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Practica No 2

Tipificacin del subgrupo de A uso de Lectina A1

Objetivo: Al terminar la prctica, el alumno al haber encontrado un grupo A determinar si se trata de un


subgrupo A1 o A2
Generalidades: Los eritrocitos que poseen antgeno A pueden ser subdivididos en Al y A2, las clulas
rojas del grupo A que aglutinen con Anti Al lectina, se consideran del subgrupo, aquellas que no aglutinan
con Anti A1 lectina, se clasifican como A2. Aproximadamente el 80 % de las clulas, son Al y el restante
20% se consideran A2.

Principio: Los procedimientos usados con este reactivo, estn basados en el principio de aglutinacin, las
clulas humanas normales, conteniendo antgenos se aglutinan en presencia del anticuerpo del antgeno
correspondiente algunos extractos de semillas lectina contienen aglutininas con especificidad de grupos
sanguneos humanos, el extracto de la semilla dolichus biflorus es virtualmente especfica para el
antgeno Al en clulas rojas humanas contiene un fito hemo aglutinina, la cual como se dijo anteriormente
aglutina las clulas rojas de los subgrupos Al o A1B.

Material y equipo:

1 gradilla

4 tubos ensaye 10 x 75

2 pipetas Pasteur con bulbo

1 centrifuga clnica o Serofuge

Suero Anti-Al lectina

Solucin salina en pizeta.


Mtodo en tubo.
1.
Preparar una suspension de glbulos rojos en solucin salina al 5%
2.
Colocar una gota de Anti A Lectina en un tubo de 10x 75
3.
Con una pipeta Pasteur, agregar una gota de la suspensin de glbulos rojos.
4.
Mezclar bien y centrifugar a 2500 r.p.m por un minuto.
5.
Resuspender los glbulos rojos cuidadosamente y examinar el tubo en busca de aglutinacin.

Interpretacin.
1.
2.
3.

Cuando los glbulos rojos son aglutinados la reaccin es positiva e indica la presencia de
antgeno A1 y por lo tanto los glbulos rojos son A1
Cuando los glbulos rojos no aglutinan, la reaccin es negativa e indica la ausencia de antgeno
A1 y los glbulos rojos son A2
Cuando se investiga en una sangre AB, con Antia Al lectina, si aglutina es AlB, si no aglutina es
A2B

Comentarios: No se requiere preparacin especial del paciente previo a la recoleccin de los


especimenes, puede usarse sangre recolectada con o sin Anticoagulantes. Las muestras de sangre
deben ser analizadas lo antes posible despus de la obtencin. Si el anlisis tiene que ser retrasado, las
muestras deben conservarse bajo refrigeracin entre 2 y 8 C.

Los glbulos rojos recolectados y conservados en citrato de sodio, oxalato de amonio; con
oxalato de potasio han de mostrado que mantienen su reactividad por 28 das. Los glbulos rojos
recolectados y conservados con sangre coagulada o en citrato de sodio u oxalato de sodio, han
demostrado su reactividad por lo menos durante 14 das; si los hemates se recolectan sobre EDTA o
heparina, stas deben ser analizadas dentro de las 48 horas.

Limitaciones del procedimiento:

Todas las pruebas usando antisuero hemoagrupadores ABO, deben ser llevadas a cabo a
temperatura ambiente y nunca incubarse a temperaturas ms elevadas,
El antgeno Al no es totalmente expresado en clulas rojas de recin nacidos y pueden
obtenerse falsos negativos
Glbulos rojos de ms de 28 das pueden ser probados con este reactivo an cuando las
reacciones positivas pueden ser ms dbiles que las obtenidas de glbulos rojos frescos,
Contaminacin de los especimenes de sangro o de los materiales suplementarios usados,
pueden interferir con los resultados de la prueba.

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Lectina Anti A1 y Lectina H
Los reactivos Anti Lectina A1 y Lectina H son usados para la clasificacin de
eritrocitos de grupo A. La prueba se realiza haciendo reaccionar cada una de las
lectinas con los eritrocitos y dependiendo con cul de las lectinas se lleve a cabo la
reaccin, se pueden clasificar a los individuos como A1 o A2.
Anti A1 Lectina se prepara a partir del extracto de semillas de Dolichos biflorus.
Lectina H es un extracto de semillas de Ulex europaeus.
Presentacin: Frasco de 2 ml, Frasco de 5 ml

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