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Como
100mL de
aguaresultado 0.1mL de DEPC por cada 100mL de agua a
tratar.
libre RNAasas
Quedaras as:
en base
Muestra 1
Muestra 2
Muestra 2
1,224 g/mL
Muestra 1
1296 g/mL 1,000 L
= 64.8
6. Qu?volumen de cadapreparacin
deg/mL
RNA se aplicara en el gel de agarosa?
50 L
R=Se divide 1g sobre la concentracin de cada muestra:
Muestra 2
Muestra 1
Muestra 2
1 g = 0.82
1 g
= 0.77
1224 1,296
g/mL
1,000 L
1,224
=
61.2
?
50 L
g/mL
10.
Buffer H
BSA
Muestra (DNA o
RNA)
Agua libre de
nucleasas
MspI
Volumen Final
Concentracin
del reactivo
Concentracin,
vol. o cantidad en
la Rxn.
Volumen para
1 Reaccin en
L
Volumen para el
coctel en L
2 Reacciones
10X
100X
------------------
1X
1X
Calcular Volumen y
Concentracin
Calcular Volumen
2 L
0.2 L
2 L
4 L
0.4 L
4 L
14.8 L
29.6 L
------------------1U
1U
1 L
20 L
20 L
38 L
Etiquetar los tubos, para el coctel, muestra y control.
Repartir el coctel en el tubo muestra y tubo control.
Aadir la enzima.
Incubar de acuerdo a recomendacin del proveedor.
Desactivar la reaccin de acuerdo al proveedor.
Analizar por electroforesis en gel de agarosa
Comparar los resultados experimentales con los obtenidos con
la digestin en slico del mismo plsmido