Universidade Estadual do Maranho

Realizando a Qualidade

UNIVERSIDADE ESTADUAL DO MARANHO

CENTRO DE CINCIAS AGRRIAS CCA
DEPARTAMENTO DE QUMICA E BIOLOGIA - DQB
CURSO DE ZOOTECNIA CZ
DISCIPLINA: MICROBIOLOGIA

DISCENTES:

Alexandre Carvalho
Allef Nunes
Deyvison Nelle
Lucas Eduardo
Gustavo Mendes

So Lus MA

Julho/2015

Universidade Estadual do Maranho

Realizando a Qualidade

UNIVERSIDADE ESTADUAL DO MARANHO

CENTRO DE CINCIAS AGRRIAS CCA
DEPARTAMENTO DE QUMICA E BIOLOGIA- DQB
CURSO DE ZOOTECNIA CZ

Trabalho
apresentado

professora Tatiane Aranha

referente a terceira nota da
disciplina de microbiologia.

HERPESVIRIDAE

So Lus MA

2014
Introduo
Os herpesvrus fazem parte da ordem Herpesvirales, famlia
Herpesviridae,

que

Alphaherpesvirinae,

se

divide

em

Betaherpesvirinae

trs

sub-famlias:

Gammaherpesvirinae,

englobando vrus que ocorrem em diversas espcies animais, como

moluscos, peixes, anfbios, rpteis, pssaros e mamferos. Diferente
das outras duas sub-famlias, os alfaherpesvrus apresentam um
ciclo de replicao rpido e ltico tanto in vitro quanto in vivo, e
possuem capacidade de infectar clulas epiteliais e nervosas,
estabelecendo infeco latente em neurnios de gnglios do
sistema nervoso. Os membros da sub-famlia Betaherpesvirinae
replicam lentamente, tambm estabelecem latncia e possuem
poucos

hospedeiros.

os

vrus

da

subfamlia

Gammaherpesvirinae infectam linfcitos de forma ltica ou latente e

alguns deles possuem potencial oncognico.
So vrus com capacidade de causarem infeces
inaparentes ou latentes. A latncia caracterizada pela ausncia de
replicao viral e de sinais clnicos, e dura toda a vida do
hospedeiro. No entanto a infeco latente pode ser ocasionalmente
reativada por situaes de estresse, onde o vrus passa a ser reexcretado e pode ser disseminado para indivduos susceptveis.
Tal propriedade de causar infeces latentes duradouras nos
seus

hospedeiros

naturais,

sem

causar

doena

grave

ou

mortalidade, possibilita a sua transmisso altamente eficaz. Existe,

entretanto, alguns casos fatais como o SuHV-1 em bovinos e ces.
Contudo, existe aproximadamente 130 espcies de Herpesvrus
estudados.

Existem vrios herpesvrus de importncia veterinria, dos

quais podemos citar:

Herpesvrus bovino tipos 1,2,4 e 5

Herpesvrus equino tipos 1,3 e 4
Herpesvrus suno tipo 1 Doena de Aujersky
Herpesvrus canino tipo 1
Herpesvrus felino tipo 1

A estrutura dos vrions

Os vrions dos herpesvrus consistem em um ncleo (ou
core) que contm o genoma viral contendo uma molcula de DNA
de fita dupla linear; um capsdeo que exibe uma simetria
icosadrica, um tegumento que recobre o capsdeo e composto
por protenas organizadas em quantidades variveis e um envelope
lipoprotico

contendo

espculas

de

glicoprotenas

na

sua

superfcie.O dimetro dos vrions varia entre 120 e 300 nm

O envelope viral uma camada lipdica composto por
glicoprotenas, conhecidas como gB, gC, gD, gE, gI, gH, gL, gG, gK
e gM, na qual apresentam diferentes funes na replicao e na
interao vrus-clula.
O tegumento do vrion consiste de um conjunto amorfo de
uma ou mais protenas codificadas pelo vrus que, para alguns
herpesvrus, auxiliam o incio do ciclo replicativo em clulas
suscetveis.
Os nucleocapsdeos tm aproximadamente 100 nm de
dimetro e consistem de 162 capsmeros proticos e uma simetria
icosadrica. Os nucleocapsdeos contm DNA viral e, para todos os
herpesvrus, so molculas de DNA linear de fita dupla. O DNA dos

herpesvrus organiza-se, estruturalmente, em uma variedade de

modelos complicados, dependendo do nmero relativo, tamanho e
posio de seqncias repetitivas.

Replicao viral
A penetrao do vrus na clula hospedeira e consequente
multiplicao viral se iniciam com o encontro de receptores
apropriados na superfcie das clulas com glicoprotenas do
envelope

viral.

A maioria

dos

herpesvrus,

provavelmente,

reconhece mltiplos receptores celulares, qualquer um dos quais

pode ser suficiente para a entrada na clula. A partir de ento,
ocorrem as seguintes fases:
1) adsoro;
2) penetrao;
3) transporte do nucleocapsdeo e protenas virais contidas
no tegumento ao ncleo das clulas infectadas;
4) transcrio, replicao e sntese do DNA e protenas
virais;
5) montagem e preenchimento dos capsdeos;
6) liberao da prognie infecciosa.
A adsoro ocorre quando h a interao do vrus com
receptores da membrana das clulas-alvo permitindo que ocorra
uma fuso entre o envelope e a membrana plasmtica da clula,
consequentemente ocorre uma invaginao e perfurao da

membrana, que a penetrao. A adsoro ativa um processo

mediado por glicoprotenas virais, onde pelo menos cinco
glicoprotenas (gB, gD, gH, gL e gK) esto envolvidas no processo
de fuso e penetrao do vrus. Aps a entrada dos virions no
citoplasma das clulas, o envelope viral desliga-se rapidamente da
membrana plasmtica e ocorre o transporte dos vrus envelopados
para os poros nucleares. A transcrio do genoma viral se inicia
logo aps a sua penetrao no ncleo. O DNA viral transcrito pela
RNA polimerase II celular com o auxlio de fatores celulares e virais.
A sntese de protenas virais regulada de forma precisa, pois a
expresso de genes virais ocorre de forma coordenada. Os genes
virais so divididos em trs grupos principais: genes alfa (immediate
early ou de transcrio imediata), beta (early ou iniciais) e gama
(late ou tardios).

Para o inicio da expresso desses genes,

necessrio que o fator iniciador de transcrio dos gene (-TIF),

uma protena do tegumento, se conjugue com fatores celulares para
estimular a transcrio, cuja funo principal ativar a transcrio
dos genes . As protenas beta esto envolvidas na sntese de
nucleotdeos trifosfato e na replicao do genoma. Os genes gama
somente so transcritos aps a replicao do DNA e codificam
principalmente

protenas

estruturais.

Parte

dessas

protenas

penetra no ncleo e forma pr-capsdeos, nos quais o genoma

introduzido.

Os

nucleocapsdeos

adquirem

envelope

por

brotamento atravs da membrana nuclear interna. Podem perder o

envelope ao atravessar a membrana nuclear externa e serem
reenvelopados no aparelho de Golgi, ou so enviados em vesculas
at o Golgi.

Os vrions envelopados so transportados em

vesculas do trans-Golgi at a superfcie celular, onde so liberados

por exocitose.

Isolamento e identificao
O isolamento viral em cultivo celular considerado o mtodo
de diagnstico etiolgico padro. Os vrus podem ser isolados de
vrias fontes: suabe de secreo conjuntival, vaginal, nasal, lavado
prepucial, e macerado de alguns rgos de feto abortado (fgado,
bao, rim, pulmo, linfonodo, mucosa do trato respiratrio e
tonsilas), reas com leses evidentes; tecidos (traquia, pulmes),
soro, smen e crebro, dependendo dos sinais clnicos e do vrus
pesquisado.

Entre as vantagens destaca-se a universalidade

(aplicvel a quase todos os vrus) e a obteno do vrus vivel para

manuteno e posteriores estudos. Porm o mtodo possui
desvantagens, uma tcnica laboriosa, com alto custo e que
necessita de correto acondicionamento das amostras por depender
de partculas virais viveis. Alm disto, o tempo necessrio para
obteno dos resultados pode levar alguns dias e os tecidos podem
conter enzimas que so txicas para o cultivo de clulas. Para
realizao da tcnica o material a ser examinado (suspenso de
tecidos

ou

secrees)

inoculado

em

cultivos

celulares

apropriados, acompanha-se por trs a cinco dias para observao

do efeito citoptico (ECP) caracterstico para confirmao do
diagnstico. Em geral este ECP caracterizado por uma
macrocitose e perda da morfologia celular, ficando as clulas
bastante arredondadas alm de levar destruio de outras em
algumas reas.
Aps a realizao do isolamento, a identificao do agente
viral pode ser efetuada com o emprego de outras tcnicas, como

imunofluorescncia

(IF),

imunoperoxidase

(IPX)

tcnicas

moleculares que quando utilizadas levam a um resultado mais

rpido. Estas tcnicas sero abordadas posteriormente.
Testes sorolgicos
Os testes sorolgicos podem ser usados na pesquisa de
antgenos virais ou de anticorpos. Vrias tcnicas tm sido
aplicadas para o diagnstico do herpesvrus nos animais. Para
deteco de antgenos podem ser usados anticorpos monoclonais
ou policlonais. Anticorpos monoclonais (AcM) so anticorpos de
especificidade nica, derivados de um nico clone de clulas B e
que respondem a um nico eptopo. J os anticorpos policlonais
detectam uma multiplicidade de eptopos, reconhecendo antgenos
diferentes. O uso de anticorpos policlonais em testes diagnsticos
efetua-se quando se pretende detectar mais do que uma estirpe de
um patgeno. A utilizao de ambos anticorpos tem sido uma
alternativa empregada em vrias reas da sade, sendo sua
aplicao cada vez mais comum e essencial em tcnicas de
diagnsticos e na pesquisa.

A imunofluorescncia (IF): permite a visualizao de

antgenos nos tecidos ou em suspenses celulares utilizando
substncias fluorescentes. A tcnica consiste em usar anticorpos
(policlonal ou monoclonal) produzidos especialmente contra o vrus
desejado, conjugado a uma substncia fluorescente. Esse anticorpo
conjugado (ou marcado), quando incubado com o antgeno, ligase
especificamente. Ao ser exposto luz ultravioleta, a substncia
fluorescente

emite

luz

(amarelo-esverdeada)

que

pode

ser

observada ao microscpio. Portanto, quando h a presena de

protenas virais no material a ser examinado, h a emisso de

fluorescncia.

Alm da especificidade, outra vantagem da tcnica de IF a

rapidez de obteno dos resultados. Considerando-se a preparao
das lminas, fixao e execuo da tcnica, o procedimento pode
ser concludo em menos de duas horas. Em situaes de surto, em
que um diagnstico etiolgico gil necessrio para direcionar as
medidas a serem adotadas, esse mtodo pode representar uma
alternativa rpida e segura de diagnstico. No entanto o sucesso da
tcnica depende da correta coleta e estocagem do material, apesar
de no exigirem a infecciosidade da partcula viral, fundamental a
integridade estrutural da partcula e das protenas virais.

Imunoperoxidase (IPX): uma tcnica de deteco de

antgenos, que utiliza anticorpos especficos conjugados com uma
enzima. A presena do antgeno no material suspeito indicada
pela mudana de colorao do substrato enzimtico que
adicionado no final da reao. A IPX pode ser adaptada para
deteco de antgenos em vrios materiais, incluindo clulas de
cultivo,

clulas

sanguneas,

tecidos

congelados

cortes

histolgicos parafinizados. Assim como na IF, a tcnica de IPX,

apesar de no exigir a infecciosidade do vrus, podem ser
seriamente comprometidas caso a integridade estrutural da
partcula no seja mantida, por falhas de transporte e estocagem.
Testes moleculares: Tcnicas de biologia molecular, para a
deteco do genoma viral, como a PCR e a anlise de fragmento

aps restrio enzimtica podem ser empregadas com sucesso

para o diagnstico dos herpesvrus. Alm da identificao de cidos
nucleicos virais, estes testes so importantes na identificao de
animais positivos durante a forma latente da infeco.

Exemplos de doenas que afetam animais domsticos

Herpesvirus bovino
BoHV-1.1: relacionado com a rinotraquete infecciosa bovina;
BoHV-2a: relacionado com balanopostite / vulvovaginite
infecciosa (subtipo mais patognico);
(BoHV-5): relacionado com a meningoencefalite / encefalite
herptica bovina.
Transmisso
Aerossis e contato direto;
Vrus est presente em secrees, excrees e smen.
Restos de tecidos do sistema nervoso (BoHV-5)
Patogenia
H a penetrao do vrus pelas mucosas, ocorrendo a
replicao primria, ento, atinge as terminaes nervosas locais e
posteriormente migra para os gnglios (gnglios trigmio) e podem
permanecer em latncia (na forma epissomal material gentico na
forma circular) at a reativao e nova replicao, e ocorre o
transporte de partculas virais para o local da infeco primria.
Gene LAT expresso quando o vrus entra em latncia e
interrompe a produo de RNA, assim no havendo produo de
protenas , e .

Reativao: Induzida por fatores estressantes, como o

transporte, superlotao, infeces intercorrentes, utilizao de
glicocorticides (3 dias para a reativao). Os sinais clnicos so
mais brandos na reativao, mas h liberao de grande
quantidade de partculas virais no meio ambiente.

Sinais Clnicos
Relacionados ao local de infeco;
Sinais respiratrio, reprodutivos, abortos, infertilidade e sinais
nervosos;
Sinais Clnicos da Rinotraquete: Inflamao aguda da
mucosa

respiratria,

febre,

apatia,

hiperemia

de

mucosas,

aparecimento de vesculas (lceras), secreo serosa com

progresso para mucopurulenta e sanguinolenta, animal respira
pela boca, secreo ocular (uni ou bilateral).
Sinais Clnicos Reprodutivos (na reativao ou na infeco
primria): Inflamao aguda da mucosa genital, vulvovaginite,
balanopostite, pstulas infecciosas podendo causar necrose.
Sinais Clnicos em Fmeas Prenhes: Aborto (a partir do 3
ms mais comum), reabsoro, infeco neonatal generalizada
(replicao ocorre em bao, fgado, musculatura, intestinos, etc.),
conjuntivite, enterites, mastite e encefalite.
Sinais Clnicos BoHV-5: Depresso profunda, nistagno,
episttono, tremores, marcha para trs, andar cambaleante,
convulses e quedas, cegueira e ranger de dentes;

Herpesvirus equina (EHV)

EHV-1: aborto em eqinos
EHV-4: rinopneumonite equina
Transmisso:
Aerossis, urina, lquidos de envoltrios fetais, placenta, smen.
Patogenia: O vrus penetra e se multiplica inicialmente no epitlio
da cavidade nasal, faringe, traquia, brnquios e bronquolos,
infectando a seguir leuccitos e clulas endoteliais de vasos
sanguneos e linfticos. A infeco dissemina-se para linfonodos
locais, a partir dos quais clulas mononucleares infectadas entram
na circulao sangunea (viremia). Com a viremia pode-se
desenvolver doena respiratria, neurolgica ou reprodutiva
(doena neonatal ou abortos).

Sinais Clnicos EHV-1

Respiratrios: febre, descarga nasal (serosa, mucide ou
mucopurulenta) e conjuntivite.
Abortos: aps infeces respiratrias, sem sinais prvios, pode
ocorrer casos isolados ou mltiplos, no afeta o trato reprodutivo
em novos ciclos.
Doena Neonatal: ocorre quando h infeco prxima ao
nascimento, patologia respiratria grave com morte alguns dias
aps o nascimento.

 Doenas Neurolgica: casos isolados ou mltiplos, pode estar

associado a doena respiratria e abortos, incio rpido com pico
em 48 horas, animal apresenta andar cambaleante e debilidade.

Sinais Clnicos EHV-4:

Respiratrios: indistinguvel da doena pelo EHV-1, sinais
clnicos mais severos na infeco primria, sinais clnicos podem
estar ausentes em animais vacinados ou em reativao, mas
verifica-se secreo nasal e cansao intenso aps exerccio.
Reprodutivo: abortos em casos isolados.

herpesvirus suis 1 (SHV)

Transmisso da doena entre grupos de porcos
Movimento de porcos portadores
Ar pelo menos 3km
As aves podem espalhar o vrus, embora no esteja ainda

comprovado
Carcaas contaminadas
Atravs do vesturio, botas, veculos e equipamento
Atravs de smen infectado via IA ou varrascos portadores
Despojos contaminados

Sinais clnicos: Dependendo da idade dos porcos, surgem sinais

determinados pela virulncia da estirpe infecciosa. Os sinais mais
dramticos ocorrem em leites muito jovens.

Os sinais neurolgicos observados so os seguintes:

Tremores
Movimentos descoordenados
Sentar-se com as patas traseiras esticadas
Decbito e ato de pedalar.
A morbilidade e mortalidade em leites muito elevada podendo

atingir os 100%.
Os porcos tornam-se cada vez menos sensveis com a idade, e a
taxa de mortalidade e incidncia de sinais neurolgicos
diminuem.

Herpesvirus canino do tipo 1 (CHV-1)

Patogenia
A transmisso ocorre por contato direto de um animal sadio
com secrees genitais, oronasais ou pela via transplacentria de
um co infectado. A idade dos filhotes no momento da infeco
fundamental para o aparecimento dos sinais clnicos e o
desenvolvimento da doena. Em filhotes com idade entre uma e
duas semanas de vida, causa uma doena necrosante generalizada
fatal e doena hemorrgica, enquanto que a infeco em filhotes
com mais de duas semanas de idade e ces adultos , muitas
vezes, assintomtica.
Sintomas da Herpes Canina Quais os sintomas da Herpes
Canina?
Dores abdominais, latidos, choro e uivos freqentes;

Para de mamar, fica letrgico e com a respirao ofegante:

secrees nasais; Diarreia amarelada ou esverdeada;
Sinais neurolgicos. Normalmente os filhotes muito jovens,
neonatos at 3 semanas, morrem dos efeitos sistmicos antes
da manifestao dos sinais neurolgicos, a maioria em 24
horas aps parar de mamar. Os que sobrevivem geralmente
apresentam seqelas neurolgicas, como cegueira, ataxia e
convulses.

Transmisso da Herpes Canina Como ocorre a transmisso da

Herpes Canina no filhote?
No tero da gestante
Por contato com secrees do canal vaginal durante o parto;
Por contato com secrees ps-parto da prpria me na
presena de anticorpos neutralizantes desenvolvidos na me;
Atravs de secrees de ces infectados que convivem no
mesmo local;

Transmisso da Herpes Canina Como ocorre a transmisso da

Herpes Canina na Cadela Prenhe?
Atravs do trato respiratrio superior ou trato genital. O vrus em
latncia pode ser ativado por algum estresse durante a gravidez;
Nas fmeas infectadas durante a gestao pode ocorre aborto,
nascimento de fetos mumificados, natimortos e infertilidade. Dos
que sobreviverem podem estar infectados ou no.

Transmisso da Herpes Canina Como ocorre a transmisso da

Herpes Canina em ces adultos?
Em ces adultos a Herpes Canina pode se manifestar atravs de
uma infeco leve ou inaparente no trato respiratrio superior,
tendo como sintomas rinites, faringites e conjuntivites. Leses
genitais da mucosa vaginal semelhantes infeco por herpes
vrus humano, j no macho causam ndulos linfides e ppulas
em prepcio e base do pnis. Pode gerar uma vaginite ou
balanopostite.

herpesvirus felino 1 (HVF-1)

O virus eliminado com as secrees nasais e lacrimais, assim
como pela saliva,
especialmente na forma de aerossol, pelos animais doentes. O
agente penetra por via nasal, oral ou conjuntival, causando infeco
primria do epitlio nasal com subsequente proliferao para o saco
conjuntival, faringe, traqueia, brnquio e bronquolos. As leses so
caracterizadas por necrose multifocal do epitlio, com infiltrao
neutroflica e inflamao.

Transmisso
Os gatinhos adquirem o vrus, na maioria das vezes, na
infncia. A principal forma de transmisso direta por contato com
as secrees dos olhos ou nasais. Os espirros tambm so uma
forma indireta e comum de transmisso. A mame pode transmitir o
vrus aos fetos e comum ocorrer aborto nas gestantes doentes.

Sintomas
Os principais sintomas so espirros, secreo nasal (catarro),
dificuldade de respirar, febre e desidratao. Por causa da
replicao do vrus nos olhos comum os animais ficarem com os
olhinhos fechados e com secreo purulenta. lcera de crnea
costuma ocorrer com certa frequncia. Alguns gatinhos podem
desenvolver dermatites (inflamao da pele) ao redor dos olhos
tambm, mas so menos comuns que os outros sintomas.
Nas infeces crnicas, ou seja, nos casos de estresse e
reativao da replicao do vrus, os sintomas costumam ser mais
brandos, com espirros espordicos e secreo nos olhos e nariz.

Concluso

Com a realizao de um correto diagnstico possvel

determinar a distribuio das doenas nos vrios grupos etrios, os
ndices de prevalncia e/ ou incidncia, monitorar o status sanitrio
dos animais e avaliar o progresso ou sucesso de programas de
controle ou erradicao. Portanto para todos estes feitos,
necessrio avaliao de alguns fatores para escolha de quais
tcnicas sero utilizadas, como: disponibilidade do teste, custo,
rapidez, facilidade de execuo, sensibilidade e especificidade.

Referncias bibliogrficas

http://www.blogdocachorro.com.br/voce-ja-ouviu-falar-daherpes-canina/
http://portalmedicinafelina.com.br/herpesvirus-felino/
http://www.unicruz.edu.br/seminario/artigos/saude/RINOTRA
QUE%C3%8DTE%20INFECICIOSA%20FELINA-%20REVIS
%C3%83O.pdf
http://www.bibliomed.com.br/bibliomed/bmbooks/dermato/livr
o7/cap01.htm
http://www.csbrj.org.br/FRAGOSO/T212Herpes.pdf
http://ppgca.evz.ufg.br/up/67/o/Greice_semin
%C3%A1rio_1_corrigido.pdf?1350301874
http://www.respig.pt/diseases/aujeszky.asp