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PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVOS Y TECNICAS DE SIEMBRA BACTERIANA PARA

OBTENER CULTIVOS PUROS


Massiel Tamaris Ternera1, Victoria Jimnez Hernandez2, Daniela Janne Nuez3, Jose
Fontanilla Sanchez4
1, 2, 3, 4.

Universidad del Magdalena, Facultad de Ingeniera, Programa de Ingeniera Ambiental y


Sanitaria. Santa Marta Magdalena, Colombia

massieltamaris1122@gmail.com , 2vickyjimenz@gmail.com, 3dannijanne28@gmail.com &


4
jose234.jdfs@gmail.com

La microbiologa es el estudio de microorganismos, un grupo amplio y diverso de organismos


microscpicos que existen como clulas aisladas o asociadas (Brock, 2004). Dichos estudios han
sido posibles gracias a la aplicacin de medios de cultivos, cuya composicin vara dependiendo de
las necesidades de los microorganismos que se quieren estudiar, aplicando las diferentes tcnicas
de siembra de acuerdo a las caractersticas de las bacterias y al inters del investigador.
Primeramente se realiz una siembra en medio lquido, en el cual con ayuda de un asa
previamente esterilizada, se tom una porcin del cultivo de bacterias (Escherichia coli) existentes
en un tubo con agua peptonada, finalmente el asa se introdujo en el tubo de ensayo con caldo
nutritivo estril. La segunda tcnica realizada es una siembra por puncin. Se sembr una
colonia de bacterias trazando estras en zig-zag desde el fondo del tubo de ensayo con agar
nutritivo inclinado con ayuda de un asa esterilizada a la llama del mechero. Siguiente a estas
tcnicas, se realiz una siembra en superficie o en profundidad. Con ayuda de una
micropipeta estril, se tom 1mL del tubo que contiene la suspensin bacteriana mixta y se
deposit en una caja Petri con agar nutritivo y con ayuda de un asa se realiz un barrido para
extender la muestra. Como ultima tcnica de siembra, se realiz una siembra por agotamiento.
Se trazaron unas lneas guas dividiendo la caja Petri en 3 sectores. Con ayuda de un asa de
siembra previamente esterilizada, se extrajo desde el tubo de ensayo que contiene la colonia
bacteriana y se llev a la caja Petri en el sector 1. Trazando lneas en zig-zag, nuevamente se
esterilizo el asa y se gir la caja Petri a 90 y se esparci la colonia del sector 1 hacia al sector 2,
nuevamente se gira la caja Petri a 90, y se esparce la colonia del sector 2 al sector 3. Todas los
cultivos se incuban durante 24-48h a una temperatura de 37C.
Tabla 1: Resultado de las tcnicas de cultivos empleadas en el laboratorio.
TIPOS DE
SIEMBRA

En medio
liquido
Pasadas las 24h,
el tubo de
ensayo presento
turbidez.

Por puncin

En superficie

El
tubo
de
ensayo, presento
crecimiento
de
microorganismos
en
la
parte
inferior y superior
del
tubo
de
ensayo.

Se
evidencio
microorganismos
en una gran parte
de la caja Petri.

Por
agotamiento
No creci ningn
microorganismo.

Discusin

El cultivo de microorganismos es un mecanismo muy utilizado para poder


identificar o aislar cualquier tipo de bacterias de un medio a otro, esto requiere
del conocimiento de las tcnicas de inoculacin que nos permite realizar
muestreos, estudios bioqumicos. A dems tenemos que tener claro la definicin y
la diferencia de las clasificaciones de cultivos en lo que pueden estar presente
las colonias de bacterias, tambin debemos tener en cuenta sus propiedades
fsicas, qumicas y su valor alimenticio para que al momento de cultivar podamos
determinar las condiciones en la que puede crecer el microorganismo bacteriano
y como puede ser su desarrollo en el mismo, para esto debemos saber cul es su
solubilidad, viscosidad y estabilidad. Pero para identificar los caracteres de
cultivos es preciso obtenerlas en cultivos puros.
En conclusin para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo
artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad
y presin de oxgeno adecuadas, as como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un
medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y
debe estar exento de todo microorganismo contaminante. Los medios de cultivo
constituyen el aporte de nutriente, indispensable para el crecimiento de los
microorganismos. La composicin precisa depender de la especie que se quiera cultivar,
porque las necesidades nutricionales varan considerablemente. Hay microorganismos
muy poco exigentes que crecen bien en medios de laboratorio normales y
microorganismos muy exigentes que necesitan determinadas sustancias para crecer.

1. Michael T. Madigan, John M. Martinko, Jack Parker. 2004. Brock, Biologa de los
Microorganismos. 10 Edicin. Editorial Pearson, Madrid. 1096 p.
2. Jorge Alberto Luna Fontalvo. Manual de prcticas de laboratorio: Microbiologa general y
aplicada. Editorial Unimagdalena. 112 p.

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