Etapa

Etapa 1

Obtencin de la cepa Apergillus oryzae

Etapa 2

Preparacin de material, reactivos y

esterilizacin

Etapa 3

Inmovilizacin de enzima y realizacin de

fermentacin en el biorreactor.

Etapa 4

Determinacin de Actividad enzimtica y

concentracin de amilasa

Etapa 5

Purificacin de amilasa

Objetivo
1.1 Aislar e identificar la cepa Apergillus oryzae
1.2 Obtener la cepa a partir de una muestra de suelo
1.3 Identificar caractersticas fenotpicas de esta especie
2.1 Identificar el material necesario para la produccin de
enzima

3.1 Inmovilizar la enzima por atrapaminto en alginato

3.2 Esterilizar el material para la correcta produccin de
enzima.
4.1 Determinar actividad ezimtica por medio del mtodo de
DNS
4.2 Determinar la concenracin de amilasa por medio del
mtodo de Bradford
5.1 Purificar adecuadamente la amilasa

Metas

Identificar la cepa adecuada de Apergillus oryzae mediante anlisis

microscpicos y macroscpicos. Obtener la cepa con el procedimiento
adecuado.

Reconocer el material adecuado, tanto para la obtencin de la cepa as

como la inmovolizacin, purificacin y produccin de la enzima.

Inmovilizar la enzima mediante el mtodo de atrapamiento. As como

tambin la realizacin de la fermentacin en el biorreactor.

Determinar la actividad enzimtica que produjo la amilasa para conocer su

eficiencia.

Realizar la purificacin adecuada para la amilasa

Actividades
1.1 Identificar la cepa de Apergillus oryzae mediante la observacin de color de sus colonias.
1.2 Por el origen del microoganismo la muestra se puede obtener en el suelo.
1.3 Se identifica porque se caractiza por la colonia es inicialmente plana, blanca que crece hacindose
algodonosa.
2.1 Identificar el material como el biorreactor, el inoculo a utilizar, realizar el alginato de sodio, el cloruro
de calcio etc. Adems de realizar la esterilizacin de los materiales para evitar la contaminacion.
3.1 En un vaso de precipotados de mezcla el alginato de sodio con la enzima y se homogeniza la
muestra.
3.2 Se monta el sistema de inmovilizacin, el cual debe de tener una jeringa con la aguja con punta
roma
3.3 Despus de obtener las perlas de alginato con la enzima se guardan en Cacl2 para evitar su
destruccin
4.1 Mediante el mtodo de DNS se determina la actividad enzimtica que la enzima amilasa produjo
4.2 Por el mtodo de bradford se determina la cantidad de protena que la enzima produjo

5.1 La purificacin se va a realizar con sulfato de amonio hasta una saturacin del 40%

Ao 1
Etapa 1

Fecha

Trimestre
I

II

III

IV
15-Mar-16
16-Mar-16
17-Mar-16
20-May-16
29-May-16
5-Jun-16
10-Jun-16
20//09/2016
9/11/2016

10-Dec-16