IESCH

Universidad Salazar

LICENCIATURA EN: QUMICA FARMACUTICA BIOLGICA

MANUAL DE PRACTICAS DE INMUNOLOGIA II

Q.F.B WILBER USIEL ARRIAGA PEREZ

TUXTLA GUTIRREZ, CHIAPAS, AGOSTO DEL 2011

CONTENIDO

Misin y Visin Institucional

Misin y Visin de la Carrera
Perfil del Egresado
Reglamento del Laboratorio
Reglas de Seguridad
Criterios de Calificacin
Formato de reporte de prcticas
PRACTICA NO.1 FACTOR REUMATOIDE
PRACTICA NO.2 PROTEINA C REACTIVA (P.C.R)
PRACTICA NO.3 V.D.R.L
PRACTICA NO.4 TIPIFICACION DE GRUPOS SANGUINEOS
PRACTICA NO. 5 DETERMINACION DE ANTIGENOS A Y B EN SALIVA
PRACTICA NO. 6 PRUEBA DE COOMBS
PRACTICA NO.7 PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD
PRACTICA N0 8 REACCIONES FEBRILES

MISION Y VISION DEL IESCH

El Instituto de Estudios Superiores de Chiapas, tiene por Misin:

Formar al ser humano, fomentando el desarrollo de actitudes,

valores, habilidades y conocimientos en pertinencia y vinculados
con el entorno econmico, social, poltico y cultural que
demanda nuestra regin y el pas

Y por Visin:

Ser una Institucin integrada a los sectores productivos y

sociales que conjunten actividades docentes y de investigacin
con el servicio y mejora de nuestro estado y pas, acorde al
proceso de globalizacin actual, fomentando excelencia y
calidad

MISION Y VISION DE LA LICENCIATURA

La licenciatura en Qumica Farmacutica

Biolgica.
Misin:
Formar profesionales en Qumico Farmacutico Bilogo con
capacidad para la produccin de bienes y servicios para la salud
y para realizar actividades de intervencin, investigacin y
docencia que respondan a las necesidades individuales y
colectivas que demanda nuestra regin y pas, con una visin
integral del ser humano y con alto sentido de responsabilidad y
humanismo

Visin:
Ser una licenciatura con alto nivel acadmico y amplio
reconocimiento social, lder en la formacin de profesionales
qumico farmacutico bilogo; integrada a los sectores
productivos y sociales que vincule actividades de docencia,
investigacin y servicio, acorde al proceso de globalizacin
actual, fomentando la excelencia y la calidad en su quehacer
diario

PERFIL DEL EGRESADO

El egresado de la carrera de qumica farmacutico biolgica
deber poseer los conocimientos habilidades y aptitudes para
poder colaborar en el equipo de salud realizando funciones
especficas en la investigacin, desarrollo, preparacin y control
de frmacos y medicamentos, teniendo la responsabilidad social
para fabricar y/o distribuir al pblico los medicamentos y la
informacin necesaria de los mismos. Desarrollar, supervisar,
Investigar y realizar los procedimientos y tcnicas analticas en
el rea de la salud colaborando en la resolucin de problemas de
salud relacionados con la prevencin, diagnstico y control de
enfermedades de acuerdo con la normatividad del pas y las
recomendaciones
internacionales.
Participar
en
el
establecimiento de la normatividad que rige las actividades del
rea de Salud, colaborar en la verificacin, peritaje y supervisin
del cumplimiento de las normas. Adems de contar con los
conocimientos necesarios para incorporarse en estudios de
postgrado, todo esto para servir a la sociedad responsablemente
contribuyendo as al desarrollo de su entorno regional.

REGLAMENTO DEL LABORATORIO

GENERALES:
El presente reglamento tiene como objetivo establecer las
normas y conductas que deben presentar catedrticos, alumnos
y laboratoristas en el transcurso de las prcticas de la materia
de Bioqumica Inmunolgica, para establecer los parmetros de
calificaciones asignadas a los alumnos.

CAPITULO I
DEL LABORATORISTA
Artculo 1

El laboratorista permanecer en el laboratorio en el

horario que le corresponde.

Tendr listo el material (cristalera, instrumental, reactivos

y equipos) para las prcticas dentro del laboratorio, de
acuerdo a lo solicitado por el profesor, con tres das de
anticipacin por lo menos.

Entregar con debida cortesa, el material a los alumnos y

a los profesores durante el tiempo estipulado para cada
sesin de laboratorio.

El material ser entregado durante los primeros 15

minutos.

Recibir y revisar que el material y el equipo estn en

buen estado y en perfectas condiciones de limpieza,

Auxiliar a los profesores en la preparacin de soluciones

u otros reactivos que se requieran para el desarrollo de la
prctica.

Orientar a los estudiantes en el manejo y cuidado del

equipo.

Tendr al da los inventarios fsicos, de cristalera,

instrumental, reactivos y equipo de laboratorio a su cargo

y los entregar a fin de semestre a la Coordinacin de la

materia.
Mantendr el equipo en su sitio procurando su correcta
utilizacin y bajo controles de seguridad.

Ser el responsable absoluto de que el equipo de

laboratorio este en perfecto estado de uso (limpio,
funcionando, etc)

Controlar el regreso de material, equipo, etc, en el

tiempo estipulado.

En casos estrictamente necesarios, se quedar unos

minutos ms para facilitar la prctica.

Al final del semestre le entregar a los alumnos un

comprobante de No Adeudo de material de Laboratorio.

Esta prohibido
laboratorio.

comer, beber o fumar dentro del

CAPITULO II

DE LOS ALUMNOS
Artculo 2

El
alumno deber llegar puntual a la hora
correspondiente de la prctica. Se le dar una tolerancia
mxima de 10 minutos, transcurrido ese tiempo, no podr
ingresar al laboratorio.

Es indispensable el uso de la bata dentro del laboratorio,

no se permite el uso de filipina.

Esta prohibido comer, beber o fumar dentro del

laboratorio, cualquier incurrimiento en lo antes
mencionado anular el derecho a realizar la prctica.

Entrando al laboratorio, el alumno deber entregar los

requisitos de la prctica a realizar de lo contrario se
anular dicha prctica.

Se deber entregar un Reporte de Prctica 8 das

despus de haberla realizado. El contenido del mismo
ser indicado por el catedrtico.

El alumno deber cumplir con al menos el 80% de

asistencias en el laboratorio durante todo el ciclo escolar,
para evitar la baja del curso prctico.

El Material biolgico necesario para la realizacin de las

prcticas ser proporcionado por los alumnos, el
incumplimiento de esta disposicin anular el derecho a
realizar la prctica.

El alumno deber solicitar el material de laboratorio con

un mximo de 3 das de anticipacin, mediante un vale a
los laboratorista, de lo contrario perder el derecho de
realizar la prctica.

Cualquier material que resulte daado durante la

realizacin de la prctica deber ser repuesto por el
alumno a ms tardar en 8 das, de lo contrario perder el
derecho de realizar la siguiente prctica y su calificacin
de ese mes ser anulada.

La calificacin de laboratorio constituir el 20% de la

calificacin global de la materia.

El alumno presentar un examen terico de la prctica,

durante el transcurso de la realizacin de la misma.

La calificacin de cada prctica estar integrada por el

reporte, la evaluacin terica de la prctica y el
desempeo durante la misma.

La calificacin mnima aprobatoria es de 6.0

Es requisito indispensable aprobar la teora para validar

la calificacin del Laboratorio.

Los alumnos que reprueben ms del 20% del total de las

prcticas, se vern obligados a presentar un Examen
terico-prctico Final del Laboratorio, como requisito
indispensable para poder tomar en cuenta el porcentaje
correspondiente al Laboratorio para la calificacin final de
la materia.

CAPITULO III

DE LOS PROFESORES
Artculo 3

El profesor deber llegar 10 minutos antes del inicio de la

prctica para verificar el orden y funcionamiento del
material de laboratorio que se emplear en el desarrollo
de la misma.

La calificacin de laboratorio constituir el 20% de la

calificacin global de la materia.

El alumno presentar un examen terico de la prctica,

durante el transcurso de la realizacin de la misma.

La calificacin de cada prctica estar integrada por el

reporte, la evaluacin terica de la prctica y el
desempeo durante la misma.

La calificacin mnima aprobatoria es de 6.0

Los alumnos que reprueben ms del 20% del total de las

prcticas, se vern obligados a presentar un Examen
terico-prctico Final del Laboratorio, como requisito
indispensable para poder tomar en cuenta el porcentaje
correspondiente al Laboratorio para la calificacin final de
la materia.

Est prohibido
laboratorio.

Las calificaciones mensuales debern

entregarse al
profesor titular a ms tardar 5 das antes de la aplicacin
del examen mensual.

Se debern entregar al profesor 10 reactivos referentes a

lo revisado durante el mes para su inclusin en el examen
mensual terico, a mas tardar 5 das antes de la
aplicacin de este,

Se deber proporcionar junto con las calificaciones, la

relacin de alumnos que adeudan material, as como las
inasistencias para su contabilizacin.

comer, beber o fumar dentro del

MEDIDAS DE SEGURIDAD QUE DEBE TOMAR DURANTE EL

DESARROLLO DE LA PRCTICA.

Leer antes su prctica. En ocasiones se le pedir traer

materiales y si no los trae no podr efectuar su prctica.
Traiga consigo siempre material de limpieza, como
franela, detergente y jabn neutro.
No coloque mochilas sobre su mesa de trabajo.
Tenga consigo siempre su manual de prcticas o diagrama
de flujo de la misma.
Efectu solo lo que se le seala. Lo dems podra
ocasionar riesgos.

Tome en cuenta las fuentes flamables: equipo elctrico,

mecheros, tuberas de gas, fuentes de calor, etc.
No utilice equipos de comunicacin mientras trabaja en el
laboratorio.
No pruebe ni huela las sustancias qumicas a menos que
se lo indique su profesor.
No se frote los ojos con las manos mientras se este
trabajando, si necesita hacerlo use un pauelo apropiado.
Antes de succionar pipetas, lvelas y squelas para no
contaminar los reactivos.
Nunca mezcle sustancias qumicas a menos que el
procedimiento se lo indique.
Si la meza de trabajo se ensucia, inmediatamente debe
limpiarla con una toalla hmeda para eliminar los residuos
de los reactivos.
Deseche las sustancias segn las instrucciones de su
profesor.
Cuando ponga a calentar tubos de ensayo, debe hacerlo
inclinado este 45 C. en direccin opuesta a sus
compaeros y usted.
Use pinzas para manejar recipientes calientes.
No utilice la boca para pipetear sustancias qumicas, use
una perilla.
En caso de quemaduras, avise al encargado de
laboratorio o a su profesor.
Siempre deje limpia su mesa de trabajo y lave el material
que utilizo con agua y jabn, con un enjuague final con
agua destilada.
Cuando utilice aparatos especiales, entrguelos limpios.
Entregue el material, reactivos y equipos.
Al concluir la practica qutese la bata y lvese las manos.

MANEJO DE EQUIPO Y CRISTALERIA.

Cercirese que la cristalera este limpia y sin dao al

recibirla.
Si va a aplicar calor a la cristalera, revise que sea tipo
Pyrex.
Si usted dao cristalera, debe inmediatamente informarlo
al encargado de laboratorio.
Toda la cristalera se lava con jabn y los tubos de ensayo
se colocan en la gradilla boca abajo.
No utilice termmetros como agitadores.

Utilice esptulas limpias para recoger los reactivos

slidos.
Limpie los goteros y las pipetas antes de usarlas para
evitar contaminaciones.
Cuando tenga que utilizar equipos de los cuales
desconozca su funcionamiento pregunte al profesor.

MANEJO DE REACTIVOS.

Antes de usar un reactivo qumico lea cuidadosamente la

etiqueta, este le indica nombre, formula, concentracin.
Tome lo que necesita y cierre el recipiente.
No use ningn reactivo que no posea etiqueta.
Mantenga los reactivos en el lugar indicado por su
profesor. Los cidos y base fuertes mantngalos alejados
de su mesa de trabajo.
Para medir volmenes de cidos y bases concentrados,
use probetas o buretas. Nunca pipetas.
Al usar reactivos evite tocarse los ojos o la boca.
Mucho de los solventes que se utilizan en laboratorio son
flamables, entre ellos estn el metanol, la acetona, el ter
y el hexano. Por ello deben mantenerse lejos de mecheros
encendidos y deben de manejarse en campanas de
extraccin de vapores.
Los cidos y base fuertes deben de manejarse en
campanas de extraccin de vapores.
Al verter al drenaje cidos y bases fuertes deje correr
mucha agua para diluirlos.
No vaci al drenaje material insoluble como grasas, ceras,
vidrios, etc.
Si se derramara cualquier reactivo sobre su piel u ojos,
avise de inmediato a su profesor.
No introduzca pipetas, goteros o cualquier otro objeto en
los reactivos, salvo los que este utilizando para evitar
contaminacin.
No mezcle el contenido de varios tubos a menos que lo
indique el procedimiento, puede causar explosiones,
calentamiento o vapores txicos.
Vierta la solucin concentrada en la menos concentrada
para evitar reacciones violentas.
Si se produjera derrame de sustancias voltiles, apague
mecheros y equipo y limpie el rea.

Lee las etiquetas de los reactivos para ver si es toxico,

inflamable, irritante o corrosivo.

Riesgo
biolgico

PREPARACIN DEL REA DE TRABAJO:

La mesa de trabajo debe ser con cubierta de acero

inoxidable, o cualquier material plstico resistente al
calor, humedad y corrosin, la cual debe mantenerse
limpia y en buen estado de conservacin. Contar con
suficiente iluminacin, natural o artificial, sin reflejos
molestos sobre el analista. Sin objetos sobre de ella que
vayan de ninguna manera intervengan en el trabajo.

Distribuir los materiales dentro del rea de trabajo en tal

forma que el movimiento del material se realice de
izquierda a derecha y siempre dentro del espacio
suficiente para realizar las maniobras con fluidez. Al

concluir la ltima actividad en la mesa de trabajo,

proceder a su limpieza.

El analista estar provisto de bata manga larga, limpia y

en buen estado. Bajo ninguna circunstancia fumar,
masticar o hablar en tanto se realiza el trabajo.

Criterios de Calificacin
Parte practica:
Se evaluara la asistencia a la prctica (es necesario asistir para
poder reportar).
Reporte de prctica

Formato de reporte de practica

El reporte de debe de contener lo siguiente:
Titulo
Introduccin
Material
Metodologa
Resultados
Observaciones
Discusin
Conclusin
Bibliografa

PRACTICA N 1
AGLUTINACIN PASIVA.
OBJETIVO.
El objetivo de la prctica es realizar ejercicios de aglutinacin pasiva
en placa (prueba cualitativa) utilizando eritrocitos y partculas de ltex
como soportes.

AGLUTINACIN PASIVA CON PARTCULAS DE LTEX.

El ltex es una suspensin coloidal de partculas esfricas de
poliestireno de 0.8 a 1.1 m de dimetro, cuya superficie est cargada
negativamente. En condiciones adecuadas estas partculas son capaces de
adsorber sustancias qumicas, particularmente protenas.
El uso de partculas de ltex como soporte de antgenos en pruebas de
aglutinacin pasiva, con respecto al uso de eritrocitos, tiene la ventaja de ser
un mtodo que consume menos tiempo, que permite una lectura muy rpida
y que proporciona reactivos que permanecen estables por mucho tiempo.
DETERMINACIN DE FACTOR REUMATOIDE.
En el suero de personas con ciertos padecimientos (artritis reumatoide,
fiebre reumtica y en general procesos inflamatorios) aparecen anticuerpos
dirigidos contra las propias inmunoglobulinas, principalmente IgG. A estos
anticuerpos se les conoce como factor reumatoide, y los ms abundantes en
estado libre en el suero pertenecen a la clase IgM. La determinacin de
factor reumatoide se lleva a cabo con partculas de ltex recubiertas con
IgG.
Material por equipo:
1 tubo de ensaye de 13 x 100 mm.
Pipeta semiautomtica 1000 uL
Pipeta semiautomtica 25 uL
Pipeta semiautomtica 100 uL
1 pipeta serolgica de 1.0 mL.
1 pipeta serolgica de 2.0 mL.
1 placa de vidrio oscuro.
Palillos o aplicadores de madera.
Solucin salina.
Reactivo de factor Reumatoide.
Mtodo:
Preparar una dilucin 1:20 del suero problema en la solucin
salina.
Colocar en una divisin de la placa una gota del suero diluido
1:20.
Aadir una gota de reactivo de factor reumatoide.

Mezclar ambas gotas con un aplicador de madera.

Preparar de la misma manera y en la misma placa, un testigo
negativo y otro positivo, supliendo el suero problema por
solucin salina y por un suero positivo conocido,
respectivamente.
Oscilar la placa suavemente.
Buscar la presencia de aglutinacin de las partculas de ltex.

RESULTADOS.
El testigo negativo debe presentar una suspensin uniforme y en el
testigo positivo deben aparecer grumos. El suero problema se compara con
cualquiera de los anteriores y el resultado se informa como negativo o
positivo, segn sea el caso.

PRACTICA # 2

DETERMINACIN DE PROTENA C REACTIVA.

La protena C reactiva (PCR) es una protena que aparece en el plasma
a consecuencia de distintos procesos patolgicos donde se presente
inflamacin o necrosis, por ejemplo, durante la fase aguda de infecciones
bacterianas. La aparicin de PCR puede determinarse a las 18-24 h despus
del inicio de la enfermedad y disminuye simultneamente con la gravedad
de la misma.

La presencia de PCR se puede determinar con partculas de ltex

recubiertas con anti-PCR.
Material por equipo:
2 tubos de ensaye de 13 x 100 mm.
2 pipetas serolgicas de 1.0 mL.
1 pipeta serolgica de 5.0 mL.
1 placa de vidrio oscuro.
Palillos o aplicadores de madera.
Solucin salina
Reactivo de ltex-anti-PCR.
Mtodo.
Preparar diluciones 1:5 y 1:50 del suero usando como diluyente
solucin salina-amortiguador de glicina.
Colocar una gota de cada dilucin del suero problema en
distintas divisiones de la placa de vidrio.
Aadir una gota del reactivo de ltex-anti-PCR.
Mezclar ambas gotas con un palillo o un aplicador de madera.
Preparar de la misma manera un testigo negativo y uno positivo,
sustituyendo el suero problema por solucin salina y por un
suero positivo conocido, respectivamente.
Oscilar la placa suavemente.
Buscar la presencia de aglutinacin de las partculas de ltex.

RESULTADOS.
El testigo negativo deber presentar una suspensin uniforme y en el
testigo positivo debern aparecer grumos. El suero problema se compara
con los testigos, y el resultado se informa como positivo o negativo, segn
sea el caso.

PRACTICA # 3

V.D.R.L

Es una enfermedad, normalmente por transmisin sexual, producida por la infeccin por
Treponema pallidum. La infeccin generalizada desde el comienzo y la enfermedad se
caracteriza por periodos de latencia, a menudo de hasta 20 aos. Estas caractersticas, junto
con el hecho de que el T. pallidum no puede aislarse en cultivos, hacen que las pruebas
serolgicas ocupen una posicin central en el diagnostico en la sfilis.

Material por equipo:

1 tubo de ensaye de 13 x 100 mm.
1 pipeta serolgica de 1.0 mL.
1 pipeta serolgica de 2.0 mL.
1 placa de vidrio oscuro.
Palillos o aplicadores de madera.
Reactivos de ltex. V.D.R.L
Mtodo:
Preparar una dilucin 1:20 del suero problema en la solucin
salina-amortiguador de glicina.
Colocar en una divisin de la placa una gota del suero diluido
1:20.
Aadir una gota de reactivo de ltex-gamma globulina.
Mezclar ambas gotas con un aplicador de madera.
Preparar de la misma manera y en la misma placa, un testigo
negativo y otro positivo, supliendo el suero problema por
solucin salina y por un suero positivo conocido,
respectivamente.
Oscilar la placa suavemente.
Buscar la presencia de aglutinacin de las partculas de ltex.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.
Davis, B.D.; Dulbecco, R.; Eisen, H.N.; Ginsberg, H.S. 1990. TRATADO

DE MICROBIOLOGIA. 3. ed. Editorial Salvat.

Murray, P.R.; Drew, W.L.; Kobayashi, G.S.; Thompson, J.H. 1992.
MICROBIOLOGIA MEDICA. Editorial Wolfe Publishing Limited.
Roitt, I.M. 1997. ESSENTIAL IMMUNOLOGY. 9. ed. Editorial
Blackwell Scientific Publications.
Weir, D.M.; Stewart, J. 1995. INMUNOLOGA. 2. ed. Editorial El
Manual Moderno.
Janeway, C.A.; Travers, P. 1997. IMMUNOBIOLOGY. 3. ed. Editorial
Current Biology.

PRACTICA # 4

TIPIFICACIN DE GRUPOS SANGUNEOS

INTRODUCCIN.
Sistema AB0.
Los eritrocitos poseen en su membrana sustancias antignicas
determinadas genticamente, las cuales pueden identificarse mediante
anticuerpos especficos. El primer grupo de estas sustancias fue identificado
por Landstainer en 1901 y le llam sistema AB0, el cual consiste en que un
individuo tiene en sus glbulos rojos uno, dos o ninguno de los dos
antgenos (A y B) pertenecientes a este sistema. As, los individuos pueden
ser del tipo A, si solamente poseen el antgeno A; del tipo B, si nicamente
tienen el antgeno B; del tipo AB si poseen ambos, o del tipo 0 si no tienen
ninguno de los dos. La naturaleza qumica de los determinantes antignicos
es polisacardica.
Aproximadamente el 85% de la poblacin posee sustancias, con
caractersticas antignicas y estructurales similares a las presentes sobre las
membranas de los eritrocitos, en prcticamente todas las secreciones
corporales. A estos individuos se les llama secretores.
Los carbohidratos que forman las estructuras antignicas A y B en la
membrana de los glbulos rojos tambin estn presentes en otros materiales
biolgicos como bacterias, alimentos y otros agentes ampliamente
distribuidos que constituyen un persistente estmulo. Los humanos
reaccionan a este estmulo produciendo anticuerpos contra aquellos
antgenos que no forman parte de su propia estructura celular. Por esta
razn, el anticuerpo anti-A se produce en personas de grupo 0 y B, y el antiB en los de grupo 0 y A, las personas del grupo AB, que contienen ambos
antgenos, no forman dichos anticuerpos. A estos anticuerpos se les llama
isohemaglutininas.
Sistema Rh.
En 1939, Levine y Stetson reportaron el caso de una mujer con severa
reaccin hemoltica despus de la transfusin de sangre proveniente de su
esposo. El antgeno responsable fue diferente de los ya conocidos en la
poca.
En 1940, Landsteiner y Wiener inmunizaron conejos y cobayos con
eritrocitos de monos Macacus rhesus, basndose en la suposicin de que en
los eritrocitos de estos monos podran existir antgenos similares a los de

humanos. El suero obtenido aglutinaba los glbulos rojos de los monos

rhesus y del 85% de la poblacin humana blanca.
Hasta ese momento todo sugera que el supuesto antgeno hallado por
Landsteiner y Wiener en monos, y el supuesto antgeno descrito por Levine
y Stetson en humanos, eran el mismo. Posteriores investigaciones
demostraron que los supuestos antgenos eran diferentes; se determin que
la mayora de los humanos tienen el antgeno del mono rhesus y adems
otro diferente, pero relacionado. A sugerencia de Levine se conserv la
denominacin de factor Rh para el antgeno humano y se asign el nombre
de LW al antgeno comn al hombre y al mono.
A mediados de la dcada de 1940 se haban identificado 5 antgenos
como pertenecientes al actualmente denominado sistema Rh. Estos cinco
antgenos (C, c, D, E, e) dan lugar a diversos patrones antignicos. El D
tiene dominancia antignica. Los individuos que presentan antgeno D en
sus eritrocitos se denominan Rh (+), y aquellos que no tienen el antgeno D
se denominan Rh (-).
Adems de los sistemas AB0 y Rh pueden ser detectados otros sistemas
antignicos en la membrana de los eritrocitos (Lewis, Duffy, MN, Ss, Ii,
etc.). Estos sistemas se consideran secundarios.
El conocimiento de los antgenos sanguneos tiene utilidad en la clnica
(transfusiones sanguneas, compatibilidad materno-fetal), en medicina legal
y en pruebas de paternidad. Antropolgicamente se ha utilizado para
estudios de dinmica de poblaciones. Asimismo, se ha utilizado para
estudios bsicos de especificidad inmunolgica.

OBJETIVO.
El objetivo principal de la prctica es que el alumno conozca distintas
maneras de poner en evidencia la reaccin de hemaglutinacin directa que
ocurre cuando los glbulos rojos interaccionan con su anticuerpo homlogo.

SISTEMA ABO
suer
o
A

eritrocit
os

AB
O

ERITROCITOS TIPIFICADOS

2
gotas
AB

2 mL.

Alb

ANTISUEROS COMERCIALES

Solucin
salina

PRUEBAS DE COOMBS
DIRECTA
2 gotas de
g.r. 0 Rh+

INDIRECTA

2 gotas de
g.r. del
BEBE

Dos gotas de Suero de

Coombs

.PRUEBAS CRUZADAS

ANTID

Solucin

Suero

diludo

Salina

Materno

D o s g o t a s d e g . r. 0
Rh+

P.M.= g.r.DONADOR +
suero REC
p.m.= g.r.RECEPTOR +
suero DON

Rh
antiD

Solucin

NO DILUDO

Salina

D o s g o t a s d e g . r.

Centrifugar a 1000
rpm/1 min

Centrifugar a 1000
rpm/1 min

Centrifugar a 1000
rpm/1 min

LEER

LEER

LEER

DET DE SIST. ABO EN

SALIVA (secretores)
Saliva

Solucin
Salina

2 gotas de antisuero comercial

diludo
Incubar 10 min
2 gotas de eritrocitos
tipificados
Centrifuga
r
LEER
Si hay inhibicin de la aglutinacin,
hay sust. de grupo sanguneo
presente en la saliva

AGLUTINACIN

NO AGLUTINACIN

AGLUTINACIN
Rh+
NO AGLUTINACIN

Incubar 37C/20
min

Incubar 37C/20
min

Lavar con sol.

salina

Lavar con sol.

salina

Centrifugar

Centrifugar

Eliminar
sobrenadante
2 gotas de suero de
Coombs
Centrifugar 1000
rpm/1 min
LEER

Eliminar
sobrenadante
2 gotas de suero de
Coombs
Centrifugar 1000
rpm/1 min
AGLUTINACIN Rh
+ Du
LEER
NO AGLUTINACIN
Rh

Fig. 13 Esquema de trabajo para tipificacin de grupos sanguneos.

DETERMINACION DE GRUPOS SANGUINEOS DEL SISTEMA ABO.

FUNDAMENTO: los primeros aglutingenos eritrociticos descubiertos fueron el A y el
B, como el resultado de las investigaciones de landsteiner, bsicamente el sistema
esta formado por los grupos: A, B, AB, y 0. En la que la sangre de un individuo del
grupo A, se encuentra el antgeno eritrocitario A y aglutininas anti B. En el grupo B,
se encuentra el antgeno B y las aglutininas anti A; el grupo AB posee ambos
aglutingenos y carece de aglutininas anti A y anti B. Por lo que puede decirse que
los aglutingenos no pueden existir con sus correspondientes aglutininas. El grupo
sanguneo de una persona es el mismo para toda la vida, pero las aglutininas no
existen en el momento del nacimiento, sino que aparecen entre los 3 y 5 meses de
edad. Existen en el mercado sueros tipificantes perfectamente estandarizados tanto
anti A como anti B estas pruebas pueden realizarse en placa como en tubo, siendo
esta ultima la mas sensible.
Material necesario:
Suero anti A

jeringa de 5ml

Suero anti B y anti Rh.

lancetas

anticoagulante

4 tubos de 13 x 100

Placa de porcelana

pipetas capilares

Centrifuga

solucin salina

TECNICA:
1.-La muestra de sangre puede tomarse por puncion de la yema del dedo, pero es
ms conveniente emplear sangre venosa tomada con anticoagulante poeque de
esta manera en caso de duda se pueden checar los resultados fcilmente. Tomar
aproximadamente 5ml de sangre que se coloca en tubo de ensaye de 13 x 100 en
el que se hacolocado previamente una gota de anticoagulante (EDTA). La
tipificacin se puede llevar acabo con sangre tomada en estas condiciones,
utilizando la cantidad de muestra que se toma con un palillo de madera o bien se
puede utilizar una susupencion de eritrocitos; para preparar esta susupencion, la
sangre se centrifuga se decanta el plasma y se lavan los eritrocitos una vez con
solucin salina isotnica, posteriormente adicionar una cantidad de solucin salina
suficiente para obtener una suspensin al 5%.
2.- se colocan 3 gotas de sangre del paciente separadamente en la placa de
porcelana.

3.- se le aade a cada gota de sangre una gota de suero anti A, anti B, y Anti Rh
respectivamente.
4.- se mezclan con los aplicadores de madera y se hace girar la placa.
5.- se observa para apreciar macroscpicamente las reacciones de aglutinacin. El
tiempo mximo para llevar acabo la lectura es de 3 min.
Mtodo en tubo:
Material necesario:
Material necesario:
Suero anti A

jeringa de 5ml

Suero anti B, anti Rh

anticoagulante

4 tubos de 13 x 100

Centrifuga

solucin salina
Tecnica:
1.- tomar la sangre en las mismas condiciones que se indicaron para la prueba en
placa utilizando sangre venosa. Centrifugar la sangre decantar el plasma y lavar los
eritrocitos una vez con solucin salina isotnica, adicionar la cantidad necesaria de
solucin salina para obtener uan suspensin al 2%.
2.- marcar los 3 tubos de ensaye con A,B Y Rh y colocar en cada uno una gota del
suero correspondiente.
3.- adicionar a cada uno de los tubos una gota de suspensin de eritrocitos al 2% y
mezclar.
4.- centrifugar a 1,000 r.p.m y observar la aglutinacin.

Interpretacin de las pruebas:

Anti A
+
+
+
+

Anti B
+
+
+
+

Anti Rh
+
+
+
+
-

Grupo sanguineo
A Rh (+)
A Rh (-)
B Rh (+)
B Rh (-)
O Rh (+)
0 Rh (-)
AB Rh (+)
AB Rh (-)

+ Aglutinacin
No aglutinacin
De acuerdo a este cuadro se determinara el grupo a que pertenece la sangre
problema que se hara constar en presente reporte. En todos los casos, pero
especialmente en aquellos en que la glutinacion no es franca, es muy conveniente
realizar prueba serica de confirmacin.

METODO INVERSO PARA LA DETERMINACION DE GRUPOS SANGUINEOS

DETERMINACION SEERICA O DE CONFIRMACION.

MATERIAL NECESARIO:
Suspensin al 2% en solucin salina de globulos rojos tipo A
Suspensin al 2% en solucin salina de globulos rojos tipo B
Tubos de ensaye de 12 x 75 mm
Pipetas capilares
Centrifuga.
Tcnica:
1.- la prueba puede realizarse sobre suero o bien sobre plasma.
Marque los 2 tubos de ensaye con A y el otro con B.
2.- obtener la sangre de punsion venosa, centrifugar y separa el suero colocar una
gota en cada uno de los tubos anteriores.
3.- adicionar una gota de la correspondiente suspensin de globulos rojos al suero y
mezclar perfectamente. Dejar reposar las mezclas a temperatura ambiente durante
un periodo de 5 a 15 min.
4.- Centrifugar ambos tubos durante un min a 1,000 r.p.m o bien a 30 seg a 3,500
r.p.m
5.- Remover suavemente los eritrocitos sedimentados y observar si existe hemolisis
o aglutinacin.
Interpretacin de la prueba:
Eritrocitos del grupo A

Eritrocitos del grupo B

El suero proviene de
sangre grupo:

+
-+
--

+
+
---

O
A
B
AB

NOTA: Si se presenta hemolisis con la determinacin inversa del grupo sanguneo,

una pequea porcin del suero problema deber inactivarse mediante
calentamiento a 56 C durante un min. Y con este suero calentado ya sin
interferencia de las hemolisinas se repite la prueba.

SISTEMA Rh.
En caso de requerirse una transfusin sangunea, slo se determina el antgeno D de forma
rutinaria, dada su mayor inmunogenicidad. Por la naturaleza protenica del antgeno, los
anticuerpos inducidos son de clase IgG que pueden atravesar placenta y causar hemlisis
intrauterina en caso de incompatibilidad materno-fetal.
Material por grupo:
1 centrfuga.
1 bao mara a 37oC.
Material por equipo:
2 tubos de ensaye de 10 x 75 mm.
Pipetas Pasteur.
Pipeta serolgica de 5.0 mL.
Suero tipificador anti-D comercial.
Solucin salina al 0.85% (SS).
Suero de Coombs.
Mtodo:
1. Colocar con una pipeta Pasteur dos gotas de sangre en un tubo con tapn de
rosca que contenga 2.0 mL de SS (suspensin aproximada de eritrocitos al
5%).
2. Marcar dos tubos, uno como Rh y otro como testigo. Colocar en cada uno una
gota de eritrocitos.
3. Agregar al primer tubo (Rh) una gota de suero anti-D no diluido y agitar
suavemente.
4. Agregar al segundo tubo (testigo) una gota de SS y agitar suavemente.
5. Centrifugar ambos tubos durante 60 seg. a 1000 rpm.
6. Buscar la presencia de aglutinacin, primero en el testigo y despus en el
otro tubo. Si el resultado es NO aglutinacin, incubar ambos tubos a 37 oC,
durante 20 min.
7. Lavar 3 veces con SS centrifugando a 1500 rpm durante 2 min. Despus de la
ltima centrifugacin desechar el sobrenadante y agregar al paquete celular
dos gotas de suero de Coombs.
8. Resuspender suavemente el paquete celular y centrifugar ambos tubos a
1000 rpm durante 60 seg.

RESULTADOS.
Buscar presencia de aglutinacin. La presencia de aglutinacin en el tubo marcado como Rh
en el punto 6 del mtodo, indica que el individuo es Rh (-). Si la aglutinacin se encuentra en el
tubo marcado como Rh slo despus de haber completado el mtodo, este individuo corresponde al
grupo Du Rh (+). Si en este tubo no hay aglutinacin, este individuo es Rh (-). El tubo marcado
como testigo debe ser negativo y en el caso de que sea positivo podra tratarse de una respuesta
autoinmune. Para fines de transfusin, el sujeto clasificado como Du se considerar como donador
Rh (+) y receptor Rh (-).

PRACTICA # 5
DETERMINACIN DE LOS ANTGENOS A Y B EN SALIVA.
La presencia de los antgenos solubles A y B en saliva puede ser demostrada mediante pruebas
de inhibicin de la hemaglutinacin. Para esta determinacin el anticuerpo utilizado se debe diluir
previamente para obtener una aglutinacin moderada. Los sueros con ttulos muy elevados de
anticuerpos no son inhibidos completamente debido a la relativamente escasa cantidad de antgeno
presente en saliva.
Material por grupo:
I.
II.
III.
IV.

Mechero Bunsen.
Bote de boca ancha.
Centrfuga clnica.
Tripie.
Material por equipo:

V.
VI.
VII.
VIII.
IX.
X.

1 tubo de ensaye de 13 x 100 mm.

4 tubos de ensaye de 12 x 75 mm.
Solucin salina 0.85% (SS).
3 pipetas Pasteur y un bulbo de hule.
Sueros tipificadores anti-A y anti-B diluidos a la mnima dilucin aglutinante.
Suspensin de eritrocitos humanos A y B al 5% en SS.

Mtodo:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Colectar de 5 a 10 mL de saliva en un tubo. No es recomendable estimular la

secrecin con chicle u otro material azucarado porque pueden presentarse
interferencias en la determinacin.
Diluir la saliva con igual volumen de SS y mantener en bao mara a ebullicin
durante 10 min., para inactivar las enzimas presentes.
Centrifugar a 3000 rpm durante 10 min. y transferir el sobrenadante a otro
tubo.
Marcar cuatro tubos de la siguiente manera: A, A testigo, B y B testigo.
Agregar a los tubos marcados A y B una gota de saliva. A los testigos
agregarles una gota de SS.
Agregar a los tubos A y A testigo una gota de suero anti-A diluido. A los tubos B
y anti-B testigo agregarles una gota de suero anti-B diluido. Incubar todos los
tubos a temperatura ambiente durante 10 min.
Agregar a cada tubo de la serie A una gota de eritrocitos A al 5%. A cada tubo
de la serie B agregarles una gota de eritrocitos B al 5%.

8.

Mezclar el contenido de cada tubo y centrifugar a 1000 rpm durante 60 seg.

RESULTADOS.
Buscar la presencia de aglutinacin. Los tubos testigo debern mostrar aglutinacin.
Cualquiera de los tubos con saliva que muestre inhibicin de la aglutinacin indicar la presencia
del antgeno correspondiente.
PRACTICA # 6
PRUEBAS DE COOMBS.
En algunas ocasiones los anticuerpos unidos a los antgenos correspondientes presentes en la
membrana de los eritrocitos no dan lugar a la formacin de un aglutinado visible. Coombs dise
un mtodo para poner en evidencia la presencia de estos anticuerpos no aglutinantes mediante la
adicin al sistema de un anticuerpo anti-inmunoglobulinas humanas preparado en otra especie
(generalmente conejos), que se conoce como suero de Coombs.
En el caso de incompatibilidad en el sistema Rh entre la madre y su producto puede haber
isoinmunizacin con la produccin de anti-D de la clase IgG. Estos anticuerpos pueden atravesar
placenta, unirse a los eritrocitos del producto y desencadenar un estado patolgico (eritroblastosis
fetal o enfermedad hemoltica del recin nacido). Por tal motivo, es de gran importancia la
bsqueda de anticuerpos anti-D en el suero de la madre o los que se han unido a los eritrocitos del
recin nacido. Como estos anticuerpos no aglutinan, es necesario recurrir a las pruebas de Coombs
(directa e indirecta). Estas pruebas tambin pueden emplearse en otros casos como anemia
hemoltica autoinmune o incompatibilidad por otros sistemas de grupos sanguneos.
PRUEBA DIRECTA DE COOMBS.
Esta prueba se aplica en el caso de que los eritrocitos estn recubiertos con anticuerpos IgG y
no aglutinen. Se utiliza en el caso de glbulos rojos provenientes de nios con eritroblastosis fetal,
en el estudio de anemia hemoltica y en la investigacin de reacciones consecutivas a transfusiones
de sangre incompatible.
Material por equipo:
Suspensin de eritrocitos problema lavados y ajustados al 2%.
Suspensin de eritrocitos normales lavados y ajustados al 2%.
Solucin salina 0.85% (SS).
Suero de Coombs.
2 tubos de ensaye de 13 x 100 mm.
Centrfuga clnica.
Mtodo:
9.

Colocar en un tubo de ensaye dos gotas de la suspensin al 2% de los

eritrocitos problema.
10. Aadir dos gotas de suero de Coombs.

11. Preparar de la misma forma un tubo que contenga una suspensin al 2% de

glbulos rojos normales y suero de Coombs (testigo negativo del suero de
Coombs).
12. Centrifugar los tubos a 1000 rpm durante 60 seg.
13. Desprender el botn suavemente y buscar la presencia de aglutinacin.
RESULTADOS.

La aglutinacin de los eritrocitos problema con suero de Coombs indica que dichos eritrocitos
estn recubiertos con anticuerpo especfico. El tubo testigo no debe presentar aglutinacin.
PRUEBA INDIRECTA DE COOMBS.
Esta prueba se usa para determinar la presencia de anticuerpos IgG, que no aglutinen, en el
suero de sujetos sensibilizados a uno o ms antgenos sanguneos. Es til en el estudio del suero de
mujeres con isoinmunizacin materno-fetal y se emplea tambin en otro tipo de pruebas como
identificacin de anticuerpos autoinmunes, deteccin de algunos sistemas sanguneos y pruebas de
compatibilidad sangunea.
Actualmente la prueba indirecta de Coombs tambin se emplea en la bsqueda de anticuerpos
contra microorganismos, principalmente bacterias.
Material por grupo:
Centrfuga clnica.
Bao mara a 37oC.
Material por equipo:
Suspensin de eritrocitos de grupo 0, Rh(+) ajustados al 5%.
Suero problema.
Suero de Coombs.
Solucin salina 0.85% (SS).
3 tubos de ensaye de 13 x 100 mm.
Suero anti-D diluido a ttulo subaglutinante.
Mtodo:
14. Colocar en un tubo de ensaye etiquetado como problema, dos gotas del suero
problema y aadir dos gotas de la suspensin al 5% de eritrocitos 0 Rh (+).
15. Colocar en un segundo tubo etiquetado como testigo negativo, dos gotas de
SS y dos gotas de la suspensin al 5% de eritrocitos 0 Rh (+).
16. Colocar en un tercer tubo etiquetado como testigo positivo, dos gotas de suero
anti-D comercial diluido a ttulo subaglutinante y dos gotas de la suspensin al
5% de eritrocitos 0 Rh (+).
17. Centrifugar todos los tubos a 1000 rpm durante 60 seg.
18. Desprender suavemente los glbulos rojos sedimentados y buscar
aglutinacin. En caso de que la aglutinacin sea negativa o dbilmente
positiva, resuspender los eritrocitos e incubar en bao mara a 37 oC durante 20
min.
19. Lavar los eritrocitos por centrifugacin con SS una sola vez y despus de
decantar, resuspender en la SS remanente.
20. Aadir dos gotas de suero de Coombs.
21. Mezclar bien y centrifugar a 1000 rpm durante 60 seg.

22. Desprender el botn suavemente y buscar aglutinacin.

RESULTADOS.

La aglutinacin de los glbulos rojos con suero problema indica la presencia de anticuerpos
(paso 5). La aglutinacin de los eritrocitos con suero problema y suero de Coombs, seala tambin
la presencia de anticuerpos en el suero problema. El testigo negativo no debe presentar
aglutinacin (testigo de eritrocitos); la aglutinacin en el testigo positivo indica que el suero de
Coombs funciona adecuadamente.

PRACTICA N 7
PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD.
Las pruebas de compatibilidad sangunea deben efectuarse antes de una transfusin. Adems
de la seleccin de sangre compatible en los sistemas AB0 y Rh, se incluyen las pruebas cruzadas
que se llevan a cabo con eritrocitos del donador y suero del receptor (PM, prueba mayor) y con
eritrocitos del receptor y suero del donador (pm, prueba menor).
Las pruebas cruzadas tienen por funcin poner de manifiesto la existencia de anticuerpos
dirigidos contra antgenos de sistemas menores o secundarios y deben realizarse en diferentes
condiciones que favorezcan la reaccin antgeno-anticuerpo y la formacin de aglutinados
celulares.
Rutinariamente las reacciones se efectan en SS, en este medio los anticuerpos que aglutinan
son principalmente de clase IgM. El empleo de albmina bovina facilita la deteccin de
anticuerpos de clase IgG ya que con frecuencia stos se ven impedidos en su efecto aglutinante por
el potencial Z (fuerza de repulsin entre eritrocitos por las cargas elctricas negativas sobre su
membrana). El suero de Coombs (anticuerpos anti-inmunoglobulinas) se utiliza para poner de
manifiesto anticuerpos que no tienen actividad aglutinante, unidos a la membrana del eritrocito.
PRUEBAS CRUZADAS.
Material por grupo:
Centrfuga clnica.
Bao mara a 37oC.
Material por equipo:
2 jeringas desechables de 5 mL con aguja de 21 x 32 mm.
Tubos de 10 x 75 mm.
Pipetas Pasteur.
Suero de Coombs.
Solucin salina al 0.85% (SS).
Solucin de albmina bovina al 25%.
Suspensin de eritrocitos lavados y ajustados al 5% en SS, provenientes del donador y del
receptor.
Suero de donador y de receptor.

Mtodo:
Fase I. Salina rpida.
23. Colocar en un tubo marcado como PM, dos gotas de eritrocitos del donador y
dos gotas de suero del receptor.
24. Colocar en un segundo tubo marcado como pm, dos gotas de eritrocitos del
receptor y dos gotas de suero del donador.
25. Centrifugar ambos tubos a 1000 rpm durante 60 seg.
26. Observar el sobrenadante de ambos tubos en busca de hemlisis. Resuspender
suavemente el botn de los eritrocitos en busca de aglutinacin.

En caso de no observar aglutinacin en los tubos de la fase I pasar a la fase II.

Fase II. Albmina.
27.
28.
29.
30.

Agregar a ambos tubos dos gotas de la solucin de albmina al 25%.

Incubar a 37oC durante 15 min.
Centrifugar ambos tubos a 1000 rpm durante 60 seg.
Resuspender suavemente el botn de eritrocitos y buscar la presencia de
aglutinacin.

En caso de no observar aglutinacin en la fase II pasar a la fase III.

Fase III. Prueba indirecta de Coombs.
31. Lavar tres veces los eritrocitos de ambos tubos por centrifugacin a 3400 rpm
durante 2 min.
32. Agregar despus del ltimo lavado dos gotas de suero de Coombs y mezclar.
33. Centrifugar ambos tubos a 1000 rpm durante 60 seg.
34. Resuspender suavemente el botn de eritrocitos y buscar la presencia de
aglutinacin.

RESULTADOS.
La aglutinacin de los glbulos rojos indica la presencia de anticuerpos aglutinantes en suero.
Si la PM y la pm son negativas, es decir que no aglutinan los eritrocitos, existe una compatibilidad
sangunea entre el donador y el receptor.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.
Bird, G. W.G.; Cunningham, J. 1977. Agglutination and agglutination-inhibition. En:
TECHNIQUES IN CLINICAL IMMUNOLOGY. R.A. Thomson Editor. Editorial Blackwell
Scientific Publications.
Dodd, B.E.; Lincoln, P.J. 1975. BLOOD GROUP TOPICS. John Turk Editor. Editorial Year
Book Medical Publishers.
Waters, A.H. 1991. Immunohaematology. En: CLINICAL IMMUNOLOGY. J. Brostoff, G. K.
Scadding, D. Male, I. M. Roitt Editores. Editorial Gower Medical Publishing.

PRACTICA # 8
REACCIONES FEBRILES.
La infeccin por grmenes de diversas especies conduce a una elevacin marcada de la
temperatura, entre otros sntomas igualmente inespecficos, por lo cual se dificulta enormemente el
diagnstico de la enfermedad. Tal es el caso de la fiebre tifoidea causada por Salmonella typhi; las
paratifoideas causadas por S. paratyphi A y S. paratyphi B; la fiebre de Malta, causada por
Brucella melitensis, y el tifo, causado por Rickettsia prowaseki. Sin embargo, cada uno de estos
microorganismos induce una respuesta humoral con la produccin de anticuerpos que pueden
identificarse fcilmente con antgenos especficos. En el caso de Rickettsia prowaseki es muy
difcil contar con antgenos provenientes directamente de la bacteria, por lo que se utiliza Proteus
OX19, el cual posee determinantes antignicos comunes con Rickettsia.
Material por grupo:
XI. 2 lmparas.
XII. 1 charola con hipoclorito.
Material por equipo:
XIII. 2 placas de vidrio para pruebas febriles, divididas en 6 partes.
XIV. 10 palillos de madera.
XV. 1 juego de antgenos para reacciones febriles: antgeno O y H de Salmonella typhi, antgenos
H de S. paratyphi A y B, antgeno de Proteus OX19 y antgeno de Brucella abortus.
XVI. 1 pipeta automtica de 100 l
XVII.1 pipeta automtica de 10 l.
XVIII. Puntas para pipetas automticas.
XIX. Sueros problema.
Mtodo:
35. Colocar una gota del suero problema en cada una de las 6 divisiones de la
placa (una placa por cada suero).
36. Agregar una gota de un antgeno diferente en cada divisin.
37. Mezclar las dos gotas en cada divisin con la ayuda de un palillo.
38. Mover la placa con movimientos oscilatorios, suavemente durante 2 min.

39. Buscar la presencia de un aglutinado en cada mezcla, ayudndose con la

iluminacin de una lmpara.
40. Titular el suero que haya causado la aglutinacin de alguno de los antgenos.
Para tal fin, tomar otra placa y depositar los siguientes volmenes de dicho
suero: 80 l, 40 l, 20 l, 10 l y 5 l.
41. Agregar una gota del antgeno en cuestin a cada volumen de suero, mezclar
bien con un aplicador de madera, mezclar con movimientos oscilatorios y leer
igual que en los pasos 4 y 5. Las mezclas resultantes suero-antgeno se
considerarn equivalentes en reactividad a las diluciones 1:20, 1:40, 1:80,
1:160 y 1:320, respectivamente, de la prueba en tubo.

RESULTADOS.
Buscar la presencia de aglutinacin en cada mezcla suero-antgeno. El hallazgo de ttulos de
1:20 1:40 no son significativos, puesto que muchos individuos de la poblacin abierta tienen
anticuerpos debido a contactos previos con los grmenes en cuestin, que no necesariamente
representan la presencia de una enfermedad. Cualquier ttulo mayor de 1:160 debe ser considerado
como positivo y uno de 1:80 como sospechoso. Los resultados tienen valor diagnstico cuando a
un mismo individuo se le practican varias pruebas sucesivas y se observan cambios en el ttulo de
anticuerpos.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.
Davis, B.D.; Dulbecco, R.; Eisen, H.N.; Ginsberg, H.S. 1990. TRATADO DE
MICROBIOLOGIA. 3. ed. Editorial Salvat.
Murray, P.R.; Drew, W.L.; Kobayashi, G.S.; Thompson, J.H. 1992. MICROBIOLOGIA
MEDICA. Editorial Wolfe Publishing Limited.