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COMPONENTE PRCTICO
BIOLOGA CELULAR Y MOLECULAR Cdigo 151009
ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD 2016
La gua de prcticas del curso de Biologa Celular y Molecular tiene como objetivo
dar herramientas al estudiante para comprender las interacciones bioqumicas,
genticas que se llevan a cabo en la clula y desarrollar su pensamiento cientfico
y crtico respecto a las relaciones que se dan en la Biologa celular y Molecular.
INTRODUCCIN
El estudio de las ciencias biolgicas siempre ha estado acompaado del uso del
microscopio; su uso contribuy en la formulacin de la teora celular. Hooke estudi
las clulas de la superficie de una hoja, y las paredes celulares del corcho,
consideradas por primera vez como unidad del organismo. Durtrochet escribi que
todos los tejidos orgnicos estaban formados por clulas globulosas pequesimas
de adhesin simple. Schleiden dijo: Todos los organismos estn compuestos de
clulas; Virchow dijo: Donde haya una clula, debi haber antes una clula
precursora. Los detalles microscpicos de la clula se hicieron evidentes al mejorar
el diseo del microscopio, de tal manera que para el siglo XIX se lograron identificar
casi todas las estructuras o componentes de la clula, las cuales actualmente
pueden describirse con el uso de diferentes tipos de microscopios; sin embargo, el
microscopio de luz es el ms utilizado, permitiendo observar la estructura bsica de
la clula. Con el microscopio compuesto, se pudieron apreciar organismos vivos
cuya existencia era desconocida para los primeros investigadores. Los
microscopios estn formados por tres sistemas fundamentales: 1) el sistema
mecnico, que es el sostn de los sistemas complementarios y que permite el ajuste
del punto focal y las dioptras; 2) el sistema ptico, que permite magnificar a
diferentes grados la muestra observada y 3) el sistema de iluminacin, que permite
iluminar y concentrar los haces luminosos en el punto de inters, as como regular
la intensidad de la iluminacin. Esta gua de laboratorio de Biologa Celular se
incluye experimentos y actividades bsicos que por principio debe conocer el
estudiante. La informacin contenida permite vincular los aspectos tericos con las
actividades prcticas propuestas. Aunque esta prctica cumple con las actividades
propuestas, es importante que el estudiante profundice sobre algunos temas
sugeridos. La biologa celular y molecular es una disciplina bsica apoyada en
ciencias bsicas y dan coherencias al entendimiento desde la biologa, bioqumica
y gentica a los distintos fenmenos celulares. El estudio de las propiedades de la
clula permite comprender el funcionamiento y la constitucin de las estructuras y
las interacciones celulares, las aplicaciones de este conocimiento a desarrollo de
biotecnolgicos.
Introduccin
Teniendo en cuenta que el tema del estudio en este curso, ya sea la clula o los
genes, requieren del desarrollo de instrumentos y tecnologas de apoyo entre ellas
el uso del microscopio. Los microscopios permiten obtener la imagen aumentada
del objeto.
Objetivo
Comprender el funcionamiento del microscopio y el procedimiento para su
manipulacin correcta.
Procedimiento:
1. Realizacin de Montaje hmedo. 1.1. Tome con un gotero una muestra de agua
estancada.
1.2. Coloque la gota de agua estancada sobre una lmina porta-objeto.
Cuestionario:
Introduccin
Objetivo
Material
Microscopio compuesto.
6 portaobjetos y 6 cubreobjetos.
Vasija con agua destilada.
Pipeta Pasteur.
Solucin de NaCl al 0.6%
Solucin de NaCl al 0.9%
Solucin de NaCl al 1.2%
Solucin de NaCl al 10%
1.- Empleando una lanceta estril obtenga una gota de sangre, colquela en un
portaobjetos limpio y seco, ponga el cubreobjetos y realice la observacin
correspondiente al microscopio.
Nota 1. Evite cualquier tipo de contaminacin de su muestra, por ejemplo con
alcohol, agua, etc.
2.- Repita el paso 1 pero ahora agregando a su muestra de sangre 2 gotas de agua
destilada.
3.- Repita el paso 1, y adicione a la muestra 2 gotas de las siguientes soluciones:
NaCl al 0.6% NaCl al 0.9% NaCl al 1.2% NaCl al 10% No realice las preparaciones
al mismo tiempo. Para obtener resultados satisfactorios es muy importante que
concluya con la observacin de una muestra antes de preparar la siguiente.
Clulas vegetales
Presentacin de resultados
Introduccin
Objetivo
Material
Procedimiento
Preparar una solucin STOCK de la siguiente manera: Coloque con una pipeta 5
ml de sangre desfibrinada en un vaso de precipitados, adicione 45 ml de solucin
isotnica de NaCl 0.17 M. Se agita levemente para homogenizar. Para preparar la
solucin al 100% de HEMOLISIS, coloque en un vaso de precipitados 0.5 ml de
solucin STOCK y agregue 3 ml de agua destilada; y luego adicione 26.5 ml de
solucin de NaCl 0.17 M. Agite.
Para preparar la solucin de 0% de HEMOLISIS, coloque en un vaso de precipitados
0.5 ml de solucin STOCK y 29.5 ml de solucin de NaCl 0.17 M. Se agita
ligeramente.
Para calibrar el espectrofotmetro primero ajuste a 0% de Transmitancia a una
longitud de onda de 525 nm, y luego llene una celda con la solucin de 100% de
HEMOLISIS y calibre a 100% de
Transmitancia a la misma longitud de onda. Una vez calibrado el espectrofotmetro,
se obtiene la lectura de Transmitancia para la solucin de 0% de HEMOLISIS.
Nota.
- Los datos obtenidos servirn para realizar la curva estndar para Hemlisis de la
sangre, graficando % de Transmitancia contra % de Hemlisis.
*Posteriormente en un vaso de precipitados coloque 29.5 ml de una de las
soluciones (Oxalato de amonio, Metanol, Fructosa, Butanol, Glicerol o cido ctrico),
en seguida adicione 0.5 ml de solucin STOCK, agitando suavemente y llenando
Presentacin de resultados
Cuestionario
Introduccin
Objetivo
Material
Reactivos
Procedimiento
1.- En tres tubos de ensayo, coloque en cada uno de ellos un mililitro del cultivo de
levaduras. Un tubo se pone en el refrigerador durante 10 minutos. Otro se coloca
en el bao Mara a 30C, y el ltimo se tapa con papel aluminio y se pone en un
bao Mara hirviendo durante 10 minutos.
2.- Al trmino de la exposicin de cada temperatura, se coloca de inmediato en cada
tubo 0.5 ml de rojo de Congo al 0.4%. Agite cada tubo y deje en reposo durante 5
minutos. Realice las observaciones al microscopio de cada uno de los tubos,
poniendo atencin al grado de tincin que se presenta.
3.- En base en sus observaciones seleccione el cultivo de levaduras para cumplir
mejor el objetivo de su prctica. Coloque sobre un portaobjetos unas gotas del
cultivo de levaduras con gotas del cultivo de ciliados. Observe al microscopio y
realice un esquema inicial. Siga observando cuidadosamente hasta visualizar de
manera anloga la funcin de los lisosomas en ciliados (cambio de color).
Objetivo
Material
Microscopio.
Aceite de inmersin.
Acetocarmn
Metanol,
Bistur
Micropreparados que ilustran los procesos de mitosis y meiosis.
Procedimiento
1. Con ayuda de una pinza retire la capa externa marronacea o roscea y lave con
abundante agua, esto se realiza para eliminar restos de sustancias con las que
frecuentemente han sido tratadas para inhibir o retardar la germinacin de las
raicillas.
2. Llene un vaso de precipitados con agua y coloque un bulbo de cebolla sujeto con
dos o tres palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el agua.
3. Pngalo a germinar a 25C o a temperatura ambiente durante 3 das, al cabo de
estos aparecern numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm. de longitud.
4. Revise diariamente y procure que la corona no se deseque para lo cual es
necesario rellenar con agua cada 24 horas.
5. Cuando las races tengan entre 0.5 y 1 cm de longitud, realice cortes de raz de
aproximadamente 2 3 mm a partir del pice.
6. Colquelas en una lmina portaobjetos. Adiciona una gota del colorante
acetocarmn.
Presentacin de resultados
Cuestionario
a. Qu etapas de la meiosis y mitosis observo?
b. Qu proceso se est desarrollando en las etapas observadas?
c. Qu tipo de clulas se estn observando?
d. Cuntos cromosomas poseen las clulas en mitosis?
e. Cuntos cromosomas poseen las clulas en meiosis?
SEPARACIN DE MEZCLAS
NOMBRE_________________________________________
Tu objetivo es obtener por separado cada uno de los componentes que componen la mezcla 1. Para
ello, de los instrumentos de laboratorio que tienes frente a ti, puedes usar los que consideres
necesarios para lograr tu objetivo.
Repite el experimento una segunda vez usando el frasco que contiene la mezcla nmero 2, esta
mezcla contienen las mismas sustancias que componen la mezcla 1. De nuevo tu objetivo es separar
los componentes de la mezcla. Puedes cambiar el procedimiento si lo consideras necesario.
Finalmente, realiza una recomendacin sobre el procedimiento ms eficiente y preciso para separar
los componentes de la mezcla.
Ahora, observa cada una de los instrumentos de laboratorio que tienes frente a ti. Piensa acerca de
cmo puedes usar algunos de ellos para solucionar el problema. T no tienes porque usar todos los
instrumentos que estn sobre el mesn.
ADELANTE
PROBLEMA 1: SEPARACIN DE LA MEZCLA 1
Toma la mezcla 1 y realiza el procedimiento para separar sus componentes.
Despus de realizar el experimento, por favor responde las siguientes preguntas con tus
compaeros y enva en un archivo pdf, esta gua diligenciada. Ten en cuenta la redaccin y
ortografa para entregar el informe. Enva adems fotos o videos del cada uno de los dos
problemas.
1. Qu instrumentos de laboratorio usaron para separar la mezcla del frasco 1?
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
________________________________________
2. Cules sustancias lograron separar por completo de la mezcla inicial? (puedes seleccionar
varias) _______ Agua _______ Arena _______ Limaduras de hierro
3. Usen el platillo para pesar cada una de las sustancias que lograron separar y escriban abajo el
valor que obtuvieron.
Prez Avila, J., Valenciaga Rodrguez, J. L., Acosta, A., Nicolau Mena, O., Turcios
Trist, S. E. & Navaroli Fernndez, F. (2012). MECANISMOS DE ACCIN
HORMONAL A TRAVS DE RECEPTORES UBICADOS EN LA MEMBRANA
CELULAR..
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