -hlice a uma fita ou vice-versa, ou, ainda, (3)
conectando duas fitas para a formao de uma folha antiparalela.
Neste ltimo caso, so ditas voltas (Figura 12.6).

Figura 12.6: As voltas , formadas por quatro aminocidos. Na figura, cada esfera
preta representa o carbono a de um aminocido. O grupamento amino do primeiro
se liga, por ponte de hidrognio, ao grupamento carboxila do ltimo (N | | | | O),
formando a volta.

CEDERJ

47

Bioqumica I | Protenas 2 Voc sabe o que estrutura secundria de uma protena?

As voltas so formadas por quatro aminocidos que se mantm


formando uma espcie de estrutura em semicrculo, em que o primeiro
resduo da volta faz uma ponte de hidrognio com o quarto resduo da
volta. Os dois resduos centrais no mantm nenhum contato especfico.
Ser que tambm existem resduos que se apresentam com mais
freqncia nas voltas? Mais uma vez, a resposta positiva! Prolinas e
glicinas so timas formadoras de voltas, exatamente pelos mesmos
motivos que fazem desses dois aminocidos maus formadores de hlices.
IMINOCIDO
Um iminocido um
aminocido que possui
seu nitrognio (do
grupamento amino)
formando um ciclo.

A glicina, por ser muito flexvel e pequena, fica bem acomodada


nessas voltas. A prolina, por ser um IMINOCIDO, assume uma conformao
propcia para este tipo de estrutura.

ATIVIDADE FINAL
1

Estrutura secundria de uma protena


A estrutura secundria de uma protena constituda por -hlices, folhas e
voltas. Analise a seqncia a seguir, de uma protena hipottica (os nmeros na
frente das linhas indicam a posio do primeiro aminocido daquela linha na
seqncia total):
1

leucina-histidina-valina-fenilalanina-alanina-

-prolina-glicina-alanina-prolina-valina-

11 -treonina-tirosina-arginina-prolina-glicina16 -serina-glicina-valina-fenilalanina-treonina21 -tritopfano

a. Identifique possveis stios (regies) de formao de voltas (escreva na linha


a seguir os nmeros dos aminocidos envolvidos na volta ).
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________

48

CEDERJ

MDULO 1

12

b. Identifique a regio na qual esta protena assumir uma conformao -hlice.

AULA

______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________

c. H possibilidade de formao de fita ? Entre quais aminocidos?


______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
RESPOSTA COMENTADA

Esta atividade oferece um grau de dificuldade maior do que as outras


por ser mais integradora e abordar todos os elementos que constituem
a estrutura secundria de uma protena. Alm disso, ela mostra uma
seqncia partida em cinco linhas para voc visualizar por inteiro e
identificar regies de volta, hlice e fita . , no era simples, mas,
certamente, muito valiosa para a sua aprendizagem!
Pedimos que voc identificasse as possveis voltas primeiro pois
elas eram as mais fceis. Voc aprendeu na aula que as voltas so
formadas entre quatro aminocidos, especialmente glicinas e prolinas.
A primeira volta formada pelos aminocidos 6, 7, 8 e 9; a segunda,
entre os resduos 14, 15, 16 e 17. Estes dois grupos de aminocidos
so majoritariamente constitudos por glicinas e prolinas.
Em seguida, voc deve ter identificado a -hlice, constituda pelos
primeiros cinco aminocidos. Entre eles no h cargas contrrias se
repelindo, aminocidos volumosas em conflito, glicinas e prolinas, boas
condies para a formao da -hlice.
Com a formao da segunda volta (entre os resduos 14-17), os
aminocidos valina-treonina-tirosina-arginina (10-13) e valinafenilalanina-treonina-tritopfano (18-21) se aproximam. Estes
aminocidos tm grande propenso a formar fita quando se
encontram pareados, como o caso. Assim, estes resduos se associam
por pontes de H e formam uma fita .

CEDERJ

49

Bioqumica I | Protenas 2 Voc sabe o que estrutura secundria de uma protena?

RESUMO

A estrutura secundria de uma protena a organizao espacial dos seus


aminocidos em trs estruturas: -hlices, folhas e voltas.
As -hlices se formam pelo enovelamento da seqncia primria ao redor de um
eixo imaginrio, simulando uma estrutura semelhante a uma espiral de caderno.
Esta estrutura estabilizada por pontes de H e por interaes de Van de Waals.
As folhas so tambm arranjos espaciais que a seqncia primria pode tomar.
Sua maior caracterstica o fato de unir regies bastante distantes de uma
protena, formando uma espcie de ziguezague semelhante a um leque ou a
uma saia de colegial. Quando dois pedaos da protena se ligam por pontes de
H formando uma tira do leque, dizemos que se formou uma fita . Quando
vrias fitas se associam (formando uma estrutura semelhante ao leque inteiro),
temos as folhas .
O terceiro arranjo espacial chamado de voltas. As voltas so tores na seqncia
primria, que tambm podem ser estabilizadas por ponte de H. No caso das voltas
, temos sempre quatro aminocidos envolvidos, e o primeiro se liga ao quarto
por uma ponte de hidrognio.
Todas essas trs estruturas estabilizam a estrutura terciria de uma protena,
importante para que ela execute sua funo no organismo/natureza.

INFORMAES SOBRE A PRXIMA AULA


Voc aprendeu hoje, isoladamente, como uma protena pode comear a se organizar
no espao. Na prxima aula, voc ver como estas conformaes (-hlices, folhas
e voltas) fazem uma protena se arrumar no espao, imaginando todos esses
elementos ao mesmo tempo em uma cadeia polipeptdica. At l!

50

CEDERJ

AULA

Protenas 3 Agora, sim:


as protenas no espao!

13
Metas da aula

objetivos

Apresentar as estruturas terciria e


quaternria de protenas, as foras que
mantm essas estruturas e as tcnicas
utilizadas para desvend-las.

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:


1

relacionar as interaes moleculares e a


manuteno das estruturas terciria e quaternria;

identificar tcnicas para determinao da estrutura


terciria de uma protena;

diferenciar estrutura terciria e quaternria


de protenas;

identificar um grupamento prosttico associado


a uma protena.

Pr-requisitos
Para acompanhar esta aula, voc precisa ter em mente o que
so as -hlices, as folhas e as voltas, temas abordados
na aula passada, sobre estrutura secundria das protenas.

Bioqumica I | Protenas 3 Agora, sim: as protenas no espao!

INTRODUO

Os cientistas estimam que o homem sintetize cerca de 100 mil protenas


diferentes em seu organismo. Estas molculas, como voc j sabe, so
responsveis por funes vitais do nosso corpo, como gerao de energia,
contrao muscular (incluindo o msculo cardaco), entre outras.
Algumas doenas so causadas por disfunes de determinadas protenas,
quer seja excesso, falta ou mau funcionamento. Um exemplo o mal de
Alzheimer, causado pelo acmulo de uma protena especfica (protena
-amilide) no crebro.

Figura 13.1: O mal de Alzheimer uma doena que afeta a atividade


dos neurnios (neurodegenerativa) e que acomete, principalmente,
indivduos de idade mais avanada. Esta doena causada pelo
acmulo de uma protena (protena -amilide) no crebro do
indivduo, prejudicando a manuteno de informaes recentes,
ou seja, causando perda de memria.

Conhecer a estrutura das protenas fundamental para que a Cincia possa


trabalhar no desenvolvimento de drogas especficas contra certas patologias.
Uma droga que se ligue protena -amilide, por exemplo, poderia favorecer
sua degradao ou impedir seu acmulo, prevenindo a manifestao do mal
de Alzheimer.
Nesta aula, voc continuar aprendendo sobre a estrutura das protenas, s que
agora ver como elas se organizam no espao (de maneira tridimensional).

52

CEDERJ

MDULO 1

13

A ESTRUTURA TERCIRIA DE UMA PROTENA

AULA

O arranjo tridimensional das -hlices, folhas e voltas no espao


conhecido como estrutura terciria da protena (Figura 13.2). Para
melhor entendermos isto, imagine um cadaro de sapato. Esticado, ele
equivale seqncia primria; quando voc faz a primeira dobra para
comear o lao, equivaleria estrutura secundria. Para amarrar o seu
sapato, preciso que o seu cadaro se dobre sobre si mesmo mais de
uma vez, at formar o lao. mais ou menos isto o que acontece com as
protenas. Os elementos de estrutura secundria (hlices, fitas e voltas)
vo se dobrando e se organizando no espao at que a protena atinge
sua conformao final. ento que ela assume sua funo, a qual pode
ser, por exemplo:
a defesa do organismo, como o caso dos anticorpos;
a regulao da expresso gnica, ativando ou reprimindo genes de
determinadas protenas;
a catlise (acelerao) de uma reao funo das enzimas;
o capsdeo (cobertura) de uma partcula viral, como o caso de
algumas protenas estruturais.

Estrutura primria
Aminocidos

Fita

-hlice

Estrutura secundria

Estrutura terciria
Representao da fita
Representao de -hlice

Figura 13.2: Os trs primeiros nveis organizacionais de uma protena. A seqncia de


aminocidos (estrutura primria) pode assumir conformaes de -hlice e de fitas
ou folhas , o que caracteriza a estrutura secundria. Quando as -hlices e as fitas/
folhas se organizam no espao e assumem uma conformao tridimensional, temos
a estrutura terciria de uma protena.

Mas voc sabe como essa estrutura mantida?

CEDERJ

53

Bioqumica I | Protenas 3 Agora, sim: as protenas no espao!

FORAS QUE MANTM A ESTRUTURA TERCIRIA DAS


PROTENAS
Por diversos estudos, hoje sabemos que a estrutura terciria das
protenas mantida por pontes de hidrognio, interaes apolares,
interaes inicas, e as foras de van der Walls todas entre as cadeias
laterais dos resduos de aminocidos. Alm dessas, a estrutura terciria
mantida tambm pelas pontes de enxofre que se formam quando duas
cistenas se aproximam no espao (Figura 13.3).

Estrutura terciria organizao espacial das


-hlices e das fitas-

Detalhe das foras que mantm a estrutura


terciria
Interaes hidrofbicas
(entre dois aminocidos
hidrofbicos)

Cadeia polipeptdica

Ponte de
hidrognio

Ponte dissulfeto

Fita
-hlice

Interaes inicas

Figura 13.3: Foras que mantm a estrutura terciria de uma protena. As -hlices
e as fitas de uma protena se organizam em um arranjo espacial mantido por
diversas interaes, como voc pode ver na figura.
Estas interaes so as responsveis pela manuteno da estrutura terciria de
uma protena.

De todas essas interaes, a mais forte , sem dvida, a ponte de


enxofre, j que a nica que envolve uma ligao covalente.
Para quebr-la, necessrio que se adicione protena um agente
redutor de pontes de enxofre. Este agente, que pode ser o ditiotreitol (DTT),
o mercaptoetanol, a glutationa etc., funciona desfazendo a ponte dissulfeto
ao doar hidrognios para cada uma das cistenas. Veja:

54

CEDERJ

MDULO 1
AULA

Cistena S S cistena

13

Adio de agente redutor H


Cistena SH e HS cistena

Ponte intacta

Ponte quebrada

(cistina)
Uma ponte dissulfeto pode unir duas cistenas bastante distantes
na seqncia primria, auxiliando o arranjo tridimensional da protena.
Desfazer uma ponte dissulfeto com um agente redutor desestabilizar
a estrutura terciria de uma protena, expondo regies que estavam
voltadas para o interior da protena por algum motivo, o qual voc
descobrir logo aps realizar a Atividade 1.

ATIVIDADE
1
1. Mantendo as protenas no espao!
At agora, voc aprendeu trs nveis de organizao das protenas. Cada um
desses nveis caracterizado e depende de determinados tipos de ligaes
e interaes entre os aminocidos para serem mantidos. Relacione o nvel
de organizao protico ao tipo de interao/ligao que o mantm:

( 1 ) Estrutura primria
( 2 ) Estrutura secundria
( 3 ) Estrutura terciria
a. ( ) interaes entre aminocidos hidrofbicos;
b. ( ) ligaes peptdicas;
c. ( ) pontes de H entre a carboxila de um aminocido e o
hidrognio de outro;
d. ( ) interaes inicas;
e. ( ) interaes entre os tomos de enxofre de duas cistenas.
RESPOSTA COMENTADA

A estrutura primria de uma protena mantida por ligaes


peptdicas entre os resduos de aminocidos.
A estrutura secundria acontece por se formarem pontes de H
entre o oxignio da carboxila de um aminocido e o hidrognio do
grupamento amino de outro e por interaes apolares.
A estrutura terciria, por sua vez, mantida por pontes de hidrognio,
interaes apolares, interaes inicas e pontes dissulfeto entre as

CEDERJ

55

Bioqumica I | Protenas 3 Agora, sim: as protenas no espao!

cadeias laterais dos resduos de aminocidos presentes. A resposta


para a atividade, portanto, :
a. 2 e 3;
b. 1;
c. 2 e 3;
d. 3;
e. 3.
Essas so as mesmas foras que mantm a estrutura quaternria
de uma protena, s que no acontecem mais em uma s cadeia,
e sim em mais de uma. Mas isso voc vai ver daqui a pouco...

DISTRIBUIO DOS AMINOCIDOS NA PROTENA


SEGUNDO SUA NATUREZA QUMICA
Um aspecto importante quando analisamos a estrutura terciria das
diversas protenas que h uma tendncia de se encontrarem aminocidos
apolares no seu interior, enquanto os aminocidos polares podem ser
encontrados na superfcie da protena. Pense um pouco: voc v alguma
razo para que tal fato ocorra?
A tendncia que os aminocidos apolares apresentam de se
esconder dentro da protena est relacionada ao fato de que no interior
de muitas dessas molculas existem poucas molculas de gua ou quase
nenhuma. Os aminocidos apolares, portanto, se situam com freqncia
no interior das protenas para evitar o contato com a gua, uma vez que
eles no conseguem interagir com esta molcula.
O mesmo no ocorre com os aminocidos polares, que interagem
com a gua formando pontes de H e, por isso, podem se localizar em
regies mais expostas gua, na superfcie das protenas.

56

CEDERJ

MDULO 1
AULA

13

COMO DESCOBRIR A ESTRUTURA DE UMA PROTENA?


Cada protena apresenta uma estrutura terciria que lhe
caracterstica. Todas as

MIOGLOBINAS

da espcie humana, por exemplo,

apresentam a mesma estrutura terciria.

MIOGLOBINAS
So protenas presentes
nas clulas musculares,
capazes de transportar/
armazenar oxignio
unicamente para as
clulas nas quais residem.
As mioglobinas so
capazes de desempenhar
esta funo porque,
associada sua estrutura,
h uma molcula capaz
de se ligar ao oxignio,
a mesma molcula
que encontramos
na hemoglobina,
possibilitando o
transporte desse gs no
nosso sangue.

Molcula capaz de
se ligar ao oxignio
e mant-lo associado
protena

Mioglobina, com muitas


-hlices e uma estrutura
bastante irregular

Mas como possvel desvendar e conhecer a estrutura terciria


de uma protena?
A estrutura terciria de uma protena pode ser obtida pela
utilizao de dois mtodos: difrao de raios X e ressonncia magntica
nuclear. Estas tcnicas nos permitem conhecer os detalhes da estrutura das
protenas, de forma a saber quais partes da protena esto mais prximas
e quais partes esto mais afastadas. quase como tentar entender como
se enrola um novelo de l!
Ambas as tcnicas so bastante sofisticadas, e o que fazem, em
ltima anlise, fornecer um retrato microscpico da protena. Este
retrato ento decifrado por especialistas nestas tcnicas que, com a
ajuda de computadores, acabam gerando uma imagem tridimensional,
refinada e precisa, dos contatos entre os tomos na protena.
Conhea essas tcnicas a seguir!

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57

Bioqumica I | Protenas 3 Agora, sim: as protenas no espao!

CRISTALOGRAFIA DE RAIOS X
Para se desvendar a estrutura de uma protena por esta tcnica,
necessrio obter uma imagem do padro de difrao (espalhamento) de
raios X desta protena. S que, para poder fazer este experimento, voc
CRISTAL
O cristal a que nos
referimos assemelha-se
visualmente quele
presente no acar
cristalizado (tambm
conhecido como acar
cristal ou acar de
confeiteiro). uma
estrutura formada
pela arrumao no
espao de maneira
organizada dos tomos
da substncia que o
compe.

precisa, primeiro, obter o CRISTAL desta protena.


Existem diversas tcnicas para se obterem cristais de protenas, e o
conjunto delas chamado cristalografia. Em geral, necessrio ter a protena
a ser analisada em estado altamente puro e em alta concentrao.
Alm disso, utilizam-se agentes qumicos, como, por exemplo, o
polietileno glicol. Um agente como este faz com que a protena se dissocie
de molculas de gua que porventura estejam ao seu redor, facilitando
a formao do cristal.
Assim, no cristal, a quantidade de gua reduzida e as molculas
esto perfeitamente ordenadas. Isso importante para se obter um padro
de difrao (espalhamento) de raios X, e voc j vai entender o porqu.
Uma vez obtido o cristal, incide-se sobre ele radiao (raios) do
tipo X. Os tomos da protena (no cristal) recebem esta radiao, que se
espalha produzindo o que se chama de padro de difrao de raios X.
Fazer a cristalografia de uma protena fundamental para se obter
um padro de difrao homogneo. Ou seja, ter um cristal faz com que,
independentemente de em que lado da sua amostra voc v incidir os
raios X, o padro de difrao que voc vai ver ser sempre o mesmo.
Cada protena possui um padro de difrao prprio. como se
cada combinao de tomos possusse uma impresso digital prpria,
cuja anlise permite que se conheam os detalhes daquela molcula. Com
a ajuda de computadores e programas especficos, estas impresses
digitais so decifradas, chegando-se estrutura final da protena. Veja,
na Figura 13.4, a estrutura j conhecida de algumas protenas:

58

CEDERJ

MDULO 1

13
AULA

Pepsina
Citocromo c

Lisozima

Albumina

Figura 13.4: Estrutura terciria, j conhecida, de algumas protenas. Observe, nas


quatro, a presena de -hlices (representadas por espirais) e de fitas (representadas
por setas largas na pepsina e na lisozima), em um arranjo tridimensional. No primeiro
quadro, est a pepsina, protena responsvel pela digesto de protenas no nosso
estmago. direita da pepsina est o citocromo c. Junto com sua estrutura esto
representados, no centro, alguns pontos cinza-escuro, que representam uma
molcula que fica associada estrutura do citocromo c. Essa molcula capaz
de doar e receber eltrons com facilidade, o que importante para a sua funo
(participar da cadeia transportadora de eltrons, uma via que participa da gerao
de energia dentro da clula). J a lisozima uma protena presente nas lgrimas,
na saliva e em outras secrees, e que atua como defesa contra microorganismos.
A albumina, por sua vez, uma protena presente em grandes quantidades no nosso
sangue, e atua carregando molculas de um lado para o outro do corpo.

Desvendando uma protena dos nossos msculos...


Em 1958, John Kendrew, ao analisar os cristais da mioglobina, a primeira
protena a ter sua estrutura cristalogrfica determinada, observou
espantado que a estrutura desta protena era bastante complicada,
irregular e assimtrica. O que as anlises de Kendrew mostraram que
a estrutura da mioglobina faz com que esta protena apresente em sua
superfcie reentrncias, formando cavidades e bolsos.
Hoje, sabemos que esta irregularidade na superfcie das protenas,
na verdade, muito importante, por exemplo, para permitir que elas
interajam entre si, ou com outras molculas da clula, como duas peas
de um quebra-cabea que se encaixam.

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59

Bioqumica I | Protenas 3 Agora, sim: as protenas no espao!

RESSONNCIA MAGNTICA NUCLEAR


A Ressonncia Magntica Nuclear (RMN) outra tcnica que permite
a elucidao da estrutura das protenas. Diferentemente da difrao de raios
X, na RMN a protena fica em soluo e no na forma cristalizada.
A protena de interesse, em soluo, levada para um equipamento
chamado espectrmetro de ressonncia. Neste equipamento, a molcula
de protena colocada sob um campo magntico muito forte. Em seguida,
PULSOS DE

so aplicados PULSOS DE RADIOFREQNCIA que so absorvidos pelos ncleos

RADIOFREQNCIA

dos tomos presentes na molcula da protena, excitando-os. Quando

Exposies de uma
amostra (no caso do
assunto da nossa aula,
protenas) a ondas
com o comprimento
das ondas de rdio,
por tempos curtos.
As exposies a estas
ondas desencadeiam
alteraes na
organizao dos
eltrons de um tomo,
deixando-o no que
chamamos estado
excitado.

esses ncleos retornam ao seu estado basal, isto , no excitado, eles


emitem de volta radiofreqncias que so especficas de cada um dos
tomos (nas protenas encontramos sempre carbonos, hidrognios e
oxignios) e que podem ser medidas.
Existem seqncias de pulsos especficas, que revelam no s qual
o tomo, mas como ele est ligado a outros tomos, por exemplo, por
meio de uma ligao covalente. Neste caso, pode-se conhecer o tipo
de aminocido responsvel por aquelas freqncias. Existem tambm
seqncias de pulsos capazes de revelar os tomos que esto prximos no
espao, mas que no esto unidos por meio de ligao covalente. Estes
sinais so oriundos de aminocidos que esto distantes, na seqncia
primria da protena, mas prximos na estrutura terciria. analisando
estas informaes que um pesquisador que trabalha com estrutura de
protenas vai, passo a passo, montando uma espcie de quebra-cabea
molecular. Obviamente a tecnologia trabalha a favor da Cincia, e a ajuda
de computadores com programas especficos possibilita a obteno da
estrutura tridimensional da protena.
Na Ressonncia Magntica Nuclear tambm necessrio que se
tenha a protena de interesse em alta concentrao e altamente pura.
No Brasil, existem diversos grupos de pesquisa que se dedicam
determinao da estrutura de protenas. Em So Paulo e no Rio de
Janeiro, existem equipamentos de RMN muito modernos, bem como
uma enorme facilidade para determinao de estrutura de protenas por
raios X, mais especificamente em Campinas e So Carlos (veja o boxe
a seguir).

60

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MDULO 1

13
AULA

O Brasil e a tecnologia de ponta


Em Campinas (SP) est situado o melhor centro da Amrica Latina para
elucidao da estrutura de protenas: o Laboratrio Nacional de Luz
Sncrotron (LNLS). Ele entrou em funcionamento em 1997, e possui todos
os equipamentos necessrios elucidao da estrutura de protenas, por
diversas tcnicas. L, possvel cristalizar uma protena e fazer a difrao
de raios X e/ ou analis-la por Ressonncia Magntica Nuclear.
At agora, diversas estruturas j foram elucidadas, incluindo a hexoquinase,
uma enzima que participa da primeira etapa para a utilizao do acar
glicose como fonte de energia.
Quer saber mais sobre este centro to importante? Visite www.lnls.br e
navegue vontade. L voc encontra, em linguagem bastante acessvel,
vrias informaes sobre o funcionamento deste importante plo
tecnolgico!

ATIVIDADE
2

2. Como descobrir a estrutura de uma protena?


Em toda reunio cientfica (congresso), h um espao para que os
pesquisadores que ali esto apresentem os trabalhos que esto
desenvolvendo, quer oralmente, quer em um painel (pster).
Dois pesquisadores, um dos Estados Unidos e outro da Frana, se
encontraram em um congresso internacional e descobriram que haviam
desvendado a estrutura da mesma protena. Para que nenhum dos dois
perdesse os dados que geraram, eles decidiram publicar o trabalho juntos,
somando os dados que tinham obtido. Por sorte, um deles tinha feito
experimentos de Ressonncia Magntica Nuclear e o outro, cristalografia
de raios X.
A seguir, voc encontra uma tabela que lista os procedimentos que John
Grey (o americano) e Louis Iliet (o francs) seguiram:
John Grey

Louis Iliet
Procedimentos seguidos

Obteno da protena em grande


quantidade

Obteno da protena em grande


quantidade

Purificao da protena

Purificao da protena

Precipitao da protena com


polietileno glicol

Concentrao da protena em soluo,


de um volume de 300mL para 50L

Manuteno da protena em uma


cmara fria sem agitao

Manuteno da protena em agitao,


em temperatura ambiente

Exposio radiao

Exposio a um campo magntico


forte e a pulsos de radiofreqncia

Obteno de um perfil de
espalhamento da radiao que
incidiu na amostra

Obteno de um perfil de emisso de


ondas por parte da amostra

Anlise deste perfil

Anlise deste perfil

Elucidao da estrutura

Elucidao da estrutura

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61

Bioqumica I | Protenas 3 Agora, sim: as protenas no espao!

Analisando as duas colunas da tabela, qual mtodo foi utilizado por que
pesquisador? Justifique sua resposta mencionando as etapas (1 a 8) que
lhe permitiram chegar a esta concluso.
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________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
RESPOSTA COMENTADA

Os dois primeiros passos foram seguidos pelos dois pesquisadores. No


passo 3, John Grey comea a trabalhar para retirar gua associada s
molculas de sua protena de estudo, o que revela que ele optou por
estudar a estrutura desta por cristalografia de raios X. Para confeccionar
um cristal, necessrio ter a protena em alta concentrao e fora de
soluo (isto , sem estar associada gua). Isso se faz mantendo a
amostra em baixa temperatura sem qualquer movimento para que
as molculas possam se organizar na forma de um cristal. Obtido o
cristal, o passo seguinte exp-lo a raios X para observar o padro de
difrao que o cristal originar. A anlise deste padro que revela a
estrutura da protena.
Louis, por sua vez, elucidou a estrutura de sua protena por RMN. Ele
obteve uma amostra bastante concentrada, que foi mantida em soluo,
caracterstica da tcnica. Esta amostra foi exposta ao campo magntico,
aos pulsos de radiofreqncia, sendo excitada e retornando ao seu
estado normal em seguida. O perfil dos pulsos emitidos pela amostra
ao retornar ao estado inicial (no excitado) foi analisado por Louis que,
assim, tambm obteve a estrutura da protena!

Agora que voc j aprendeu o que e como mantida a estrutura


terciria de uma protena, alm de descobrir como desvend-la, podemos
dar mais um passo no estudo destas molculas.
Na Aula 11 apresentamos voc aos quatro nveis de organizao
das protenas. At agora, voc aprendeu trs deles. Vamos ao quarto?

A ESTRUTURA QUATERNRIA DE UMA PROTENA


Pense no funcionamento de uma mquina. Independentemente de
qual tenha sido sua escolha, certamente esta mquina conta com mais
de uma pea para seu funcionamento. Algumas dessas peas, inclusive,
se repetem. Em um carro, por exemplo, no basta termos um pneu para
que ele se movimente. Precisamos dos quatro!

62

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MDULO 1

13

Existem protenas que no concentram em uma nica seqncia

AULA

de aminocidos tudo o que precisam para exercer sua funo. s vezes,


necessrio que haja aquela mesma seqncia duplicada, ou mesmo que
haja uma outra seqncia que, organizada espacialmente, se associe
primeira. Neste contexto, cada seqncia desta protena que ser
montada chamada de subunidade.
Uma protena apresenta nvel de organizao quaternrio quando
possui mais de uma subunidade. Se a protena tiver duas subunidades,
chamada dmero; se trs, trmero; se quatro, tetrmero; cinco, pentmero,
e assim por diante. Quando usamos o termo oligmero, queremos dizer
que a protena tem vrias subunidades.
Mas, antes de seguir, pense um minutinho: voc acha que todas
as protenas alcanam o nvel de organizao quaternrio?
A verdade que no. Muitas protenas se apresentam na forma
monomrica, isto , com apenas uma subunidade. A mioglobina, que
usamos como exemplo no incio desta aula, uma protena monomrica.
J a hemoglobina, protena responsvel pelo transporte do oxignio no
sangue (funo bastante similar da mioglobina, mas em outro tecido),
possui quatro subunidades:

Mioglobina
(formada por apenas
uma subunidade)

Hemoglobina
(formada por apenas
quatro subunidades)
Subunidade

Subunidade

Subunidade

Subunidade

Figura 13.5: Estruturas esquemticas da mioglobina e da hemoglobina. A mioglobina,


por ser formada por apenas uma subunidade, no possui estrutura quaternria.
J a hemoglobina um tetrmero, ou seja, uma protena composta pela unio de
quatro subunidades (duas subunidades e duas ).

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63

Bioqumica I | Protenas 3 Agora, sim: as protenas no espao!

Protenas oligomricas podem possuir subunidades idnticas,


HEXOQUINASE
Enzima que participa
da primeira etapa da
quebra da glicose,
processo que acontece
para que a clula
obtenha energia desta
molcula.

como no caso da

HEXOQUINASE,

ou subunidades distintas, como no

caso da hemoglobina que apresenta cadeias e (que so pedaos


da hemoglobina que circula no nosso sangue se quiser saber mais
exemplos de oligmeros, veja o boxe Com quantas subunidades se faz
um ribossomo?).

Com quantas subunidades se faz


um ribossomo?
Um bom exemplo de oligmero
o ribossomo, estrutura da clula que realiza a traduo das
protenas. Os ribossomos so
formados por cerca de 50 cadeias
polipeptdicas distintas que se
associam s molculas de um
RNA caracterstico, encontrado
somente nesta estrutura (e, por
isso, chamado RNA ribossomal).
A estrutura deste grande complexo foi completamente desvendada em
2000 por pesquisadores da Universidade de Yale (Thomas Steitz e Peter
Moore), utilizando a tcnica de cristalografia de raios X.
Na Aula 17, onde falaremos de estruturas virais e de fibras amilides voc
ver outros exemplos de oligmeros e de estrutura quaternria.

Mas volte Figura 13.5 e a observe com um pouco mais de ateno.


Se voc reparar, h uma estrutura representada no meio da cadeia da
mioglobina e no centro de cada uma das subunidades da hemoglobina.
Esta estrutura no um elemento protico, isto , no um
aminocido e no faz parte da seqncia primria da protena. Sobre
este elemento estranho s estruturas representadas voc aprender na
prxima seo, logo aps realizar a Atividade 4!

64

CEDERJ

MDULO 1

13

ATIVIDADE

AULA

3. Como explicar?
O pesquisador Joo Souza, aps diversos procedimentos, obteve uma
amostra pura da protena de seu interesse de estudo, a XYZ. Ao verificar a
seqncia da protena pura, deparou-se com duas seqncias diferentes.
Joo se esforou mais na purificao, acreditando que poderia ter alguma
outra protena contaminando sua amostra, mas todos os resultados davam
sempre os mesmos: duas seqncias diferentes na amostra.
Em um congresso, Joo teve a oportunidade de conversar com um grande
especialista da rea, que j havia, alguns anos antes, trabalhado com a
protena XYZ. Este especialista disse a Joo que ele no tinha com o que
se preocupar, pois sua amostra continha apenas a protena XYZ, mesmo.
Joo, obviamente, ficou intrigado e, na mesma hora, perguntou: Por que
h duas seqncias, ento?
Que explicao voc daria a Joo no lugar do especialista, levando em
considerao os dois nveis de organizao das protenas que aprendeu
nesta aula?
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RESPOSTA COMENTADA

Joo se empenhou em obter uma amostra pura de sua protena,


mas sempre a conseguia com duas seqncias diferentes. Um
especialista garantiu a ele que a segunda seqncia no se referia a
uma contaminao. A explicao para isso? Joo est diante de uma
protena que possui estrutura quaternria, e no terciria apenas. Se
a protena XYZ apresentasse estrutura terciria, Joo certamente teria
em mos uma amostra com contaminao por outra protena. Como
o especialista garantiu que no h nenhuma protena alm da XYZ
na amostra de Joo, ele s pode estar diante de uma protena com
estrutura quaternria e, mais ainda, com pelo menos duas subunidades,
as quais apresentam seqncias diferentes (o que nem sempre
acontece em protenas com estrutura quaternria).
No caso especfico da protena XYZ e com as informaes que tivemos,
no podemos saber quantas subunidades a protena tem de fato (se
dmero, trmero etc.). O que podemos garantir que ela possui, no
mnimo, duas subunidades, e que elas so distintas.

CEDERJ

65

Bioqumica I | Protenas 3 Agora, sim: as protenas no espao!

OUTROS GRUPAMENTOS NAS PROTENAS


Assim como voc viu nas representaes esquemticas da
hemoglobina e da mioglobina, muitas protenas possuem grupamentos
no-proticos aderidos. Na hemoglobina, o grupamento que voc
viu ligado a cada uma das quatro subunidades o heme (voc ver o
grupamento heme com mais detalhes na Aula 16).
Outros exemplos de protenas que possuem grupamentos noproticos so as protenas do complexo coletor de luz, que esto envolvidas
na fotossntese. Essas protenas possuem pigmentos aderidos a elas, tais
como a clorofila. H ainda as protenas que, para exercer corretamente
suas funes, precisam ter vitaminas associadas sua estrutura.
Os grupamentos no-proticos tm papel relevante em grande
parte das funes das protenas e, conseqentemente, se faltar um desses
grupamentos a protena perde sua funo. Um exemplo pode ser visto
no caso de uma dieta desbalanceada, na qual nos falta alguma vitamina.
As protenas que possuem esta vitamina como parte de sua estrutura, e
que dela dependem para realizar sua funo, ficaro prejudicadas. Em
aulas mais frente, voc ver como agem e quais so as vitaminas, para
que voc compreenda melhor toda essa histria.

CONCLUSO
Considerando a enorme quantidade de protenas que temos em
nosso organismo e as diversas funes que estas desempenham, qualquer
estudo sobre estas molculas parece pouco em relao sua importncia
para a vida.
Conhecer a estrutura das protenas fundamental para que
possamos pensar em maneiras de contornar doenas causadas por
disfunes destas molculas no nosso corpo. O princpio farmacolgico
disso se baseia no fato de que estas molculas apresentam grande
associao entre a estrutura que tm e a funo que realizam. Assim,
quanto mais soubermos sobre estas molculas, melhor!

66

CEDERJ

MDULO 1

13

ATIVIDADE FINAL

AULA

Um estranho (bastante til) no ninho...


A mucina uma protena, e tambm conhecida como protena do muco. Uma
caracterstica das mucinas que essas protenas so altamente glicosiladas, ou
seja, possuem uma grande quantidade de carboidratos associada sua estrutura.
Esses acares fazem com que essa protena seja mais difcil de ser atacada por
proteases (enzimas que quebram outras protenas).
Ela est presente em diversas partes do corpo, por fazer parte da constituio das
mucosas (membranas que recobrem as paredes internas de algumas cavidades do
nosso corpo). Uma dessas mucosas a do estmago.
Considerando que o estmago um rgo rico em pepsina, uma enzima que
quebra outras protenas, qual a vantagem de se ter a mucina recobrindo a parede
deste rgo? O que fornece essa possibilidade s mucinas?
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RESPOSTA COMENTADA

O suco gstrico (secreo que liberada na cavidade estomacal por


estmulo alimentar) rico em cido clordrico (HCl) e uma protease, a
pepsina. O cido tem duas funes: exterminar microorganismos que
venham junto com a alimentao e desfazer a estrutura das protenas
que chegam no estmago (voc aprender mais sobre esse processo
daqui a algumas aulas). A pepsina capaz de quebrar outras protenas
em peptdeos menores, que sero quebrados em aminocidos mais
adiante no processo de digesto.
Um risco de se ter cido e protease em uma cavidade dentro do corpo
o de que esses dois componentes podem destruir as clulas que
compem o tecido da parede da prpria cavidade. Qual a estratgia
para evitar isso? Recobrir a cavidade com algo que no possa ser
destrudo por essas substncias e aqui entram as mucinas!
As mucinas podem defender o tecido da digesto pela pepsina e
da acidez do HCl por causa da sua estrutura, que tem uma grande
quantidade de carboidratos associada parte protica. Esses
carboidratos (acares) so os grupamentos prostticos da mucina e,
sem eles, ela no poderia desempenhar sua funo.

CEDERJ

67

Bioqumica I | Protenas 3 Agora, sim: as protenas no espao!

RESUMO

A estrutura terciria de uma protena a maneira como estas molculas se


organizam no espao. Ela proporcionada e mantida por diversos tipos de
interao que acontecem entre as cadeias laterais dos aminocidos que fazem
parte da seqncia primria da molcula. A mais forte destas interaes a ponte
dissulfeto, por ter um carter covalente.
Conhecer a estrutura das protenas importante por causa da enorme gama de
funes que estas molculas exercem nos organismos. Maneiras de se fazer isso
utilizar as tcnicas de cristalografia de raios X e Ressonncia Magntica Nuclear.
Na primeira, incidimos raios X sobre um cristal formado pela protena pura e em
alta concentrao. O padro de espalhamento dos raios X aps a incidncia no
cristal, ao ser analisado, revela a estrutura da protena. J na segunda tcnica, a
amostra da protena, em soluo, exposta a um forte campo magntico, e sofre a
ao de pulsos de radiofreqncia, ficando no estado excitado; ao retornarem para
o estado inicial, os tomos da molcula emitem novos pulsos de radiofreqncia,
que revelam suas identidades e a que outros tomos esto ligados.
Para algumas protenas, alm da estrutura terciria existe um quarto nvel
organizacional: a estrutura quaternria. Esta definida pela unio de subunidades
que, ligadas umas s outras, possibilitam que a protena exera corretamente sua
funo. Um exemplo a hemoglobina, que possui quatro subunidades.
Falando em hemoglobina, esta serve de exemplo tambm para mostrar que
h possibilidade de encontrarmos outras molculas no-proticas associadas
s protenas. A presena destes grupamentos tambm relacionada funo
que a protena exerce, e sua retirada pode fazer com que a protena perca sua
funcionalidade.

68

CEDERJ

AULA

Protenas 4 Como as
protenas adquirem as
suas estruturas tercirias
(ou quaternrias)?

14
Meta da aula

objetivos

Apresentar como acontece o enovelamento


protico e as protenas que auxiliam este
processo.

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:


1

analisar o experimento de Anfinsen sobre


enovelamento protico;
caracterizar o processo de enovelamento protico
assistido.

Pr-requisitos
Para acompanhar esta aula, fundamental ter claro o conceito de
estrutura terciria de uma protena, que vimos na Aula 13. Alm disso,
interessante que voc reveja, caso no se lembre, o que mutao
(Aula 11) e por que as molculas na natureza assumem a estrutura de
menor energia (Aula 12).

Bioqumica I | Protenas 4 Como as protenas adquirem as suas estruturas tercirias


(ou quaternrias)?

INTRODUO

Lembra que na aula anterior usamos o exemplo de um cadaro de sapato


amarrado para mostrar como seria a estrutura terciria de uma protena?
Pois bem, continuemos usando o cadaro por analogia. Concorda que
um cadaro no se amarra sozinho? Para que ele forme um lao, existe um
agente atuando: a sua mo, que dobra o cadaro, passa um lado por cima
do outro e o amarra.

Figura 14.1: O dobramento de um lao pode


ser uma boa analogia formao da estrutura
terciria de uma protena.
Fonte: http://www.sxc.hu/photo/730972

E na clula, como acontece? Ser que existe uma mo, algum elemento
que auxilie este processo, ou ser que as protenas se enovelam sozinhas?
Caso exista, ou quando for necessrio, quem desempenha a funo da mo
que ajuda as protenas a se enovelarem?
sobre como as protenas adquirem as suas estruturas que voc aprender
na aula de hoje!

70

CEDERJ

MDULO 1
AULA

14

ENOVELAMENTO PROTICO: O EXPERIMENTO DE


ANFINSEN
Hoje vamos propor uma estratgia diferente para voc aprender
sobre enovelamento protico. Voc ir, passo a passo, redescobrindo este
processo, seguindo os procedimentos experimentais que fez Christian
Anfinsen (veja o boxe sobre ele mais adiante) para entender como as
protenas se enovelam dentro de uma clula. Isso ser como uma grande
atividade. Daremos os passos e, ao final, voc ter que chegar a uma
concluso. Vamos l?!

Primeiras informaes
Pesquisador: Christian Anfinsen.
poca: dcada de 1960.
Pergunta a que queria responder: como as protenas se enovelam dentro
de uma clula?
Protena que usou para seus estudos: ribonuclease A, uma enzima que
quebra o RNA em

RIBONUCLEOTDEOS.

Esta enzima um monmero, isto

RIBONUCLEOTDEOS

, possui apenas uma subunidade, com quatro pontes de enxofre que

So as unidades
formadoras do RNA
(uracila, citosina,
guanina, adenina).
A ribonuclease
capaz de quebrar uma
molcula de RNA
em seus constituintes
menores, isto , em
ribonucleotdeos,
destruindo a molcula
de RNA original.

ajudam a manter a sua estrutura terciria mais rgida. Em condies


adequadas de pH e na ausncia de agentes perturbadores da estrutura
de protenas, a ribonuclease se encontra no ESTADO NATIVO (N) e apresenta
atividade enzimtica.

Quem foi Christian Anfinsen?


Christian Anfinsen tem um currculo cientfico
admirvel. Este pesquisador nasceu em 1916 nos
Estados Unidos e, com 23 anos, j era Mestre em
Qumica Orgnica. Seu doutorado, no entanto,
foi em Bioqumica, concludo em Harvard, onde
ele trabalhou durante muitos anos, antes de
ir para o NIH (um dos centros de pesquisa em
sade mais respeitados do mundo).
No comeo de sua carreira, Anfinsen desenvolveu um mtodo para marcar protenas
recm-sintetizadas. Isso permitiu a outros pesquisadores, pouco tempo
depois, descobrir que as protenas comeavam a ser sintetizadas pela
extremidade amino, alm de conhecer quanto tempo demorava para
incorporar cada aminocido molcula.

ESTADO NATIVO
o estado natural
das protenas no
qual suas estruturas
secundria, terciria
e quaternria (se
houver) se encontram
ntegras. Neste estado,
elas esto aptas a
desempenhar suas
funes.

CEDERJ

71

Bioqumica I | Protenas 4 Como as protenas adquirem as suas estruturas tercirias


(ou quaternrias)?

Em seguida, Anfinsen comeou a se dedicar ao estudo das relaes entre


seqncia, estrutura e funo de cada protena. Foi nessa poca que ele
realizou as descobertas que voc est estudando nesta aula, as quais
deram a este pesquisador o Prmio Nobel de Qumica em 1972.
Atualmente, ele continua estudando estrutura de protenas, agora em
parceria com um importante centro de estudos: o MIT (Massachusetts
Institute of Technology).

URIA E MERCAPTOETANOL

So agentes
desnaturantes, ou seja,
capazes de perturbar
o estado nativo das
protenas. Os agentes
desnaturantes podem
ser de natureza
qumica (pHs
cidos ou bsicos
extremos, uria ou
-mercaptoetanol), ou
fsica (temperatura
ou presso). No
se sabe muito bem
como a uria atua.
Especula-se que ela
possa aumentar a
solubilidade em gua
de alguns trechos
da protena. J o
-mercaptoetanol
funciona reduzindo
as pontes dissulfeto e,
portanto, separando
os resduos de cistena
que se ligaram desta
maneira.

ESTADO
DESENOVELADO OU
DESNATURADO

(D)

o estado das
protenas quando
parte ou a totalidade
de sua estrutura foi
perdida, por exemplo,
pela ao de agentes
desnaturantes, como
a uria. Quando
so sintetizadas
nos ribossomas, as
protenas tambm se
encontram no estado
desnaturado e tendem
a passar para o estado
nativo em curto tempo.

72

CEDERJ

1 passo do experimento
Para comear a estudar a ribonuclease, Anfinsen usou dois agentes
que perturbam drasticamente a estrutura dessas molculas: a

URIA

eo

-MERCAPTOETANOL.
Ao fazer isso, ele desenovelou a ribonuclease, deixando-a em um
estado muito parecido com aquele no qual ela se encontrava quando
saiu do ribossoma, aps sua sntese dentro da clula, ou seja, o

ESTADO

DESENOVELADO ainda sem estrutura e funo (Figura 14.2). Neste estado, as

protenas no so capazes de exercer suas funes. Ou seja, desenovelada,


a ribonuclease no capaz de quebrar molculas de RNA!

Adio de uria e
mercaptoetanol

72
58
110

SH
65
HS
HS

40

65
84

95

HS

SH

26

26

40

Ribonuclease
nativa (N) ativa

HS

72

58

HS
110

SH
84
95

Ribonuclease
desnovelada (D)
inativa

Figura 14.2: Desnaturao de uma protena. A ribonuclease,


protena utilizada para estudos sobre enovelamento por
Christian Anfinsen, foi colocada em um meio com uria e mercaptoetanol. Estas duas molculas so agentes desnaturantes
e fizeram com que a ribonuclease perdesse sua estrutura nativa,
assim como sua funo.

2o passo do experimento
Qual foi, ento, o prximo passo de Anfinsen? Para verificar se a
protena era capaz de se enovelar sozinha novamente, ele precisava retirar
de perto dela os agentes perturbadores de estrutura. Em laboratrio, um
procedimento que pode ser utilizado nestes casos a dilise.

MDULO 1

14

Na dilise, a protena colocada dentro de um saco de dilise, que

AULA

possui poros muito pequenos. Este colocado dentro de um compartimento


com bastante lquido (um tampo, para que no haja variaes de pH no
meio), que entra e sai do saco de dilise livremente.
Isto faz com que a protena seja lavada e que os agentes perturbadores sejam DILUDOS por todo o lquido do compartimento onde est
o saco de dilise (incluindo o interior do saco).
Pense um pouco: por que ser que as protenas no saem do saco
de dilise e os agentes perturbadores de estrutura saem?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
Os poros do saco de dilise so muito pequenos e conseguem reter dentro
dele a protena; no entanto, os agentes perturbadores so molculas muito
menores do que a ribonuclease. Isso faz com que, na lavagem, somente
a uria e o -mercaptoetanol passem para fora do saco.
Aps vrias horas de lavagem e vrias trocas de tampo, a uria e
o -mercaptoetanol j foram to diludos que sua concentrao
insignificante e podemos considerar que no esto mais em contato

DILUIO
J fez suco de caju
alguma vez? Quando
voc faz essa ao
to corriqueira nem
se d conta de que
est fazendo uma
diluio: na garrafa,
o suco de caju est
concentrado; quando
voc coloca gua, est
efetuando a diluio
da polpa concentrada.
Diluio, portanto,
a ao de diminuir
a concentrao de
alguma coisa, quer de
um suco concentrado,
quer de um agente
perturbador de
estrutura!

com a enzima (Figura 14.3).

Saquinho de dilise
Ribonuclease
desnaturada
-mercaptoetanol
Uria

Figura 14.3: Dialisando uma protena. A ribonuclease foi colocada em um saco de dilise que, em seguida, foi
colocado em um recipiente contendo tampo. Os poros do saco de dilise so de tal tamanho que permitem
a sada dos agentes perturbadores, mas no da protena. Depois de muitas horas, os agentes perturbadores
passaram para o tampo, e a protena ficou sozinha no saco de dilise.

Agora que a protena est sem os agentes perturbadores de estrutura,


como ser que ela est: enovelada ou desenovelada? Esta pergunta levou
Anfinsen ao seu terceiro passo experimental...

CEDERJ

73

Bioqumica I | Protenas 4 Como as protenas adquirem as suas estruturas tercirias


(ou quaternrias)?

3 passo do experimento
Como ser que se encontra a ribonuclease? foi a pergunta que Anfinsen
se fez.
Para respond-la, o pesquisador efetuou um experimento para medir a
atividade da ribonuclease que estava dentro do saco de dilise (aps a
dilise, claro!).
Anfinsen surpreendeu-se, pois observou que ela apresentava atividade
quase idntica da protena que no tinha sido tratada com uria e
-mercaptoetanol.
Agora, faa a Atividade 1, pois ela fundamental para continuarmos
nossa aula!

ATIVIDADE
1

1. Tirando concluses a partir de dados experimentais


At agora, voc viu com detalhes os trs passos principais do experimento
realizado por um importante pesquisador da rea do enovelamento
protico. Veja um resumo, s para recapitular:
1 passo: provocou a perda da estrutura terciria da ribonuclease pela ao
de agentes desnaturantes;
2 passo: efetuou uma dilise para livrar a ribonuclease do contato com
os agentes perturbadores de estrutura;
3 passo: mediu a capacidade da ribonuclease (que passou pelos passos
1 e 2) realizar sua funo e viu que ela era capaz.
Analisando todos os dados obtidos, a que concluso voc acha que ele
chegou sobre o processo de enovelamento protico?
________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
RESPOSTA COMENTADA

Aps estudar o experimento de Anfinsen nas pginas anteriores, voc


deve ter chegado mesma concluso que ele. Se a RNAse foi capaz
de assumir novamente sua estrutura terciria, ela deve ser capaz de
realizar a sua funo: quebrar molculas de RNA em nucleotdeos.
Os dados obtidos pelo pesquisador sugerem que a ribonuclease que
estava no estado desenovelado se reenovelou sozinha, assumindo
sua conformao original (nativa) dotada de funo.

74

CEDERJ

MDULO 1

14
AULA

S para voc saber, isso significa que at mesmo as quatro pontes de


enxofre existentes entre as cistenas foram re-formadas!
SH
65
HS
HS

72
58
110

65
84

95

Adio de uria e
-mercaptoetanol
26

40

26
HS

40

Ribonuclease
nativa (N) ativa

58
SH

72

SH

Dilise

84
95
HS
HS
110

Ribonuclease
desnovelada
inativa (D)

Ribonuclease nativa (N)


ativa

Generalizando, poderamos dizer que as protenas enovelam-se


sozinhas sem a ajuda de nenhum outro fator. No experimento de Anfinsen,
nada mais havia dentro do saco de dilise a no ser a prpria ribonuclease,
o que foi suficiente para que a protena reassumisse sua conformao nativa
e funcional. Voltando ao exemplo do cadaro do sapato, seria como se o
cadaro pudesse se amarrar sozinho, sem a ajuda da mo!
Com estes experimentos bastante simples, Anfinsen chegou seguinte
concluso: a seqncia primria da protena que determina sua estrutura
terciria. Isso porque, se nada mais havia no saco de dilise alm da
ribonuclease e isso foi suficiente para ela se reenovelar, a estrutura terciria foi
determinada pelas caractersticas qumicas dos aminocidos desta protena,
ou seja, sua seqncia primria (Quadro 14.1)! Por conseqncia, qualquer
alterao na seqncia primria de uma protena pode comprometer a sua
estrutura terciria e, conseqentemente, sua funo.

Quadro 14.1: Determinao da estrutura terciria de uma protena

Seqncia primria da protena Estrutura terciria Protena funcional

!
So caractersticas qumicas e estruturais dos aminocidos que fazem com
que uns se aproximem ou se afastem de outros. Assim, na seqncia
primria mesmo que mora a receita para que uma protena se organize
espacialmente. Esta receita a que origina a estrutura de menor energia,
ou seja, a estrutura que ser favorecida pela natureza (voc viu esta explicao
sobre menor energia na Aula 12).

CEDERJ

75

Bioqumica I | Protenas 4 Como as protenas adquirem as suas estruturas tercirias


(ou quaternrias)?

Mas, um tempo depois, se descobriu que nem sempre da maneira


como Anfinsen descreveu que o enovelamento protico acontece...

ENOVELAMENTO PROTICO ASSISTIDO


O experimento que voc viu ainda agora foi o primeiro passo
importante no estudo do enovelamento protico. De fato, diversas
protenas se comportam como a ribonuclease e se enovelam sozinhas,
especialmente in vitro (em um meio experimental).
In vivo, ou seja, dentro de uma clula, milhares de protenas
ESCHERICHIA COLI

so sintetizadas a todo tempo. Em uma clula de ESCHERICHIA

uma espcie de
bactria, bastante
utilizada como
modelo experimental
por ser de fcil
manipulao,
replicao e
crescimento em
laboratrio.

protena com 100 aminocidos pode ser sintetizada e montada em 5

COLI,

uma

segundos a 37C.
A sntese de protenas determinada pela necessidade de uso
destas molculas para os processos fisiolgicos. Estas protenas precisam,
portanto, ficar prontas para trabalhar imediatamente.
Entretanto, algumas protenas no so capazes de se enovelar
sozinhas e precisam de uma mozinha, como o cadaro que precisa
de uma mo para amarr-lo.
Em nossas clulas, existem algumas protenas denominadas
chaperonas moleculares. A funo das chaperonas interagir com
as protenas que necessitam enovelar-se, auxiliando-as a assumir a
conformao nativa. Elas podem ser encontradas em todos os organismos,
desde bactrias at o homem.
Existem duas classes de chaperonas moleculares: as protenas de
choque trmico e as chaperoninas. Veja estas duas classes em detalhe
a seguir!

Classe 1: Protenas de choque trmico


ESTRESSE TRMICO
o que ocorre a
clulas, em cultura,
expostas a uma
temperatura mais
elevada em relao
quela que, em
geral, elas esto
acostumadas a estar
e que necessitam para
crescer.

76

CEDERJ

As chaperonas desta classe so rapidamente encontradas em


clulas que tenham sido submetidas a um

ESTRESSE TRMICO.

por isto

que so chamadas protenas de choque trmico.


Alm desta funo, essas protenas de choque trmico se ligam s
regies hidrofbicas de outras protenas que ainda esto desenoveladas,
evitando que a protena se agregue. A agregao ocorre quando protenas
desenoveladas, parcialmente enoveladas ou enoveladas incorretamente
interagem umas com as outras, formando uma espcie de aglomerado

MDULO 1

14

dentro da clula (Figura 14.4). Como voc pode imaginar, este

AULA

aglomerado no desejvel, j que a protena que nele se encontra no


pode desempenhar sua funo. A agregao de protenas um tema muito
importante nos dias de hoje, sendo a causa de vrias doenas como a da
vaca louca e a doena de Alzheimer, por exemplo, que sero tratadas
em mais detalhes na Aula 17.

Figura 14.4: Agregao protica. Diversas cpias de uma mesma


protena recm-sintetizadas e no enoveladas corretamente
tendem a formar aglomerados no interior da clula, que
so chamados de agregados proticos. Os agregados so
indesejveis pois esto concentrando diversas cpias de
uma protena, que no est exercendo sua funo; alm
disso, os aglomerados podem atrapalhar fisicamente o bom
funcionamento da clula.

Veja, na Figura 14.5, como as chaperonas moleculares auxiliam


o enovelamento protico de algumas protenas:
Ribossomo
sintetizando
protena

Chaperonas se
ligam a protena
nascente

Protenas de choque trmico


(chaperonas)

Protena
Protena
parcialmente enovelada
enovelada corretamente

Chaperonas
livres

Figura 14.5: Atuao das chaperonas moleculares protenas de choque


trmico no enovelamento correto de uma protena. As chaperonas se
ligam a uma cadeia polipeptdica durante a sntese. Quando a seqncia
primria j foi toda sintetizada, as chaperonas induzem esta cadeia a um
estado parcialmente enovelado; em seguida, se dissociam da protena
recm-sintetizada, que assume sua conformao terciria completamente
enovelada.

CEDERJ

77

Bioqumica I | Protenas 4 Como as protenas adquirem as suas estruturas tercirias


(ou quaternrias)?

No citoplasma da clula, enquanto uma protena est sendo


sintetizada associada ao ribossomo, as chaperonas se ligam cadeia
nascente. Uma vez que a sntese se completou e a protena se soltou do
ribossomo, as chaperonas a induzem a um estado parcialmente enovelado.
como se as protenas precisassem apenas de uma mozinha para
adquirir suas estruturas tercirias. Uma vez que a protena recmsintetizada chega a este estado parcialmente enovelado, as chaperonas se
dissociam da cadeia polipeptdica, que termina seu enovelamento sozinha,
adquirindo a sua estrutura funcional (ou seja, corretamente enovelada).
Esta mesma classe de chaperonas tambm est envolvida na
manuteno de determinadas protenas no estado desenovelado, para
que elas possam ser transportadas para o interior das organelas. Neste
processo, as chaperonas se grudam s protenas assim que elas so
liberadas dos ribossomas, mantendo-as esticadas e sem estrutura at
que elas cheguem sua organela-alvo onde, ento, se enovelam.

Classe 2: Chaperoninas
As chaperoninas (Figura 14.6) so protenas complexas que
ajudam no enovelamento das protenas que no so capazes de se
enovelar sozinhas nem com a ajuda das protenas de choque trmico.

Figura 14.6: Representao de uma chaperonina


bastante conhecida, a GroEL. Esta chaperonina
encontrada em bactrias e tem seu mecanismo de
atuao completamente descrito.

78

CEDERJ

MDULO 1

14

Elas funcionam como uma espcie de barril que se abre permitindo

AULA

a entrada do peptdeo desenovelado, fechando-se em seguida. Quando


fechada, cria um ambiente livre de gua, permitindo que os resduos de
aminocidos apolares da protena que ser enovelada se encontrem e formem
o miolo ou o cerne da estrutura da protena nativa (Figura 14.7).

Protena recm-sintetizada,
que alcanou o estado
parcialmente enovelado sozinha
ou com a ajuda de protenas
de choque trmico

Protena parcialmente
enovelada
encaminhada para
uma chaperonina

Consumo de energia
(quebra de ATP)
Figura 14.7: Mecanismo de enovelamento protico mediado por
chaperoninas. As chaperoninas so protenas grandes e complexas,
em forma de barril, que possuem 14 subunidades idnticas associadas.
Estas protenas recebem em seu interior protenas recm-sintetizadas
que no conseguiram se enovelar. dentro da chaperonina que as
regies hidrofbicas da protena recm-sintetizada se aproximam
e comeam a interagir. Isso forma o ncleo da estrutura da nova
protena, a partir do qual se reestruturam as outras partes da
protena. Esse processo tem fim quando a protena nova est
completamente enovelada.

Protena enovelada
corretamente

ATIVIDADE
2

2. Como acontece?
Um cientista est diante do seguinte impasse:
Uma enzima sintetizada em seu laboratrio apresentou uma atividade
(capacidade de catalisar uma reao) muito baixa em relao enzima
in vivo. As duas enzimas foram analisadas e apresentaram exatamente a
mesma composio de aminocidos.
a. Com base no que voc estudou at agora nesta aula, qual uma possvel
explicao para a diferena de atividade entre a enzima sintetizada em
laboratrio e a in vivo?
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________________________________________________________________
________________________________________________________________

CEDERJ

79

Bioqumica I | Protenas 4 Como as protenas adquirem as suas estruturas tercirias


(ou quaternrias)?

b. Quais seriam duas possveis estratgias para resolver o problema da falta


de atividade da enzima? Como o cientista poderia proceder para fazer com
que a protena sintetizada em laboratrio tivesse atividade normal? Descreva
os mecanismos bioqumicos envolvidos em cada uma delas.
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RESPOSTAS COMENTADAS

a. Voc j aprendeu que a seqncia primria que determina


a estrutura da protena e, conseqentemente, sua funo.
Considerando que a seqncia das duas protenas (a sintetizada
em laboratrio e a in vivo) exatamente a mesma, provavelmente a
falta de atividade se deve a um enovelamento incorreto da protena
sintetizada no laboratrio. Este enovelamento incorreto deve estar
relacionado ao fato de que a protena em questo no capaz
de se enovelar sozinha, precisando do auxlio de chaperonas e/ou
chaperoninas para faz-lo.
b. Se o problema de atividade derivado de um enovelamento
incorreto, duas estratgias para resolver isso podem ser sintetizar a
protena (1) na presena de chaperonas ou (2) de chaperoninas.
No primeiro caso, as chaperonas se ligam protena enquanto
ela est sendo sintetizada e auxiliam na formao de ligaes
que conferem protena um enovelamento parcial correto, que
concludo quando estas chaperonas se desligam da cadeia
polipeptdica em estruturao. No segundo, a protena recmsintetizada abrigada no interior da chaperonina, onde regies
hidrofbicas entram em contato e formam o ncleo da protena em
formao. A partir deste ncleo, todo o resto da protena se estrutura,
e ela adquire sua conformao nativa correta.

80

CEDERJ

MDULO 1

14

Na classe das chaperoninas, encontramos as protenas

AULA

denominadas dissulfeto isomerase. Elas ajudam a formar as pontes de


enxofre de protenas que esto se enovelando e que possuem estas pontes
na sua conformao nativa (Figura 14.8).
No caso da ribonuclease que vimos na primeira parte desta aula, h
quatro pontes de enxofre, e estas se formam sozinhas, conforme Anfinsen
nos mostrou em seus experimentos. Entretanto, nem todas as protenas so
capazes de fazer (ou refazer) as suas pontes dissulfeto como a ribonuclease.
Muitas delas precisam da protena dissulfeto isomerase para que os pares
de cistena corretos se encontrem e formem as pontes.

SS

S
|
S

SS

Protena que formou


pontes de enxofre
incorretas

A mesma protena
associada agora
dissulfeto isomerase,
que quebra pontes
incorretas

S
S
Dissulfeto
isomerase
livre

S
|
S

S
|
S

Protena com
as pontes de
enxofre formadas
corretamente

Figura 14.8: Esquema do mecanismo de ao da enzima dissulfeto isomerase.


Observe que ela capaz de desfazer as pontes de enxofre erradas ao fazer pontes
de enxofre com a protena de interesse. Desta forma, a dissulfeto isomerase deixa
livre as cistenas que devem fazer as pontes de enxofre corretas, presentes na
protena nativa.

Outra protena dentro da classe das chaperoninas a peptidil


prolil isomerase. Esta chaperonina especializou-se na converso de um
ismero (veja o boxe O que so ismeros?) da ligao peptdica da
prolina em outro; estes ismeros podem existir na forma cis ou trans.
Falando grego? Calma, voc j vai entender!

CEDERJ

81

Bioqumica I | Protenas 4 Como as protenas adquirem as suas estruturas tercirias


(ou quaternrias)?

O que so ismeros?
Ismeros so molculas que possuem a mesma frmula molecular (isto , a
mesma quantidade de cada tomo que as compem), mas que apresentam
pequenas diferenas na organizao destes tomos.
Voc aprendeu na Aula 8 que os aminocidos constituintes de protenas
so sempre na forma L, lembra? Esse L vem de levgero (derivado de lado
esquerdo). Um aminocido L um estereoismero de um aminocido
D (destrgero, lado direito).
Agora, voc precisa saber o que significa isomeria cis-trans. Cis e trans
so os nomes que se do a molculas que so ismeras de acordo com
um plano de referncia. Assim, molculas cis tendem a apresentar seus
grupamentos voltados para o mesmo lado do plano e molculas trans,
grupamentos voltados para lados opostos. Voc entender melhor ainda
quando vir a Figura 14.9, que vem logo a seguir.

Os resduos de prolina (chamados de prolil) podem existir


apresentando uma pequena variao na sua estrutura. Veja a Figura 14.9:
Prolil na forma trans
Carboxila da prolina

Ao da
peptidil prolil
isomerase

Outro resduo
de aminocido

Ligao peptdica

Outro resduo de
aminocido

Ligao peptdica

Prolil na forma cis

Carboxila da prolina

Figura 14.9: Ao da peptidil prolil isomerase. Esta enzima


converte os resduos de prolil (ou seja, as prolinas que esto
compondo uma cadeia de protena e que, portanto, j fizeram
suas ligaes peptdicas) da forma cis para a forma trans, que
a forma que favorece a formao das estruturas tercirias.
Considere a linha pontilhada como eixo de referncia. Agora,
imagine se voc pudesse mantendo o eixo de referncia virar
o prolil para baixo. A carboxila que estava em cima fica para
baixo, e o oposto acontece com os carbonos (CH2 que sobem).
assim que atua a peptidil prolil isomerase.

Os resduos de prolina que esto na forma cis no favorecem a


formao da estrutura terciria da protena e precisam ser convertidos
na forma trans. Com freqncia, este o passo considerado limitante no
enovelamento de protenas.
Tal converso muito lenta, necessitando de uma ajudinha.
Assim, a prolil isomerase torna mais acelerada esta reao, permitindo que
a protena se enovele rapidamente.

82

CEDERJ

MDULO 1

14
AULA

To importante quanto complicado


o seu nome...
Existem diversas peptidil prolil
isomerases capazes de atuar em
qualquer prolil cis ligado a uma
cadeia polipeptdica. Existem tambm
enzimas destas muito especficas,
como o caso de uma presente nas
moscas, chamada NinaA.
A NinaA participa do enovelamento
Fonte: www.sxc.hu/photo/462292
da protena Opsina, uma protena de
membrana dos olhos da mosca, que capaz de absorver luz e desencadear
a resposta visual. Moscas com mutaes na NinaA no so capazes de
apresentar uma resposta visual apropriada.

CONCLUSO
Quando a gente come um bife ou mesmo quando olha para as
prprias mos, onde existem milhares de protenas, nem imagina a
quantidade de processos que a clula teve que fazer para sintetiz-las e
mont-las. o funcionamento perfeito desta linha de montagem que permite
o bom funcionamento dos organismos.

ATIVIDADE FINAL
Caracterizando o enovelamento de uma protena

Um estudante de doutorado est tentando estudar o enovelamento de uma


protena de bactria que ele havia purificado. Veja um esquema desta protena:

Cis

Cis

Cis

Cis

Cis

Cis

Cis

Cis

Cis

Cis

Cis

Cis

No entanto, todas as vezes que ele dialisava a protena para retirar dela os agentes
desnaturantes, ele observava que a protena agregava.
Com base no que voc aprendeu at agora nesta aula e nas informaes desta
atividade (especialmente no esquema da protena), como voc aconselharia o

CEDERJ

83

Bioqumica I | Protenas 4 Como as protenas adquirem as suas estruturas tercirias


(ou quaternrias)?

estudante a evitar a agregao da protena de estudo? Qual o fundamento


cientfico da sua sugesto?
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
RESPOSTA COMENTADA

Se voc olhar com ateno a estrutura da protena de estudo do


doutorando, ver que esta molcula bastante rica em resduos de
cistena que podem formar vrias pontes dissulfeto. J que ele observou
que a sua protena de estudo agrega com facilidade, o estudante poderia
dialisar sua amostra (para retirar os agentes redutores) incluindo na
soluo chaperoninas do tipo dissulfeto isomerase. Por qu? Porque esta
enzima capaz de se ligar a protenas que formaram pontes dissulfeto
incorretas e que, portanto, esto enoveladas incorretamente (o que as
faria agregar). A dissulfeto isomerase corrige estas pontes erradas
e auxilia a formao de pontes de enxofre entre as cistenas corretas,
proporcionando protena um enovelamento correto.

84

CEDERJ

MDULO 1

14
AULA

RESUMO

O enovelamento protico o processo de formao da estrutura terciria de uma


protena. Dependendo da protena, o enovelamento pode ser espontneo ou
assistido por outras protenas.
O enovelamento espontneo foi descoberto por Christian Anfinsen, em um
dos experimentos mais conhecidos da histria do enovelamento protico. Este
pesquisador descobriu que uma protena submetida a agentes desnaturantes e, em
seguida, retirada da presena destes perdia e recuperava sua estrutura terciria,
sendo capaz de executar perfeitamente sua funo.
Algumas protenas, no entanto, necessitam de auxlio de outras protenas para
adquirirem suas estruturas corretas. So duas as classes de protenas que participam
como auxiliares no enovelamento: as chaperonas e as chaperoninas. No grupo
das chaperonas, se destacam as protenas de choque trmico, que se ligam a uma
protena nascente e ajudam a formao da estrutura nativa desta. J no grupo das
chaperoninas, esto protenas em forma de barril que abrigam em seu interior a
poro hidrofbica da protena recm-sintetizada, permitindo que estas regies
se aproximem e interajam, formando o ncleo da estrutura terciria.
Tambm no grupo das chaperoninas, h outras duas protenas: a dissulfeto
isomerase, que corrige pontes dissulfeto formadas incorretamente, e a peptidil
prolil isomerase, que converte prolil cis (no favorvel formao da estrutura
nativa) em prolil trans (favorvel).

INFORMAES SOBRE A PRXIMA AULA


De acordo com as estruturas que as protenas apresentam, elas podem ser divididas
em duas categorias: as fibrosas e as globulares. Na aula que vem, voc comear
a aprender sobre o primeiro grupo, que compreende, por exemplo, a protena
que compe nossos fios de cabelo... At l!

CEDERJ

85

AULA

Voc j ouviu falar em


protenas fibrosas?

15
Meta da aula

objetivos

Apresentar o que so protenas fibrosas e


suas caractersticas estruturais.

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de


caracterizar as seguintes protenas fibrosas:
1

-queratina;

colgeno;

fibrona da seda.

Pr-requisitos
Vai ser mais fcil estudar esta aula se voc voltar Aula 12 e revisar
a formao de hlices. Foque em quais aminocidos no so bons
formadores de hlices e o porqu disso. Veja, nessa mesma aula,
o que so fitas antiparalelas.

Bioqumica I | Voc j ouviu falar em protenas fibrosas?

INTRODUO

H cinco aulas voc vem, pouco a pouco, construindo seu conhecimento sobre
uma classe de biomolculas fundamental existncia da vida: as protenas.
Como voc j viu, estas molculas podem apresentar diferentes composies
e, por conta disso, as mais variadas estruturas. Entre todas as formas que
uma protena pode assumir, podemos identificar duas grandes categorias:
as fibrosas (assunto da aula de hoje) e as globulares (arredondadas, assunto
da aula que vem).
Essa classificao em dois grandes grupos s pode ser feita depois que um
grande nmero de protenas teve suas estruturas tercirias reveladas, graas
utilizao de dois mtodos: difrao de raios X e ressonncia magntica
nuclear (que voc aprendeu na Aula 13). Essas tcnicas, como voc j viu,
permitem que tiremos retratos microscpicos das protenas revelando sua
forma, topologia, reentrncias etc.
Na aula de hoje, voc vai estudar as caractersticas estruturais de um destes
dois grupos de protenas, o das protenas fibrosas. Acredite ou no, pode ser
muito mais interessante do que voc imagina...

AS PROTENAS FIBROSAS
Antes de mais nada, voc sabe o que uma fibra? Segundo o
Dicionrio Houaiss da Lngua Portuguesa; fibra qualquer estrutura
filamentosa, geralmente sob a forma de feixe, encontrada nos tecidos
animais e vegetais ou em algumas substncias minerais.
Uma protena fibrosa, portanto, uma protena em forma de
filamento, mais comprida do que larga. Uma protena fibrosa se associa
a outras unidades idnticas a ela e forma um feixe. Difcil de visualizar?
Pense em um fio qualquer. Se voc tivesse diversas unidades desse fio
e as agrupasse, colocando um fio paralelo a outro, teria um feixe! Da
mesma maneira, h protenas fibrosas que se organizam de tal maneira
que formam feixes. Veja a Figura 15.1:

Feixe
Filamento

Figura 15.1: Exemplo de filamentos que se associam, formando um feixe ou fibra.

88

CEDERJ

MDULO 1

15

Quer um exemplo real? Que tal descobrir como a estrutura de

AULA

um fio de cabelo seu?

O QUE TM A VER PROTENA E O MEU CABELO?


Voc j deve ter ouvido falar no termo queratina, provavelmente
por causa de um tratamento capilar que vem sendo bastante divulgado.
Mas voc sabe o que queratina?
A queratina (que daqui para a frente chamaremos -queratina)
uma protena fibrosa encontrada nos cabelos e plos, nas unhas, na l,
nos chifres, nas garras, nas penas e na maior parte da camada superficial
da pele dos animais. Essa protena apresenta grande resistncia, conforme
poderamos imaginar, j que est presente em estruturas to duras quanto
um chifre, por exemplo.
A resistncia da -queratina vem das suas caractersticas estruturais: ela formada por -hlices que se enrolam umas sobre as outras
formando uma super-hlice (Figura 15.2). exatamente essa super-hlice
que faz a queratina ser muito forte e resistente.

Distncia entre um
aminocido e outro na
-queratina: 5,15

Figura 15.2: A -queratina uma protena


fibrosa cuja estrutura rica em -hlices
com aminocidos mais prximos uns
dos outros do que nas demais protenas
(distncia de 0,2 menor). Estas
-hlices de um filamento de -queratina
se entrelaam com as -hlices de outro
filamento, formando um feixe bastante
resistente, denominado super-hlice. a
super-hlice que constitui nossos fios de
cabelo, nossas unhas, os chifres de alguns
animais, a l de outros.

Diferentemente das -hlices, as hlices da -queratina apresentam


cada volta com tamanho de 5,15 a 5,2 , em vez de 5,4 das hlices
tradicionais. Isso significa que a estrutura toda mais compacta, o que
lhe confere maior resistncia.

CEDERJ

89

Bioqumica I | Voc j ouviu falar em protenas fibrosas?

Outra caracterstica da estrutura da -queratina que as hlices


so entrelaadas de tal maneira que a superfcie de cada uma delas, que
toca a hlice adjacente, composta por aminocidos hidrofbicos como
alanina, valina, leucina, isoleucina, metionina e fenilalanina (Figura 15.3).
Esse contato possibilita a formao de interaes hidrofbicas entre esses
aminocidos, ajudando a estabilizar a estrutura da super-hlice.

Aminocidos
hidrofbicos

Figura 15.3: Imagem de duas hlices entrelaadas da -queratina. As superfcies das


hlices que esto em contato so compostas por aminocidos hidrofbicos.

Voc pode estar se perguntando: Se os fios de cabelo de todas as


pessoas so formados por essa tal de -queratina, como que uns tm
cabelos enrolados e outros, lisos? Essa uma excelente pergunta, cuja
resposta vem de um conceito que voc aprendeu na primeira aula sobre
protenas: as pontes dissulfeto. Vamos por partes...
As -queratinas podem apresentar uma grande quantidade de
PERMANENTE
Esta definio para
os rapazes (uma vez
que todas as moas,
provavelmente, sabem
do que se trata).
Permanente uma
tcnica capilar que faz
com que cabelos lisos
se tornem cacheados.
Esse tratamento,
embora chamado de
permanente, no o
de fato, j que
medida que os cabelos
vo crescendo o
padro de pontes de
enxofre estabelecido
o natural da
pessoa e no o
novo, produzido
artificialmente no
cabeleireiro.

90

CEDERJ

cistenas e, por isso, serem capazes de formar pontes de enxofre ou pontes


dissulfeto. Essa interao mais uma fora envolvida na manuteno
da estrutura da super-hlice dessas protenas e confere estrutura das
queratinas alta resistncia.
Como essas interaes interferem na forma do cabelo? Muito
simples: a maneira como as pontes dissulfeto so formadas (quais resduos
de cistena esto envolvidos) que determina. Assim, se tivermos cistenas
pareadas formando pontes de enxofre, o cabelo apresenta aspecto mais
liso. J se so formadas entre resduos mais afastados, o cabelo assume
aspecto ondulado (veja a Figura 15.4). Esse, inclusive, o princpio
do

PERMANENTE

feito por cabeleireiros naquelas que desejam ter cabelos

cacheados (veja o boxe Algumas coisas continuam as mesmas, mas os


meus cabelos...).

MDULO 1
S

Figura 15.4: Cabelos lisos e cabelos


ondulados: uma questo de pontes
de enxofre. A protena que constitui
os fios de cabelo a -queratina
bastante rica em cistenas, as
quais formam pontes dissulfeto.
Dependendo da maneira como essas
pontes dissulfeto forem formadas,
teremos cabelos lisos ou ondulados.

S
S
S
S
S

15

Cabelos ondulados

AULA

Cabelos lisos

Algumas coisas continuam as mesmas, mas os meus cabelos...


Algumas pessoas que tm cabelos lisos decidem que querem ter cabelos
cacheados. A soluo para o problema? Ir at um salo de beleza que
aplique a tcnica do permanente. Como funciona? Veja a seguir:
Primeiro, enrolamos os cabelos sobre um molde que lhes dar sua forma
ondulada futura. Em seguida, adicionamos um produto que funciona como
agente redutor das pontes de enxofre, isto , o produto reduz as ligaes
S-S desfazendo-as entre duas cistenas, deixando-as livres e reduzidas.
Aplicao de um
agente redutor

cistena S S cistena

cistena SH SH cistena

Ponte de enxofre
Como no so apenas as pontes dissulfeto responsveis pela estrutura
da super-hlice dos fios, o cabelo deve ser aquecido para fazer com que
as pontes de hidrognio existentes entre as duas hlices tambm sejam
rompidas. O agente redutor, associado ao calor, faz com que as hlices
se desfaam.
Depois de um determinado tempo, o produto redutor removido dos
cabelos e um outro produto, agora oxidante, aplicado. Este produto
vai fazer com que novas pontes de enxofre se formem entre as duas
hlices da -queratina. As pontes de enxofre resultantes desse processo
no so as mesmas que as anteriores, e os cabelos ficam ondulados (veja
a figura a seguir).
Etapa 1:
Quebra das pontes
dissulfeto pelo agente
redutor e das pontes
de H pelo calor.
S

Etapa 2:
Formao de novas pontes
de enxofre pela ao de
um agente oxidante.

SH HS

S
S
S

SH HS

S
Reduo

Aquecimento

Oxidao

SH HS

S
S

SH HS

CEDERJ

91

Bioqumica I | Voc j ouviu falar em protenas fibrosas?

A seqncia a seguir resume os passos do processo:


1. Enrolar o cabelo com molde.
2. Adicionar agente redutor das pontes de enxofre para quebrar as
pontes S-S das cistenas.
3. Aquecer o cabelo para romper as pontes de hidrognio que existem
nas hlices.
4. Lavar o cabelo para retirar o agente redutor.
5. Aplicar outro produto, o agente oxidante, que vai permitir que se
formem novas pontes de enxofre, diferentes daquelas que foram
desfeitas no passo 2. Essas pontes de enxofre daro o aspecto ondulado
ao cabelo, j que espiralizam a -queratina.

Surpreso com o fato de seu cabelo ser composto por uma protena?
Pois saiba que as clulas da sua pele tambm so impregnadas por essa mesma
molcula. Isso importante porque a queratina uma protena que funciona
impermeabilizando a pele para que no percamos gua para o ambiente sem
necessidade. Para ver se voc aprendeu os conceitos relacionados estrutura
dessa protena to importante, faa a Atividade 1.

ATIVIDADE
1
1. O que fao com meu casaco?
Leia o depoimento a seguir:
Coloquei meu suter de l novinho para lavar na mquina e, em seguida,
para secar na secadora de roupas. Ele encolheu uns trs tamanhos e, agora,
serve no meu filho de sete anos, e no mais em mim!

a. Sabendo que a l composta de -queratina, como voc explica o fato


de o suter ter encolhido depois de exposto ao calor (secadora)?
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b. As hlices que formam a -queratina possuem um lado que formado
por aminocidos apolares (hidrofbicos) e outro que concentra aminocidos
polares (hidroflicos). Lembrando que tais hlices formam uma super-hlice
e que, portanto, cada hlice faz contato uma com a outra, como podemos
explicar essa distribuio de aminocidos nas hlices da queratina?
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92

CEDERJ

MDULO 1

15
AULA

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RESPOSTAS COMENTADAS

a. Como voc viu nesta aula, a estrutura da -queratina


depende basicamente de trsa tipos de interao: pontes
de enxofre, interaes hidrofbicas e pontes de H. As pontes
de enxofre s podem ser desfeitas com um agente redutor;
as pontes de H, por sua vez, se desfazem com o calor.
O que aconteceu com o suter do nosso amigo um processo
parecido com parte do processo de cachear os cabelos (permanente).
Ao colocar na secadora de roupas o suter molhado, ele o exps a
uma grande quantidade de calor, que desfez as pontes de hidrognio
da l. Quando o suter esfriou, as pontes de H se refizeram, mas no
na conformao original, unindo partes da -queratina que estavam
mais distantes antes. Resultado: o suter encolheu!
b. Voc viu na Aula 12 que, para se constituir uma hlice, o arranjo dos
aminocidos que compem a protena fundamental. Por exemplo,
dois aminocidos cidos e negativos prximos desestabilizavam a
hlice, pela repulso entre as suas cargas. Um dos arranjos que
favorecia a formao das hlices era aquele em que aminocidos
hidrofbicos ficavam em contato. Isso porque aminocidos desse
tipo so capazes de fazer interaes hidrofbicas uns com os outros.
Essas interaes hidrofbicas so mais uma fora de interao que
tende a estabilizar a hlice.
No caso da -queratina, portanto, temos os aminocidos hidrofbicos
voltados para um mesmo lado da estrutura para que, quando uma
hlice for se enovelar em outra (para formar a super-hlice), esse
grupo de molculas fique em contato e possa estabelecer as
interaes hidrofbicas. Essas interaes, no caso da super-hlice,
so fundamentais, pois conferem maior resistncia estrutura, o que
importante para a funo que a protena desempenha (compor
cabelos, unhas, chifres etc.).

CEDERJ

93

Bioqumica I | Voc j ouviu falar em protenas fibrosas?

Outra protena que possui estrutura fibrosa e de que voc pode


ter ouvido falar o colgeno. Veja a seguir.
Mais hlices o colgeno
O colgeno a protena mais abundante nos vertebrados. Suas
fibras so fortes e insolveis e ele est presente nos ossos, nos dentes,
nas cartilagens, nos tendes, nas veias etc. Cada molcula de colgeno
constituda por trs cadeias polipeptdicas na forma de hlice, porm
com caractersticas diferentes das -hlices da queratina.
A composio do colgeno bastante peculiar e gera uma
estrutura mais peculiar ainda. Quase um tero dos seus aminocidos
composto de glicina; de 15% a 30 % so prolinas e 4-hidroxiprolinas
(este ltimo aminocido bastante incomum nas protenas. Veja o boxe
Um aminocido diferente...). Est achando alguma coisa esquisita?

Um aminocido diferente...
Como voc viu na Aula 8, a hidroxiprolina origina-se da prolina, quando
esta recebe um grupamento OH no carbono da posio 4.

Prolil-hidrolase

Vitamina C

Prolina
4-Hidroxiprolina

Essa reao promovida por uma enzima denominada prolil-hidrolase,


que necessita de cido ascrbico (vitamina C) para adicionar esse OH
prolina.
Na aula sobre vitaminas, voc ver de que modo o escorbuto, doena
relacionada carncia de vitamina C, afeta o colgeno. Aguarde!

Se voc se lembra do que aprendeu na Aula 12, sabe que, em geral, as


prolinas so ms formadoras de -hlices, por serem aminocidos com uma
estrutura muito rgida e por no possurem H ligado ao N para fazer ponte
de hidrognio, fator indispensvel formao das -hlices. No colgeno,
entretanto, esses aminocidos so bons formadores das hlices.

94

CEDERJ

MDULO 1

15

Isso acontece porque as hlices do colgeno so diferentes. Elas

AULA

assumem uma conformao helicoidal voltada para a esquerda com


cerca de trs resduos por volta, e no 3,6 resduos apresentados pelas
-hlices normalmente. Nessa conformao, o oxignio da carboxila da

prolina fica orientado de tal maneira que permite a formao de uma


forte ponte de hidrognio com o grupamento amino (N---H) da glicina.
Trs cadeias paralelas se enrolam umas sobre as outras para formar a
tripla hlice do colgeno (Figura 15.5).

Figura 15.5: Tripla hlice do colgeno. Essa


estrutura diferente das outras -hlices
que voc viu na Aula 12 por possuir, em
cada volta, trs aminocidos, em vez de
3,6. A estrutura fica mais compacta e,
conseqentemente, mais resistente. Essa
diminuio no tamanho da volta de cada
hlice permite que um aminocido como
a prolina, que em outras condies no
participa da formao de hlices, seja
um dos aminocidos mais abundantes
do colgeno.

Uma cadeia

Tripla hlice

As trs hlices do colgeno se enovelam de tal modo que o centro


delas fica ocupado sempre por glicinas, que o nico aminocido capaz
de caber nessa estrutura compacta e apertada. Por essa razo, a cada
trs resduos de aminocidos da seqncia primria do colgeno temos
sempre uma glicina (o que faz com que a quantidade de glicinas no
colgeno seja to alta).
Os resduos de prolina e hidroxiprolina, que so mais volumosos,
ficam para fora da tripla hlice e, por serem inflexveis e rgidos, conferem
resistncia molcula do colgeno. A rigidez e a resistncia da prolina
e da hidroxiprolina so necessrias funo do colgeno, que formar
as cartilagens, os dentes etc. Distrbios na sntese de colgeno podem
acarretar graves doenas. Para saber mais sobre isso, leia o boxe Nem
sempre osso duro de roer...

CEDERJ

95

Bioqumica I | Voc j ouviu falar em protenas fibrosas?

Nem sempre osso duro de roer...


Deficincias na sntese de colgeno podem acarretar doenas graves,
como o caso da Osteogenesis imperfecta. Essa doena faz com que seu
portador tenha ossos muito frgeis, pois no h colgeno fornecendo a
esse tecido a resistncia de que ele precisa. Assim, os ossos dessa pessoa
podem se quebrar por impactos suaves ou, por vezes, espontaneamente.
Podem tambm entortar, acredite! Para saber mais sobre essa doena,
visite o site da Associao Brasileira de Osteogenesis imperfecta em http:
//www.aboi.org.br/.
Outra doena que acontece em decorrncia da deficincia de colgeno
a sndrome de Ehlers-Danlos. Essa disfuno causada por alteraes
na sntese de colgeno, que podem acontecer em diversos momentos,
por exemplo na transcrio ou traduo incorreta do gene, na produo
de hidroxiprolina etc. Existem dez tipos diferentes de sndrome de
Ehlers-Danlos, e todas elas so caracterizadas pelos mesmos sintomas:
alta elasticidade da pele, grande mobilidade das articulaes, luxaes
freqentes e equimoses (manchas na pele). No h tratamento para a
sndrome, apenas recomendaes para se evitar as freqentes luxaes,
como o uso de roupas acolchoadas. Se quiser saber mais, visite a
pgina da Merck, em http://www.manualmerck.net/?url=/artigos/
%3Fid%3D295%26cn%3D1561.

ATIVIDADE
2

2. Pode? E como?
Analise as informaes a seguir (veja Aula 8):
Aminocidos essenciais so aqueles que nosso organismo no capaz de
sintetizar e que, por isso, so essenciais nossa dieta. Os no-essenciais
so aqueles para os quais dispomos de vias de sntese.
Relao de aminocidos essenciais e no-essenciais

96

CEDERJ

Aminocidos no-essenciais

Aminocidos essenciais

Glicina

Leucina

Alanina

Isoleucina

Tirosina

Valina

Serina

Triptofano

cido asprtico

Fenilalanina

cido glutmico

Treonina

Asparagina

Metionina

Glutamina

Lisina

Cistena

Histidina

Prolina

Arginina

MDULO 1

15
AULA

a. Com base nas duas informaes anteriores e no que acabou de aprender


nesta aula sobre colgeno, voc acha que uma dieta em que a fonte
majoritria de protena seja gelatina (composta basicamente de colgeno)
suficiente para as necessidades do organismo? Por qu?
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________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
b. Observe agora mais duas informaes:
Parte da composio do colgeno
Aminocido

Percentual

Glicina

35%

Alanina

11%

Prolina e hidroxiprolina

21%

Fonte: Adaptado de Lehninger Principles of Biochemistry, 2003.

A prolina m formadora de -hlice porque possui seu tomo de


nitrognio como parte de um anel, o que impossibilita que a ligao N-C
gire para formar uma espiral. (Aula 12)
A glicina uma m formadora de -hlice devido sua grande flexibilidade.
Por ser um aminocido pequeno (o menor deles), a glicina apresenta grande
mobilidade no espao, o que desestabiliza tanto -hlices quanto folhas .
(Aula 12)
Considerando as informaes da tabela Parte da composio do colgeno
e dos trechos retirados da Aula 12, como voc explica o fato de a estrutura
do colgeno ser composta por uma tripla hlice?
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CEDERJ

97

Bioqumica I | Voc j ouviu falar em protenas fibrosas?

RESPOSTA COMENTADA

a. Se voc prestou bastante ateno no que dissemos na aula, deve


ter mencionado em sua resposta que a gelatina NO uma boa
fonte nutricional porque possui em grande maioria aminocidos noessenciais (alto teor de glicinas e prolinas). O que ns precisamos
ter na dieta so os aminocidos essenciais, pois, para estes, no
possumos vias de sntese.
b. Na tabela que expomos na letra b desta atividade, mostramos
que 67% do colgeno so de alaninas, glicinas e prolinas (ou
hidroxiprolinas). Na Aula 12, voc viu que os dois ltimos aminocidos
no so bons formadores de hlices. No entanto, as hlices do
colgeno so diferentes das -hlices que voc aprendeu na Aula
12. As hlices do colgeno possuem, em cada volta, apenas trs
aminocidos (em vez de 3,6, como nas -hlices). Essa diminuio
do tamanho da volta faz com que as prolinas sejam posicionadas
de tal maneira que o seu grupamento carboxila possa interagir
com o grupamento amino de uma glicina, formando uma ponte
de H. Por que uma glicina? Porque este o nico aminocido que
cabe no interior de uma hlice to estreita. Voc no precisava ter
mencionado isso na sua resposta, mas, s para relembrar, a glicina
no uma boa formadora de hlice por ser muito flexvel e acabar
por desestabilizar a estrutura. No entanto, na hlice de colgeno, o
pequeno espao em que ela se encontra, associado alta rigidez
da prolina e da hidroxiprolina, faz com que suas caractersticas no
atrapalhem a formao da hlice.

At agora, demos dois exemplos de protenas fibrosas presentes


em vertebrados: a -queratina e o colgeno. No entanto, essas no so
as nicas protenas fibrosas. Quer um exemplo? Veja a seguir.

O que h em comum entre a teia de uma aranha e a seda


de uma roupa?
Talvez voc se lembre de que, na Aula 12, j havamos falado
sobre a fibrona da seda. Naquela aula, a fibrona da seda foi mencionada
para exemplificar as folhas . Agora voc vai conhecer melhor essa
protena.

98

CEDERJ

MDULO 1

15

A fibrona da seda produzida por insetos (bicho-da-seda, princi-

AULA

palmente) e aranhas. Ela uma protena fibrosa que constitui tanto a seda
dos tecidos que utilizamos na confeco de roupas quanto a teia de aranhas.
Essa protena formada, predominantemente, por fitas antiparalelas.
Essa estrutura formada porque a seqncia primria da fibrona rica
em alanina e glicinas, dois aminocidos bem pequenos, que permitem um
grande empacotamento das fitas umas contra as outras.

3,5

5,7

LIGAES FRACAS
X LIGAES

Alanina

Glicina

Figura 15.6: Estrutura da fibrona da seda. constituda de folhas antiparalelas


possuindo uma repetio de seis aminocidos ao longo de sua estrutura primria:
Gli-Ser-Gli-Ala-Gli-Ala.

A estrutura terciria da fibrona estabilizada pelas pontes de


hidrognio e pelo contato entre resduos apolares. A seda no pode ser
estendida porque as fitas j esto muito esticadas. Entretanto, isso no
quer dizer que ela no seja uma estrutura flexvel. Isso porque a folha
mantida por LIGAES FRACAS (pontes de hidrognio e interaes hidrofbicas)
e no por LIGAES COVALENTES como as -queratina (pontes de enxofre).
A fibrona uma protena-modelo para o estudo de estrutura
terciria de protenas ricas em folhas antiparalelas. Alm disso,
tambm um dos alvos de estudo mais relevantes quando se trata de
aranhas (o outro fica por conta dos poderosos venenos que estes seres
so capazes de produzir) e faz parte do fascnio que estes animais causam.

COVALENTES

Ligaes fracas
so as pontes de
hidrognio, interaes
inicas e interaes
hidrofbicas. Esse
tipo de ligao pode
ser quebrado pelo
calor ou por agentes
desnaturantes,
como a uria. J as
ligaes covalentes
so ligaes fortes,
ou seja, que precisam
de uma quantidade
de energia alta para
serem quebradas. Para
voc ter uma idia,
uma ligao covalente
pode requerer dez
vezes mais energia
do que uma ponte de
hidrognio, para ser
desfeita.

CEDERJ

99

Bioqumica I | Voc j ouviu falar em protenas fibrosas?

Acha que estamos exagerando? Ento, por que ser que um dos mais
aclamados super-heris foi originado a partir da picada de uma aranha,
que lhe conferiu a capacidade de produzir fibronas de enorme resistncia,
fazendo-o voar pelos ares, pendurando-se de prdio em prdio, salvando
as mocinhas e vencendo os bandidos?

Figura 15.7: O Homem-Aranha, heri dos quadrinhos da Marvel Comics, dos desenhos
animados e, posteriormente, das telas de cinema, uma amostra de como esses
aracndeos e suas fabulosas teias so capazes de exercer fascnio. Homem-Aranha
o codinome de Peter Parker, um rapaz que, ao ser picado por uma aranha, adquire a
capacidade de produzir enormes e resistentes teias. pendurado nessas teias que ele
se lana pelos ares da cidade de Nova York, enfrentando os bandidos e salvando as
mocinhas. Se voc tiver a oportunidade, vale a pena conferir esses filmes de ao!

CONCLUSO
No fosse a queratina, no teramos cabelos e unhas e poderamos
nos desidratar at a morte, uma vez que essa protena impede a perda
de gua por via cutnea. No fosse o colgeno, nossas estruturas ssea
e cartilaginosa seriam bastante comprometidas. Realizar esportes para
quem tem doenas associadas deficincia de colgeno tarefa impossvel.
Nada de Copas do Mundo, Olimpadas, Jogos Pan-americanos...
As protenas fibrosas de invertebrados tambm so importantes.
O que seria das aranhas se no pudessem capturar suas presas em suas
magnficas teias?
Embora a maior parte dos tipos de protenas dos organismos no
seja fibrosa, as que existem tm papel de grande relevncia!

100 C E D E R J

MDULO 1
AULA

15

ATIVIDADE FINAL
Ser que vai caber?
Joana tinha uma festa importante para ir. Para no
fazer feio, foi a uma loja chique e comprou um
vestido de seda bastante elegante para usar no
evento. Ela fez isso umas duas semanas antes da
festa. O problema que Joana no contava que podia
engordar uns dois quilinhos nesse meio tempo, e foi
o que aconteceu.
Na vspera da festa, Joana experimentou o vestido, e
ele estava um pouco apertado. Sem saber o que fazer,
Joana ligou para uma amiga que lhe disse que, se ela
lavasse o vestido, ele cederia (alargaria) um pouco e
ela poderia us-lo na festa.

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/669554

Levando em considerao o que voc estudou sobre seda nesta aula, lavar o vestido
vai adiantar? Voc acha que a seda vai ceder? Por qu?
___________________________________________________________________________
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____________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________

RESPOSTA COMENTADA

Infelizmente, Joana tem um problema para resolver, e a soluo no


lavar o vestido: a seda um tecido que no cede. Isso acontece porque
as fibras que formam o tecido so compostas por uma protena a
fibrona que organizada em folhas antiparalelas de tal maneira j
esticadas que no possvel distend-las mais. Assim, ou Joana compra
outro vestido s pressas ou correr o risco de ter seu vestido de seda
rasgado no primeiro salgadinho que comer na festa...

C E D E R J 101

Bioqumica I | Voc j ouviu falar em protenas fibrosas?

RESUMO

Existem dois grandes grupos de protenas: as fibrosas e as globulares. As protenas


fibrosas, tema desta aula, so aquelas cuja estrutura filamentosa e organizada
na forma de feixes, em geral envolvendo a formao de hlices. Exemplos de
protenas desse tipo so a -queratina, o colgeno e a fibrona da seda.
A -queratina a protena que compe nossos cabelos, as unhas, os chifres e
cascos de alguns animais, por exemplo. uma protena bastante resistente por
sua estrutura envolver a formao de uma super-hlice. As hlices de -queratina
se enovelam uma na outra, mantendo as regies hidrofbicas em contato,
aumentando a resistncia da super-hlice formada.
O colgeno tambm se organiza em hlices, s que em triplas hlices. O colgeno
possui grande quantidade de prolina e glicina, que no so boas formadoras
de hlice mas que, neste caso, a formam porque cada volta da hlice tem trs
aminocidos, em vez de 3,6. Esse estreitamento possibilita interaes mais
resistentes entre os aminocidos e conferem protena uma grande rigidez,
necessria sua funo, que , por exemplo, participar da constituio dos nossos
ossos e cartilagens.
Protenas fibrosas tambm esto presentes em invertebrados, como o caso da
fibrona da seda das aranhas e de bichos-da-seda. Essa protena organizada
em folhas antiparalelas e, embora no possa ser muito esticada, possui grande
flexibilidade (para ser dobrada).

INFORMAES SOBRE A PRXIMA AULA


Nesta aula, dissemos para voc que as protenas fibrosas existem em poucos tipos
diferentes. Ora, se existem milhares e milhares de protenas, em que categoria
se encontram as outras tantas, e como so elas? A resposta voc vai descobrir na
aula que vem. At l!

102 C E D E R J

AULA

Protenas 6: protenas
globulares a maioria
delas

16
Meta da aula

objetivos

Apresentar as protenas globulares,


relacionando a estrutura que apresentam
funo que exercem.

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:


1

identificar caractersticas de uma protena globular;

descrever a funo do grupamento heme no sangue;

diferenciar a ligao de oxignio na hemoglobina


e na mioglobina, de acordo com as estruturas das
duas protenas;
descrever o Efeito Bohr.

Pr-requisito
Antes de comear a estudar esta aula, importante que
voc volte Aula 7 e relembre como funciona o sistema de
tamponamento do sangue.

Bioqumica l | Protenas 6: protenas globulares a maioria delas

UMA PEQUENA RECAPITULAO...


Na aula passada, voc viu trs exemplos de protenas fibrosas:
a queratina, o colgeno e a fibrona. Estas trs protenas so mais compridas
do que largas, da serem includas no grupo das protenas fibrosas.
As protenas fibrosas, em geral, tambm contm poucos elementos
de estrutura secundria: ou so ricas em folhas contendo poucas -hlices,
ou, ao contrrio, so ricas em a-hlices possuindo poucas folhas . Estas
protenas podem compor a seda da teia de uma aranha ou suporte, forma
e proteo externa aos vertebrados, sendo encontradas nos plos, penas,
seda, tendes, matriz ssea, unhas etc. Mas isso tudo voc j viu.
O que voc deve estar curioso para saber como so as protenas
que no so fibrosas e em que outra classe se enquadram. Esse o assunto
da aula de hoje: as protenas globulares.

E A MAIORIA ASSIM!
Alm das protenas fibrosas, existem as chamadas protenas
globulares, que apresentam uma forma mais arredondada. Elas so
ricas em elementos de estrutura secundria, podendo ser encontradas,
na mesma protena, as -hlices, as voltas e as folhas .
Dentro desse grupo, temos centenas de protenas, como a
mioglobina, o citocromo c, a lcool desidrogenase, a ribonuclease, a
lisozima, a hemoglobina etc. (calma, no se assuste com esses nomes
veja o boxe Quem so essas protenas todas?).

Quem so essas protenas todas?


Se voc se espantou com os nomes das protenas do pargrafo anterior,
aqui vo algumas explicaes:
O citocromo c uma protena que participa da respirao celular.
A respirao celular, caso voc no lembre, um processo que acontece
dentro das mitocndrias das clulas, convertendo oxignio em gua e
gerando energia na forma de ATP.
A lcool desidrogenase uma enzima que est presente no fgado e que
participa da metabolizao do lcool que ingerimos, fazendo com que
esse seja convertido em outras molculas que podem ser excretadas do
nosso organismo.
A ribonuclease uma enzima que degrada RNA. Isso importante, por
exemplo, depois que o RNA mensageiro j foi traduzido na protena
que deveria. O RNAm que est no citoplasma deve ser degradado, pois
j cumpriu seu papel: a que atua a ribonuclease!

104 C E D E R J

MDULO 1

16
AULA

A lisozima uma enzima tambm, e est presente na nossa saliva e


nas lgrimas, por exemplo. Ela atua como um mecanismo de defesa
contra a ao de bactrias, desestabilizando a estrutura desses
microorganismos.
A mioglobina e a hemoglobina so protenas to importantes que
vamos us-las de exemplo no decorrer desta aula; ento, no vale a
pena mencion-las aqui.
Tanto em Bioqumica I quanto em Bioqumica II e em outras disciplinas
que falem sobre essas coisas que no podemos ver, vai ser comum
voc se deparar com nomes de protenas e enzimas. Nesta aula, demos
os exemplos anteriores e, neste boxe, suas definies, s para familiariz-lo
com esses nomes. Agora no importante que voc os mantenha em
mente; no se preocupe, pois, quando for, avisaremos!

As protenas globulares, em geral, so enzimas, funcionando


tambm como transportadoras de outras molculas ou como protenas
reguladoras (que regulam a atuao de outras molculas). Nesta aula,
voc ver duas protenas globulares que esto envolvidas em uma funo
importantssima no nosso organismo: o transporte de oxignio. Mas
antes, faa a Atividade 1 (que bastante objetiva) e, em seguida, descubra
como essas protenas podem estar relacionadas sua respirao!

ATIVIDADE
1
1. Como so essas protenas?
Leia os trechos a seguir:
1. A Cinesina uma protena que atua dentro da clula de forma
absolutamente surpreendente: carregando (literalmente!), por fora
mecnica, molculas de um lado para o outro da clula. Essa protena
consegue realizar essa ao graas sua estrutura, um misto de -hlices
e folhas , e capaz de realizar uma ao enzimtica de quebra do ATP
para gerar energia para realizar seus transportes.
2. A elastina uma protena estrutural que faz exatamente o que seu nome
sugere: confere elasticidade aos tecidos em que se encontra presente, por
exemplo, nossos pulmes. A elastina uma protena bastante resistente,
graas a elementos da sua estrutura que, embora sejam pouco variados,
interagem de tal forma que a protena capaz de se distender e retrair
sem se romper.
Agora, escreva no espao a seguir qual dos trechos se refere a uma protena
globular e por que pistas no texto voc o identificou:

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________________________________________________________________

C E D E R J 105

Bioqumica l | Protenas 6: protenas globulares a maioria delas

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________________________________________________________________
RESPOSTA COMENTADA

Se voc estudou atentamente a aula passada e o incio desta aula,


esta atividade deve ter sido bastante fcil de realizar. Isso porque na
aula anterior dissemos que as protenas fibrosas so normalmente
protenas estruturais e possuem uma estrutura bastante resistente.
Por essas informaes, voc j poderia ter identificado a elastina
como fibrosa e, por eliminao, a kinesina como globular. No
bastasse isso, no incio desta aula dissemos que uma protena
globular, alm de arredondada (e isso, para no ficar bvio demais,
no estava no texto), possui diversos elementos de estrutura terciria
e pode apresentar atividade enzimtica. Esses dois itens esto
mencionados no texto 1, que fala da kinesina!

TRANSPORTE DE OXIGNIO NOS ORGANISMOS


MULTICELULARES O PROBLEMA E A SOLUO!
O oxignio um gs essencial vida da maior parte dos organismos.
Esse gs no se dissolve facilmente em solues aquosas, o que dificulta o
transporte dele na forma livre (sem estar associado a nenhuma molcula)
para os tecidos. Esta caracterstica do oxignio fez com que, no caso dos
organismos multicelulares, somente aqueles que desenvolveram estratgias
para a utilizao desse gs fossem selecionados positivamente.
Durante o processo de evoluo, surgiram molculas capazes
de transportar o oxignio em meio aquoso. As molculas que foram
selecionadas para esta funo foram as protenas.
Uma particularidade associada a essas protenas que era necessrio
que a molcula transportadora de oxignio se ligasse a ele com grande
afinidade, mas que, no lugar de destino (no caso, os tecidos), se desligasse
LIGAO REVERSVEL
Tipo de ligao
qumica que pode
acontecer e se
desfazer sem que as
partes (molculas)
envolvidas percam suas
caractersticas iniciais.

106 C E D E R J

dele facilmente. Em outras palavras, A LIGAO DEVERIA SER REVERSVEL.


Dos vinte aminocidos constituintes de protenas, nenhum deles
capaz de se ligar reversivelmente ao oxignio. Desta forma, as protenas
compostas apenas por aminocidos no poderiam desempenhar a funo
de agente transportador de oxignio.

MDULO 1

16

Alguns metais, como o ferro e o cobre, so timos transportadores

AULA

de oxignio. Pronto! Bastaria que os organismos utilizassem o ferro ou


o cobre como transportadores e o problema estaria resolvido.
S que, infelizmente, isto no possvel, porque a ligao do
oxignio ao ferro gera radicais (molculas muito reativas) que so
altamente danosos ao DNA e s protenas.
Uma vez que a natureza no poderia usar ferro ou cobre, na
sua forma livre, para desempenhar a funo de transporte (pois no
se poderia resolver um problema criando outros), continuamos com o
mesmo problema...
Considerando que ns existimos e que acontece o transporte do
oxignio dentro do nosso organismo e de tantos outros, uma soluo
foi encontrada. Veja como este problema foi solucionado.

O GRUPAMENTO HEME
Parte da soluo veio quando o ferro associou-se a um grupo
conhecido como protoporfirina, formando uma molcula chamada heme.
No heme, o ferro fica seqestrado, isto , fica escondido, tornando-se
menos reativo. Veja a Figura 16.1.
O

C
CH2
CH2

CH2
X
N

C
CH
C

N
X

Protoporfirina

CH C
CH2

C
C

HN
X

CH

C
CH2

N+

CH

Fe
N

CH3

C
C

CH

CH3

CH3

C
CH
CH2

Heme

Figura 16.1: Soluo para o transporte de oxignio - o heme. Como o ferro um tomo
bastante reativo para se ligar diretamente estrutura de uma protena ou para ficar
livre pelo organismo, uma soluo para podermos nos beneficiar da capacidade de este
tomo se associar ao oxignio veio com a molcula de protoporfirina ( esquerda). Esta
molcula composta por tomos de carbono, hidrognio e nitrognio, formando um
anel no centro do qual possvel ligar um tomo de ferro. Quando a protoporfirina
est associada ao ferro a chamamos a molcula de heme.

C E D E R J 107

Bioqumica l | Protenas 6: protenas globulares a maioria delas

O heme uma molcula formada por tomos de carbono,


hidrognio e nitrognio ligados de tal forma que constituem um anel.
Localizados no centro desse anel, os nitrognios tm a capacidade de
estabelecer quatro ligaes (tambm chamadas coordenaes) com outros
tomos. Quando o anel no tem nenhum tomo associado em seu centro,
ele chamado protoporfirina. Quando um tomo de ferro se associa ao
centro desse anel, ele (o anel) passa a ser chamado de heme.
Apenas um tomo de ferro se associa ao anel, e em seu estado
ferroso, ou seja, Fe+2 (veja o boxe O que estado ferroso?). Isso porque
quando est no estado Fe2+, ele capaz de ligar oxignio reversivelmente;
j no estado Fe3+ (frrico), no apresenta mais esta capacidade. So os
nitrognios presentes na protoporfirina, devido ao seu carter doador
de eltrons, que ajudam a evitar a converso do Fe+2 em Fe+3.

O que estado ferroso?


Um tomo possui um ncleo composto por neutros e prtons e uma
eletrosfera, composta por eltrons. Os eltrons dessa eletrosfera,
dependendo da situao, podem se desprender e passar para outro tomo
qualquer. O tomo que perde eltrons fica com mais cargas positivas do
que negativas; o nmero de eltrons que ele perder significar o nmero
de cargas positivas que ele ter a mais.
O processo de perda de eltrons chamado oxidao. O tomo de ferro
apresenta dois estados de oxidao: aquele em que perdeu dois eltrons
e o em que perdeu trs eltrons.
Quando um tomo de ferro oxidado perdendo dois eltrons, dizemos
que ele Fe+2, ou que est em seu estado ferroso. Quando o ferro perde
trs eltrons, Fe+3, dizemos que est em estado frrico.

2e

Estado ferroso

3e

Estado frrico

Fe

Se voc olhar com cuidado a Figura 16.1, vai notar que o


ferro faz quatro ligaes (coordenaes) com os quatro nitrognios da
protoporfirina, e que h ainda duas ligaes que ficam livres; exatamente
uma delas a que deve ser ocupada pelo oxignio a ser transportado.
Tudo solucionado? No ainda! Lembra que mencionamos que
uma protena a molcula que transporta o oxignio no organismo? At
agora, s falamos do heme. Por que no somente ele que transporta

108 C E D E R J

MDULO 1

16

o oxignio diretamente? Por que h uma protena envolvida nesse

AULA

processo?
H alguns motivos para termos uma protena envolvida:
o primeiro que o heme uma molcula hidrofbica, e no conseguiria
circular livremente pela corrente sangnea (composta principalmente de
gua). O segundo est relacionado ao estado de oxidao do ferro.
Quando o oxignio ocupa uma das duas ligaes livres (valncias)
do ferro no heme, ele pode converter Fe2+ em Fe3+, o que torna o heme
incapaz de transportar o oxignio. Como j dissemos, Fe3+ no capaz
de se ligar ao oxignio.
Aqui entra a protena: umas das ligaes livres do ferro interage
com um aminocido da protena designada para o transporte de oxignio.
No caso da protena que faz o transporte de oxignio no nosso corpo,
por exemplo, este aminocido a
HISTIDINA,

que liga o ferro a um de

HISTIDINA

seus nitrognios. A outra ligao fica

S para voc relembrar a estrutura da histidina e ver qual


nitrognio liga o heme:

livre para receber o oxignio.


A ligao do oxignio muda os

COO

arranjos dos eltrons do heme. Essa


mudana eletrnica resulta em uma

H3N+ C

alterao na cor do heme. Na forma

CH2

desoxigenada (sem oxignio ligado),


ele vermelho escuro; na forma
oxigenada (com oxignio ligado),
vermelho vivo.

Este nitrognio do anel


imidazol da histidina
perde o hidrognio e se
liga ao ferro da molcula
de heme.

Este nitrognio est


envolvido em uma
ligao peptdica, pois
a histidina que liga
o heme se encontra
no meio da cadeia da
hemoglobina.

C
C

NH
CH
N

Sangue claro, sangue escuro...


J reparou que, quando nos
cortamos ou nos machucamos,
algumas vezes o sangue que
sai de nosso corpo vermelho
escuro e, s vezes, mais claro?

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/729161

C E D E R J 109

Bioqumica l | Protenas 6: protenas globulares a maioria delas

Alm do transporte pelo sangue e a manuteno do ferro no estado


ferroso, h outra vantagem de o heme estar ligado a uma protena. Essa
molcula capaz de ligar no apenas o oxignio, mas tambm o gs
carbnico (CO2) e o monxido de carbono (CO). Quanto ao gs carbnico,
isso representa uma vantagem, uma vez que a protena chega aos tecidos
carregando oxignio e se afasta deles carregando o gs que produto das
reaes do metabolismo das clulas o CO2. A afinidade do heme por
esse gs no alta, mas suficiente para que ele seja retirado dos tecidos
e entregue aos pulmes, de onde expelido quando expiramos.
J o monxido de carbono representa um problema para ns, pois
ele se liga ao heme com maior afinidade que o oxignio. Quando o CO
se liga ao heme, ele exclui o oxignio definitivamente. Isso explica por
que o CO to txico aos organismos aerbicos.
O fato de o heme ficar protegido dentro de protenas faz com que
o acesso do CO e de outras molculas pequenas seja dificultado.
Assim, o ferro preso a anis (protoporfirina) formando o heme,
que por sua vez fica mergulhado no interior de uma protena, garante
que o transporte de oxignio seja feito da melhor maneira possvel, pois,
com isto:
a. no h converso do Fe2+ em Fe3+, o que inviabilizaria o transporte
do oxignio;
b. no h formao de radicais txicos, que so danosos a outras
molculas da clula;
c. possvel limitar o acesso de determinadas molculas ao heme.
Pois bem! Agora chegou a hora de falar especificamente dessas
protenas que esto envolvidas no transporte de gases no nosso
organismo: a hemoglobina e a mioglobina.
A hemoglobina est presente nos glbulos vermelhos (hemcias) e
sua funo a de carregar oxignio no sangue, desempenhando, tambm,
um papel vital no transporte de dixido de carbono (CO2) e hidrognio (H),
conforme voc ver com detalhes mais frente. J a mioglobina encontrada
nos msculos e tem como funo distribuir oxignio a este tecido. Vamos
ver suas estruturas com mais detalhes depois da atividade a seguir.

110 C E D E R J

MDULO 1
2

2. Sangue azul... Pode?


J ouviu a expresso Fulano tem
sangue azul? Essa expresso
era utilizada para designar
membros da nobreza que, de
to superiores s pessoas de
outras classes sociais, possuiriam
at sangue de cor diferente.
No entanto, quando um nobre se
cortava, o sangue que todos viam
sair de seu corpo era vermelho.
O argumento utilizado pelos
Fonte: http://www.sxc.hu/photo/707930
nobres para justificar isso era o
de que, ao entrar em contato
com o ar impuro, o sangue azul de suas veias ficava vermelho.
Pergunta: Os nobres (ou qualquer pessoa) podem ter sangue de cor azul de
fato? Por qu? Mencione em sua resposta a molcula que d cor ao sangue,
qual sua funo nesse fluido e associada a que molcula ela pode exerc-la.
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RESPOSTA COMENTADA

Independentemente de ter estudado esta aula at esse ponto, voc


provavelmente j sabia que ningum tem sangue azul! O que talvez
voc no soubesse ainda que o que d a cor vermelha ao sangue
uma protena chamada hemoglobina, e que ela faz isso por ter,
em sua estrutura, um grupamento prosttico chamado heme.
A hemoglobina uma protena essencial ningum pode prescindir
de sua presena no sangue (e, por isso, os nobres no poderiam ter
sangue azul de jeito nenhum!). Isso porque ela participa do transporte
de oxignio para os tecidos, e ela s pode desempenhar essa funo
por ter associados grupamentos heme sua estrutura .
O heme uma molcula que possui, no centro do anel que compe
a sua estrutura, um tomo de ferro que faz o heme ser colorido e,
por conseqncia, a hemoglobina e o sangue. Esse ferro do heme
capaz de fazer duas ligaes qumicas alm da que faz para estar

C E D E R J 111

AULA

16

ATIVIDADE

Bioqumica l | Protenas 6: protenas globulares a maioria delas

no centro do anel: uma acontece com uma histidina da seqncia


da protena, e outra, com uma molcula de oxignio. Ou seja, no
final das contas, o ferro o elemento capaz de se ligar ao oxignio
e possibilitar o transporte desse gs.

MSCULOS E OXIGNIO A MIOGLOBINA


A mioglobina uma das mais simples entre as protenas que
transportam oxignio. Ela particularmente abundante nos msculos
de mamferos que mergulham, como focas e baleias, pois capaz de
reter o oxignio por longos perodos de tempo, enquanto o animal est
submerso.
A mioglobina uma protena composta por uma nica cadeia,
que contm 153 aminocidos, apenas uma molcula de heme e oito
-hlices (Figura 16.2), cada uma recebendo como denominao uma
letra do alfabeto: de A at H.

Figura 16.2: Estrutura terciria da


mioglobina. Esta protena, presente nos
msculos dos mamferos, possui uma
nica cadeia, com estrutura rica em
-hlices (representadas pelos bastes
mais largos). Em seu interior, h uma
molcula de heme, a qual permite
que esta protena tenha participao
na armazenagem e no transporte de
oxignio nos msculos.

Em vez de atuar transportando oxignio para todos os tecidos, a


mioglobina faz isso somente entre as clulas musculares (para saber como
essa protena pode auxiliar no diagnstico de uma doena, veja o boxe
Mioglobina livre bom negcio no !). Alm disso, h outras atuaes
da hemoglobina que a mioglobina no pode exercer, como, por exemplo,
o transporte de gs carbnico. Mas isso voc vai ver daqui a pouco!

112 C E D E R J

MDULO 1

16
AULA

Mioglobina livre bom sinal no !


A mioglobina uma protena bastante abundante nas clulas musculares.
Ela responsvel, inclusive, pela cor vermelha que o msculo apresenta.
Quando um msculo sofre uma leso, as suas clulas tambm so lesionadas.
Isso faz com que haja liberao de mioglobina para o sangue.
Pessoas que tiveram um infarto agudo tm a quantidade de mioglobina
no sangue elevada logo nas primeiras horas depois do infarto, e os nveis
dessa protena no sangue s so restabelecidos um ou dois dias depois.
O aumento da quantidade de mioglobina no sangue acontece antes do
aumento da quantidade de outras protenas tpicas do tecido do corao
e pode ajudar na confirmao de ter havido mesmo um infarto ou outro
tipo de problema corao. Isso determina, por exemplo, o tratamento
que ser aplicado ao paciente.

E POR ISSO QUE NOSSO SANGUE VERMELHO


A HEMOGLOBINA
Como voc deve se lembrar (provavelmente aprendeu isso no
Ensino Mdio), no nosso sangue h clulas chamadas hemcias (que
tambm podem ser chamadas de eritrcitos ou glbulos vermelhos).
Essas clulas possuem uma grande quantidade de hemoglobina em seu
interior (e voc j viu que a hemoglobina vermelha por causa do heme
que carrega).
Curioso que para desempenharem melhor sua funo de clulas
transportadoras de oxignio, as hemcias perderam suas organelas, tais
como: ncleo, mitocndria e retculo endoplasmtico (no deixe de ler
o boxe Uma clula bem diferente!). Podemos dizer que as hemcias so,
na verdade, um saco cheio de hemoglobina!

Uma clula bem diferente!


As hemcias so clulas bastante abundantes no nosso sangue. Estima-se
que um indivduo adulto tenha cerca de cinco milhes de glbulos
vermelhos por milmetro cbico de sangue. Dentro de cada hemcia,
h muitas molculas de hemoglobina e, para aumentar ainda mais a
capacidade de transportar oxignio (a quantidade de hemoglobinas que
cabem dentro da clula), as hemcias perderam diversas organelas.
Como elas perderam o ncleo, no podem se dividir. Isso significa que,
aps seu tempo de vida (que, no caso de uma hemcia humana, de
aproximadamente quatro meses) elas so eliminadas pelo organismo. Por
isso, a sntese dessas clulas pela medula ssea to intensa: so produzidos
cerca de dois milhes por segundo.
A perda da mitocndria trouxe para essas clulas outra restrio. que
a mitocndria o lugar onde acontece a respirao celular. Sem essa
organela, a nica fonte de energia para essas clulas a quebra da glicose
em um processo chamado gliclise, que voc vai aprender em Bioqumica II.
No curioso? A clula que transporta oxignio para que todas as outras
respirem simplesmente no respira!

C E D E R J 113

Bioqumica l | Protenas 6: protenas globulares a maioria delas

A hemoglobina uma protena tetramrica, isto , possui quatro


subunidades. Ela possui duas subunidades ditas e duas sendo, ento,
denominada (22). H quatro grupos hemes na hemoglobina, cada um
ligado a uma destas subunidades. Dessa forma, a hemoglobina transporta
quatro molculas de oxignio de cada vez.
Diferentemente da mioglobina, a hemoglobina transporta prtons
e CO2, alm do oxignio. Veja com mais detalhes o mecanismo do
transporte de cada um desses.

A INTERAO DAS PROTENAS COM DIFERENTES GASES E


COM PRTONS

Como o oxignio consegue chegar dentro da protena e


encontrar o heme? a formao da oxi-hemoglobina
A resposta para isto bastante curiosa, pois nos mostra que as
protenas no so to rgidas como poderamos pensar.
Na verdade, as protenas so maleveis e at parece que respiram,
isto , elas incham e desincham. Claro que esses movimentos so
da ordem de angstrons, mas so suficientes para que uma molcula
pequena, como a do oxignio, que est do lado de fora, entre no miolo
da protena.
Na ligao do oxignio mioglobina, exatamente isso o que
acontece: a protena liga o oxignio alterando um pouco o seu tamanho
e permitindo que esse gs fique ligado ao heme em seu interior. Ou seja,
ela incha quando est ligada ao oxignio e desincha quando se
desliga dele.
No caso da hemoglobina, que transporta quatro oxignios, a ligao
do primeiro oxignio causa uma mudana na conformao da protena,
aumentando a afinidade pelo segundo oxignio. Quando esse segundo
oxignio se liga, causa novas mudanas que resultam no aumento progressivo
da afinidade da protena pelo seu ligante (no caso, o oxignio).
Esse tipo de ligao chamado cooperativa, isto , a ligao de
um ligante coopera com a ligao do prximo ligante. Por isso, dizemos
que a hemoglobina uma protena alostrica. Protenas alostricas so
aquelas nas quais a ligao de um ligante altera a afinidade da protena
pelos demais ligantes (e voc ver mais sobre isso quando estudarmos o
funcionamento das enzimas, daqui a algumas aulas).
114 C E D E R J

MDULO 1

16

As anlises cristalogrficas da hemoglobina, nas formas oxigenada

AULA

e desoxigenada, revelaram alteraes importantes de estrutura,


explicando como a entrada do primeiro oxignio facilita a entrada do
segundo e assim por diante (cooperatividade). Aqui, temos um exemplo
claro de como a determinao da estrutura de uma certa protena, em
diversos estados de ocupao, permite compreender o seu mecanismo
de funcionamento.
Vamos ver como isso se processa?
Quando o ferro sem oxignio est preso ao heme, ele fica levemente
acima do plano dos anis do heme. Observe a Figura 16.3:

(A)

(B)
Oxignio
Ferro puxado
para cima

Heme

Heme
Ferro

Histidina
ligada ao
ferro
Histidina
ligada ao
ferro

Figura 16.3: O que acontece com o heme ao se ligar ao oxignio. Nesta viso lateral da molcula de heme, voc
pode perceber que o ferro, na ausncia de oxignio, deslocado para baixo em relao ao eixo horizontal do heme
(A). Quando o oxignio se liga a esse ferro, ocorre um deslocamento: o ferro puxado para cima da molcula
de heme, puxando consigo a histidina F8 a que est ligado (B). Observe a distncia entre a linha pontilhada e a
histidina em (B) Esse movimento provoca mudanas na estrutura da hemoglobina de tal ordem que fazem com
que o prximo oxignio se ligue mais facilmente, em um sistema de ligao cooperativa ou alostrica.

Para voc entender essa imagem, vai precisar de um pouquinho


de viso espacial. Imagine que voc esteja olhando a molcula de heme
lateralmente (como se voc colocasse uma folha de papel horizontalmente
na altura dos seus olhos), e no frontalmente (como voc olha a folha de
papel normalmente). Nesse tipo de viso, possvel perceber como o ferro do
heme est deslocado para baixo em relao ao plano horizontal da molcula.

C E D E R J 115

Bioqumica l | Protenas 6: protenas globulares a maioria delas

Esse ferro o mesmo que est ligado histidina 8 de uma das hlices da
hemoglobina, a hlice F (por isso, chamamos a histidina de F8).
Quando o oxignio se liga ao ferro, esse ferro puxado pelo
oxignio e acaba puxando o resduo de histidina junto, aproximando
a protena toda do heme e do oxignio. Como conseqncia, toda
a protena sofre um rearranjo e fica mais esticada. Nessa nova
conformao, os demais oxignios podem se ligar com mais facilidade
aos outros grupamentos heme da hemoglobina.

!
Resumindo: quando o primeiro oxignio se liga hemoglobina, muda
de tal forma a estrutura da protena que ela passa a se ligar melhor aos
demais oxignios.

Mas, como voc j aprendeu, a hemoglobina no liga apenas o


oxignio, mas tambm outras molculas, como o monxido de carbono
(CO), o dixido de carbono (CO2) e, surpreenda-se, prtons (H+). Veja
isso aps fazer a Atividade 2!
ATIVIDADE
3

3. Hemoglobina, mioglobina e suas particularidades


Como voc viu at agora, no seu corpo h duas protenas capazes de se
ligar ao oxignio: a mioglobina e a hemoglobina. Essas duas protenas
possuem um grupamento heme em suas estruturas, o que atribui a elas
a capacidade para realizar tal funo.
Embora tenham o mesmo grupamento prosttico e uma seqncia primria
bastante similar, a mioglobina uma protena pequena, e a hemoglobina,
uma protena considerada grande.
a. A que se deve essa diferena entre as duas molculas? Qual a
particularidade do arranjo espacial da hemoglobina em relao
mioglobina?
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b. A estrutura da hemoglobina faz com que a ligao do oxignio a
essa protena tenha uma caracterstica que no pode estar presente na
mioglobina: a ligao cooperativa. Explique esse tipo de ligao, justificando
a afirmativa anterior.
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116 C E D E R J

a. A diferena entre os tamanhos da mioglobina e da hemoglobina,


embora as seqncias delas sejam parecidas, est no fato de que a
mioglobina tem uma seqncia primria semelhante seqncia de
cada subunidade da hemoglobina. A hemoglobina uma protena
composta por quatro subunidades, que se organizam espacialmente
formando um tetrmero. Em outras palavras, a hemoglobina
uma protena que possui estrutura quaternria, ao passo que a
mioglobina, por ser composta por uma nica unidade de uma cadeia
polipeptdica, apresenta apenas nvel de organizao tercirio.
b. A estrutura da hemoglobina acarreta diferenas na ligao do
oxignio a essa molcula em relao mioglobina. Enquanto cada
mioglobina capaz de ligar apenas um oxignio, cada hemoglobina
capaz de ligar quatro um em cada grupamento heme presente
em cada uma das quatro subunidades. A ligao do oxignio na
hemoglobina acontece de forma cooperativa. Quando o primeiro
oxignio se liga a uma das subunidades da protena, provoca uma
mudana na conformao da protena inteira. Isso porque o tomo
de ferro do centro do anel do heme, que era deslocado do plano
dessa molcula, puxado para o mesmo plano do resto do
grupamento heme. Como esse ferro est ligado a uma histidina da
protena, ele puxa tambm esse aminocido no seu deslocamento
e, por conseqncia, todo o resto da protena que est ligado a ele
(histidina). Essa mudana de conformao facilita o acesso de outra
molcula de oxignio ao heme de outra subunidade da mesma
hemoglobina, e a ligao desse gs favorecida. Esse processo
chamado ligao cooperativa e no pode acontecer na mioglobina,
porque ela s tem uma subunidade.

C E D E R J 117

16

MDULO 1

RESPOSTA COMENTADA

AULA

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Bioqumica l | Protenas 6: protenas globulares a maioria delas

Uma ligao no desejada a carbo-hemoglobina


Conforme voc j viu no incio desta aula, o heme capaz de ligar
o monxido de carbono (CO) com grande afinidade. Se a mioglobina
ou a hemoglobina se ligarem ao CO, elas deixaro de transportar o
oxignio, e o indivduo poder sofrer morte por asfixia.
Para voc ter uma idia, o heme livre liga CO com afinidade
20.000 vezes maior do que liga oxignio. Para nossa sorte, quando est
ligado hemoglobina, essa afinidade cai para 200 vezes. Mas como a
hemoglobina favorece a ligao com o oxignio?
Essa diferena pode ser entendida se olharmos mais de perto como
esses dois gases se ligam ao heme. Veja a Figura 16.4.

Figura 16.4: Ligao dos gases oxignio e monxido de carbono ao ferro


do heme. As barras laterais representam o restante da molcula de heme.
Repare que o espao requerido para cada ligao acontecer (representado
pelas setas) diferente.

A ligao do oxignio ao ferro do heme faz uma espcie de dobra.


Quando CO se liga ao heme, a ligao linear.
Perceba que, quando o CO se liga ao heme, ele precisa de um
espao diferente daquele que o oxignio precisa para se acomodar, j
que fica reto, e no dobrado.
Quando o heme est mergulhado na hemoglobina, devemos
lembrar que existem vrios aminocidos ao seu redor. Um deles a
histidina 64 (conhecida como histidina distal), que no se liga diretamente
ao ferro, mas fica prxima ao heme, formando uma espcie de telhado
sobre o tomo de ferro desse grupo.
Isso tem implicaes muito importantes, pois como a ligao do
CO necessita exatamente do espao que a histidina restringe para que a
molcula de monxido de carbono se acomode, a presena da histidina
distal (que forma esse telhado) dificulta a ligao.
O mesmo no acontece quando oxignio se liga a esta molcula,
pois, conforme vimos, ele se liga formando uma dobra, e a o telhado
(histidina 64) no atrapalha. Tal fato explica por que o heme, quando
ligado hemoglobina, perde tanta afinidade pelo CO (Figura 16.5). Alis,
o processo que acabamos de descrever tambm se aplica mioglobina.
118 C E D E R J

MDULO 1

16
AULA

Histidina distal
Telhado
formado pela
histidina distal

Histidina distal
Telhado
formado pela
histidina distal

Figura 16.5: Importncia da histidina distal. Esse


aminocido dificulta a ligao do monxido de
carbono (CO), um gs txico, s protenas ligadoras
de oxignio, como a hemoglobina e a mioglobina.
A maior afinidade do heme pelo CO, em relao ao
oxignio, cai de 20.000 vezes para 200 por causa
do carter das ligaes e da presena da histidina
distal. A ligao do CO ao ferro do heme requer um
espao diferente daquele que a ligao do oxignio
requer, espao esse que no existe por causa da
presena da histidina distal.

Monxido de carbono, dixido de carbono... dois gases com


nomes to parecidos! Como pode um ser to txico para o organismo
e o outro no? Isso o que voc vai ver a seguir!

ATIVIDADE
4. Poluio e suas hemoglobinas: alguma relao?

No estado de So Paulo, houve muita


discusso e protesto quando o governo
implantou o sistema de rodzio para os
veculos, com o objetivo de minimizar o
caos no trnsito da cidade.
Funciona assim: de acordo com o final da
placa do veculo, h um dia da semana
em que ele no pode circular. Isso http://www.sxc.hu/photo/120674
diminui em cerca de 20% o nmero de
veculos circulantes por dia, e vale apenas para os dias de semana, quando
o trfego mais intenso.
Um dos benefcios associados reduo do nmero de veculos circulantes
na cidade foi a reduo da emisso de monxido de carbono (CO), produto
da queima de combustvel nos motores dos veculos.

C E D E R J 119

Bioqumica l | Protenas 6: protenas globulares a maioria delas

a. Por que o monxido de carbono um gs to txico ao nosso


organismo?
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b. Que caracterstica molecular do nosso organismo minimiza as
possibilidades de intoxicao por inalao de CO? Explique o mecanismo
molecular envolvido nessa estratgia.
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RESPOSTA COMENTADA

No novidade para ningum que a poluio um problema


de propores mundiais e que qualquer medida para reduzi-la
bem-vinda.
Em So Paulo, adotou-se o rodzio para minimizar problemas de
trnsito e, como conseqncia, minimizou-se tambm a emisso de
gases txicos para a atmosfera. O uso de gs natural veicular como
combustvel (no s em So Paulo, mas em diversos estados) outra
medida que est sendo incentivada pelo governo, por exemplo com
reduo do valor de impostos pagos pelo proprietrio do veculo.
O monxido de carbono, emitido a partir da queima de combustveis,
como a gasolina no motor dos veculos, bastante txico para o
nosso organismo e pode levar um indivduo morte. (a) Isso porque
a hemoglobina, protena que transporta oxignio no nosso sangue,
tem muito mais afinidade pelo CO do que pelo oxignio. Quando
uma molcula de monxido de carbono se liga a uma hemoglobina,
ele no se desgruda, impedindo que aquela hemoglobina seja capaz
de transportar oxignio. Dependendo da quantidade de CO que
inalamos, comprometemos mais hemoglobinas e, por conseqncia,
ficamos sem oxignio em tecidos importantes, como o crebro.
(b) Uma caracterstica molecular do nosso organismo que ajuda a
minimizar a possibilidade de intoxicao por CO que ele dificulta
a ligao deste gs hemoglobina. Essa caracterstica dada pelo
posicionamento de uma histidina em relao ao grupamento heme,
onde esse gs (e o oxignio) se liga. A histidina restringe o espao

120 C E D E R J

MDULO 1

16
AULA

disponvel para posicionamento do CO, que possui uma estrutura


linear, a qual ocupa mais espao do que o oxignio, que possui
uma estrutura com uma inclinao que reduz o espao necessrio
para que ele se ligue hemoglobina. A histidina funciona como
uma espcie de telhado, que dificulta bastante a ligao do
CO, minimizando a chance de este gs se ligar hemoglobina,
inutilizando-a.

Hemoglobina e gs carbnico uma ligao diferente!


As nossas clulas produzem CO2 como resultado do metabolismo.
Este CO2 pode seguir dois destinos no nosso organismo: participar do
sistema de tamponamento do sangue ou ser expelido na expirao.
Na Aula 7, voc viu que o sangue tamponado por um sistema
que envolve gs carbnico e bicarbonato.
Pela ao de uma enzima que est dentro das hemcias, a
anidrase carbnica, parte do CO2 gerado pelo nosso metabolismo
transformado em bicarbonato (HCO3-) :
CO2 +

H2O

anidrase carbnica

HCO3- +

H+

Os H+ gerados por essa reao so transportados pela hemoglobina


como parte do Efeito Bohr, do qual falaremos mais adiante. O restante
do CO2 que no transformado em bicarbonato pela anidrase carbnica
, ento, transportado pela hemoglobina at os pulmes, de onde ser
mandado para fora do corpo.
O transporte do CO2 pela hemoglobina acontece pela ligao
deste gs s

AMINAS TERMINAIS

da hemoglobina. Quando essa ligao

acontece, a afinidade da protena pelo oxignio diminui. por isso


que, nos tecidos, o oxignio liberado e o sangue retorna ao pulmo
carregando gs carbnico.

AMINAS TERMINAIS
Lembre-se de que
todas as protenas
possuem um
grupamento dito
amino terminal
(NH2) e outro dito
carboxi-terminal
(COOH). O amino
terminal o grupo
amino do primeiro
aminocido da
protena; o carboxi,
o grupo carboxil do
ltimo.

C E D E R J 121

Bioqumica l | Protenas 6: protenas globulares a maioria delas

Substncias que influenciam a ligao de oxignio na


hemoglobina
Existem mecanismos que modulam a afinidade da hemoglobina
pelo oxignio, como a concentrao de CO2, o pH do sangue e um
composto chamado 2,3 bifosfoglicerato (BPG). Esses mecanismos
so adaptaes do organismo para facilitar a liberao do oxignio
para tecidos que estejam precisando muito deste gs para exercer suas
atividades.
A ligao do oxignio hemoglobina depende do pH. Quanto
mais cido o pH, mais facilmente o oxignio se desliga da hemoglobina.
Da mesma forma, se a quantidade de CO2 aumenta, diminui a afinidade
da hemoglobina pelo oxignio.
Esses fatos tm grande relevncia quando lembramos de algumas
situaes metablicas, como, por exemplo, o msculo em contrao.
Nessa situao, a quantidade de CO2 e cidos muito alta,
devido intensa atividade realizada pela clula muscular. O baixo pH,
promovido pela liberao de cidos vindos da atividade muscular, e a
alta concentrao de CO2 fazem com que a hemoglobina, prxima aos
tecidos, libere o oxignio. Em outras palavras, perto dos msculos em
atividade, a hemoglobina tem a sua afinidade pelo oxignio diminuda
e libera esse gs para o tecido.
Na ausncia do oxignio, a hemoglobina pode, perto do msculo,
associar-se ao CO2 e aos prtons que foram produzidos pela atividade
muscular, indo pela corrente sangnea em direo aos pulmes.
Nos pulmes saturados de oxignio, ocorre o contrrio. O H+ e
o CO2, vindos dos tecidos ligados hemoglobina, so liberados para a
entrada de oxignio na molcula. Veja o esquema a seguir (Figura 16.6),
que representa este mecanismo do Efeito Bohr, descoberto em 1904 por
Christian Bohr:

122 C E D E R J

MDULO 1

16
AULA

Sangue
Pulmes
Oxignio
vindo do ar
H+

CO2

O2
O2

Hb
Hb O2

H+ Hb CO2

1
Hb

H+
H+
O2

H+

cidos
originados
pela contrao
muscular

H+
CO2

CO2
CO2

CO2 produto
do metabolismo

Msculos

Figura 16.6: Efeito Bohr. Quando o sangue com hemoglobina ligada ao oxignio
(1) se aproxima do msculo em intensa atividade, a grande quantidade de prtons
(provenientes dos cidos gerados pela contrao muscular) e de CO2 (produto do
metabolismo destas clulas) faz com que essa protena se desligue do oxignio,
fornecendo esse gs ao tecido muscular. Ao se desligar do oxignio, a hemoglobina
imediatamente se associa a prtons e ao CO2 e vai pela circulao at os pulmes.
Nos pulmes, acontece o inverso. A grande quantidade de oxignio faz com que a
hemoglobina libere o CO2 e os prtons (2) para esse rgo e se ligue novamente ao
oxignio, recomeando o ciclo.

Esse mecanismo muito importante, pois as clulas musculares


necessitam de grande quantidade de oxignio quando esto em intensa
atividade. A capacidade de modular a afinidade da hemoglobina chave
para determinadas situaes fisiolgicas, como essa que acabamos de
descrever.

!
Ateno!
importante voc ter em mente que todo o transporte de gases realizado
pela hemoglobina acontece no sangue, onde esta protena se encontra
dentro das hemcias. Na verdade, a hemoglobina no entra em contato
direto nem com o msculo, o pulmo ou qualquer outro tecido. Quem entra
em contato com estes tecidos e rgos o sangue! Os gases atravessam a
parede dos vasos sanguneos, entram na hemcia e se ligam protena que
estamos estudando!

C E D E R J 123

Bioqumica l | Protenas 6: protenas globulares a maioria delas

Um outro achado curioso a respeito da ligao do oxignio


hemoglobina foi a descoberta feita por Reinhold Benesch e Ruth
Benesch em 1967, do 2,3 bifosfoglicerato (BPG). Essa uma molcula
que est presente dentro das hemcias e capaz de alterar a afinidade
da hemoglobina pelo oxignio.
Essa descoberta foi importante, pois explicou por que a afinidade
da hemoglobina pelo oxignio, em condies experimentais, era maior
do que a afinidade da hemoglobina pelo oxignio na hemcia.
Esses pesquisadores imaginavam que deveria haver algum mecanismo
capaz de influenciar a afinidade da hemoglobina pelo oxignio dentro da
clula, um modulador dessa afinidade da hemoglobina. Eles acabaram
descobrindo que esse modulador o BPG, que se liga hemoglobina e
diminui a afinidade dela pelo oxignio em torno de 26 vezes.
Assim, foi elucidado um importante mecanismo que possibilita
hemoglobina desligar-se do oxignio e entreg-lo aos tecidos. A atuao
do BPG como modulador da afinidade da hemoglobina pelo O2 explica,
por exemplo, como a me pode passar oxignio para seu filho (para saber
mais sobre esse assunto, leia o boxe De me para filho!).

De me para filho!
Voc j se perguntou como se d a transferncia de oxignio entre a me
e o feto?
Imagine que o feto deva receber oxignio vindo da me. Para que isso ocorra
de forma eficiente, necessrio que a hemoglobina da me se desligue do
oxignio e o entregue para a hemoglobina do feto. Se as duas hemoglobinas
forem idnticas, essa transferncia no se processa de forma eficiente.
necessrio que elas apresentem diferentes afinidades pelo oxignio para que
a entrega e a recepo do gs sejam favorecidas. E isto o que ocorre.
Os fetos apresentam um outro tipo de hemoglobina, chamada hemoglobina
fetal (hemoglobina F), que possui maior afinidade pelo oxignio. Essas duas
formas de hemoglobina, a fetal e a no fetal (tambm conhecida como
hemoglobina A), so ditas isoformas, j que so duas formas da mesma
protena, no caso a hemoglobina.
O que faz a hemoglobina fetal ter maior afinidade pelo oxignio que a
hemoglobina no fetal? a afinidade pelo BPG que, na F, bem menor do
que na A.
Dessa forma, o oxignio se liga hemoglobina F com mais afinidade do
que hemoglobina A, j que o BPG diminui, no caso da A, a afinidade pelo
oxignio.

124 C E D E R J

MDULO 1
AULA

16

CONCLUSO
Muitas coisas j se sabe acerca da hemoglobina e da mioglobina.
O mais importante que o conhecimento das estruturas atmicas destas
protenas, em vrios estados de ocupao (ligadas ao oxignio, ligadas ao
CO, ligadas ao BPG etc.), permitiu que se conhecessem os aminocidos
envolvidos nessas ligaes. Estas informaes, quando combinadas aos
estudos em laboratrio, realizados em tubo de ensaio ou observaes
feitas nas clulas, permitiram estabelecer a questo mais relevante dentro
da Bioqumica moderna de protenas: conhecer como a estrutura de uma
protena determina a sua funo.

ATIVIDADE FINAL
4

O que h entre inspirar e expirar?


Em um exerccio aerbico, a participao do oxignio nas reaes do

Fonte: www.sxc.hu/photo/747641

organismo para obteno de energia fundamental.


In A capacidade de usar oxignio
Veja online, 27 dezembro de 2006

Pessoas que desejam emagrecer geralmente


optam por associar uma dieta com restrio
h

/
oto

u/p
c.h
.sx 0
w
5
ww 628
7
te:

Fo

calrica execuo de exerccios fsicos


aerbicos, como corridas, caminhadas,
pedaladas. Esses exerccios tm esse nome

(aerbicos) porque aumentam o consumo de oxignio no corpo do indivduo.


O aumento do consumo de oxignio ocorre porque o organismo em alta atividade,
como no caso do exerccio, precisa gerar mais energia do que de costume, para
continuar o movimento. Isso acontece por causa da associao entre dois principais
eventos no organismo: a utilizao das reservas de gordura da pessoa, como fonte
de nutrientes, e o aumento do processo de respirao celular.
Esses dois eventos so associados porque, na quebra das gorduras, h formao
de dois compostos: o CO2 que expiramos e uma molcula chamada NADH,
fundamental para a gerao de ATP (energia) na respirao celular, a qual precisa
de oxignio para acontecer.
Uma outra forma de gerar energia que os nossos msculos podem realizar em um
momento de exerccio intenso a quebra incompleta da glicose (acar). Nesse
processo, outra molcula produzida: o cido ltico. Esse cido pode, como voc
aprendeu na Aula 5, sofrer dissociao. Veja a reao:
C E D E R J 125

Bioqumica l | Protenas 6: protenas globulares a maioria delas

Assim, durante o exerccio fsico, dois processos diferentes podem acontecer nos
nossos msculos, e os produtos desses processos so uma grande quantidade de
CO2 e de lactato (e H+) no organismo.
Como esses dois compostos influenciam o transporte do oxignio dos pulmes
para o msculo, realizado pela hemoglobina? Mencione em sua resposta o que
acontece com essa protena quando ela est prxima aos pulmes e quando ela
est prxima ao msculo.
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RESPOSTA COMENTADA

Como voc j aprendeu, o transporte de oxignio no corpo se d pela


hemoglobina, que carrega esse gs ligado aos seus grupamentos heme
dos pulmes para os outros tecidos, incluindo os msculos.
Quando essa protena (com oxignio) se aproxima do msculo, a alta
concentrao de CO2 nesse tecido diminui a afinidade da hemoglobina
pelo oxignio (O2 ). A reduo da afinidade que vai acabar levando
liberao do O2 provocada tambm pela presena de grandes
quantidades de cidos produzidos durante a atividade muscular.
A hemoglobina sensvel a variaes de pH e, quando esse diminui,
ela perde afinidade pelo oxignio. Conjuntamente, a alta concentrao
de CO2 e o pH mais baixo do tecido muscular em atividade provocam
o desligamento do oxignio da hemoglobina. Esse mecanismo modula
a afinidade da hemoglobina pelo O2, ou seja, faz com que ela solte
esse gs mais rapidamente em uma situao em que o msculo
esteja precisando muito dele para continuar realizando o movimento.
126 C E D E R J

MDULO 1

16

Ao se dissociar do oxignio, essa protena permite a associao do

AULA

gs carbnico em sua extremidade amino. Carregada com esse CO2 ,


a hemoglobina segue para os pulmes, onde a alta concentrao
de oxignio far com que o CO2 se desligue dela e possa, ento, ser
expelido do nosso corpo pela expirao. Esse processo conhecido
como Efeito Bohr, por causa do pesquisador que o desvendou!

RESUMO

As protenas globulares so aquelas que apresentam um formato arredondado.


Essas protenas podem ter papis fundamentais na homeostase de um organismo,
como o caso da hemoglobina e da mioglobina.
Essas duas protenas participam do transporte e armazenamento de oxignio
no organismo a hemoglobina no sangue e a mioglobina nos msculos. Uma
particularidade dessas duas molculas que elas possuem um grupamento
prosttico, o heme.
O heme uma molcula que possui um tomo de ferro no centro do seu anel,
que o que possibilita a interao com o oxignio. Ele preso s protenas pela
ligao do ferro a uma histidina.
A mioglobina um monmero, que contm apenas uma molcula de heme e,
portanto, liga apenas um oxignio de cada vez. J a hemoglobina constituda
de quatro cadeias polipeptdicas, cada uma com um heme ligado; por isso, ela
capaz de ligar quatro oxignios de uma vez.
Quando o primeiro oxignio se liga hemoglobina, ele facilita a ligao dos
prximos, o que faz com que a hemoglobina seja chamada protena alostrica.
A ligao com o oxignio favorecida pela estrutura da protena, em detrimento da
ligao com o CO (um gs txico), que tambm acontece via interao com o ferro.
O CO2, produto do nosso metabolismo, s pode ser ligado pela hemoglobina;
parte dele utilizada no sistema tampo do sangue. Isso importante porque
tanto o pH do sangue quanto a concentrao do CO2 influenciam a ligao do O2
hemoglobina em um mecanismo chamado Efeito Bohr. O restante do CO2 se liga
s aminas terminais da protena e levado at os pulmes para ser expelido.
Outra molcula capaz de alterar a afinidade da hemoglobina pelo oxignio o BPG
que, quando se liga hemoglobina, diminui a afinidade dela pelo oxignio.

C E D E R J 127

Bioqumica l | Protenas 6: protenas globulares a maioria delas

INFORMAES SOBRE A PRXIMA AULA


J ouviu falar em Doena da Vaca Louca? E em Mal de Alzheimer? No sabe muitos
detalhes sobre essas duas patologias? Na prxima aula, voc vai aprender!

128 C E D E R J

AULA

Quando as protenas
se tornam mais... parte I:
os agregados
supramoleculares

17
Meta da aula

objetivos

Apresentar a formao de estruturas


supramoleculares: o que so protenas
amiloidognicas e que conseqncias sua
formao pode trazer para um indivduo.

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de


caracterizar as fibras amiloidognicas:
1

na doena da Vaca Louca;

no mal de Alzheimer.

Pr-requisito
Para acompanhar melhor esta aula, interessante que voc reveja,
na Aula 13, as interaes moleculares que mantm a estrutura
terciria de uma protena.

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte I:


os agregados supramoleculares

CANAD CONFIRMA NOVO CASO DE VACA LOUCA


Autoridades canadenses

(...), aps o aparecimento do

confirmaram hoje a presena de

primeiro caso de vaca louca.

um animal infectado com mal

(...) Na indstria de carne

da vaca louca em uma fazenda

prensada canadense, [as] perdas

da Provncia de Alberta (oeste

com exportaes j chegam a

do pas). (...) O resultado pode

US$ 5,7 bilhes.

ser uma dor de cabea a mais

Extrado de:

para os fazendeiros canadenses

http://

que j foram afetados depois

www1.folha.uol.com.br/folha/

que [diversos pases] baniram as

dinheiro/ult91u104518.shtml

importaes de gado do Canad

A reportagem que voc acabou de ver real; foi retirada da pgina da Folha
de So Paulo, em meio a um nmero enorme de outras matrias sobre este
assunto to importante na atualidade: o Mal da Vaca Louca (veja o boxe a
seguir para saber como acessar essa e outras reportagens).
Por que comear a aula com essa matria? Para voc ter uma idia de quanto
o que voc vai aprender hoje relevante para o mundo todo, e no apenas
para a sua formao em Bioqumica.

Contextualizando a minha aula


Para voc saber mais sobre um dos males relacionados formao de
agregados supramoleculares que mostramos no incio desta aula, temos
uma boa sugesto: visite a pgina da BBC Brasil (http://www.bbc.co.uk/
portuguese/) e digite na barra de busca que fica no canto superior direito
MAL DA VACA LOUCA. Aparecero diversas matrias, e apenas um clique
pode proporcionar a voc uma contextualizao mais abrangente sobre o
tema da aula de hoje.
Se quiser voc pode navegar livremente pelos contedos relacionados
Biologia em geral, clique em Cincia & Sade, o segundo link do canto
esquerdo da pgina inicial da BBC Brasil. L voc encontrar muitas
informaes interessantes, por exemplo, sobre avanos da medicina, mudanas
climticas etc. Divirta-se!

130 C E D E R J

MDULO 1
AULA

17

AS PROTENAS AMILOIDOGNICAS
Voc j estudou vrios aspectos sobre a estrutura das protenas,
desde sua estrutura primria, representada pela seqncia de aminocidos,
at aspectos relacionados organizao destes aminocidos no espao
que d origem estrutura secundria e terciria das protenas. Na Aula
14, voc viu como as protenas se dobram e se montam na sua estrutura
final, que aquela em que elas so capazes de executar sua funo.
No caso das protenas fibrosas, voc aprendeu que uma grande
resistncia pode ser adquirida quando, por exemplo, vrias hlices se
enovelam umas sobre as outras, como no caso do colgeno.
Agora, vamos conhecer um novo aspecto relacionado ao estudo
das protenas; ele um pouco mais sombrio do que aquele que vimos
at ento. Trata-se das doenas amiloidognicas e como certas protenas
podem caus-las.
Mas... que doenas so essas? No incio desta aula, mencionamos
o Mal da Vaca Louca; certamente voc tambm j ouviu falar do Mal
de Alzheimer e do Mal de Parkinson. Todos esses males fazem parte
de uma classe de doenas ocasionadas pelo mau enovelamento de uma
determinada protena, e so tambm chamadas amiloidoses.
Este nome, amiloidose, lembrou-lhe de amido? De fato, os
primeiros estudos feitos com algumas das protenas envolvidas nessas
doenas mostraram a presena de depsitos fibrilares presentes em alguns
tecidos ou rgos (Figura 17.1) que, por serem corados por reagentes
com iodo, imaginou-se serem constitudos por AMIDO. Posteriormente, os

AMIDO

cientistas descobriram que esses depsitos fibrilares no eram de amido,

Um acar que
sintetizado como
reserva de nutriente
nos vegetais. Existe
em grande quantidade
na batata, por
exemplo.

mas sim de protenas. O nome amiloidose, no entanto, permaneceu.

Figura 17.1: Fibra amilide.


A agregao de determinadas
protenas em forma de fibra
pde ser visualizada graas
colorao que essas estruturas
supramoleculares assumiam
na presena de iodo, a mesma
substncia utilizada para
visualizar o amido produzido
como reserva nutritiva pelos
vegetais. Por essa caracterstica
em comum, os agregados foram
batizados de fibras amilides.

C E D E R J 131

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte I:


os agregados supramoleculares

Mas, afinal, o que h de especial com este grupo de doenas?


A maioria das doenas existentes provocada por um agente
causador de doena (agente patognico). Desse modo, a pneumonia
causada por uma bactria conhecida como Pneumococcos pneumoniae;
a doena de Chagas causada por um protozorio conhecido como
Trypanossoma cruzi; o resfriado causado por um vrus chamado
rinovrus, e assim por diante. Enfim, a grande maioria das doenas,
principalmente as contagiosas, causada por um agente, seja uma
bactria, um protozorio ou um vrus.
Esses agentes possuem material gentico na forma de DNA ou
RNA. Eles se reproduzem no organismo hospedeiro graas replicao do
seu material gentico, conforme voc ver na disciplina de Gentica.
E no caso das doenas amiloidognicas? Quem o agente
responsvel?
Conforme j mencionamos, essas doenas so causadas por
protenas; o que no dissemos ainda que as doenas acontecem quando
essas protenas adquirem uma conformao alterada, formam agregados
e depsitos fibrilares que causam danos aos tecidos e rgos onde se
acumulam. Veja a Figura 17.2:

Protena em conformao
incorreta

Agregados/fibrilas

Depsitos em tecidos e
rgos especficos

Figura 17.2: Formao de agregados


proticos e suas conseqncias. Ao
assumir uma conformao incorreta,
uma protena pode sofrer o processo
de agregao, formando agregados
proticos, como as fibras amilides.
O acmulo dessas fibras em tecidos
especficos acarreta perda da funo do
tecido ou rgo que, em alguns casos,
leva o indivduo morte.

132 C E D E R J

Perda de funo do rgo


ou tecido

Morte do indivduo

MDULO 1

17

Quando uma protena assume uma conformao incorreta (quer

AULA

seja durante o enovelamento ou posteriormente), deixa segmentos de


aminocidos apolares voltados para o lado de fora. H possibilidade de
que esses segmentos se associem uns com os outros, formando agregados
proticos ou fibras, conforme voc viu na Figura 17.2.
Mas por que isto ocorre?
A resposta tem relao com as propriedades dos aminocidos
apolares, que voc viu na Aula 8. Lembra que discutimos que os
aminocidos apolares ou hidrofbicos no interagem com a gua e
tendem a se esconder dentro da protena, ocupando seu miolo? Lembra
tambm que os aminocidos polares ou hidroflicos, por interagirem bem
com a gua, ficam mais voltados para o lado de fora da protena?
Pois ! Por mecanismos ainda no bem compreendidos, algumas
protenas no se enovelam direito, deixando de fora aminocidos apolares
que deveriam ficar escondidos no miolo da protena. Para esses
aminocidos no ficarem em contato com a gua, essas protenas fazem
contato umas com as outras, de modo a esconder esses aminocidos
da gua. Desta forma, aparecem fibras como aquelas vistas na Figura
17.1 e representadas na Figura 17.2.
Um dos aspectos mais surpreendentes dessas doenas, principalmente no que diz respeito s chamadas

ENCEFALOPATIAS ESPONGIFORMES

ENCEFALOPATIAS

TRANSMISSVEIS (e aqui se incluem a doena da Vaca Louca, que acomete as

ESPONGIFORMES

vacas, e um grupo de doenas que acomete o homem, dentre as quais uma

TRANSMISSVEIS

doena de nome estranho Creutzfeldt-Jakob), que elas so contagiosas.


, isso mesmo! Se uma protena que se enovela errado e forma fibrilas
amilides em um organismo, for introduzida num organismo saudvel,
pode levar este indivduo ao estado enfermo. E a est a surpresa, pois
possvel termos contgio sem haver um microorganismo ou um material
gentico envolvido. Apenas uma protena mal enovelada!

Esse o nome tcnico


do grupo de doenas
no qual se inclui
a Doena da Vaca
Louca. Essas doenas
(em latim = patia)
afetam uma regio
do crebro chamada
encfalo, fazendo com
que o tecido apresente
um aspecto esponjoso.

C E D E R J 133

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte I:


os agregados supramoleculares

E foi assim que a vaca ficou louca...

Voc no est
preocupada com essa
doena da Vaca Louca?
Claro que no, eu sou
um cachorro!

A doena da Vaca Louca j dizimou mais de 150.000 cabeas


de gado na Gr-Bretanha desde 1985, quando teve incio uma grande
epidemia desta doena. Ela causada pela agregao de uma protena
chamada prion ou PrP (prion protein).
A PrP uma protena encontrada na membrana das clulas, em
especial dos neurnios. A funo exata que ela exerce nos organismos
ainda desconhecida, mas sabe-se que aves, rpteis e mamferos a
possuem.
Sabe-se tambm que esta protena, quando presente na membrana,
possui um alto contedo de -hlices e um baixo contedo de folhas .
Nesta conformao no patognica, a protena do prion conhecida
como PrPC, onde C quer dizer celular.
Entretanto, por um mecanismo ainda no completamente
elucidado, esta protena sofre o que chamamos mudana conformacional,
isto , sua conformao muda. Tal mudana de conformao d origem
a uma protena PrP com alto contedo de folhas e um baixo contedo
de -hlices.

134 C E D E R J

MDULO 1

17

Nesta conformao, a protena do prion patognica, e conhecida

AULA

como PrPSC, onde SC quer dizer scrapie (em ingls, que significa que
se arranha, por esses animais passarem a se arranhar nas cercas de
arame farpado do lugar onde vivem). Como conseqncia da alterao
na estrutura, esta nova forma da protena apresenta grande propenso
em formar fibrilas, como as mostradas na Figura 17.1. Estas fibras se
acumulam no crebro, causando danos ao funcionamento deste tecido.
O crebro fica com aspecto esponjoso e, por isso, essa doena tambm
chamada encefalopatia espongiforme, que pode acometer no s bovinos
(encefalopatia espongiforme bovina), mas tambm humanos (veja mais
frente o boxe Maluco nada beleza). Por esse motivo, diversos pases da
Europa, nos ltimos anos, tm diminudo o consumo de carne de vaca.
Isso tem causado graves problemas em diversos pases exportadores
desse alimento, como o Canad, conforme voc viu no incio dessa aula.
A doena da Vaca Louca influencia desde de o cardpio das pessoas at
a poltica e as relaes comerciais internacionais.
E como comeou este tipo de doena?
O que os pesquisadores imaginam que as vacas adquiriram esta
doena a partir de ovelhas doentes. As ovelhas tambm desenvolvem um
tipo de encefalopatia espongiforme conhecida como scrapie (j que as
ovelhas tambm ficam se roando nas cercas quando doentes).
Especula-se que o contgio tenha iniciado devido ao fato de as
vacas, na Inglaterra, serem alimentadas uma rao enriquecida com uma
farinha preparada com vsceras de ovelhas. Ovelhas acometidas pelo
scrapie teriam sido utilizadas inadvertidamente no preparo da rao. As
vacas, ao comerem a rao contaminada, adquiriram a doena.
provvel que, neste ponto da aula, voc esteja se perguntando
qual o mecanismo molecular de transmisso desta doena, uma vez
que no h material gentico envolvido no processo. Vrios cientistas
tambm se fizeram essa pergunta e tentaram respond-la por meio de
experimentos.
Existem evidncias experimentais que indicam que as ovelhas
afetadas por scrapie possuem suas protenas do prion na conformao rica
em folhas , ou seja, a conformao patognica PrPSC. Esta conformao
alterada, ao entrar em contato com a protena celular PrPC presente no
crebro de vacas sadias, causaria uma mudana conformacional nesta
ltima, convertendo-a na forma PrPSC (Figura 17.3).

C E D E R J 135

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte I:


os agregados supramoleculares

PrPSC
PrPSC
C

PrP

Composio
da rao das
vacas

Figura 17.3: E foi assim que a vaca ficou louca! Os cientistas acreditam que
vacas normais (que sintetizavam prion PrPC) passaram a produzir a protena
prion na forma alterada (PrPSC) por causa da rao que ingeriam, rica em
vsceras de ovelhas que produziam prion scrapie. As duas protenas prion so
completamente diferentes na sua estrutura: a PrPC apresenta alto contedo
de -hlices, ao passo que a PrPSC apresenta muitas folhas .

Maluco nada beleza...


Existem quatro doenas raras que afetam os homens e que so causadas por
mudanas conformacionais na protena PrP, as quais podem ser desencadeadas,
por exemplo, pela ingesto da carne de animais acometidos por encefalopatia
espongiforme. Assim como nos animais, o sistema nervoso afetado.
Sintomas? Demncia, perda de memria, mudana de personalidade e
ocorrncia de alucinaes. O indivduo afetado passa a apresentar tambm
dificuldades para falar, disfunes de equilbrio e coordenao motora.
Indivduos acometidos por essas doenas podem morrer em semanas, no
mximo em poucos meses.
J se conhecem algumas mutaes na protena PrPC que favorecem sua
converso em scrapie. Esse j um passo importante na busca de estratgias
que possam evitar a morte de um indivduo por encefalopatia espongiforme.

A partir do estudo destas doenas, a Biologia moderna deparouse com um problema novo, at ento sem precedentes, que um grupo
de doenas transmissveis em que no h um patgeno convencional
como agente responsvel, mas sim uma simples protena. Ao sofrer
uma alterao de conformao, esta protena passa da forma celular e
inofensiva para a forma patognica e deletria. Voc j tinha imaginado
que uma estrutura to ingnua como uma protena poderia causar
tantos problemas?

136 C E D E R J

MDULO 1

17

Alis, se voc acha que os prions so as nicas protenas que

AULA

causam doenas neurodegenerativas... aguarde at ver o que vem depois


de voc realizar a Atividade 1!
ATIVIDADE
1

Foto: Wendy Domeni

1. Cada um com seu cada qual!

http://www.sxc.hu/photo/821526

Leia o trecho a seguir:


Comissria quer que UE investigue carne do Brasil
A comissria europia de Agricultura, Mariann Fischer Boel,
pediu que a Unio Europia (UE) realize uma investigao
efetiva e convincente sobre os padres sanitrios da carne
bovina que o Brasil exporta ao bloco, em resposta a crticas
feitas por uma organizao agrcola europia. (...) acreditase que parte dos envios (de carne do Brasil) procedem de
zonas restringidas devido febre aftosa.
Fonte: pgina da BBC Brasil, em http://www.bbc.co.uk/portuguese/
reporterbbc/story/2007/07/070710_carnebrasil_uerg.shtml

O trecho que voc acabou de ler mostra a preocupao dos importadores


com a qualidade da carne que ns exportamos. Isso porque, embora no
tenhamos um histrico da presena do Mal da Vaca Louca no nosso gado,
temos uma parte dos animais acometida pela febre aftosa.
A febre aftosa uma doena contagiosa, causada por um vrus. Provoca
aftas (ferimentos) na boca, lngua, narinas e, entre outros, nas patas dos
animais (da seu nome em ingls ser Foot and Mouth Disease Doena
do p e da boca, em portugus). Alm das aftas, ocorrem perda de apetite,
baba excessiva, tremores, ranger de dentes, tonturas etc.

C E D E R J 137

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte I:


os agregados supramoleculares

a. Diferencie as duas doenas de acordo com seus agentes causadores:


Agente causador
Doena da Vaca Louca
Febre Aftosa

b. Descreva o agente causador da Doena da Vaca Louca e como ele causa


a doena. Mencione em sua resposta:
- a localizao deste agente no animal;
- os nomes que esse agente recebe quando causa a doena e quando
no causa;
- como um animal fica doente;
- as diferenas entre as estruturas desse agente quando ele causa a doena
e quando ele no causa;
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__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
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__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
_________________________________________________________________
RESPOSTA COMENTADA

Embora a maior parte das atenes quanto s doenas que


acometem gado tenha se voltado para a Doena da Vaca Louca,
h diversas outras que tambm merecem ateno, inclusive a
Febre Aftosa. Diferentemente da Doena da Vaca Louca, que
causada por uma protena que se enovela de maneira incorreta
a protena prion , a febre aftosa causada por vrus; sobre eles,
alis, conversaremos na prxima aula.
O prion uma protena que existe nas membranas das clulas
nervosas, e no se sabe muito bem qual a sua funo. O que se
sabe que a estrutura dessa protena rica em -hlices e pobre
em folhas . Nessa conformao, ela no causa mal algum ao
animal e chamada de protena prion celular (PrPC). Por algum
motivo que os cientistas desconhecem at agora , essa protena
pode assumir uma outra conformao, que rica em folhas e
pobre em -hlices. Essa conformao anormal (PrPSC) capaz de
se agregar formando fibrilas que se acumulam no sistema nervoso
do animal e causam dano cerebral.

138 C E D E R J

MDULO 1

17
AULA

Um animal fica doente a partir do contgio por uma PrPSC, quando


esta entra em contato com a PrPC eis a Doena da Vaca Louca,
encefalopatia espongiforme transmissvel bovina, se voc preferir!

A DOENA DE ALZHEIMER
Diferentemente das encefalopatias espongiformes transmissveis,
que so bastante raras em humanos, a doena de Alzheimer afeta 25%
das pessoas com mais de 80 anos. Isto significa que uma em cada quatro
pessoas que atinge 80 anos vai adquirir a doena de ALZHEIMER. J
alarmante o nmero de pessoas com essa doena nos Estados Unidos.
Estima-se que mais de 5 milhes de pessoas estejam afetadas por esta
doena. Fique chocado: a cada 72 segundos, mais uma pessoa apresenta
Alzheimer nos EUA!
A doena de Alzheimer fatal e de curso lento. A pessoa acometida
pode ficar doente de 2 a 10, s vezes 15 anos. As funes cognitivas so
perdidas lentamente, tais como memria, raciocnio, fala, padro de
comportamento etc.
Como ocorre esta doena?
Cortes histolgicos (do tecido) do crebro de pessoas que faleceram
de Alzheimer (Figura 17.3) mostram a presena de placas que no
ocorrem nos crebros de pessoas que no tm a doena. Estas placas
so conhecidas como placas senis.
A presena destas placas no crebro atrapalha a transmisso do
impulso nervoso e, por conseqncia, o bom funcionamento do crebro.
Assim que aparecem os sintomas que voc viu anteriormente.
Nestas placas, encontramos fibras de um peptdeo conhecido como
amilide, a quem vem sendo atribuda a causa da doena de Alzheimer.
Mas... de onde que ele surge?
Os cientistas j conseguiram descobrir que o peptdeo amilide
derivado de uma protena maior chamada APP (do ingls amyloid
precursor protein protena precursora de amilide). Esta protena est

ALOIS ALZHEIMER
(1864-1915)
Alois Alzheimer,
mdico alemo, foi
o descobridor da
doena de Alzheimer,
que foi assim batizada
em sua homenagem.
Ele descobriu essa
doena em 1905,
quando uma paciente,
Sra. August D., deu
entrada no hospital
onde ele trabalhava,
apresentando quadro
de demncia, perda de
memria e alteraes
de comportamento.
Quando essa paciente
morreu, ele analisou
o tecido do crtex
cerebral dela e
descreveu a presena
de placas senis (que
voc ver o que
daqui a pouco).
Alzheimer morreu
em 1915, depois de
passar dois anos com
uma grande infeco
cardaca e renal, que
levou insuficincia
destes dois rgos.

presente na membrana de vrias clulas, inclusive na dos neurnios. Sua


funo precisa ainda incerta, mas ela parece estar relacionada com o
crescimento celular.

C E D E R J 139

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte I:


os agregados supramoleculares

PROTEASES
So enzimas que
quebram as protenas,
gerando fragmentos
menores das mesmas.

Pode acontecer de esta protena ser quebrada (clivada), por


exemplo, porque j alcanou o limite do seu tempo de vida. Essa
quebra da APP acontece pela ao de

PROTEASES

especficas, conhecidas

como secretases e . Essas secretases quebram a APP, gerando o peptdeo


amilide, que liberado da clula. Se ele for rapidamente metabolizado,
no h problemas; se no for, devido sua alta propenso em agregar,
forma fibras, como as que voc viu na Figura 17.1.
Figura 17.4: Placas senis no crebro de
pessoas acometidas pela doena de
Alzheimer. Estas placas so formadas
por agregados do peptdeo -amilide,
e prejudicam o bom funcionamento
do crebro. Nos primeiros estgios
da doena, a regio relacionada
formao de memria de curto prazo
especialmente afetada. por isso
que pessoas que sofrem de Alzheimer
tm dificuldade de se lembrar do que
fizeram recentemente. Com o avano
da doena, outras reas do crebro so
danificadas, incluindo as responsveis
pela fala e compreenso do que se escuta;
a memria de longo prazo tambm
afetada, e uma pessoa com Alzheimer
pode morrer sem conseguir reconhecer
pessoas prximas e queridas.

Alm das fibras, outra caracterstica nociva desse peptdeo ser


neurotxico, isto , causar a morte de clulas nervosas cultivadas em
laboratrio. Acredita-se que ele tambm cause a morte de neurnios no
organismo.

!
Embora tambm seja uma doena que ataque o sistema nervoso central, a
doena de Alzheimer no transmissvel, diferentemente das encefalopatias
espongiformes transmissveis.

Infelizmente, no h cura para o Alzheimer. Os cientistas esto


adotando algumas estratgias; mais promissora parece ser a descoberta
de inibidores para as secretases que geram o peptdeo amilide.
Os pesquisadores acreditam que, inibindo estas secretases, no haja
formao do peptdeo e, com isto, a doena no progrida.
Por enquanto, o mximo que temos disposio so alguns
medicamentos aprovados pela FDA (Food and Drug Association rgo
norte-americano que testa os medicamentos e os considera aptos ou no

140 C E D E R J

MDULO 1

17

para a comercializao), que atuam minimizando os sintomas da doena.

AULA

Esses medicamentos atuam basicamente em duas frentes:


1. minimizando distrbios de comportamento, como surtos de
agressividade ou de depresso, alucinaes, dentre outros. Nessa linha,

ANSIOLTICO

temos os antidepressivos, os ANSIOLTICOS e os antipsicticos (que evitam

Remdio
administrado
ao paciente que
tenha distrbio de
ansiedade, o que
costuma causar
grande agitao e
nervosismo.

os surtos e alucinaes);
2. tentando contornar disfunes cognitivas, como perda
de memria, incapacidade de prestar ateno em algo, dificuldade
de expresso (fala). Nessa direo, temos remdios que controlam
mensageiros qumicos que levam informaes de um neurnio a outro
(os neurotransmissores).
ATIVIDADE

2. Trovo Distante...
Trovo Distante por Pete
() eu estava deitado na cama assistindo televiso, mudando
de canal sem achar nada de interessante para assistir.
Trs dias antes, eu fiz 57 anos, e anotei no meu dirio:
Deus, como posso estar to velho! Isso parece ser
impossvel, embora eu venha me sentindo bastante
cansado...
Mudando de canal, me deparei com um programa
comeando, chamado Explorando o incio do aparecimento
da Doena de Alzheimer. O apresentador exibiu alguns dos
problemas que eu tinha comeado a experimentar: por
exemplo, no lembrar onde as coisas estavam na cozinha,
em que armrio ou gaveta eu as guardava.
Desliguei a televiso, respirei fundo algumas vezes, fechei
meus olhos, fui para o sof e deixei minha mente ficar
vazia. Tentei relaxar, no pensar que aquilo pudesse estar
acontecendo comigo; mas estava l, como o som de um
trovo distante, espreita no horizonte. Eu sabia que alguma
coisa estava errada, j sentia isso havia algum tempo (...).
Tentei visualizar meus parentes e minha vida com eles, o
crescimento da minha famlia... Era tudo confuso e vago (...).
Fonte: http://www.alz.org/living_with_alzheimers_8895.asp

C E D E R J 141

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte I:


os agregados supramoleculares

O que voc acabou de ler a traduo de um trecho de um depoimento


retirado da pgina da Associao Norte-americana de Alzheimer. Se
voc tivesse de explicar para Pete (o autor deste depoimento) o que
est acontecendo dentro do crebro dele para que esses sintomas to
desagradveis se manifestem, o que voc diria? Mencione em sua resposta
o agente causador da doena, como ele originado e que tipo de estruturas
forma no crebro do indivduo doente.
Que agente causa a doena?

Como esse agente originado?

Que tipo de estruturas so


formadas no crebro do
indivduo doente?

RESPOSTA COMENTADA

Provavelmente, seu sentimento em relao a esse depoimento


bastante parecido com o nosso comoo. A doena de Alzheimer
priva o indivduo das suas memrias, das lembranas dos familiares,
da capacidade de fazer julgamentos, compreender o que se fala ao
seu redor, dentre outros problemas.
Tudo isso acontece porque o crebro do indivduo danificado por
aglomerados de um peptdeo, o amilide.
O peptdeo amilide originado a partir da quebra de uma protena,
a protena APP, que existe nas membranas dos neurnios. Quando
essa protena clivada (por secretases), o peptdeo amilide
formado; esse peptdeo tem grande propenso a formar agregados,
e isso o que acontece. Formam-se fibrilas desse peptdeo, que se
acumulam no crebro e do origem, em estgios avanados da
doena, s placas senis, que so verdadeiros buracos no crebro
do paciente. As conseqncias so o comprometimento do bom
funcionamento de diversas partes do crebro, e os sintomas so os
que voc viu nesta aula e no incio desta resposta.

142 C E D E R J

MDULO 1
AULA

17

CONCLUSO
Ainda no existe tratamento para as doenas causadas pelos prion
ou pelo peptdeo amilide. Os cientistas tm procurado desenvolver
drogas que inibam a formao das fibrilas, visando, com isto, a impedir
a progresso das doenas.
Uma concluso que podemos tirar de tudo o que voc viu nesta
aula que estas doenas nos mostram a necessidade de conhecermos
muito bem a estrutura e o funcionamento das protenas. Desta forma,
possvel desenhar ou descobrir drogas capazes de impedir o avano
destas doenas fatais e enigmticas.

ATIVIDADE FINAL
1

Cada um na sua, mas com alguma coisa em comum...


Esta atividade est dividida em duas partes. importante que voc responda
parte I antes de ler a parte II. Vamos l?
Durante esta aula, voc aprendeu como surgem duas doenas importantes, muito
faladas na atualidade: a doena da Vaca Louca e o mal de Alzheimer.
Parte I:
Baseado em tudo o que estudou nesta aula, sua tarefa encontrar trs semelhanas
e duas diferenas entre a doena da Vaca Louca e o mal de Alzheimer.
Semelhanas:
1.

________________________________________
________________________________________

2.

________________________________________
________________________________________

3.

________________________________________
________________________________________

Diferenas:
1. __________________________________________
________________________________________
2. __________________________________________
________________________________________

C E D E R J 143

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte I:


os agregados supramoleculares

Parte II:
Independentemente de estarmos nos referindo doena da Vaca Louca ou ao mal
de Alzheimer, sabemos que essas patologias so causadas por protenas/peptdeos
que se agregam. A pergunta que desafiamos voc a responder : por que motivo
(relacionado distribuio de seus aminocidos) essas protenas se agregam?
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
RESPOSTA COMENTADA

Parte I:
Para responder a essa parte da atividade, voc pode ter pensado que
ambas as doenas:
- no so causadas por agentes que tenham material gentico e sejam
capazes de se replicar;
- so causadas por agentes de natureza protica;
- so causadas por agregao desses agentes;
- so causadas por molculas que existem no corpo em condies
normais, s que com outra estrutura;
- atingem um grande nmero de indivduos, independentemente da
espcie;
- atacam o sistema nervoso central;
- so doenas neurodegenerativas;
- no tm cura;
- levam morte.
Embora apresentem todas essas semelhanas, h diferenas
importantes entre elas:
- atingem organismos de espcies diferentes;
- uma causada por uma protena inteira que sofreu enovelamento
incorreto, ao passo que a outra causada por um peptdeo que
gerado pela quebra de uma protena, a APP;
- o Mal de Alzheimer no transmissvel, a Doena da Vaca Louca .
Se voc pensou algo que no esteja listado aqui, no deixe de procurar
seu tutor e mostrar sua resposta!
Parte II:
Se voc prestou bastante ateno no que dissemos no incio desta aula,
esta parte da atividade deve ter sido fcil de responder:

144 C E D E R J

MDULO 1

17

Independentemente de ser por enovelamento incorreto (no caso dos

AULA

PrPSC) ou por quebra da protena (no caso do peptdeo amilide),


acontece agregao porque os resduos de aminocidos apolares
esto expostos gua!
Em uma protena enovelada corretamente, os aminocidos apolares
esto confinados ao cerne (miolo) da protena, onde ficam protegidos
do contato com a gua, com a qual no so capazes de interagir.
Quando esses aminocidos, por qualquer motivo, so expostos a um
ambiente aquoso, eles tendem a formar agregados, a fim de esconder
os grupamentos apolares da gua. por isso que a protena prion SC e
o peptdeo amilide tm grande tendncia a formar agregados: para
evitar o contato dos seus aminocidos apolares com a gua!

RESUMO

Algumas protenas, quando sofrem enovelamento incorreto, podem formar


estruturas conhecidas como fibras amilides. Estas fibras tm caractersticas
particulares, como a capacidade de se agregar, formando os chamados agregados
supramoleculares. Dois desses agregados tm grande relevncia atualmente: os
que causam a doena da Vaca Louca e o que causa o mal de Alzheimer.
A doena da Vaca Louca (encefalopatia espongiforme bovina) causada por uma
protena conhecida como prion. A protena prion (PrP) est presente na membrana
de clulas, especialmente de neurnios, e no tem ainda funo bem conhecida. Em
condies normais, essa protena chamada de PrPC e constituinte do organismo;
em condies patolgicas, essa protena passa a ser chamada de PrPSC e se agrega
no tecido nervoso, causando danos.
O mais surpreendente acerca desta doena que ela transmissvel e pode afetar,
inclusive, seres humanos.
Uma outra doena causada por agregados supramoleculares e que afeta o crebro
o mal de Alzheimer. Esta doena acomete indivduos idosos, e seus sintomas so
perda de memria, da capacidade de falar e compreender; o Alzheimer no tem
cura, e o indivduo, aps alguns anos, morre.
Esta doena causada pela agregao do peptdeo amilide, que produto da
quebra da protena APP. A agregao leva formao de fibras amilides, que
danificam o tecido nervoso e levam aos sintomas que j mencionamos.

C E D E R J 145

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte I:


os agregados supramoleculares

Ainda no se conhece a cura para ambos os males. Os pesquisadores trabalham


para conhecer melhor a estrutura dessas protenas causadoras das doenas para
que possam desenvolver estratgias para bloquear a formao dos agregados.

INFORMAO SOBRE A PRXIMA AULA


Na prxima aula, voc ver como se forma mais um agregado supramolecular de
grande importncia para a Medicina no mundo todo: o vrus.
At l!

146 C E D E R J

AULA

Quando as protenas se
tornam mais... parte II:
os vrus

18
Meta da aula

objetivos

Apresentar a formao de mais uma


estrutura supramolecular composta de
protenas, o capsdeo dos vrus, e uma
introduo estrutura e replicao
destes patgenos.

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:


1

identificar os elementos que compem a estrutura


de um vrus;

caracterizar o capsdeo de um vrus;

identificar a importncia das clulas para o processo


de multiplicao de um vrus.

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte II:


os vrus

INTRODUO

Seguindo a linha do que voc viu no incio da aula passada, tambm sobre
a formao de agregados supramoleculares de protenas, leia a matria a
seguir:

50% DOS RFOS DO BRASIL PERDERAM


UM DOS PAIS PARA A AIDS
O dado faz parte de um

Em todo o mundo, a

estudo lanado pela entidade

OIT estima que 15 milhes de

que avalia o impacto da Aids

rfos com menos de 18 anos

sobre o mundo do trabalho.

perderam pelo menos um dos

Um dos problemas apon-

pais por causa da Aids. (...)

tados pela OIT o de que o

Extrado de:

crescente nmero de crianas

http://www.bbc.co.uk/portuguese

que crescem sem o apoio

/noticias/story/2004/07/

dos pais, que morreram por

040709_aidsebc.shtml

causa da Aids, tm a educao


prejudicada e chances menores
de conseguir um trabalho de
boa qualidade no futuro.

Chocante, no? por isso que dedicamos uma aula inteira para falar um

PATGENO
Agente causador de
doena.

pouco sobre a estrutura dos vrus e outra para voc acompanhar, por meio
de um estudo dirigido, como o processo de entrada deste

PATGENO

em

uma clula. Vamos l?

OS VRUS
Certamente, voc j ouviu falar em algumas das doenas a seguir:
AIDS (HIV)

Hepatites

Catapora

Herpes

Caxumba

Poliomielite

Dengue

148 C E D E R J

Rubola

Enterites (rotavrus)

Raiva

Febre amarela

Sarampo

Gripe (influenza)

Varola

MDULO 1

18

O que elas tm em comum? O fato de serem causadas pelo mesmo

AULA

tipo de patgeno o vrus. Mas... o que so os vrus e como eles podem


causar tantas doenas?
Os vrus so estruturas incapazes de se replicar por conta prpria.
Para se multiplicarem, eles precisam entrar em uma clula, chamada
clula hospedeira, que lhes fornecer tudo aquilo de que precisam para se
propagarem: as enzimas envolvidas no processo e os suprimentos energticos
para o seu acontecimento. Somente quando os vrus atingem o interior das
clulas que podem replicar seus genes e produzir uma numerosa prole.
Assim, a perpetuao dos vrus na natureza depende de sua
capacidade de infectar alguns tipos celulares.
Desde a sua entrada at o momento em que o vrus deixa a clula,
uma srie de eventos acontecem; esses eventos dependem do tipo de vrus
que est infectando e da clula que est sendo infectada. A combinao
entre esses dois quesitos que faz com que tenhamos uma quantidade
to grande de doenas causadas por vrus. Essa combinao, inclusive,
diretamente influenciada pela existncia de enorme quantidade de vrus
diferentes. Acha que estamos exagerando? Observe a Figura 18.1.
ds DNA
ss RNA

ds RNA

Picornaviridae

ss DNA

Reoviridae

Parvoviridae

Papovaviridae

Adenoviridae

Iridoviridae

RNA ss

Togaviridae

Retroviridae

Coronaviridae

Rhabdoviridae

Paramyxoviridae

Orthomyxoviridae

Bunyaviridae

Arenaviridae

ds DNA

Hespesviridae

Baculoviridae

Poxiviridae

Figura 18.1: Diversidade estrutural dos vrus. Os vrus podem apresentar, como material gentico, tanto DNA quanto
RNA, mas nunca os dois ao mesmo tempo. Ao contrrio do que acontece nos demais organismos, nos quais o genoma
sempre DNA, nos vrus os dois materiais genticos (DNA e RNA) podem compor o genoma e se apresentar em dupla fita
(ds) ou fita simples (ss). Voc pode ver exemplos de vrus que possuem cada tipo de genoma na parte superior da figura.
Como se no bastasse, ainda podemos ter vrus que levam ou no consigo uma parte da membrana da clula hospedeira
ao sair de dentro dela depois da replicao. Estes so os vrus envelopados.

C E D E R J 149

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte II:


os vrus

O que voc acabou de ver na figura definitivamente no foram


todos os vrus que existem, mas todos os tipos de vrus que existem.
Eles esto agrupados, nessa figura, de acordo com suas caractersticas
estruturais, que apresentam grande variao quanto ao tamanho, forma
e composio.
Eles so formados por um material gentico, que pode ser tanto
DNA ou RNA, em fita dupla ou simples. Este material gentico, chamado
genoma viral, o que carrega as informaes necessrias para que de um
vrus possam ser feitos muitos outros. No h vantagens especiais em ter
um ou outro tipo de genoma; a existncia de vrios tipos proporciona
aos vrus uma diversidade maior e, conseqentemente, maior dificuldade
de defesa para os organismos que eles infectam.
Quando um vrus entra em uma clula, ele faz com que toda a
clula trabalhe em funo da sua replicao em uma enorme prole viral.
o genoma do vrus que informa para a clula quantas cpias de cada
protena e de cada novo genoma devem ser sintetizadas para formar os
novos vrus.
Mas... protenas? isso mesmo: o genoma viral no a nica parte
da estrutura dos vrus. Existe uma estrutura composta por protena(s)
que protege esse genoma e permite que ele permanea longos perodos
de tempo fora de uma clula. Essa estrutura protica chamada
capsdeo.

Genoma viral
Glicoprotenas que
ficam na superfcie do
vrus e participam da
interao deste com a
clula hospedeira.
Envelope lipdico

Capsdeo protico

Figura 18.2: Representao de um corte da estrutura de um vrus envelopado.


O genoma viral fica confinado dentro do capsdeo protico. Esse capsdeo recoberto
por um envelope lipdico que o vrus ganha ao sair da clula em que se replicou.
Neste envelope, h glicoprotenas que orientaram a sada do vrus por uma regio
especfica da clula hospedeira e que vo participar da entrada do vrus em uma
outra clula.
150 C E D E R J

MDULO 1

18

O capsdeo protege o cido nuclico de possveis danos ou

AULA

degradao. So estruturas extremamente estveis enquanto os vrus se


encontram no meio extracelular. No entanto, ao entrarem em contato
com a clula hospedeira, os capsdeos virais devem se desestabilizar,
permitindo a exposio do genoma ao meio intracelular, onde ele ser
replicado, transcrito e traduzido (os mecanismos envolvidos nesta
mudana de estabilidade so o tema de nossa prxima aula).
O capsdeo protico do vrus pode ou no ser envolvido por uma
membrana lipdica, chamada envelope. Esse envelope , na verdade,
um pedao da membrana plasmtica da clula hospedeira, que o vrus
carrega consigo na hora em que vai sair da clula. Difcil de visualizar?
Veja a figura a seguir:

Novo vrus
Glicoprotenas

Interior
da clula

Figura 18.3: Vrus saindo de dentro da clula hospedeira, por brotamento. Na membrana
da clula, h glicoprotenas que foram sintetizadas a partir do genoma viral. Essas
glicoprotenas precisam estar na superfcie dos novos vrus, pois participam da infeco
de novas clulas. Os vrus recm-montados migram para uma parte da membrana da clula
onde esto essas glicoprotenas que foram sintetizadas e saem da clula por essa regio,
envolvidos por um pedao da membrana da clula o envelope lipdico.

O vrus que acabou de ser produzido no interior da clula


hospedeira ganha esse envelope na hora em que vai deixar essa
clula. Quando o vrus j est montado no interior da clula (genoma
viral dentro do capsdeo), ele se direciona para uma parte especfica
da membrana da clula.
Essa parte especfica da membrana por onde os vrus saem da
clula apresenta em sua superfcie GLICOPROTENAS codificadas pelo vrus

GLICOPROTENAS

(ou seja, que ele mandou a clula sintetizar), e so essas protenas

Protenas que
apresentam
carboidratos
(acares) ligados
sua estrutura.

que direcionam o vrus para sair da clula exatamente naquele ponto


da membrana dela.

C E D E R J 151

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte II:


os vrus

Resumindo, os vrus so compostos por um genoma englobado


por um capsdeo protico que pode estar envolvido por um envelope
lipdico (se o vrus for do tipo que sai da clula por brotamento).

Da formiga ao elefante!

BACTERIFAGO
Vrus que infecta
bactrias.

Os menores vrus conhecidos, os vrus satlites, possuem


dimetro de 18 nm, apresentando apenas um gene.
Estes vrus so to simples que s podem se replicar
caso infectem uma clula juntamente com outro vrus.
J outros vrus, como o BACTERIFAGO T4, os rabdovrus
(como o vrus da raiva) e os poxvrus (como o vrus da
varola), apresentam mais de 200 nm e uma complexa
estrutura genmica, que pode chegar, no caso dos
poxvrus, a mais de 200 genes.

Embora a Figura 18.1 tenha separado a diversidade viral de acordo


com o genoma desses patgenos, essa no a nica classificao de vrus
que podemos fazer. H outras; dentre elas a que leva em considerao
a estrutura do capsdeo do vrus. Sobre isso, voc aprender logo aps
realizar a Atvidade 1!

152 C E D E R J

MDULO 1
1

Foto: Josh Armstrong

1. Como um vrus?

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/296655

Quando vemos uma pessoa com os olhos vermelhos e irritados, possvel


que estejamos diante de algum com conjuntivite. A conjuntivite uma
irritao da conjuntiva, uma membrana que recobre o olho e a parte
interna da plpebra. Pode ser causada tanto por um vrus quanto por
uma bactria.
Imagine que a pessoa da foto tenha sua conjuntivite causada pelo seguinte
patgeno:
DNA

Citoplasma

Membrana
plasmtica

Ribossomos
Mesossoma

Parede celular

a. Voc diria que ela est com conjuntivite viral ou bacteriana?


( ) Viral
( ) Bacteriana
b. Diga uma estrutura que voc v nesta imagem e que poderia estar
presente tanto em um vrus quanto em uma bactria;
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C E D E R J 153

AULA

18

ATIVIDADE

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte II:


os vrus

c. Qual a estrutura cuja ausncia indica claramente que estamos diante


de um patgeno, e no de outro. Qual a composio dessa estrutura e
qual a sua funo?
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RESPOSTA COMENTADA

A pessoa da foto, definitivamente, est com uma conjuntivite


bacteriana. Isso porque, na imagem do agente causador da doena,
h estruturas que no pertencem composio de um vrus, como
voc acabou de estudar: parede celular, mesossoma, ribossomos
e citoplasma.
Um elemento que voc poderia, inicialmente, confundir o DNA.
Isso porque esse material gentico, encontrado em bactrias, pode
ser encontrado em alguns vrus tambm. Alm disso, na figura h
uma membrana plasmtica, o que tambm poderia t-lo deixado
em dvida afinal, alguns vrus podem ser compostos tambm
por um envelope lipdico, que nada mais do que um pedao da
membrana plasmtica da clula em que ele se replicou. No entanto,
as outras estruturas que acabamos de listar no pargrafo anterior
descartariam a possibilidade de estarmos diante de um vrus.
Da estrutura representada na imagem, outro elemento que nos faz
descartar a possibilidade de ser um vrus o fato de ele no ter
um capsdeo. O capsdeo uma estrutura composta por protenas
e que tem como funo abrigar o genoma viral em seu interior,
protegendo-o de degradao e possveis danos s informaes que
esse genoma contm.
Realizando esta atividade, voc acabou de identificar os elementos
que compem a estrutura de um vrus!

COMO SO OS CAPSDEOS VIRAIS?


A Figura 18.4 mostra imagens de vrios vrus obtidas por
microscopia eletrnica. O que voc observa em relao forma dos
capsdeos?

Figura 18.4: Imagens de diversos capsdeos virais obtidas por


microscopia eletrnica.

154 C E D E R J

MDULO 1

18

Repare que os capsdeos apresentam forma tubular ou esfrica.

AULA

De fato, vrios estudos mostram que os vrus de estrutura conhecida


apresentam capsdeos cujas protenas esto arranjadas simetricamente
de forma HELICOIDAL (os tubulares) ou ICOSADRICA (os esfricos).

HELICOIDAL

ICOSADRICO
Um arranjo em forma HELICOIDAL
nada mais do que um arranjo
em forma de hlice. J um arranjo
ICOSADRICO aquele que possui
a forma de uma figura geomtrica
tridimensional (poliedro) de 20
lados. Para voc visualizar um
icosaedro, veja o dado de 20 lados!
Fonte: http//www.sxc.hu/
photo/75105

Mas... como isso foi descoberto?


Na dcada de 1950, os estudos de Francis Crick e James Watson
(veja o boxe Mistrio resolvido a estrutura do DNA) contriburam
enormemente para a compreenso da estrutura dos vrus. Estes cientistas
propuseram que a forma dos capsdeos virais, seja de vrus que infectam
animais, seja dos que infectam vegetais ou, ainda, dos que infectam
bactrias, consistia em um poliedro regular. E de onde veio essa idia?
Tudo comeou quando eles pensaram que no possvel que um
cido nuclico de tamanho pequeno, como o do vrus, codifique uma
protena grande o bastante para envolv-lo e proteg-lo. Assim, o capsdeo
deve ser formado por muitas cpias de uma mesma protena ou de poucas
protenas diferentes (isso permite que os vrus se formem mesmo tendo
um genoma pequeno, ou seja, que no tem comprimento suficiente para
conter um grande nmero de genes).

Mistrio resolvido a estrutura do DNA


Francis Crick e James Watson so dois dos mais conhecidos cientistas da
Histria. Isso porque esses dois pesquisadores elucidaram um problema que
h muito era investigado sem sucesso: a estrutura do DNA. Foram eles que
propuseram a hiptese de que o DNA se organizava em uma hlice dupla,
com uma seqncia entrelaando-se na outra. Essa descoberta foi publicada,
em 1953, em uma das mais conceituadas revistas cientficas (Nature), em um
artigo que tinha apenas uma pgina, no mostrava nenhum experimento
feito por eles e somente discorria sobre a hiptese da dupla hlice, que estava
correta. Isso rendeu aos dois o prmio Nobel de Medicina em 1962. O que
poucas pessoas sabem que esse prmio, na verdade, foi dividido por trs.

C E D E R J 155

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte II:


os vrus

Havia um outro cientista, Maurice Wilkins, que comprovou que Watson e Crick
estavam certos, visualizando a estrutura do DNA por difrao de raios X.
A descoberta da estrutura simtrica dos vrus veio logo em seguida, mais
por influncia de Watson, que h alguns anos trabalhava com esse tipo de
patgeno.
Mais uma curiosidade sobre eles: a despeito de o prmio ser de Medicina,
nenhum deles mdico! Crick e Wilkins so fsicos e Watson zologo.
Se voc tiver um pouco de conhecimento de lngua inglesa e quiser saber
mais sobre o assunto e ver as fotos desses pesquisadores, s visitar a pgina
do prmio Nobel de 1962 em http://nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/
laureates/1962/index.html.

Uma particularidade importante da montagem do capsdeo que


as subunidades proticas devem se reconhecer com preciso e interagir
(por interaes no-covalentes, ou seja, pontes de hidrognio, interaes
hidrofbicas etc.). Afinal, o capsdeo tm de se montar espontaneamente
dentro da clula a partir de seus componentes individuais.
Subunidades idnticas arranjadas que se reconheam da mesma
maneira levam ocorrncia de estruturas de simetria, uma vez que
padres repetidos de partes idnticas levam a uma estrutura final
simtrica. Assim, os capsdeos virais consistem em estruturas formadas
por subunidades simetricamente arranjadas. Hoje sabemos que essas
estruturas simtricas so hlices ou poliedros.
Os vrus que apresentam simetria na forma de hlice so os de
forma tubular. A estrutura deles foi elucidada a partir de estudos com o
vrus do mosaico do tabaco (TMV um vrus que ataca essa planta de
grande interesse econmico) e, hoje em dia, sabe-se que a mesma para
vrus como o da raiva, por exemplo.
Os pesquisadores viram que vrias unidades de uma mesma
protena se organizavam ao redor do material gentico do vrus,
formando uma espcie de capa protetora, na forma de uma hlice bem
determinada, ou seja, com o mesmo comprimento e a mesma distncia
entre as voltas que a compem (Figura 18.5).

Figura 18.5: Representao


do capsdeo de um vrus que
apresenta simetria helicoidal.
Vrus cujo capsdeo seja formado
seguindo a simetria helicoidal
tem suas protenas de capsdeo
organizadas em forma de hlice,
cujo dimetro de todas as voltas
o mesmo, assim como a distncia
entre elas.

156 C E D E R J

MDULO 1

18

J sobre os vrus que apresentam simetria icosadrica...

AULA

O icosaedro um poliedro formado por vinte lados idnticos,


mais especificamente, vinte tringulos equilteros. O icosaedro, como
todos os objetos simtricos, pode ser subdividido em partes menores,
que no so mais simtricas, mas que guardam entre si uma relao de
simetria, sendo por isso chamadas de unidades assimtricas do icosaedro.
O nmero de unidades assimtricas presentes no icosaedro de sessenta,
uma vez que cada face triangular (1/20 do icosaedro) pode ser dividida
em trs partes simetricamente relacionadas (Figura 18.6).

(a)
Unidades assimtricas

Protenas que
podem compor
a unidade
assimtrica

(b)

Figura 18.6: Diviso da superfcie de um icosaedro em unidades assimtricas.


Um icosaedro possui 20 faces triangulares e (a) cada uma dessas faces
dividida em trs unidades assimtricas. Em (b), voc v essas trs protenas
(no caso dos vrus) simetricamente relacionadas e posicionadas em cada
face do icosaedro.

Como as protenas so estruturas assimtricas, o nmero mximo


de subunidades proticas presentes em um capsdeo viral icosadrico
deveria ser 60, nmero de unidades assimtricas do icosaedro. Entretanto,
um capsdeo formado por 60 subunidades de uma protena de 300
aminocidos teria uma cavidade interna com aproximadamente 80
, que poderia conter um cido nuclico de fita simples com apenas
3 kb. Pouqussimos vrus apresentam uma estrutura como essa. Como
exemplos, podemos citar os parvovrus, que possuem um capsdeo
formado por 60 cpias de uma protena de 520 aminocidos, cujo gene
ocupa 1/3 do genoma viral; ou o satlite do vrus da necrose do tabaco,
que possui 60 cpias de uma protena de 195 aminocidos mas no
auto-suficiente, ou seja, precisa infectar a clula hospedeira juntamente
com outro vrus, para poder se replicar.
A grande maioria dos vrus icosadricos apresenta nmero de
subunidades maior do que sessenta, mais especificamente, mltiplos deste
nmero, ou seja, mais de uma protena forma a unidade assimtrica do
icosaedro. Isso possibilitou a formao de capsdeos maiores, que podem
englobar genomas tambm maiores.
C E D E R J 157

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte II:


os vrus

A estrutura icosadrica para os capsdeos virais foi comprovada


por outro cientista, chamado Paul Kaesberg, tambm na dcada de 1950.
Foi esse cientista que refutou a idia de que alguns vrus eram esfricos
e, analisando estudos de microscopia com sombreamento, difrao de
raios X e microscopia eletrnica (Figura 18.7), props que os vrus
ditos esfricos, estudados at ento, na verdade eram icosadricos,
o que posteriormente se tornou evidente para todos os capsdeos proticos
dos vrus esfricos.

!
Dois princpios bsicos governam o arranjo das protenas nos capsdeos
virais:
1) o da economia gentica os vrus so formados por poucos tipos proticos
(o que faz com que um vrus que tenha poucos genes seja capaz de dirigir a
sntese de seu capsdeo);
2) o da especificidade as protenas virais apresentam alta capacidade de
reconhecimento umas das outras. Assim, as muitas unidades de uma mesma
protena viral, sintetizadas no citoplasma de uma clula, se reconhecem e
podem montar o capsdeo.

Figura 18.7: Microscopia eletrnica com


sombreamento, retirada do artigo publicado
por Paul Kaesberg (1956). Esta uma das
figuras do trabalho que mostra os resultados
dos experimentos feitos por Kaesberg e que
elucidaram a estrutura do capsdeo dos vrus
at ento ditos esfricos na verdade,
eles so icosadricos!

Talvez voc esteja se perguntando por que motivo estamos falando


tanto da estrutura do capsdeo dos vrus. Lembra que na aula passada voc
estudou a relao entre a estrutura e a funo da hemoglobina? Agora no
diferente: as protenas que compem o capsdeo de um vrus apresentam
uma estrutura que possibilita que elas se montem de maneira simtrica,
para compor essa capa que protege o genoma viral.
Ainda sobre relao entre estrutura e funo, importante
que voc tenha em mente que tambm h uma relao estreita entre
a estrutura do capsdeo e a funo que ele exerce. Veja uma pequena
introduo sobre esse assunto logo aps a Atividade 2!

158 C E D E R J

MDULO 1
2

2. Montando um quebra-cabea?
O capsdeo de um vrus, como voc deve ter descrito na Atividade 1, uma
estrutura formada por protenas, cuja funo proteger o genoma viral,
que fica abrigado em seu interior.
Quando o vrus infecta uma clula hospedeira, importante que esse
capsdeo rapidamente se desestabilize (se desmonte), liberando, no interior
da clula, o genoma viral, para que este possa ser replicado e novos vrus
possam ser sintetizados.
Considerando que o processo de replicao do genoma viral j tenha sido
concludo e que todas as protenas necessrias montagem do novo vrus
tenham sido sintetizadas, como que estas protenas se organizam para
montar os capsdeos dos novos vrus? Mencione em sua resposta as duas
possibilidades de montagem que voc estudou.
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RESPOSTA COMENTADA

To importante quanto o capsdeo ser capaz de se desmontar


rapidamente dentro da clula, para liberar o genoma viral para ser
replicado, que ele seja capaz de se re-montar espontaneamente
quando o processo de replicao terminar.
A estratgia selecionada para essa montagem acontecer espontnea e
eficientemente foi utilizar diversas cpias de uma mesma protena (ou
de poucas protenas) para compor esse capsdeo. Essas vrias cpias
de uma protena tm grande afinidade umas pelas outras e tendem
(no citoplasma) a se agregar. Essa agregao acontece de maneira
simtrica, e o tipo de simetria vai depender do tipo de vrus.
Alguns vrus organizam seu capsdeo em simetria helicoidal, ou seja,
formando uma hlice de protenas em torno do material gentico.
Esses so os vrus que apresentam formato tubular, como o caso
do vrus do mosaico do tabaco e o da raiva.
Outros vrus, antigamente chamados esfricos, apresentam simetria
icosadrica, ou seja, organizam suas unidades proticas de forma
que a estrutura final se assemelhe a um icosaedro (um poliedro de
20 lados). Exemplos desses vrus so o vrus da dengue, da AIDS, da
gripe (vrus influenza).

C E D E R J 159

AULA

18

ATIVIDADE

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte II:


os vrus

A relao entre a estrutura das protenas virais e a entrada


dos vrus nas clulas hospedeiras
A estrutura das protenas virais e as modificaes da estrutura
terciria que essas protenas podem sofrer (o que chamado flexibilidade
conformacional) permitem aos vrus reconhecer sua clula hospedeira.
A ligao dos vrus na clula hospedeira se d quando acontece a
interao das protenas do vrus com a superfcie celular. Essa interao
desencadeia uma srie de eventos que culminam com a entrada do vrus
na clula e com a exposio do genoma viral ao meio intracelular. Como
mencionamos no incio da aula, os mecanismos envolvidos neste processo
variam muito de vrus para vrus.
Na prxima aula, analisaremos o processo de entrada em uma
clula de uma importante famlia de vrus os picornavrus , da qual
fazem parte vrus de grande importncia mdica, como:
Poliovrus o vrus causador da poliomielite, uma doena que
acomete crianas, causando paralisia (tambm chamada de paralisia
infantil);
FMDV (Foot and Mouth Disease Virus) vrus causador da febre
aftosa que, como voc viu na aula anterior, uma doena que acomete
o gado;
Rinovrus o vrus causador do resfriado comum;
Vrus da hepatite A vrus que causa a hepatite A, doena que
ataca o fgado e compromete seu bom funcionamento.
Em seguida, voc entender as estratgias usadas pelos vrus
envelopados, aqueles que possuem uma membrana lipdica em volta de
seu capsdeo, para atingirem o interior de suas clulas hospedeiras. Para
isso, usaremos como exemplo o HIV, o vrus que causa a AIDS.
Faremos isso realizando um estudo dirigido; por isso, no h uma
atividade relacionada a essa ltima parte da aula.

CONCLUSO
Varola, dengue, raiva, poliomielite, sarampo, catapora, hepatite,
AIDS. Essas so s algumas das doenas causadas por vrus, e que ajudam
a justificar a necessidade de estudar e entender a estrutura desses parasitas
e os mecanismos pelos quais eles invadem uma clula no nosso corpo.
A compreenso dessa estrutura e desses mecanismos que nos possibilita
desenhar drogas que impeam o vrus de se multiplicar nos organismos.
160 C E D E R J

MDULO 1
AULA

Como os vrus se propagam?


Esta atividade longa e tem um grau de dificuldade um pouco mais alto uma
atividade-desafio! Voc gastar um tempo maior para realiz-la, mas os ganhos
que voc ter, ao tentar, sero valiosos. Boa sorte!
Imagine que Joo trabalha em um laboratrio que faz pesquisas com vrus
que matam as clulas aps se replicarem. Este laboratrio recebeu, em uma
semana do perodo de frias escolares, um grupo de alunos do
primeiro ano do Ensino Mdio, interessados em entender sobre
a multiplicao dos vrus.
Joo foi designado para fazer uma experincia com esses alunos.
Eis o que ele fez:
1. Separou quatro placas de petri especiais para cultura de
clulas. Duas dessas placas estavam com clulas cultivadas no
laboratrio (106 clulas por placa; grupo I) e duas estavam

MEIO DE CULTURA
Substncia que
contm os nutrientes
necessrios para
uma clula crescer
em cultura, ou seja,
em placas em um
laboratrio. Essa
substncia diluda
em gua para a
colocarmos em contato
com as clulas.

apenas com MEIO DE CULTURA (grupo II).

Grupo I com clulas


Placas com clulas cultivadas no
laboratrio, em meio de cultura

18

ATIVIDADE FINAL

Grupo II sem clulas


Placas com meio de cultura apenas

2. Selecionou uma dentre as amostras de vrus que tinha guardadas e dividiu-a

Foto: Jean Scheijen

em quatro alquotas iguais.

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/803093

C E D E R J 161

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte II:


os vrus

3. Colocou o contedo de cada alquota em cada uma das placas.

Grupo I com clulas


Placas com clulas cultivadas no
laboratrio, em meio de cultura

Grupo II sem clulas


Placas com meio de cultura apenas

4. Esperou algumas horas prazo de que esse vrus precisava para se replicar.
5. Retirou uma amostra do contedo de cada placa e colocou-as em tubos, ainda
separadas por grupo.

Tubos com o contedo que foi


coletado das placas do grupo I

Tubos com o contedo


que foi coletado das
placas do grupo II

6. Colocou uma pequena frao de cada um desses tubos em novas placas, todas
com clulas agora (106 clulas, mesma quantidade usada no passo 1).

Novas placas para o grupo I


Novas placas com clulas cutivadas
no laboratrio receberam uma
frao do que foi coletado nos
tubos do grupo I

162 C E D E R J

Novas placas para o grupo II


Novas placas, agora com clulas
cultivadas no laboratrio receberam
uma frao do que foi coletado nos
tubos do grupo II

MDULO 1

18

7. Aguardou mais algumas horas.

AULA

8. Observou as placas dos dois grupos em um microscpio.

Foto: Janet Goulden

Resultado obtido para o grupo I:


Todas as clulas mortas

Fonte: http://www.sxc.hu/
photo/810369

Resultado obtido para o grupo II:


Todas as clulas vivas

A no ser pelo fato de que, inicialmente, o grupo I tinha clulas e o grupo II no,
as condies experimentais a que as placas foram expostas eram exatamente as
mesmas durante todo o experimento. Considerando isso, responda: Por que as
amostras coletadas das placas do grupo I (no passo 5) foram capazes de matar as
clulas em que foram adicionadas (no passo 6) e as do grupo II no?
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____________________________________________________________________________
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C E D E R J 163

Bioqumica I | Quando as protenas se tornam mais... parte II:


os vrus

RESPOSTA COMENTADA

Esta atividade longa, e d trabalho analisar as informaes


atentamente, mas a sua resposta simples; para chegar a ela, voc
precisaria ter em mente uma informao que foi dada no incio da
aula: os vrus somente so capazes de se multiplicar se infectarem
uma clula.
Se voc voltar ao passo 5, ver que Joo adicionou vrus a placas com
clulas (grupo I) e a placas sem clulas (grupo II). Ora, no grupo I, os
vrus encontraram clulas que eles puderam infectar e se replicar; o
mesmo no aconteceu no grupo II.
Quando Joo coletou amostras dos dois grupos e colocou-as (todas)
em placas com clulas, as amostras do grupo I tinham uma grande
quantidade de vrus; ao serem colocados em novas placas, esses
vrus se replicaram novamente, matando todas as clulas presentes.
J as amostras coletadas das placas do grupo II (em que no houve
replicao no passo 5) continham uma quantidade muito pequena de
vrus, provenientes da adio que Joo fez no passo 3. Esses poucos
vrus no foram capazes de matar todas as clulas quando foram
colocados em contato com elas, no passo 6.
Resumindo, todas as clulas das placas do grupo II no morreram no
passo 6 porque no havia vrus suficientes para matar todas elas. Isso
porque, no passo 5, a amostra inicial de vrus utilizada por Joo no
se replicou, pois foi colocada em placas sem clulas, essenciais para
a replicao viral.

RESUMO

Os vrus so partculas formadas por um tipo de cido nuclico e por um capsdeo


protico que protege o seu material gentico. So agentes causadores de diversas
doenas, como a varola, a raiva, a dengue e a AIDS. Os vrus s conseguem se
reproduzir se entrarem em uma clula e usarem a maquinaria de replicao do
genoma dessa clula para sua prpria replicao. Esses parasitas infectam tanto
clulas vegetais quanto animais e apresentam uma enorme diversidade no que
se refere:
- ao tipo de material gentico que carregam (RNA ou DNA);
- organizao estrutural desse material (fita dupla ou simples);
- presena de membrana lipdica ao seu redor (vrus envelopados ou noenvelopados);

164 C E D E R J

MDULO 1

18
icosadrica).
Quanto a esse ltimo item, a contribuio de Watson e Crick foi de grande
importncia. Eles postularam que a estrutura do capsdeo de um vrus deveria ser
composta por vrias cpias de uma mesma protena (ou de poucas), uma vez que
com o genoma pequeno de um vrus no seria possvel codificar uma protena
para cobrir todo o material gentico nem muitas protenas diferentes para essa
mesma funo. Alm disso, essas protenas precisavam se organizar em um arranjo
que fosse favorecido para acontecer espontaneamente no interior da clula. Esses
dois requisitos foram a base da proposta da estrutura simtrica dos vrus, tanto da
helicoidal (em forma de hlice) quanto da icosadrica (vrus esfricos).

INFORMAO SOBRE A PRXIMA AULA


A prxima aula ser um estudo dirigido, para voc poder aplicar os conhecimentos
adquiridos nesta aula sobre o papel das protenas virais no processo de
infeco.

C E D E R J 165

AULA

- simetria de organizao das protenas do seu capsdeo (helicoidal ou

AULA

Sobre as famosas enzimas


parte I: uma introduo

19
Metas da aula

objetivos

Apresentar a histria da descoberta das


enzimas e introduzir os conceitos de
funcionamento dessas protenas.

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:


1

definir enzima;

caracterizar o papel de uma enzima em uma


reao qumica.

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte I: uma introduo

INTRODUO

Fonte: www.sxc.hu/photo/533310

Fonte: www.sxc.hu/photo/831097

Fonte: www.sxc.hu/photo/850640

J lhe passou pela cabea alguma vez o nmero de reaes que devem
acontecer no seu corpo durante um dia para que ele funcione corretamente?
Comeando pelo bsico, voc se alimenta e precisa digerir e absorver os
nutrientes. Isso para, claro, sintetizar molculas novas no seu organismo.
Alis, falando em sintetizar molculas novas, quantas delas no precisam
ser construdas para que uma nica clula possa se dividir? E, falando em
diviso celular, quantas clulas ser que se dividem no nosso corpo em um
nico dia? Imagine, ainda, em um indivduo em crescimento! Muita coisa?
Certamente!
Imagine se todas estas reaes acontecessem a seu tempo, sem nenhum
empurrozinho? Vrias delas demorariam tanto para acontecer que a vida
como a conhecemos (bioquimicamente) seria impossvel! E aqui que entram as
enzimas, tema da aula de hoje, na qual voc vai conhecer a histria da descoberta
dessas molculas e iniciar seu estudo sobre o funcionamento delas.

168 C E D E R J

19 MDULO 1
AULA

UMA VISO HISTRICA DA ENZIMOLOGIA


A histria das enzimas comea junto com a histria da prpria
Bioqumica, a partir das primeiras investigaes acerca da fermentao
e da digesto. Vamos comear apontando alguns momentos importantes
dessa histria.
Podemos considerar que as primeiras observaes relacionadas
atividade de enzimas datam do final do sculo XVIII, quando vrios
estudos demonstraram que secrees estomacais catalisavam a digesto
da carne, o que sugeriu a existncia dos CATALISADORES biolgicos.
No incio do sculo XIX, outras atividades biolgicas comearam
a ser demonstradas. Em 1810, Joseph Gay-Lussac determinou que a
decomposio do acar pelas leveduras resultava em etanol (o lcool

CATALISADORES
Molculas capazes
de acelerar a
velocidade de
acontecimento de uma
reao qumica.

comercial) e CO2. Alguns anos depois, Jacob Berzelius mostrou que o extrato
de malte conhecido como diastase catalisava a hidrlise do amido de forma
muito mais eficiente do que o cido sulfrico (um catalisador qumico).
At aquele momento, no se tinha idia de quais componentes
biolgicos estavam envolvidos com estas atividades. A dificuldade
de se reproduzir, em laboratrio, diversas reaes bioqumicas levou
Louis Pasteur (um pesquisador sobre quem voc j leu na Aula 1 desta
disciplina) a propor, na metade do sculo XIX, uma hiptese. Ele disse que a
FERMENTAO ocorreria somente em clulas vivas, que segundo ele possuiriam

FERMENTAO

uma fora vital responsvel pelas transformaes observadas. Esta viso,

o processo pelo
qual microorganismos
decompem, na
ausncia de oxignio,
substncias orgnicas,
como os acares.
H alguns tipos de
fermentao, como a
fermentao lctica
e a fermentao
alcolica; na
fermentao alcolica,
por exemplo, o
microorganismo gera
energia para suas
atividades e produz
gs carbnico (CO2) e
lcool.

chamada vitalismo, prevaleceu por vrios anos. Entretanto, com o passar


do tempo, surgiu uma nova corrente de pensamento, que dizia que os
processos biolgicos ocorriam pela ao de substncias qumicas presentes
nas clulas das leveduras (fungos que realizam fermentao, utilizados no
estudo), conhecidas como fermentos.
Em 1878, Frederich Wilhelm Kuhne nomeou como enzimas (do
grego en dentro e zyme levedura) estes fermentos, enfatizando
que no eram as leveduras que catalisavam as reaes da fermentao,
mas sim algo presente dentro delas. Esta teoria foi definitivamente
comprovada quando Eduard Buchner, em 1897, mostrou que extratos
de leveduras que no continham clulas inteiras catalisavam a produo
de etanol a partir de glicose. O que eram essas enzimas, afinal?

C E D E R J 169

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte I: uma introduo

Esta pergunta comeou a ser respondida em 1926, quando James


Sumner isolou e cristalizou a urease, enzima que catalisa a hidrlise
em NH3 e CO2. Ele descobriu que os cristais de urease eram

URIA

da

Composto produzido
no nosso corpo para
excretar nitrognio.

constitudos inteiramente de protena, e postulou que todas as enzimas

URIA

eram protenas.
A proposta de Sumner s se tornou amplamente aceita alguns
anos depois, durante a dcada de 1930, quando John Northrop e Moses
Kunitz cristalizaram a pepsina, a tripsina e outras enzimas digestivas.
Eles mostraram que todas elas tambm eram protenas e, mais ainda,
que havia uma relao direta entre a atividade enzimtica e a quantidade
de protena presente no cristal.
Durante a segunda metade do sculo XX, com o desenvolvimento
de tcnicas modernas de separao e anlise de protenas como as que
voc aprendeu na Aula 13 (veja o boxe a seguir), milhares de enzimas
foram purificadas e caracterizadas, tendo suas estruturas elucidadas e seus
mecanismos de ao determinados. Com exceo de uma pequena classe
de RNAs com atividade cataltica ( isso mesmo que voc acabou de ler: h
RNAs capazes de atuar como enzimas), as enzimas so de fato protenas.

As primeiras enzimas vistas


Como marcos histricos desses avanos podemos citar a primeira
determinao da seqncia completa de aminocidos de uma enzima, a
ribonuclease (RNAse) de pncreas de boi, em 1963, e a determinao por
difrao de raios X da estrutura da lisozima da clara de ovo, em 1965.
Voc viu as estruturas dessas protenas na Aula 13.

CATALISADORES BIOLGICOS X CATALISADORES


QUMICOS
A descoberta das enzimas e da sua natureza qumica (protenas)
foi muito importante porque, at ento, os catalisadores que se conhecia
eram qumicos. Um catalisador qumico qualquer molcula no
sintetizada in vivo, isto , por um organismo. Esse tipo de catalisador
apresentava vrias limitaes que as enzimas no apresentam.
Assim, alm da natureza qumica, as enzimas diferem dos
catalisadores qumicos em vrios aspectos importantes:

170 C E D E R J

19 MDULO 1

Rapidez na catlise: as velocidades das reaes catalisadas pelas

AULA

enzimas so geralmente de 106 a 1012 vezes maiores do que as das reaes


no catalisadas e, pelo menos, vrias ordens de grandeza maiores do que
aquelas catalisadas por catalisadores qumicos.
Catlise em condies fisiolgicas: as condies nas quais as
reaes catalisadas por enzimas ocorrem so mais compatveis com a
vida temperaturas abaixo de 10C, presso atmosfrica e pH neutro ,
enquanto a catlise qumica geralmente requer temperaturas e presses
elevadas, alm de pHs extremos.
Alta preciso: as reaes enzimticas apresentam alta
especificidade e dificilmente resultam na formao de produtos no
esperados.
Possibilidade de controle da reao: as reaes enzimticas
podem ser reguladas por substncias diferentes de seus substratos.
Os mecanismos regulatrios incluem controle alostrico, modificao
covalente ou variaes nas quantidades de enzima sintetizada (veja o
boxe a seguir), como voc aprender nas aulas de Bioqumica II.

Elas no esto descontroladas!


Imagine se voc no pudesse controlar o rdio da sua casa, e ele tocasse
msica o tempo todo, sem parar? De noite, provavelmente isso seria um
incmodo; talvez o fosse tambm em outras horas do dia. H momentos
para funcionar e para desligar, concorda? Do mesmo jeito acontece com
as enzimas. H momentos em que elas devem catalisar as reaes e
momentos em que isso no necessrio. Como inform-las? Qual o
boto de liga/desliga das enzimas?
Para avisar a uma enzima que ela no deve atuar em determinado
momento, nosso organismo possui diversos mecanismos. O mais simples
deles a reduo da quantidade de composto disponvel para a enzima
realizar uma reao. Com menor quantidade da molcula necessria para
iniciar a reao disponvel, as enzimas tendem a trabalhar em velocidade
menor. Voc ver isso melhor na prxima aula.
Outra possibilidade o controle via etiquetas qumicas, isto , molculas
que so ligadas enzima ou ao seu composto de interesse para sinalizar
que a reao deve ou no acontecer. Esse tipo de controle chamado
modificao alostrica, e voc o ver melhor em Bioqumica II.
Importante agora saber que, independente do mecanismo utilizado,
nossas enzimas no esto descontroladas.

C E D E R J 171

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte I: uma introduo

ATIVIDADE
1. Catalisador qumico x enzima

Voc j viu algum programa de investigao criminal que usasse


conceitos cientficos para elucidar crimes? Nestes programas, representando
o que acontece nas investigaes reais, costuma-se usar um composto
chamado luminol para identificar vestgios de sangue nas cenas dos
crimes. A reao que indica a presena do sangue acontece assim:
coloca-se luminol na presena de gua oxigenada. Somente se houver
sangue no local investigado, o luminol emitir luz, pois o ferro presente
na hemoglobina do sangue acelera a quebra do luminol e podemos ver o
produto da reao a luz.
O luminol um composto que pode ser obtido comercialmente, mas
tambm h um anlogo a ele na natureza: a luciferina, uma protena que,
ao ser quebrada pela ao de outra protena, origina a luz que vemos um
vagalume emitir.
a. Quem so os catalisadores das duas reaes mencionadas?
Luminol: _____________________________
Luciferina: ___________________________
b. Qual das reaes no catalisada por uma enzima e por qu?
________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
RESPOSTA COMENTADA

Na reao que envolve luminol e gua oxigenada, o catalisador o ferro,


que acelera a reao. Somente luminol na presena da gua oxigenada
no emitiria luz (pelo menos, no em um tempo mensurvel).
Na reao de quebra da luciferina, temos uma outra protena
envolvida que, se voc pensou se tratar de uma enzima, acertou!
A luciferase uma protena presente nos vagalumes e em algas
bioluminescentes (algas que brilham mesmo dentro do mar, noite),
que quebra seu substrato, a luciferina, e gera energia na forma de
luz esverdeada.
Portanto, a reao que no catalisada por uma enzima a reao
que envolve o luminol. Isso porque, embora a reao, em cenas
de crime, s acontea na presena de sangue, o que catalisa a
reao apenas o ferro (catalisador qumico) a parte protica da
hemoglobina no tem participao direta no processo.

172 C E D E R J

19 MDULO 1
AULA

COMO AS ENZIMAS FUNCIONAM?


As enzimas possibilitam diversas reaes biolgicas (veja o boxe
a seguir) criando um ambiente especfico para determinada reao, por
exemplo promovendo a aproximao de duas ou mais molculas na
orientao exata que necessria para a reao ocorrer. Alm disso, elas
tambm proporcionam ao substrato um meio energeticamente favorvel
reao.

Quem faz o qu?


O estudo das reaes do metabolismo, desde o incio do sculo XX, resultou
na descoberta de um nmero enorme de enzimas. Praticamente todas as
reaes que ocorrem nos organismos vivos so catalisadas por enzimas.
Naquela poca, no havia ainda regras para nomear um composto, e se
voc descobrisse uma enzima, poderia nome-la como achasse melhor.
Normalmente elas eram nomeadas de acordo com sua funo.
O problema disso veio com o aumento do nmero de enzimas descobertas:
o uso de uma terminologia no sistemtica para nome-las fez com que
algumas enzimas passassem a ter mais de um nome, enquanto outras
enzimas diferentes eram conhecidas pelo mesmo nome.
Diante disso, a nomenclatura das enzimas foi sistematizada a partir
de 1961, e est baseada em uma diviso em seis classes, relacionada s
reaes que elas catalisam:
1. xido-redutases: catalisam reaes de xido-reduo, isto , de
transferncia de eltrons entre compostos;
2. transferases: catalisam a transferncia de grupos entre molculas;
3. hidrolases: catalisam reaes de hidrlise (quebram molculas
utilizando a gua);
4. liases: catalisam a remoo no-hidroltica de grupos, formando
ligaes duplas (ou seja, retiram um grupamento da molcula sem
usar gua);
5. isomerases: catalisam reaes de isomerizao (reorganizam a molcula
sem que ela perca nenhum tomo);
6. ligases: catalisam a formao de uma ligao qumica entre dois
compostos utilizando a energia da quebra de um nucleotdeo
trifosfatado (por exemplo, ATP), que acontece ao mesmo tempo.
Esta classificao ser importante, principalmente, durante a disciplina
de Bioqumica II, quando estudaremos as reaes do metabolismo.

A atuao das enzimas est relacionada, diretamente, velocidade


das reaes das quais elas participam. Estas protenas trabalham fazendo
com que uma reao que aconteceria em um tempo grande (s vezes
at no mensurvel) acontea em tempos compatveis com os processos
vitais. Um exemplo disso a digesto de protenas no estmago.
No nosso estmago, uma substncia chamada suco gstrico
secretada, majoritariamente, em resposta chegada de alimento. Quando

C E D E R J 173

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte I: uma introduo

comemos um bife, por exemplo, esse vai parar no nosso estmago e,


em contato com o suco gstrico, as protenas que o compem comeam
a ser degradadas por dois elementos presentes nesta secreo: o cido
clordrico e uma enzima, chamada pepsina, que quebra protenas.

Figura 19.1: Um bife, composto por protenas, comea a ser digerido no nosso estmago,
por causa do contato com o suco gstrico, que contm cido clordrico e pepsina.
Fonte: www.sxc.hu/photo/433527

O bife, em contato com o cido, acabaria por ser degradado, de


forma que suas protenas seriam quebradas. No entanto, na presena
da pepsina e do cido, ele degradado muito mais rapidamente, o que
aumenta a velocidade do nosso processo de digesto e, portanto, nossa
aquisio de nutrientes.
Uma pergunta que voc pode estar se fazendo, neste momento,
: Como ser que as enzimas conseguem acelerar a velocidade das
reaes? Isso o que voc ver a seguir.

174 C E D E R J

19 MDULO 1

2. O que faz uma enzima?

Acidentes ecolgicos como o do Exxon Valdez, em 1989, no qual


ocorreu um grande derramamento de petrleo no Alasca, acarretam
conseqncias ambientais enormes, como a morte de milhares de animais.
Em casos como este, possvel:
1. deixar que a natureza se encarregue de degradar o petrleo que foi
derramado, o que pode demorar sculos;
2. fazer a remediao do petrleo por agentes qumicos ou a biorremediao,
processo que utiliza microorganismos para degradar o petrleo (uma
combinao de compostos orgnicos). Os microorganismos utilizam o
petrleo como fonte de energia para seu metabolismo, quebrando-o pela
atividade de suas enzimas.
No segundo caso, a reduo das reas contaminadas acontece muito
mais rapidamente.
Com base no que voc aprendeu nesta aula, como se justifica,
bioquimicamente, o fato de a biorremediao reduzir mais rapidamente a
rea contaminada do que deixar que o petrleo se degrade sozinho?
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RESPOSTA COMENTADA

A biorremediao tem sido vista como um processo de degradao


de petrleo bastante eficiente, mesmo em relao remediao por
agentes qumicos. Isso porque a biorremediao, alm de reduzir a
contaminao de petrleo nas reas onde tiverem ocorrido acidentes
ecolgicos, tambm no cria, como conseqncia do seu acontecimento,
mais resduos o que acontece na remediao.
A biorremediao consiste em colocar uma grande quantidade
de microorganismos em uma rea contaminada por petrleo.
Estes microorganismos comem o petrleo, diminuindo a rea afetada
pelo derramamento. Esta degradao de petrleo, portanto, mediada
pelas enzimas, capazes de quebrar o petrleo para gerar energia para
os microorganismos que esto participando do processo.
O petrleo, na presena do oxignio do ar e do calor, depois de
muitos e muitos anos, poderia ser degradado; no entanto, os sistemas
ambientais provavelmente no suportariam essa espera. Por isso,
a participao das enzimas dos microorganismos acelerando a
degradao do leo negro to providencial!

C E D E R J 175

AULA

ATIVIDADE

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte I: uma introduo

ACELERANDO UMA REAO QUMICA COMO?


Quando um composto qumico convertido em outro, o que
est acontecendo uma reorganizao dos tomos que fazem parte do
reagente (substrato) para que ele se torne o produto da reao.

!
No caso de reaes que envolvem a participao de enzimas, chamamos os
reagentes de substratos.

Para que a reao de converso de um dado substrato em produto


ocorra espontaneamente (quer dizer, seja favorvel termodinamicamente
voc aprender mais sobre isso em Bioqumica II), preciso que haja
liberao de energia durante a transformao do substrato em produto.
Em outras palavras, quando a energia contida na molcula de substrato
maior do que a energia contida na molcula de produto, podemos dizer
que a reao favorvel e, portanto, espontnea.
Entretanto, o fato de a reao ser favorvel e espontnea no
significa que ela v ocorrer rapidamente. Mas por qu? Isso ocorre
porque, durante a converso de um substrato em produto, pode se
formar um composto intermedirio que possui uma energia muito alta.
Esse composto intermedirio chamado estado de transio. A diferena
de energia entre ele e o substrato chamada energia de ativao. Em
outras palavras, a energia de ativao o quanto de energia necessrio
no sistema para que o substrato possa ser convertido em produto.

!
Estado de transio: composto intermedirio, formado no processo de
converso de um substrato em produto.
Energia de ativao: diferena entre a energia do substrato e a do estado
de transio.

176 C E D E R J

19 MDULO 1
AULA

Variao de energia
entre o substrato e o
estado de transio

Energia livre, G

Estado de transio

Variao de energia
entre o estado de
transio e o produto

S
Estado fundamental
do substrato S

P
Estado fundamental do produto P

Diferena de energia
entre S e P

Coordenada de reao
Figura 19.2: Estado de transio e energia de ativao de uma reao. Em uma reao qumica,
um arranjo estvel de tomos (ou seja, a molcula do substrato) convertido em um outro arranjo
estvel de tomos (ou seja, a molcula do produto da reao). Para que esta converso acontea,
necessrio que os tomos que formam o substrato sofram uma reorganizao, passando por um
arranjo instvel de alta energia, conhecido como estado de transio. A diferena de energia entre
o arranjo atmico do substrato e o do estado de transio chamada energia de ativao.

No exemplo mostrado na Figura 19.2, a energia de P menor do


que a de S, de forma que a variao de energia da reao negativa (energia
de P energia de S < 0), e favorece a formao de P. No entanto, existe
uma barreira energtica entre S e P, a energia de ativao, relacionada
formao do estado de transio, que pode envolver formao de cargas
instveis na molcula, rearranjo de ligaes etc.
Quanto maior a energia de ativao, mais lenta a reao.
Diminuir a energia de ativao de uma reao exatamente o que
uma enzima faz. Por isso que ela aumenta a velocidade da reao!
Veja a Figura 19.3:

C E D E R J 177

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte I: uma introduo

Energia livre, G

Estado de transio ()

Energia necessria
para a converso
de S ao estado de
transio

ES

EP
P

Na presena de uma
enzima, energia
necessria para a
converso de S ao
novo estado de
transio

Coordenada de reao

Figura 19.3: Estado de transio e energia de ativao de uma reao na presena (linha pontilhada) e na ausncia
(linha cheia) de um catalisador. Na ausncia de uma enzima, a energia de ativao para a converso de S em um
estado de transio maior do que quando a enzima est presente. Isso se deve formao de estados intermedirios
constitudos pela associao do catalisador ao substrato (ES), que convertido a um produto ainda associado a
esse catalisador (EP) e, s ento, ao produto livre (P).

Um catalisador, portanto, funciona diminuindo a energia


de ativao, que o que determina a velocidade da reao. por
proporcionar esta diminuio que aumenta a velocidade das reaes.

!
Para entender como as enzimas funcionam, importante distinguir entre o
equilbrio da reao e a velocidade da reao. Os catalisadores funcionam
aumentando a velocidade das reaes; eles no alteram seu equilbrio.
Ou seja, se uma reao tende a acontecer favorecendo um determinado
produto, a presena de uma enzima somente far com que ela acontea
mais rpido; se uma reao no tende formao de um determinado
produto, a enzima no alterar esse quadro, isto , a reao continuar
no acontecendo.

Em termos gerais, assim que as enzimas atuam aumentando a


velocidade de reaes qumicas no nosso organismo. Um pouco mais de
detalhes sobre como esse processo acontece voc ter na prxima aula,
quando estudar a interao da enzima com seu substrato...

178 C E D E R J

19 MDULO 1
AULA

CONCLUSO
As enzimas participam de diversos processos, fazendo com que eles
aconteam em tempos compatveis com as necessidades do organismo.
No fossem estes catalisadores biolgicos, o momento de uma clula se
dividir, o momento em que metabolizamos os nutrientes que ingerimos
para gerar energia para diversos processos no organismo, a sntese e
a quebra de compostos de alta energia para gerar a energia necessria
para nossas atividades dirias poderiam acontecer em prazos que
inviabilizassem nossa existncia.

ATIVIDADE FINAL
Quem d mais?
Lembra-se do luminol, que mencionamos na Atividade 1? Este composto produz
luz na presena de gua oxigenada quando colocado em contato com o ferro,
como j dissemos. O que no dissemos ainda que este mesmo composto tambm
pode sofrer essa reao, que gera luz, catalisada por uma enzima, chamada
peroxidase. O uso desta reao bastante comum em experimentos cientficos,
para revelar se h presena de determinadas protenas de interesse para estudo
em uma amostra.
At agora, mencionamos fatos verdicos; daqui para a frente, vamos trabalhar
com situaes hipotticas.
Imagine que pudssemos traar em um grfico os perfis de energia das reaes
que envolvem luminol e gua oxigenada tanto na presena de ferro quanto de
uma peroxidase:

Ferro

Peroxidase

Energia livre

Energia livre

?
x
S

P
Coordenada de reao

P
Coordenada de reao

C E D E R J 179

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte I: uma introduo

a. O que representam os pontos dos grficos assinalados com uma interrogao


(?)?
__________________________________________________________________________

b. O que representa a seta na qual est assinalado x em ambos os grficos?


__________________________________________________________________________

c. Nesta atividade, os dois grficos apresentam as variaes de energia da reao


de produo de luz a partir do luminol na presena de catalisadores diferentes.
Considere que ambos esto na mesma escala. Qual catalisador foi mais eficiente,
ou seja, foi capaz de fazer a reao acontecer mais rpido? Por qu?
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________

RESPOSTA COMENTADA

O topo de uma curva que representa a variao de energia durante a


converso de um substrato em produto (assinalado com ?) se refere
ao estado de transio desta reao. Em outras palavras, se refere a um
intermedirio formado durante a reao que apresenta uma quantidade
de energia maior do que a do substrato e que representa uma barreira
energtica a ser vencida pela reao. Esta barreira energtica a ser
ultrapassada o que est representado pelas setas assinaladas com X,
e chama-se energia de ativao. Quanto mais um catalisador capaz
de reduzir a energia de ativao necessria para que uma reao
acontea, mais ele capaz de aumentar a velocidade da reao. Assim,
no exemplo hipottico desta atividade, a peroxidase se apresenta como
um catalisador mais eficiente do que o ferro.

180 C E D E R J

19 MDULO 1
AULA

RESUMO

As enzimas foram descobertas por um pesquisador que detectou a capacidade de


produo de fermentos por algum composto no interior das leveduras. A partir
desse achado, surgiu a enzimologia, que estuda exatamente estes compostos
e como eles funcionam. Os pesquisadores descobriram que a natureza qumica
da maior parte das enzimas protica e que elas diferem dos catalisadores
qumicos em vrios aspectos, tais como: maior eficincia no que diz respeito
capacidade de aumentar a velocidade da reao; funcionamento em condies
de temperatura, presso e pH compatveis com a vida; so altamente especficas
e tambm podem ser reguladas. Mas quando uma enzima necessria e como
funciona a sua catlise?
Durante uma reao, um composto intermedirio, chamado estado de transio,
formado. O estado de transio um arranjo instvel de tomos que possui energia
mais elevada do que o substrato e o produto. A diferena de energia entre o estado
de transio e o substrato (energia de ativao) o fator limitante para uma reao.
Quanto maior a energia de ativao, mais lenta tende a ser a reao.
Em outras palavras, o estado de transio representa uma barreira energtica para
a reao, que precisa ser vencida. A energia necessria para vencer estas barreira
a energia de ativao.
Uma enzima atua aumentando a velocidade de uma reao por diminuir a energia
de ativao dessa reao, gerando um estgio intermedirio formado por sua
associao com o substrato ES. Isso faz com que as reaes aconteam, nos
organismos, em tempos muito mais curtos do que se no houvesse as enzimas, o
que muito mais compatvel com os processos vitais que executamos todos os dias,
como a produo de energia, a sntese e degradao de molculas diversas etc.

INFORMAES SOBRE A PRXIMA AULA


Na prxima aula, voc entender um pouco mais a fundo o funcionamento das
enzimas, aprendendo qual regio de suas estruturas fundamental para que elas
exeram suas funes, como se ligam aos substratos e que fatores podem interferir
no poder de catlise. At l!

C E D E R J 181

AULA

Sobre as famosas
enzimas parte II:
J ouviu falar
em stio ativo?

20
Meta da aula

objetivos

Apresentar o stio ativo das enzimas,


regio onde o substrato se liga para ser
convertido em produto.

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:


1

definir stio ativo;

descrever os dois modelos de interao entre o


stio ativo da enzima e seu substrato;

caracterizar o efeito de variaes de temperatura


e de pH na atividade de uma enzima.

Pr-requisitos
Para acompanhar bem esta aula,
importante que voc volte Aula 9
e relembre a influncia do pH sobre
a protonao de um aminocido;
reveja tambm quais so as foras que
mantm a estrutura tridimensional de
uma protena, assunto da Aula 13.

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte II: J ouviu falar em stio ativo?

INTRODUO

Protenas, vitaminas, gorduras, acares... Estas so algumas molculas


que esto presentes o tempo todo no nosso organismo, as chamadas
biomolculas, que vimos na Aula 1.
Voc j sabe que existem diversos tipos de protenas, formadas por
aminocidos, que se convertem uns nos outros por ao de enzimas
especficas. Sobre as outras molculas, voc ainda vai aprender ao longo da
disciplina. S para adiantar um pouco...
As vitaminas participam de vrias reaes enzimticas fundamentais ao
funcionamento do nosso organismo. Os lipdeos (gorduras) so nossa reserva
energtica, sintetizados e decompostos a todo tempo no nosso corpo, por
ao de enzimas. Com freqncia, os acares que ingerimos precisam ser
quebrados em acares menores para, em seguida, serem utilizados como
fonte de energia dentro das clulas, o que tambm depende de enzimas
especficas, desde o incio at o final do processo.
Enzimas, enzimas... que elas so importantes j sabemos, mas se existem

SUBSTRATO

muitas delas no nosso corpo, como que cada uma sabe com que SUBSTRATO

S para relembrar o
que voc aprendeu
na aula passada,
substrato a molcula
que participa do incio
da reao enzimtica,
ou seja, o reagente
desta reao.

interagir e que produto formar?


aqui que comea esta nossa aula.

O STIO ATIVO E OS MODELOS DE FUNCIONAMENTO


DAS ENZIMAS
O bom funcionamento das enzimas, ou seja, sua capacidade de
diminuir enormemente a energia de ativao de uma reao, depende
da formao de um complexo (uma associao) entre a enzima e seu
substrato (para saber como este complexo foi descoberto, leia o boxe
a seguir). Essa associao ocorre graas presena do stio ativo na
estrutura das enzimas.

Desvendando o funcionamento de uma enzima


Nas aulas, tanto presenciais quanto a distncia, comum aprendermos
um conhecimento pronto e, por isso, muitas vezes no nos damos
conta de que o que se sabe sobre determinados assuntos atualmente
resultado de uma longa trilha percorrida por pesquisadores, muitas
vezes afastados no tempo e no espao. Foi assim para a descoberta do
complexo enzima/substrato.
A primeira vez que se pensou em formao de complexo entre enzima
e substrato foi em 1870, quando um francs, Charles Adolph Wurtz,
descobriu, por experimentos, que a enzima com a qual trabalhava

184 C E D E R J

20 MDULO 1
AULA

(papana, uma enzima presente no mamo papaia da o nome) formava


um composto insolvel em gua quando colocada na presena do seu
substrato e antes de quebr-lo.
Outros pesquisadores, dez anos depois, mostraram que uma enzima
(invertase) era capaz de sobreviver a temperaturas muito altas sem
perder sua atividade quando seu substrato (a sacarose) estava presente.
Mais doze anos (em 1902), um ingls chamado Adrian John Brown
amarrou essas idias e props o mecanismo de formao de um
complexo enzima/substrato que era necessrio para a catlise da reao
e a antecedia.

Voc sabe o que o stio ativo? O stio ativo uma pequena


poro da enzima formada a partir do enovelamento na sua estrutura
terciria. Ele apresenta resduos de aminocidos cujas cadeias laterais
so capazes de interagir com o substrato.
da especificidade desta ligao entre o substrato e o stio ativo
da enzima que surge a especificidade de cada atividade enzimtica.
Em outras palavras, uma enzima interage com um dado substrato
porque a sua seqncia primria possui aminocidos que determinam
uma estrutura terciria que, em uma poro especfica o stio ativo ,
permite o encaixe do substrato para que a reao acontea.

Seqncia primria Estrutura terciria Stio ativo Encaixe do substrato

ESTEREOISMEROS
Por causa dessas caractersticas estruturais, o substrato se liga ao
stio ativo da enzima com grande especificidade. Em 1894, um pesquisador
chamado Emil Fisher observou que as enzimas da via de quebra da glicose
(um acar) distinguiam ESTEREOISMEROS de acares, ou seja, eram muito
especficas para os seus substratos. Dentre outras, esta observao levou
Fisher a propor a hiptese da chave e fechadura, na qual a especificidade
da enzima (fechadura) por seu substrato (chave) era decorrente de suas
formas geomtricas serem complementares (Figura 20.1).

No final da Aula 8,
sobre aminocidos,
voc aprendeu
o que so os
estereoismeros:
so molculas
quase iguais, que
possuem os mesmos
grupamentos
funcionais, mas
apresentam diferente
organizao dos seus
tomos no espao.
Se quiser relembrar
mais detalhes sobre
este assunto, volte,
na Aula 8, seo
que fala sobre
aminocidos D e L.

C E D E R J 185

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte II: J ouviu falar em stio ativo?

Substrato

Fechadura

Stio ativo de uma enzima

Figura 20.1: Modelo chave e fechadura para a interao enzima e substrato.


A relao de especificidade do encaixe de um substrato em sua enzima especfica
anloga relao de encaixe de uma chave em uma fechadura. Assim como uma
chave, em geral, abre apenas uma fechadura, os substratos, tambm em geral, so
transformados em um determinado produto por uma s enzima.

A idia de a associao entre enzima e substrato ser bastante


especfica pressupe a existncia de interaes moleculares especficas
entre as superfcies da enzima e do seu substrato, o que uma concepo
bastante importante na Bioqumica.
As interaes moleculares envolvidas na ligao enzima-substrato so
da mesma natureza daquelas que mantm a estrutura tridimensional das
protenas, ou seja, pontes de hidrognio, interaes eletrostticas, interaes
hidrofbicas e interaes de van der Waals. Os grupos funcionais envolvidos
nestas interaes, tanto da enzima quanto do substrato, devem estar
precisamente localizados para garantir a eficincia do processo cataltico.
claro que, se o stio ativo a poro da enzima responsvel pela
catlise, ele deve ser capaz de interagir com o substrato, ou com parte dele,
para que o complexo enzima-substrato se forme.
Na verdade, ocorre que, inicialmente, algumas interaes fracas
so formadas entre a enzima e o substrato, tornando possvel a ligao
destas duas molculas. Em seguida, uma srie de outras interaes so
formadas, favorecendo a distoro da molcula do substrato (mudana
da sua forma), e, enfim, a formao do produto.
A hiptese da ligao substrato e enzima, seguindo o modelo de
associao entre chave e fechadura, explica a ligao de algumas enzimas
a seus substratos, mas no maior parte das reaes enzimticas. O modelo
de interao enzima e substrato como chave e fechadura sofreu adaptaes
posteriores, como voc ver na seo a seguir.

186 C E D E R J

20 MDULO 1

1
1. Sobre stio ativo...
Uma protease uma enzima capaz de quebrar cadeias polipeptdicas.
Existem proteases que so chamadas de proteases cidas, por apresentarem
sua atividade aumentada em pH cido e por terem, participando da reao,
resduos de aminocidos cidos, como o cido asprtico (Asp).
Um pesquisador que trabalha com uma protease de carrapato fez algumas
mutaes na seqncia da protena, substituindo determinados resduos de
Asp. Em seguida, o pesquisador monitorou a atividade da enzima normal
e das mutantes. Observe os resultados no grfico a seguir:

100%
90%

Atividade da enzima

80%
70%
60%
50%
40%
30%
20%
10%
0%
normal

mutao
Asp65

mutao
Asp130

mutao
Asp26

Com base no que voc acabou de estudar sobre funcionamento e estrutura


de enzimas, como voc explica a perda de atividade da protease pela
mutao do Asp da posio 65? Que regio da enzima provavelmente foi
afetada com esta mutao?
________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
RESPOSTA COMENTADA

O stio ativo a regio da estrutura da enzima responsvel por sua atividade cataltica; o stio ativo conta com aminocidos especficos, de
acordo com a reao que a enzima catalisa. Fazer uma mudana na
seqncia primria de uma protena de forma a afetar seu stio ativo
acarreta em perda ou, pelo menos, drstica diminuio da atividade
enzimtica. Como a mutao do asprtico da posio 65 provocou
a inativao da enzima (total perda da atividade), provavelmente
ela atingiu o stio ativo desta protena, inviabilizando a catlise.

C E D E R J 187

AULA

ATIVIDADE

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte II: J ouviu falar em stio ativo?

AJUSTE INDUZIDO OUTRO MECANISMO DE


FUNCIONAMENTO DAS ENZIMAS
Um problema no modelo chave e fechadura proposto por Fisher,
para explicar a interao enzima/substrato, era que ele explicava o
funcionamento de algumas, mas no da maioria das enzimas.
Foi um pesquisador escocs, J.B.S. Haldane, que, em 1930,
props a noo que temos hoje sobre o funcionamento das enzimas, a
qual foi aprimorada por Linus Pauling. Para voc entender o modelo
de explicao para o funcionamento das enzimas proposto por estes
pesquisadores, observe a Figura 20.2:

Substrato
(barra de metal)

Estado de transio
(barra de metal
dobrada)

Produto
(barras de metal
quebradas)

Energia livre, G

Gno-cat

S
P

S: substrato.
P: produto.
Gno-cat: energia de ativao necessria
reao de quebra do cilindro sem
atuao de um catalisador.
: estado de transio

Figura 20.2: Esquema da reao imaginria da quebra de um cilindro sem a atuao


de um catalisador. Nessa imagem, voc v tambm uma representao grfica
hipottica da energia de ativao necessria para o cilindro reto (substrato) passar
ao cilindro dobrado (estado de transio).

188 C E D E R J

20 MDULO 1

A reao imaginria representada na Figura 20.2 a quebra de

AULA

um cilindro em duas partes sem a atuao de um catalisador. Para que


a quebra ocorra, o cilindro deve ser inicialmente dobrado, o que requer
uma alta energia. Nesta analogia, o cilindro dobrado equivale ao estado
de transio desta reao. Se voc observar o grfico ao lado do esquema,
ainda na Figura 20.2, ver que a alta energia de ativao para a dobra
do cilindro est representada pela altura da curva.
Nada disso novidade, uma vez que voc j viu, na aula passada,
a importncia da participao de uma enzima como catalisadora de
uma reao. Comeamos a usar este exemplo do cilindro para voc
entender a participao do stio ativo e de sua forma na catlise feita
por uma enzima.
Imagine agora que pusssemos uma enzima para catalisar a quebra
da barra de metal, e que essa enzima tenha stio ativo de forma geomtrica
complementar ao substrato (Figura 20.3):

Enzima

Stio
ativo

Cilindro de metal

Energia livre, G

Gno-cat

S
P
ES

Gcat

GM

S: substrato.
: estado de transio
ES: complexo enzima + substrato.
P: produto.
Gno-cat: energia de ativao necessria para converter
o substrato em produto sem catalisador.
Gcat: energia necessria para converter o substrato
em produto com um catalisador com stio ativo
complementar ao substrato.
GM: diferena de energia entre Gcat e Gno-cat.

Figura 20.3: Esquema da reao imaginria da quebra de um cilindro com a atuao de uma enzima com stio
ativo complementar ao substrato da reao. Nessa imagem, voc tambm v uma representao grfica hipottica
da energia de ativao necessria para a quebra do cilindro nestas condies. A ligao do cilindro de metal (S)
enzima (E) to estvel que faz com que o complexo ES tenha uma energia menor do que a energia original
do substrato. A energia de ativao necessria para vencer o estado de transio maior quando partimos do
complexo ES do que quando apenas de S, inviabilizando a reao.

C E D E R J 189

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte II: J ouviu falar em stio ativo?

Neste esquema, o que estamos mostrando nada mais do que


uma representao do modelo chave e fechadura, no qual o cilindro se
ajusta perfeitamente ao stio da enzima. Esta conformao tende a ser
bastante estvel, ou seja, ser uma estrutura de baixa energia.
No nosso exemplo, considere que a energia da associao cilindro
e enzima seja mais baixa do que as energias dos dois separados. Neste
caso, o cilindro no vai se dobrar, e conseqentemente, no vai se quebrar.
Em outras palavras, o produto da reao no vai ser formado. Portanto, esta
enzima com stio ativo complementar ao substrato acaba estabilizando o
substrato de tal maneira que impede que a reao ocorra, ou seja, se o
encaixe do substrato enzima for to preciso, como ser superado um
estado de alta energia (estado de transio) para que o substrato seja
convertido em produto?
Aqui entram as explicaes dos pesquisadores que mencionamos l
no incio desta seo da aula (Haldane e Pauling). Veja a Figura 20.4:

Stio
ativo

Energia livre, G

no-cat
GM

Gno-cat

cat

Gcat

ES
P

S: substrato.
ES: complexo enzima + substrato.
P: produto.
Gno-cat: energia de ativao necessria para converter
o substrato em produto sem catalisador.
Gcat: energia necessria para converter o substrato
em produto com um catalisador com stio ativo
complementar ao estado de transio.
GM: diferena de energia entre Gcat e Gno-cat.

Coordenada da reao

Figura 20.4: Esquema da reao imaginria da quebra de um cilindro com a atuao de uma enzima com
stio ativo complementar ao estado de transio da reao. Nesta imagem, voc tambm pode observar
uma representao grfica hipottica da energia de ativao necessria para a quebra do cilindro nestas
condies. A ligao do cilindro de metal (S) enzima (E) possui uma energia menor do que o substrato;
alm disso, o estado de transio para uma reao nestas condies possui energia menor do que o estado
de transio no-catalisado. A energia de ativao necessria para vencer o estado de transio menor
nessa situao, o que facilita o acontecimento da reao.

190 C E D E R J

20 MDULO 1

A proposta de Haldane foi a de que o stio ativo deve ser

AULA

complementar ao estado de transio e no ao substrato. Assim,


quando o substrato se liga enzima, a interao entre as duas molculas
favorece a formao do estado de transio, por este possuir uma
energia mais baixa do que nas outras duas situaes que voc acabou
de ver (Figuras 20.2 e 20.3).

!
Resumindo...
Uma enzima uma protena capaz de acelerar o acontecimento de uma
reao. Ela faz isso se ligando ao seu substrato por uma poro da sua estrutura
chamada stio ativo e diminuindo a energia necessria para que esse substrato
vena a barreira energtica existente na reao a formao do estado de
transio. Para que isso acontea, o stio ativo da enzima tem de ser capaz de
se associar ao substrato, mas no de maneira perfeitamente complementar,
pois, seno, acabaria por inviabilizar, e no por favorecer a reao.

A proposta de Haldane e Pauling foi fundamental para os estudos


de Daniel Koshland tambm sobre o funcionamento das enzimas. Este
pesquisador verificou que, algumas vezes, a primeira interao da enzima
com seu substrato resulta em uma srie de mudanas na estrutura
tridimensional da enzima. Isso se deve, justamente, s vrias interaes
formadas durante a ligao do substrato ao stio ativo da enzima, que
influenciam outras interaes na estrutura da protena, responsveis pela
estabilizao da sua conformao.
As mudanas conformacionais sofridas pela enzima levam
acomodao de grupos funcionais especficos (dos aminocidos da
protena) em posies apropriadas, facilitando a interao com o
substrato. Alm disso, permitem a formao de outras interaes fracas
necessrias ao estado de transio e, conseqentemente, favorecem a
reao. Este processo conhecido como ajuste induzido e foi proposto
pelo Koshland, em 1958 (Figura 20.5).

C E D E R J 191

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte II: J ouviu falar em stio ativo?

Partes do substrato que


encaixam no stio ativo
da enzima

Stio ativo antes da


ligao do substrato

Stio ativo depois da


ligao do substrato

Figura 20.5: Esquema de ajuste induzido. Aps a ligao do substrato enzima,


ela sofre mudanas conformacionais que fazem com que sua estrutura se ajuste
ligao do substrato, colocando em contato grupos funcionais dos aminocidos que
so importantes para que a reao acontea.

Um bom exemplo da ocorrncia do ajuste induzido o caso da


HEXOCINASE

HEXOCINASE,

enzima que catalisa a converso de glicose em glicose-6-

Para que uma clula


possa utilizar a glicose
e oxid-la para obter
energia, necessrio
que esta glicose receba
uma etiqueta ao
entrar na clula.
Essa etiqueta a
adio de um grupo
fosfato no sexto
carbono da molcula
de glicose por isso
o composto formado
se chama glicose-6fosfato. Quem faz
essa adio a enzima
hexocinase, sobre a
qual voc aprender
mais na disciplina
Bioqumica II.

fosfato, o primeiro passo da via de utilizao de glicose pelas clulas. Esta


enzima foi cristalizada e teve sua estrutura tridimensional determinada
na ausncia e na presena de seu substrato, a glicose (Figura 20.6).

Domnio 1

Glicose

Aberta

Domnio 2

Fechada

Figura 20.6: Estrutura da hexocinase na ausncia e na presena de seu substrato.


Do lado esquerdo, esto representados os dois domnios da estrutura desta enzima,
e a poro onde a glicose se ligar (stio ativo) est indicada pela seta. Sem o
substrato, dizemos que a estrutura desta enzima est aberta. J do lado direito,
voc v a hexocinase fechada, ajuste estrutural que ocorreu aps a ligao do
substrato enzima.

192 C E D E R J

20 MDULO 1

Como voc pde ver na Figura 20.5, h uma grande diferena entre

AULA

as estruturas da hexocinase antes e depois da ligao do seu substrato


a glicose. Esta enzima sofre uma mudana de conformao induzida pelo
substrato um ajuste induzido - que aproxima seus dois domnios. Essa
aproximao coloca mais bem posicionados os grupos funcionais dos
aminocidos que vo participar da adio do fosfato glicose, tornando
esta uma reao energeticamente favorecida.

!
Trs possibilidades para o stio ativo de uma enzima
1. Ser de forma geomtrica perfeitamente complementar ao substrato
e permitir seu encaixe assim como uma chave se encaixa na fechadura
correta.
2. Ser de forma geomtrica complementar a do estado de transio da
reao.
3. Sofrer um ajuste da sua forma induzido pela ligao do substrato, o qual
influenciou outras interaes entre os grupos laterais dos aminocidos da
enzima, alterando sua conformao.
Isso no quer dizer que essas possibilidades sejam excludentes. Por exemplo, o
ajuste induzido pode tornar o stio ativo complementar ao estado de transio
da reao, ou, ento, o ajuste induzido pode tornar o stio ativo da enzima
complementar ao substrato, mas deixando-o em um ambiente diferente do
meio aquoso no qual ele (o substrato) se encontrava. Em casos, por exemplo,
em que uma reao favorecida em um meio hidrofbico, ela passa a ser mais
favorvel se o stio ativo esconde o substrato do meio aquoso.

ATIVIDADE
2. Como funciona uma enzima?

Imagine que voc um pesquisador que recebe, em seu laboratrio, um


estudante de graduao procurando estgio. Um dos projetos que voc tem
a oferecer a este estudante a caracterizao de duas enzimas purificadas
de clulas de fgado; voc mostrou uma imagem da estrutura tridimensional
de cada uma das protenas a ele. O estudante, recm-ingresso na faculdade,
ficou olhando para a imagem e lhe perguntou em seguida:
Como os substratos se ligam a estas enzimas?
Sabendo que uma das enzimas se liga de acordo com o modelo chave e
fechadura e outra, por ajuste induzido, explique para o estudante como
seus substratos interagem com as enzimas.
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C E D E R J 193

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte II: J ouviu falar em stio ativo?

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RESPOSTA COMENTADA

Na posio de um orientador solcito, voc explicou a seu aluno que


a enzima que se liga ao substrato obedecendo o modelo chave e
fechadura possui seu stio ativo geometricamente complementar
ao substrato. Assim, a molcula do substrato se encaixa fsica e
perfeitamente na regio da enzima responsvel pela catlise. J a
enzima que interage com o substrato por ajuste induzido tem seu
stio ativo com uma forma diferente da do substrato; quando essa
molcula se liga enzima, promove mudanas conformacionais na
estrutura da protena que fazem com que ela se ajuste presena
do substrato, colocando-o em contato com os resduos do stio ativo
fundamentais catlise da reao.

FATORES QUE PODEM INTERFERIR NAS REAES


ENZIMTICAS
Como voc viu at agora, a formao do stio ativo e sua interao
com o substrato dependem de interaes moleculares que mantm ou
influenciam na estrutura tridimensional da enzima.
A estrutura ntegra de uma protena aquela na qual a protena
capaz de exercer suas funes chamada estrutura nativa. Esta estrutura
URIA E GUANIDINA
So agentes
desnaturantes de
protenas.
O mecanismo de
atuao destes dois
compostos ainda
controverso, mas
acredita-se que a ao
desnaturante da uria
e do hidrocloreto
de guanidina possa
ser decorrente
de elevaes na
solubilidade de
grupos da protena,
desestabilizando
sua estrutura.

194 C E D E R J

nativa pode ser afetada por vrios fatores, em conseqncia de esses


fatores produzirem distrbios extensos na estrutura tridimensional da
protena. Esses distrbios capazes de tornar uma protena no-funcional
e, no caso das enzimas, uma enzima no-cataltica provocam o que
chamamos de desnaturao de protenas. A desnaturao de protenas
(incluindo as enzimas) pode se dar por:
aquecimento;
variaes de pH;
presena de solventes orgnicos;
detergentes;
molculas como URIA ou GUANIDINA.

20 MDULO 1

Sobre os efeitos do aquecimento e das variaes de pH, vamos ver

AULA

mais detalhes daqui a pouco. Solventes orgnicos, como, por exemplo, o


etanol, bem como os detergentes, perturbam a estrutura da enzima por
favorecerem a exposio das regies apolares (normalmente mantidas
no interior da estrutura da protena) ao meio externo. Isso altera
dramaticamente a estrutura da enzima e de seu stio ativo, de forma
que a atividade cataltica perdida.
Outros agentes desnaturantes, como a uria ou a guanidina, so
timos formadores de pontes de hidrognio. Como pontes de hidrognio
so importantes para manter a estrutura nativa das protenas, estas
substncias promovem a sua desnaturao.
Todas estas condies (incluindo o aquecimento e as variaes
de pH) levam ao rompimento das interaes no-covalentes entre os
resduos de aminocidos, presentes na protena, que so responsveis
por sua estrutura, pela geometria do stio ativo e pelo posicionamento
dos grupos funcionais presentes neste.

MAIS CIDO, MAIS BSICO COMO ISSO INTERFERE NA


ATIVIDADE DAS ENZIMAS?
As enzimas apresentam um pH timo para o seu funcionamento,
no qual sua atividade cataltica mxima. Em pHs maiores ou menores,
sua atividade diminui.
Isso acontece porque as cadeias laterais de alguns aminocidos
apresentam grupos protonveis, ou seja, grupos que podem ser protonados
ou desprotonados em funo do pH do meio (voc viu esse assunto nas
Aulas 9 e 10, sobre titulao de aminocidos). Esses grupos podem:
(1) fazer parte do stio ativo, e a mudana no seu grau de protonao
ir influenciar diretamente a ligao do substrato; ou
(2) podem ser importantes para a estabilizao da estrutura da enzima
como um todo, indiretamente influenciando na estrutura do stio ativo.
Alm disso, variaes de pH tambm podem causar mudanas de
ionizao do substrato, afetando sua ligao enzima.
Para ver um exemplo do efeito do pH sobre a atividade de uma
enzima, veja o Grfico 20.1:

C E D E R J 195

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte II: J ouviu falar em stio ativo?

Grfico 20.1: Atividade da enzima amilase salivar em funo do pH do meio em


que ela se encontra

Atividade enzimtica

Valor de pH em que
a amilase salivar
apresenta maior
atividade pH timo.

2 3

5 6

9 10 11 12

pH

No grfico que voc acabou de ver, apresentamos o efeito do pH


sobre a atividade da amilase salivar (tambm conhecida como ptialina).
Esta enzima est presente na nossa saliva e responsvel pela quebra de
amido, durante a mastigao. Se voc reparar, o grfico mostra que esta
enzima funciona to melhor quanto mais perto de 7,0 o pH estiver.
A faixa de pH na qual a enzima funciona melhor pode fornecer
pistas sobre que aminocidos esto envolvidos na sua atividade. Mudanas
de atividade em pHs prximos a 7,0 devem ser decorrentes da protonao/
desprotonao de resduos dos His, enquanto mudanas de atividades em
pHs mais bsicos (em torno de 9,0) refletem a protonao/desprotonao
de Arg e Lis e, em pHs mais cidos (prximos a 3,0), resultam da
protonao/desprotonao de Glu ou Asp.
No caso da amilase salivar que voc acabou de ver, o pH timo
em torno de 7,0. Isso ocorre por causa da combinao de resduos cidos
presentes em um domnio desta protena (domnio A) e bsicos presentes
no outro domnio da protena (domnio B), ambos importantes para a
catlise de uma reao por essa enzima.

196 C E D E R J

20 MDULO 1
3

3. De onde cada enzima?


Analise as informaes a seguir:

2
Boca
Esfago
Fgado
Estmago
Pncreas
Vescula
biliar
Clon
Intestino
delgado

3
Secreo
digestria

pH
aproximado

Saliva

7,0

Suco gstrico

2,0

Suco
pancretico

7,8 a 8,2

Bile

7,2

Suco entrico

6,5 a 7,5

Pepsina
Enzima responsvel pela
quebra de protenas no
estmago de diversos
animais, incluindo os mamferos. secretada na
cavidade estomacal junto
com o suco gstrico.
Quimotripsina
Enzima liberada no intestino delgado junto com
o suco pancretico. Atua
quebrando protenas inteiras ou parcialmente
digeridas, dando origem a
peptdeos ainda menores.

4
(A)

(B)

Atividade
enzimtica

Atividade
enzimtica

4
pH

7,5
pH

Com base nas informaes apresentadas, identifique as enzimas A e B


(qual a pepsina e qual a quimotripsina). Como voc chegou a esta
concluso?

C E D E R J 197

AULA

ATIVIDADE

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte II: J ouviu falar em stio ativo?

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________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
RESPOSTA COMENTADA

Esta atividade era um grande quebra-cabeas. Para chegar


resposta, voc provavelmente deve ter se dado conta de que, se a
pepsina uma enzima presente no suco gstrico (quadro 2), o seu
pH de atuao deve ser em torno de 2,0, que o pH dessa secreo
digestria (quadro 3). Analisando os grficos (quadro 4), podemos
concluir que a pepsina a enzima A, por ser esta a que apresenta
atividade em pH cido. Uma informao a mais: o motivo para a
pepsina funcionar somente em pHs cidos que essa enzima
secretada no estmago em uma forma precursora o pepsinognio.
o pH cido que ativa essa enzima, transformando-a em pepsina,
a qual capaz de quebrar as protenas que ingerimos naquele belo
bife do almoo.
O mesmo caminho voc deve ter feito para justificar a identificao
da enzima B como quimotripsina. Esta enzima est presente no suco
pancretico (quadro 2), o qual tem pH em torno de 8,0 (quadro
3). A enzima B (quadro 4) tem sua atividade mais alta em torno
deste valor de pH.
A figura do quadro 1 era s para voc se localizar quanto ao
posicionamento dos rgos do aparelho digestrio mencionados
no restante da atividade.

MAIS QUENTE, MAIS FRIO O QUE ACONTECE COM AS


ENZIMAS?
O aumento da temperatura causa um aumento na velocidade
das reaes catalisadas por enzimas, assim como ocorre para todas
as reaes qumicas. Isso acontece porque o calor (energia trmica)
se converte em energia cintica para as molculas. Esse aumento da
energia de movimento fornece s molculas energia para se sobreporem
a barreira energtica de uma reao. Assim, para uma reao, quanto
mais quente, melhor.

198 C E D E R J

20 MDULO 1

Devemos lembrar que as enzimas so protenas. Essas molculas

AULA

desnaturam em decorrncia do aquecimento (no deixe de ler o boxe


a seguir), de forma que sua atividade tende a diminuir quando a
temperatura aumenta alm da temperatura normal do organismo (no
caso dos humanos, em torno de 37C). A conseqncia destes dois efeitos
opostos pode ser vista no Grfico 20.2. Esse grfico mostra o efeito da
temperatura sobre a atividade de uma enzima.

Protenas desnaturadas!

Foto: Steve Woods

Falamos at agora em desnaturao de protenas por detergente, por pH,


por temperatura. Como visualizar isso no dia-a-dia? Mais uma vez, voc vai
ver como sempre esteve prximo a conceitos importantes da Bioqumica
sem nem se dar conta. Duvida? Olhe as imagens a seguir:

Foto: Marco Michelini

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/831221

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/552765

Qual a diferena entre a primeira e a segunda imagem? A desnaturao


trmica da protena que compe a clara do ovo a albumina.

C E D E R J 199

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte II: J ouviu falar em stio ativo?

Grfico 20.2: Efeito da temperatura na atividade de uma enzima hipottica.


Temperatura tima de
funcionamento desta
enzima

Atividade
enzimtica

10

20

30

40

50

60

70

Temperatura (C)

No exemplo do Grfico 20.2, voc pode notar que h dois


momentos: um em que a atividade enzimtica aumenta, e outro em
que ela diminui. De 0 a 40C, conforme a temperatura aumenta, a
atividade da enzima tambm aumenta. Em outras palavras, o efeito do
aquecimento na reao o de aumentar sua velocidade. No entanto,
se continuamos aumentando a temperatura do meio em que est
acontecendo a reao, a atividade da enzima comea a diminuir esta
protena est sofrendo desnaturao e, por esse motivo, sua atividade
comea a ficar comprometida. Administrando mais calor ao meio,
causaremos uma desnaturao completa da protena, e mais nenhuma
atividade detectada.
No sei se voc se lembra, mas, na Aula 2, comentamos sobre
alguns problemas de se ter febre alta, e mencionamos a desnaturao
de protenas e perda de atividade de algumas enzimas. Agora que voc
acabou de entender o porqu de a febre ser realmente um perigo (por
aumentar a temperatura do nosso corpo e poder causar a perda de
atividade de diversas enzimas), vale a pena voltar e reler aquele trecho.

200 C E D E R J

20 MDULO 1
AULA

CONCLUSO
Quando voc estiver cursando a disciplina Bioqumica II, vai
aprender como funciona o metabolismo energtico do seu organismo.
L, voc ver como acontece a quebra da glicose para obter energia, a
respirao das clulas que utiliza o oxignio que sorvemos do ar, a sntese
e a degradao das gorduras, dentre outras vias metablicas.
O que isso tem a ver com a aula de hoje? O fato de todos estes
processos envolverem (e dependerem) da participao de milhares de
enzimas diferentes. Da a enorme importncia de estudarmos como estas
protenas funcionam (e por que podem no funcionar).

ATIVIDADE FINAL

E agora?
Voc acabou de aprender que as enzimas do nosso organismo apresentam uma
temperatura tima para sua atividade em torno de 37C. Pois bem fao um
desafio a voc. Observe o grfico a seguir, que se refere s atividades (em funo
da temperatura) de trs enzimas de seres vivos:

Atividade
relativa da
enzima

37

95

Temperatura (C)

C E D E R J 201

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte II: J ouviu falar em stio ativo?

a. Qual(is) curva(s) pode(m) representar a(s) atividade(s) de uma enzima de


mamfero? Por qu?
( ) tracejada

( ) pontilhada

( ) linha cheia

_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________

b. Pense nos ecossistemas do planeta Terra. Agora, diga um ser vivo que venha sua
cabea que possa ter uma enzima cuja atividade mxima seja em uma temperatura em
torno de 4C. Escreva em sua resposta o ser vivo e seu habitat.
Ser vivo: _____________________________________________________________________
Habitat: ______________________________________________________________________

c. Voc consegue imaginar um ser vivo que exista em uma temperatura prxima a 95C,
de forma que a atividade mxima de uma de suas enzimas acontea nesta temperatura?
Se conseguir, cite-o e diga onde ele vive.
Ser vivo: _____________________________________________________________________
Habitat: ______________________________________________________________________
RESPOSTA COMENTADA

Fazer esta atividade era importante para voc se dar conta de que
nos mamferos, que tm sua temperatura corporal constante em
torno de 37C, que a atividade mxima das enzimas acontecer
tambm a esta temperatura. Aumentar a temperatura acima de 40C
para um mamfero iniciar um processo de desnaturao de suas
enzimas; abaix-la para menos de 34C fazer com que as enzimas
deste organismo no funcionem direito, embora no tenham sido
desnaturadas (estejam s inativas). Da a preocupao com quadros
de febre alta e hipotermia (baixa temperatura corporal).
Exatamente pelo que acabamos de dizer no pargrafo anterior que
a nica curva que pode representar a atividade de uma enzima de
mamfero, dentre as trs apresentadas no grfico da questo, a de
linha pontilhada (curva do meio).
Na letra (b), perguntamos sobre ecossistemas cuja temperatura seja
4C. Lembre-se de que pensar nos ursos polares do Alasca assim
como nos pingins da Patagnia no responder questo, pois
estes animais, embora vivam em ambientes frios, mantm as suas
temperaturas corporais constantes.
Algumas possibilidades de habitats e de seres vivos que se encaixam
no perfil da enzima que mostramos so crustceos que vivem nos

202 C E D E R J

20 MDULO 1

oceanos, a uma profundidade grande, na qual a luz do sol no capaz

AULA

de fornecer calor para aquecer a gua (ou lugares onde, mesmo a


presena do sol no capaz de aquecer a gua). Camares, lagostas
e lagostins, dentre outros, so seres em que voc pode ter pensado.
Peixes como o salmo e o bacalhau, que vivem em guas prximas
ao plo norte e, portanto, bastante frias tambm podem ter vindo
sua cabea para responder questo, e so opes corretas.
Se voc pensou em algas, por ter pensado em oceanos e lagos, no
acertou a questo por pouco! Estes seres vivos normalmente no vivem
em profundidade, onde a temperatura baixa, porque precisam da
luz do sol para fazer fotossntese.
E na letra c? Quase incrvel, mas h organismos que vivem em
temperaturas altssimas, como as arqueias. Esses organismos so
unicelulares e, por viverem em condies muito extremas de temperatura,
pH e salinidade, so denominados extremfilos. As arqueias podem ser
encontradas tanto em regies muito frias (abaixo de zero grau, onde
a gua s no congela por estar submetida alta presso, como o
caso das fossas abissais) quanto muito quentes, como nos

GISER

GISERES

e lagos termais, como no parque de Yellowstone, nos Estados Unidos

Fonte de gua quente


que lana no ar jatos
de gua muito quente
(ou vapor dgua)
em intervalos de
tempo regulares.

(se voc no se lembra, este parque aquele onde moram os ursos


Z Colmia e seu amigo Catatau). A temperatura nesses locais pode
chegar a 95C, exatamente a temperatura de atividade mxima da

Foto: Cristiano Galbiati

enzima que mostramos no grfico desta questo.

Figura 20.7: Um giser borbulhando gua.


Fonte: http://www.sxc.hu/photo/822419

C E D E R J 203

Foto: Cristiano Galbiati

Bioqumica I | Sobre as famosas enzimas parte II: J ouviu falar em stio ativo?

Figura 20.8: Giser em atividade.

Foto: Jeremy Doorten

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/766674

Figura 20.9: Lago termal no Parque Nacional de Yellowstone.


Fonte: http://www.sxc.hu/photo/840559

204 C E D E R J

20 MDULO 1
AULA

RESUMO

O stio ativo de uma enzima a regio de sua estrutura qual o substrato se liga e
que promove a catlise da reao. Existem dois modelos que explicam a interao
de uma enzima com seu substrato: o modelo chave e fechadura e o modelo de
ajuste induzido.
Pelo primeiro modelo, a enzima tem seu stio ativo de forma geomtrica
complementar ao substrato, de tal maneira que os dois se encaixam perfeitamente
e a catlise da reao tem incio. No entanto, este modelo no explica todas
as reaes enzimticas, uma vez que a ligao do stio ativo perfeitamente
complementar ao substrato pode, em muitos casos, formar um complexo enzima/
substrato de tal ordem estvel que a reao se torna energeticamente invivel.
Uma explicao para as reaes que acontecem sem stio ativo e substrato de
geometria complementar o ajuste induzido, onde o substrato, ao se ligar
enzima, provoca alteraes na conformao desta protena que fazem com que
resduos importantes reao a ser catalisada se aproximem e esta acontea.
Alguns fatores alteram a atividade cataltica de uma enzima, como o pH e a temperatura
em que ela se encontra. Cada enzima possui um pH timo e uma temperatura tima
de funcionamento. No caso do pH, este valor depender do meio em que ela atua
e dos resduos de aminocidos envolvidos na catlise. J no caso da temperatura, o
valor timo se refere em geral temperatura do animal (no caso dos animais que
controlam suas temperaturas corporais) ou do ambiente em que ele vive (no caso
daqueles que no controlam a temperatura corporal).

INFORMAO SOBRE A PRXIMA AULA


Na prxima aula, voc vai estudar mais sobre a velocidade de reao das enzimas,
no campo de estudo que chamamos cintica enzimtica. At l!

C E D E R J 205

AULA

Cintica enzimtica:
partindo da prtica
para a teoria

21
Meta da aula

objetivos

Apresentar teoria de cintica enzimtica


e relacion-la aos resultados obtidos por
voc nas aulas prticas sobre
este assunto.

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:


1

definir a constante de Michaelis (KM);

relacionar KM e afinidade de uma enzima


por seu substrato;

identificar inibidores irreversveis, reversveis


competitivos e reversveis no-competitivos;

elaborar um relatrio de aula prtica.

Pr-requisito
Tenha em mos o roteiro da aula prtica
com todos os resultados obtidos por seu
grupo. Voc vai precisar de tudo isso
para confeccionar, ao final desta aula,
um relatrio.

Bioqumica I | Cintica enzimtica: partindo da prtica para a teoria

!
Colocamos como um dos objetivos desta aula a elaborao do relatrio da aula
prtica, porque a partir dos fundamentos tericos apresentados nela que voc
vai poder construir os grficos solicitados em cada um dos itens de seu roteiro
de prtica e vai responder a todas as questes do estudo dirigido.

INTRODUO

Diversas doenas no nosso organismo podem ser causadas por disfunes


nas atividades de algumas enzimas. Vejamos alguns exemplos:
Fenilcetonria: doena causada por uma deficincia na enzima que metaboliza
o aminocido fenilalanina. J comentamos sobre ela na Aula 8; s para
relembrar, o acmulo desse aminocido pode causar retardo mental, retardo
no desenvolvimento psicomotor, dentre outros problemas.
Adrenoleucodistrofia: doena causada pela deficincia na enzima que
metaboliza gorduras de cadeias muito longas. Essas gorduras no
metabolizadas se acumulam, especialmente no crebro, e passam a interferir
na capa de gordura que envolve os neurnios e isola o impulso nervoso, a
bainha de mielina. uma doena neurodegenerativa (para saber mais, veja
o boxe O leo de Lorenzo).
Hemlise (destruio de hemcias): dentre muitas causas possveis para esta
doena, uma delas a deficincia em uma enzima que participa da via de
sntese de acares de cinco carbonos, uma via metablica importante nas
hemcias. A deficincia nesta enzima, a glicose-6-fosfato desidrogenase
(G6PD), compromete a integridade das membranas das hemcias; o
diagnstico feito monitorando a atividade da G6PD.
Doena de Gaucher: um produto do metabolismo de gorduras, os
glucocerebrosdeos, no metabolizado e se acumula nos tecidos,
principalmente no fgado e bao. Isso causa anormalidades no funcionamento
destes rgos. O tratamento feito pela reposio da enzima que no
metabolizou os glucocerebrosdeos.
Tanto para monitorar o acontecimento de algumas doenas quanto para
trat-las, importante conhecer bem o funcionamento das enzimas.
Voc j viu na Aula 21, com detalhes, que o pH e a temperatura do meio de
reao afetam bastante a atividade da enzima; na aula prtica, voc mesmo
pode testar o efeito da temperatura sobre a atividade enzimtica.
O tipo de estudo que voc fez na aula prtica, chamado cintica enzimtica, a
abordagem mais clssica para o estudo das enzimas, e at hoje fundamental
para a total compreenso do funcionamento dessas protenas.

208 C E D E R J

21 MDULO 1

Que tal entender os princpios bsicos da cintica enzimtica aproveitando

AULA

os resultados obtidos na aula prtica?

O leo de Lorenzo
Este filme conta a histria
de um garoto sobre quem
se descobriu, aos seis anos,
que tinha problemas mentais conseqentes de uma
doena, diagnosticada como
adrenoleucodistrofia (ADL).
Esse mal, incurvel, provoca
a degenerao do crebro
e leva o doente morte
em poucos anos. Os pais
do menino, representados
por Susan Sarandon e Nick
Nolte, ficam descontentes
com os prognsticos mdicos e resolvem estudar a
doena por conta prpria.
O filme foi feito em 1992, sob a direo de George Miller, e
vale a pena conferir!

MAIS SUBSTRATO = REAO MAIS RPIDA?


Uma das experincias mais comuns no estudo de uma enzima
a medida de sua atividade em funo da concentrao de seu substrato.
Esta experincia feita da seguinte forma:
1. Em diferentes tubos de ensaio, coloca-se as mesmas quantidades
de enzima, variando apenas a quantidade de substrato.
2. Aps determinado tempo de reao (previamente estimado
para a enzima em questo de acordo com suas caractersticas cinticas),
mede-se a quantidade de produto formado. Para isso, possvel usar
diferentes metodologias, cuja escolha depende do produto da reao.
No caso da aula prtica, o produto era colorido e sua formao podia
ser medida em um espectrofotmetro, lembra-se?
Observe o grfico obtido quando a atividade da enzima fosfatase
alcalina foi medida em funo da variao da concentrao de seu
substrato, o P-NPP.

P-NPP

p-NPP, ou para-nitrofenol-fosfato, um
composto que serve
de substrato para
a enzima fosfatase
alcalina, e que
amplamente utilizado
para ensaios qumicos
envolvendo essa
protena. Quando
metabolizado pela
enzima, o p-NPP se
transforma em paranitro-fenol, p-NP,
que um composto
de cor amarela,
visualizvel por
espectrofotmetro.

C E D E R J 209

Bioqumica I | Cintica enzimtica: partindo da prtica para a teoria

Grfico 21.1: Atividade da enzima fosfatase alcalina em funo da


quantidade de substrato (p-NPP) adicionada ao meio de reao

Atividade (nmoles pNP/min.g enzima)

14
12
10
8
6
4
2
0
0

50

100

150

200

[pNPP] (M)

Quanto mais substrato adicionamos reao, maior a atividade da


enzima. Assim, fica claro que um fator importante para a velocidade
da reao a concentrao de substrato, que representaremos, a partir de
agora, como [S]. Entretanto, um complicador para tais medidas o fato
de que a [S] varia durante o curso da reao, j que o substrato vai sendo
convertido em produto.
Uma maneira de contornar este problema sempre medir o produto
da reao quando ela ainda est acontecendo em sua velocidade inicial
(V0 l-se v zero), ou seja, quando a diminuio da concentrao de
substrato ainda insignificante. Isso possvel se adicionarmos todos os
componentes da reao ao tubo de ensaio e, somente a, colocarmos a
enzima e medirmos a formao do produto. O intervalo de tempo entre
colocar a enzima e medir a formao do produto um parmetro chave.
Na nossa experincia, usamos um tempo de reao que garantia que
estvamos trabalhando em velocidade inicial. Com este procedimento,
garantimos que a variao na [S] fosse insignificante e, por isso, podemos
considerar seu valor constante.

210 C E D E R J

21 MDULO 1

Observando o Grfico 21.1, voc pode ver que, em concentraes

AULA

relativamente baixas de substrato, a velocidade inicial da enzima (V0)


aumenta quase que linearmente em funo do aumento da [S]. medida
que aumentamos a [S], a resposta de V0 aumentando cada vez
menor, at que, em determinado ponto, o aumento de V0 praticamente
nulo. Neste momento, a enzima alcanou sua capacidade mxima de
catlise. O plat que voc v no Grfico 21.1 corresponde ao alcance da
velocidade mxima da reao, ou Vmx (l-se v mxima).
Dois importantes cientistas do incio do sculo XX, LEONOR
MICHAELIS e MAUDE MENTEN, descobriram que a formao do complexo
enzima-substrato (ES), que voc aprendeu com tantos detalhes na Aula 20,
influencia diretamente a velocidade mxima de catlise de uma enzima em
uma reao. Eles propuseram que a enzima, inicialmente, se combinava
com o substrato de forma rpida e reversvel. O passo seguinte, mais lento,
era a dissociao de ES, gerando enzima livre e produto:

Enzima se liga ao substrato, formando de maneira reversvel um


complexo:
E + S ES

O substrato convertido em produto, que se dissocia lentamente da


enzima, que fica livre para uma nova catlise:
ES E + P

LEONOR MICHAELIS
(1875-1949)
Leonor Michaelis,
bioqumico alemo,
dedicou-se em toda
sua carreira ao estudo
de parmetros fsicoqumicos aplicados
Biologia e Medicina.
Alm da famosa
equao para explicar
a cintica das reaes
enzimticas, ele foi
fundamental para que
hoje seja possvel fazer
ondas permanentes
nos cabelos.
Ele descobriu que a
protena queratina
que compe os
cabelos solvel
em uma determinada
substncia, o cido
tiogliclico.
Essa substncia
utilizada na primeira
etapa do permanente,
reduzindo as
pontes dissulfeto.

MAUDE LEONORA MENTEN (1879-1970)


Maude Leonora Menten, mdica canadense, foi uma
das cientistas mais versteis e inovadoras da Qumica
no incio do sculo XX. Viajou, na companhia de
Michaelis, para Berlim, onde desenvolveu junto com
este pesquisador seu trabalho mais notvel: a equao
de Michaelis e Menten. O mais interessante que, a
despeito de sua paixo pela investigao cientfica, ela
tambm se dedicava msica, s artes (existem algumas
telas suas expostas em uma galeria de arte em Pitsburgo,
nos EUA) e, pode acreditar, escalada de montanhas.

C E D E R J 211

Bioqumica I | Cintica enzimtica: partindo da prtica para a teoria

Como a segunda reao mais lenta, ela a etapa que limita


a converso de substrato em produto. A velocidade de formao do
produto ser proporcional concentrao de ES, ou seja, a rapidez
com que o complexo ES se desfaz determina a velocidade de formao
do produto.
Com o que dissemos, voc agora sabe que uma enzima pode existir
sob duas formas: livre ou associada ao substrato. Quando a concentrao
de substrato no meio de reao baixa, a maior parte das enzimas est
livre; logo, a velocidade da reao ser proporcional unicamente [S].
J quando oferecemos muito substrato ao meio de reao, ou seja,
quando a [S] muito maior do que a concentrao de enzima, todas as
enzimas se encontram na forma ES. Nesse ponto, a velocidade mxima
da reao alcanada.
SATURANTE
A concentrao
de substrato dita
saturante aquela que
ocupa todos os stios
ativos das enzimas
presentes em um meio
de reao.

Quando uma reao atinge sua Vmx, dizemos que a [S] SATURANTE.
Afinal, se todas as enzimas esto ocupadas com substrato, aumentar
mais ainda a [S] no ir resultar em nenhum aumento da velocidade
da reao.
Quando uma enzima misturada com seu substrato em concentrao
saturante, rapidamente se inicia a formao de diversos complexos ES.
Este perodo da reao denominado pr-estado estacionrio, e ele
marcado pelo aumento expressivo da concentrao de ES. O pr-estado

ESTADO

estacionrio seguido do ESTADO ESTACIONRIO, no qual a concentrao de

ESTACIONRIO

ES constante ao longo do tempo (Figura 21.1) (a durao do pr-estado

Momento da
reao em que a
concentrao do
complexo ES
constante.
O conceito de estado
estacionrio foi
formulado por dois
pesquisadores, Briggs
e Haldane, em 1925.
Haldane, inclusive,
foi um enzimlogo
importante, que
voc j conheceu na
Aula 20, quando
mencionamos
que ele participou
da elucidao do
mecanismo de ligao
da enzima ao seu
substrato.

estacionrio to curta que quase impossvel medi-lo).

212 C E D E R J

[S] inicial

Concentraes

Concentraes

[P] final

[E]
[ES]
Tempo

Tempo
Substrato
Produto

Enzima
Complexo
enzima-substrato

Grfico C, mostrando os tempos em que acontecem


os processos apresentados nos grficos A e B, uma
vez que so dependentes uns dos outros.
[S] inicial

Concentraes

[P] final

[E]
[ES]
Tempo
Substrato
Produto

Enzima
Complexo
enzima-substrato

Figura 21.1: Variaes da concentrao de produto, substrato, enzima e do complexo enzima-substrato em uma
reao, ao longo do tempo. No grfico A, voc v que a concentrao de substrato diminuiu ao longo do tempo,
ao passo que a do produto, aumenta. No grfico B, voc pode observar que a concentrao de enzima livre no
incio da reao diminui rapidamente e s retorna a seus valores iniciais no final da reao. Nesse meio tempo,
toda a enzima est envolvida na reao, associada ao substrato formando o complexo ES. A regio sombreada
neste grfico indica o estado estacionrio, e a regio imediatamente antes do sombreado, o momento pr-estado
estacionrio. O grfico C mostra a juno dos outros dois, para que voc possa acompanhar ao mesmo tempo
todas as variaes de concentrao de enzima, substrato, complexo ES e produto ao longo da reao, uma vez
que estes processos acontecem e esto relacionados.

C E D E R J 213

21 MDULO 1

Grfico B, representando as concentraes de


enzima livre e de enzima associada ao substrato,
ao longo do tempo.

AULA

Grfico A, representando as concentraes de


substrato e produto em funo do termo.

Bioqumica I | Cintica enzimtica: partindo da prtica para a teoria

Somente quando o substrato comea a sair da concentrao saturante (por ter sido convertido em produto) que a reao sai do estado
estacionrio. Normalmente, nesta situao, ela se encaminha para o seu fim:
o substrato praticamente acaba, grande quantidade de produto formada
e o complexo ES se desfaz, deixando a enzima (E) livre novamente.
Na verdade, essas variaes entre os estados durante uma reao
so quase que instantneas. Assim, em condies laboratoriais, sempre que
fazemos a medida da cintica da reao catalisada por uma enzima, mesmo
em V0, estamos trabalhando com a reao j no estado estacionrio.

Elucidando numericamente uma reao enzimtica a


equao de Michaelis e Menten
A fim de relacionar a velocidade de uma reao enzimtica
com a concentrao de substrato usada, Leonor Michaelis e Maud
Menten, pesquisadores que comearam a elucidar a cintica das reaes
enzimticas como mencionamos antes, propuseram a seguinte frmula,
batizada de equao de Michaelis e Menten:

Equao de Michaelis e Menten


V0 =

Vmx [S]
KM + [S]

!
Caso voc queira conhecer mais profundamente a equao, assim como a sua
deduo matemtica, consulte qualquer livro de Bioqumica, como os que voc
encontra na biblioteca do seu plo (por exemplo, Lehninger Princpios de
Bioqumica). O importante para ns, nesta aula, entender como podemos
us-la para determinar os parmetros cinticos de uma enzima, que serviro
para compreendermos seu funcionamento. Alm disso, fundamental voc ter
sempre em mente que todos esses estudos e dedues so sempre feitos em
condies que garantam que a velocidade da reao medida a velocidade
inicial, ou seja, que ainda no h uma variao significativa da [S].

Embora parea complicada, esta equao apenas relaciona,


numericamente, os parmetros de uma reao sobre os quais j
conversamos na seo anterior desta aula: velocidade inicial, velocidade
mxima e concentrao de substrato ([S]). A novidade nessa expresso

214 C E D E R J

21 MDULO 1

matemtica o termo KM, do qual no falamos ainda, mas que tem uma

AULA

enorme importncia para o estudo da cintica das enzimas.


O KM a constante de Michaelis, que corresponde relao entre as
constantes de velocidade de formao e dissociao do complexo ES (como
voc poder ver melhor se estudar a deduo da equao de Michaelis e
Menten). Este parmetro da cintica de uma enzima pode nos trazer muitas
informaes sobre seu funcionamento, mas vamos com calma. Primeiro,
vamos conhecer uma estratgia para se obter o valor de KM.
Imagine que faamos um grfico no qual estejam relacionadas
velocidade inicial da reao e concentrao de substrato (Grfico 21.2):

Grfico 21.2: Relao entre a velocidade inicial da reao e a concentrao


de substrato consumida durante uma reao

V0 (M/min)

Vmx

V0 = 1 Vmx
2

[S] (mM)

Como voc pode ver neste grfico, para uma determinada


concentrao de substrato, a velocidade inicial da reao apresenta valor
numrico igual metade do valor da Vmx que esta reao alcanar.
Escrevendo isso por uma frmula, como no grfico, temos:
V0 =

1
V
2 mx

C E D E R J 215

Bioqumica I | Cintica enzimtica: partindo da prtica para a teoria

Ento, para esta [S], podemos substituir o termo V0 na equao


1
de Michaelis e Menten pela expresso V0 =
V :
2 mx
V0 =

Vmx [S]
Vmx [S]
1

Vmx =
KM + [S]
KM + [S]
2

Voc deve se lembrar de que, matematicamente, possvel dividir


os dois lados de uma equao por um mesmo nmero sem alterar seu
resultado. Assim, veja o que acontece quando dividimos os dois lados
da equao por Vmx:
1 Vmx
Vmx [S]
[S]
1
=

=
2 Vmx
KM + [S] Vmx
+ [S]
K
2
M
Agora, podemos fazer a multiplicao cruzada do denominador
de um lado com o numerador do outro:
[S]
1
=
KM + [S] = 2 [S]
KM + [S]
2
Continuando a resolver a expresso...
KM + [S] = 2 [S]
KM = 2[S] [S]
Logo...
KM = [S]

Esta expresso nos mostra que o valor do KM equivalente


concentrao do substrato que faz com que a velocidade inicial da reao
seja metade da velocidade mxima da reao.
Uma enzima que precise de uma quantidade de substrato pequena
para alcanar a metade da sua Vmx uma enzima capaz de se associar com
facilidade ao seu substrato. J uma enzima que precise de muito substrato
para que sua velocidade inicial chegue metade da Vmx uma enzima que
no se associa ao seu substrato to facilmente. Essa facilidade, maior ou
menor, de uma enzima se associar ao seu substrato chamada afinidade.
Quando dissemos que o KM fornece informaes importantes
sobre a cintica de uma enzima, era neste ponto que queramos chegar:
a afinidade de uma enzima por seu substrato.

216 C E D E R J

21 MDULO 1

Se o KM equivale concentrao de substrato com a qual a

AULA

velocidade inicial da reao metade da Vmx, uma enzima com KM muito


alto precisa de muito substrato para atingir metade da sua velocidade
mxima. J um valor de KM baixo significa que a enzima atinge essa
velocidade na presena de pouco substrato.
Podemos concluir, a partir destas informaes, que o valor de KM
inversamente proporcional afinidade da enzima por seu substrato: quanto
maior o KM, menor a afinidade da enzima por seu substrato; quanto menor
o KM, maior a afinidade.

!
O KM equivale ao valor da concentrao de substrato que faz com que a reao
atinja metade da sua Vmx. Quanto menor for a quantidade de substrato para
isso acontecer, maior a afinidade da enzima por seu substrato.
Assim:
Enzima com ALTO KM = enzima com BAIXA afinidade pelo substrato.
Enzima com BAIXO KM = enzima com ALTA afinidade pelo substrato.

possvel que voc, agora, esteja um pouco zonzo com tantos


conceitos e tantos nmeros em uma aula s. Por isso, nada melhor do
que fazer uma atividade para consolidar o que voc estudou at agora,
verificar se j tem tudo claro na cabea ou precisa reler algum trecho da
aula. Mos obra!

ATIVIDADE
1
2
1. Qual mais afim?
Um dos passos mais importantes do metabolismo de glicose
dentro de uma clula etiquetar essa glicose para ela poder ser usada
pelas vias de destino e, ao cabo, gerar energia etc. Essa etiqueta que
colocada na glicose a adio de um grupamento fosfato no sexto carbono
da cadeia que forma este acar. Veja um esquema da reao:

Glicose glicose-6-fosfato
Existem diferentes isoformas da enzima que catalisa a converso da
glicose em glicose-6-fosfato (G6P). Essas isoformas so enzimas levemente
diferentes, que catalisam a mesma reao, e que so expressas em tecidos
diferentes no nosso corpo.

C E D E R J 217

Bioqumica I | Cintica enzimtica: partindo da prtica para a teoria

No crebro, a isoforma denominada hexocinase, enquanto no fgado a


enzima denominada glicocinase. Veja a cintica das reaes catalisadas
por estas duas enzimas:
Atividade das enzimas hexocinase e glicocinase em funo da
concentrao de seu substrato, a glicose.

% Velocidade mxima

100
80
60
Hexocinase
Glicocinase

40
20
0
0

10 12 14 16

18 20 22 24 26 28 30

[Glicose] (mM)

Analisando o grfico e com as informaes que demos no enunciado,


responda:
a. Qual das duas enzimas precisa de uma maior concentrao de substrato
para atingir sua velocidade mxima?
( ) Hexocinase
( ) Glicocinase
b. O que KM?
________________________________________________________________
________________________________________________________________
c. Pela anlise do grfico, qual das duas enzimas apresenta maior KM?
( ) Hexocinase
( ) Glicocinase
d. Qual enzima apresenta maior afinidade pelo seu substrato (glicose)?
( ) Hexocinase
( ) Glicocinase
RESPOSTAS COMENTADAS

a. Observando o grfico, voc deve ter percebido que a glicocinase


alcana a velocidade mxima em uma concentrao de substrato
bem mais alta do que a hexocinase.
b. Como voc bem sabe, o KM, representa o valor da concentrao
do substrato em que a enzima atinge metade da sua Vmx.
c. Se voc realmente entendeu a definio de KM, no deve ter tido
nenhuma dificuldade em responder esta pergunta. Isto porque,

218 C E D E R J

muito mais alta de substrato do que a hexocinase, a concentrao


de substrato que ela precisa para atingir metade da Vmx tambm
mais alta. Portanto, seu K M mais alto do que o da hexocinase!
Na verdade, o KM da hexocinase para glicose de 0,1 mM, enquanto
o KM da glicocinase para a glicose de 10 mM.
d. Pelo grfico e pela anlise do KM das duas enzimas, possvel
concluir que a hexocinase apresenta muito maior afinidade pela
glicose do que a glicocinase. Afinal, quem tem maior KM tem menor
afinidade pelo substrato, e vice-versa.
S por curiosidade, a diferena na afinidade das duas enzimas e
os tecidos em que elas se encontram tm um motivo fisiolgico.
A concentrao basal de glicose no sangue de aproximadamente 4,5
mM. Assim, na faixa fisiolgica de concentrao de glicose, o crebro
pode usar a glicose em velocidade mxima, enquanto o fgado no.
Isso importante porque o fgado pode usar gorduras para gerar
energia para suas clulas, mas o crebro no, pois as molculas de
gordura se associam a protenas para circularem, o que as impede
de atravessar a barreira que h entre o sangue e o crebro (barreira
hemato-enceflica).

Como calcular precisamente os valores de KM e Vmx para uma


reao?
A equao de Michaelis e Menten pode ser algebricamente
transformada em outras equaes de maior utilidade experimental. Uma
transformao simples e muito til feita invertendo-se os numeradores
com os denominadores. Assim:

Equao de Michaelis e Menten:

Equao de Michaelis e Menten


com numeradores e
denominadores invertidos:

V0 =

1
V0

Vmx [S]
KM + [S]

KM + [S]
Vmx [S]

C E D E R J 219

21 MDULO 1
AULA

se a glicocinase chega velocidade mxima em uma concentrao

Bioqumica I | Cintica enzimtica: partindo da prtica para a teoria

Separando os componentes do numerador do lado direito da


expresso, temos:
1

V0

KM
[S]
=
Vmx [S]
Vmx [S]

Repare que na parcela do lado direito temos [S] sendo dividida por
[S]. Assim, esta equao pode ser simplificada:
1
V0

KM
1
=
Vmx [S] V
mx

Esta equao que obtivemos denominada equao de LineweaverBurk, em homenagem aos pesquisadores que a deduziram. Ela tambm
chamada de duplo recproco, assim como o grfico que ela gera, j
explicaremos por qu. Voc deve estar achando que no faz nenhuma
diferena aplicar a equao de Michaelis e Menten ou a de LineweaverBurk cintica de uma enzima. No entanto, a grande diferena aparece
quando voc plota os dados, obtidos experimentalmente, em um grfico:
a equao de Michaelis e Menten gera uma hiprbole, ao passo que a
de Lineweaver-Burk gera uma reta, muito mais fcil de analisar. Veja
um exemplo:

Grfico 21.3: O duplo recproco um grfico para cintica enzimtica em forma de


reta, obtido a partir do uso da equao de Lineweaver-Burk. No eixo y, o inverso da
velocidade inicial (1/V0); no x, o inverso da concentrao de substrato (1/[S]).

Km
Vmx

1
V0

1
M/min

Slope =

1
Vmx

220 C E D E R J

1
Km

1
[S]

1
[mM]

21 MDULO 1

No grfico gerado a partir da equao de Michaelis e Menten, no

AULA

trivial encontrar o ponto exato em que a velocidade inicial se iguala


metade da velocidade mxima. Em outras palavras, no fcil encontrar,
naquele tipo de grfico, o valor de Vmx e do KM. No entanto, no grfico
do duplo recproco, os dados obtidos geram uma reta, a qual cruza o eixo
y (que, neste caso, o inverso da V0) e o eixo x (que, neste tipo de grfico,
o inverso da [S]).
O valor em que a reta cortar o eixo y equivaler ao inverso da
velocidade mxima. O valor em que a reta cortar o eixo x equivaler ao
inverso de KM. Alm disso, a inclinao da reta pode ser obtida apenas
dividindo-se o KM pela Vmx.
Assim, s de olhar um grfico do duplo recproco e de fazer alguns
clculos bastante simples, encontramos as informaes importantes sobre
a cintica de uma enzima: o seu KM e sua Vmx.
At agora, voc viu como varia a velocidade de reao de uma enzima
em funo da concentrao de seu substrato. Voc viu que, aumentando-se
a concentrao de substrato, uma enzima tem sua velocidade de reao
aumentada at alcanar a Vmx.
No entanto, possvel que uma enzima, em condies ideais de
temperatura e pH e na presena de seu substrato, no seja capaz de realizar
sua catlise. Por qu? Veja na seo a seguir.

INIBIO DA ATIVIDADE DAS ENZIMAS


Uma enzima pode, mesmo na presena de seu substrato e em
condies timas para o seu funcionamento, no realizar catlise, ou ter
sua velocidade de reao diminuda. Isso pode acontecer se, no meio de
reao, houver aquilo que chamamos de inibidor enzimtico.
Um inibidor enzimtico uma molcula capaz de se associar
enzima e reduzir ou at zerar sua velocidade de catlise, isto , de gerar
produto a partir do substrato.
Existem dois tipos de inibidor: os irreversveis e os reversveis.
1. Inibidores irreversveis so aqueles que se ligam enzima,
modificando sua estrutura de tal forma que inutilizam permanentemente
essa protena.

C E D E R J 221

Bioqumica I | Cintica enzimtica: partindo da prtica para a teoria

2. Inibidores reversveis so aqueles que podem se dissociar da enzima e,


de acordo com a maneira como isso acontece, esto subdivididos em:
a. Inibidores reversveis competitivos: competem com o substrato pela
ligao ao stio ativo da enzima. Assim, se aumentamos a concentrao
de substrato, favorecemos o acontecimento da catlise por dois
mecanismos:
aumentando a chance de enzimas livres se associarem ao substrato em
vez de ao inibidor;
deslocando o inibidor da enzima. Por afinidade, o substrato pode fazer
com que a enzima se dissocie do inibidor e se associe a ele e, a partir
da, acontea a reao.
b. Inibidores reversveis no-competitivos: so aqueles que se associam
enzima em uma parte de sua estrutura diferente daquela onde se liga o
substrato. Esta ligao promove alteraes na enzima, de forma que a catlise
seja comprometida e que, mesmo aumentando a concentrao de substrato,
nenhuma mudana no acontecimento da reao seja observada.

ATIVIDADE FINAL

Inibidores enzimticos
Nos trechos a seguir, relatamos os trs mecanismos de inibio enzimtica possveis:
irreversvel, reversvel competitivo e reversvel no-competitivo. Identifique que letra
corresponde a que tipo de inibio e sublinhe a frase que lhe revelou o mecanismo:
a. A produo das hemcias no nosso organismo depende da produo de heme,
composto capaz de se ligar ao oxignio possibilitando o transporte deste gs pelo
nosso organismo, como voc viu na Aula 16. Uma das enzimas da via de sntese
do heme se chama ALAD.
Em locais onde h contaminao por metal pesado como o chumbo, os organismos,
em contato com esse metal, podem sofrer de anemia. Isso porque o chumbo se liga
a um stio da estrutura da ALAD, de onde no pode ser removido pelo aumento
da concentrao de ALA (substrato da enzima). No entanto, poderia ser removido
por uma molcula capaz de grudar metais.
Inibio __________________________________________________________________

222 C E D E R J

21 MDULO 1

b. A aspirina um medicamento para dores de cabea que atua em uma enzima

AULA

da via de processos inflamatrios, a ciclooxigenase.


Funciona assim:

Aspirina
(Acetilsalicilato)

COO
O

Ativa

Inibida

Salicilato

C
CH3

O
+

Ciclooxigenase

O
Ciclooxigenase

COO
OH

CH3
+

A aspirina (cido acetilsaliclico) se liga enzima ciclooxigenase, que fica modificada


permanentemente, impedindo a continuao da via de sntese de molculas que
promovem a sensao de dor (prostaglandinas).
Inibio __________________________________________________________________
c. A angiotensina 2 uma molcula que promove a vasoconstrio e, conseqentemente, o aumento da presso arterial. Ela produzida por uma reao
catalisada pela enzima conversora de angiotensina (ECA):

Angiotensina 1

ECA

Angiotensina 2

Medicamentos como o captopril e o enalapril so capazes de inibir a enzima ECA,


controlando a presso arterial. No entanto, esta inibio s funciona por um
determinado perodo de tempo, necessrio para a concentrao de angiotensina 1
aumentar e disparar sua converso em angiotensina 2.
Inibio __________________________________________________________________

C E D E R J 223

Bioqumica I | Cintica enzimtica: partindo da prtica para a teoria

RESPOSTA COMENTADA

Como voc viu nesta aula, h trs mecanismos de inibio enzimtica.


Em um, o inibidor capaz de promover uma alterao permanente
na estrutura da enzima, de forma que, mesmo que ele se desligue
dela, essa enzima continua inativada. Este tipo de inibio chamado
irreversvel e o que acontece quando tomamos uma aspirina para
dor de cabea.
Em outro, o inibidor se liga enzima, mas pode ser deslocado caso a
concentrao de substrato para esta enzima seja aumentada. Este tipo
de inibio, a inibio competitiva reversvel, o que faz remdios para
controle de hipertenso como o captopril e o enalapril.
Por fim, o terceiro tipo de inibio caracterizado pela ligao do
inibidor enzima em um stio diferente daquele em que se liga o
substrato. Embora diferente, esta ligao afeta a atividade da enzima.
Aumentar a concentrao de substrato no influencia, neste caso, a
velocidade da reao, pois ele no capaz de deslocar o inibidor da
estrutura da enzima. Este tipo de inibio chamado reversvel nocompetitiva e o caso do chumbo que, ligado ALAD, inibe a sua
atividade sem que o aumento da concentrao de ALA faa qualquer
diferena neste quadro.

RESUMO

A concentrao de substrato um dos fatores que influenciam a velocidade de uma


reao enzimtica. A adio de mais substrato ao meio de reao aumenta a velocidade
desta reao at um certo ponto. Quando concentrao de substrato ([S]) suficiente
para ocupar todas as molculas de enzima, dizemos que a reao est com uma [S]
saturante; nestas condies, a enzima atinge sua velocidade mxima de catlise.
Dois pesquisadores, Michaelis e Menten, se dedicaram intensamente a desvendar
a cintica das reaes enzimticas. Eles chegaram concluso de que, durante a
reao, rapidamente se forma um complexo entre enzima e substrato, chamado
ES; com a formao deste complexo possvel que o produto da reao seja
formado. Este se dissocia da enzima, que volta sua forma livre, etapa esta que
mais lenta e, por isso, a limitante da reao. Michaelis e Menten propuseram
uma equao que relaciona os parmetros velocidade inicial, velocidade mxima

224 C E D E R J

21 MDULO 1
constante de Michaelis, o KM.
O valor do KM corresponde concentrao de substrato com a qual a reao
atinge metade da sua Vmx. Ele pode ser entendido tambm como uma medida
de afinidade da enzima pelo seu substrato: quando mais baixo o KM, maior a
afinidade da enzima por seu substrato, e vice-versa.
A equao de Michaelis e Menten foi objeto de estudo de outros cientistas tambm.
Uma derivao dela foi elaborada por Lineweaver e Burk, que propuseram uma
equao cujo grfico fornece os dados em uma reta, e no uma hiprbole. Este
tipo de grfico, o duplo recproco, fornece os valores de KM e Vmx de forma mais
fcil de calcular do que o grfico gerado pela equao de Michaelis e Menten.
Embora o aumento da concentrao de substrato, em geral, desencadeie o
funcionamento da enzima, h situaes em que isso no acontece. Estas situaes
esto relacionadas presena de um composto chamado inibidor, que se associa
enzima (ou modifica sua estrutura), impedindo seu funcionamento. H trs tipos
de inibidores: os que modificam as enzimas definitivamente (irreversveis), os que
competem com o substrato pela enzima (reversveis competitivos) e os que no
competem com o substrato pela enzima (reversveis no-competitivos).

C E D E R J 225

AULA

e concentrao de substrato, levando em considerao uma constante chamada

AULA

Voc realmente sabe


o que so vitaminas?

22
Meta da aula

objetivos

Apresentar o que so vitaminas e seus


papis no bom funcionamento
do organismo.

Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:


1

definir vitaminas;

identificar a importncia desses compostos para


o organismo;

identificar alimentos que sejam fontes de


determinadas vitaminas.

Pr-requisito
Antes de comear a estudar esta aula,
importante que voc volte Aula 20
e relembre o que stio ativo de uma
enzima, bem como a participao dos
aminocidos da enzima na catlise
de uma reao.

Fonte: www.sxc.hu/photo/774156

INTRODUO

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/771855

Foto: Meliha Gojak

Fonte: www.sxc.hu/photo/732221

Foto: Kotz

Foto: Meliha Gojak


Fonte: www.sxc.hu/photo/774158

Foto: Meliha Gojak

Foto: Sanja Gjenero

Bioqumica I | Voc realmente sabe o que so vitaminas?

Fonte: www.sxc.hu/photo/840735

Provavelmente todos ns ouvimos, quando crianas, que devamos comer


frutas e legumes porque estes alimentos contm vitaminas, que so
importantes para crescermos fortes e saudveis etc.
bem possvel tambm que voc j tenha visto em pacotes de biscoitos,
normalmente voltados para o pblico infantil, a expresso biscoito
vitaminado.
s vezes, damos preferncias a esses produtos vitaminados, valorizamos a
adio de vitaminas aos alimentos, mas... sabemos de fato o que so estes
compostos? Sabemos qual a importncia das vitaminas para o organismo?
Por que to comum escutarmos que as crianas precisam tanto de vitaminas?
O que acontece quando esses compostos faltam no nosso organismo?
No tinha parado para pensar nisso ainda? Ficou curioso? Ento voc tem
um bom motivo para comear a estudar esta aula!

228 C E D E R J

22 MDULO 1
AULA

AS FAMOSAS VITAMINAS
As vitaminas so molculas orgnicas pequenas no sintetizadas
pelo nosso corpo (ou sintetizadas em quantidades insignificantes), mas
essenciais ao bom funcionamento do organismo. So obtidas a partir
do consumo de diversos alimentos, especialmente frutas e legumes.
As vitaminas foram batizadas com este nome porque so essenciais
vida (por isso o prefixo latino vita que, em portugus, significa vida) e
porque a primeira delas observada, pelo pesquisador polons CASIMIR
FUNK, possua grupamentos amina (NH3) em sua estrutura.
Existem diversos tipos de vitaminas, que podem ser divididas em
trs grupos: hidrossolveis, lipossolveis e nutrientes tipo vitaminas.
As vitaminas hidrossolveis so, como o prprio nome diz, solveis
em gua; as lipossolveis no so solveis em gua, de forma que elas
geralmente esto associadas a lipdeos ou gorduras e so absorvidas a partir
da ingesto destes. Esses dois tipos de vitaminas (hidro e lipossolveis)
no so sintetizados em nosso corpo (ou so sintetizados em quantidades
insuficientes para as funes que desempenham). Isso, inclusive, o que
as diferencia dos nutrientes tipo vitamina, o terceiro tipo de vitaminas.
Os nutrientes tipo vitamina so sintetizados em nosso corpo em
quantidades suficientes para as funes que desempenham, podendo ser
lipo ou hidrossolveis. Veja a Tabela 22.1, que apresenta as vitaminas
divididas de acordo com essa classificao:
Tabela 22.1: Vitaminas de acordo com sua classificao em hidrossolveis, lipossolveis
e nutrientes tipo vitamina
Vitaminas hidrossolveis

Vitaminas lipossolveis

Nutrientes tipo
vitaminas

Tiamina (B1)

Vitamina A

Inositol

Riboflavina (B2)

Vitamina D

Colina

Piridoxina (B6)

Vitamina E

Carnitina

Vitamina K

cido lipico

Vitamina B12
(cobalamina)
cido nicotnico (niacina
ou PP)
cido pantotnico
Biotina
cido flico
Vitamina C

p-aminobenzoato
(PABA)
Coenzima Q

CASIMIR FUNK
(1884-1967)
Bioqumico polons
que observou que
havia uma relao
entre deficincias
alimentares e algumas
doenas. Em 1911,
ele administrou
extratos obtidos de
arroz em pombos
que apresentavam
uma doena chamada
beribri, curando os
animais. Como havia
grande quantidade de
aminas no extrato que
ele utilizou, concluiu
que naquele extrato
havia uma amina
vital, que, por isso,
foi batizada por
ele de vitamina.
Funk caracterizou
a primeira vitamina
que a cincia
conheceu: a niacina,
uma vitamina do
complexo B.

PABA
Nutriente tipo
vitamina que auxilia
no crescimento
dos cabelos e na
manuteno da pele
em boas condies.
Voc j deve ter
ouvido falar em
PABA por causa dos
filtros solares, pois
muitos deles contm
esta substncia.
Ocasionalmente, os
filtros solares contendo
PABA causam
irritao da pele em
algumas pessoas.

C E D E R J 229

Bioqumica I | Voc realmente sabe o que so vitaminas?

Cada uma destas vitaminas tem uma funo no nosso organismo,


e isso que voc ver na prxima seo!

ATIVIDADE
1
1. Sobre as vitaminas...
Veja as descries a seguir:
um composto cuja estrutura apresenta um grupamento amina e que
fundamental para o nosso organismo. Essa substncia no s participa
da composio de molculas importantes no nosso organismo como atua,
ela prpria, como um neurotransmissor; sintetizada no nosso organismo
a partir de modificaes qumicas em outras molculas que servem de
fonte de carbono;
um composto cuja estrutura apresenta um grupamento amina e que
fundamental para o nosso organismo, embora no a sintetizemos. Essa
substncia participa de reaes qumicas importantes e, sem ela, o bom
funcionamento do organismo fica comprometido.

a. Qual destes dois trechos se refere a uma vitamina? Por qu?


________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
b. Toda vitamina apresenta um grupamento amina necessariamente?
________________________________________________________________
c. Uma alimentao balanceada aquela que possui uma proporo
adequada entre protenas, gorduras, carboidratos, alm das vitaminas,
claro. Por que motivo consumir vitaminas como a vitamina A em uma dieta
com absteno de lipdeos praticamente o mesmo que no consumir
esta vitamina, ao passo que o consumo de vitamina B no percebe esta
ausncia das gorduras?
________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
RESPOSTAS COMENTADAS

a. Como voc viu na primeira seo desta aula, vitaminas so


nutrientes que so essenciais dieta, pois no so sintetizadas
pelo nosso organismo (ou o so, mas em quantidades insuficientes
para suprir as necessidades do corpo). Assim, o trecho que se refere
a uma vitamina o trecho 2.

230 C E D E R J

estrutura dos primeiros compostos desse tipo que foram descobertos


os quais continham grupamentos amina. Atualmente, os cientistas
j revelaram a estrutura de outras vitaminas e nem todas possuem
uma amina na sua estrutura.
c. Como voc viu, as vitaminas so divididas em trs grupos:
hidrossolveis, lipossolveis e nutrientes tipo vitaminas. As vitaminas
lipossolveis s so solubilizadas, como o prprio nome diz, em
gorduras. Isso significa que elas s podem ser absorvidas pelo
organismo se, junto com elas, no trato digestivo, houver lipdeos. Esse
o caso da vitamina A. J a vitamina B hidrossolvel, e a presena
ou ausncia de lipdeos no faz diferena para sua absoro. O que
espervamos que voc desse como resposta neste item da atividade
era: porque a vitamina A lipossolvel e precisa de gorduras para
ser absorvida, enquanto a vitamina B hidrossolvel e, para sua
absoro, no h necessidade de gorduras.

PARA QUE SERVEM AS VITAMINAS?


Pode parecer estranho, mas, antes de comear a explicar para
que servem as vitaminas no nosso corpo, preciso relembrar o que voc
aprendeu nas aulas anteriores, sobre enzimas.
As enzimas so protenas capazes de aumentar a velocidade de
uma reao qumica, por diminurem a energia de ativao existente
entre o substrato e seu estado de transio.
So diversas as atividades enzimticas: quebrar protenas em
peptdeos (proteases); duplicar o DNA (polimerases); quebrar o ATP para
liberar energia dentro da clula (ATPases); adicionar novos grupamentos
qumicos aos substratos, por exemplo fosfatos (fosforilases ou cinases)
ou grupamentos carboxilas (carboxilases) etc.
Todas estas atividades s acontecem quando o substrato encontra
o stio ativo da enzima; so os aminocidos presentes no stio ativo que
possibilitam enzima exercer sua funo.
Um ponto importante que, dos vinte aminocidos que compem
as protenas, apenas nove possuem grupamentos R (grupamentos laterais)
com caractersticas qumicas que possibilitam a mediao de reaes
enzimticas (veja o boxe a seguir).

C E D E R J 231

22 MDULO 1
AULA

b. A resposta no. O nome vitamina foi dado em funo da

Bioqumica I | Voc realmente sabe o que so vitaminas?

Aminocidos ativos!
Como voc viu na Aula 20, uma reao enzimtica acontece a partir
da interao do stio ativo da enzima com seu substrato. No stio ativo,
portanto, deve haver aminocidos capazes de interagir com o substrato.
Como voc acabou de ver, apenas nove aminocidos podem participar de
reaes enzimticas como mediadores. So eles: histidina, cido glutmico,
cido asprtico, serina, treonina, tirosina, lisina, arginina e cistena.
Por que estes? Por que eles possuem grupamentos laterais que podem
agir como cidos e bases, recebendo prtons ou outros grupos qumicos
e os transferindo para o substrato da enzima.

Com isso, temos um problema: existe uma infinidade de reaes


que acontecem no organismo, e vrias delas envolvem reaes qumicas
que no podem ser realizadas por esses nove aminocidos. Como resolver
este problema?

Como realizar reaes enzimticas


que no podem ser catalisadas pelos nove
aminocidos capazes de realizar transferncia
de grupamentos qumicos?

h t t p : / / w w w. s x c . h u /
photo/264245

Quando uma reao no pode ser mediada por nenhum dos nove
aminocidos formadores de stios ativos, entram em cena outras molculas
capazes de auxiliar na transferncia de grupamentos: as coenzimas.
Coenzimas so molculas orgnicas pequenas que se ligam ao stio ativo
das enzimas e agem junto com elas para catalisar reaes bioqumicas.
Neste momento, imagino que voc j esteja vislumbrando onde
que entram as vitaminas nesta histria... Muito simples: diversas
vitaminas so precursoras ou atuam diretamente como coenzimas. Veja
a Tabela 22.2:

232 C E D E R J

22 MDULO 1

Tabela 22.2: Vitaminas que do origem ou atuam diretamente como coenzimas

Tiamina (B1)

Precursora da coenzima tiamina


pirofosfato

Riboflavina (B2)

Precursora da coenzima flavina


mononucleotdeo e flavina adenina
dinucleotdeo

B
Vitaminas que compem o COMPLEXO

Nutrientes tipo
vitamina

Vitaminas
hidrossolveis

Funes

Piridoxina (B6)

Precursora da coenzima piridoxal


fosfato

Vitamina B12
(cobalamina)

Precursora da coenzima
deoxiadenosil cobalamina

cido nicotnico
(niacina ou PP)

Precursora da coenzima
nicotinamida adenina dinucleotdeo
e nicotinamida adenina
dinucleotdeo fosfato

cido pantotnico

Precursora da coenzima A (CoA)

Biotina

Precursora da coenzima biocitina

cido flico

Precursora da coenzima cido


tetrahidroflico

cido lipico

Coenzima na descarboxilao
oxidativa de cetocidos

p-aminobenzoato
(PABA)

Componente do cido flico, que


precursor de uma coenzima

Coenzima Q

Importante para o transporte de


eltrons na mitocndria

AULA

Vitaminas

COMPLEXO B
Grupo de vitaminas
batizadas com a
letra B seguida
de um nmero
(ex. B1, B2, B6, B12).
Todas as vitaminas
do complexo B so
hidrossolveis e so
precursoras ou
atuam diretamente
como coenzimas.

Embora haja, listado nesta tabela, um nmero grande de reaes


e compostos de que voc nem imagina o significado (e no se preocupe,
pois no relevante saber agora), importante voc saber que as
vitaminas so fundamentais como coenzimas de uma srie de reaes
metablicas. S para voc ter uma idia, o cido nicotnico, por exemplo,
d origem coenzima que sintetiza um dos nucleotdeos que compem
a estrutura do DNA e do RNA. Como uma clula poderia se dividir e
sintetizar uma nova molcula de DNA sem esta coenzima necessria para
produzir nucleotdeo? Como uma clula poderia sintetizar protenas se
no houvesse nucleotdeo para sintetizar o RNAm?
A vantagem de se ter compostos como as vitaminas participando
de reaes enzimticas que, por essas molculas possurem natureza
variada, aumentam o repertrio de possveis reaes a serem catalisadas
pelas enzimas.

C E D E R J 233

Bioqumica I | Voc realmente sabe o que so vitaminas?

!
As enzimas que participam de reaes com o auxlio de coenzimas so
chamadas apoenzimas quando no esto ligadas coenzima e holoenzimas
quando esto ligadas a essa.

Apoenzima

Enzima inativa
(desligada da
coenzima)

coenzima

holoenzima

Vitamina ou
composto
derivado de uma
vitamina

Enzima ativa
(ligada
coenzima)

ATIVIDADE
1

2. Para que servem?

Um pesquisador percebeu que ao colocar a protena que ele estudava


em um meio de reao contendo tampo e uma mistura de vitaminas e um
determinado composto A. Este composto A desaparecia, e um composto
B era formado. Com isso e mais alguns estudos, ele concluiu que sua
protena era uma enzima.
Utilizando tcnicas para revelar a estrutura tridimensional desta protena, ele
descobriu que o stio ativo dela era composto pelos seguintes aminocidos:
glicina, asparagina, metionina e alanina.
Sabendo que estes aminocidos no so capazes de mediar diretamente
reaes enzimticas, como podemos justificar o fato de que esta protena
seja capaz de exercer sua atividade de converso do composto A em B?
________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
________________________________________________________________
RESPOSTA COMENTADA

Como voc acabou de ver nessa seo da aula, um dos papis


mais importantes das vitaminas o de atuarem como coenzimas ou
precursores de coenzimas, as quais medeiam reaes enzimticas
que no podem ser mediadas por aminocidos. Esse papel das
vitaminas fundamental uma vez que, no nosso organismo, temos
uma infinidade de reaes a serem catalisadas e apenas nove
aminocidos capazes de faz-lo. Da a grande importncia de estes
compostos estarem presentes na nossa alimentao.

234 C E D E R J

22 MDULO 1
AULA

OUTRAS FUNES DAS VITAMINAS


Reparou que, na Tabela 22.2, no esto listadas todas as vitaminas
que mencionamos na Tabela 22.1?
Nem todas as vitaminas atuam no nosso organismo como
coenzimas. Observe a Tabela 22.3.

Tabela 22.3: Vitaminas que no so coenzimas e suas funes


Vitaminas
Hidrossolvel

Funes

Proporciona o aumento da absoro de ferro


pelo intestino; especula-se que influencie o
sistema imunolgico no combate a viroses.

Atua na formao dos ossos, em funes


da retina associadas viso noturna e na
QUERATINIZAO da pele.

Age como um hormnio regulando as


concentraes de clcio no sangue.

Antioxidante. Atua impedindo que radicais


txicos ataquem biomolculas importantes
para o organismo.

Participa da produo de uma molcula


importante para a coagulao do sangue.

Inositol

Participa do metabolismo de lipdeos no


fgado e da estrutura de fosfolipdeos que
compem as membranas das clulas.

Colina

Possui as mesmas funes do inositol


e, ainda, parte da estrutura de um
NEUROTRANSMISSOR importante a
acetilcolina.

Carnitina

importante para o metabolismo de


gorduras.

Lipossolvel

Nutriente tipo
vitamina

Embora no sejam coenzimas, as vitaminas apresentadas na


Tabela 22.3 tambm so importantssimas para o bom funcionamento do
organismo. Elas esto envolvidas em uma gama de processos fisiolgicos

QUERATINIZAO
Processo de
impermeabilizao da
pele por acmulo
de queratina.

NEUROTRANSMISSOR
Molcula secretada
entre dois neurnios
(na sinapse);
liberada por um
e capturada, em
seguida, por outro,
proporcionando
a transmisso de
informaes entre
essas clulas.

e, qualquer desequilbrio envolvendo estas vitaminas, acarreta uma


srie de transtornos, incluindo alguns graves, como a possibilidade de
cegueira. Aprenda mais sobre avitaminoses (isto , falta das vitaminas)
na prxima seo.

C E D E R J 235

Bioqumica I | Voc realmente sabe o que so vitaminas?

E QUANDO FALTAM VITAMINAS...


As vitaminas, como j dissemos, no so sintetizadas no nosso
organismo, e precisam ser obtidas atravs da alimentao. Quando no
comemos vitaminas suficientes, podemos sofrer algumas conseqncias,
que variam de acordo com a vitamina da qual carecemos.
Existem dois tipos de carncias de vitaminas: a primria e a secundria.
A carncia primria acontece quando o indivduo no ingere vitaminas
suficientes na sua dieta; j a secundria ocorre quando o organismo perde
(ou tem reduzida) a sua capacidade de absorver as vitaminas que ingeriu.
Esse tipo de carncia, normalmente, est associado a hbitos de vida como
o fumo e o consumo excessivo de lcool, dentre outros.
E o que acontece com um indivduo se sua dieta for pobre em
vitaminas? Quais so as conseqncias?
A resposta para esta pergunta depende do tipo de vitamina que
faltar no organismo. Nesta aula, vamos nos ater quelas avitaminoses que
mais freqentemente geram casos clnicos. So elas as carncias de:
Tiamina (B1).
Niacina (B3).
Cobalamina (B12).
Vitamina C (cido ascrbico).

Hidrossolveis

Vitamina A (retinol).
Vitamina D.

Lipossolveis

Independente de estas serem as avitaminoses mais freqentes,


importante termos em mente que todas as vitaminas so importantes, e
apenas uma dieta balanceada, que contenha carnes, verduras, legumes
e cereais, capaz de fornecer a quantidade diria de vitaminas de
que necessitamos.
Veja agora mais detalhes sobre as conseqncias da carncia das
sete vitaminas que listamos anteriormente. Em seguida, voc ver uma
tabela indicando os alimentos mais indicados para se obter no apenas
estas, mas todas as vitaminas.

236 C E D E R J

A tiamina, ou vitamina B1, d origem coenzima tiamina


pirofosfato (TPP). Este composto importante para que uma molcula
de acar que tenhamos obtido a partir da alimentao possa ser
completamente oxidada e gerar mais energia para a clula.
A falta desta vitamina causa o BERIBRI, que se caracteriza pelo
acmulo de fluidos corpreos, inchamento do corpo, dor, paralisia e,
em casos extremos, morte.

Esta palavra vem do


cingals, lngua falada
no Sri Lanka, onde
beri significa eu
no posso. Desta
forma, beribri (eu
no posso duas
vezes) mostra como
as pessoas acometidas
pela deficincia
desta vitamina ficam
incapacitadas e fracas.

Essa doena no precisa ser tratada com medicamentos complexos.


Seu tratamento a reposio da vitamina ao organismo do indivduo
acometido.

Carncia de niacina (vitamina B3 ou PP)


A niacina precursora de um composto chamado NAD. Esta
molcula fundamental ao organismo, pois ela necessria a uma srie
de reaes qumicas, incluindo a oxidao de acares, a sntese e a
degradao de lipdios, a gerao de energia durante a respirao celular
dentre muitos outros.
A ausncia da niacina acarreta uma doena da pele chamada
pelagra. A pelagra tambm conhecida como doena dos trs D, por
diarria e demncia. Em casos mais extremos, pode

DERMATITE

chegar a ser a doena dos quatro D, quando leva o paciente morte

Segundo o dicionrio
eletrnico Houaiss,
uma inflamao da
pele, caracterizada
por eritema, edema e
presena de vesculas
no local exposto. Ou
seja, uma pessoa com
dermatite apresenta
vermelhido, inchao
e feridas em forma de
placas arredondadas
na pele.

causar

DERMATITE,

(que, em ingls, death).


O tratamento da pelagra feito pela administrao de altas
doses de niacina, juntamente com doses elevadas de outras vitaminas
do complexo B, cuja carncia tambm provocam sintomas como os da
pelagra (por exemplo: falta de vitamina B6 causando dermatite).

Cobalamina (vitamina B12)


Esta vitamina fundamental para a sntese de um dos nucleotdeos
que compem as molculas de DNA. Assim, uma deficincia dessa
vitamina acarreta em deficincias de crescimento, por exemplo.

C E D E R J 237

22 MDULO 1

BERIBRI

AULA

Carncia de tiamina (vitamina B1)

Bioqumica I | Voc realmente sabe o que so vitaminas?

Alm disso, essa vitamina tem um papel importante na origem de


novas clulas sangneas. Quando falta B12 no organismo, por exemplo,
por uma deficincia na dieta ou na capacidade de o intestino absorver
esta vitamina, comum as pessoas desenvolverem um tipo de anemia
ANEMIA PERNICIOSA
Doena hereditria
causada pela falta
de vitamina B12
no organismo, que
no absorvida
por problemas nas
clulas do estmago,
que secretam um
fator que facilita
a absoro desta
vitamina quando ela
chega ao intestino.
Com toda anemia, os
doentes apresentam
uma diminuio do
nmero de hemcias
circulantes no sangue
e, conseqentemente,
perda da eficincia
no transporte
de oxignio.

chamado ANEMIA PERNICIOSA.


comum que vegetarianos (daqueles que no comem nenhum
tipo de alimento de origem animal) sofram as conseqncias da falta de
B12. Isso acontece porque essa vitamina presente apenas em alimentos
de origem animal.
A anemia perniciosa causada pela falta de B12 deve ser tratada
pela administrao de altas doses dessa vitamina.
Uma particularidade da B12 que a sua carncia, normalmente (e
excluindo-se o caso dos vegetarianos), do tipo secundria, ou seja, est
ligada a uma deficincia na sua absoro, e no ao seu baixo consumo.
Por causa disso, a maioria dos pacientes que desenvolvem os sintomas
da carncia de B12 precisam ter sua alimentao suplementada com
essa vitamina pelo resto da vida; caso no o faam, voltam a ter anemia
perniciosa.

Vitamina C (cido ascrbico)


A vitamina C participa da sntese de colgeno nas nossas clulas,
como co-fator da reao catalisada pela prolil-hidroxilase, que, como
voc viu na Aula 15, transforma a prolina em hidroxi-prolina, aminocido
presente nas hlices do colgeno. Sua ausncia causa uma fragilidade na
pele da gengiva que acarreta em inchao, sangramento (hemorragia) e
m fixao dos dentes. Este quadro caracteriza uma doena chamada
escorbuto (veja como essa doena foi descoberta no boxe a seguir).
Alm desses sintomas, uma pessoa com escorbuto tambm pode
apresentar feridas que no cicatrizam, espalhadas por todo o corpo.
Para tratar essa doena, necessrio administrar as doses corretas de vitamina C, uma vez que mais do que isso no aproveitado
pelo organismo.

238 C E D E R J

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/763855

22 MDULO 1
AULA

Estamos em pleno mar...

Fonte: http://www.sxc.hu/photo/849277

Doenas com os sintomas do escorbuto foram visualizadas em seres


humanos desde o Antigo Egito. No entanto, o ponto que marcou a
caracterizao desta doena foi a poca das grandes navegaes (sculo
XVI). Neste perodo, uma grande tripulao saa de sua terra natal em
busca de novos territrios e passava um enorme tempo no mar. Durante o
perodo em que estavam embarcados, os tripulantes tinham acesso apenas
a alimentos que no eram frescos vegetais de nenhuma natureza era
consumido nessas grandes jornadas e os tripulantes acabavam padecendo
de deficincia de vitamina C, expressa pelo incio de hemorragias na
boca que no paravam e se agravavam cada vez mais. A maior parte
dos tripulantes morria.
Foi um cirurgio ingls, a bordo de uma expedio, que descreveu o
tratamento dos acometidos por escorbuto com limes e laranjas como
eficaz, prevenindo a morte de milhares de pessoas.
Foi no incio do sculo XX que descobriram haver uma vitamina
antiescorbtica que foi, por causa disso, batizada de cido ascrbico
(se aproximando de escorbuto em ingls, scurvy).

Vitamina A (retinol)
A vitamina A, tambm conhecida como retinol, funciona como
hormnio e como um composto fundamental para a sntese de um
pigmento que ajuda nossos olhos a captar luz a rodopsina. A vitamina
A tambm regula a expresso gnica e o desenvolvimento do tecido
epitelial, incluindo a pele.
Na ausncia desta vitamina, a sntese de rodopsina prejudicada
e o indivduo tem dificuldade de se adaptar a pouca disponibilidade de
luz no ambiente. Por isso, um dos sintomas da carncia de vitamina A
chamado cegueira noturna. Alm disso, a carncia da vitamina A faz com
que a produo de lgrimas seja prejudicada. Isso faz com que nossos
olhos fiquem ressecados, uma doena chamada xeroftalmia (xero = seco,
ftalmia = relativo a olho).

C E D E R J 239

Bioqumica I | Voc realmente sabe o que so vitaminas?

Mais uma vez, o tratamento se d pela administrao desta


vitamina ao paciente (para saber outras funcionalidades da vitamina A,
veja o boxe a seguir).

Fugindo da acne
Algumas drogas usadas no tratamento da acne severa contm cido
retinico, um derivado da vitamina A. Isso porque essa vitamina tem
carter cido e realiza uma leve escamao da pele, alm de auxiliar na
sntese de colgeno, melhorando o aspecto da pele.

Vitamina D
A vitamina D d origem, na presena de luz UV, a um hormnio
chamado de 1,25-diidroxicolecalciferol, que controla a captao de clcio
no intestino, bem como os nveis de clcio nos rins e ossos. Por interferir na
captao de clcio, esse hormnio influencia no bom crescimento dos ossos.
Ele importantssimo para crianas em fase de crescimento. Crianas que
possuem problemas na via de biossntese da vitamina D apresentam graves
dificuldades de formao ssea (raquitismo).
O raquitismo mais comum em crianas que vivem em reas de
clima frio. Isso porque, nestas regies, a incidncia de luz solar menor,
ou seja, h menos luz disponvel para participar da reao de sntese do
hormnio diidroxicalciferol.
A deficincia em vitamina D pode ser tratada com suplementos
dessa vitamina.

240 C E D E R J

3. Faltou vitamina, sobrou problema...

22 MDULO 1
2

Como voc acabou de estudar, as vitaminas so importantes no nosso


organismo pelos diversos papis que desempenham. A seguir, voc v duas
colunas; na primeira, esto os nomes de algumas vitaminas e, na segunda,
alguns quadros clnicos decorrentes da ausncia de alguma vitamina.
Sua tarefa relacion-las.
Primeira coluna:
( 1 ) Vitamina A
( 2 ) Vitamina D
( 3 ) Vitamina C
( 4 ) Vitamina B1 (tiamina)
( 5 ) Vitamina B3/ PP (niacina)
( 6 ) Vitamina B12 (cobalamina)
(

) Lana, 32 anos, apresenta fraquezas e declara desmaiar com freqncia.


Diz se alimentar bem, comer frutas e verduras orgnicas e variadas;
no ingere carne vermelha. Exame de sangue mostra quadro de
anemia perniciosa.
) Joo, 40 anos, trabalhava como segurana noturno e foi demitido por
quase ter deixado a casa que protegia ser assaltada. Queixa-se de estar
sempre piscando por tempos prolongados, devido a um incmodo
nos olhos. Alm disso, declarou que o incidente que causou sua
demisso aconteceu porque ele no tinha enxergado a aproximao
do bandido.
) Maria das Dores, 72 anos, queixa-se de estar com as pernas doloridas
e bastante inchadas. Seu p direito no apresenta mais mobilidade e
sua funo locomotora est bastante comprometida.
) Rafaela, 6 anos, apresenta estatura de 98 cm e j sofreu vrias fraturas
nas pernas e braos, embora declara a me seja menos levada do
que as outras colegas de escola. Apresenta pele plida e declara no
tomar sol com freqncia.
) Joaquim, 9 anos, est apresentando problemas de aprendizagem e,
por vezes, no reconhece seus pais. Estes declaram que a criana
tem diarria com freqncia e que, h dois meses, apresenta uma
vermelhido na pele que, embora medicada com anti-alrgicos, no
foi curada.
) Jos, 26 anos, funcionrio da bolsa de valores, procurou consultrio
mdico por estar freqentemente resfriado e, recentemente, ter
comeado a apresentar sangramentos na gengiva. Declarou que sua
alimentao feita s pressas, geralmente em lanchonetes do tipo
fast-food.

C E D E R J 241

AULA

ATIVIDADE

Bioqumica I | Voc realmente sabe o que so vitaminas?

RESPOSTA COMENTADA

De acordo com as descries que demos dos quadros clnicos


desencadeados pela falta de algumas vitaminas no organismo, voc
no deve ter tido muitas dificuldades para realizar esta atividade.
Lana sofre de anemia perniciosa e sua fraqueza e desmaios
so derivados desse quadro de deficincia nas suas hemcias.
Ela apresenta carncia de vitamina B12 porque no come carne
vermelha, e esta uma fonte importante deste nutriente.
Joo est com um quadro de xeroftalmia e de cegueira noturna,
tpicos da carncia de vitamina A.
Maria das Dores est com avitaminose de B1 e est sofrendo de
beribri. Se ela no se cuidar rapidamente fazendo uma reposio
desta vitamina - poder at morrer.
Rafaela est raqutica e com fragilidade ssea, conseqncias da
falta de vitamina D, que influencia na captao de clcio pelos ossos
e no crescimento.
Joaquim est com dermatite, diarria e quadros temporrios de
demncia, sintomas que caracterizam a pelagra, doena causada
pela falta de vitamina B3.
Por fim, Jos est com escorbuto, sintoma tpico da carncia de vitamina
C; essa carncia certamente tem relao com sua m alimentao,
rica em calorias e pobre em alguns nutrientes essenciais.

ONDE OBTER VITAMINAS?


Todos ns sabemos desde crianas que as frutas e legumes so
boas fontes de vitaminas. No entanto, no so todas as vitaminas que so
abundantes em qualquer vegetal, assim como h algumas que somente
esto presentes em carnes. Na Tabela 22.4, resumimos as fontes das quais
voc pode obter cada uma das vitaminas que mencionamos nesta aula,
incluindo as que no comentamos em detalhes na seo anterior.

242 C E D E R J

Vitaminas

Fontes

Fgado de aves, animais e cenoura

leo de peixe, fgado, gema de ovos

Verduras, azeite e vegetais

Fgado e verduras

B1

Cereais, carnes, verduras, levedo de cerveja

B2

Leites, carnes, verduras

cido pantotnico

Fgado, cogumelos, milho, abacate, ovos, leite, vegetais

B6

Carnes, frutas, verduras e cereais

B12

Fgado, carnes

Laranja, limo, abacaxi, kiwi, acerola, morango, brcolis,


melo, manga

Biotina

Noz, amndoa, castanha, levedo de cerveja, leite, gema


de ovo, arroz integral

cido flico

Cogumelos, hortalias verdes

niacina

Ervilha, amendoim, fava, peixe, feijo, fgado

22 MDULO 1
AULA

Tabela 22.4: Alimentos como fontes de vitaminas

Obs.: Os nutrientes tipo vitamina so sintetizados pelo organismo em quantidades suficientes


para suprir as necessidades do corpo.

CONCLUSO
Agora voc sabe por que as vitaminas so importantes no nosso
organismo. Elas participam como coenzimas (ou precursores destas) de
diversas reaes enzimticas e como base para a sntese de molculas
fundamentais ao bom funcionamento do organismo, como o caso do
hormnio que controla a absoro de clcio e do retinol que forma o
pigmento do nosso olho capaz de perceber luz no ambiente. Quando
algum lhe perguntar sobre a importncia das vitaminas, voc realmente
saber explicar.

C E D E R J 243

Bioqumica I | Voc realmente sabe o que so vitaminas?

ATIVIDADE FINAL
3

Como resolver o problema?


Na atividade anterior, voc identificou, pelos sintomas, quais eram as vitaminas
que faltavam nos organismos de Lana, Joo, Maria das Dores, Rafaela, Joaquim
e Jos. O mdico deles j receitou um suplemento vitamnico. No entanto, esse
suplemento s pode ser consumido enquanto persistirem os sintomas. A fim de
que no apresentem problemas novamente, indique para cada um deles pelo
menos um alimento que devem ingerir com freqncia para no ficarem doentes
de novo.
Lana ____________________________________________________________________
Joo ____________________________________________________________________
Maria das Dores__________________________________________________________
Rafaela__________________________________________________________________
Joaquim _________________________________________________________________
Jos _____________________________________________________________________

RESPOSTA COMENTADA

Para realizar essa atividade, voc precisava apenas consultar a


Tabela 22.4. De acordo com as avitaminoses apontadas para cada
uma dessas pessoas por voc e por nossa resposta comentada da
Atividade 3, era s escolher um alimento para sugerir a cada um dos
seis pacientes. Se esta situao toda fosse verdade, seu problema
seria convencer a macrobitica Lana a comer carne vermelha e ao
Jos que, embora seu ritmo de trabalho na Bolsa de Valores seja
enlouquecedoramente acelerado, ele deveria comer uma saladinha
de frutas de sobremesa.

244 C E D E R J

22 MDULO 1
AULA

RESUMO

As vitaminas so pequenas molculas orgnicas essenciais ao bom funcionamento


do organismo e que no so sintetizadas por este em quantidades suficientes para
atender s necessidades do corpo. Estes compostos podem ser divididos em trs
grupos: hidrossolveis, lipossolveis e nutrientes tipo vitaminas.
Muitas vitaminas atuam como coenzimas ou como precursoras de coenzimas,
molculas que participam de reaes enzimticas auxiliando na transferncia
de grupamentos qumicos. Outras, participam de processos diversificados no
organismo, por exemplo absoro de ferro no intestino, coagulao sangnea,
proteo contra radicais livres, composio de neurotransmissores etc.
Dada a importncia destes compostos no organismo, a carncia de vitaminas pode
acarretar uma srie de quadros clnicos. Alguns deles so o beribri, a pelagra, a
cegueira noturna e o raquitismo.
Para evitar a carncia de vitaminas, importante fazer uma dieta balanceada,
diversificando alimentos como gros, carnes, legumes e verduras.

INFORMAO SOBRE A PRXIMA AULA


Na prxima aula, voc comear a aprender um pouco sobre a classe de
biomolculas que serve de reserva de energia no nosso organismo: os lipdeos.

C E D E R J 245

Referncias

Bioqumica I

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