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REPLICACIN SEMICONSERVATIVA
Cada uno de los dplex hijos debe consistir en una cadena completa
heredada del dplex parental y una cadena sintetizada completamente
nueva.
Se dice que es una replicacin semiconservativa puesto que la nueva hebra
de DNA contiene una hebra completa heredada de la original, es decir,
conserva su origen. Pero de igual forma en base a esta hebra se forma una
completamente nueva. A pesar de que esta teora esta validada, antes de
tener conocimiento sobre el mecanismo encargado de la replicacin se
tuvieron en cuenta dos teoras ms: La conservativa que planteaba que las
dos cadenas originales deban permanecer juntas, as como tambin las
dos cadenas sintetizadas juntas, y as, las hebras hijas solo tendran el DNA
parental y las otras solo el DNA re sintetizado. La teora dispersadora
propuso que las cadenas parentales deban fragmentarse y las nuevas
sintetizarse en cadenas cortas y, unindose todos los fragmentos se
obtendra la cadena completa.
Para definirse por que teora era la correcta, hicieron un experimento con
bacterias e isotopos del Nitrgeno para distinguir cuales eran las parentales
y cuales las sintetizadas, fueron sometidas a pruebas de laboratorio (cultivo
y centrifugacin) y basndose en la densidad se puso determinar que
despus de una generacin todas las molculas de DNA deben ser hbridas.
Esta replicacin, aunque fue estudiada en bacterias, tambin se da en
clulas eucariotas. La replicacin en ambas clases de clulas, es muy similar
por lo tanto, lo que se discute en la replicacin bacteriana se aplica a las
clulas eucariotas.
HORQUILLAS DE REPLICACIN
La replicacin, comienza en un punto especfico de la clula llamado punto
de origen, en el estudio que se le realiz a la E. coli este punto recibi el
nombre de oriC, que es donde se da la replicacin del cromosoma. El
reconocimiento de este punto se da por protenas especficas, en las
procariotas hay un solo origen de replicacin, mientras que en las
eucariotas hay mltiples orgenes de replicacin. Todo esto ocurre durante la
fase de iniciacin de la replicacin. La apertura de la doble hlice se da
gracias a la ruptura de los puentes de hidrogeno. Tras comenzar la
replicacin, ambas hebras se alejan del punto oriC en direcciones contrarias
por eso se denomina replicacin bidireccional. Cada horquilla posee un sitio
donde, primero, la doble hlice se separa y segundo, los nucletidos se
incorporan a la cadena y comienzan a sintetizarla.
DESENROLLAMIENTO
Se comienza a formar una sper hlice positiva en la porcin no replicada.
Todo esto es causado gracias a enzimas especficas que se encuentran en
la clula, se denominan topoisomerasas y tienen la capacidad de cambiar
el estado se superenrollamiento. Una enzima de este tipo llamada girasa, es
la encargada de liberar la tensin creada durante la replicacin en E. coli.
Estas girasas se desplazan por todo el DNA, en especial la horquilla de
replicacin, para eliminar los superenrollamientos positivos. La girasa est
encargada de hacer el corte de las dos cadenas de DNA y todo este proceso
se lleva a cabo gracias a la energa liberada de la hidrolisis del ATP.
POLIMERASAS
Los dos tipos de polimerasa avanzan sobre una cadena de DNA molde e
incorporan el nucletido complementario. Todas las polimerasas tiene
requerimientos bsicos: 1. Una cadena de DNA templada para copiar y 2.
Una cadena iniciadora de la cual los nucletidos puedan pegarse. Hay una
cadena que posee hidroxilo en el extremo 3 pero no posee el molde para
iniciar la replicacin. Por otra parte hay una cadena circular sencilla que
posee el molde peor no posee el iniciador. El diagrama postulado por
Watson y Crick propuso que na de las cadenas se sintetizaba en sentido 5
3, mientras que la otra en sentido 3 5. Siendo 3 y 5 los carbonos
donde estn ubicados los OH libres. Estudios demostraron la existencia de
no solo una, sino tres tipos de polimerasas
El desenrollamiento del dplex y la separacin de las cadenas requiere de la
ayuda de dos tipos de protenas que se unen al DNA, una helicasa (o enzima
que desenrolla al DNA) y las protenas que SSB que unen el DNA a la cadena
sencilla. Las helicasas desenrollan el dplex por medio de la ruptura de los
puentes de hidrogeno que unen las dos cadenas. El desenrollamiento de
DNA por la helicasa se mantiene por la unin de las protenas SSB de las
cadenas deparadas de DNA y previene que se vuelvan a unir y enrollar las
cadenas.
Recordando que la primasa es la encargada de unir los fragmentos de
Okazaki, el las bacterias la primasa y la helicasa se unen y forman la
primosoma de la cual, la helicasa se mueve a los largo de la hebra retrasa
progresivamente, abriendo y templando las cadenas de dplex mientras que
la primasa se une peridicamente a la helicasa y sintetiza los iniciadores
cortos de RNA que comienzan la formacin de los fragmentos de Okazaki.
Estos fragmentos de polimerizan por medio de la polimerasa de DNA lll, esta
misma polimerasa es que la sintetiza los fragmentos sucesivos de la cadena
retrasada, de igual forma, se recicla del sitio donde ha terminado uno de los
fragmentos de Okazaki y pasa al prximo a travs de la cadena retrasada
cerca del lugar donde se desenrolla el DNA y all se une al extremo 3 OH del
iniciador de RNA y comienza a adicionar desoxirribonucleotidos en el
extremo del RNA corto. Aunque las dos polmeros de mueven en direcciones
contrarias tiene la capacidad de actuar como si fueran una sola. Una vez las
PROTENA EUCARIOTA
Protena CROR
Primasa
FUNCIN
Reconocimiento
del
origen de replicacin
Sintetiza iniciadores de
RNA