Preinforme LBM

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD
Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA

Programa: Zootecnia.
PREINFORME: Laboratorio de bioqumica metablica-LBM
Nombre y Apellido: Sor Margarita Martinez; Cdigo: 1019122866; Fecha 10/05/2015
TTULO DE LA PRCTICA: Actividad uresica (AU) en forrajes, suelos y harinas
INTRODUCCIN.
La ureasa cataliza la hidrlisis de urea a carbonato, el cual espontneamente se descompone a amoniaco y bicarbonato. La ureasa en una enzima amihdrolosa esta enzima tambin participa en la hidrlisis de los
sustratos tipo ureico naturales, como por ejemplo los productos resultantes de la mineralizacin del cido nucleico. La actividad ureasica vara de forma directamente proporcional con la materia orgnica. Al hacer la
titulacin se calcula la cantidad de urea hidrolizada a lo que es llamado cuantificar.
Mentefacto diagrama conceptual.
MATERIALES Y MTODOS
1.1. Materiales y equipos requeridos.
Equipos.
Beaker
Pesa analtica.
Varilla de vidrio
Shaker
Probeta
Soporte universal
Tubos de ensayo con gradilla.
Erlenmeyer
Muestra de suelo
1.2 Reactivos a utilizar
Reactivo
Cloruro de mercurio.
cido clorhdrico
Formula
HgCl2
HCl
Papel filtro
Embudo
Esptula
Reloj de vidrio.
Bureta.
Pinzas para bureta
Nuez
Termstato
Pipetas graduadas.
Muestra de forraje.
Concentracin.
1%
0,1N

Cloruro de sodio
Urea
Ureasa
NaCl
H2NCONH2
En buffer fosfatado.
1%
0,25 M
0,5 %
Procedimiento:
Extraccin de la ureasa. Para mirar la ESAU: Extracto de suelo para actividad uresica y EFAU: Extracto de forraje para actividad uresica.
Extraer la ureasa
del suelo y del
forraje.
muestreo
Pasto
Suelo.
Agutar con varilla de

vidrio.
agitar en el shaker
por 10 minutos a 200
revoluciones por
minuto.
Sacar el filtrado y
pasar 10 ml en dos
tubos de ensayo
Rotular y tapar.
Pesar.Aproximad
amente 2gramos
de suelo y pasto.
dejar reposar por 3

minutos.
Trasbasar. Pasar los

muestras pesada a un
beaker con 20 ml de
NaCl
Filtrar.
enfriar en la
nevera.
Preparar 4 tubos de ensayo rotularlos y aadirle la cantidad de reactivos indicados por la gua.
Agitar 30 segundos.
Incubar a 37C por 20 minutos.
Luego pasar el contenido uno por uno de los tubos de ensayo a un Erlenmeyer.
Agregar el indicador.
Verificar SI cambia de color
Titular con HCl y mira los ml gastados.
Llenar la tabla de datos de la gua de actividades.
Resultados esperado
La enzima ureasa produjo hidrolisis de urea.

La cuantificacin aproximadamente de la actividad ureasica de un suelo y forraje de un lugar predeterminado.
Glosario.
catin amonio: (NH4 + )

RBE: Reaccin Bioqumica Enzimtica
AU: Actividad uresica

ESAU: Extracto de suelo para actividad uresica

EFAU: Extracto de forraje para actividad uresica
Bibliografa.
Granados, J.,(2010), Mdulo Fisicoqumica Ambiental, Unidad 1, Cap 3; ECAPMA; UNAD Granados, J.,(2010), Protocolo prcticas de laboratorio FA, Pg 2025; ECAPMA; UNAD Granados., J;
Garca, J.,(2000), Fisicoqumica Aplicada; Cap 11, Ed Antropos, Bogot, Colombia
TTULO DE LA PRCTICA: CARBONO ORGNICO, MATERIA ORGNICA Y CAPACIDAD AMORTIGUADORA DE SUELOS
INTRODUCCIN.
La materia orgnica ha sido muy estudiada y evaluada durante aos y se ha atribuido a diferentes factores para su descomposicin. Permitindole tener varias propiedades fsico y qumicas que le
ayudan a crecimiento microbiano, sustratos, enzimas, y nutrientes tanto buenos como malos en el suelo y se puede observar las fuerzas internas como externas del crecimiento de estos
microorganismos.
MATERIALES Y MTODOS
Equipos.
Beaker
Pesa analtica.
Varilla de vidrio
Shaker
Papel filtro
Embudo
Esptula
Reloj de vidrio.
Bureta.

Probeta
Soporte universal
Erlenmeyer
Reactivo
Agua destilada
cido sulfrico
Bicromato de potasio
Sulfato ferroso
cido fosfrico
Pinzas para bureta

Nuez
Pipetas graduadas.
Muestra de suelo
Formula
H2O
H2SO4
K2Cr2O7
FeSO4
H3PO4
Concentracin.
1%
0,02 N
1N
1N
0,1 %
Procedimiento:
Extraer el CO, MO y
capacidad
amortiguadora
Agutar 3 minutos con

varilla de vidrio.
enfriar 5 minutos.
muestreo de solo
Suelo.
agregar 10 ml de H22SO44
agregar agua destilada

hasta completar 100ml
Pesar.Aproximada
mente 0,4
gramos de suelo.

beaker con 10 ml de
K22Cr22O77
agitar suavemente por

1 minuto.
agitar 5 minutos en el
shaker a 150
revoluciones por
minuto
reposar por 2 horas
Filtrar
Sacar 20 ml y distribuirlo en un tubo de ensayo y en un Erlenmeyer.
Rotular el tubo de ensayo, taparlo y guardarlo en la nevera.
En el Erlenmeyer agregar 90 ml de agua destilada, Agitar por 30 segundos, agregar 5 ml de H 3PO4 y agregar 30 gotas de difenilamina.
Mezclar en el shaker por 5 minutos a 150 revoluciones por minuto.
Titular con FeSO4 y mirar cuanto ml se gastaron hasta que apareciera un color verde brillante.
Resultados esperado
Observar el equilibrio de la materia orgnica de una muestra de suelo por medio de la titulacin y la tcnica espectrofotomtrica el carbono orgnico.

Cuantificar la capacidad amortiguadora de muestras de suelos mediante tcnicas potenciomtricas y de titulacin volumtrica, en presencia de los indicadores adecuados para lo que
queremos ver respectivamente.
Glosario.
CO: carbono orgnico

MO: materia orgnica.
BI: bases intercambiables.
A: Absorbancia.
NT: Nitrgeno total
Bibliografa.
TTULO DE LA PRCTICA: DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE), EN FORRAJES, POR EL MTODO DE FENOL-CIDO SULFRICO.
INTRODUCCIN.
Ayuda en la absorcin de energa, en el metabolismo de los rumiantes y los monos gstricos, y en su digestin.
Son macronutrientes proveedores de energa para el animal, para la planta, etc. Son convertidos en azucares y en almidones. Estos carbohidratos no tienen fibra.

MATERIALES Y MTODOS
Equipos.
Beaker
Pesa analtica.
Varilla de vidrio
Shaker
Embudo
Reloj de vidrio.
Reactivo
Hidroxido de sodio
cido clorhdrico
Glucosa
Agua destilada
Papel filtro
Termostato
Esptula
Pipetas graduadas
Muestra de forraje
Probeta
espectrofotmetro
Formula
NaOH
HCl
C6H12O6
H2O
Concentracin.
0,6 N
0,1N
1%
Procedimiento:
Extraccin la hidrolisis acida.

pesar mas o
menos 2 gramos
de forraje
vertirlo e n unbeaker
con 50 ml de HCl
filtrar
sacr 5 ml en un tubo
de ensayo con 5 ml
de NaOH
agitar
incubar a 90 C por
5 minutos
agitar en el saker
por 5 minutos a
150
revoluvciones por
minuto
agitar con la varilla

de vidrio y rotular
sacar y dejarlo
enfrian en bao de
agua
incubar por 20 minutos

a 90 C
hacer la mexcla
reactica en 3
tubos de ensayo
hacer la Lectura
espectrofotometri
ca
Resultados esperado
Con la extraccin de la hidrolisis acida cuantificar la cantidad de carbohidratos no estructural de los almidones hidrolizables y azucares solubles.
Glosario.
CNE: Carbono no estructural.

FFCNE: Filtrado de forraje para carbohidratos no estructurales.
B=blanco
St=Estndar
m =muestra
Bibliografa.
TTULO DE LA PRCTICA: ACTIVIDAD CATALTICA DE LA CATALASA (ACAT)
INTRODUCCIN.
La catalasa como biocatalizador de origen proteico, es una enzima xido-reductasa que participa en la degradacin del perxido de hidrgeno participando de una forma activa en la fotorespiracin de la fotosntesis de las plantas. Se encuentra en animales y protistas; Todas las enzimas son protenas. Por lo tanto, todas las enzimas sufren desnaturalizacin frente al calor. Esto
quiere decir que cuando la temperatura es muy elevada, la enzima pierde su estructura terciaria, por lo tanto su sitio activo tambin se desnaturaliza, y ya no puede cumplir su funcin.

MATERIALES Y MTODOS
Equipos.
Beaker
Pesa analtica.
Varilla de vidrio
Shaker
Probeta
Soporte universal
Erlenmeyer
Muestra de suelo
Reactivo
Catalasa
Perxido de hidrogeno
cido sulfrico.
Permanganato de potasio.
Buffer fosfato
Papel filtro
Embudo
Esptula
Reloj de vidrio.
Bureta.
Pinzas para bureta
Nuez
Termstato
Pipetas graduadas.
Muestra de forraje.
Formula
2 H2O2
2 H2O + O2
H2O2
H2SO4
KMnO4
En buffer fosfatado.
Concentracin.
0,05 %
0,05 M
0,02 N
0,01 M
0,5 M
Procedimiento:
Extraccin de la catalasa del suelo y del forraje.

Extraer la catalasa
del suelo y del
forraje.
muestreo
Pasto
Suelo.
Agutar con varilla de

vidrio.
agitar en el shaker
por 10 minutos a 200
revoluciones por
minuto.
Sacar el filtrado y
pasar 10 ml en dos
tubos de ensayo
Rotular y tapar.
Pesar.Aproximad
amente 2gramos
de suelo y pasto.

beaker con 20 ml de
NaCl
dejar reposar por 3

minutos.
Filtrar.
enfriar en la
nevera.
Preparar 3 tubos de ensayo rotularlos y aadirle la cantidad de reactivos indicados por la gua para hacer la mezcla.
Agitar 30 segundos.
Incubar a 37C por 5 minutos.
Luego pasar el contenido uno por uno de los tubos de ensayo a un Erlenmeyer.
Titular con KMnO4 y mira los ml gastados.
Llenar la tabla de datos de la gua de actividades.
Resultados esperado
Hacer la titulacin de a actividad de la catalasa con permanganato de potasio.

Hacer la cuantificacin de la actividad enzimtica de la catalasa en un forraje
Glosario.
RBE: Reaccin Bioqumica Enzimtica.

FAD
FMN
AG: cidos grasos.
ECAT: Extractos de catalasa
EFCAT: extracto de forraje para catalasa
ESCAT: extractos de suelo para catalasa.
Bibliografa.

TTULO DE LA PRCTICA: CUANTIFICACIN DE NITRGENO NO PROTEICO (NNP) (Fraccin A de Van Soest )

INTRODUCCIN.
El nitrgeno no protenico viene del amonio, del amoniaco, la urea, el nitrato y el nitrito sirven de remplazo de protenas para los rumiantes, se degrada hasta pptidos por accin de las proteasas.
Los pptidos son catalizados hasta aminocidos libres, y stos hasta amonaco, cidos grasos voltiles y dixido de carbono. Permitiendo que los microorganismos tengan buena energa (con la
energa disponible, generada durante la digestin) para hacer la sntesis de protenas.
MATERIALES Y MTODOS
Equipos.
Beaker
Pesa analtica.
Varilla de vidrio
Tubos de ensayo
Embudo
Reloj de vidrio.
Reactivo
Acido Tricloroactico
(ATA)
Papel filtro
Esptula
Pipetas graduadas
Muestra de suelo
Probeta
espectrofotmetro
Formula
Cl3-C-COOH
Concentracin.
10%

Agua destilada
H2O
Procedimiento:
Extraccin la hidrolisis acida.
pesar mas o
menos 2 gramos
de suelo
vertirlo e n unbeaker
con 30 ml agua
destilada
agitar por dos

minutos con la
varilla de vidrio.
sacr 5 ml de filtrado a
un tubo de ensayo y
rotular.
hacer la mezcla
reactiva en 3 tubos
de ensayo
agitar c por 30
segundos
hacer la Lectura
espectrofotometrica
Leer la absorbancia.
registrar en tabla
de datos.
Filtrar
Llevar al
espectrometro-
Resultados esperado
Cuantificar el nitrgeno no proteco (NNP) por el mtodo de Van Soest

Aplicar tcnicas instrumentales analticas de Kjeldhal y espectrofotomtricas para determinar el contenido de NNP y Protena verdadera (PV) en suelos.
Glosario.
NNP: Nitrgeno no proteico.

A: Absorbancia
Bibliografa.

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TTULO DE LA PRCTICA: Actividad uresica (AU) en forrajes, suelos y harinas

Mentefacto diagrama conceptual.

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Agutar con varilla de

dejar reposar por 3

Trasbasar. Pasar los

La enzima ureasa produjo hidrolisis de urea.

catin amonio: (NH4 + )

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ESAU: Extracto de suelo para actividad uresica

TTULO DE LA PRCTICA: CARBONO ORGNICO, MATERIA ORGNICA Y CAPACIDAD AMORTIGUADORA DE SUELOS

Mentefacto diagrama conceptual.

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Pinzas para bureta

Agutar 3 minutos con

agregar agua destilada

Trasbasar. Pasar los

agitar suavemente por

reposar por 2 horas

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CO: carbono orgnico

Mentefacto diagrama conceptual.

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UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD

agitar con la varilla

incubar por 20 minutos

CNE: Carbono no estructural.

TTULO DE LA PRCTICA: ACTIVIDAD CATALTICA DE LA CATALASA (ACAT)

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD

Mentefacto diagrama conceptual.

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD

Agutar con varilla de

Trasbasar. Pasar los

dejar reposar por 3

Hacer la titulacin de a actividad de la catalasa con permanganato de potasio.

RBE: Reaccin Bioqumica Enzimtica.

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD

TTULO DE LA PRCTICA: CUANTIFICACIN DE NITRGENO NO PROTEICO (NNP) (Fraccin A de Van Soest )

Mentefacto diagrama conceptual.

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD

agitar por dos

Cuantificar el nitrgeno no proteco (NNP) por el mtodo de Van Soest

NNP: Nitrgeno no proteico.

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