1.

RESUMEN
En el segundo laboratorio de Concentracin de Microorganismos, se realiz el conteo
de microorganismos presentes y su concentracin a travs de dos mtodos:
El mtodo de la celda Sedgwick Rafter y el mtodo de la franja, de las cuales
observaremos y determinaremos cual es el mtodo ms adecuado para el tratamiento
de agua y microorganismos.
En este informe se realiz el mtodo de la Franja y de la Celda observada con
objetivo de 10X.
Para el mtodo de la franja se obtuvo como N total de campos 12 con un nmero total

de 53 microorganismos, lo cual nos dio una concentracin de

12673

m.o
ml

Para el mtodo de la celda se obtuvo como N total de campos 640, lo cual nos dio

una concentracin de

10240

m.o
ml .

2. INTRODUCCION
Conocer la concentracin de microorganismos de una determinada muestra de gran
importancia para la Microbiologa Sanitaria y el abastecimiento de agua, por ello el
presente informe de laboratorio tiene como objetivos principales:

Determinacin del nmero de campos en toda la celda Sedgwick - Rafter o el

cubreobjetos en el mtodo de la franja.
Contar correctamente algas presentes por campo.
Determinar la concentracin de los microrganismos (algas).
Determinar cul de los dos mtodos es el ms adecuado para los distintos fines
relacionados al tratamiento de agua y microbiologa.

En general las algas se definen similares a las plantas, organismos fotosintticos y

acuticos, pero que a diferencia de las plantas no tiene verdadera raz, tallo, hojas o
tejido vascular y tiene forma de reproduccin simple [1].
Se encuentran en todo suministro de agua expuesto a la luz del sol aunque algunas
algas se encuentran en el suelo y en superficies expuestas al aire. Conocer el nmero
y clase de algas presentes en estanques de aguas negras es de gran utilidad para ver
el avance del proceso de oxidacin.
Las algas tienen la capacidad de modificar el pH, la alcalinidad, el color y la turbiedad

[2]

El Conteo de algas: El objetivo de contar algas no es solamente establecer la

poblacin (densidad) de clulas por mililitro que hay en un recipiente, sino tambin
determinar numricamente el grado de divisin celular en un determinado tiempo. Los
resultados permiten estimar en cierto modo la situacin de un cultivo y relacionarlo con
la curva de crecimiento de esa poblacin alga. [3]
Mtodo de Sedgwick-Rafter: La celda Sedgwick-Rafter es el dispositivo ms
comnmente usado para el recuento de plancton en donde los organismos tienen que
distribuirse uniformemente en toda la superficie de la celda, para ello se debe de
contar con una muestra homognea.
Se divide la celda en campos ya sea solo usando el microscopio mediante tangentes
o con el micrmetro de Whipple.
La concentracin se calcular multiplicando la cantidad de microorganismos promedio
por campo y la cantidad total de campos en la celda, dividida entre el volumen de
muestra analizada que es 1 ml.
El tamao es de 50 mm x 20 mm x 1 mm con un volumen de 1ml.
Mtodo de la Franja: Similar al anterior mtodo, se analiza una gota de muestra
sobre un portaobjetos y sobre la gota se coloca el cubreobjetos, sin dejar la presencia
de burbujas, tomamos una divisin (campo) y contabilizamos la cantidad de
microorganismos, posteriormente se toma otra divisin igual y tangente a la anterior,
hasta cubrir toda la celda.
Si la muestra contiene mucha cantidad de organismos se procede a diluirla.
Podemos ayudarnos con la retcula del ocular de Whipple para hacer el procedimiento
ms preciso. [2]

3. METODOLOGIA
3.1 Materiales
METODO DE LA CELDA SEDGWITH-RAFTER

Microscopio N 1
Celda Sedgwick Rafter
Pipeta volumtrica de 1ml
Contador
Muestra de algas: Estanque de Arquitectura
1 gotero

METODO DE LA FRANJA

3.2

Portaobjeto y cubreobjeto.
1 gotero
Contador digital
Probeta de 1 ml

Procedimiento
Mtodo de la celda Sedgwick-Rafter
1. Con una pipeta de 1ml, colocar un volumen de 1ml en la celda SedgwickRafter
2. Girar en sentido anti horario el portaobjeto de la celda S-R, para sellarlo sin
burbujas

3. Determinar el N de campos a lo ancho

4. Determinar el N de campos a lo largo de la celda.
5. Determinar el N de campos en toda la celda S-R.

de la celda.

6. Determinar la concentracin de m.o.

4. CALCULOS Y RESULTADOS
Datos N1: Mtodo de la Franja (Objetivo 10X)

MUESTRA: Estanque de arquitectura

FECHA: 14/09/16
HORA: 12:00 pm
T = 19C
5ml -> 110 gotas
Vgota = 0.04545 ml
N de
campo
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12

N de
microorganismos
3
2
5
15
2
6
5
5
5
1
3
1

N de campos: 12
N de campos en todo el cubreobjeto: 122 = 144 campos
N total de microorganismos: 53
N de gotas por ml = 110 gotas / 5 ml = 22 gotas / ml

x=Promedio del N de m. o por campo=

N total de m. o
53
m. o
= =4.416=4
N total de campos 12
campo

Concentracion de m. o

o
X N de campos en todo elcubreobjeto
=
( N dem.
)
ml
1 gota

Concentracion de m. o=

4 m. o 144 campos
m. o

=12673
campo 0.04545ml
ml

Datos N 2: Mtodo de la Celda (Objetivo 10X)

N
de
cam
po
N
de
m.o

MUESTRA: Estanque de arquitectura

FECHA: 14/09/16
HORA: 12:00 pm
T = 19C
5ml -> 55 gotas

1
0

1
1

1
2

1
3

1
4

1
5

1
6

1
2

1
8

2
5

3
8

2
7

2
8

1
9

1
6

1
1

1
0

1
2

N de campos: 16
N total de microorganismos: 250
N de gotas por ml = 55 gotas / 5 ml = 11 gotas / ml
N de campos a lo ancho de la celda = 16
N de campos a lo largo de la celda = 16 x 50/20 = 40
N de campos en toda la celda:16x40 = 640 campos

Promedio de microorganismos=x=

x=

N total de microoganismos
N total de campos
250
m.o.
=16
16
campo

Determinando el N de campos a lo ancho de la celda

16 campos

Determinamos el N de campos a lo largo de la celda

N de campos a lo ancho de la celda 20 mm

N de campos a lo largo de la celda 50 mm

N de campos alo largo de la celda=N de campos a lo ancho x

N de campos alo largo de la celda=16 x

50
20

50
=40 campos
20

16 campos

40 campos

Determinamos el N total de campos de la celda

N total de campos=N de campos alo ancho x N de campos a lolargo

N total de campos=16 x 40=640 campos

640 campos

Determinamos la concentracin de microorganismos

Concentracin de m. o=

N de m . o X x N de campos en todala celda

=
ml
1 ml

Concentracin de m. o .=

16 x 640
m. o .
=1 0240
1 ml
ml

5. DISCUSIONES
Al demorar en el conteo de microorganismos estos por el calor producido por la luz
de la lmpara, disminuyen en cantidad.
Faltaron realizar los mtodos de la celda y la franja, usando el microscopio en
objetivo de 43X.
Se observ la diferencia de resultados de ambos mtodos.

6. CONCLUSIONES

En los resultados se pudo observar que las muestras de agua analizadas estaba
muy concentrada dando no para el mtodo de la celda y la franja concentraciones

de 12673 y 10240 m.o. /ml respectivamente.

Nos damos cuenta que una diferencia existente en las concentraciones halladas

para los mtodos de la celda y la franja.

Segn lo aprendido, el mtodo de la celda Sedgwick-Rafter es ideal para realizar

anlisis en los cuales necesitemos de resultados ms exactos.

Determinar la concentracin de microorganismo en una determinada muestra de
agua nos ayuda a realizar interpretaciones y anlisis de los parmetros de calidad
del agua, as como para evitar o determinar fallas en los sistemas de
abastecimiento y tratamiento de aguas.

7. RECOMENDACIONES

Se recomienda que el conteo de microorganismos en cada celda sea lo ms rpido

posible ya la intensidad de luz de la lmpara del microscopio puede hace que parte

del lquido analizado se evapore.

Al agregar el lquido a la celda o al colocar el cubreobjetos sobre la gota de agua
debe evitar que se formen burbujas de aire que distorsionan la adecuada

determinacin de la concentracin de microorganismos.

No dejar burbujas dentro de la muestra que se va observar para evitar perdida de

volumen y errores en el conteo.

Utilizar el contador para realizar el experimento y evitar confusiones en los datos
obtenidos.

8. BIBLIOGRAFIA
[1] Descripcion de las algas y tipos. Autor: Lenntech Bv.
Pagina Web: http://www.lenntech.es/eutroficacion-de-las-aguas/algas.htm
[2] Algas - anlisis cualitativo y cuantitativo Biblioteca Virtual de Desarrollo
Sostenible y Salud Ambiental.
Pagina Web: http://www.bvsde.paho.org/bvsacd/scan/013761/013761-07.pdf
[3] Conteo de microalgas Autor: Yuleidy Burgos
Pagina Web: http://microalgasmodulo1.blogspot.pe/2013/03/conteo-de-microalgas.html

9. CUESTIONARIO
1. CUAL ES EL METODO DE CONCENTRACION DE M.O MAS
RECOMENDABLE?
El mtodo de Sedgwick Rafter es el mtodo de contaje ms preciso pero se
debe tener cuidado en saber concentrar la muestra. Es desventajoso en la
medida de que tambin se concentra partculas en suspensin y si no se
tiene el debido cuidado se dificulta el reconocimiento.

2. QUE PROBLEMAS OCASIONAN LOS MICROORGANISMOS EN

LOS SISTEMAS DE ABASTECIMIENTO DE AGUA?
El problema de las algas siempre aparecer en depsitos de agua se quiera
o no, en pequeos lugares como esquinas o paredes aparecen algas que
hacen que la superficie sea jabonosa y resbaladiza lo cual produzca un
accidente
PROLIFERACIONES DE ALGAS EN AGUA DULCE
Las proliferaciones de algas en agua dulce son consecuencia de un exceso
de nutrientes, particularmente fsforo. El exceso de nutrientes puede ser
causado por fertilizantes que son incorporados al suelo para mejorar la
produccin agrcola o usos recreativos, estos nutrientes pueden
incorporarse a los espejos de agua mediante escurrimiento de las aguas de
superficie producto de precipitaciones o riego. Tambin se sospecha que el
exceso de carbono y nitrgeno pueden ser causas de proliferaciones.
Cuando los fosfatos se introducen en los sistemas acuticos, las elevadas
concentraciones dan lugar a un aumento del crecimiento de algas y plantas.
Las algas tienden a crecer muy rpido en condiciones en las que abundan
los nutrientes, pero cada alga posee una vida corta, y el resultado es una
alta concentracin de materia orgnica muerta que comienza a
descomponerse. El proceso de descomposicin consume el oxgeno disuelto
en el agua, produciendo condiciones de hipoxia. En ausencia de cantidades
apropiadas de oxgeno en el agua, los animales y las plantas fallecen en
grandes cantidades.
Se pueden producir proliferaciones en acuarios de agua dulce cuando los
peces son sobrealimentados y el exceso de nutrientes no es absorbido por
las plantas. Estas condiciones en general no son dainas para los peces, y
es posible corregir esta situacin mediante el recambio del agua en el
tanque y reduciendo la cantidad de alimento que se provee.
TRATAMIENTO DEL AGUA
Las proliferaciones de aguas a veces pueden tener lugar en los sistemas de
suministro de agua para consumo. En tales circunstancia, las toxinas dla
proliferacin logran sobrevivir a los tratamientos estndar de purificacin de
agua. Investigadores en la Florida International University en Miami
experimentan con el uso de ondas de ultrasonido de 640-kilohertz que
generan zonas de micropresiones con temperaturas de hasta 3,700 C. Este

mtodo permite romper algunas molculas de agua formando fragmentos

reactivos que pueden matar a las algas.
EUTROFICACIN
La palabra eutroficacin procede del griego eu que significa buen o bien y
tropos alimento, es decir eutrfico se puede traducir como rico en
nutrientes.
Sabemos que todos los lagos tienen un proceso de eutroficacin natural,
siendo el mismo muy lento dado que puede durar miles de aos.
Lamentablemente las actividades antrpicas aceleran este proceso por el
aporte de nutrientes brindados por las descargas de lquidos cloacales, la
actividad agrcola circundante, etc.
En resumen la eutroficacin es el proceso natural de enriquecimiento de
nutrientes que se lleva a cabo en un cuerpo de agua. El crecimiento
biolgico resultante, principalmente de algas, es importante y cuando
mueren, se sedimentan, acumulndose en el fondo donde se descomponen
y agotan el oxgeno disuelto del agua.
La eutroficacin es uno de los problemas de calidad de agua, ms
significativo, ya que los problemas ms importantes que originan son:

El efecto perjudicial en la pesca comercial y deportiva, debido a

cambios en las especies presentes en las aguas, cuya causa principal
son los bajos niveles de oxgeno de las aguas inferiores.
El efecto en la recreacin y turismo debido al crecimiento excesivo de
algas y otras plantas acuticas que transforman al agua y las playas
en no idneas para fines recreativos. Por ejemplo, las algas
filamentosas se depositan en las playas durante las tormentas y
dejan montones de materia orgnica que se descompone
rpidamente.
Abundantes floraciones algceas que confieren a las fuentes de
abastecimiento de agua un sabor y olor desagradable y obstruyen las
obras de toma y los filtros de las plantas de tratamiento.

As pues es preferible un lago biolgicamente pobre en nutrientes a uno con

excesiva cantidad. Esto es una paradoja, puesto que en ciertas partes de la
biosfera, la tierra por ejemplo, se hacen todos los esfuerzos posibles para
aumentar la fertilidad en la produccin de alimentos, en cambio la
fertilizacin excesiva por nutrientes en los lagos y el resultado del
crecimiento de algas deteriora, en la primera etapa, la calidad de la pesca y
con el tiempo la vida acutica.
En el proceso de eutroficacin es muy importante tener en cuenta el cibclo
del nitrgeno (N) y el fsforo (P) dentro del medio ambiente.
Grado
OLIGOTROFICO
MESOTRFICO
EUTRFICO
HIPERTROFICO

GRADO DE EUTROFICACIN
P mg. / m3
Clorofila mg. / m3
< 10
< 2,5
10 35
2,5 8
35 100
8 25
> 100
> 25

CONTRIBUCIN DE LA AGRICULTURA A LA EUTROFIZACIN

En el resumen sobre la repercusin de los fertilizantes en la calidad del agua
que aparece en el documento FAO/CEPE (1991) se citan los siguientes
problemas:

La fertilizacin de las aguas superficiales (eutrofizacin) da lugar, por

ejemplo, al crecimiento explosivo de algas, que ocasiona trastornos
en el equilibrio biolgico [incluyendo mortandades de peces]. As
ocurre tanto en las aguas continentales (acequias, ros, lagos) como
costeras.
El agua subterrnea se contamina fundamentalmente por la
presencia de nitratos. En todos los pases el agua subterrnea es una
reserva importante de agua potable. En varias zonas, este recurso
hdrico est contaminado hasta el punto de que ya no rene las
condiciones establecidas en las normas actuales para el consumo
humano.

NOTA:
Por ejemplo si el agua receptora tiene como uso el abastecimiento de agua
potable o natacin, lo que se debe medir son los grupos de bacterias
coliformes, ya que las mismas producen rpidamente infecciones en las
personas.

3. SEALE LOS CONTROLES QUE SE DEBEN REALIZAR A LOS

MICROORGANISMOS, BACTERIAS, PROTOZOARIOS Y VIRUS?
El mejor control de microorganismos consiste en la desinfeccin peridica
de los filtros y la cloracin continua del agua en base a inyecciones de
compuestos como cloro gaseoso, hipoclorito de sodio o hipoclorito clcico, el
cloro acta inhibiendo la actividad enzimtica de las clulas evitando su
proliferacin.
La efectividad de la accin del cloro est condicionada por algunos factores
externos como pH y temperatura, a su vez el tiempo de contacto entre
desinfectante y agua tambin influye en el poder biocida de los compuestos
clorados. A mayor temperatura, el poder desinfectante del cloro es mayor,
sin embargo, es menos estable, perdindose con mayor rapidez. Con
respecto al tiempo de contacto entre los compuestos clorados y el agua de
riego, depende en gran medida del contenido de materia orgnica ya que la
oxidacin es lenta, por lo que con aguas ricas en materia orgnica necesita
incrementar la cantidad de cloro a aplicar o aumentar la duracin del
contacto. En general, es aconsejable que el tiempo de contacto no sea
inferior a 30 minutos.
De cualquier forma, ya sea, gaseosa, lquida o slida, la aplicacin de cloro
en una instalacin de riego produce reacciones con los compuestos
presentes en el agua, lo que gasta o consume determinada cantidad de
cloro. Parte del cloro empleado oxida la materia orgnica del agua (cloro

combinado), siendo el fenmeno ms importante de la cloracin por el que

se forman compuestos orgnicos clorados a los que genricamente se les
denomina cloro residual combinado (CRC), de tal forma que:
Cloro residual total (CRT) = Cloro libre residual (CRL) + Cloro residual
combinado (CRC).
El empleo de cloro, para evitar la proliferacin de algas limita su uso como
bactericida, por lo que en la mayora de los casos se destina,
exclusivamente, al tratamiento de las instalaciones de riego localizado para
prevenir la formacin de bacteria y otros microorganismos, adems de los
sedimentos formados.
Control preventivo: Para la prevencin y control de bacterias y
microorganismos se utiliza hipoclorito de sodio, a la dosis de 15-20 cc/m3 de
agua. Tambin dan buenos resultados tratamiento frecuentes, cada 10 15
das, a dosis de 100 200 cc de hipoclorito sdico por metro cbico de
agua, manteniendo la solucin clorada en la instalacin durante media hora,
lavando posteriormente.

4.
QUE
PROBLEMAS
OCASIONAN
CIANOBACTERIAS EN ZONAS DE RECREACION?

LAS

ALGAS

En piscinas el problema sera que el agua obtendra una turbiedad verde y

generara un cierto rechazo sobre los usuarios adems que el agua no sera
buena para el aseo. El problema de las algas siempre aparecer en
depsitos de agua se quiera o no, en pequeos lugares como esquinas o
paredes aparecen algas que hacen que la superficie sea jabonosa y
resbaladiza lo cual produzca un accidente.

5.
EXPLIQUE
LOS
PROBLEMAS
QUE
OCASIONAN
EL
CRECIMIENTO DE LAS PLANTAS ACUTICAS Y ALGAS EN
LAGOS.
El excesivo crecimiento de las algas har pasar hambre o suprimir otras
formas de vida de las plantas acuticas y puede bloquear la luz solar
necesaria para su adecuado crecimiento. Problemas de sabor y olor en el
agua potable y, algunas veces, la muerte de los peces, se asocian con
floraciones excesivas de las algas plantnicas. Las algas filamentosas y las
algas macrfitas forman a menudo densos agregados que hacen que la
pesca, la natacin, y otros usos recreativos sean casi imposibles. La cubierta
total puede restringir la penetracin de la luz del sol y limitar la produccin
de oxgeno y alimentos necesarios para el crecimiento de los peces. Cuando
la abundancia de las algas interfiere con el uso pretendido del estanque,
debe empezarse a pensar en un procedimiento de control.