Laboratorio de Bioqumica

Prctica N2 Extrae tu propio ADN

1. Objetivo
Extraer ADN de muestras de clulas animales y determinar algunas de sus
caractersticas fsicas
2. Materiales y reactivos

Para la extraccin de ADN (clulas de la mejilla):

Agua destilada C/N

Etanol al 95% (150 ml)
Solucin de jabn lquido al 25% (100 ml, 1 parte de jabn + 3 partes de agua)
Solucin de NaCl 0.9% (150 ml)
12 Cuchara de plstico
Vaso descartable
10 12 Alambres en forma de anzuelo o palitos de chupete
Hielo en recipiente de tecnopor
12 Tubos de ensayo largo (con tapn)
12 tubos de ensayo pequeos (con tapn)
4 probetas de 50 ml
4 pipetas de 5 ml
3. Introduccin
La molcula de ADN posee una conformacin estructural especfica y se organiza
espacialmente como una doble hlice (forma helicoidal). Dicha conformacin es
posible gracias a la unin de bases nitrogenadas mediante puentes de hidrgeno.
Para comprender de manera general el sistema de apareamiento de bases y la
estructura helicoidal del ADN se construir una representacin tridimensional en papel
y se discutirn algunas propiedades fsicas de esta molcula.
El ADN se encuentra en el interior del ncleo de las clulas, superenrollado y unido a
protenas (histonas) para formar la cromatina. Para su extraccin, es necesario
romper las clulas (membrana o pared celular), acceder al ncleo y liberar el ADN.

4. Parte experimental

Extraccin de ADN de las clulas de la mejilla:

1. Adicionar en un tubo de ensayo 10 ml de etanol al 95% y poner a enfriar en un

recipiente con hielo
2. Colocar un poco de agua (10 ml aproximadamente) en un vaso descartable y
enjuagar la boca en forma enrgica, durante al menos medio minuto, para
arrastrar la mayor cantidad de clulas de descamacin de la mucosa bucal
NOTA: antes de hacerlo trague saliva para eliminar la accin de las amilasas,
enzimas contenidas en la saliva.
3. Devolver el agua del enjuague al vaso. Aadir dos pizcas de sal y 5 ml de la
solucin de jabn lquido, agitar suavemente evitando la formacin de espuma
4. Transferir la mezcla al tubo de ensayo con el etanol fro. Dejar reposar durante 2
o 3 minutos sin mover el tubo esta mezcla se muestra turbia y es ms densa que
el alcohol, por lo que se deposita en el fondo del tubo. El alcohol forma una capa
por encima de la fase acuosa en la que se encuentra el ADN en disolucin
provocando que este se precipite
5. Esperar unos 10 minutos mientras el ADN se precipita en la interfase alcoholagua, formando una masa blanquecina (grumo de aspecto algodonoso)

5. Cuestionario previo (para el cuaderno de laboratorio)

1. Qu es el ADN y por qu es importante estudiarlo?
2. En qu componentes o estructuras celulares es posible encontrarlo?
3. Cules son los principales usos de las muestras de ADN recogidas en los
laboratorios clnicos y cientficos?

6. Cuestionario posterior (para el informe)

1. Qu funcin tienen el jabn, la sal y el alcohol para la extraccin de ADN?
2. El ADN tiene mayor afinidad con el agua o con el alcohol? Justifica tu respuesta
3. Qu clulas de nuestro cuerpo no podran resultar tiles en el estudio de ADN
para paternidad? Justifica tu respuesta

7. REFERENCIAS
Cooper GM; Hausman RE. 2007. La clula. Tercera Edicin. Marbn Libros, S.L.,
Madrid, Espaa.
http://ciat-library.ciat.cgiar.org/Articulos_CIAT/ accedido el 2 de Agosto de 2016
http://learn.genetics.utah.edu/content/basics/ accedido el 3 de Agosto de 2016
http://www.pbs.org/wgbh/nova/education/activities/2809_genome.html accedido el 31
de Agosto de 2016