tcnicas experimentais

Espectroscopia de Absoro
no Ultravioleta e Visvel
J. M. G. MARTINHO*
1. INTRODUO
A absoro de radiao electromagntica da regio do ultravioleta (UV)
(100-400 nm) e visvel (Vis) (400-800
nm) por parte de molculas, tomos ou
ies est normalmente associada a transies electrnicas. Estas ocorrem quando, por interaco da radiao electromagntica com o meio absorvente, um
electro promovido dum estado electrnico de baixa energia para outro de
energia mais elevada.
A quantidade de luz absorvida
quando um feixe de radiao monocromtica atravessa o meio absorvente
depende da concentrao, do coeficiente de absoro molar da espcie absorvente e do percurso ptico da radiao
[1]. 0 estudo da sua variao com a concentrao permite: i) a determinao
quantitativa de um grande nmero de
substncias qumicas e biolgicas (a
ttulo de exemplo, refira-se que mais de
95% das anlises clnicas nos Estados
Unidos so feitas por mtodos espectrofotomtricos); ii) o estudo cintico de
reaces lentas em soluo; iii) a determinao de curvas de titulao. Por
outro lado, a compilao de espectros de
absoro (representao grfica do coeficiente de absoro molar em funo do
comprimento de onda) sob a forma de
atlas ou bases de dados usada para: i)
identificao e verificao do grau de
pureza de compostos; ii) clculo da diferena de energia entre estados electrnicos e do momento dipolar da transio.
O desenvolvimento da espectroscopia de absoro UV-Vis tem sido
constante ao longo dos ltimos anos,
sendo a tcnica revista em nmero especial do Analytical Chemistry, de dois em
dois anos, desde 1945 [2].
Este trabalho descreve os principios da espectroscopia de absoro UVVis, pretendendo constituir um conjunto
de conhecimentos bsicos necessrios a
um estudo mais aprofundado da mesma.

2. LEI DE BEER
A intensidade de um feixe de radiao electromagntica atenuada ao

Perdas por reflexo

na interface

Perdas por
disperso
Feixe

Io

incidente

Feixe
transmitido

Perdas por reflexo

na interface

Fig. 1. Esquema dos processos que ocorrem quando um feixe de radiao electromagntica incide
numa clula que contm uma soluo absorvente.

atravessar um meio que contm uma

espcie absorvente (fig. 1), devido a
sucessivos processos de absoro, reflexes nas paredes da clula e a fenmenos de disperso [3a].
Considerando apenas os processos de absoro, a intensidade ) do feixe
transmitido, I, relaciona-se com a do feixe incidente, 1 0 (paralelo e monocromtico de comprimento de onda X), pela lei
de Beer [3]
I = 1010 e(x)cb
-

(1)

onde c (mol I -1 ) a concentrao da

espcie absorvente, x (I mo1 -1 cm -1 ) o
coeficiente de absoro molar ao comprimento de onda X, e b (cm) o percurso
ptico da radiao no meio 2 .
Experimentalmente, mede-se a razo de
intensidades
T = - = 10-e(^)cb (2)
0
que se designa por transmitncia. Para
um meio totalmente absorvente a transmitncia nula (1=0), enquanto que para
um meio completamente transparente
unitria (1=1 0 ). Embora a transmitncia
seja uma grandeza cujo significado
intuitivo, vulgarmente substituda pela
absorvncia
A = - Iog 10 T = E Ncb

(3)

que apresenta a vantagem de variar linearmente com a concentrao, percurso

ptico e coeficiente de absoro molar.

3. DESVIOS LEI DE BEER

A lei de Beer vulgarmente usada
para a determinao de concentraes,
coeficientes de absoro molar e mesmo
percursos pticos. A obteno de valores exactos destas grandezas deve ter
em conta os desvios linearidade da
absorvncia com a concentrao. Estes
desvios ocorrem para concentraes
superiores a 0.01 M e resultam da variao do coeficiente de absoro molar,
provocada pelas interaces entre
nvens electrnicas. A esta concentrao, a distncia mdia entre espcies
absorventes prxima de 70 A o que
faria supor a inexistncia de interaco
entre nvens electrnicas. Contudo,
devido existnciade uma distribuio
de distncias, os desvios lei de Beer
resultam de interaces entre pares de
molculas a menores distncias. Em
solues de electrlitos este efeito ainda mais pronunciado, podendo fazer-se
sentir para concentraes muito
inferiores. Uma outra causa de desvios
lei de Beer a variao do coeficiente de
absoro molar com o ndice de refraco do meio que, por sua vez, depende
da concentrao da espcie absorvente.
Os desvios lei de Beer provocados por
esta dependncia no so perceptveis
para concentraes inferiores a 0.01 M,
sendo geralmente ignorados. Outros
,

tcnicas experimentais
desvios provocados por limitaes instrumentais sero abordados na parte
referente instrumentao.

4.ESPECTROS ELECTRNICOS
Os espectros de absoro no UVVis de gases monoatmicos a baixa
presso so espectros de riscas,
enquanto os espectros moleculares so
espectros de bandas. Tal resulta do facto
de as molculas possuirem, para alm
da energia electrnica, energia vibracional e rotacional, enquanto os tomos
apenas possuem energia electrnica. O
diagrama energtico de uma molcula no
estado gasoso bastante mais complexo
do que o de um tomo (fig. 2), pois cada
estado electrnico molecular tem associados vrios estados vibracionais e rotacionais.

tados muito inferior diferena de

energia entre os estados electrnicos (a
diferena de energia entre nveis rotacionais da ordem de 10 cm -1 < > 0.13
kJmol - t), a banda de absoro correspondente a uma transio electrnica
composta de um "quase contnuo" de
transies. Em soluo, as diferenas
energia entre estados rotovibracionais
so ainda menores do que as observadas no estado gasoso, devido s interaces soluto-solvente.
A intensidade de absoro, medida
pelo maior ou menor valor de c, depende da seco recta de captura de um
foto pela espcie absorvente, isto , da
probabilidade da transio electrnica
que ditada pelo valor do momento
dipolar de transio. Transies com
valores de E >10 4 MOI -l cm -1 so francamente permitidas, enquanto valores de E
< 10 3 Imol -1 cm -1 indicam transies
proibidas [4].

Estados rotacionais

4.1 Transies electrnicas

do grupo carbonilo
Estados vibracionais

Estado electrnico excitado

Estados rotacionais

'

,Estados vibracionais

Estado fundamental

Figura 2. Diagrama esquemtico dos diferentes nveis

energticos de urna molcula.

Uma transio electrnica ocorre

quando a energia da radiao iguala a
diferena de energia entre os estados
envolvidos na transio, AE, pelo que
AE = hc / X

O carbono forma uma ligao

dupla (uma de tipo 6 e outra de tipo rt)
com o oxignio. A ligao 6 assegurada por dois electres (um do tomo de
carbono e outro do tomo de oxignio)
que vo ocupar uma orbital molecular
ligante (de mais baixa energia do que as
correspondentes orbitais atmicas),
resultante da coalescncia directa das
orbitais atmicas hbridas sp 2 . A ligao
n assegurada por dois electres numa
orbital molecular ligante, resultante da
coalescncia lateral das orbitais atmicas 2p, dos tomos de carbono e oxignio. Os dois pares de electres em orbitais sp 2 do tomo de oxignio no participam na ligao, pelo que ocupam orbitais moleculares no ligantes. n, com
energia semelhante das correspondentes orbitais atmicas. O diagrama de
nveis de energia, que inclui as orbitais
antiligantes 6 * e rr * (de maior energia
do que as correspondentes orbitais atmicas, pelo que no pa rt icipam na ligao), mostra que a transio de menor
energia corresponde passagem dum
electro da orbital n para a orbital rt*
(transio n_rr*).

Uma vez que a absoro de radiao UV-Vis por uma espcie absorvente
conduz promoo de um electro de
uma orbital para outra de maior energia,
as transies electrnicas podem ser
qualitativamente previstas a partir do
diagrama de orbitais moleculares. O
espectro de absoro de molculas complexas pode, em geral, ser interpretado
com base nos espectros dos seus grupos cromforos, desde que estes estejam separados pelo menos por uma ligao simples. A ttulo de exemplo, apresenta-se na fig. 3 o diagrama de orbitais
moleculares de um cromforo caracterstico, o grupo carbonilo (>C=0) [4,5].

Figura 3. Diagrama esquemtico da formao de orbitais moleculares para o grupo carbonilo.

C=0
a

r,

2p,
Spp

47,
+

^,\ \
\ \
\ \
\ \
^
\ \
` ) } 2pz

1 \

`
\
^
\

` ^

`,

\`^ \\ `^ n^ ^/ ^^ 41 41SP2
\\

1 ^ n
'1 I i

- /,

Q;

Figura 4. Diagrama de nveis de energia das orbitais

moleculares do grupo carbonilo.

(4)

onde h a constante de Planck, c a velocidade da luz no vcuo e X o comprimento de onda da radiao incidente. As
transies moleculares ocorrem, temperatura ambiente, do primeiro nvel
vibracional do estado electrnico fundamental para vrios nveis rotovibracionais dos diferentes estados excitados.
Como a diferena de energia entre os
nveis rotovibracionais dos estados exci-

^ -- 1
I

'

1
,

_ =
-/-t tI

II

I
Orbitais usadas
na formao de
ligaes simples

/ ,

L/

I
1

Orbitais preenchidas
(pares isolados)
(Orbital
mdlecular Q

rnm

CV

Orbital molecular 7
0

tcnicas experimentais
Tabela I

Caractersticas pticas de alguns grupos cromforos presentes

em molculas orgnicas e biolgicas

Cromforo
Alceno

Abico

Exemplo
CyHOCHae

CsHCCCHr

e m /

Solvente

xmax/nm

n-Heptano

177

13 000

t-i

178

10000

x+r*

196

2 000

225

160

186

10 00

n -ee*

280

16

n--x'

180

<1000

o-va*

293

12

n-ex^

Etanol

204

41

n +x^

iglu

214

60

n+xA

Etanol

339

n -+i

bootUno

280

22

n -..r.

n -Heptano

II

meel cm' 1

Transio

CH CCH

n -Hexano

Carbonilo

Q
CH r C H

Carboxilo

if
CV-1,C OH

Amide

0
ll
CH CNHr
CH3NNCH3

Azo

Nitro

Nitroso

Nitrato

CHyNOZ

C Ha NO

300

100

665

20

e-rl*

270

12

n +i

Eter Naito

Cz f40NO2

Dionno

Tabela I
Caractersticas pticas de alguns grupos cromforos presentes em molculas orgnicas e biolgicas

Esta transio ocorre no ultravioleta (X = 270nm). sendo o valor exacto da

sua energia dependente do solvente
(efeito solvatocrmico). Solventes polares estabilizam mais as orbitais no
ligantes n do que as orbitais antiligantes
n * , provocando o deslocamento das
bandas para maiores energias (deslocamento para o azul). Este tipo de transico tambm responsvel pela absoro no UV de anies inorgnicos (nitrato, nitrito, etc.), com relevncia em
Qumica Analtica Alimentar [6]. Outras
transi-es, associadas promoo de
um electro da orbital ligante para a
orbital antiligante n * (transio n >
7C * ), ou promoo de um electro da
orbital n para a orbital G * (transio n >
6 * ), ocorrem neste tipo de cromforos a
comprimentos de onda muito baixos
(energias muito elevadas), pelo que no
so experimentalmente acessveis com
os espectrofotmetros convencionais.

46

4.2. Compostos com transies

n min* e n ->6* no UV-Vis
As transies

11 -

n* podem

ocorrer no ultravioleta e visvel, desde

que exista deslocalizao dos electres
n, como sucede, por exemplo, nos compostos aromticos. Existem compostos
orgnicos, nomeadamente corantes,
com bandas de absoro n > n*
cobrindo toda a regio do visvel at ao
infravermelho prximo. As transies
TE n ' distinguem-se das transies
n - n * por responderem de modo diferente polaridade do solvente. Em geral,
solventes polares estabilizam mais a
orbital n* do que a orbital n, observando--se um desvio da banda n -- n * para
menores energias (deslocamento para o
vermelho) com o aumento da polaridade
do solvente. Transies n -x a* s ocorrem no ultravioleta para um nmero
muito reduzido de compostos (Xmax =
227nm, e 900 Imo1 -1 cm -1 para o
(CH3)3N; kmax= 215nm, E -600
Imol - lcm -1 para o CH 3 N 2 ) [1]. Estas
transies respondem polaridade do solvente do mesmo modo que as transies
n n * , pelo que so difceis de distinguir
destas por estudos solvatocrmicos.
Na tabela 1 resumem-se algumas
propriedades de grupos cromofros
caractersticos (grupo carbonilo, carboxilo, nitroso, etc.) que permitem interpretar o espectro de absoro de muitas
substncias.

4.3. Absoro de complexos metlicos

Na regio UV-Vis, e mesmo no
infravermelho prximo, absorvem tambm muitos complexos metlicos [7]. Os
espectros de absoro dos complexos de
lantandeos e actindeos so constitudos
por bandas muito estreitas, caractersticas
dos elementos centrais, sendo pouco
afectadas pelo tipo de ligando e solvente.
Tal resulta do facto de as transies electrnicas envolverem electres em subcamadas internas, que se encontram protegidos pelos electres das camadas electrnicas exteriores. Por seu lado, os complexos dos metais de transio apresentam espectros de bandas mais largas, que
so fortemente afectadas pelo tipo de
ligando, estrutura do complexo e solvente. O espectro de absoro UV-Vis de
complexos metlicos com um grupo doador e outro aceitante de electres pode
tambm apresentar bandas de transferncia de carga, resultantes da transferncia
de um electro do grupo doador para o
grupo aceitante. Um exemplo tpico a
banda de absoro do complexo de Fe(III)
com o io tiocianato (SCN - ),

[FeSCN(H2O)5]2+ (tiocianopentaaquoferro
(Ill)), que resulta da transferncia de um
electro do io tiocianato para o io frrico, que reduzido a io ferroso. A espcie electronicamente excitada relaxa rapidamente para o estado fundamental,
regenerando o complexo inicial.

5. INSTRUMENTAO
5.1 Espectrofotmetros convencionais
Os equipamentos de medida de
absorvncia (ou transmitncia) designam-se por espectrofotmetros ou por
fotmetros, conforme tenham ou no
possibilidade de fazer o varrimento de
comprimentos de onda (obteno do
espectro de absoro). Um fotmetro
(espectrofotmetro) de absoro basicamente constitudo por uma fonte de
radiao contnua, um selector de comprimentos de onda (filtros ou monocromador), o porta-amostras, um detector
de radiao (fotomultiplicador, bateria de
fotododos) e um medidor de corrente. A
fig. 5 mostra as configuraes bsicas
para fotmetros de feixe simples e de
feixe duplo.
Nos equipamentos de feixe
duplo mede-se directamente a absorvncia (transmitncia), enquanto nos
de feixe simples realizam-se medidas
sequenciais da intensidade do feixe
incidente (usando uma clula com o
solvente) e do feixe transmitido (usando uma clula com a amostra). Os
Figura 5. Esquema de blocos de um fotmetro de feixe
simples (a) e feixe duplo (b).
Selector

Cal
os

de comprimento
de onda
Diafragma

a) Fotmetro
de feixe

I r^

simples
^

HI
H

^^

I LJ
Lmpada

de emisso

Obturador

Espelho

sem ireflector

continua

b) Fotmetro
de feixe
duplo

Clula com
o solvente

Detector
de zero
%T

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PORTUGUESA
DE QUIMICA

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aplicvel), etc..

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tcnicas experimentais

equipamentos de feixe duplo utilizam

dois feixes de luz, um que passa numa
clula com a amostra e outro numa clula com o solvente, sendo os dois sinais
tratados electronicamente, de modo a
obter directamente a absorvncia (transmitncia).
Os fotmetros so muito mais baratos do que os espectrofotmetros, mas
no permitem a obteno de espectros.
Contudo, a relao sinal-rudo , em geral,
boa, devido ao uso de filtros de banda larga, sendo mesmo possvel usar fontes de
radiao de fraca intensidade (lmpadas
de filamento de tungstnio), bem como
detectores e circuitos de medida baratos.
De entre os espectrofotmetros,
merece realce o "velho" Spectronic 20,
cujo lanamento remonta aos anos 50, e
que ainda hoje, numa verso melhorada,
tem grande popularidade no ensino e na
indstria. Este espectrofotmetro de feixe
simples usa uma lmpada de filamento de
tungstnio (340-2500nm) e um fotomultiplicador sensvel na gama de 340-625nm,
o qual pode ser substitudo por um outro,
sensvel no vermelho at aos 900nm.
Os espectrofotmetros mais dispendiosos so de feixe duplo, utilizam duas
fontes de radiao (lmpadas de tungstnio e de deutrio), monocromador duplo,
e detectores e circuitos elctricos sofisticados, com excelentes razes sinal/rudo.
Estes espectrofotmetros tm resolues
da ordem de 0.1nm e permitem o traado
de espectros de absoro na gama de
180nm a 900nm (o uso de detectores de
sulfito de chumbo permite estender a
gama de comprimentos de onda ao infravermelho). A componente de luz parasita
geralmente inferior a 0.001% da intensidade do feixe incidente, em toda a gama de
comprimentos de onda.
Em meados dos
ter
anos 70, foram introduzidos os espectrofotMicrometros com detectores
5
:
L^
\ ^ amperfinetro
baseados em baterias de
fotododos.
I com
Neste tipo de es1st re
pectrofotmetros a radiao dispersa analisada por uma nbateria de
fotodidos sensveis a
gamas estreitas de energia, estando-se, assim, o
varrimento mecnico do
espectro. Estes espectrofotmetros tornaram-se
muito populares, por
permitirem a aquisio

Bator de
fotodiodos

C i^

Moneeromador /

(^1
^^

Fenda /

Cblula fotoecstlCe

t3

Fonte modulado
de lu[

Lente /

(laser)

Porta cblules (./

Obturador
Lente

Lm pede
de emisso
Sines

continua

alb

o ttico

Tre ternento
de sinal

Microfone

Figura 6. Esquema de blocos de um espectrototmetro de bateria de fotodiodos.

de um espectro (200nm a 800nm) em

menos de 0.1s. A sua principal limitao
reside na resoluo espectral que, tipicamente, da ordem de 2nm.

Espect de bsoradi

Figura 7. Esquema de blocos de um espectrototmetrototoacstico.

5.3. limitaes instrumentais

5.2. Espectrofotmetros fotoacsticos
A determinao de espectros de
amostras slidas e solues turvas 3 por
mtodos convencionais difcil, devido
interferncia da luz dispersa e reflectida.
Na espectroscopia fotoacstica so
detectados sinais fotoacsticos gerados
pela espcie absorvente, quando dissipa
a energia de excitao sob a forma de
calor. A dissipao de calor provm dos
processos de desactivao no radiativos, que envolvem a converso da energia electrnica da espcie inicialmente
excitada em energia translacional e rotovibracional das molculas vizinhas. A
expanso do meio, devida ao aumento
da temperatura, gera um sinal fotoacstico, desde que o feixe de excitao seja
modulado em frequncia da regio das
ondas acsticas.
Na figura 7 representa-se o diagrama de blocos de um espectrofotmetro
fotoacstico, composto por um feixe de
luz modulada, uma clula fotoacstica
onde so geradas as ondas sonoras e o
detector (um simples microfone) que
produz um sinal elctrico, que depois
amplificado e registado.
A intensidade do sinal fotoacstico, em condies experimentais adequadas, depende linearmente da densidade
ptica, a = cc, obtendo-se directamente
o espectro de absoro ao fazer o varrimento dos comprimentos de onda de
excitao. O sinal fotoacstico gerado
unicamente pelas espcies que absorvem a radiao de excitao, pelo
que no afectado pela luz dispersa e
reflectida.

A radiao electromagntica usada nos espectrmetros e espectrofotmetros policromtica, pois provm da

selecco por filtros ou monocromador
da radiao emitida por uma lmpada
de espectro contnuo. Estes seleccionam uma banda de radiao mais ou
menos estreita em energias, deixando
ainda passar luz parasita com energia muito diferente da radiao seleccionada.
5.3.1. Importncia da monocromaticidade
O uso de radiao policromtica
provoca desvios lei de Beer, pois o coeficiente de absoro molar, , depende do
comprimento de onda da radiao. Na
figura 8 apresentam-se trs situaes para
luz composta de 2 comprimentos de onda,
verificando-se um aumento do desvio para
grandes diferenas entre os valores do
coeficiente de absoro molar.

1.00

0.50

0.00
0 0

2.0

4.0

6.0

8. 0

10

c/10 -4 M

Figura 8. Efeito do uso de radiao policromtica (constituda por dois comprimentos de

onda) na variao da absorvncia com a concentrao.

tcnicas experimentais
De modo a diminuir a influncia da
policromaticidade na determinao de
absorvncias, estas devem, sempre que
possvel, ser efectuadas na regio da
banda de absoro onde as variaes
com o comprimento de onda sejam
mnimas. Na figura 9 observa-se que, no
caso de uma banda de absoro larga,
as absorvncias no mximo de absoro
(regio A) seguem a lei de Beer, enquanto na zona lateral da banda (regio B) os
desvios so significativos.
Regio A

Para resolver uma banda de absoro necessrio que a largura de banda

do monocromador seja inferior a 10% da
largura da banda de absoro. Esta condio pode ser impraticvel, pois a diminuio da largura das fendas do monocromador reduz a intensidade do feixe, o
que provoca a diminuio da razo
sinal/rudo.

5.3.2. Luz parasita

Na presena de luz parasita (luz de

comprimento de onda diferente do seleccionado), a absorvncia, Ap, dada por

os mtodos de ajuste, em que so determinadas simultaneamente diferentes

substncias, usando absorvncias a vrios comprimentos de onda. Neste tipo de
anlise . em geral, incorporada a informao das derivadas de vrias ordens
do espectro de absoro, que permitem
uma melhor selectividade [2]. Estes
mtodos, que tambm possibilitam
aumentar a sensibilidade das determinaes, s se tornaram prticos com o
advento dos espectrofotmetros de bateria de diodos, e com a vulgarizao e
expanso dos meios de clculo.

BIBLIOGRAFIA
Regio B

10 + p

A =log 1+I p
Adorn

c/M

Figura 9. Efeito do uso de radiao policromtica da

regio do mximo da banda de absoro (regio A) e da
zona lateral (regio B) na variao da absorvncia com a
concentrao.

Este problema importante quando se usam fotmetros (espectrofotmetros) baratos, que no permitem a seleco de uma banda estreita de comprimentos de onda. Por outro lado, a
monocromaticidade do feixe de luz,
determinada pelas fendas de entrada e
sada do monocromador, limita tambm
a resoluo do espectro de absoro. A
figura 10 ilustra a perda de resoluo de
um espectro com o aumento da largura
de banda do monocromador.
100

(5)

onde I p a intensidade de luz parasita.

Como a intensidade do feixe transmitido
inferior do feixe incidente (I<l o ) e
diminui com a concentrao, a componente de luz parasita provoca desvios
negativos lei de Beer (fig. 11).

2.0

1. D. A. Skoog, D. W. West, F. J. Holler, Fundamentals of Analytical Chemistry, 6th ed.,

Saunders College Publishing: New York, 1992.
2. L. G. Hargis, J. Howell, Anal. Chem. 64 (1992) 66R.
3. a) F. C. Strong, Anal. Chem. 24 (1952) 338. b) M.
N. Berberan-Santos, J. Chem. Educ. 67 (1990) 757.
4. a) R. C. Denney, R. Sinclair, Visible and
Ultraviolet Spectroscopy, John Wiley& Sons: New
York , 1988. h) H. H. Jaff, M. Orchin, Theory and
Applications of Ultraviolet Spectroscopy, Wiley:
New York, 1962. c) C. N. R. Rao, UltraViolet and
Visible Spectroscopy: Chemical Applications, 3rd
ed., Butter worths: London, 1975.
5. H. H. Jaff, D. L. Beveridge, M. Orchin, J. Chem.
Educ. 44 (1967) 383.

1.0

6. M. L. S. S. Gonalves, Mtodos Instrumentais

para Anlise de Solues, 2 1 edio, Fundao
Calouste Gulbenkian: Lisboa, 1990.
0

2.5

5.0

7.5

10.0

c/10-3 M

Figura 11. Eleito da luz parasita (I p ) na variao da

absorvncia com a concentrao.

7. F. A. Cotton, A. Wilkinson. P. L. Gauss, Basic

Inorganic Chemistry, 2 nd ed., Wiley: New York, 1987.
8. a) A. Rosencwaig, Anal. Chem. 47 (1975) 592A.
b) J. F. McClelland, Anal. Chem. 55 (1983) 89A.

50

NOTAS
Largura de

6. DESENVOLVIMENTOS PRESENTES
E FUTUROS

banda-0.5nm

100

Largura de
banda=9nm

48

400

500

600

10. Efeito da largura de banda do monocromador na resoluo do espectro de absoro.

O desenvolvimento da espectroscopia de absoro UV-Vis est, em grande medida, associado s suas aplicaes
analticas. Substncias muito variadas,
que vo desde os metais aos frmacos,
so doseadas por absoro UV-Vis.
Verificou-se nos ltimos anos um
aumento do interesse em processos de
doseamento de substncias orgnicas,
em especial as de interesse biolgico. A
par do desenvolvimento de novos mtodos de doseamento, tambm o tratamento de dados foi significativamente
melhorado. Merecem especial referncia

1 A intensidade fotnica do feixe de radiao pr oporcional ao nmero de fotes por m 2 e por s, vindo expressa em einstein m -2 s -1 . O einstein representa uma mole de fotes.
As unidades destas grandezas seguem a tradio
enraizada na comunidade cientfica, que e contrria
s recomendaes da IUPAC. No sistema de unidades SI recomendado pela IUPAC, o coeficiente de
absoro molar vem expresso em m 2 mort, a concentrao em mol m -3 e o percurso ptico em m.
2

3 0s

espectros destas substncias so geralmente

obtidos a pa rtir da reflectncia da amostra.

*Centro de Qumica-Fsica Molecular,

Instituto Superior Tcnico
1096 Lisboa Codex

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Este sistema consegue sensibilidades e
reprodutibilidades nunca dantes atingidas
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Controlo da temperatura para resultados
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Anlises a 185nm para maiores sensibilidades
Desenvolvimento de mtodos de um modo
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