Lamina perifrica

FROTIS DE SANGRE PERIFERICA :

Introduccin
Se define como frote, frotis o extendido, a la preparacin
microscpica delgada y transparente, extendida entre dos cristales
(porta o cubreobjetos), obtenida de un lquido orgnico espeso o
tejido semilquido o pastoso (sangre, aspirados, secreciones,
exudados, etc.
Objetivo
El frote perifrico se utiliza para el estudio de las caractersticas
citolgicas de las clulas de la sangre, lo cual permite valorar el
funcionamiento general de la mdula sea a travs de sus
componentes celulares, lo cual implica la evaluacin de las lneas
eritrocticas, leucocitaria y megacarioctica, determinando
anormalidades en forma, tamao, color e inclusiones citoplasmticas,
dando una medida cuantitativa y cualitativa de los elementos que lo
conforman.
Materiales y equipo

Aceite de inmersin
Microscopio ptico
Lminas portaobjetos limpias.
Portaobjetos de bordes biselados y esquinas romas (Frotadora)
Capilar o pipeta pasteur
Sangre con EDTA

D. Preparacin del frote perifrico

a) Colocar una gota de sangre (de alrededor de 2-3 mm de dimetro) en un

extremo del portaobjetos. El tamao de la gota es importante: si es
demasiado grande crea un extendido muy largo o muy grueso y si es
demasiado pequea a menudo forma un extendido corto o delgado.

b) Sostener el portaobjetos extensor (frotadora) con firmeza con la

mano dominante a un ngulo de 30-45 y llevar hacia atrs hasta
tocar la gota de sangre, dejando que sta se esparza en todo el ancho
del portaobjetos.
c) Empuja con rapidez y suavidad hacia delante hasta el final del
portaobjetos para crear el extendido. Es importante que toda la gota
se incluya en el extendido.
d) Colocar el frotis secado al aire sobre una rejilla o cubeta de tincin con
la sangre hacia arriba.
e) Cubrir completamente el portaobjetos o cubreobjetos con el colorante
de Wright gota a gota. El colorante deber cubrir completamente el
portaobjetos, pero no debe derramarse por los bordes. Deber agregarse
una cantidad adicional si ste se comienza a evaporar. Dejarlo que
permanezca en el frotis aproximadamente de 5- 8 minutos.
f)
Agregar directamente al colorante un volumen igual de amortiguador
de Wright,
para evitar la coloracin dbil. Esperar la formacin de brillo
metlico. Puede usarse de igual manera agua desionizada. Dejar actuar de
10-15 minutos.
h) Lavar con agua en el chorro cuidadosamente hasta que la extensin
presente un aspecto rosado al examinarlo a simple vista.
j) Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa o algodn humedecido en
alcohol para eliminar cualquier resto de colorante.
f) Secar al aire y observar con el microscopio con el objetivo de inmersin.

RECUENTO DE PLAQUETAS :
Este resultado es importante ya que desempean un
papel vital en la hemostasis.
El mtodo utilizado es un mtodo directo en el que se
utiliza Oxalato de amonio al 1% 1.98 ml y 0.02ml (20
landas) de sangre anticoagulada con EDTA, Se mezcla
bien y se deja en reposo aproximadamente durante 10
minutos para permitir la lisis total del resto de las
clulas, se monta la cmara de neubauer y se deja en
reposo por otros 10 minutos en cmara hmeda para
evitar que la muestra ya montada se vaya a secar. Se
lee con objetivo de 40 X contando las plaquetas que se
encuentran el el cuadrante de rojos (CENTRO), luego el

resultado obtenido se multiplica por 1.000.

Valor Normal : 150.000 - 450.000 / mm3

Conclusin
Al observar la muestra en el microscopio ptico no
se evidencio anomalas en clulas blancas ,todos los
elementos formes estn con forma y tamao normal .