La tincin de Zielh-Neelsen

Es una coloracin diferencial til en la identificacin de micobacterias,

aunque no permite la diferenciacin de distintas especies. La
caracterstica de acido resistencia de estos organismos hace de esta
coloracin un mtodo rpido en el diagnostico, presuntivo de infeccin
micobacteriana.
Principio
Las micobacterias que resisten la decoloracin se llaman acido alcohol
resistentes (AAR) son coloreadas de rojo por la fuscina y retienen el
color a pesar de la accin del acido y del alcohol.
Fundamento de la coloracin
Manifiesta la capacidad de resistir a la decoloracin gracias al alto
contenido de lpidos complejos (cidos micolicos) y ceras que poseen
algunos microorganismos en su pared celular.
Procedimiento:
Mtodo:
1. Desinfectar el rea de trabajo con solucin de cloro al 10%.
2. Con un aplicador de madera tomar una muestra de esputo que este
sanguinolenta, hacer un frotis dejar secar y fijar al calor.
3. Colorear con fucsina fenicada durante 5 minutos aplicando calor en
la parte posterior del portaobjetos hasta emisin de vapores (3 veces)
sin que hierva.
Nota: aadir mas fucsina fenicada conforme esta se evapore la
preparacin No debe de quedar seca en ningn momento.
4. Lavar con agua.
5. Decolorar alcohol-acido durante 3 minutos.
6. Lavar con agua, limpiar la preparacin por la parte posterior con
algodn impregnado con alcohol al 70% agregar mas alcohol
sosteniendo la lamina inclinada y observar las gotas no arrastran
colorante. Lavar nuevamente con agua. Repetir esta operacin hasta
que el alcohol acido ya no arrastre colorante. Lavar con agua.
7. Colorear con azul de metileno durante 1 minuto.
8. Lavar con agua, dejar secar y observar a inmersin.
Nota: al finalizar la prctica, ordenar y desinfectar con cloro al 10% su
rea de trabajo y descartar el material.
IMPORTANTE
Descartar el material utilizado (guantes, mascarillas, hisopos,
muestras en una bolsa de desecho biolgico).

Diferentes frotis.

Bacilos acido alcohol resistente

La baciloscopia se debe realizar de acuerdo a las indicaciones

siguientes:
1. en cualquier muestra clnica
2. en todos los casos probables, entre los contactos de un caso d
tuberculosis, en grupos o poblaciones de alto riesgo y pacientes
dados de alta que acudan con tos productiva en tres muestras
sucesivas de esputo.
3. independientemente de la edad en quienes
clnica y
radiologicamente se sospeche si la primera serie de tres hubiera
resultado negativa, se debe de tomar otra serie de tres.
4. en el control de tratamiento antituberculoso, con una muestra
cada mes la ultima al terminar el tratamiento.
Baciloscopia
La baciloscopia es la tcnica de eleccin para el diagnostico rpido y el
control del tratamiento de la tuberculosis pulmonar.
Es simple, econmica y eficiente para detectar los casos infecciosos
por eso es la herramienta fundamental de un programa de control de
la tuberculosis.
Muestra
La muestra ms examinada es el esputo debido a que la tuberculosis
pulmonar es la ms frecuente.
Puede investigar en orina, liquido cefalorraqudeo, liquido pleural,
sangre, pus de cavidades, biopsias.
El Esputo
Envase: Debe ser de boca ancha de no menos de 50 mm de dimetro
Capacidad de entre 30 y 50 ml para facilitar que el paciente pueda
depositar la muestra, con facilidad sin ensuciar sus manos y para que
en el laboratorio se pueda seleccionar y tomar la partcula ms
adecuada.
Cierre hermtico con tapa rosca para evitar el derrame durante el
trasporte y la produccin de aerosoles cuando se abra en el
laboratorio. (No se recomienda lavar y reutilizar frasco de vidrio).

Muestra
La
primera muestra debe ser tomada en el
momento de la consulta.
La segunda muestra la debe recolectar el paciente en su casa por la
maana al despertar.
La tercera muestra cuando sea requerida puede ser tomada en el
centro de salud, o puede ser recolectada por el paciente al despertar e
su casa.
Obtencin espontnea del esputo
Para la recoleccin de la muestra elegir un lugar ventilado o un lugar
abierto
Entregar al paciente el envase de la recoleccin con sus datos
Solicitar al paciente una buena muestra de esputo.

Procedimiento:
1. Inspirar profundamente llenando sus pulmones como sea
posible.
2. Retener el aire un momento.
3. Expulsar luego la expectoracin con un esfuerzo de tos tratando
de arrastrar la secrecin del pulmn.
4. recoja el esputo producido dentro del envase tratando e que
entre en su totalidad sin manchar sus manos o las paredes
externas del frasco.
5. Repita esta operacin otras dos veces colocando todas las
secreciones en el mismo frasco.
6. limpiar el exterior del frasco con un pauelo de papel y lavar las
manos con agua y jabn.
La calidad de la muestra de esputo muco purulento proviene del
rbol bronquial, es la que asegura mayor probabilidad de que se
pueda observar el bacilo.

La muestra es de 3 a 5 ml generalmente espesa y mucoide, el color

es variable blanco, amarillento y hasta verdoso a veces
sanguinolento.
Cuando no se puede obtener la muestra de manera espontnea se
debe de recurrir a mtodos especiales:
a. induccin de esputo
b. lavado gstrico
c. lavado bronquial
Conservacin de la muestra Si la muestra de esputo no ser
procesada en el da es aconsejable introducir cada envase en una
bolsa de polietileno y anudar la bolsa encima de la tapa, de manera
que quede sujeta firmemente.