TCNICA DE LABORATORIO PARA LA CRA DE

Thrips tabaci LINDEMAN (THYSANOPTERA: THRIPIDAE)

Alejandro Durn Lpez Velarde1

Viviana Onofre Chino2
Agustn Aragn Garca3
Cesreo Rodrguez hernndez4
Ana Ma. Tapia Rojas3
Jess Francisco Lpez-Olgun1,3,*
1

Posgrado en Ciencias Ambientales

Departamento de Agroecologa y Ambiente
Instituto de Ciencias, BUAP
*cs002116@siu.buap.mxT
2

Escuela de Biologa
BUAP
4

Entomologa
Instituto de Fitosanidad
Campus Montecillo, Colegio de Postgraduados

En: AVANCES EN AGROECOLOGA Y AMBIENTE VOL. I. Lpez-Olgun J. F.,

A. Aragn G. y A. M. Tapia R. (Eds.). 2007. Publicacin especial de la Benemrita
Universidad Autnoma de Puebla. Puebla, Mxico. pp. 327-336.
ISBN: 978 968 9391 07 4.

Avances en agroecologa y ambiente Vol. I

RESUMEN
Se presenta una tcnica para la cra en laboratorio de Thrips tabaci Lindeman, plaga de
importancia mundial en plantas ornamentales y hortalizas. El mtodo consiste en una
modificacin del mtodo de Murai e Ishii (1982), al utilizar germinados de semillas de haba
(Vicia faba L.) como sustrato de alimentacin y oviposicin, debido a su alta
disponibilidad, bajo costo y a que no se requiere de un espacio o equipo especial, adems
de que se reduce el riesgo de contaminacin de hongos y otros insectos. El mtodo permite
obtener suficientes larvas y adultos para su utilizacin en estudios experimentales de
laboratorio, invernadero o campo.
Palabras clave: cra de insectos, mtodo de cra, trips.
INTRODUCCIN
Los trips pertenecen al Orden Thysanoptera, su tamao oscila entre 0.3 y 14 mm, aunque en
zonas tropicales los hay ms grandes. Por sus hbitos alimenticios, hay especies
depredadoras, parasitoides y fitfagas. Estas ltimas producen daos directos a las plantas
al alimentarse de hojas jvenes, ptalos de flores y frutos en desarrollo, e indirectos por ser
vectores de virus fitopatgenos (Johansen y Mojica, 1997). Por ello, no es sorprendente que
ciertos miembros del Orden sean reconocidos como plagas de importancia econmica,
como es el caso de T. tabaci, cuyos daos son causados al incrustar el ovipositor de la
hembra en el tejido de la planta, y por la alimentacin tanto de adultos como de larvas al
penetrar el tejido con las partes bucales para adsorber los lquidos de las clulas (Johansen,
1999). Debido a su importancia agrcola, adems de que en Mxico no se encontraron
referencias sobre estudios de la biologa y cra de este insecto (Snchez et al., 2001) se
desarroll una tcnica para su cra en laboratorio. La tcnica o mtodo para la cra se
propone como una contribucin para posteriores estudios sobre biologa, hbitos de vida y
el diseo de estrategias efectivas para el manejo racional y econmico en el marco de un
programa de Manejo Integrado de la Plaga.
Antes de establecer una cra de trips, es importante considerar los objetivos para la
produccin masiva del insecto. Una vez establecida la cra, es necesario realizar
determinaciones taxonmicas antes y durante el mantenimiento de la cra. El equipo tcnico
debe estar diseado para asegurar un ambiente confiable y el material utilizado debe ser
evaluado de tal manera que no sea un problema para el mantenimiento de la cra. Otro
parmetro que se debe considerar, es el tipo de sustrato de alimentacin, el cual puede
variar segn los objetivos, por lo que se recomienda obtener toda la informacin biolgica
disponible en la literatura (alimento, ciclo de vida, hospederos etc.), de la especie, ya que
los hospederos naturales preferidos pueden no ser el alimento ms conveniente para la cra
de insectos. Estos aspectos son muy importantes para mantener un control de calidad de los
insectos y evitar o disminuir la contaminacin por bacterias, hongos e insectos ajenos a la
cra. Es importante sealar que muchas especies de trips son difciles de criar en laboratorio
ya que tienen una tendencia a escapar de las cajas donde se encuentran confinados (Lewis,
1997), debido a que son insectos muy pequeos, frgiles, difciles de manipular, de
transportar y por lo tanto de criar en cautiverio (Lewis, 1973), por lo que se recomienda
evaluar con detalle el material y los recursos econmicos disponibles.

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Tcnica de laboratorio para la cra de Thrips tabaci

CICLO DE VIDA Y CARACTERSTICAS MORFOLGICAS DE T. tabaci

CICLO DE VIDA
El ciclo de vida de T. tabaci esta integrado por cuatro estados biolgicos; huevo, larva,
pupa y adulto (Figura 1) y la duracin promedio va de 23 a 40 das como se muestra en el
Cuadro 1.

Fuente: Quintanilla (1980)

Figura 1. Ciclo biolgico de T. tabaci

Cuadro 1. Duracin en das (medias) de los diferentes estados e instares de
T. tabaci en laboratorio (27 1 C, 70 5% H.R. y 16:08 horas L:O).
Estado
Huevo
Larva
I
II
Prepupa
Pupa
Adulto
Huevo Adulto

Tiempo (das)

Rango

5.9

5-7

1.2
5.0
1.6
2.1
14.3
30.1

1-2
4-6
1-2
2-3
10 - 20
23 - 40

Fuente: Onofre (2005)

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Avances en agroecologa y ambiente Vol. I

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS
Huevo
Son de forma arrionada, de color blanco cristalino cuando son depositados en el tejido
vegetal y de consistencia delicada (Quintanilla, 1980; Salas et al., 1993; Onofre, 2005).
Presentan una longitud y ancho promedio de 0.22 y 0.11 mm, durante su desarrollo el
tamao se incrementa a 0.30 mm de largo con 0.20 mm de ancho y su color se torna
amarillo oscuro, pudindose observar la presencia de dos puntos rojizos (manchas oculares)
en el extremo anterior (ligeramente ms estrecho que el extremo posterior) que representan
los ojos, esto indica que el huevo est por eclosionar (Salas et al., 1993; Onofre, 2005).
Larva I
Recin emergida, la larva es de color blanco transparente, cambiando a amarillo claro
durante su desarrollo. En promedio mide 0.5 mm de largo y 0.1 mm de ancho, presenta ojos
compuestos, rojos y pequeos, pero con el paso de las horas se tornan rojizos obscuros;
tiene un par de antenas con siete artejos, el cuarto artejo es mucho ms grande que los
dems, los ltimos dos se observan muy rudimentarios; trax con los tres segmentos
torcicos poco diferenciados con tres pares de patas pequeas, transparentes y robustas,
carece de sacos alares; los terguitos abdominales son muy estrechos y poco diferenciados.
Durante su desarrollo el abdomen se alarga en forma de U observndose mejor los
terguitos abdominales (Onofre, 2005).
Larva II
La larva de segundo instar es de color amarillo claro, que cambia a un amarillo ms intenso
conforme se desarrolla, al inicio tiene una longitud promedio de 0.82 mm con un ancho de
0.2 mm, incrementa su tamao con el tiempo notndose 11 segmentos abdominales, sus
movimientos son ms rpidos que en la Larva I. Este instar se caracteriza por su color
amarillento y mayor actividad motriz (Salas et al., 1993; Onofre, 2005). Los ojos
compuestos son pequeos y rojizos, las antenas tienen siete artejos, el 4o artejo es ms
grande que los dems, los ltimos dos artejos antenales se observan como una prolongacin
del 5o artejo, semejante a una espiga de pelos. El 3er segmento torcico es ms ancho y
carece de sacos alares. Las patas son ms largas y delgadas, se diferencian la coxa, el
fmur, la tibia y el tarso, este ltimo segmento se observa ms obscuro, debido a la
presencia de la vescula retrctil que posee (Onofre, 2005).
Prepupa
Es de color blanco brillante, tiene una longitud y ancho promedio de 0.99 y 0.25 mm,
respectivamente. Los ojos son rojizos y ms grandes que los de la larva II, recin emergida
mantiene las antenas hacia delante pero durante su desarrollo poco a poco las dirige hacia el
dorso de la cabeza, presenta rudimentos alares poco desarrollados que emergen de la parte
dorsal a nivel del 2o par de patas y del 2o terguito. Es inactiva a menos que se le moleste
(Salas et al., 1993; Onofre, 2005).
Pupa
Recin formada es de color blanco claro-brillante, el color no difiere mucho con el de la
prepupa. Presenta una longitud y ancho promedio de 0.98 y 0.26 mm, a simple vista se
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Tcnica de laboratorio para la cra de Thrips tabaci

observa ms ancha que los dems estados, es una pupa inactiva libre con los apndices
expuestos y separados del cuerpo. Presenta ojos rojizos tornndose a obscuros y ms
grandes que en la prepupa, y se observan a la vez las omatidias que conforman el ojo
compuesto. Las antenas estn dirigidas por completo hacia el dorso de la cabeza, casi
pegadas al trax, estn compuestas por siete artejos, los ltimos asemejan un racimo de
pelos, los sacos alares estn ms desarrollados llegando hasta el 6o segmento abdominal. A
medida que la pupa madura se observa en el interior de los sacos alares, la formacin de los
flecos dando la apariencia de un color obscuro en los mrgenes de los mismos, que originan
las alas verdaderas del adulto (Salas et al., 1993; Onofre, 2005).
Adulto
Recin emergido es de color amarillo marrn claro que cambia a marrn oscuro durante su
desarrollo. Presenta una longitud y ancho promedio de 1.3 y 0.3 mm respectivamente, a
nivel abdominal; ojos compuestos, obscuros y pequeos; antenas compuestas por siete
artejos dirigidas hacia el frente de la cabeza; alas desarrolladas tipo plumosa, con una
prolongacin promedio de 0.8 mm (Salas et al., 1993; Onofre, 2005).
MTODOS Y TCNICAS DE LABORATORIO PARA LA CRA DE T. tabaci
Entre los mtodos de cra que descritos para T. tabaci, algunos utilizan plantas hospedantes
completas en invernadero como plantas de cebolla Allium cepa L. (Lall y Singh, 1968);
estas tcnicas han dado buenos resultados para mantener una cra constante de todos los
estados e instares, pero no es fcil distinguir la edad de los individuos.
En laboratorio, utilizan rganos o partes de plantas, como germinados de semilla de haba
(Vicia faba) (Murai y Loomans, 2001); catfilas de hojas de cebolla (Salas et al., 1993;
Jimnez y Roscandido, 1996); hojas de Emilia sagittata (Sakimura, 1932); en polen de t
verde Camellia sinensis y de pino Pinus thunbergii (Murai, 1998); solucin de miel y
granos de polen de t verde C. sinensis (Murai, 2000) y en tejidos de hoja de cebolla
(Edelson y Magaro, 1988); estos mtodos son apropiados para mantener cras pequeas de
trips y la sincronizacin de instares. El utilizar partes de plantas como sustrato hospedero,
facilita el manejo y la observacin, pero los mtodos en los que se usan hojas o discos de
hojas requieren tiempo de preparacin, son ms vulnerables a la contaminacin de
bacterias, hongos y de otros insectos, adems el material vegetal tiene un tiempo de vida
limitado.
Las condiciones ambintales en las cras de T. tabaci son de gran importancia, para
temperatura se reportan rangos de 10 a 32 1 C (Murai, 1998, 2000; Murai y Loomans,
2001; Jimnez y Roscandido, 1996; Salas et al., 1993); fotoperiodo de 16:08 horas
luz:oscuridad (Murai, 1998, 2000; Murai y Loomans, 2001) y humedad del 60% al 100%
(Murai y Loomans, 2001; Salas et al., 1993).
COLECTA, MONTAJE Y DETERMINACIN DE TRIPS
En campo se realizan colectas de trips a lo largo del ciclo de cultivo de cebolla y en
malezas cercanas al cultivo. Los adultos se colectan mediante el sacudido de la planta sobre
una hoja de papel de color blanco, tamao carta, para distinguirlos fcilmente. Los insectos

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Avances en agroecologa y ambiente Vol. I

se recogen con un pincel fino (No. 000) de pelo de camello y se depositan en recipientes
con alcohol al 70% para su traslado y determinacin en el laboratorio.
En el laboratorio, los trips adultos una vez fijados en alcohol al 70%, pasaran por un
proceso de deshidratacin progresiva con alcohol. Despus se cambian a xileno y se dejan
1 minuto para aclararlos. Enseguida se realiza el montaje de los trips, cuidando de dejar los
especmenes en posicin dorsal con las alas bien extendidas acorde a la tcnica descrita por
Johansen y Mojica (1997). Una vez que el espcimen quede en posicin dorsal, se coloca
sobre l un cubreobjetos. Durante el proceso de montaje se emplea un microscopio
estereoscpico.
Se recomienda realizar una determinacin taxonmica preliminar de los ejemplares con la
ayuda de las claves de Mound y Marullo (1996) y un microscopio ptico.
MTODO DE CRA PARA T. tabaci
Este mtodo es una modificacin del de Murai e Ishii (1982), al utilizar germinados de
semillas de haba (Vicia faba L.) como sustrato de alimentacin y oviposicin de T. tabaci,
debido a su disponibilidad, bajo costo y a que no se requiere un espacio o equipo
especiales, adems de que se evita el riesgo de contaminacin de hongos y otros insectos.
El proceso completo para el establecimiento, manejo de la cra de T. tabaci y para la
obtencin de los individuos de ensayo (larvas y adultos) se muestra en la Figura 2.

Colecta de trips en campo

Determinacin
taxonmica y
confirmacin
de la especie T. tabaci

Montaje y
determinacin
taxonmica en
laboratorio

Establecimiento de una colonia de

trips en invernadero

Mantenimiento de
colonia y siembras
escalonadas de cebolla

Cra en laboratorio. Cmara

ambiental. Humedad 70%, 27 C
Fotoperiodo 16:08 L:O

Mantenimiento de
cra, germinados de
haba como
sustrato de
oviposicin y
alimentacin

Sincronizacin Adultos

Sincronizacin de larvas

Oviposicin de adultos 48 horas

Oviposicin de adultos 24 horas

Observacin hasta Pupas

Observacin inicio de eclosin

Figura 2. Diagrama del procedimiento para el establecimiento y manejo de la cra de T.

tabaci y obtencin de individuos (larvas y adultos).

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Tcnica de laboratorio para la cra de Thrips tabaci

Con el fin de contar peridicamente con plantas para iniciar y mantener una poblacin de
trips en invernadero, se realizan siembras de cebolla. Las plantas se infestan con larvas y
adultos de trips colectados en campo en el momento que alcanzan una altura promedio de
15 cm. El invernadero debe estar libre de la aplicacin de productos qumicos.
Cuando se observa un nmero superior a 10 adultos por planta, se procede a colectar de
cada una de las plantas tres muestras de trips, para su determinacin en el laboratorio.
Confirmada la especie, se colocan 150 hembras partenogenticas en estado adulto de edad
desconocida, con un pincel fino de pelo de camello, en recipientes de PVC transparentes
(4.5 cm de altura x 3.8 cm dimetro) y se trasladan al laboratorio para iniciar la cra, en
condiciones controladas.
Los adultos hembras se distribuyen en 15 unidades de cra (frascos de PVC) a los que se les
realiza una abertura en cada lado de 5 mm de largo por 5 mm de ancho, para favorecer una
mejor ventilacin. Dichos orificios se cubren con malla de serigrafa de polister de color
naranja adherida con silicn (Figura 3). En el fondo de cada frasco se coloca un disco de
papel filtro humedecido aplicando dos o tres gotas de agua bidestilada y sobre ste, una
semilla de haba previamente germinada, a la cul previamente se le retira la testa (Figura
4).

Parafilm

Malla
Haba germinada
Papel filtro

Figura 3. Unidad de cra; frasco de plstico.

Figura 4. Semillas de haba germinada sin testa.

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Avances en agroecologa y ambiente Vol. I

Para la germinacin de las habas, stas se lavan con detergente biodegradable y despus se
depositan en recipientes con agua suficiente para la germinacin. El agua se cambia cada
12 horas. Una vez germinadas las semillas, lo que ocurre entre los 4 y 6 das despus de su
colocacin en el recipiente, se les retira la testa y se lavan con agua bidestilada. Las habas
germinadas, cuando no se usen en la cra, se pueden mantener en refrigeracin por 2 das
hasta su utilizacin.
Los frascos, las pinzas entomolgicas y el resto del material utilizado se limpian con
alcohol al 70% antes de usarse para reducir la contaminacin de hongos y de otros insectos.
Los adultos hembras partenogenticas se colocan durante 48 horas para que ovipositen en
el haba recin germinada y despus se cambian a otras unidades de cra, ste procedimiento
debe ser constante para mantener la cra de los diferentes instares del insecto. La parte
superior de las unidades de cra se cubre con una doble capa de Parafilm, la cual se retira y
cambia en cada observacin, para evitar la rotura de la misma y el escape de los individuos.
Para la sincronizacin de los instares y obtener las larvas de edad conocida, se colocan de
20 a 35 adultos hembra por unidad de cra durante 24 horas, tiempo en que ovipositan en el
haba, transcurrido el tiempo los adultos se retiraran y las unidades se mantienen en
observacin hasta la aparicin de larvas del primer instar. Las unidades de cra se colocan
en charolas de poliestireno identificadas con fecha y hora. Este procedimiento debe ser
continuo.
Los adultos de edad conocida se obtienen de de la misma forma que las larvas, pero los
adultos se deben mantener por 48 horas para que ovipositen, despus se retiran y se
mantienen en observacin hasta que aparecen las primeras pupas (Figura 5).

Figura 5. Pupas de T. tabaci sobre haba.

Las observaciones de las unidades de cra se realizan con un microscopio estereoscopio y
una lente de aumento, la manipulacin de los insectos se debe realizar con pinceles finos de
pelo de camello a los que se les retiran pelos para facilitar el manejo de los insectos.

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Tcnica de laboratorio para la cra de Thrips tabaci

RECOMENDACIONES
La cra masiva puede mantenerse en una cmara de crecimiento a una temperatura de 27
o
C, con una humedad del 70% y un fotoperiodo de 16:08 luz-oscuridad. La cmara
microclimtica o espacio donde se mantenga la cra, debe de limpiarse con yodo, formol u
otro tipo de sustancia desinfectante para disminuir la contaminacin.
En el caso de que las plantas de cebolla sean atacadas por pulgones (fidos), se recomienda
eliminarlos de manera manual y emplear agua y jabn neutro para rociar a las plantas
atacadas.
Otro problema que se puede presentar es la presencia de hormigas (Hymenoptera:
Formicidae) que, de acuerdo a observaciones propias, son depredadoras de larvas, pero no
se observaron alimentndose de adultos o pupas. Las hormigas observadas en el
invernadero pertenecen a la especie Monomorium ebenium.
Uno de los principales problemas en el trabajo de laboratorio es la manipulacin de los trips
debido a su tamao y delicadeza para manejarlos. Para la manipulacin de huevos y larvas
de primer instar se sugiere utilizar pinceles No. 000 con menos pelos (de 4 a 5 pelos).
Es necesario que las semillas de haba se laven perfectamente con agua y jabn antes de
ponerlas a germinar para quitarles posibles microorganismos. El crecimiento de hongos en
las habas se presenta ocasionalmente, todas las habas contaminadas se deben desechar. El
material a utilizar (frascos, pinzas entomolgicas, cajas de Petri, etc.) deben de estar muy
bien lavados y desinfectados antes y despus de su uso. El material debe desinfectarse con
alcohol al 96% y posteriormente con cloro comercial. Durante el trabajo se debe usar bata,
cubre bocas y guantes, para reducir problemas de contaminacin.
Los recipientes que se utilicen para el germinado de las habas deben estar completamente
limpios y desinfectados. Durante el proceso de germinacin, el agua empleada para
sumergir las semillas debe cambiarse continuamente para evitar una contaminacin
prematura. Las semillas de habas utilizadas deben ser de tamao pequeo para facilitar su
manejo dentro de los frascos. El control de la humedad dentro de los frascos es muy
importante, ya que el papel filtro hmedo ayuda a que el haba permanezca fresca por un
largo tiempo.
La formacin de pequeas gotas de agua en la pared de los frascos es otro problema que se
presenta frecuentemente, principalmente para las larvas de segundo instar, ya que algunas
quedan atrapadas entre las gotas de agua. Estas gotas se deben eliminar durante las
observaciones.
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