Manual de Instrumental P-A

M.A.G.E.
Marisa Martnez Amador
UNIVERSIDAD
VERACRUZANA
ORIZABA, VER
LABORATORIO DE ANALISIS
INSTRUMENTAL
(MEIF)
QUIMICO FARMACEUTICO BIOLOGO
TERCER SEMESTRE
MAGE MARISA MARTINEZ AMADOR

SEM AG/FB
2015
1
M.A.G.E. Marisa Martnez Amador
CONTENIDO PROGRAMATICO
Introduccin: Instrumentos analticos.
1.- MICROMETRIA
a) manejo de microscopio.
Practica No. 1 Medicin de objetos microscpicos.
2.-REFRACTOMETRIA
Practica No. 2 Uso y manejo del refractmetro de campo (calibracin).
Practica No.3 Aplicacin de refractmetro de campo: Determinacin del
% de
sacarosa en refrescos.
Practica No. 4 Uso y manejo de refractmetro Abbe (calibracin y
estandarizacin).
Prctica No. 5 Medicin de % de alcohol en bebidas.
Practica No. 6 Uso, manejo y aplicacin de refractmetro clnico
3.- POLARIMETRIA
Practica No. 7 Uso, manejo, aplicacin de polarmetro (calibracin).
Practica No. 8 Determinacin polarimetraca de la inversin de la
sacarosa
4.- POTENCIOMETRIA
Practica No 9 Uso y manejo (calibracin) de potencimetro analgico y
digital.
Practica No 10 Determinacin potenciomtrica de acido fuerte-base
fuerte.
Practica No. 11 Determinacin potenciomtrica acido dbil- acido fuerte.
5.- ESPECTROFOTOMETRIA VISIBLE
Practica No. 12 Determinacin colorimtrica del cobre en sulfato de
cobre.
a) calibracin de tubos.
b) curva de calibracin.
Practica No. 13 Determinacin espectrofotomtrica de cobre en sulfato
de cobre.
Practica No. 14 Determinacin de mxima curva de adsorcin de un
compuesto coloreado.
6.- ESPECTROFOTOMETRIA ULTRAVIOLETA
Practica no. 15 anlisis espectrofotomtrico de acido acetil saliclico en
tabletas
2
7.- INTRODUCION A LA CROMATOGRAFIA HPLC

Practica No 16 Uso y manejo de HPLC.
8.- INFRAROJO
Prctica No.17 Uso y manejo de Espectrofotmetro infrarrojo
INTRODUCCION
OBJETIVO DE LA QUIMICA ANALITICA:
La qumica analtica se puede dividir en dos reas llamadas anlisis cualitativo y
anlisis cuantitativo. El anlisis cualitativo, trata de la identificacin de sustancias,
que elementos o compuestos estn presentes en una muestra. En el anlisis
cuantitativo se trata de la determinacin de la cantidad de una sustancia en
particular, que se encuentre presente en una muestra.
Si este componente particular presenta ms de 1 % de la muestra, se le considera
un componente principal. Si es del 0.01 % de la muestra, se le considera un
componente menor.
Finalmente, si se encuentra en la muestra en una proporcin menor al 0.01%, se
considera como un componente vestigial. Otra clasificacin del anlisis
cuantitativo se puede basar en el tamao de la muestra con la que cuenta para el
anlisis. Las subdivisiones no estn muy bien definidas, se unen en forma
imperceptible y son en general, como sigue: anlisis macro, cuando el peso de la
muestra empleada es mayor de 0.1 g; los anlisis semimicro, se realizan con
muestras de 10 a 100 mg; en los anlisis micro, las muestras empleadas son de 110 mg y los anlisis ultramicro, involucran muestras del orden del microgramo (1
microgramo =10-6 ).
Clasificacin de los mtodos analticos.
1.- En base a la propiedad que se observa en el proceso de medicin final.
Mtodos volumtricos, Mtodos gravimtricos, Mtodos electroqumicos
2.- Mtodos clsicos y Mtodos instrumentales.
Mtodos clsicos:
En los primeros aos de la qumica, la mayor parte de los anlisis se realizaban
separando los componentes de inters de una muestra (los analitos) mediante
precipitacin, extraccin o destilacin. En los anlisis cualitativos, los
componentes separados se trataban seguidamente con reactivos, originando as
productos que podan identificarse por sus colores, sus puntos de ebullicin, de
3
fusin, sus solubilidades en diferentes solventes, sus olores, sus

pticas o sus ndices de refraccin.
actividades
Mtodos instrumentales.
Inicia a partir de los aos treinta, con la medicin de otras propiedades fsicas
de los analitos como conductividad, potencial del electrodo, absorcin o emisin
de la luz, razn masa-carga, fluorescencia y el empleo de tcnicas de separacin
ms eficaces como la cromatografa, que reemplazaron a la destilacin,
extraccin, precipitacin como una etapa previa a su determinacin cualitativa y
cuantitativa; dando lugar a lo que hoy conocemos como mtodos instrumentales
de anlisis.
-
Tipos de mtodos instrumentales
Para este tipo de anlisis es importante conocer las propiedades fsicas que
son utilizadas como seales analticas en anlisis cualitativo y cuantitativo como
se muestra en el cuadro siguiente.
Algunas tcnicas instrumentales son ms sensibles, que las clsicas, pero

otras no.
http://es.slideshare.net/belkyspereira/mtodos-analticos-unidad-1-anlisisinstrumental-1
- Instrumentos para el anlisis.
Un instrumento para el anlisis qumico convierte una seal analtica que no
puede ser detectable y comprensible por el hombre en una forma que si lo es. Un
instrumento analtico es considerado como un dispositivo de comunicacin entre el
4
sistema de estudio y el qumico analista. Un instrumento para el anlisis suele

estar constituido por cuatro componentes principales:
Generador de seales.
Transductor de entrada (detector).
Procesador de la seal.
Transductor de salida o dispositivo de lectura.
http://es.slideshare.net/alis590/fundamentos-de-qumica-analtica-skoog-8va-ed?
related=3
Generador de seales:
Produce una seal que denota la presencia y con frecuencia la concentracin
del analito. Puede ser un compuesto o un ion generado a partir del propio analito.
Para un anlisis de misin atmica el generador de seal puede ser los tomos
excitados o los iones del analito que emiten fotones de radiacin. Para una
determinacin de pH la seal es la actividad del ion hidrogeno de una disolucin
de la muestra. En otros instrumentos el generador de seal esta
considerablemente ms elaborado.
Detectores (transductor de entrada):
Dispositivo que convierte un tipo de seal o energa en otro. Ejemplo el
termopar que convierte una seal de calor radiante en voltaje elctrico; la foto
celda que convierte la luz en corriente elctrica. La mayor parte de los detectores
convierte en una seal analtica en voltaje o corriente elctrica, que se amplifica o
modifica fcilmente para accionar un dispositivo de lectura.
Procesador de seal:
Modifica la seal transdusida procedente del detector de tal forma que se
adecue al funcionamiento del dispositivo de lectura.
Dispositivo de lectura:
Es un transductor que convierte un seal procesada en una seal que puede
ser entendida por un observador humano; puede ser la posicin de una aguja en
un medidor de escala o una serie de nmeros en una pantalla digital.
-La seleccin de un mtodo analtico
5
Se deben realizar dos acciones primordiales la definicin del problema y el

conocimiento de las caractersticas de funcionamiento de los instrumentos
(parmetros de calidad).
Definicin del problema:

Para poder seleccionar un mtodo analtico, es esencial definir con claridad la
naturaleza del problema analtico, dicha definicin requiere de la contestacin de
las siguientes preguntas:
1. Tipo de anlisis cualitativo o cuantitativo.?
2. Qu exactitud y precisin se requiere?
3. De qu cantidad de muestra se dispone?
4. Cul es el intervalo de la concentracin del analito?
5. Qu componentes de la muestra interferirn?
6. Cules son las propiedades fsicas y qumicas de la muestra?
7. Cuntas muestras deben realizarse?
Teniendo en cuenta la respuesta a las 6 cuestiones anteriores, puede escogerse
un mtodo instrumental siempre que se conozcan las caractersticas de
funcionamiento de los distintos mtodos.
Caractersticas del funcionamiento de los instrumentos (parmetros de
calidad)
Se enumeran criterios cuantitativos de funcionamiento de los instrumentos; las
caractersticas se expresan en trminos numricos que se denominan parmetros
de calidad, esto permite al Qumico reducir la eleccin de los instrumentos a tan
solo unos pocos.
CRITERIOS NUMERICOS PARA SELECCIONAR UN METODO ANALITICO
INSTRUMENTAL
Criterio
Parmetro de calidad
1.-Precisin
Desviacin estndar absoluta, desviacin
estndar relativa, coeficiente de variacin,
varianza.
2.-Exactitud
Error absoluto sistemtico, error relativo
sistemtico
3.-Sensibilidad
De calibracin y analtica.
4.-Limite de deteccin
Blanco ms tres veces ms la desviacin
estndar del blanco.
5.Intervalo
de Concentracin
entre
el
lmite
de
6
concentracin
6.-Selectividad
1.
2.
3.
4.
5.
6.
-
cuantificacin(LOQ) y limite de linealidad LOL).

Coeficiente de selectividad.
OTROS PARAMETROS DE CALIDAD A TENER EN CUENTA EN LA

ELECCION DE UN METODO ANALITICO INSTRUMENTAL
Velocidad
Facilidad y comodidad
Habilidad del operador
Costo y disponibilidad del equipo
Costo por muestra
Contaminacin en el anlisis
UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS
LABORATORIO DE ANALIS INSTRUMENTAL
MICROMETRIA
ANALISIS INSTRUMENTAL-PROC: DET 001.
REVISION No. 1
PAGINA 1FECHA ULTIMA
MAYO 2015
REVISION
1.0PROPOSITO.
Conocer y manejar el micrmetro de platina y micrmetro ocular para la medicin
de clulas.
2. ALCANCE
Para todo el personal de laboratorio de Anlisis Instrumental.
3. REFERENCIAS.
-
Casartelli J.D. Microscopia terica prctica. Ediciones URMO Bilbao.

Atlas de Microscopia.
4. GENERALIDADES.
5. MATERIAL
- No aplica.
6. EQUIPO O INSTRUMENTO.
8
Microscopio compuesto
7. MUESTRAS
- Laminilla teida de muestra sangunea.
- Laminilla teida de parsitos.
- Laminilla teida de varias clulas.
8. REACTIVOS
- No aplica.
9. ESQUEMA DEL INSTRUMENTO
10. ESQUEMA DEL SISTEMA OPERATIVO
11. PROCEDIMIENTO
-
Se formaran grupos de trabajo de 4 integrantes.

Se asignara a un grupo de trabajo la exposicin de la prctica, auxilindose
de cualquier material didctico.
Se realizara un resumen de la exposicin tomando en cuenta los aspectos
fundamentales.
12. CALIBRACION
13. ESCALAS DE MEDICION
ESCALA DE MICROMETRO OCULAR
ESCALA DE MICROMETRO DE PLATINA
ESC
ALAS SOBREPUESTAS PARA CALCULAR FACTOR
13. PRECAUCIONES
14. TCNICA.
15. OBSERVACIONES
16. RESULTADOS.
17. GRAFICAS
18. CUESTIONARIO
19. INVESTIGACION.
10
20. BIBLIOGRAFIA
21. ANEXOS.
USO Y MANEJO DEL
REFRACTMETRO DE
CAMPO (CALIBRACIN).

REVISION No. 1
MAYO 2015
REVISION
1. PROPOSITO
Conocer y calibrar el refractmetro de campo
2. ALCANCE
3. REFERENCIAS.
- Skoog D.A. Anlisis Instrumental. Editorial Interamericana.
- http://www.atago.net/Spanish/pop_knowledge.html
4.0 GENERALIDADES.
La Refractometria es un proceso de medicin, por medio del cual se determina
un valor especfico de una sustancia: el ndice de refraccin.
Propiedades de la Radiacin Electromagntica.
La radiacin electromagntica es una forma de energa que se transmite a
travs del espacio a grandes velocidades. Sus propiedades se explican mediante
la teora ondulatoria clsica que emplea parmetros tales como longitud de onda,
frecuencia y amplitud. La radiacin electromagntica no requiere un medio
soporte para su transmisin, por lo que se transmite fcilmente en el vaco; es
considerada como un flujo de partculas discretas o paquetes de energa llamados
fotones o cuantos. La energa de un fotn es proporcional a la frecuencia de
radiacin.
11
Cuando la radiacin atraviesa un medio transparente, se produce una accin

recproca entre el campo elctrico y de la radiacin y los electrones de enlace de
la materia como consecuencia la velocidad de propagacin del haz entre la
velocidad de propagacin del haz es menor en el vaco.
Refraccin de la luz.Se da el nombre de refraccin de luz a la desviacin que sufre o experimentan los
rayos luminosos cuando pasan oblicuamente de un medio al otro. Por ejemplo,
cuando pasan del aire al agua y recprocamente. Los rayos al refractarse, unas
veces se acercan y otras se alejan de lo normal.
En el primer caso se dice que el segundo medio es ms refractante que el primero
y en el segundo caso se dice que es menos refractante.
El ndice de refraccin de una sustancia (n) se da por la relacin ntrela velocidad
de propagacin en el medio y la velocidad en el vaco. El ndice de refraccin de
muchos lquidos vara entre 1.3 y 1.8 es de 1.3 a 2.5 o mayor en slidos.
Los instrumentos ms usados para la medicin del (n) son del tipo de ngulo
critico; que se define como el ngulo de refraccin en un medio cuando el ngulo
de la radiacin incidente es de 90 (ngulo rasante). Se necesita una fuente
enfocadora o condensadora para producir un solo limite oscuridad-luz. El ngulo
critico depende de la longitud de onda, si se observa luz policromtica no se
observa un solo limite ntido, sino hay una reaccin cromtica difusa entre las
areas de luz y obscuridad; as es imposible el establecimiento preciso del ngulo
critico. Esta dificultad se supera a menudo por el uso de radiacin monocromtica.
Muchos refractmetros de ngulo critico van equipados con un compensador que
permite el uso de radiacin de una fuente de tungsteno, pero compensa la
dispersin resultante de tal modo que da un (n) en funcin de la lnea de sodio D.
El compensador consta de uno dos prismas de Amici
Las propiedades de este complejo prisma son tales que la radiacin dispersada
converge dando un solo haz de luz blanca que se desplaza en la trayectoria de la
lnea amarilla del sodio D.
5.0 MATERIAL
2 frascos goteros.
Agua destilada.
Papel absorbente.
6.0 EQUIPO O INSTRUMENTO.
Sacarmetro ATAGO
Modelo y serie:
Sacarmetro ATAGO rojo: 1043 0-30 Brix T/C Hand Refractometer
12
Sacarmetro ATAGO negro: Atago N1 Brix 0-32%

7.0 MUESTRA.
Agua destilada.
8.0 REACTIVOS
No aplica
9.0- ESQUEMA DEL INSTRUMENTO
10 .ESQUEMA DEL SISTEMA OPERATIVO.
11. PROCEDIMIENTO
-

13

fundamentales.
12. CALIBRACION
Procedimiento Operativo:
1. Abra cuidadosamente el prisma secundario y coloque de 2 a 3 gotas
de agua destilada en el centro de la superficie del prisma.
2. Cierre cuidadosamente el prisma secundario.
3. Observe por el ocular, aparece una lnea clara y definida en el campo
de visin en el lugar que coincide en la lnea de interseccin de el
campo claro y oscuro con el cero de la escala.
4. Si la lnea de interseccin, no coincide, ajustar a cero con el tornillo
calibrador.
5. Queda listo para realizar lecturas.
6. Al finalizar seque el prisma con papel higinico SIN TALLAR y cerrar
el prisma secundario para que est listo para la siguiente muestra.
13. ESCALAS DE MEDICION
14
14. PRECAUCIONES
-
No tallar los prismas.

Secar con papel absorbente sin color, olor y con grabados.
Dejar un pequeo papel absorbente entre los prismas.
15. TCNICA.
- No aplica
16. OBSERVACIONES
17. RESULTADOS.
En forma de tabla
18. GRAFICAS
-
No aplica
19. CUESTIONARIO
- Qu es la refraccin?
- Defina ndice de Refraccin.
- Cite la Ley de Snell.
- Defina el ngulo critico?
- Cmo se relaciona la refraccin con la dispersin?
- Cul es la aplicacin prctica del refractmetro de campo?
20. ANEXOS.
15
APLICACIN DE
REFRACTMETRO DE
CAMPO: DETERMINACIN
DEL % DE
SACAROSA EN
REFRESCOS Y JUGOS

REVISION No. 1
MAYO 2015
REVISION
1.0 PROPOSITO
Determinar el % de sacarosa en refrescos utilizando el refractmetro de
campo.
2.0 ALCANCE
3.0 REFERENCIAS.
- http://www.atago.net/Spanish/pop_knowledge.html
- http://www.infoagro.com/instrumentos_medida/doc_refractometria_refraccio
n.asp?k=20
4.0 GENERALIDADES.
La Refractometra es un proceso de medicin, por medio del cual se determina
un valor especfico de una sustancia: el ndice de refraccin.
Propiedades de la Radiacin Electromagntica.
La radiacin electromagntica es una forma de energa que se transmite a
travs del espacio a grandes velocidades. Sus propiedades se explican mediante
la teora ondulatoria clsica que emplea parmetros tales como longitud de onda,
frecuencia y amplitud. La radiacin electromagntica no requiere un medio
soporte para su transmisin, por lo que se transmite fcilmente en el vaco; es
considerada como un flujo de partculas discretas o paquetes de energa llamados
fotones o cuantos. La energa de un fotn es proporcional a la frecuencia de
radiacin.
16
Cuando la radiacin atraviesa un medio transparente, se produce una accin

recproca entre el campo elctrico y de la radiacin y los electrones de enlace de
la materia como consecuencia la velocidad de propagacin del haz entre la
velocidad de propagacin del haz es menor en el vaco.
Refraccin de la luz.Se da el nombre de refraccin de luz a la desviacin que sufre o experimentan los
rayos luminosos cuando pasan oblicuamente de un medio al otro. Por ejemplo,
cuando pasan del aire al agua y recprocamente. Los rayos al refractarse, unas
veces se acercan y otras se alejan de lo normal.
En el primer caso se dice que el segundo medio es ms refractante que el primero
y en el segundo caso se dice que es menos refractante.
El ndice de refraccin de una sustancia (n) se da por la relacin ntrela velocidad
de propagacin en el medio y la velocidad en el vaco. El ndice de refraccin de
muchos lquidos varia entre 1.3 y 1.8 es de 1.3 a 2.5 o mayor en slidos.
Los instrumentos ms usados para la medicin del (n) son del tipo de ngulo
critico; que se define como el ngulo de refraccin en un medio cuando el ngulo
de la radiacin incidente es de 90 (ngulo rasante). Se necesita una fuente
enfocadora o condensadora para producir un solo limite oscuridad-luz. El ngulo
critico depende de la longitud de onda, si se observa luz policromatica no se
observa un solo limite ntido, sino hay una reaccin cromtica difusa entre las
areas de luz y obscuridad; as es imposible el establecimiento preciso del ngulo
critico. Esta dificultad se supera a menudo por el uso de radiacin monocromtica.
Muchos refractmetros de ngulo critico van equipados con un compensador que
permite el uso de radiacin de una fuente de tungsteno, pero compensa la
dispersin resultante de tal modo que da un (n) en funcin de la lnea de sodio D.
El compensador consta de uno dos prismas de Amici
Las propiedades de este complejo prisma son tales que la radiacin dispersada
converge dando un solo haz de luz blanca que se desplaza en la trayectoria de la
lnea amarilla del sodio D.
5.0 MATERIAL
5 frascos goteros.
Agua destilada.
Papel absorbente.
6.0 EQUIPO O INSTRUMENTO.
Sacarmetro ATAGO
Modelo y serie:
17
Sacarmetro ATAGO rojo: 1043 0-30 Brix T/C Hand Refractometer

Sacarmetro ATAGO negro: Atago N1 Brix 0-32%
7.0 MUESTRA.
5 muestras de refrescos de marcas diferentes jugos sin pulpa.
8.0 REACTIVOS
No aplica
10.0 ESQUEMA DEL SISTEMA OPERATIVO.
11.0 PROCEDIMIENTO
-

18

fundamentales.
12.0 CALIBRACION
1. Abra cuidadosamente el prisma secundario y coloque de 2 a 3
gotas de agua destilada en el centro de la superficie del prisma.
2. Cierre cuidadosamente el prisma secundario.
3. Observe por el ocular, aparece una lnea clara y definida en el
campo de visin en el lugar que coincide en la lnea de
interseccin de el campo claro y oscuro con el cero de la escala.
4. Si la lnea de interseccin, no coincide, ajustar a cero con el
tornillo calibrador.
5. Queda listo para realizar lecturas.
6. Al finalizar seque el prisma con papel higinico SIN TALLAR y
cerrar el prisma secundario para que est listo para la siguiente
muestra.
13.0 ESCALAS DE MEDICION
14.0 PRECAUCIONES
19

15.0 TCNICA.
- Calibre el instrumento.
- Abra cuidadosamente el prisma secundario y coloque de 2 a 3 gotas de
muestra en el centro de la superficie del prisma.
- Cierre cuidadosamente el prisma secundario.
- Observe por el ocular, leer el % de sacarosa de la muestra.
- Al finalizar lave el prisma con 2 o 3 gotas de agua destilada y seque el
prisma con papel higinico SIN TALLAR y cerrar el prisma secundario para
que est listo para la siguiente muestra
16.0 OBSERVACIONES
En forma de tabla.
17.0 RESULTADOS.
En forma de tabla.
Reportar con valores de referencia
18.0 GRAFICAS
Presentar resultados en grafica de barras.
19.0 CUESTIONARIO
- Qu influencia tiene la temperatura en la medicin del ndice de
refraccin?
- Porque es importante eliminar el gas de la muestra?
- Qu caractersticas deben tener las muestras a medir?
20.0 ANEXOS.
20
USO Y MANEJO DE
ANALISIS INSTRUMENTAL: PROC: DET 004
REVISION No. 1
PAGINA 1REFRACTMETRO ABBE
FECHA
ULTIMA
AGOSTO 2015
(CALIBRACIN Y
REVISION
ESTANDARIZACIN)
4. PROPOSITO
Usar y calibrar el refractmetro Abbe.
5. ALCANCE
6. REFERENCIAS.
- http://depa.fquim.unam.mx/IQ/balances/anexo1.htm
-
http://www.reles.com.pe/catalogo/bellingham/pdf/r_abbe60.pdf
http://www.metas.com.mx/guiametas/La-Guia-MetAs-08-12-refraccion.pdf
8.0 GENERALIDADES.
NDICE DE REFRACCIN
Cuando un haz de luz que se propaga por un medio ingresa a otro distinto, una
parte del haz se refleja mientras que la otra sufre una refraccin, que consiste en
el cambio de direccin del haz. Para esto se utiliza el llamado ndice de refraccin
del material, que nos servir para calcular la diferencia entre el ngulo de
incidencia y el de refraccin del haz (antes y despus de ingresar al nuevo
material).
El efecto de la refraccin se puede observar fcilmente introduciendo una varilla
en agua. Se puede ver que parece quebrarse bajo la superficie. En realidad lo que
sucede es que la luz reflejada por la varilla (su imagen) cambia de direccin al salir
del agua, debido a la diferencia de ndices de refraccin entre el agua y el aire.
21
Se utiliza la letra n para representar el ndice de refraccin del material, y se

calcula por la siguiente frmula:
n = c0
v
n: ndice de refraccin del medio en cuestin

co: velocidad de la luz en el vaco (3x108 m/s)
v: velocidad de la luz en el medio en cuestin
Es decir que es la relacin entre la velocidad de la luz en el vaco y en el medio.

Dado que la velocidad de la luz en cualquier medio es siempre menor que en el
vaco, el ndice de refraccin ser un nmero siempre mayor que 1.
En el vaco: n=1
En otro medio: n>1
LEY DE REFRACCIN (LEY DE SNELL)
El ngulo de incidencia 1 es igual al ngulo de reflexin 1'
n1 . sen 1
n2 . sen 2
1ngulo
entre el haz incidente y la normal (perpendicular)

a la superficie
2ngulo
entre el haz refractado y la normal a la superficie.

9.0 MATERIAL
5 frascos goteros.
Agua destilada.
Papel absorbente.
10.0
11.0
EQUIPO O INSTRUMENTO.
22
Refractmetro Abbe.
El Refractmetro Abbe sirve para determinar el ndice de refraccin y de la
dispersin cromtica de lquidos y sustancias plsticas y slidas, en el mayor
margen comprendido de 1.3 a 1.7.
El funcionamiento del refractmetro de Abbe est basado en el estudio del ngulo
lmite en el que se produce la reflexin total del rayo que atraviesa los prismas y la
muestra entre ellos. Como este valor depende de los ndices de refraccin de las
sustancias atravesadas y, dado que el valor correspondiente a los prismas es
conocido, resulta posible conocer el ndice de refraccin de la muestra
Especificaciones tcnicas
ndice de refraccin (nD):
1,700
Precisin: 0,0002
Resolucin: 0,0002
12.0
No aplica
Contenido de azcar (%): 0 ... 95

1,300 ... Precisin: 0,25 %
Resolucin: 0,25 %
Peso: 3000 g
MUESTRA.
8.0 REACTIVOS
Agua destilada.
Etanol al 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%,35%, 40%.
23
A. Lista de partes principales. Figuras 1 y 2.

1. Ocular
8. Caja desecadora
2. Ensamble de iluminacin de la
9. Conexiones de entrada y salida de
muestra
agua para el control de temperatura
3. Perillas de abertura del prisma
l0. Tornillo de ajuste
4. Prisma secundario
11. Perilla de compensacin de color
5. Prisma principal
12. Perilla de medicin
6. Termistor
13. Termmetro
7. Ensamble de la iluminacin de la
escala
24
9.- ESQUEMA DEL SISTEMA OPERATIVO.
10.-PROCEDIMIENTO
-

fundamentales.
11.- CALIBRACION
25
Ajuste de la escala
1.- Encienda el instrumento e identifique las partes que lo constituyen
2.- Retire el foco y levante el prisma secundario.
3.- Colocar de 2 a 3 gotas de agua destilada en la superficie del prisma principal
con una jeringa. (Figura 3)
4. Cierre el prisma secundario y observa a travs del ocular la escala de medicin.
5. Ajustar la escala, a 1.333 ( Brix 0%). Figura 4.
12.- ESCALAS DE MEDICION
26
13.- PRECAUCIONES
-

14.- TCNICA.
1.- Calibrar el instrumento con agua destilada a 1.333 de ndice de refraccin.
2.- Colocar en el prisma fijo dos o tres gotas de la muestra, cerrar con el prisma
mvil, acercar la lmpara y ajustar la interseccin del campo oscuro y claro. Con el
botn grande de la derecha.
3.- Ya ajustando los campos, bajar el swtich de encendido para observar la escala
y hacer la lectura correspondiente.
4.- Secar y enjuagar con dos gotas de agua destilada, secar nuevamente y hacer
la siguiente medicin.
15.- OBSERVACIONES
16.- RESULTADOS. Tabulados
17.- GRAFICAS
Presentar resultados en grafica de puntos o histograma. Para realizar la
interpolacin. En Excel.
18.- CUESTIONARIO
19. ANEXOS.
27
DETERMINACIN
REVISION
No. 1
PAGINA 1INDIRECTA DEL % DE
FECHA ULTIMA
AGOSTO 2015
ALCOHOL EN BEBIDAS
REVISION
EMPLEANDO EL
REFRACTOMETRO ABBE.
1. PROPOSITO
Determinar en forma indirecta l % de etanol en bebidas empleando el
Refractmetro de Abbe.
2. ALCANCE
3. REFERENCIAS.
- http://depa.fquim.unam.mx/IQ/balances/anexo1.htm
-
4. GENERALIDADES.
NDICE DE REFRACCIN
28
material).
n = c0
v


En el vaco: n=1
En otro medio: n>1
LEY DE REFRACCIN (LEY DE SNELL)
El ngulo de incidencia 1 es igual al ngulo de reflexin 1'
n1 . sen 1
n2 . sen 2
1ngulo
entre el haz incidente y la normal (perpendicular)

a la superficie
29
2ngulo
entre el haz refractado y la normal a la superficie.

PORCENTAJE DE ALCOHOL EN BEBIDAS.
5. MATERIAL
5 frascos goteros.
Agua destilada.
Papel absorbente.
Refractmetro Abbe.
El Refractmetro Abbe sirve para determinar el ndice de refraccin y de la
dispersin cromtica de lquidos y sustancias plsticas y slidas, en el mayor
margen comprendido de 1.3 a 1.7.
El funcionamiento del refractmetro de Abbe est basado en el estudio del ngulo
lmite en el que se produce la reflexin total del rayo que atraviesa los prismas y la
muestra entre ellos. Como este valor depende de los ndices de refraccin de las
sustancias atravesadas y, dado que el valor correspondiente a los prismas es
conocido, resulta posible conocer el ndice de refraccin de la muestra
Especificaciones tcnicas
ndice de refraccin (nD):
1,700
Precisin: 0,0002
Resolucin: 0,0002
Contenido de azcar (%): 0 ... 95

1,300 ... Precisin: 0,25 %
Resolucin: 0,25 %
Peso: 3000 g
7. MUESTRA
5 Diferentes bebidas alcohlicas sin sacarosa.
8.0 REACTIVOS
Agua destilada.
Etanol
30
9.0- ESQUEMA DEL INSTRUMENTO.
A. Lista de partes principales. Figuras 1 y 2.

1. Ocular
8. Caja desecadora
2. Ensamble de iluminacin de la
9. Conexiones de entrada y salida de
muestra
agua para el control de temperatura
3. Perillas de abertura del prisma
l0. Tornillo de ajuste
4. Prisma secundario
11. Perilla de compensacin de color
31
5. Prisma principal
6. Termistor
7. Ensamble de la iluminacin de la
escala
12. Perilla de medicin

13. Termmetro
11.-PROCEDIMIENTO
-

32

fundamentales.
12.- CALIBRACION
Ajuste de la escala
Calibracin
1.- Encienda el instrumento e identifique las partes que lo constituyen
2.- Retire el foco y levante el prisma secundario.
3.- Colocar de 2 a 3 gotas de agua destilada en la superficie del prisma principal
4. Cierre el prisma secundario y observa a travs del ocular la escala de medicin.
5. Ajustar la escala, a 1.333 ( Brix 0%). Figura 4.
33
14.- PRECAUCIONES
-

15.- TCNICA.
1.- Calibrar el instrumento con agua destilada a 1.333 de ndice de refraccin.
botn grande de la derecha.
y hacer la lectura correspondiente.
5.- Realizar el mismo procedimiento para las 5 muestras de bebidas alcohlicas.
34
16.- OBSERVACIONES
17.- RESULTADOS. Tabulados, con valores de referencia, nombre y marca de
bebida.
18.- GRAFICAS
Presentar resultados en grafica de puntos o histograma. Realizar la interpolacin
de acuerdo a los resultados de ndice de refraccin de las bebidas.
19.- CUESTIONARIO
1.- Cules son los alcoholes encontrados en las bebidas y que nos indica el
ndice de refraccin?
Que indica la presencia de metanol en una bebida y cul es su concentracin
mxima permitida?
20. ANEXOS.
DETERMINACION DE %
REVISION No. 1
PAGINA 1DE PROTEINAS ES
FECHA
ULTIMA
AGOSTO 2015
SUERO, DENSIDAD E
REVISION
INDICE DE REFRACCION
EN ORINA.
1. PROPOSITO
Utilizando el refractmetro clnico determinar % de protenas en suero, densidad e
ndice de refraccin en orina.
2. ALCANCE
35
3.
-
REFERENCIAS.
http://depa.fquim.unam.mx/IQ/balances/anexo1.htm
http://www.ctv.es/USERS/pasi/labora/bioquim.htm
http://www.uned.es/cristamine/gemas/propiedades/refraccion.htm
http://www.pce-iberica.es/medidor-detalles-tecnicos/instrumento-de
optico/refractometro-refrigerante.htm
- http://www.pce-iberica.es/medidor-detalles-tecnicos/instrumento-deoptico/brixometro-pce-oe.htm
- http://www.infoagro.com/instrumentos_medida/medidor.asp?
id=2001&_proteina_en_suero__densidad_espec%EDfica_orina___
%EDndice_de_refracci%F3n_-_refractometro_atago_sur-ne_tienda_on_line
GENERALIDADES.
NDICE DE REFRACCIN
material).
n = c0
v


36
En el vaco: n=1
En otro medio: n>1
Informacin general: cuando se analiza la orina es importante que se determinen

a la vez la glucosa (contenido de azcar por medio del ndice de refraccin) y las
protenas, puesto que ambos parmetros influyen en la refraccin en el aparato (la
refraccin depende del nmero de partculas). Para realizar el anlisis se
necesitan unas simples gotas de orina.
Peso especifico de la orina.
El peso especfico de la orina es un modo de medir la concentracin y est
relacionado con el agua. El agua tiene un peso especfico de 1000. Si la orina
tiene el peso especfico del agua quiere decir que es simplemente agua que se ha
separado. Si la orina est ms concentrada tendr un tono ms amarillo, el peso
especfico asciende a valores aproximados de 1.020 - 1.030.
Proteinas en orina.
La concentracin de protenas totales aumenta en la orina con la estasis venosa.
Durante el embarazo se produce una disminucin de la concentracin de
protenas totales. Los valores de referencia oscilan 0-100 mg/da
4. MATERIAL
3 frascos goteros
3 pipetas Pasteur.
Guantes de ltex
Cubre bocas papel absorbente.
1 bolsa de polipapel 15 x 20 cm
Instrumento: Clinical Refractometer.
Marca: Erma Tokyo.
Nmero de serie: 40009.
6. MUESTRA
5 ml de orina
5 ml de suero
8.0 REACTIVOS
37
Etanol 96%
11.-PROCEDIMIENTO
- Se formaran grupos de trabajo de 4 integrantes.
- Se asignara a un grupo de trabajo la exposicin de la prctica, auxilindose
- Se realizara un resumen de la exposicin tomando en cuenta los aspectos
fundamentales.
12.- CALIBRACION
Ajuste de la escala
Calibracin
1. Colocar de 2 a 3 gotas de agua destilada en la superficie del prisma principal
38

2. Cierre el prisma secundario y observa a travs del ocular.
3. Ajusta la escala, a 1.333 ( Brix 0%). Y a cero en las escalas de densidad y %
protenas.
14.- PRECAUCIONES
-

15.- TCNICA.
1.- Calibrar el instrumento con agua destilada.
botn detrs del ocular.
y hacer la lectura correspondiente en cada una de las escalas.
39
5.- Realizar el mismo procedimiento para cada muestra.

16.- OBSERVACIONES
17.- RESULTADOS. Tabulados con valores de referencia
18.- GRAFICAS
Presentar resultados en grafica de barras indicando el valor normal y el de lectura.
19.- CUESTIONARIO
1.- Que representa los valores anormales de la densidad e ndice de refraccin en
la orina
2.- Que representa un valor alto l % de protenas en suero.
20. ANEXOS.
USO Y MANEJO DEL
REVISION No. 1
PAGINA 1POLARIMETRO
FECHA
ULTIMA
AGOSTO 2015
(CALIBRACIN Y
REVISION
ESTANDARIZACIN)
7. PROPOSITO
Aprender a calibrar el Polarmetro y su manejo con la determinacin del % de
sacarosa.
8. ALCANCE
40
9. REFERENCIAS.
www.bellinghamandstanley.com/general.../ADS%20P%20Spanish'02.pdf
pdf.directindustry.es/.../bellingham-stanley/.../25236-597710. GENERALIDADES.
Un rayo de luz lleva asociada una vibracin electromagntica. Esta vibracin tiene
lugar en un plano perpendicular a la lnea de propagacin del rayo. Un rayo de luz
ordinario consiste en un haz de rayos y cada rayo va asociado a una vibracin
electromagntica.
Las vibraciones son siempre
perpendiculares a la lnea de la transmisin. Las vibraciones tienen lugar
simultneamente en todas las direcciones perpendiculares.
La luz polarizada es aquella en la que se ha sustrado uno de los dos
componentes. La vibracin electromagntica resultante queda entonces
completamente sobre un plano. Existen varias formas de polarizar un rayo de luz
en un plano, una de ellas consiste en el empleo de un prisma de Nicol. Este tipo
de prisma divide la luz ordinaria incidente en dos rayos polarizados en planos
perpendiculares, uno de los rayos se desva fuera del prisma, de este modo la luz
que emerge del mismo esta polarizada.
El fsico francs Biot (1774 1862), descubri en los primeros aos del siglo XIX
que cierto nmero de compuestos orgnicos naturales hacan girar el plano de
polarizacin de un rayo incidente de la luz polarizada. Teniendo en cuenta que
esta rotacin ptica ocurre incluso cuando los compuestos estn en fase liquida,
debe tratarse de un fenmeno molecular.
Para comparar cuidadosamente las medidas de polarizacin de una muestra con
las de otra, deben especificarse todas las variables al expresar la medida. Para
sistematizar los resultados ,se define la magnitud llamada rotacin especifica ( )
como la rotacin en grados producida por una solucin que contiene 1g de
sustancia en 1ml, examinada en un tubo de polarmetro que tiene una longitud de
un dm. La rotacin observada puede ser hacia la derecha (positiva) o hacia la
izquierda (negativa), es entonces caracterstica del compuesto examinado si se
mantienen constantes las dems variables.
Rotacin observada
[]=
Longitud del tubo en dm X concentracin
(g/ml)
41
La lnea D del sodio (5893 A que comunica el color amarillo a la llama del sodio) es
la fuente luminosa que se usa ms comnmente y la temperatura de 25 C . El
smbolo [] D representa estas circunstancias.
Conc.g/ml = Rotacin []
(Long. Tubo) ( sacarosa)
El polarmetro es un instrumento mediante el cual podemos determinar el valor de

la desviacin de un enantimero. A partir de un rayo de luz, a travs de un filtro
polarizador obtenemos un rayo de luz polarizada plana, que al pasar por un porta
muestras con un enantimero en disolucin, se desva. Segn la orientacin
relativa entre los ejes de los dos filtros polarizantes, la luz polarizada pasar por el
segundo filtro o no.
El polarmetro sirve para analizar determinadas sustancias orgnicas segn su
actividad ptica. Tambin determina el porcentaje de sacarosa contenida en una
muestra.
Algunas sustancias, como por ejemplo las soluciones de azcar, muestran un
fenmeno que se puede denominar como "cambio de la polarizacin a travs
de la actividad ptica".
Un filtro de polarizacin comn expuesto a la luz se ve simplemente gris. Si se
sostienen dos de dichos filtros uno detrs del otro, entonces existe una posicin
de los filtros para la cual la luz no atraviesa.
Los dos filtros tienen una direccin propia de pasaje de la luz, denominada
polarizacin de la luz. Durante el pasaje de la luz los filtros se encuentran uno a
otro en forma perpendicular.
11. MATERIAL
1 frascos 500ml para residuos
3 vasos de pp de 150
Papel absorbente
Polarmetro
Modelo y Serie:
ADP220 Bellingham & Stanley Hd.
42
No. PE99079
Cdigo: 36-220
13. MUESTRA
Soluciones de sacarosa al 10,20 y 30%
8.0 REACTIVOS
Agua destilada
Sacarosa
Etanol 96%
43
11.-PROCEDIMIENTO
-

fundamentales.
12.- CALIBRACION
Conectar y encender el instrumento esperar 15 minutos de calentamiento
1. Encender el instrumento y esperar a que se estabilice.
2. Colocar el tubo estndar de 2 dm que tiene un valor de 33.5 angulares, si
no da el valor indicado esperar estabilizacin y ver la lectura.
3. Si no da lectura esperada colocar el tubo vaco, esperar la lectura y si no da
cero resetear con el tercer botn y esperar estabilizacin que debe marcar
cero.
4. Tomar la temperatura.
5. Instrumento calibrado para su empleo
No aplica
44
14.- PRECAUCIONES
-
No tallar los prismas ni poner los dedos en los extremos del tubo para
muestra.
Enjuagar con agua destilada.
Secar con alcohol.
Dejar limpio y seco el tubo para la muestra.
Dejar apagado y desconectado el polarmetro.
15.- TCNICA.
1. Con el instrumento ya calibrado asegurarse que no hay tubo demuestra o

placa de control en la cmara de medicin.
2. Llenar el tubo cuidadosamente con la solucin de sacarosa cuidando que
no queden burbujas de aire dentro, limpiar perfectamente y colocar dentro
de la cmara de medicin sobre los rieles. Se notara que el instrumento
empieza a registrar lecturas que fluctan, indicando por el pront ( ) hasta (
) que indica estabilizacin de la lectura.
3. Realizar la lectura de temperatura, grados angulares y correccin a cero.
4. Sacar el tubo del riel, depositar la muestra en su vaso, enjuagar con agua
destilada 3 veces y secar con alcohol para dejar el tubo listo para la
siguiente medicin.
16.- OBSERVACIONES
Realizar clculos empleando formula de % de sacarosa.
18.- GRAFICAS
Presentar resultados en grafica de barras indicando el valor normal y el de lectura.
19.- CUESTIONARIO
45
1.- En que se fundamenta la medicin en el polarmetro.

2.- Qu importancia tiene la temperatura en las determinaciones polarimtricas.
3.- Cual es la funcin del los prisma de Nicol.
4.- Que aplicaciones tiene el polarmetro. ( para que se utiliza)
5.- Que son los grados Pol.
20. ANEXOS.
DETERMINACION DE LA
46
HIDRLISIS DE LA
SACAROSA
(SEGUIMIENTO
POLARIMETRICO)
REVISION No. 1
FECHA ULTIMA
REVISION
PAGINA 1AGOSTO 2015
14. PROPOSITO
Determinar la velocidad de hidrlisis de la sacarosa con la medicin de la
sacarosa empleando el polarmetro.
15. ALCANCE
16. REFERENCIAS.
www.bellinghamandstanley.com/general.../ADS%20P%20Spanish'02.pdf
pdf.directindustry.es/.../bellingham-stanley/.../25236-597717. GENERALIDADES.
Un rayo de luz lleva asociada una vibracin electromagntica. Esta vibracin tiene
lugar en un plano perpendicular a la lnea de propagacin del rayo. Un rayo de luz
ordinario consiste en un haz de rayos y cada rayo va asociado a una vibracin
electromagntica.
Las vibraciones son siempre
perpendiculares a la lnea de la transmisin. Las vibraciones tienen lugar
simultneamente en todas las direcciones perpendiculares.
La luz polarizada es aquella en la que se ha sustrado uno de los dos
componentes. La vibracin electromagntica resultante queda entonces
completamente sobre un plano. Existen varias formas de polarizar un rayo de luz
en un plano, una de ellas consiste en el empleo de un prisma de Nicol. Este tipo
de prisma divide la luz ordinaria incidente en dos rayos polarizados en planos
perpendiculares, uno de los rayos se desva fuera del prisma, de este modo la luz
que emerge del mismo esta polarizada.
El fsico francs Biot (1774 1862), descubri en los primeros aos del siglo XIX
que cierto nmero de compuestos orgnicos naturales hacan girar el plano de
polarizacin de un rayo incidente de la luz polarizada. Teniendo en cuenta que
esta rotacin ptica ocurre incluso cuando los compuestos estn en fase liquida,
debe tratarse de un fenmeno molecular.
Para comparar cuidadosamente las medidas de polarizacin de una muestra con
las de otra, deben especificarse todas las variables al expresar la medida. Para
47
sistematizar los resultados ,se define la magnitud llamada rotacin especifica ( )

como la rotacin en grados producida por una solucin que contiene 1g de
sustancia en 1ml, examinada en un tubo de polarmetro que tiene una longitud de
un dm. La rotacin observada puede ser hacia la derecha (positiva) o hacia la
izquierda (negativa), es entonces caracterstica del compuesto examinado si se
mantienen constantes las dems variables.
Rotacin observada
[]=
Longitud del tubo en dm X concentracin
(g/ml)
La lnea D del sodio (5893 A que comunica el color amarillo a la llama del sodio) es
la fuente luminosa que se usa ms comnmente y la temperatura de 25 C . El
smbolo [] D representa estas circunstancias.
Conc.g/ml = Rotacin []
(Long. Tubo) ( sacarosa)
La hidrlisis de la sacarosa produce una molcula de -glucosa y otra de -2fructosa. A este disacrido tambin se le conoce con el nombre de azcar comn,
se obtiene a partir de la caa de azcar, betabel, sorgo, pia, zanahoria y
remolacha; juega un papel importante en la dieta del hombre ya que contribuye a
mantener los valores normales de glucosa en sangre.
REACCIN DE HIDRLISIS DE LA SACAROSA
18. MATERIAL
1 frascos 500ml para residuos
1 vasos de pp de 500 ml
Papel absorbente
Polarmetro
48
Modelo y Serie:
ADP220 Bellingham & Stanley Hd.
No. PE99079
Cdigo: 36-220
20. MUESTRA
Solucion de sacarosa al 30%
HCl 1N
8.0 REACTIVOS
Agua destilada
Sacarosa
Etanol 96%
Acido clorhdrico conc.
49
11.-PROCEDIMIENTO
-

fundamentales.
12.- CALIBRACION
Conectar y encender el instrumento esperar 15 minutos de calentamiento
6. Encender el instrumento y esperar a que se estabilice.
7. Colocar el tubo estndar de 2 dm que tiene un valor de 33.5 angulares, si
no da el valor indicado esperar estabilizacin y ver la lectura.
8. Si no da lectura esperada colocar el tubo vaco, esperar la lectura y si no da
cero resetear con el tercer botn y esperar estabilizacin que debe marcar
cero.
9. Tomar la temperatura.
10. Instrumento calibrado para su empleo

No aplica
14.- PRECAUCIONES
50
No tallar los prismas ni poner los dedos en los extremos del tubo para
muestra.
Enjuagar con agua destilada.
Secar con alcohol.
Dejar limpio y seco el tubo para la muestra.
Dejar apagado y desconectado el polarmetro.
15.- TCNICA.
5. Con el instrumento ya calibrado asegurarse que no hay tubo demuestra o
placa de control en la cmara de medicin.
6. Llenar el tubo cuidadosamente con la solucin de sacarosa cuidando que
no queden burbujas de aire dentro, limpiar perfectamente y colocar dentro
de la cmara de medicin sobre los rieles. Se notara que el instrumento
empieza a registrar lecturas que fluctan, indicando por el pront ( ) hasta (
) que indica estabilizacin de la lectura.
7. Realizar la lectura de temperatura, grados angulares y correccin a cero.
8. Sacar el tubo del riel, depositar la muestra en su vaso, enjuagar con agua
destilada 3 veces y secar con alcohol para dejar el tubo listo para la
siguiente medicin.
Nota: De la misma forma llenar el tubo con la sacarosa que se esta invirtiendo y
medir cada 15 minutos.
16.- OBSERVACIONES
Realizar clculos empleando formula de % de sacarosa, % sacarosa invertida,
velocidad de hidrolisis.
1
1
ln
T

f
f
% sac
obs
x 100
2 66.5

51
N
o
Hora
Tiempo Temperatura
Minutos
C
(obs)
0
a
%
Sacaros
a
%
Hidrlisi
s
K
Vel de
reacci
n
0
1
2
3
4
5
18.- GRAFICAS
- en funcin de la concentracin.
- en funcin del tiempo.
- tiempo vs concentracin de sacarosa.
- tiempo vs sacarosa hidrolizada
Presentar resultados en grafica (histograma).
19.- CUESTIONARIO
1.-Mencione las caractersticas de la luz polarizada
2.- Defina que es Rotacin ptica
3.- Defina que son azcares invertidos
4.- Qu aplicacin prctica tiene la hidrlisis de la sacarosa
20. ANEXOS.
52
USO Y MANEJO DEL
REVISION No. 1
PAGINA 1POTENCIOMETRO
FECHA ULTIMA
AGOSTO 2015
REVISION
1. PROPOSITO
El alumno aprender y comprender la calibracin, uso y manejo del
potencimetro analgico y digital.
2. ALCANCE
3.- REFERENCIAS.
- Luna Rangel. Fundamentos de Qumica Analtica. Edit. LIMUSA.
- Teijn-Garca-Jimnez-Guerrero La qumica en problemas. Edit.Alfaomega.
4. GENERALIDADES.
El pH se define como el inverso de la concentracin de los iones hidronio
pH = _ 1__
.
H+
Los mtodos electromtricos para la determinacin del pH, se hace en un equipo

llamado Potencimetro tambin conocido como pHmetro, el cual registra una
lectura anloga del pH mediante una escala y est provisto de un electrodo de
referencia.
La medicin del pH se fundamenta en la diferencia de potencial elctrico que
existe entre dos electrodos un electrodo de referencia y el de medicin,
sumergidos en una solucin que contenga iones hidronio y depende de la
concentracin o actividad de estos.
El electrodo de referencia es un electrodo que tiene un potencial de equilibrio
estable y conocido. Es utilizado para medir el potencial contra otros electrodos en
una celda electroqumica.
El potencial de unin lquida en estos
electrodos es minimizado por el uso de altas concentraciones de cloruro de
53
potasio como solucin de llenado, debido a que la velocidad de difusin de estos

iones son similares.
5. MATERIAL
5 vasos de pp de 100 ml.
Piseta de 500 ml con agua destilada.
A) Potencimetro analgico
(Medidor de pH) Orion Research

Modelo: 301
No. de Serie: 201892
B) Potencimetro digital
Potencimetro digital.
7. MUESTRA
- Liquido para vidrios.
-Bebidas alcohlicas.
- Refrescos.
- Jabones lquidos.
- Productos farmacuticos.
8.0 REACTIVOS
-
Buffer pH 7
Buffer pH10
9.0 ESQUEMA DEL INSTRUMENTO.
54
Potencimetro analgico
Potencimetro digital
11.-PROCEDIMIENTO
-

fundamentales.
12.- CALIBRACION.
B) Potencimetro digital.

No aplica
14.- PRECAUCIONES
- Leer el instructivo antes de utilizar el potencimetro.
- No tallar los electrodos.
- Dejar los electrodos sumergidos en buffer oH 7.
- Calibrar antes de utilizar el potencimetro.
55
15.- TCNICA.
A.- Potencimetro analgico.
B.- Potencimetro digital.
16.- OBSERVACIONES
17.- RESULTADOS.
En forma de tabla con resultados de referencias.
18.- GRAFICAS
De barras solo para apreciar diferencias de medicin y referencias.
19.- CUESTIONARIO
1.- Defina acido y base segn Lewis, Arrhenius, Bronsted-Lowry.
2.- Defina pH, pOH, Producto inico del agua.
3.- Cuantos tipos de electrodos hay, cual es su uso. Esquematice.
20. ANEXOS.
Esquematice los tipos de electrodos.
56
DETERMINACION
REVISION No. 1
PAGINA 1POTENCIOMETRICA DE
FECHA
ULTIMA
AGOSTO 2015
UN ACIDO FUERTE CON
REVISION
BASE FUERTE
2. PROPOSITO
Aplicacin del potencimetro analgico y digital en una titulacin potenciomtrica
entre un cido fuerte y base fuerte.
2. ALCANCE
3.- REFERENCIAS.
4. GENERALIDADES.
El pH se define como el inverso de la concentracin de los iones hidronio pH =
_ 1__
H+
referencia.
57

5. MATERIAL
2 vasos de pp de 250 ml.
1 bureta de 25 ml
1 pipeta volumtrica de 10 ml.
1Soporte universal
1 pinzas para bureta.

Modelo: 301
7. MUESTRA
No aplica
8.0 REACTIVOS
-
Buffer pH 7
Buffer pH10
Hidrxido de sodio 0.1 N
Acido clorhdrico 0.1 N
58
11.-PROCEDIMIENTO
-

fundamentales.
12.- CALIBRACION.
A) Potencimetro analgico.

No aplica
14.- PRECAUCIONES
- No tallar los electrodos.
- Dejar los electrodos sumergidos en buffer pH 7.
- Calibrar antes de utilizar el potencimetro.
59
15.- TCNICA.
16.- OBSERVACIONES
17.- RESULTADOS.
En forma de tabla con resultados de referencias.
18.- GRAFICAS
Graficar ml agregados de Hidrxido de sodio contra pH. Tanto en pH medido, y pH
calculado.
19.- CUESTIONARIO
1.- Explique para que se utilizan las curvas de neutralizacin.
2.- Defina acido fuerte y base fuerte.
3.- Cual es el punto de equivalencia en una titulacin entre un acido fuerte y base
fuerte.
4.- Cuales son los indicadores empleados en la titulacin mencionada.
20. ANEXOS.
Esquematice curva tpica de titulacin entre acido fuerte-base fuerte.
60
DETERMINACION
REVISION No. 1
PAGINA 1POTENCIOMETRICA DE
FECHA
ULTIMA
AGOSTO 2015
UN ACIDO DEBILCON
REVISION
BASE FUERTE
1. PROPOSITO
El alumno aprender y comprender la calibracin, uso y manejo del
potencimetro analgico y digital.
2. ALCANCE
3.- REFERENCIAS.
4. GENERALIDADES.
El pH se define como el inverso de la concentracin de los iones hidronio pH =
_ 1__
H+
referencia.
61

5. MATERIAL
2 vasos de pp de 250ml.
1 bureta de 25 ml
1 soporte universal
1 pinzas para bureta.

Modelo: 301
7. MUESTRA
-
No aplica
8.0 REACTIVOS
-
Buffer pH 7
Buffer pH10
Acido Actico 0.1 N
Hidrxido de sodio.
62
11.-PROCEDIMIENTO
-

fundamentales.
12.- CALIBRACION.
A) Potencimetro analgico.

No aplica
14.- PRECAUCIONES
63
No tallar los electrodos.

Dejar los electrodos sumergidos en buffer oH 7.
Calibrar antes de utilizar el potencimetro.
15.- TCNICA.
16.- OBSERVACIONES
17.- RESULTADOS.
En forma de tabla con resultados de referencias GRAFICAS
18.- GRAFICAS.
Graficar ml agregados de Hidrxido de sodio contra pH. Tanto en pH medido, y pH
calculado.
19.- CUESTIONARIO
1.- Defina acido dbil.
2.- Cual es el punto de equivalencia entre un cido dbil y base fuerte.
3.- Cuales son los indicadores empleados en una determinacin de neutralizacin
entre un cido dbil y base fuerte.
20. ANEXOS.
64
Esquematice una curva tpica de neutralizacin entre un cido dbil cido actico
e Hidrxido de sodio.
DETERMINACION
REVISION No. 1
PAGINA 1COLOROMETRICA DE
FECHA
ULTIMA
AGOSTO 2015
COBRE
REVISION
(VISUAL)
1. PROPOSITO
.
El alumno aprender a manejar los clculos necesarios para la preparacin de
soluciones estndar, concentracin de los tubos en la serie tipo, diluciones de
problema y clculo de la concentracin real del problema. Obteniendo un criterio
para aplicar los mtodos espectrofotomtricos.
2. ALCANCE
3. REFERENCIAS.
Skoog D.A. Anlisis Instrumental. Editorial Interamericana.
http://www.basculasbalanzas.com/instrumentos-de-medicion/colorimetria.html
4. GENERALIDADES.
La colorimetra es una importante ciencia cuyo objetivo primordial es el de
estudiar en profundidad la medida de los colores. Se trata de una tcnica de
carcter instrumental que tiene como objetivo final la determinacin de la
absorcin de la luz visible a partir de una muestra.
Esta muestra, a su vez, puede ser una sustancia sumamente pura o bien una
mezcla o una disolucin especfica. De esta forma, la colorimetra desarrolla
continuamente una serie de mtodos, con el objetivo de realizar una
cuantificacin de los colores, siempre teniendo en la meta a la obtencin de
todos los valores numricos con los que cuentan los colores. Para realizar
todo lo que hemos mencionado, esta la colorimetra se basa en el empleo de
65
un instrumento, que se encuentra constituido por una serie de elementos: tal

es el caso de la fuente de radiacin (se trata de una luz blanca); de un sistema
dispersivo como lo son las rendijas de entrada y salida, junto con la red de
difraccin; del detector que es una especie de fototubo encargado de
transformar la seal luminosa en una seal elctrica; y, por el ltimo, del
sistema que se ocupa de las medidas de la absorcin, una vez que la misma
haya sido previamente amplificada, es decir, se trata de un conversor
analgico o digital.
Mtodo de la colorimetria
Para realizar el procedimiento de la medida del color, es decir, la colorimetra, por
lo general es habitual que se produzca una fuerte necesidad de establecer una
determinacin (casi siempre estndar) del color, para luego poder efectuar
apropiadamente una clasificacin y reproduccin posterior del mismo. Es decir,
este proceso que se emplea en la medida de los colores consiste en agregar una
determinada respuesta de ciertos estmulos de dichos colores junto con la
normalizacin en la llamada curva espectral de la respuesta del fotorreceptor, que
a su vez es sensible a las manifestaciones del color. Para tener un marco de
referencia, lo que se emplea es una curva de carcter espectral, pero que siempre
haya sido codificada anteriormente por la Comisin Internacional de Iluminacin. A
esa curva se la conoce con el nombre de Funcin Colorimtrica.
El color es una especie de caracterstica de gran subjetividad, debido a que existe
tanto en el ojo como en el cerebro del observador. Por lo tanto, no se trata de un
rasgo propio que posee un objeto, de ah que no podamos considerar al color
como una caracterstica esencialmente objetiva. De esta manera, todos los
fotorreceptores que intervienen en el mtodo o sistema de medicin son los conos
de la retina del ojo humano, razn por la cual no habr un solo tipo sino que los
hay de distintas clases y, por ende, con dismiles sensibilidades a la hora de tener
en cuenta todo el espectro luminoso que se le presenta a la visin humana. La
colorimetra se constituye, de esta forma, en una ciencia de rasgos sumamente
expansivos, es decir, la industria cosmtica, por ejemplo, estudia continuamente
distintas sombras, polvos y colores para el cabello y todo eso es posible gracias a
la colorimetra. Otra actividad en donde se la emplea es en el medio grfico, en
especial cuando se suscitan problemas en la reproduccin de los colores y en
todos los anlisis y documentaciones de aquellas superficies que datan desde
muchos aos atrs, como es el caso de los policromados y de los cuadros
tambin.
66
Mediante el empleo de las tcnicas para la realizacin de un anlisis colorimtrico

se pondr arriba a un mtodo qumico de los materiales superficiales que son el
objeto de los distintos anlisis y cuyo ejemplo radical es el anlisis de la respuesta
espectral. En cuanto al origen de la colorimetra, cabe aclararse que Hermann
Grassmann, un matemtico de Alemania, fue el autor de una serie de leyes que
mencionaban las vicisitudes de las mezclas aditivas de los colores. Es decir,
Grassmann enunci a travs de esas leyes que todos los colores pueden
efectivamente ser expresados como si se tratara de una suma de los tres colores
primarios, o sea, de los colores que no pueden ser de ninguna manera obtenidos
mediante la mezcla de colores x. Cuando se aplica la Ley de Grassmann, lo que
se obtiene es una ecuacin unitaria del color que, cuando se la representa, da
como resultado una forma ms que similar a la de un tringulo. Dicho tringulo,
con el tiempo, fue adquiriendo importante trascendencia y actualmente se lo
conoce con el nombre de Tringulo Internacional del Color.
5. MATERIAL
12 tubos de ensaye de 1.5 X 15 cm
Gradilla para tubos
Bureta de 25 ml
Matraz aforado de 500 ml
Vaso de pp de 250 ml
Balanza analtica
7. MUESTRA
Problema de CuSO4. 5H2O
8.0 REACTIVOS
CuSO4. 5H2O
KNO3 al 10%
Ferricianuro de Potasio al 10%
Especificar trazabilidad de la balanza analtica.
No aplica.
11.-PROCEDIMIENTO
67

fundamentales.
12.- CALIBRACION
No aplica
No aplica
14.- PRECAUCIONES
Realizar las observaciones con una buena fuente de luz natural o artificial.
Emplear material limpio y seco.
Marcar los tubos en la parte superior con marcador permanente fino.
15.- TCNICA.
Procedimiento experimental.
TABLA DE DILUCIONES
TUB
ML DE
ML DE
O
SOLUCION
AGUA
ESTANDAR
1
1
9
2
2
8
3
3
7
4
4
6
5
5
5
VOLUMEN
TOTAL
ML
10
10
10
10
10
CONCENTRACIO
N
PPM
68
6
6
4
10
7
7
3
10
8
8
2
10
9
9
1
10
10
10
0
10
1.- En balanza analtica pesar la cantidad de CuSO 4.5H2O necesaria para
preparar 500 ml de solucin tipo de una concentracin de 50 ppm.
2.- Disolver el CuSO4.5H2O en 250 ml de agua destilada en un vaso de pp y
pasar cuantitativamente a un matraz aforado de 500 ml y aforar con agua
destilada.
3.- llenar una bureta con solucin estndar o tipo y otra con agua destilada.
4.-Secar perfectamente 12 tubos con etanol marcando o etiquetando del 1-10
y guardar 2 para el problema.
5.- Adicionar a cada tubo medido con bureta la solucin estndar y
complementar a un volumen de 10 ml con agua destilada medida tambin con
bureta: 1 ml de solucin estndar + 9 ml de agua y asi hasta el tubo 10.
6.- tomar como referencia la tabla de diluciones.
7.-PARA DECIDIR SI EL PROBLEMA SE DEBE DILUIR: Depositar en un tubo
de ensaye 2 ml de problema y en otro tubo 2 ml de solucin estndar,
adicionar a los dos tubos 2 gotas de KNo 3 al 10 % y 2 gotas a cada tubo de
Ferrocianuro de potasio al 10 %, homogenizar y esperar 3-5 minutos el
desarrollo de color.
8.- Si el color caf rojizo de su problema es ms intenso que el de la solucin
estndar, es necesario diluir el problema.
9.- Para diluir el problema medir una alcuota de 10 a 25 ml y aforar a 100 ml.
10.- Ya teniendo el problema diluido, medir una alcuota de 10 ml en un tubo
marcado como problema y agregar al tubo del problema y a los tubos de la
serie tipo en forma simultnea 2 gotas de KNo 3 al 10 % y 2 gotas a cada tubo
de Ferrocianuro de potasio al 10 %, homogenizar y esperar 3-5 minutos el
11.- Comparar el color del problema contra los tubos de la serie tipo.
12.- Si el color se encuentra entre dos tubos de la serie es necesario realizar
otra dilucin.
16.- OBSERVACIONES
Realizar clculos empleando las formulas siguientes.
No de diluciones = Volumen total
alcuota
69
C1V1 =C2V2 C2 = C1V1

ML
V2
DONDE:
C1 = 50 PPM
V1= 1ML
V2= 10
CALCULAR LA CONCENTRACION PARA LOS 10 TUBOS EL CLCULO

EJEMPLIFICADO ES DEL PRIMER TUBO
CALCULAR QUE CANTIDAD DE SULFATO DE COBRE PENTAHIDRATADO
QUE SE DEBE PESAR PARA TENER DE 500 ML DE UNA SOLUCION DE 50
PPM DE COBRE.
17.- RESULTADOS.
DEL PROBLEMA
70
18.- GRAFICAS
No aplica
19.- CUESTIONARIO
1.-cuales son las ventajas y desventajas de las determinaciones colorimtricas en
forma visual.
20. ANEXOS.
ANALISIS INSTRUMENTAL: PROC: DET
DETERMINACION
013
REVISION
No.
1
PAGINA 1ESPECTROFOTOMETRICA
FECHA ULTIMA
AGOSTO 2015
DE COBRE
REVISION
(VISUAL)
1. PROPOSITO
.
El alumno aprender a manejar los clculos necesarios para la preparacin de
soluciones estndar, concentracin de los tubos en la serie tipo, diluciones de
problema y clculo de la concentracin real del problema. Obteniendo un criterio
para aplicar los mtodos espectrofotomtricos en la resolucin de problemas.
2. ALCANCE
3. REFERENCIAS.
4. GENERALIDADES.
Los mtodos espectroscpicos se anlisis se basan en la medida de la
radiacin electromagntica, emitida o absorbida por la materia: Los mtodos d
emisin utilizan la radiacin emitida cuando un analito es excitado por energa
trmica, elctrica o energa radiante.
Los mtodos de absorcin por lo contrario estn basados en la disminucin de
la potencia o atenuacin de la radiacin electromagntica como consecuencia de
71
la absorcin que se produce en su interaccin con el analito.
Las ventajas de la espectrofotometra sobre otros mtodos analticos de

laboratorio son varias: es rpida, precisa, verstil, fcil de usar y eficiente en
costo. Los espectrofotmetros se han mejorado en precisin y versatilidad en los
ltimos aos con los avances de tecnologa, y hoy se consideran indispensables
en un laboratorio de qumica analtica y como una de las mejores tcnicas
instrumentales para la adquisicin de informacin cualitativa y cuantitativa
Los mtodos espectroscpicos se clasifican segn la regin del espectro
electromagntico que est implicada; siendo las ms importantes las regiones de
los rayos X, ultravioleta, visible, infrarrojo, microondas y radiofrecuencia.
5. MATERIAL
Gradilla para tubos
Bureta de 25 ml
Matraz aforado de 500 ml
ESPECTROFOTOMETRO
TRAZABILIDAD:
7. MUESTRA
Problema de CuSO4. 5H2O
8.0 REACTIVOS
CuSO4. 5H2O
KNO3 al 10%
Ferricianuro de Potasio al 10%
72
11.-PROCEDIMIENTO
-

Se asignara a un grupo de trabajo la exposicin de la prctica,
auxilindose de cualquier material didctico.
fundamentales.
12.- CALIBRACION
-
Calibrar con agua destilada a 0 absorbancia y 100% trasmitancia

Calibrar con solucin estndar segn indicaciones.
73

-
Indicar escala de longitud de Onda del espectrofotmetro.
14.- PRECAUCIONES
- Calentar el instrumento conectado al regulador de 15-20 minutos antes de
realizar lecturas.
- -No tocar con los dedos la parte de lectura de la cubeta.
- La cubeta no tallarla, ni rayar.
- La muestra debe ser colocada hasta el aforo indicado en la cubeta.
- Respetar los tiempos de desarrollo de color.
15.- TCNICA.
Procedimiento experimental.
TABLA DE DILUCIONES
TUBO
ML DE
ML DE
SOLUCION
AGUA
ESTANDAR
1
1
9
2
2
8
3
3
7
4
4
6
5
5
5
6
6
4
VOLUMEN
TOTAL
ML
10
10
10
10
10
10
CONCENTRACION
PPM
74
7
7
3
10
8
8
2
10
9
9
1
10
10
10
0
10
1.- En balanza analtica pesar la cantidad de CuSO 4.5H2O necesaria para
preparar 500 ml de solucin tipo de una concentracin de 50 ppm.
2.- Disolver el CuSO 4.5H2O en 250 ml de agua destilada en un vaso de pp y
pasar cuantitativamente a un matraz aforado de 500 ml y aforar con agua
destilada.
3.- llenar una bureta con solucin estndar o tipo y otra con agua destilada.
4.-Secar perfectamente 12 tubos con etanol marcando o etiquetando del 1-10
y guardar 2 para el problema.
5.- Adicionar a cada tubo medido con bureta la solucin estndar y
complementar a un volumen de 10 ml con agua destilada medida tambin
con bureta: 1 ml de solucin estndar + 9 ml de agua y asi hasta el tubo 10.
6.- tomar como referencia la tabla de diluciones.
7.-PARA DECIDIR SI EL PROBLEMA SE DEBE DILUIR: Depositar en un
tubo de ensaye 2 ml de problema y en otro tubo 2 ml de solucin estndar,
adicionar a los dos tubos 2 gotas de Kno 3 al 10 % y 2 gotas a cada tubo de
Ferrocianuro de potasio al 10 %, homogenizar y esperar 3-5 minutos el
8.- Si el color caf rojizo de su problema es ms intenso que el de la solucin
estndar, es necesario diluir el problema.
9.- Para diluir el problema medir una alcuota de 10 a 25 ml y aforar a 100 ml.
10.- Ya teniendo el problema diluido, medir una alcuota de 10 ml en un tubo
marcado como problema y agregar al tubo del problema y a los tubos de la
serie tipo en forma simultnea 2 gotas de Kno 3 al 10 % y 2 gotas a cada tubo
de Ferrocianuro de potasio al 10 %, homogenizar y esperar 1-2 minutos el
11.- Comparar la lectura de absorbancia y transmitancia del problema contra
los tubos de la serie tipo, realizando la medicin en espectrofotmetro
respetando los tiempos de desarrollo de color. A 530 nm.
16.- OBSERVACIONES
No de diluciones = Volumen total
alcuota
C1V1 =C2V2 C2 = C1V1
DONDE:
C1 = 50 PPM
V1= 1ML
V2= 10
75
ML
V2
CALCULAR LA CONCENTRACION PARA LOS 10 TUBOS EL CLCULO
EJEMPLIFICADO ES DEL PRIMER TUBO
17.- RESULTADOS.
De la concentracin del problema en ppm.
18.- GRAFICAS
Graficar
19.- CUESTIONARIO
1.- Mencione cuales son las propiedades de la radiacin electromagntica.
2.- Cuales son las propiedades y parmetros ondulatorios de la radiacin
electromagntica.
3.- Cuales son las propiedades corpusculares de la radiacin electromagntica.
4.- Que es el espectro electromagntico.
5.- Defina espectro de emisin.
6.- Que es un espectro de banda y uno continuo.
7.- Enuncie la ley de Beer y cules son sus limitaciones.
20. ANEXOS.
1.- Ilustre el espectro electromagntico e indique las regiones analticamente
tiles.
76
REVISION No. 1
PAGINA 1DETERMINACION
AGOSTO 2015
DE LA CURVA DE MAXIMA FECHA ULTIMA
REVISION
ABSORCIN DE UN
COMPUESTO COLORIDO.
PROPOSITO
El alumno obtendr la curva mxima de absorcin de un compuesto colorido.
Obteniendo un criterio para poder seleccionar la longitud de onda apropiada para
realizar las determinaciones espectrofotomtricas.
8. ALCANCE
77
9. REFERENCIAS.
http://www.slideshare.net/asaor/espectrofotometria-presentation
10. GENERALIDADES.
Los mtodos espectroscpicos se anlisis se basan en la medida de la
radiacin electromagntica, emitida o absorbida por la materia: Los mtodos d
emisin utilizan la radiacin emitida cuando un analito es excitado por energa
trmica, elctrica o energa radiante.
Los mtodos de absorcin por lo contrario estn basados en la disminucin de
la potencia o atenuacin de la radiacin electromagntica como consecuencia de
la absorcin que se produce en su interaccin con el analito.
Las ventajas de la espectrofotometra sobre otros mtodos analticos de

laboratorio son varias: es rpida, precisa, verstil, fcil de usar y eficiente en costo.
Los espectrofotmetros se han mejorado en precisin y versatilidad en los ltimos
aos con los avances de tecnologa, y hoy se consideran indispensables en un
laboratorio de qumica analtica y como una de las mejores tcnicas
instrumentales para la adquisicin de informacin cualitativa y cuantitativa
Los mtodos espectroscpicos se clasifican segn la regin del espectro
electromagntico que est implicada; siendo las ms importantes las regiones de
los rayos X, ultravioleta, visible, infrarrojo, microondas y radiofrecuencia.
11. MATERIAL
Gradilla para tubos
ESPECTROFOTOMETRO
TRAZABILIDAD:
78
13. MUESTRA
KMnO4 a 20 ppm.
Cu SO4 . 5H2O 1% de Cu+2
15.0 REACTIVOS
No aplica
79
11.-PROCEDIMIENTO
-

fundamentales.
12.- CALIBRACION
-
Calibrar con agua destilada a 0 absorbancia y 100% trasmitancia

Calibrar con solucin estndar segn indicaciones.

-
Indicar escala de longitud de Onda del espectrofotmetro.
14.- PRECAUCIONES
- Calentar el instrumento conectado al regulador de 15-20 minutos antes de
realizar lecturas.
- -No tocar con los dedos la parte de lectura de la cubeta.
- La cubeta no tallarla, ni rayar.
- La muestra debe ser colocada hasta el aforo indicado en la cubeta.
- Respetar los tiempos de desarrollo de color.
15.- TCNICA.
1.- Realizar el clculo de preparacin de 250 ml de KMnO 4 a 20 ppm. Y 1% de
Cu+2 de CuSO4. 5H2O.
80
2.- Seguir el siguiente procedimiento.

-
Solicitar al profesor asigne la solucin problema a las cuales se les realizar

el estudio.
Registrar las caractersticas de la muestra.
Seleccionar los rangos preliminares dentro de los cuales se aplicara el
estudio.
Empleando blanco como referencia medir las absorbancias (A) de las
soluciones tomando las lecturas cada 20 nm excepto en la regin de
mxima absorbancia donde se utilizaran intervalos de 5-2 nm dependiendo
del instrumento.
Construir grfica.
16.- OBSERVACIONES
-
1 ppm = 1 mg en 1000 ml de solucin.
17.- RESULTADOS.
De la concentracin del problema en ppm. En tabla.
Longitud
de Absorbancia
onda nm. ()
Longitud
de Absorbancia
onda nm. ()
81
18.- GRAFICAS
Graficar
19.- CUESTIONARIO
1.- Para qu se realiza la curva de mxima absorcin?.
2.- Cual es la funcin del blanco?.
3.- Defina color?.
20. ANEXOS.
No aplica
DETERMINACION
015
REVISION No. 1
PAGINA 1ESPECTROFOTOMETRICA
FECHA ULTIMA
AGOSTO 2015
ULTRAVIOLETA-VISIBLE
REVISION
(VISUAL)
14. PROPOSITO
.
El alumno aprender a manejar el espectrofotmetro ultravioleta visible por
82
medio del anlisis cuantitativo de un compuesto orgnico ACIDO ACETIL

SALICILICO.
Obteniendo
un
criterio
para
aplicar
los
mtodos
espectrofotomtricos en la resolucin de problemas.
15. ALCANCE
16. REFERENCIAS.
http://www.espectrometria.com/espectrometra_ultravioleta-visible
Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos. Octava edicin. Volumen
II. Mxico, 2004. Pgs. 1371-1372
Lozano. MC.(2012). Manual de tecnologa farmacutica. Barcelona,
Espaa: Elsevier.
Barb. C. (2001) Preparados farmacuticos y para farmacuticos Bases
tecnolgicas y documentos. (116-119). Barcelona Espaa: Masson
SOP CC 010 Valoracin de Acido Acetil Saliclico. Dra Rocio Bulas
Mendoza M.C Julia Briones Macas. Manual de Tecnologa
Farmacutica.
17. GENERALIDADES.
La espectrometra ultravioleta-visible o espectrofotometra UV-Vis implica la

espectroscopia de fotones en la regin de radiacin ultravioleta-visible. Utiliza la
luz en los rangos visible y adyacentes (el ultravioleta (UV) cercano y el infrarrojo
(IR)
cercano.
En esta regin del espectro electromagntico, las molculas se someten a
transiciones
electrnicas.
Esta tcnica es complementaria de la espectrometra de fluorescencia, que trata
con transiciones desde el estado excitado al estado basal, mientras que la
espectrometra de absorcin mide transiciones desde el estado basal al estado
excitado.
La espectrometra UV/Vis se utiliza habitualmente en la determinacin

cuantitativa de soluciones de iones metlicos de transicin y compuestos
orgnicos muy conjugados.
Las soluciones de iones metlicos de transicin:
pueden ser coloreadas (es

83
decir, absorben la luz visible) debido a que los electrones en los tomos de metal
se pueden excitar desde un estado electrnico a otro. El color de las soluciones
de iones metlicos se ve muy afectado por la presencia de otras especies, como
algunos aniones o ligandos. Por ejemplo, el color de una solucin diluida de
sulfato de cobre es muy azul; agregando amonaco se intensifica el color y
cambia
la
longitud
de
onda
de
absorcin
mxima.
Los compuestos orgnicos: especialmente aquellos con un alto grado de
conjugacin, tambin absorben luz en las regiones del espectro
electromagntico visible o ultravioleta. Los disolventes para estas
determinaciones son a menudo el agua para los compuestos solubles en agua, o
el etanol para compuestos orgnicos solubles. Los disolventes orgnicos pueden
tener una significativa absorcin de UV, por lo que no todos los disolventes son
adecuados para su uso en espectrometra UV. El etanol absorbe muy dbilmente
en la mayora de longitudes de onda. La polaridad y el pH del disolvente pueden
afectar la absorcin del espectro de un compuesto orgnico. La tirosina, por
ejemplo, aumenta su mximo de absorcin y su coeficiente de extincin molar
cuando aumenta el pH de 6 a 13, o cuando disminuye la polaridad de los
disolventes.
Aunque los complejos de transferencia de carga tambin dan lugar a colores,
stos son a menudo demasiado intensos para ser usados en mediciones
cuantitativas.
La ley de Beer-Lambert establece que la absorbancia de una solucin es
directamente proporcional a la concentracin de la solucin. Por tanto, la
espectrometra UV/VIS puede usarse para determinar la concentracin de una
solucin. Es necesario saber con qu rapidez cambia la absorbancia con la
concentracin. Esto puede ser obtenido a partir de referencias (las tablas de
coeficientes de extincin molar) o, con ms exactitud, determinndolo a partir de
una
curva
de
calibracin.
El espectrofotmetro UV/Vis puede utilizarse como detector para la
Cromatografa Lquida de Alta Resolucin (CLAR). La presencia de un analito da
una respuesta que puede ser proporcional a la concentracin. Para resultados
precisos, la respuesta del instrumento al analito debe compararse con la
respuesta a un estndar, lo que es muy similar al uso de curvas de calibracin.
La respuesta (por ejemplo, el pico de altura) para una concentracin particular se
conoce como factor de respuesta.
LEY DE BEER-LAMBERT
84
La espectrometra UV-Vis se utiliza con mayor frecuencia en forma cuantitativa

para determinar las concentraciones de especies absorbentes en solucin,
usando la Ley de Beer-Lambert:
donde A es la absorbancia medida, I0 es la intensidad de la luz incidente a una

determinada longitud de onda, I es la intensidad de transmisin, L la longitud de
ruta a travs de la muestra, y c la concentracin de las especies absorbentes.
Para cada especie y longitud de onda, es una constante conocida como
absortividad molar o coeficiente de extincin. Esta constante es una propiedad
fundamental molecular en un solvente dado, a una temperatura y presin
particular, y tiene como unidades 1/M * cm o, a menudo, U/M * cm.
La absorbancia y extincin a veces son definidas en trminos de logaritmo
natural, en lugar de base 10. La ley de Beer-Lambert es til para la
caracterizacin de muchos compuestos, pero no sirve como relacin universal
para la concentracin y absorcin de todas las sustancias. En molculas
complejas de gran tamao, como los tintes orgnicos (Xylenol Naranja o Rojo
Neutro, por ejemplo), a veces se encuentra una relacin polinmica de segundo
orden entre la absorcin y la concentracin.
ESPECTROFOTMETRO ULTRAVIOLETA-VISIBLE
El instrumento utilizado en la espectrometra ultravioleta-visible se llama
espectrofotmetro UV-Vis. Mide la intensidad de luz que pasa a travs de una
muestra (I), y la compara con la intensidad de luz antes de pasar a travs de la
muestra (Io). La relacin I / Io se llama transmitancia, y se expresa habitualmente
como un porcentaje (%T). La absorbancia (A) se basa en la transmisin:
A = - log (%T)
Las partes bsicas de un espectrofotmetro son una fuente de luz (a menudo

una bombilla incandescente para las longitudes de onda visibles, o una lmpara
de arco de deuterio en el ultravioleta), un soporte para la muestra, una rejilla de
difraccin o monocromador para separar las diferentes longitudes de onda de la
luz, y un detector. El detector suele ser un fotodiodo o un CCD. Los fotodiodos se
85
usan con monochomadores, que filtran la luz de modo que una sola longitud de
onda alcanza el detector. Las rejillas de difraccin se utilizan con CCDs, que
recogen la luz de diferentes longitudes de onda en pxeles.
Un espectrofotmetro puede ser nico o de doble haz. En un instrumento de un
solo haz (como el Spectronic 20), toda la luz pasa a travs de la clula muestra.
La Io debe medirse retirando la muestra. Este fue el primer diseo, y todava est
en uso en los laboratorios de enseanza en qumica analtica instrumental y
laboratorios
industriales.
En un instrumento de doble haz, la luz se divide en dos haces antes de llegar a la
muestra. Un haz se utiliza como referencia, y el otro haz de luz pasa a travs de
la muestra. Algunos instrumentos de doble haz tienen dos detectores
(fotodiodos), y el haz de referencia y el de la muestra se miden al mismo tiempo.
En otros instrumentos, los dos haces pasan a travs de un bloqueador que
impide el paso de un haz. El detector alterna entre la medida del haz de muestra
y
la
del
haz
de
referencia.
Las muestras para espectrofotometra UV-Vis suelen ser lquidas, aunque la
absorbancia de los gases e incluso de los slidos tambin puede medirse. Las
muestras suelen ser colocadas en una clula transparente, conocida como
cubeta. Las cubetas suelen ser rectangulares, con una anchura interior de 1 cm.
Esta anchura se convierte en la longitud de ruta, L, en la Ley de Beer-Lambert.
Tambin se pueden usar tubos de ensayo como cubetas en algunos
instrumentos. Las mejores cubetas estn hechas con cuarzo de alta calidad,
aunque son comunes las de vidrio o plstico. El cristal y la mayora de los
plsticos absorben en el UV, lo que limita su utilidad para longitudes de onda
visibles.
ESPECTRO ULTRAVIOLETA-VISIBLE
Un espectro ultravioleta-visible es esencialmente un grfico de absorbancia de
luz frente a una longitud de onda en el rango del ultravioleta o la luz visible. Este
espectro puede ser producido directamente con los espectrofotmetros ms
sofisticados, o bien pueden registrarse los datos de una sola longitud de onda
con los instrumentos ms simples. La longitud de onda se representa con el
smbolo . Del mismo modo, para una determinada sustancia, puede hacerse un
grfico estndar del coeficiente de extincin () frente a la longitud de onda ().
Este grfico estndar sera efectivamente "la concentracin corregida" y, por
tanto, independiente de la concentracin. Para una sustancia determinada, la
longitud de onda en la cual se produce el mximo de absorbancia en el espectro
86
se
llama
max,
se
pronuncia
"lambda-max".
Las reglas de Woodward-Fieser son un conjunto de observaciones empricas que

pueden utilizarse para predecir max, la longitud de onda de la absorcin UVVis, para compuestos orgnicos conjugados como dienos y cetonas.
Las longitudes de onda de los picos de absorcin pueden correlacionarse con los
tipos de enlace en una determinada molcula, y son valiosos para determinar los
grupos funcionales dentro de la molcula. La absorcin UV-Vis no es, sin
embargo, una prueba especfica para ningn compuesto determinado. La
naturaleza del disolvente, el pH de la solucin, la temperatura, la concentracin
de electrolitos, y la presencia de sustancias interferentes pueden influir en los
espectros de absorcin de los compuestos, as como las variaciones en la
anchura de la hendidura (ancho de banda efectivo) en el espectrofotmetro.
18. MATERIAL
Vidrio de reloj
Matraz aforado de 10, 50 y 100 mL
Pipeta graduada de 2, 5 y 10 mL
Pipeta volumtrica de 2 y 5 mL
Probeta de 100 mL
Embudo de filtracin talle largo y papel filtro
Piseta
Espectrofotmetro ultravioleta-visible
Celdas de cuarzo para espectrofotmetro
papel absorbente

ESPECTROFOTOMETRO U.V.
TRAZABILIDAD:
87
20. MUESTRA
cido Acetil Saliclico Tabletas
8.1 REACTIVOS
Solucin de Referencia de AAS
NaOH
Solucin de NaOH 1N
Solucin de NaOH 0.1 N
Agua
88
11.-PROCEDIMIENTO
11.1. Actividad extra clase
1.1.1 Cul es la finalidad de cuantificar el AAS en una mezcla de
polvos?
1.1.2
11.2 Actividad en el laboratorio
1.1.3 Verificar el orden y limpieza del rea de pesado
1.1.4 Una sola persona que realice la pesada de la materia prima y
otra persona que verifique la actividad.
11.3 Preparacin de referencia

Pesar una cantidad de la SRef de cido acetilsaliclico equivalente a 10
mg de AAS
Pasar a un matraz volumtrico de 10 ml
Agregar 5 ml de agua y 2 ml de solucin de NaOH 1N
Agitar y llevar al aforo con agua, mezclar
Pasar una alcuota de 5 ml de sta solucin a un matraz volumtrico de
100 ml
Llevar al aforo con solucin de NaOH 0.1N y mezclar
Esta solucin contiene 50 g/ml de AAS.
Etiquete la solucin estndar stock
11.4 Preparacin de la muestra
Pesar del polvo mezclado lo equivalente a 50 mg de AAS (100 mg de

polvo)
Pasar a un matraz volumtrico de 50 ml
Agregar 20 ml de agua destilada y 10 ml de solucin de NaOH 1N
Llevar al aforo con agua destilada, filtrar
Pasar una alcuota de 2 ml de esta solucin a un matraz volumtrico de 50
ml
Llevar al aforo con solucin de NaOH 0.1 N y mezclar
Esta solucin contiene 40 g/ml de AAS
89
11.5 Lectura de absorbancia en el espectrofotmetro
Determinar la absorbancia de la preparacin de referencia y de la

preparacin de la muestra, a la longitud de mxima absorbancia de 298
nm,
Utilizar celdas de 1 cm y solucin de NaOH 0.1 N como blanco de ajuste
Calcular la cantidad de AAS en la porcin de muestra tomada, por medio
de la frmula siguiente:
INTERPRETACION.
Contiene no menos del 95% y no ms del 105.0% de la cantidad de AAS
(C9H8O4), indicada en la formulacin
12.- CALIBRACION
14.- PRECAUCIONES
15.- CALCULOS:
90
16.- OBSERVACIONES
No. de muestra
1
2
3
4
5
6
Mg AAS
Media
S*
S* Desviacin estndar muestral
17.- RESULTADOS.
Graficar
19.- CUESTIONARIO
1.- Qu otras aplicaciones tiene la espectroscopia ultravioleta?
2.- Cul es la importancia de determinar por ultravioleta la concentracin de
AAS?
3.- Indique la longitud de onda que abarca la radiacin ultravioleta?
3.- Qu dificultad presento la realizacin de esta prctica y como lo soluciono?
20. ANEXOS.
91
HPLC
Revisin Pag.1
016
1
ltima revisin
Agosto 2015
1. PROPOSITO
92
.
El alumno conocer y aprender a manejar el HPLC.
2. ALCANCE
3. REFERENCIAS.
4. GENERALIDADES.
5. MATERIAL
HPLC
TRAZABILIDAD:
7. MUESTRA
8.2 REACTIVOS
93
11.-PROCEDIMIENTO
12.- CALIBRACION
14.- PRECAUCIONES
15.- CALCULOS:
94
16.- OBSERVACIONES
No. de muestra
1
2
3
4
5
6
17.- RESULTADOS.
Graficar
19.- CUESTIONARIO
20. ANEXOS.
95
LABORATORIO DE ANALIS
INSTRUMENTAL
INFRARROJO
ANALISIS INSTRUMENTAL: PROC:
DET 017
REVISION No. 1
AGOSTO
REVISION
2015
96

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Marisa Martnez Amador

QUIMICO FARMACEUTICO BIOLOGO

MAGE MARISA MARTINEZ AMADOR

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

7.- INTRODUCION A LA CROMATOGRAFIA HPLC

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

fusin, sus solubilidades en diferentes solventes, sus olores, sus

Tipos de mtodos instrumentales

Algunas tcnicas instrumentales son ms sensibles, que las clsicas, pero

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

sistema de estudio y el qumico analista. Un instrumento para el anlisis suele

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

Se deben realizar dos acciones primordiales la definicin del problema y el

Definicin del problema:

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

cuantificacin(LOQ) y limite de linealidad LOL).

OTROS PARAMETROS DE CALIDAD A TENER EN CUENTA EN LA

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

Casartelli J.D. Microscopia terica prctica. Ediciones URMO Bilbao.

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

Se formaran grupos de trabajo de 4 integrantes.

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

13. ESCALAS DE MEDICION

ESCALA DE MICROMETRO OCULAR

ESCALA DE MICROMETRO DE PLATINA

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

ANALISIS INSTRUMENTAL-PROC: DET 002.

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

Cuando la radiacin atraviesa un medio transparente, se produce una accin

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

Sacarmetro ATAGO negro: Atago N1 Brix 0-32%

9.0- ESQUEMA DEL INSTRUMENTO

10 .ESQUEMA DEL SISTEMA OPERATIVO.

Se formaran grupos de trabajo de 4 integrantes.

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

Se asignara a un grupo de trabajo la exposicin de la prctica, auxilindose

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

No tallar los prismas.

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

ANALISIS INSTRUMENTAL-PROC: DET 003.

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

Cuando la radiacin atraviesa un medio transparente, se produce una accin

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

Sacarmetro ATAGO rojo: 1043 0-30 Brix T/C Hand Refractometer

10.0 ESQUEMA DEL SISTEMA OPERATIVO.

Se formaran grupos de trabajo de 4 integrantes.

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

Se realizara un resumen de la exposicin tomando en cuenta los aspectos

M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

No tallar los prismas.

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M.A.G.E. Marisa Martnez Amador

Se utiliza la letra n para representar el ndice de refraccin del material, y se

n: ndice de refraccin del medio en cuestin

Es decir que es la relacin entre la velocidad de la luz en el vaco y en el medio.

LEY DE REFRACCIN (LEY DE SNELL)

El ngulo de incidencia 1 es igual al ngulo de reflexin 1'

entre el haz incidente y la normal (perpendicular)

entre el haz refractado y la normal a la superficie.

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