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MORFOLOGIA,

CITOLOGIA E
FISIOLOGIA DA CLULA
BACTERIANA

Profa. Francis Moreira Borges

SISTEMAS DE
CLASSIFICAO DOS
ORGANISMOS

Linnaeus
Primeiro sistema de classificao de microrganismos 1753
(Carollus Linnaeus)
Domnio (Reino) - Diviso (filo) Classe Ordem Famlia Gnero
Espcie
Domnio Animalia
(animais e protozorios)
Constitudo por seres no-fotossintticos, mveis e sem parede
celular
Plantae
(plantas, algas, bactrias e fungos)
Constitudo por organismos fotossintticos, imveis e com parede
celular

Haeckel
Tentativa de acomodar melhor os microrganismos 1866 (Ernest
Haeckel)

Organismos unicelulares de organizao simples terceiro reino =>


PROTISTA

Animalia
(animais)

Plantae
(plantas e algas
multicelulares)

Protista
(algas unicelulares, bactrias protozorios e
fungos)

Whittaker
Desenvolvimento da microscopia e tcnicas bioqumicas 1969
(Robert H. Whittaker)
Cinco reinos relacionados com estrutura celular e forma de obteno de
nutrientes

Animalia (animais)

Plantae (plantas)

Protista (algas e protozorios)

Fungi (fungos)

Monera (procariotas)

RVORE FILOGENTICA DA VIDA

Classificao dos seres vivos, de acordo com Whittaker (1969)

Woese
Sistema de classificao fundamentado no argumento de que a
diviso dos microrganismos em procariotos e eucariotos era
insuficiente 1991 (Carl R. Woese)
Diviso dos procariotos em Archae e Bacteria - seqncia do RNAr 16S e 18S

Archaea
(procariotas)

Bacteria
(procariotas)

Eukarya (eucariotas: fungos, algas, protozorios, plantas e


animais)

As archaea so procariotas porque no possuem ncleo envolvido por membrana, mas


possuem lipdios e cidos nuclicos ribossomais diferentes das bactrias e dos
eucariotos

RVORE FILOGENTICA DA VIDA

Classificao dos seres vivos, de acordo com Woese (1991)

PRINCIPAIS GRUPOS DE PROCARIOTOS

Domnio Bacteria
Grande variedade fisiolgica e morfolgica.
Diferentes tipos nutricionais quanto a fonte de carbono, energia e fatores
ambientais (oxignio, pH, temperatura e presso osmtica) so encontrados.
Os principais grupos filogenticos esto agrupados em 16 filos ou divises

Domnio Archaea
Bactrias com caractersticas altamente especializadas capazes de resistir a
altas temperaturas, concentraes de sal e valores extremos de pH.
Metabolizadores incomuns como redutoras de sulfato e metanognicas.
Os principais grupos filogenticos esto agrupados em 2 filos. Mais 2 filos
foram descobertos e compe formas de vida primitivas e as menores j
descobertas

Proteobactrias
Espiroquetas

Deinococos

Bactrias
hipertermfilas

Flavobactrias

DOMNIO EUBACTERIA
Cianobactrias
e Proclorfitas

Cytophaga

Chlamydia

Bactrias verdes
sulfurosas

Planctomyces
Nitrospira e
Deferribacter

Bactrias verdes
no-sulfurosas
Verrucomicrobios

Bactrias Gram positivas

Halfitas
Euryarchaeota

Termfilas
Metanognicas

DOMNIO ARCHAE

Crenarchaeota

MORFOLOGIA BACTERIANA

BACTRIAS - clulas procariontes, constituindo os menores seres vivos e os mais simples

estruturalmente, embora complexos e diversificados do ponto de vista bioqumico e


metablico - ADAPTAO
Caractersticas bsicas dos procariontes:
Ausncia de compartimentos dentro da clula - metablitos dispersos no citoplasma;
Ausncia de ncleo verdadeiro - cromossomo bacteriano disperso no citoplasma

Morfologia Bacteriana:
As clulas bacterianas so caracterizadas morfologicamente pelo seu tamanho, forma e arranjo.

Tamanho: 0,3 /0,8 m at 10/25 m. As espcies de interesse mdico variam entre 0,5 a 1,0 m por 2 a 5
m.
Forma e arranjo:

- Cocos (formas esfricas): grupo homogneo em relao a tamanho, sendo clulas menores (0,8 a 1,0
m).

Diplococos: cocos agrupados aos


pares. Ex.: Neisseria (meningococo)

Ttrades: agrupamentos
de quatro cocos

Estreptococos: cocos agrupados em cadeias.


Ex.: Streptococcus

Sarcinas: agrupamento
de oito cocos em forma
cbica. Ex.: Sarcina

Estafilococos: cocos em grupos irregulares,


lembrando cachos de uvas. Ex.: Staphylococcus

Bacilos ou bastonetes: cilndricos, forma de basto, podendo ser longos ou


delgados, pequenos e grossos, extremidade reta, afilada, convexa ou
arredondada.

Diplobacilos: bastonetes agrupados aos pares.


Estreptobacilos: bastonetes agrupados em cadeias.
Paliada: bastonetes agrupados lado a lado como palitos de fsforos.

Formas helicoidais ou espiraladas: clulas de forma espiral.

Espirilos: possuem corpo rgido e se movem s


custas de flagelos externos, dando uma ou mais
voltas espirais em torno do prprio eixo.

Espiroquetas: so flexveis e locomovem-se s custas de


filamentos axiais (flagelos periplasmticos), podendo das
vrias voltas completas em torno do prprio eixo. Ex.: Gnero
Treponema

Formas de transio

Bacilos muito curtos: cocobacilos. Ex.: Prevotella

Espirilos muito curtos, assumindo formas de


vrgula: vibries. Ex.: Vibrio cholerae

CITOLOGIA BACTERIANA
A observao interna das estruturas celulares d-nos uma idia de como a
bactria funciona no ambiente. A figura a seguir representa as diversas estruturas
bacterianas:

ESTRUTURAS CELULARES EXTERNAS


Flagelos
Estruturas especiais de locomoo, constitudas pela protena flagelina, que formam
longos filamentos que partem do corpo da bactria e se estendem externamente parede
celular.
O flagelo propulsiona a bactria por movimento rotatrio => dependente de energia
fornecida pela diferena de potencial de membrana (fluxo de ons H).
A protena flagelar antgeno H til para diferenciar entre os sorovares (variaes dentro
de uma mesma espcie G-) Ex: E. coli
Distribuio dos flagelos: atrquias (sem flagelo)

a) monotrquio

b) anfitrquio

c) lofotrquio

b) peritrquio

Fmbrias

Estruturas filamentosas mais curtas e delicadas que os flagelos, semelhantes a


plos, que se originam da membrana plasmtica, e so usados para fixao, e
no para motilidade.
So constitudas por uma protena denominada pilina.
Esto relacionadas com a aderncia s superfcies mucosas (fmbrias comuns)
=> colonizao.

Pili
So mais longos que as fmbrias, havendo um ou dois por clula. Une as
clulas para transferncia de DNA de uma clula para outra.
Pili F => relacionado com a transferncia de material gentico durante a
conjugao bacteriana (fmbrias ou pili sexual codificadas pelo plasmdeo F).

Pili sexual

Fmbria comum

Cpsula
Camada que circunda a clula bacteriana externamente a parede celular, de consistncia
viscosa e de natureza polissacardica (polissacardeo extracelular) ou polipeptdica.
Pode ser evidenciada por mtodos especiais de colorao (tinta nanquim).
Funes: proteo da clula bacteriana contra desidratao, permitir a fixao da bactria
em vrias superfcies, evitar a adsoro de bacterifagos na clula bacteriana.
Relacionada virulncia da bactria, pois confere resistncia fagocitose pelas clulas
de defesa do corpo em uma mesma espcie, amostras encapsuladas so mais virulentas
que as no-encapsuladas AUMENTA A CHANCE DE INFECO.

Parede Celular
Estrutura rgida que recobre a membrana citoplasmtica e d forma s
clulas, alm de proteo, mantendo a presso osmtica intrabacteriana e
prevenindo expanso e eventual rompimento da clula.
Composio: peptidioglicano (mucopeptdeo ou murena) estrutura rgida
da parede:
N-acetilglicosamina (NAG)
cido N-acetilmurmico (NAM)
tetrapeptdeo (4 aminocidos)

Devido as propriedades da parede celular, as bactrias podem ser divididas em dois grandes
grupos: GRAM POSITIVAS e GRAM NEGATIVAS, de acordo com a sua resposta colorao de
GRAM.

PAREDE DAS GRAM POSITIVAS


Possuem maior quantidade de peptidioglicano, o que torna a parede dessas
bactrias mais espessa e rgida.
Composta por peptidioglicano e cidos teicicos (cadeias de polifosfato com
resduos de ribitol e glicerol) ou cidos lipoteiccicos.

cidos teicicos

Peptideoglicano

Membrana citoplasmtica

Citoplasma

Os cidos teicicos/lipoteicicos esto ligados ao peptidioglicano APENAS nas


bactrias Gram positivas, nunca nas Gram negativas.

PAREDE DAS GRAM NEGATIVAS


Mais complexa - a quantidade de peptidioglicano menor, e possui uma
membrana externa envolvendo a fina camada de peptidioglicano, que se situa no
espao periplasmtico.
MEMBRANA EXTERNA: Serve como barreira seletiva que controla a
passagem de algumas substncias.

Estrutura: bicamada assimtrica, contendo fosfolipdios, semelhante MP.

Internamente => camada de fosfolipdeos e lipoprotena, que est ancorada ao


peptidioglicano.
Externamente => camada impermevel de lipopolissacardeo (LPS) molcula
anfiptica.

A membrana externa das bactrias Gram negativas contm protenas


(OMP), que formam canais por onde penetram diversas substncias.

Lipopolissacarideo

Membrana externa
Espao periplasmtico
lipoprotenas

Peptideoglicano

Espao periplasmtico

Membrana
citoplasmtica

Citoplasma

Essas protenas presentes na membrana externa das Gram negativas


constituem aprox. 50% da membrana, no relacionadas com as protenas
da MP, e possuem diversas funes.

LPS
3 segmentos ligados covalentemente: lipdio A, cerne do polissacardeo e antgenos O.

A poro lipdica do LPS tambm chamada de ENDOTOXINA.

O LPS pode ser txico, causando febre, diarria, destruio de hemcias e


um choque potencialmente fatal. Efeito protetor nas bactrias Gram
negativas intestinais (resistncia solubilizao pelas enzimas intestinais e
bile).

Implicao da estrutura da parede celular bacteriana - COLORAO DE GRAM


Baseado nas propriedades da parede celular (substncias lipdicas na camada externa)

1884 Hans Christian Joachim Gram


Experimentos com pneumococos corantes
seletivos para bactrias
Desenvolvimento de um protocolo de
colorao de esfregaos bacterianos
Permitiu a diviso destes organismos em 2
grandes grupos - visualizao por microscopia
ptica
Revoluo no diagnstico das doenas
infecciosas.

PAREDE CELULAR DAS MICOBACTRIAS

Bacilos aerbios, imveis, no-formadores de esporos, de parede celular complexa rica


em lipdios e ceras, especialmente cidos miclicos que so ligados covalentemente a
lipidios acil (cidos arabnogalactamicos). Causadores da tuberculose e da lepra.

Estrutura da parece celular:

A parede celular das micobactrias responsvel por muitas caractersticas das


bactrias (por exemplo, cido resistncia, crescimento lento, resistncia aos
detergentes, resistncia aos antibiticos comuns).

Nutrientes solveis em gua entram nas clulas atravs de porinas.

Os diferentes lipdios da parede celular das micobactrias formam uma bicamada assimtrica
com cadeias curtas de glicerol-fosfolipdios que atuam como barreira a substncias aquosas
tornando a superfcie celular hidrofbica e resistente a numerosos desinfetantes, lcoois e
cidos.

Porina

Arabnogalactose

LPS

Lipdios acil
(ceras)

Gram +
Peptdeoglicano

cido
Miclico

Bi-camada
lipdica

Glicolipdio
(lipoarabnomanana)

Gram -

Micobacterias

Membrana Citoplasmtica
Aproximadamente 10 nm e separa a parede celular do citoplasma. constituda
de fosfolipdeos e protenas.
Desempenha importante papel na permeabilidade seletiva da clula funciona
como barreira osmtica.
Difere da membrana citoplasmtica dos eucariotos por:
- no apresentar esteris (colesterol) em sua composio;
- ser sede de numerosas enzimas do metabolismo respiratrio => (MESOSSOMO);
- controlar a diviso bacteriana atravs do mesossomo.

ESTRUTURAS CELULARES INTERNAS

rea citoplasmtica

Citoplasma: 80 % de gua, cidos nuclicos, protenas, carboidratos, compostos de


baixo peso molecular, lipdios, ons inorgnicos. Stio de reaes qumicas.
Ribossomos: ligados a uma molcula de mRNA, so chamados de poliribossomos.
Presentes em grande nmero nas clulas bacterianas. So menores ribossomos 70S
Grnulos de reserva (incluses): os procariotos podem acumular no citoplasma
substncias sob a forma de grnulos, constitudos de polmeros insolveis (ex.: grnulos de
glicognio, amido, lipdios, polifosfato, enxofre e xido de ferro) .

rea citoplasmtica
Ribossomos: ligados a uma molcula de mRNA, so chamados de poliribossomos.
Presentes em grande nmero nas clulas bacterianas. So menores ribossomos 70S
Responsveis pela sntese proteica
Alvo de ao de antibiticos (ex: cloranfenicol e eritromicina)

rea nuclear

Nucleide: cromossomo bacteriano, constitudo por uma nica molcula dupla fita circular
de DNA no delimitado por membrana nuclear e sem a presena de histonas. Contm as
informaes necessrias sobrevivncia da clula e capaz de replicao.
Elementos extracromossomais
Plasmdeos:, molculas menores de DNA, dupla fita, circulares, cujos genes no
codificam caractersticas essenciais, mas podem conferir vantagens seletivas para as
bactrias que os possuem (ex.: genes de resistncia a antibiticos, metais txicos,
produo de toxinas, etc). Auto-duplicao independente do cromossomo bacteriano, e
podem existir vrias cpias dentro da clula.

Esporos

Tambm chamados de endosporos (porque se formam dentro da clula).

Esporos contm pouca gua no citoplasma, possuem parede celular muito


espessa, so altamente resistentes a agentes fsicos e qumicos, devido a sua
capa impermevel de protena tipo queratina (associado ao clcio) e presena de
cido dipicolnico.

Funo: proteo da clula vegetativa das adversidades do meio ambiente


(limitao de nutrientes, temperatura, e dessecao). Sua formao leva em torno
de 6 horas.

Tm pouca atividade metablica, pode permanecer latente por longos perodos forma de sobrevivncia, e no de reproduo. Ex. Bacillus e Clostridium.

Endosporos verdadeiros encontrados em bactrias gram positivas.

FISIOLOGIA BACTERIANA
As clulas procariticas so compostas por gua, macromolculas,
apresentando tambm uma menor quantidade de outros compostos
orgnicos e ons.

Todos os organismos vivos necessitam de compostos para sua nutrio,


crescimento e multiplicao. Esses compostos so utilizados para a formao
dos constituintes celulares e na obteno de energia.

VIAS ANABLICAS E CATABLICAS


Dentro da clula bacteriana ocorrem reaes qumicas catalisadas por enzimas.
O conjunto de transformaes da matria orgnica denominado
METABOLISMO e compreende basicamente dois processos:

Quebra
de
compostos
orgnicos
complexos
em
compostos mais simples, com
liberao de energia. Ex.:
Degradao do acar.

CATABOLISMO

Construo
de
molculas
orgnicas complexas a partir
de molculas simples, com
gasto
de
energia.
Ex.:
formao das protenas.

ANABOLISMO

NUTRIO DOS MICRORGANISMOS

Os microrganismos necessitam de um ambiente propcio com todos os


constituintes fsicos e qumicos necessrios para seu crescimento. As substncias
ou elementos retirados do ambiente so utilizadas como blocos para a construo
da clula.

NUTRIENTES
Os nutrientes podem ser de vrios tipos, dispostos em trs categorias, de
acordo com a sua concentrao e importncia na clula bacteriana:
macronutrientes, micronutrientes e fatores de crescimento.

MACRONUTRIENTES
Macronutrientes

Funes
gramas

Carbono (Compostos orgnicos, CO2)


Oxignio

(O2, H2O, comp. orgnicos)

Nitrognio (NH4, NO3, N2, comp. org.)


Hidrognio (H2, H2O, comp. Orgnicos)

Constituintes de carboidratos, lipdeos, protenas


e cidos nuclicos

Fsforo (PO4)
Enxofre (SO4, HS, S, comp. enxofre)
mg
Potssio (K+)

Atividade enzimtica

Clcio (Ca2+)

Resistncia ao calor do endosporo

Magnsio (Mg2+)

Cofator de enzimas, complexos com ATP,


estabiliza ribossomos e membranas

Ferro (Fe2+/Fe3+)

Constituio de citocromos, cofator de enzimas,


cofator de protenas transportadores de eltrons

MICRONUTRIENTES

Mangans

FATORES DE CRESCIMENTO
So compostos que alguns tipos celulares necessitam em quantidades muito
pequenas.

Embora a maioria dos microrganismos seja capaz de sintetiz-los, alguns


microrganismos necessitam que eles sejam adicionados ao meio de cultura.

Estes compostos entram na composio das clulas ou de precursores dos


constituintes celulares.

Aminocidos
Purinas e pirimidinas
Colesterol
Vitaminas

Vitaminas requeridas pelos


microrganismos e suas funes

FONTES DE CARBONO E ENERGIA PARA O


CRESCIMENTO BACTERIANO
As bactrias, de acordo com a fonte de carbono e de energia que utilizam,
podem ser classificadas em diferentes tipos nutricionais:

CARBONO

HETEROTRFICOS

AUTOTRFICOS

Microrganismos que
utilizam
carbono
orgnico

Microrganismos que
utilizam
carbono
inorgnico (CO2)

ENERGIA

FOTOTRFICOS

QUIMIOTRFICOS

Microrganismos que Microrganismos que


energia
utilizam
energia utilizam
qumica (compostos
radiante (luz)
qumicos)

Diversidade Metablica entre os organismos

Os microrganismos exibem os mais diversos mecanismos nutricionais. A nutrio


ocorre predominantemente pela absoro, atravs da oxidao de substncias com
alto valor energtico, preferencialmente os acares.

PROCESSO DE NUTRIO EM PROCARIOTOS


1) Nutrio em Gram positivos
=> Estas bactrias sintetizam uma srie de exoenzimas, as quais so liberadas no meio,
clivando os nutrientes, que so captados por protenas transportadoras.

2) Nutrio em Gram negativos


=> Devido presena de uma membrana externa (LPS), as bactrias Gram negativas
apresentam um grande nmero de porinas associadas camada lipopolissacardica, e que
permitem a passagem de molculas hidroflicas, de baixa massa molecular.

=> No espao periplasmtico dessas clulas, so encontrados proteases, fosfatases,


lipases, nucleases e enzimas de degradaco de carboidratos.

FORMAS DE OBTENO DE ENERGIA


I Fermentao: processo no qual os compostos orgnicos so
parcialmente degradados
Ltica:

cido ltico

Alcolica:

etanol

Aceto-butrica:

cido butrico e acetona

Actica:

cido actico (vinagre)

Propinica:

cido propinico

=> Libera energia de acares (2 ATP) ou


molculas orgnicas;
=> No requer oxignio (mas pode ocorrer na
presena deste);
=> No requer o uso do ciclo de Krebs ou
cadeia de transporte de eltrons;
=> Utiliza uma molcula
aceptor final de eltrons

orgnica

como

II - Respirao

a) RESPIRAO AERBICA:
processo onde os compostos
orgnicos so completamente
degradados, e o O2 o aceptor
final dos eltrons.

b) RESPIRAO ANAERBICA: processo no qual os compostos


orgnicos so completamente degradados, e uma molcula diferente
do O2 o aceptor final dos eltrons (SO4, CO3, NO3, fumarato, etc)

A quantidade de ATP gerada na respirao anaerbica varia de acordo


com o microrganismo e a via.

Devido a somente uma parte do ciclo de Krebs funcionar sob


condies anaerbias, o rendimento de ATP nunca to alto
quanto o da respirao aerbica.

REQUERIMENTOS FSICOS E AMBIENTAIS PARA O


CRESCIMENTO MICROBIANO
Quando falamos em crescimento microbiano no referimos ao nmero e no ao
tamanho das clulas.
Os microrganismos em crescimento esto, na
verdade, aumentando o seu nmero e se
acumulando em colnias

COLNIAS => grupos de clulas => visualizao


sem utilizao de microscpio.

CONDIES NECESSRIAS PARA O CRESCIMENTO MICROBIANO


Qumicos

Fsico-qumicos (ambientais)

gua

Temperatura

Macronutreintes

pH

Micronutrientes

Presso Osmtica

Fatores de crescimento

O2

Temperatura
Cada tipo de bactria apresenta uma temperatura tima de crescimento. Acima do limite,
ocorre desnaturao protica e conseqente morte celular. Temperaturas inferiores levam a
uma desacelerao das atividades metablicas.

pH
A maioria das bactrias cresce melhor dentro de variaes pequenas de pH,
sempre perto da neutralidade, entre pH 6,5 e 7,5.

Presso Osmtica
A capacidade dos microrganismos se adaptar a presses osmticas chama-se
OSMOADAPTAO.

Os microrganismos so
frequentemente encontrados
em ambientes onde a
concentrao do soluto
igual o seu citoplasma (meio
isotnico).

Halotolerantes: toleram altas concentraes de sais-10% NaCl


Haloflicos: requerem altos nveis de NaCl (Vibrio cholerae).

Oxignio
O oxignio pode ser incuo, indispensvel ou letal para as bactrias, o que
permite classific-las em:

OXIBINTICAS

ANOXIBINTICAS

Aerbios

Anaerbios
obrigatrios

Aerbios
obrigatrios

Extremamente
sensveis

Microaerfilos

Aerotolerantes

Anaerbios
facultativos
Aerbio
estrito

Anaerbio
estrito

Anaerbio Anaerbio
facultativo aerotolerante

Por que o oxignio letal para os anaerbios?


Incapacidade de eliminao ou capacidade limitada de eliminar
produtos do metabolismo do oxignio molecular.
Reduo do Oxignio

O2 + e- = O2- (nion superxido)


O2 + 2 e- = H2O2 (perxido de hidrognio)
O2 + 3 e- = H2O + OH- (radical hidroxila)
O2 + 4 e- = H2O (gua => reduo total)

Espcies Reativas do Oxignio (EROs)

Estratgias de defesa dos microrganismos: mecanismos


antioxidantes

REPRODUO BACTERIANA

As bactrias se multiplicam por DIVISO BINRIA SIMPLES, um processo devido


formao de septos na regio do mesossomo, que se dirigem da superfcie para
o interior da clula, dividindo a bactria em duas clulas filhas.
A fisso precedida pela duplicao do DNA, que se processa de modo semiconservativo, e cada clula filha recebe uma cpia do cromossomo da clula-me.
O perodo da diviso celular depende do tempo de gerao de cada bactria

Tempo de gerao: tempo necessrio para um clula se dividir em


duas

CURVA DE CRESCIMENTO BACTERIANO

Quando uma bactria semeada em um meio apropriado,


nas condies apropriadas, o seu crescimento segue uma
curva definida e caracterstica:

A Fase LAG: pouca diviso


celular, os microrganismos
esto se adaptando ao meio
em que esto crescendo. As
clulas aumentam de volume,
mas no se dividem.
B Fase exponencial (log):
crescimento
exponencial,
divises celulares sucessivas,
grande atividade metablica.
C

Fase
estacionria:
decrscimo na taxa de diviso
celular, onde a velocidade de
crescimento = velocidade de
morte
D Fase de declnio ou morte:
condies imprprias para o
crescimento, meio deficiente
em nutrientes e rico em
toxinas, onde as clulas
mortas excedem o nmero de
clulas vivas