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PREPARACIN LIMPIEZA Y ESTERILIZACIN DE MATERIALES


Mayra Alejandra Perez Chaves
22 de agosto del 2016
INTRODUCCIN
La limpieza y esterilizacin del material de laboratorio radica en que dentro del ambiente
se encuentran presentes bacterias, microorganismos y otros seres vivos que deben
eliminarse a fin de obtener resultados de anlisis qumicos de muestras con mayor
exactitud y precisin. Se han desarrollado y aplicado diversos procesos de desinfeccin y
esterilizacin para limitar la presencia o eliminacin de los microorganismos.
MTODOS
a. Esterilizacin: es un mtodo de eliminacin total de todo tipo de organismo y que
asegura la ausencia absoluta de cualquier forma viviente.

METODOS DE ESTERILIZACIN

b. Desinfeccin es un proceso que solamente elimina formas vegetativas de los


microorganismos.
CALOR HUMEDO:
Autoclave
CALOR SECO:
Horno/Estufa
RADIACIONES: UV y
Gama

FSICOS

QUMICOS

LIQUIDOS
GASEOSOS

MECNICOS

FILTRACIN

Figura 1. Mtodos de Esterilizacin. Tomado de [3]

Para este caso se implementaron los mtodos de esterilizacin fsicos:


a. Calor hmedo: la esterilizacin por vapor a presin se lleva a cabo en el autoclave.
Estos equipos emplean vapor de agua saturado, a una presin de 15 libras lo que
permite que la cmara alcance una temperatura de 121C. El tiempo de
esterilizacin usualmente es de 15 minutos.
b. Calor seco: se somete el material directamente a la flama e un mechero o al horno
a 150/180 durante 2 horas. La esterilizacin se aplica principalmente al material
de vidrio.

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1. MATERIALES

H 2 O destilada

Frasco lavador

Escobilln

Cinta control de esterilizacin

Papel estraza

Tubos de ensayo

Matraces

Cajas Petri

Pipetas

Autoclave

Horno de aire caliente

Toalla o papel de envoltura

Detergente

Tapones de algodn

Gasa
2.PROCEDIMIENTO

Para uso de horno de aire caliente


1. Lavar perfectamente el material con escobilln y detergente. Enjuagar con abundante
agua corriente.
2. Escurrir el exceso de agua y enjuagar el material con agua destilada con un frasco
lavador, por las paredes interiores. Dejar escurrir el material sobre una toalla o papel de
envoltura. No debe secar el material por ningn otro medio.
3. Recorte el papel para envolver material, de acuerdo a las necesidades.
4. Tome el material correspondiente y envulvalos segn las instrucciones del instructor;
por ltimo, colquele un trozo pequeo de cinta control de esterilizacin.
5. Llvelos al horno de aire caliente y encienda en la temperatura adecuada (180C), una
vez caliente empiece a contabilizar el tiempo de esterilizacin (2 horas).

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6. Finalizado el proceso y luego de bajar la temperatura, verifique la cinta control.


Esterilizacin de materiales y medios de cultivo

Para esterilizacin de medios de cultivo


1. Lavar perfectamente las cajas de Petri y pipetas con escobilln y detergente. Enjuagar
con abundante agua corriente.
2. Escurrir el exceso de agua y enjuagar el material con agua destilada con un frasco
lavador, por las paredes interiores. Dejar escurrir el material sobre una toalla o papel de
envoltura. No debe secar el material por ningn otro medio.
3. Una vez seco el material, se proceder a envolver las cajas de Petri y pipetas con papel
de estraza. Para los tubos y matraces se elaborarn tapones de algodn y gasa (torunda),
procurando que ajusten con holgura, sobre los que finalmente se les colocar un
capuchn de papel.
4. Las cajas de Petri y pipetas envueltas se colocarn en horno a 150 C durante 2 horas.
Despus de sacarlas, dejarlas enfriar y abrir los paquetes nicamente en rea asptica.
5. Los medios de cultivo se esterilizarn en autoclave de acuerdo a las siguientes
instrucciones:
a. Retiramos la tapa desenroscando las mariposas.
b. Revisar que el nivel de agua cubra completamente la resistencia elctrica. En caso
necesario aadir agua destilada.
c. Conectar la autoclave y poner la perilla de control en calentamiento alto. Acomodar los
medios y materiales en la canasta del autoclave y colocarla dentro.
d. Poner la tapa, apretar las manijas de dos en dos en posicin encontrada. Ubicar en
posicin vertical la vlvula de escape de aire. Dejar que haya un escape vigoroso de
vapor, volverla a colocar en posicin horizontal.

e. Dejar que el equipo se caliente hasta alcanzar los 121 C o 15 Ibs de presin revisando
continuamente la escala del manmetro. Una vez alcanzada esta temperatura deber
bajarse el nivel de calentamiento moviendo la perilla de control al nivel medio o bajo.

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f. Mantener el equipo en estas condiciones durante 35 minuto


3. RESULTADOS Y DISCUSIN

Figura 2: Uso del autoclave. Fotografa tomada por Linda Parada

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Figura 3. Ubicacin de los elementos de laboratorio en el autoclave. Fotografa


tomada por Linda Parada.

Se debe utilizar el papel correcto, de lo contrario se rasgar y el material no


quedar esterilizado.

Si la cinta testigo no se colorea, la prctica se rechaza.

Si el material no se envuelve correctamente a pesar de que la cinta se coloree, el


material no est estril.

Para la esterilizacin de medios de cultivos en el Autoclave se debe tener en


cuenta cada una de las indicaciones antes mencionadas, de lo contrario se puede
ocasionar un accidente.

No se requiere de mucho tiempo para la esterilizacin, si el procedimiento para tal


fin se hace de manera adecuada.
4.CONCLUSIN

La presencia de microorganismos en el ambiente puede provocar la contaminacin de las


muestras y los implementos de trabajo en un laboratorio qumico con la implementacin
de los procesos de desinfeccin y esterilizacin se controla o disminuye la cantidad de
estos organismos en los instrumentos, proporcionando mayor eficiencia y calidad de los
resultados en las muestras examinadas y los procedimientos empleados. Durante
cualquier practica en laboratorios la eliminacin de los microorganismos es relevante para
que los errores o variaciones conforme a los resultados no causen grandes alteraciones
debido a acumulaciones en los instrumentos por su vida de uso o errores de quienes los
utilizan por no tener en cuenta los mtodos de limpieza y esterilizacin de materiales.
BIBLIOGRAFA
[1]
Baker, F. J., y Breach, M. R. 1990. Manual de tcnicas de Microbiologa Mdica.
Editorial Acribia. Zaragoza, Espaa. 676 p.
[2]
Madigan, M. T.; Martinko, J.M.; y Parker J. Brock: Biologa de los Microorganismos.
Editorial Prentice Hall Hispanoamericana S.A. 10 Ed. Madrid. 2003.
[3]
Bioterios.
(Agosto
09
del
2016).
Bioterios.com.
http://www.bioterios.com/2013/post.php?s=2013-07-01-mtodos-de-limpieza-desinfeccin-yesterilizacin

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