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HEMATOXILINA
La hematoxilina es un colorante natural que se obtiene de la madera del rbol
Haematoxylum campechianum. El nombre deriva del griego: haimatos: sangre y xylon:
madera. La hematoxilina que se compra proviene directamente de estos rboles que son
originarios de Amrica Central y del Sur. Aunque se ha conseguido sintetizar en el
laboratorio su produccin sigue siendo natural. Para su obtencin se astilla la madera y se
hierve. Se obtiene una solucin rojiza que luego se vuelve amarilla, y posteriormente
negruzca cuando se vuelve a enfriar. El agua se evapora dejando la hematoxilina cruda con
una pureza que puede llegar al 10 %. Es necesario purificar posteriormente con ter, secar y
volver a cristalizar en ambiente acuoso.
Como colorante fue introducido independientemente por Bhmer (1865) y Fischer (1875).
Wossowzky (1876) introdujo la mezcla hematoxilina y eosina en una tincin.
Tincin hematoxilina-eosina
La tincin hematoxilina-eosina corresponde a la mezcla de hematoxilina y eosina. La
tincin hematoxilina y eosina es uno de los mtodos ms populares de tincin utilizado en
histologa y medicina diagnstica.
El mtodo supone la aplicacin de la tincin de hematoxilina, que por ser catinica o
bsica, tie estructuras cidas (basfilas) en tonos azul y prpura,como por ejemplo los
ncleos celulares; y el uso de eosina que tie componentes bsicos (acidfilos) en tonos de
color rosa, gracias a su naturaleza aninica o cida, como el citoplasma.
Tcnica
Sumergir los preparados histolgicos en xilol para eliminar los excesos de parafina.
El xilol es un alcohol txico pero existen reactivos (como el Hemo-D) que ejercen
la misma funcin aclarante de parafina sin la toxicidad del xilol.
Luego pasan por una serie de alcoholes en concentracin decreciente para rehidratar
la muestra (100, 95 y 70).
Se lava nuevamente
Se pasa por otra serie de alcoholes, esta vez en orden creciente (70, 95 y 100)
para deshidratar la muestra y que se pueda realizar el montaje con un pegamento no
soluble en agua.
Resultados
Citoplasma: Rosa
Fibrina: Rosa